HPLC Fingerprinting U Spectrum-antitumor Effect Relation For Diskriminazzjoni Bejn Mylabris Phalerata Pallas U Mylabris Cichorii Linnaeus

Kuntatt: emily.li@wecistanche.com

Jian-Yong Zhang, Qi-Hong Chen, Xian Pei1, Rong Yan, Can-Can Duan, Yun Liu4, Xiao-Fei Li

1 Skola tal-Farmaċija, Zunyi Medical University, Zunyi, iċ-Ċina,

2 Laboratorju Ewlenin tal-Farmakoloġija Bażika tal-Ministeru tal-Edukazzjoni u Laboratorju Konġunt tar-Riċerka Internazzjonali tal-Ethnomedicine tal-Ministeru tal-Edukazzjoni, Zunyi Medical University, Zunyi, Guizhou, iċ-Ċina.

3 Iskola tax-Xjenzi Mediċi Bażiċi, Zunyi Medical University, Zunyi, iċ-Ċina, Laboratorju Ewlenin ibbażat fuq il-Kulleġġ Provinċjali ta 'Guizhou għall-Prevenzjoni ta' Tumur u Trattament b'Mediċini Distinttivi, Zunyi Medical University, Zunyi, iċ-Ċina.

Ikklikkja hawn biex tikseb aktar informazzjoni dwar Cistanche kontra t-tumur

Il-punti ewlenin

Dan l-istudju jipprovdi metodu HPLC applikabbli, kredibbli u aktar effiċjenti għad-diskriminazzjoni ta' żewġ speċijiet ta' Mylabris. U, il-marki tas-swaba' HPLC u l-ispettru-effetti kontra t-tumurġew integrati u t-tliet markaturi differenzjali importanti nstabu għal markatur ġdid ta' Mylabris.

Astratt

Għan: Evalwazzjoni ta' diskriminazzjoni bejn żewġ Speċijiet Mylabris ibbażata fuq il-marki tas-swaba' HPLC u l-ispettru-effett kontra t-tumurrelazzjoni. Metodi: F'dan l-istudju, metodu sempliċi u effiċjenti ta' kromatografija likwida ta' prestazzjoni għolja (HPLC) li jintegra ma' analiżi kimometrika u spettru.effett kontra t-tumurrelazzjoni ġiet żviluppata għal diskriminazzjoni bejn żewġ speċi ta 'Mylabris: Mylabris phalerata Pallas (MP) u Mylabris cichorii Linnaeus (MC). Riżultati: Fl-analiżi tal-marki tas-swaba ', intgħażlu 14-il quċċata karatteristika biex jevalwaw id-differenzi bejn MP u MC bl-użu ta' xebh u analiżi ta 'rikonoxximent tal-mudell bl-użu ta' PCA u OPLS-DA. Il-kromatogrammi HPLC ta 'kampjuni minn 10 reġjuni taċ-Ċina wrew differenzi bejn MP u MC, u nstabu 7 markaturi kimiċi karatteristiċi. Fl-ispettru-effett kontra t-tumuranaliżi tar-relazzjoni, 4 markaturi ta 'attività kellhom rwol vitali fit-tnaqqis tal-IC50 u jistgħu jkunu l-komponenti antitumorali ta' Mylabris permezz ta 'analiżi relazzjonali griża u analiżi ta' rigressjoni lineari multivarjata. L-analiżi kimometrika flimkien mar-riżultati tar-relazzjoni tal-ispettru-effett indikat li l-qċaċet 2 (cytosine), 4 (mhux magħruf), u 14 (mhux magħruf) kienu markaturi differenzjali importanti għad-distinzjoni taż-żewġ speċi ta 'Mylabris.

Konklużjoni: Il-metodu huwa applikabbli, kredibbli, u aktar effiċjenti biex jiddiskrimina MP u MC, u se joffri mod ġdid biex jiffaċilita l-kontroll tal-kwalità tal-mediċini tal-insetti.

Kliem ewlieni: HPLC, Marki tas-swaba', Spectrum-effett kontra t-tumur, Mylabris, Diskriminazzjoni

Sfond

Mylabris, imsejjaħ projbizzjoni mao fiċ-Ċina, intuża bħala mediċina tradizzjonali Ċiniża (TCM) għat-trattament tal-furuncle, ulċeri b'għeruq fondi, massa addominali, u huwa importanti.kontra t-tumuraġent. Barra minn hekk, huwa użat ħafna fl-Ewropa bħala mediċina folkloristika [1]. Il-kostitwent attiv ewlieni ta 'Mylabris huwa cantharidin, li huwa effettivkontra t-tumurkompost [2]. Studji farmakoloġiċi moderni wrew li Mylabris jippossjedi attivitajiet multipli, u huwa apprezzat ħafna għat-trattament tat-tumuri minħabba d-doppju tiegħu.kontra l-kanċerproprjetajiet u l-abbiltà li jiżdied in-numru ta' lewkoċiti [3-4]. Fil-preżent, Mylabris intuża ħafna f'xi preskrizzjonijiet kliniċi ta 'TCM kontra l-karċinoma fiċ-Ċina, bħall-injezzjoni Aidi u l-kapsula mao ta' projbizzjoni ta 'Compound.

Skont il-Farmakopea tar-Repubblika Popolari taċ-Ċina (verżjoni 2015), Mylabris huwa definit bħala korp imnixxef ta 'Mylabris phalerata Pallas (MP) u Mylabris cichorii Linnaeus (MC), li huma differenti fil-karatteristiċi botaniċi tagħhom, id-dinamika tal-popolazzjoni, u l-ekoloġija. 5-6]. Mylabris hija wkoll droga tossika ħafna. Peress li d-drogi disponibbli fiċ-Ċina huma ġeneralment taħlita ta 'MP u MC, huwa meħtieġ li jiġu identifikati d-differenzi kimiċi u ta' attività bejn iż-żewġ speċi.

Peress li t-TCM's fihom bosta ingredjenti magħrufa u mhux magħrufa, l-analiżi tal-profil kwantitattiv tal-kostitwenti kimiċi tagħhom toħloq sfida sinifikanti. Il-marki tas-swaba 'tal-kromatografija likwida ta' prestazzjoni għolja (HPLC) għandha rwol importanti fil-kontroll tal-kwalità (QC) tat-TCM minħabba l-karatteristiċi ġenerali tal-profil tagħha tal-biċċa l-kbira tal-komposti f'sistema kumplessa. Barra minn hekk, l-analiżi tal-marki tas-swaba 'ta' TCMs għandha riproduċibbiltà u stabbiltà tajba għall-awtentikazzjoni tal-ispeċi u l-evalwazzjoni tal-kwalità, u hija aċċettata mill-Organizzazzjoni Dinjija tas-Saħħa, l-Amministrazzjoni tal-Ikel u d-Droga tal-Istat taċ-Ċina (SFDA), u l-Aġenzija Ewropea għall-Evalwazzjoni tal-Mediċini (EMEA). Riċentement, ġiet żviluppata analiżi kimometrika li tgħaqqad il-marki tas-swaba HPLC għal QC u tiddiskrimina sorsi naturali kumplessi differenti [7]. Madankollu, huwa ineffettiv li tiddiskrimina d-differenzi fit-TCMs peress li ma tistax tirrifletti d-differenzi kostitwenti attivi, li huwa aktar importanti għall-użu kliniku. S'issa, l-ispettru-kontra t-tumur effettapproċċi ta' relazzjoni intużaw biex jidentifikaw b'suċċess il-kostitwenti bijoattivi tat-TCMs [8]. Il-marki tas-swaba 'HPLC flimkien ma' analiżi kimometrika u relazzjoni ta 'effett spettru-antitumorali se jiċċaraw aħjar id-differenza ta' sorsi multipli ta 'TCMs.

Riċentement ġew irrappurtati xi metodi biex jiġi ddeterminat il-kontenut ta 'cantharidin, li jista' jintuża biex jiddetermina l-kwalità ta 'Mylabris [9]. Xi stampi tas-swaba kromatografiċi ġew applikati wkoll għal QC [10-11]. Studju wieħed biss utilizza metodu li jinvolvi elużjoni gradjent tal-komposti solubbli fl-ilma ta' Mylabris ibbażat fuq HPLC. Sadanittant, intużaw biss għaxar kampjuni, u l-ebda kampjun MC [12]. Sa fejn nafu tagħna, id-diskriminazzjoni ta 'MP u MC ibbażata fuq il-kompożizzjoni kimika u l-attività ma ġietx studjata qabel.

Dan l-istudju kellu l-għan li jiżviluppa metodu sempliċi u effiċjenti biex jiddiskrimina żewġ speċi ta’ Mylabris bl-użu tal-marki tas-swaba’ HPLC flimkien ma’ analiżi kimometrika u spettru.kontra t-tumureffettrelazzjoni, li se tipprovdi bażi għall-QC ta 'Mylabris. Dan il-metodu jista' jiġi applikat ukoll għall-identifikazzjoni tal-markatur QC ta' TCMs oħra.

materjali u metodi

B'kollox, 20 lott ta 'Mylabris phalerata Pallas (MP) u Mylabris cichorii Linnaeus (MC) inġabru minn provinċji differenti taċ-Ċina (Tabella 1) u identifikati mill-professur tagħna Xiao-Fei Li. Il-kampjuni tal-vawċers ġew depożitati fil-laboratorji tagħna.

Iċ-ċitosina, l-uridina, il-guanosina u l-adenosina standard ta 'referenza nxtraw minn ChengduPush Biotechnology Co., Ltd. (Chengdu, iċ-Ċina). L-aċetonitrile u l-metanol tal-grad HPLC inxtraw minn Thermofisher Scientific (Fairlawn, NJ, USA). L-ilma pur ta' Watson intuża matul l-istudju. Kimiċi u solventi oħra kienu ta 'grad analitiku u miksuba minn Aladdin Reagent (Shanghai, iċ-Ċina), Chengdu Kelong Reagent (Chengdu, iċ-Ċina) u Sinopharm Chemical Reagent (Beijing, iċ-Ċina)

Apparat u kundizzjonijiet kromatografiċi

L-analiżi HPLC saret bl-użu ta' sistema HPLC Agilent 1260 Infinity fi 30 gradi fuq Phenomenex Synergy Polar-RP80 (4.6 mm × 250 mm, 5 μm) għat-teħid tal-marki tas-swaba'. Elużjoni tal-gradjent lineari b'eluwenti A (ilma/aċidu aċetiku glaċjali, 100:1, v/v) u B (metanol) intużat għas-separazzjoni. Il-programm gradjent ġie żviluppat kif ġej: 0-1 min, 3.0-4.6 fil-mija B; 1-9 min, 4.6-6.8 fil-mija B; 9-25 min, 6.8-51}.0 fil-mija B; 25-30 min, 51.0-100 fil-mija . Ir-rata tal-fluss tal-fażi mobbli kienet 1.0 mL/min. Il-kromatogramma ġiet immonitorjata f'254 nm. Wara perjodu ta 'ekwilibrazzjoni ta' 15-il minuta, intużaw 10 μL ta 'kampjuni għall-injezzjoni.

Preparazzjoni tal-kampjun

Il-kampjuni mnixxfa ġew imfarrak fi trab, u 2.5 g ta 'kull kampjun trab ġew estratti darbtejn b'50 mL ta' 75 fil-mija etanol permezz ta 'rifluss għal 1.5 sigħat kull darba. Il-kampjun estratt ġie mħallat u kkonċentrat taħt pressjoni mnaqqsa għal 20 mL. It-taħlita mbagħad ġiet preċipitata bi 80 mL ilma għal 24 siegħa taħt 4 gradi. Sussegwentement, l-estratt ġie ċentrifugat fi 3000 g min-1 għal 10 min biex jissepara s-supernatant. Is-supernatant kien ikkonċentrat taħt pressjoni mnaqqsa għal 25 mL. Fl-aħħarnett, is-supernatant ġie ffiltrat permezz ta 'film Millipore ta' 0.22 μm qabel l-analiżi HPLC.

Validazzjoni tal-metodoloġija

Il-metodu HPLC ġie vvalidat għall-preċiżjoni, ir-riproduċibbiltà u l-istabbiltà (0 h, 2 h, 4 h, 8 h, 12 h, 24 h). Il-validazzjoni ġiet stmata abbażi tal-ħin ta 'ritenzjoni (RT) u l-ogħla żona (PA). Fl-aħħarnett, marki tas-swaba 'kimiċi ta' 20 lott ta 'Mylabris ġew stabbiliti biex jidentifikaw il-karatteristiċi kimiċi integrati ta' komposti multipli. Xi tekniki kimometriċi ġew introdotti fuq il-marki tas-swaba' kimika għall-analiżi.

Analiżi tar-rikonoxximent tal-mudelli

Id-differenzi bejn żewġ speċi taż-żoni tal-quċċata ġew evalwati għas-sinifikat statistiku bl-użu tat-test t ta' Student mhux imqabbad. Valur p inqas minn 0.05 kien ikkunsidrat statistikament sinifikanti. Bħala metodu klassiku mhux sorveljat, l-analiżi tal-komponenti prinċipali (PCA) hija applikata b'mod wiesa 'għall-analiżi tad-dejta statistika. Minflok ma tuża ħafna varjabbli, PCA tieħu numru żgħir ta 'PCs mingħajr ma titlef ħafna informazzjoni, u l-plots tal-punteġġ huma mbagħad viżwalizzati għal separazzjoni ħielsa tal-osservazzjonijiet. F'dan l-istudju, PCA sar fuq iż-żoni tal-quċċata normalizzati ta 'kull komponent fil-marki tas-swaba' HPLC bl-użu tas-softwer SIMCA-P plus 14.0 (Umetrics, Umea, Svezja) biex issib id-diskriminazzjoni bejn iż-żewġ speċi ta 'Mylabris.

Għal diskriminazzjoni aktar preferuta bejn iż-żewġ speċi Mylabris, ġie applikat metodu sorveljat ta 'analiżi diskriminanti tal-inqas kwadri parzjali ortogonali (OPLS-DA) biex janalizza d-differenzi fiż-żoni tal-quċċata normalizzati ta' kull komponent fil-marki tas-swaba 'HPLC. Il-valur VIP huwa somma peżata ta 'kwadri tal-piżijiet OPLS, li tirrifletti l-kontribuzzjoni relattiva ta' kull varjabbli X għall-mudell. Il-varjabbli b'VIP > 1, flimkien ma 'S-plot tqiesu li huma influwenti għas-separazzjoni tal-kampjuni fil-plots tal-punteġġ ġenerati mill-analiżi OPLS-DA. Imbagħad, inkisbu l-markaturi kimiċi karatteristiċi għad-diskriminazzjoni.

Analiżi tar-relazzjoni tal-effett spettru-antitumorali

Biex tesplora l-kontra t-tumurżona tal-quċċata tal-effett għall-kampjuni ta 'Mylabris integrati mad-dejta tal-marki tas-swaba', u qabbel id-differenzi bejn iż-żewġ speċi, il-korrelazzjoni bejn il-quċċata tal-marki tas-swaba' ukontra-tumurl-effetti ġew studjati. Żewġ metodi li jikkombinaw analiżi relazzjonali griża u analiżi ta 'rigressjoni lineari multivarjata (MLRA) ġew applikati minn SPSS19.0 (IBM, USA) u GM6.0 artab (Grey Systems Theory Institution, NUAA, iċ-Ċina). Il-kontra-tumurit-test sar bil-metodi ppubblikati tagħna [12], ċelluli tal-linja taċ-ċelluli tal-karċinoma epatoċellulari tal-bniedem HepG2 inżammu f'medja RPMI1640 supplimentata b'10 fil-mija serum bovin tal-fetu. Iċ-ċelloli tkabbru f'atmosfera umidifikata li fiha 5 fil-mija CO2 f'37 C. Il-metodu SRB intuża għall-valutazzjoni tal-proliferazzjoni għalkontra-tumurattivitajiet, imbagħad ġie kkalkulat l-IC50 taċ-ċelloli HepG2, finalment, l-IC50 u ż-żoni tal-quċċata normalizzati ntużaw għall-analiżi kimometrika. Imbagħad, inkisbu l-markaturi ta' attività karatteristiċi ta' Mylabris.

Riżultati u diskussjoni

Ottimizzazzjoni tal-kundizzjonijiet tal-estratt

Għal estrazzjoni suffiċjenti ta 'komposti soluti fl-ilma minn Mylabris, is-sistema ta' estrazzjoni ġiet ottimizzata. Ultrasoniku u refluxing wrew li dawn il-komposti jistgħu jiġu estratti bl-aħjar mod bir-refluss.

Ottimizzazzjoni tal-metodu HPLC

Biex tikseb il-qċaċet kromatografiċi massimi biex tiddeskrivi l-karatteristika ġenerali tal-ħaxix, il-kompożizzjoni tal-kolonna kromatografika, il-fażi mobbli, u t-tul ta 'mewġ ta' skoperta (200, 254, 265, u 278 nm) ġew investigati. Ir-riżultati wrew li l-kolonna Phenimenex Synergy Polar-RP80, ilma (li fih 1 fil-mija aċidu aċetiku glaċjali) u metanol, u 254 nm kienu l-aħjar kundizzjonijiet għall-analiżi Mylabris HPLC (Figura 1), l-istruttura ta '4 sustanzi standard hija murija fil-Figura 2 .

Validazzjoni tal-metodu

F'dan l-istudju, 14-il quċċata kienu separati sew u użati bħala "qċaċet komuni". Il-preċiżjoni, ir-ripetibbiltà, u l-istabbiltà kienu bbażati fuq il-ħin ta 'ritenzjoni (RT) u l-ogħla żona (PA). Il-valuri RSD ta' RT u PA għall-preċiżjoni (n=6) ma qabżux 0.2 u 4 fil-mija, rispettivament; Il-valuri RSD ta' RA u PA għar-ripetibbiltà (n=6) kienu taħt 0.2 u 4 fil-mija, rispettivament, u l-valuri RSD għall-istabbiltà (0-24 h) kienu inqas minn 0-24 {10}}.4 u 5 fil-mija, rispettivament, li indikaw li l-kampjuni kienu stabbli fi żmien 24 siegħa. Dawn ir-riżultati wrew li l-kwalità tal-kampjuni studjati u l-metodu HPLC kienu stabbli u kkontrollati tajjeb.

Evalwazzjoni tax-xebh tal-marki tas-swaba'

The fingerprint similarity analysis was used to evaluate the similarity of HPLC peaks. The similarities of MP and MC were calculated by the reference HPLC fingerprint, respectively. As shown in Table 1, except for two MP samples (from Guizhou2 and Guizhou5) with lower similarities (0.880 and 0.920, respectively), other samples of MP were >0.930. The similarities of MC samples were >{{0}}.921 ħlief għal kampjuni MC (minn Guizhou2 u Guizhou4), li s-similaritajiet tagħhom kienu 0.888 u 0.887, rispettivament. Din id-dejta indikat li l-kwalità ta' Mylabris fi ħdan speċi waħda kienet stabbli. Madankollu, is-similaritajiet ta' tliet kampjuni MP biss meta mqabbla mal-marki tas-swaba' HPLC ta' referenza kienu > 0.930; u s-similaritajiet ta 'żewġ kampjuni MC biss meta mqabbla mal-marki tas-swaba' HPLC ta' referenza kienu > 0.921. Dawn ir-riżultati wrew li ż-żewġ speċi ta 'Mylabris kienu varjazzjoni konsiderevoli f'xi żoni tal-quċċata.

Diskriminazzjoni ta 'MP u MC permezz ta' analiżi ta 'rikonoxximent tal-mudell

For global analysis of the difference, PCA was used to find the quality variation of the samples from the two species of Mylabris. Figure 3 shows that the two-dimensional PCA model was constructed by the first two PCs, which included approximately 61.8% of the original data. The score plot showed that the MP and MC samples could not be separated by PCA. To understand the differences between MP and MC, an OPLS-DA model was established. As shown in Figure 4, the Mylabris samples could be classified into two groups with R2X=0.502, R2Y=0.492, and Q2=0.0769 as compared to the PCA model. These results showed that the OPLS-DA model was more suitable than the PCA model for distinct separation of the test samples based on their different components. From the S-plot of OPLS-DA, peak markers including peaks 1, 2, 4, 7, 9, 12, and 14 between MP and MC could be found (Figure 5). Based on VIP>1, il-qċaċet 1, 2, 4, 7, 9, 12, u 14 jistgħu jkunu l-aktar varjabbli sinifikanti fid-diskriminazzjoni bejn iż-żewġ speċi (Figura 6). Il-grupp tal-quċċata (1, 2, 4, 7, 9, 12, u 14) jista' jkollu rwol vitali fid-distinzjoni bejn MP u MC bħala markaturi kimiċi karatteristiċi.

Relazzjoni spettru-effett permezz ta 'analiżi relazzjonali griż

To further evaluate the relationship between the variations of normalized peak area and IC50, grey relational analysis (GRA) was performed. The influence rank by normalized peak area was P13>P14>P3>P2>P12>P4>P9>P1>P10>P7>P6>P8>P5> P11 as shown in Table 2. The results indicated that the top-6 peak including peaks 13, 14, 12, 2, 3, and 4 were the main influencing factors for the antitumor effect based on the standard of Relative Grey correlative degree (RGCE) >0.75.

Relazzjoni spettru-effett mill-MLRA

Il-mudell MLRA huwa l-aktar metodu ta' mmudellar komuni biex tiġi dedotta l-kumplessità tar-relazzjoni bejn żewġ varjabbli jew aktar u rispons li nbena bil-formula li ġejja

Fejn Y huwa l-valur stmat u jirrappreżenta r-rispons; Xn hija varjabbli indipendenti, b{{0}} hija l-interċettazzjoni, u bn huwa l-koeffiċjent ta' rigressjoni għal Xn. F'dan l-istudju, MLRA ġie applikat biex tiġi stabbilita r-relazzjoni tal-marki tas-swaba'-effikaċja bejn il-valuri tal-ogħla żoni fil-marki tas-swaba 'HPLC u l-IC50 ta' anti-HepG2, u mbagħad issib il-komponenti antitumorali possibbli. Il-kolineazzjoni tad-dejta nstabet minn mudell MLRA komuni, li mhuwiex adattat biex jesplora l-korrelazzjoni bejn Y (IC50) u X (PA). Intuża mudell PCA MLRA biex tistudja r-relazzjoni tal-marki tas-swaba '-effett, u l-ewwel sitt PCs b'rata ta' kontribuzzjoni ta 'varjanza kumulattiva: 91.068 fil-mija ġew magħżula għall-analiżi. Fl-aħħarnett, l-ekwazzjoni li ġejja ġiet stabbilita skont l-output tal-SPSS u l-PCs: IC50=1.115864 plus （ 1.87268PA{1- 699.722PA2 plus 25.7138PA{3 - 24.1528PA4 plus 7.22878PA{{{ 23}}.2114PA6 flimkien ma' 2.95283PA7- 15.5305PA8 flimkien ma' 13.0297PA9 flimkien ma' 22.5683PA{10 - 10.3462PA11 flimkien ma' 123.762PA12 flimkien ma' 31.0428PA{0428PA9}}7{0.{44}}}) (R kien 0.682, P <>

Integrazzjoni Analiżi ta 'Żewġ Speċi Mylabris

L-esperiment wera li l-marki tas-swaba HPLC jistgħu jintużaw biex jirriflettu l-karatteristiċi kimiċi ta 'Mylabris. L-algoritmi ta 'xebh, PCA, u OPLS-DA ġew applikati biex tinstab id-differenza bejn MC u MP. Il-grupp tal-quċċata (1, 2, 4, 7, 9, 12, u 14) kien definit bħala markaturi kimiċi karatteristiċi.

Barra minn hekk, kemm GRA kif ukoll MLRA wrew li huma metodi sodisfaċenti għal aktar diskriminazzjoni. L-integrazzjoni tar-riżultati tal-analiżi GRA u MLRA, il-qċaċet 2, 4, u 14 bħala markaturi ta 'attività ta' Mylabris għandhom ikunu responsabbli għall-effett kontra t-tumur, li jista 'jkun il-bażi materjali farmakodinamika ta' Mylabris.

Il-markaturi differenzjali importanti ġew definiti għall-quċċata b'karatteristiċi kimiċi u proprjetajiet tal-markaturi tal-attività. Allura, bejn MC u MP fuq marki tas-swaba 'HPLC wara analiżi tar-relazzjoni tal-ispettru-effett, il-qċaċet 2 (cytosine), 4 (mhux magħruf) u 14 (mhux magħruf) kienu markaturi differenzjali importanti għad-differenzi bejn MP u MC kif muri fil-Figura 7.

Konklużjoni

B'mod konklużiv, fir-riċerka preżenti, ġie propost metodu HPLC għat-teħid tal-marki tas-swaba' kimiċi ta 'MP u MC. Billi tgħaqqad il-marki tas-swaba HPLC, PCA, u analiżi tar-relazzjoni tal-ispettru-effett bħal GAS u MLRA, il-proprjetajiet kimiċi u farmakoloġiċi ta 'żewġ speċi mill-qrib ta' Mylabris jistgħu jiġu diskriminati. Dan indika li l-komposti mill-qċaċet 2(cytosine), 4 (mhux magħruf), u 14 (mhux magħruf) bħala markaturi differenzjali importanti kellhom rwoli dominanti fid-distinzjoni bejn MP u MC. L-istruttura tal-qċaċet 4 u 14 għandha tiġi identifikata minn teknoloġija oħra. Il-metodu tat-teħid tal-marki tas-swaba' HPLC flimkien ma' analiżi statistika, kimometrika, u analiżi tar-relazzjoni tal-ispettru-effett intwera li huwa effiċjenti fl-iskoperta ta' komponenti li jimmarkaw jew għall-promozzjoni tal-QC ta'mediċini erbali.

Referenzi

1 Wang GS. Użi mediċi ta 'Mylabris fiċ-Ċina tal-qedem u studji reċenti. J Ethnopharmacol 1989, 26(2): 147-162.

2. Lin YS, Lia YH, Peng ZP, et al. Determinazzjoni tal-kontenut ta 'Cantharidin u l-effett inibitorju tiegħu fuq ċelluli HepG2 tal-epatoma umana. Biomed Res-India 2016, 27(2): 533-536.

3. Xu MZ, Lee WS, Kim MJ, et al. Acyl-CoA: attivitajiet inibitorji tal-kolesterol acyltransferase ta 'amidi ta' aċidu xaħmi iżolati minn Mylabris phalerate Pallas. Bioorg Med Chem Lett 2004, 14(16): 4277-4280.

4. Day RM, Harbord M, Forbes A, et al. Folji ta 'Cantharidin: teknika għall-investigazzjoni tat-traffikar tal-lewkoċiti u l-produzzjoni taċ-ċitokini f'siti ta' infjammazzjoni fil-bnedmin. J Immunol Methods 2001, 257(1-2): 213-220.

5. Mo RY, Sun NX, Peng R. Studju dwar ikel preferut ta 'Mylabris phalerata adulti f'popolazzjonijiet ġeografiċi differenti. Zhongguo Zhong Yao Za Zhi 2014, 39(22): 4293-4296.

6. Wang XM, Cheng XS, Li XF. Karatteristika Bijoloġika ta 'Meloidae u t-Tmigħ Artifiċjali tiegħu. Guizhou Agricultural Sciences (Chin) 2007, 35(2): 140-142.

7. Yang Y, Zhang J, Jin H, et al. Analiżi Kwantitattiva Flimkien mat-Teknoloġija tal-Marki tas-Swaba' u Analiżi Kimometrika Applikata għall-Evalwazzjoni ta' Sitt Speċi ta' Pariġi Selvaġġ bl-użu ta' UHPLC-UV-MS. J Anal Methods Chem 2016: e3182796.

8. Liu Y, Liu Z, Sun G, et al. Il-monitoraġġ u l-evalwazzjoni tal-konsistenza tal-kwalità tal-pilloli tal-Compound Bismuth Aluminate permezz ta 'metodu kwantifikat sempliċi tal-marki tas-swaba' flimkien ma 'determinazzjoni simultanja ta' ħames komposti u korrelatati ma 'attivitajiet antiossidanti. Plos One 2015; 10: e0118223.

9. Mehdinia A, Asiabi M, Jabbari A, et al. Analiżi ta 'cantharidin f'ħanfus foloz foloz (Coleoptera: Oedemeridae) permezz ta' mikroestrazzjoni ta 'fażi solida ta' headspace u kromatografija tal-gass-spettrometrija tal-massa. J Chromatogr B Analyt Technol Biomed Life Sci 2011, 879(27): 2897-2901.

10. Li XM, Xiao JS. Studju dwar il-marki tas-swaba' GC ta' Mylabris phalerata. China Journal of Hospital Pharmacy (Chin) 2010; 30(2): 116-119.

11. Luo CX, Sun, GX, u Shi XF. Marki tas-swaba' diġitalizzati ta' Mylabris minn HPCE. Central South Pharmacy (Chin) 2008; 6(2): 230-235.

12. Sun GX, Luo CX, u Wang, Z. Studju dwar il-marki tas-swaba 'HPLC Diġitizzati ta' Mylabris. Ġurnal Ċiniż ta 'Analiżi Farmaċewtika (Chin) 2008;28(7): 1031-1036.

13. Guo K, Li XF, Yan R, et al. Karċinoma epatoċellulari anti-bniedem HepG 2 ċelluli attività ta 'cantharidin derivati ​​mill-Provinċja ta' Guizhou u r-reġjuni tal-madwar. Ġurnal tal-Mediċina Moderna u s-Saħħa (Chin) 2016; 32(5): 648-650.