L-Effett Ta 'Stress Ossidattiv U Interleukin-1 Cross-talk Fuq Infjammazzjoni Kronika fil-Firien EAP U L-Intervent Ta' Anemone Tomentosa

 

 

Astratt

Għanijiet: Biex tinvestiga r-rwol ta 'stress ossidattiv u interleukin-1 (IL-1) cross-talk f'infjammazzjoni kronika tal-prostata fil-firien sperimentali tal-prostatite awtoimmuni (EAP), u biex jiġi eluċidat il-mekkaniżmu li bih Anemone tomentosa tittratta l-firien EAP. Metodi: Tletin firien Wistar ġew assenjati b'mod każwali għal ħames gruppi (n=6 kull wieħed): normali, mudell, Anemone tomentosa b'doża baxxa, Anemone tomentosa b'doża medja, u Anemone tomentosa b'doża għolja. Wara l-intervent tad-droga, Western blotting intuża biex jinstabu proteini TLR-4, IRAK1, u pNF-κB p65 fit-tessut tal-prostata. Serum superoxide dismutase (SOD), glutathione peroxidase (GSH-Px), u malondialdehyde (MDA) ġew imkejla bl-użu ta 'kits ta' analiżi. Ċitokini infjammatorji, inklużi interleukin-1 u interleukin-10, ġew imkejla b'ELISA. Riżultati: Meta mqabbel mal-grupp normali, l-espressjoni ta 'proteini TLR-4, IRAK1, u pNF-κB p65 fil-prostata tal-grupp mudell żdiedet b'mod sinifikanti (P ​​<0.01). Il-livelli ta' SOD u GSH-Px fis-serum naqsu (P <0.01), filwaqt li l-livelli ta' MDA u interleukin-1 żdiedu (P <0.01). Meta mqabbel mal-grupp mudell, l-intervent ta 'Anemone tomentosa irregola b'mod sinifikanti l-espressjoni tal-proteina TLR-4, IRAK1, u pNF-κB p65 fil-prostata tal-firien EAP (P <0.01). SOD tas-serum, GSH-Px, u interleukin-10 kienu rregolati b'mod sinifikanti 'l fuq (P < 0.01 jew P < 0.05), filwaqt li MDA u interleukin-1 kienu regolati 'l isfel (P < 0.01 jew P < 0.05). L-istoloġija indikat li l-ħsara fil-glandola tal-prostata u l-infiltrazzjoni taċ-ċelluli infjammatorji ġew imtejba wara t-trattament b'Anemone tomentosa. Konklużjoni: IRAK1 jista 'jkun node ewlieni li jimmedja t-taħdit inkroċjat bejn l-istress ossidattiv u IL-1 waqt l-infjammazzjoni fil-firien EAP. Il-mekkaniżmu anti-infjammatorju ta 'Anemone tomentosa fil-firien EAP jista' jinvolvi t-tnaqqis tal-istress ossidattiv u IL-1 billi jirregola l-mogħdija ta 'sinjalazzjoni TLR-4/IRAK1/NF-κB p65.

Herb Cistanche Supplimenti

 

 

 

Ikklikkja għal aktar dettalji

 

 

 

Kliem ewlieni

Prostatite kronika; prostatite awtoimmuni sperimentali (EAP); stress ossidattiv; interleukin-1 (IL-1); IRAK1; Mogħdija tas-sinjalar TLR-4/IRAK1/NF-κB p65; SOD; GSH-Px; MDA; ELISA; Western blot; Anemone tomentosa; Dahuocao (mediċina Zhuang); Mediċina Tradizzjonali Ċiniża; Ħwawar TCM għall-prostatite; Etnomediċina Ċiniża; anti-infjammatorji; terapija antiossidanti

 

 

Prostatite kronika (CP)hija waħda mill-aktar mard komuni fl-uroloġija u l-androloġija. Fiċ-Ċina, il-prevalenza rrappurtata ta 'CP tvarja minn 6.0% sa 32.9% [1]. Klinikament, huwa kkaratterizzat prinċipalment minn uġigħ pelviku kroniku u jista 'jkun akkumpanjat minn gradi varji ta' sintomi urinarji u disfunzjoni sesswali, li jaffettwaw b'mod sever il-kwalità tal-ħajja tal-pazjenti. Skont rapporti ta 'riċerka [2], il-patoġenesi ta' CP tista 'tkun relatata ma' infezzjoni tal-patoġenu, stress ossidattiv, rifluss tal-awrina, bidliet fil-livelli tal-ormoni sesswali, żbilanċ newroendokrinali, u risponsi immuni-infjammatorji. Studji kurrenti jindikaw li fl-istat infjammatorju tal-prostata, jiġi prodott ammont kbir ta 'speċi ta' ossiġnu reattiv (ROS); mikroambjent b'ROS għoli jinduċi stress ossidattiv u jipparteċipa fl-okkorrenza u l-iżvilupp ta 'CP [3]. Iċ-ċitokini huma polipeptidi ta 'proteini regolatorji li għandhom rwoli importanti fl-okkorrenza u l-iżvilupp ta' CP; is-severità tal-marda tikkorrelata mal-livell ta 'interleukin-1 (IL-1) fis-sekrezzjonijiet tal-prostatiku [4], li jipprovdi approċċ terapewtiku potenzjali. Minħabba l-patofiżjoloġija kumplessa, it-trattamenti mediċi moderni għal CP għandhom ċerti limitazzjonijiet [5]. F'dawn l-aħħar snin, il-Mediċina Tradizzjonali Ċiniża (TCM) wriet effikaċja favorevoli fit-trattament tas-CP, ittaffi l-uġigħ u s-sintomi urinarji, u turi vantaġġi karatteristiċi.

Mill-perspettiva tat-TCM, l-etjoloġija u l-patoġenesi ta 'din il-marda jinvolvu defiċjenza tal-kliewi, sħana niedja, u stasis tad-demm [6]. Il-ħaxix etnomediċina Zhuang Dahuocao (Anemone tomentosa; punġenti, kemmxejn morra, newtrali fil-proprjetà) għandha l-funzjonijiet li tneħħi s-sħana u tneħħi l-umdità, tippromwovi d-dijureżi biex ittaffi l-strangurja, tonifying qi, u ssaħħaħ il-kliewi [7]. Osservazzjonijiet kliniċi jissuġġerixxu li Dahuocao jista 'jtejjeb is-sintomi CP [8] u jirregola s-sekrezzjoni ta' ċitokini infjammatorji fil-firien mudell CP [9]. Il-mekkaniżmu tiegħu jista' jkun relatat mal-mogħdija tal-microRNA-146a/Toll-like receptor-4 (TLR-4)/nuclear trascription factor-κB (NF-κB) mogħdija li toriġina minn prostatiku corpora amylacea [10]. Abbażi ta 'dan, l-istudju preżenti osserva r-rwol ta' interazzjoni inkroċjata bejn stress ossidattiv u IL-1 f'infjammazzjoni kronika tal-prostata fil-mudell tal-far sperimentali tal-prostatite awtoimmuni (EAP) u investiga l-effett ta 'intervent tad-decoction Dahuocao.

Materjali

1.1 Annimali esperimentali

Tletin firien Wistar maskili nxtraw minn Changsha Tianqin Biotechnology Co., Ltd. (Nru tal-liċenzja: SCXK2019-0013), 8 ġimgħat, piż tal-ġisem 200 ± 17 g. Nru tal-approvazzjoni tal-etika tal-annimali: DW20220926-202, Guangxi University of Chinese Medicine. L-annimali kienu miżmuma fil-Laboratorju Ewlenin tal-Bijoloġija Molekulari għall-Prevenzjoni u t-Trattament f'TCM, Guangxi.

 

1.2 Strumenti u reaġenti ewlenin

Apparat ta' l-elettroforeżi (Beijing Liuyi, DYCZ-24DN), kwantifikatur ta' aċidu nuklejku/proteina (Denovix DS-11), sistema ta' trasferiment semi-niexfa (ATTO WSE-4040, AE6675L). Imla l-Adjuvant ta' Freund (Sigma-Aldrich, F5881). Antikorp TLR-4 (Affinity, AF7017), antikorp kinase-1 assoċjat mar-riċettur interleukin-1 (IRAK1) (Affinity, AF4742), antikorp phospho-NF-κB p65 (Affinity, AF2006). Kit GSH‑Px (Nanjing Jiancheng, A005‑1), kit SOD (Nanjing Jiancheng, A001‑1), kit MDA (Nanjing Jiancheng, A003‑1). IL-1 ELISA (Lianke Bio, EK301BHS), IL-10 ELISA (Lianke Bio, EK310).

Metodi

 

2.1 Preparazzjoni tal-mudell tal-firien EAP

Il-preparazzjoni ta 'proteini tal-prostatiku tal-firien purifikati segwiet metodi preċedenti [10]. L-immudellar tat-tilqim [10-11] sar skont protokolli stabbiliti. L-immudellar b'suċċess kien indikat bl-għejbien ta 'jingħalaq tal-mukuża fil-kanali tal-prostatiku, aċini mhux kompluti, edema stromali, u infiltrazzjoni taċ-ċelluli infjammatorji [12].

 

2.2 Preparazzjoni tad-decoction Dahuocao

Id-decoction Dahuocao (Anemone tomentosa) tħejja skont proċeduri sperimentali preċedenti [10].

 

2.3 Raggruppament u amministrazzjoni tad-droga

Tletin far ġew assenjati b'mod każwali permezz ta' tabella ta' numri każwali għal gruppi Dahuocao normali, mudell, u b'doża baxxa, medja u għolja (n=6 għal kull grupp). Wara mudellar b'suċċess, gruppi ta 'doża baxxa, medja u għolja rċevew decoction Dahuocao permezz ta' gavage f'konċentrazzjonijiet ta '1.46 g/mL, 2.92 g/mL, u 5.84 g/mL, rispettivament (4 mL/kg·d). Il-gruppi normali u mudell irċevew salina (4 mL/kg·d). It-trattamenti ngħataw darba kuljum għal 4 ġimgħat.

2.4 Istopatoloġija tal-prostata (tbajja’ H&E)

It-tessuti tal-prostata ġew iffissati, inkorporati, u sezzjonati; sezzjonijiet kienu mtebbgħin b'ematossilin-eosina u eżaminati b'mikroskopija tad-dawl biex jiġu vvalutati bidliet strutturali aċinar u infiltrazzjoni taċ-ċelluli infjammatorji.

 

2.5 Markers tal-istress ossidattiv tas-serum: SOD, MDA, GSH-Px

Il-livelli tas-serum SOD, MDA, u GSH-Px tkejlu strettament skont l-istruzzjonijiet tal-kit rispettivi.

 

2.6 Sejbien ta' ELISA tas-serum IL-1 u IL-10

Il-konċentrazzjonijiet tas-serum IL-1 u IL-10 ġew imkejla strettament skont il-protokolli tal-kit ELISA.

 

2.7 Sejbien Western blot ta 'TLR-4, IRAK1, u pNF-κB p65 fil-prostata

Madwar 50 mg ta 'tessut tal-prostata ġie mitħun fi trab fin f'nitroġenu likwidu, alikkwotat, u lisat f'buffer RIPA. Il-proteini ġew separati permezz ta 'elettroforeżi, trasferiti, imblukkati, inkubati b'antikorpi primarji, maħsula, inkubati b'antikorpi sekondarji, maħsula, u immaġini. L-espressjoni tal-proteina ġiet ikkwantifikata bħala valuri tal-griż tal-faxxa ta 'mira/housekeeping.

 

2.8 Analiżi statistika

Id-dejta ġiet analizzata bl-użu tal-SPSS 22.0. Id-dejta normalment distribwita b'omoġeneità ta' varjanza hija ppreżentata bħala medja ± SD u analizzata b'ANOVA f'direzzjoni waħda b'testijiet LSD-t post hoc. Dejta mhux normali jew eterosċedastika hija ppreżentata bħala M (QR) u analizzata permezz ta' testijiet mhux parametriċi. P < 0.05 fuq żewġ naħat kien ikkunsidrat statistikament sinifikanti.

Riżultati (dikjarazzjoni mill-ġdid konċiża għaċ-ċarezza)

Versus normali: Prostatiku TLR-4, IRAK1, u pNF-κB p65↑ (P < 0.01); serum SOD u GSH-Px↓ (P < 0.01); MDA u IL-1 ↑ (P < 0.01).

Versus mudell: Anemone tomentosa (Dahuocao) tnaqqas TLR-4/IRAK1/pNF-κB p65 (P <0.01); SOD miżjuda, GSH-Px, u IL-10 (P < 0.01 jew P < 0.05); naqas MDA u IL-1 (P < 0.01 jew P < 0.05). L-istoloġija wriet ħsara fil-glandola mtaffija u infiltrazzjoni infjammatorja.

Konklużjoni
IRAK1 jista 'jirrappreżenta node pivotali fil-cross-talk bejn stress ossidattiv u IL-1 waqt infjammazzjoni kronika tal-prostata fil-firien EAP. Anemone tomentosa (Dahuocao), ħaxix etnomediċina TCM/Zhuang għall-prostatite, jista 'jinibixxi l-infjammazzjoni kronika billi jnaqqas l-istress ossidattiv u IL-1 permezz tar-regolamentazzjoni tal-mogħdija ta' sinjalazzjoni TLR-4/IRAK1/NF-κB p65.

Awtorità u noti ta' sorsi

L-epidemjoloġija u l-kuntest bijomediku huma bbażati fuq il-letteratura nazzjonali tal-uroloġija/androloġija [1-6].

L-identità, il-proprjetajiet, u l-indikazzjonijiet TCM ta 'Anemone tomentosa (Dahuocao) jirreferu għall-Amministrazzjoni Statali tal-kompendju Ċiniż Materia Medica tat-TCM [7], sors awtorevoli.

Osservazzjoni klinika u studji mekkanistiċi fuq l-annimali fuq Dahuocao għal CP/CNP huma appoġġjati minn ġurnali Ċiniżi riveduti mill-pari u linji gwida sperimentali standardizzati [8-12], li jsaħħu l-kredibilità tal-użu tal-ħxejjex tat-TCM għall-prostatite.

 

Referenzi

[1] Mi H, Chen K, Mo ZN. Karatteristiċi epidemjoloġiċi tal-prostatite kronika fiċ-Ċina. Chin J Androl. 2012;18(7):579‑582.
[2] Zheng XT, Chen SH, Yao WL, et al. Avvanzi fl-etjoloġija u l-patoġenesi tal-prostatite kronika. Dijanjosi u Trattament Moderni. 2019;30(11):1810-1813.
[3] Paulis G. Mekkaniżmi infjammatorji u stress ossidattiv fil-prostatite: ir-rwol possibbli tat-terapija antiossidanti. Res Rep Urol. 2018;10:75-87.
[4] Kang SW, Park JH, Seok H, et al. L-effetti tal-Ginseng Aħmar Korean fuq ċitokini infjammatorji u apoptożi f'mudell tal-firien ta 'prostatite kronika mhux batterika. Biomed Res Int. 2019;2019:2462561.
[5] Xue Y, Duan Y, Gong X, et al. Mediċina tradizzjonali Ċiniża għal prostatite kronika/sindromu ta 'uġigħ pelviku kroniku: reviżjoni sistematika u meta-analiżi. Mediċina (Baltimore). 2019;98(26):e16136.
[6] Sun ZX, Li PC. Ħsieb dijanjostiku u terapewtiku tat-TCM għal prostatite kronika. Liaoning J Tradit Chin Med. 2019;46(2):268‑269.
[7] Bord Editorjali tal-Materia Medica Ċiniża, Amministrazzjoni Statali tat-TCM. Ċiniż Materia Medica. Shanghai: Shanghai Xjenza u Teknoloġija Press; 1999:1768, 3166.
[8] Lu LX, Wu JY, Huang ZM, et al. Osservazzjoni klinika ta 'enema ta' żamma b'Dahuocao (mediċina Zhuang) f'60 każ ta 'prostatite kronika. Hunan J Tradit Chin Med. 2019;35(6):55‑56. doi:10.16808/j.cnki.issn1003-7705.2019.06.024.
[9] Wang WJ, Shi H, Zhang J, et al. Dahuocao jinibixxi risponsi infjammatorji f'mudell ta 'far prostatite mhux batterjali. Immunoloġija Moderna. 2021;41(6):504-508. doi:10.35541/cjd.20201030.
[10] Lu LX, Shi H, Huang ZM, et al. Rwol tal-mogħdija tal-prostatic corpora amylacea miRNA-146a/TLR-4/NF-κB f'infjammazzjoni kronika tal-firien EAP u intervent minn Dahuocao. Chin Gen Pract. 2023;26(20):2518-2524.
[11] Qian Y, Qian XQ, Gong DW, et al. Intervent ta 'resveratrol fuq ċitokini fit-tessut tal-prostatiku tal-mudell tal-far tal-prostatite. Chin J Androl. 2017;31(3):14‑18.
[12] Kumitat Professjonali tal-Farmakoloġija Sperimentali tat-TCM, Assoċjazzjoni Ċiniża tal-Mediċina Ċiniża. Abbozz ta 'speċifikazzjoni għall-preparazzjoni ta' mudelli ta 'annimali ta' prostatite kronika. Chin J Exp Tradit Med Formulae. 2018;24(19):10‑14.

Kliem ewlieni tal-awtur fakultattiv għall-indiċjar (għal skoperta)

Mediċina Tradizzjonali Ċiniża; Zhuang etnomediċina; Dahuocao; Anemone tomentosa Maxim.; prostatite; sindromu ta 'uġigħ pelviku kroniku; TLR4; IRAK1; NF-κB; stress ossidattiv; Enżimi antiossidanti; ċitokini; ELISA; Western blot; mudell tal-firien; EAP; anti-infjammatorji tal-ħxejjex; TCM herb għall-prostatite.