Studju dwar il-Funzjoni Neuroendokrinali-Immuni Ta' Cistanche Deserticola U l-Prodotti Tagħha tal-Fwar tal-Inbid Ross fil-Mudell tal-Firien Indott minn Glukokortikojdi-Ⅱ
Apr 16, 2024
3.2.4. Immunoistokimika
L-apoptosi newronali hija kkontrollata minn ħafna ġeni apoptotiċi u antiapoptotiċi, prinċipalment il-ġene Bax li jippromwovi l-apoptożi u l-ġeni antiapoptotiċi tal-familja tal-ġeni Bcl-2. Bcl-2 huwa lokalizzat f'organelli reattivi li jipproduċu l-ossiġnu bħall-mitokondrija, ir-retikulu endoplasmiku, u l-membrani nukleari. Bcl-2 ftit li xejn għandu impatt fuq ir-radikali ħielsa mill-ossiġnu iżda jista'jipprevjeni ħsara ossidattiva fiċ-ċelloli. Bax jittrasporta miċ-ċitoplasma għall-membrana mitokondrijali, jibdel l-istruttura tal-membrana mitokondrijali, u jippromwovi r-rilaxx taċ-ċitokromu ċ u l-induzzjoni ta 'apoptożi.
CISTANCHE TUBULOSA NATURALI GĦAT-TITJIB TAL-FUNZJONI SESSWALI PHGS75% ECH 30% ACT 12%
Kien hemm espressjoni fiċ-ċitoplasma adrenali tal-proteina Bax u Bcl-2. It-tbajja wriet il-partiċelli sofor kollha. Meta mqabbel ma 'dak tal-grupp BC, id-densità ottika medja tal-proteina Bax fil-grupp MC żdiedet b'mod sinifikanti (P< 0.01). Compared to that of the MC group, the average optical density in the CD-LD and WCD-LD groups decreased significantly (P < 0.01) (Figure 5(a)).
Figura 5(b) turi li meta mqabbla ma' dik tal-grupp BC, id-densità ottika medja tal-proteina Bcl-2 fil-grupp MC naqset b'mod sinifikanti (P< 0.05). Compared to that of the MC group, the average optical density in the WCD-HD and CD-HD groups increased significantly (P < 0.01), while those of the WCD-MD and CD-MD groups increased (P < 0.05).
Il-proteina caspase-3 hija lokalizzata prinċipalment fiċ-ċitoplasma fil-forma oriġinali tagħha f'tessuti normali u għandha espressjoni baxxa. Sinjali pożittivi huma isfar ċar jew isfar kannella. Meta mqabbel ma 'dak tal-grupp BC, l-espressjoni ta' caspase-3 fil-grupp MC żdiedet b'mod sinifikanti (P< 0.05). Compared to that of the MC group, the expression of caspase-3 in the WCD-HD and WCD-MD groups increased (P < 0.05) (Figure 5(c)).
Fit-tessuti normali, l-espressjoni tal-ġene Fas tnaqqset, u s-sinjal pożittiv għall-ibridizzazzjoni in situ kien isfar kannella. Kif muri fil-Figura 5(d), meta mqabbel ma 'dak tal-grupp BC, id-densità ottika medja tal-proteina Fas fil-grupp MC żdiedet (P< 0.05). Compared to that of the MC group, the average optical density in the WCD-HD and WCD-LD groups improved (P < 0.05) (Figure 5(d)).
Il-proteina FasL tinsab prinċipalment fil-membrana taċ-ċellula jew ċitoplasma, u s-sinjali pożittivi tagħha huma kannella. Meta mqabbel ma 'dak tal-grupp BC, id-densità ottika medja tal-ġene FasL fil-grupp MC żdiedet b'mod sinifikanti (P< 0.05). Compared to that of the MC group, the average optical density of the FasL gene in the WCD-HD, WCD-MD, CDHD, and CD-MD groups increased significantly (P < 0.01) (Figure 5(e)).
Ir-riżultati wrew li CD u WCD jistgħujinduċi apoptożi fiċ-ċelloli infjammatorjiu tnaqqas il-ħsara adrenali billi tippromwovi l-espressjoni tal-proteina FasL u torbot mal-proteina Fas, tattiva l-proteina caspase-3 u tiskatta kaskata ta 'caspase. L-effett tal-grupp WCD-HD kien l-aħjar.
3.3. Determinazzjoni tal-Funzjoni Immuni
3.3.1. Indiċi tal-Organi Immuni
Meta mqabbel ma 'dawk tal-grupp BC, il-koeffiċjent tat-timu u l-indiċi tal-milsa tal-grupp MC naqsu b'mod sinifikanti (P< 0.01). Compared to the MC group, the WCD-MD group had the greatest difference (P < 0.05). The thymus coefficient was almost back to the normal level. For the spleen index, the WCDMD, WCD-LD, and CD-MD groups showed significant differences compared with that of the MC group (P < 0.01) (see Figure 6). Therefore, WCD and CD treatment could protect the immune organs, and the effects of WCD were better.
CISTANCHE TUBULOSA NATURALI GĦAT-TITJIB TAL-FUNZJONI SESSWALI PHGS75% ECH 30% ACT 12%
3.3.2. Sejbien Ta' Sottogruppi ta' Limfoċiti T Fid-Demm Periferali
Il-perċentwal ta' ċelluli CD4+ fil-kwadrant ta' fuq tax-xellug u ċelluli CD8+ fil-kwadrant t'isfel tal-lemin fil-BC u kull grupp tad-droga kien ogħla minn dak fil-grupp MC. Meta mqabbel ma' dak tal-grupp BC, il-proporzjon ta' CD4+ThCD8+ naqas b'mod sinifikanti fil-grupp MC (P< 0.01). Compared to that of the MC group, the ratio of CD4+ThCD8+ increased significantly in the PC group, the WCD group, and the CD-HD group (P < 0.01) (Figure 7).
3.3.3. Determinazzjoni Tal-Livell Ta' IL-10, IL-6, IL-2, TNF-Α, U IFN-C Fis-Serum
Il-Figura 8 turi li meta mqabbel ma' dak tal-grupp BC, il-livell ta' IL-6, TNF- , u IFN-c żdied b'mod sinifikanti (P< 0.01). The level of IL-10 and IL-2 decreased in the MC group. Compared to that of the MC group, the level of IL-6, TNF-α, and IFN-c decreased and IL-10 and IL-2 increased in serum in each of the drug groups. The effect of WCD was better than the effect of CD, especially in the WCD-MD group, in which the effect was close to that of the PC group.
3.3.4. Riżultati Ta 'Lymus Tissue Mikroskopju Esperiment ta' Osservazzjoni
Figura 9 turi li fil-grupp BC, numru kbir ta 'limfoċiti kienu preżenti. Il-limfoċiti u r-reticulocytes kienu rranġati b'mod laxk fiċ-ċentru b'timoċiti tondi jew ovali mxerrdin. Ma kien hemm l-ebda nekrożi, l-ebda infiltrazzjoni taċ-ċelluli infjammatorji, u l-ebda tibdil anormali.
Il-grupp MC wera ammont kbir ta 'tessut tan-nekrożi limfojde, b'arranġament diżordinat ta' limfoċiti u reticulocytes fiċ-ċentru. Timoċiti tondi jew ovali sparixxew, deġenerazzjoni jew nekrożi massiva taċ-ċelluli kienet evidenti, u kien hemm infiltrazzjoni taċ-ċelluli infjammatorji b'bidliet patoloġiċi anormali.
Fil-gruppi CD, il-karatteristiċi morfoloġiċi tal-limfoċiti kienu rritornaw għan-normal, u l-arranġament tal-limfoċiti ċentrali u reticulocytes kien kważi normali. Timoċiti tondi jew ovali kienu rkupraw, iżda baqa 'numru żgħir ta' limfoċiti deġenerattivi jew nekrotiċi u ċelluli infjammatorji infiltranti.
Fil-gruppi WCD u l-grupp PC, il-karatteristiċi morfoloġiċi tal-limfoċiti ġew imsewwija aħjar. Il-limfoċiti u r-reticulocytes fiċ-ċentru kienu allinjati sew, it-timoċiti tondi jew ovali kienu kważi normali, iżda baqa 'numru żgħir ta' limfoċiti infiltranti u deġenerattivi.
3.4. CaM Protein Gene Expression
Il-valur RQ (CaM mRNA -actin mRNA) kien ikkunsidrat biex jeżamina l-espressjoni ta 'CaM mRNA. L-RQ tal-grupp BC kien 1. L-espressjoni ta 'CaM mRNA fl-ipotalamu fil-grupp MC żdiedet b'mod sinifikanti (P< 0.01), while the value decreased in the WCD-HD, WCD-MD, WCDLD, and CD-HD groups (P < 0.05) (Figure 10). The expression of CaM mRNA in the hypophysis in the MC group was lower than that in the BC group (P < 0.01). The expression in the WCD-HD, WCD-MD, WCD-LD, CD-HD, and CD-LD groups increased (P < 0.05), and the effect in the WCD groups was better than the effect in the CD groups.
4. Diskussjoni
Il-Farmakopea Ċiniża [2] tirreġistra li CD u WCD jistgħu jintużaw fil-klinika bħala t-tipi ewlenin ta 'biċċiet ta' decocting. Wara li jkun steamed bl-inbid tar-ross, ileffetti kontra t-tixjiħ u tonifikazzjoni tal-kliewi-yangġew imtejba. Permezz ta 'UPLC-QqQ-MS, skoprejna l-bidliet kwantitattivi fil-bażi tal-materjal kimiku matul il-proċess tal-fwar tal-inbid tar-ross. Iridoid glycosides kienu instabbli u l-kontenut ta 'dawn il-glycosides naqas, saħansitra ma setgħux jinstabu. Il-kontenut ta 'phenylethanol glycosides inbidel ukoll, li jista' jinduċi bidliet fil-farmakodinamika u l-effett kliniku.
CISTANCHE TUBULOSA NATURALI GĦAT-TITJIB TAL-FUNZJONI SESSWALI PHGS75% ECH 30% ACT 12%
Il-mudell klassiku tad-defiċjenza tal-kliewi-yang ġie replikat b'injezzjoni taħt il-ġilda ta 'corticosterone [19]. Corticosterone doża eċċessiva jista 'jinibixxi s-sigriet ta' CRH fl-ipotalamu. Sadanittant, is-sigriet ta 'ACTH kien inibit ukoll. Il-livell tal-ormon tal-kortiċi adrenali naqas, u għalhekk, il-funzjoni tal-assi HPA tnaqqset. L-ipofunzjoni tal-assi HPA hija karatteristika komuni tad-defiċjenza tal-kliewi-yang [20]. Imbagħad il-firien juru fenomeni ta '"tnaqqis" u s-sintomi huma konformi ma' dawk ta 'defiċjenza tal-kliewi-yang fil-klinika.
Fil-grupp MC, il-livell ta' CRH, ACTH, T, u CORT fis-serum tal-firien naqas b'mod sinifikanti (P< 0.01). After being treated by CD and WCD, the content of CRH, ACTH, T, CORT, and cortisol all increased to some degree, and the effect of WCD-MD was the best, almost equal to that in the PC group. These results indicated that the relative hormone balance in the HPA axis had been destroyed in the MC group, CD and WCD could improve the functional recovery of abnormal adrenal axis hormone levels, but the effect of WCD was better.
Il-modulazzjoni tal-proporzjon tal-membri tal-familja Bcl-2 huwa wieħed mill-mekkaniżmi ewlenin li permezz tiegħu FasThFasL jimmedja l-mogħdija tar-riċettur tal-mewt, u l-familja Bcl-2 tirregola l-mogħdija mitokondrijali [21]. Il-fattur Bcl-2 li jinibixxi l-apoptożi u l-fatturi li jinduċu l-apoptożi, bħal Bax, kollha jappartjenu għall-familja Bcl-2 [22]. L-apoptożi taċ-ċelluli tista 'tiġi ddeterminata mill-proporzjon relattiv ta' fatturi li jinibixxu l-apoptożi u fatturi li jinduċu l-apoptożi [23]. Il-mitokondrija għandhom il-funzjoni ta 'punti ta' kontroll ċentrali għal ħafna forom ta 'apoptożi [24]. L-istudju preżenti wera li CD-MD u WCDs jistgħu jiddeduċu l-espressjoni ta' Bax u jżidu Bcl-2 għalittejjeb id-defiċjenza tal-kliewi-yang. Fas huwa r-riċettur ewlieni tal-mewt li jinduċi apoptożi permezz ta 'ligazzjoni mal-ligand Fas (FasL) [25]. L-espressjoni ta 'Fas u FasL fil-grupp MC żdiedet, filwaqt li din l-espressjoni żdiedet b'mod sinifikanti fil-grupp WCD-MD (P< 0.01) compared with the MC group. Both FasThFasL and BaxThBcl-2 systems transduce apoptotic signals to the caspase family [26]. Caspase-3 is one of the pivotal proteinases that initiate cell apoptosis. The activation of caspase-3 indicates that apoptosis enters an irreversible stage [27]. The expression of caspase-3 in the MC group increased and increased significantly in the WCD-HD and WCD-MD groups (P < 0.05).
Id-defiċjenza tal-funzjoni immuni hija waħda mill-manifestazzjonijiet importanti tad-defiċjenza tal-kliewi-yang [28]. F'dan l-istudju, sibna li l-indiċi tal-milsa u tat-timu tal-grupp WCD-MD irkupra b'mod sinifikanti (P< 0.01, P < 0.05). The immune response of the immune system is regulated mainly by the Th subgroups [29]. IL-2 is the growth factor for T cells, secreted by T cells and macrophages, participates in inflammatory regulation, regulates immunity, and increases infection resistance [30]. The level of IL-2 in the MC group decreased (P < 0.01), and after treatment with CD and WCD, the level of IL-2 recovered. IL-6 and TNF-α are proinflammatory cytokines. Increased levels of IL-6 and TNF-α cytokines cause cytokine imbalances and exacerbate inflammation. The levels of IL-6 and TNF-α increased in the MC group, while after treatment, the levels of IL-6 and TNF-α decreased. T cells are divided into CD4 cells and CD8 cells, and the CD4+ThCD8+ ratio can be used as an important index of immune regulation [31]. CD4+ThCD8+ in the MC group decreased (P < 0.01), while in the WCD and CDHD groups increased (P < 0.01).
L-assi HPA hija s-sistema regolatorja l-aktar importanti għaliex tirregola s-sekrezzjoni tal-glukokortikojdi u s-sistema endokrinali biex iżżomm il-funzjoni sekretorja tal-kortiċi adrenali [32]. Espressjoni żejda ta 'CaM mRNA fit-tessut ipotalamu kienet relatata ma' defiċjenza ta 'yang tal-kliewi. CD u WCD jistgħu jimblokkaw il-kanali tal-kalċju, jinibixxu l-espressjoni tal-mRNA ta 'CaM fl-ipotalamu, u jnaqqsu l-influss tal-kalċju, u b'hekk inaqqsu l-attività kumplessa ta' Ca2+·CaM.
Il-formazzjoni ta 'defiċjenza tal-kliewi-yang hija proċess ta' żvilupp ta 'mard kroniku. Il-kliewi m'għadux kunċett purament anatomiku, u huwa terminu ġenerali għal sistemi ta 'immunità newroendokrinali u ġenitourinarji. In-netwerk newroendokrinali-immuni (NEI) huwa sistema regolatorja integrata importanti [33]. CD u WCD jistgħu jirregolaw il-funzjoni tal-assi HPAT u jtejbu l-irkupru tad-defiċjenza tal-kliewi-yang. Dan ir-riżultat jipprovdi l-bażi sperimentali għall-prevenzjoni klinika u t-trattament tad-defiċjenza tal-kliewi-yang.
CISTANCHE TUBULOSA NATURALI GĦAT-TITJIB TAL-FUNZJONI SESSWALI PHGS75% ECH 30% ACT 12%
