Astratt:

Studji reċenti wrew li plumbagin għandu attivitajiet anti-infjammatorji, anti-allerġiċi, antibatteriċi u kontra l-kanċer; madankollu, għadu ma ġiex muri jekk il-plumbagin irażżanx is-sintesi tal-melanin indotta mill-ormon li jistimula l-alfa-melanocyte (-MSH) biex tevita l-iperpigmentazzjoni. F'dan l-istudju, aħna wrejna li plumbagin irażżan b'mod sinifikanti s-sintesi tal-melanin stimulata minn -MSH fiċ-ċelloli tal-melanoma tal-ġrieden B16F10. Biex nifhmu l-mekkaniżmu inibitorju ta 'plumbagin fuq is-sinteżi tal-melanin, għamilna analiżi tal-attività tat-tyrosinase ċellulari jew mingħajr ċelluli u analizzajna l-espressjoni tal-ġeni relatata mal-melanoġenesi. Aħna wrejna li plumbagin jrażżan direttament l-attività tat-tyrosinase indipendenti mill-makkinarju traskrizzjoni assoċjat mal-melanoġenesi, li jinkludi fattur ta 'traskrizzjoni assoċjat mal-mikroftalmja (MITF), tyrosinase (TYR), u proteina 1 relatata mat-tyrosinase (TYRP1). Investigajna wkoll jekk plumbagin kienx tossiku għall-keratinoċiti umani normali (HaCaT) u ċ-ċelloli epiteljali tal-lenti (B3) li jistgħu jweġġgħu bl-użu ta 'kożmetiċi għall-kura tal-ġilda. B'mod sorprendenti, konċentrazzjonijiet aktar baxxi ta 'plumbagin (0.5-1 µM) inibixxu b'mod effettiv is-sintesi tal-melanin u l-attività ta' tyrosinase iżda ma jikkawżawx tossiċità f'keratinoċiti, ċelluli epiteljali tal-lenti u ċelluli tal-melanoma tal-ġurdien B16F10, li jissuġġerixxu li plumbagin huwa sikur għall-applikazzjoni dermali. Meħuda flimkien, dawn ir-riżultati jissuġġerixxu li l-effett inibitorju ta 'plumbagin fuq il-pigmentazzjoni jista' jagħmilha komponent aċċettabbli u sikur għall-użu f'formulazzjonijiet kosmetiċi għall-kura tal-ġilda użati għat-tibjid tal-ġilda.

Skont studji rilevanti, cistanche hija ħaxixa komuni li hija magħrufa bħala "l-ħaxix miraklu li jtawwal il-ħajja". Il-komponent ewlieni tiegħu huwa cistanoside, li għandu diversi effetti bħall-promozzjoni tal-funzjoni anti-ossidanti, anti-infjammatorji u immuni. Il-mekkaniżmu bejn cistanche u jbajdu l-ġilda jinsab fl-effett antiossidant tal-glikosidi cistanche. Melanin fil-ġilda tal-bniedem hija prodotta mill-ossidazzjoni tat-tyrosine katalizzata minn tyrosinase, u r-reazzjoni ta 'ossidazzjoni teħtieġ il-parteċipazzjoni ta' ossiġnu, sabiex ir-radikali ħielsa mill-ossiġnu fil-ġisem isiru fattur importanti li jaffettwa l-produzzjoni tal-melanin. Cistanche fih cistanoside, li huwa antiossidant u jista 'jnaqqas il-ġenerazzjoni ta' radikali ħielsa fil-ġisem, u b'hekk jinibixxi l-produzzjoni tal-melanin.

Ikklikkja Fuq Cistanche bienfaits Għall Whitening

Għal aktar informazzjoni:

david.deng@wecistanche.com WhatApp:86 13632399501

Kliem ewlieni:plumbagin; melanoġenesi; pigmentazzjoni; tyrosinase

1. Introduzzjoni

Melanin jikkonsisti minn grupp ta 'pigmenti sintetizzati f'melanoċiti epidermali li għandu rwol importanti fid-difiża tal-ġilda kontra l-ħsara mir-radjazzjoni ultravjola (UV) [1]. Melanoġenesi anormali, jew żieda jew tnaqqis fil-produzzjoni ta 'melanin, hija assoċjata mill-qrib ma' bosta mard tal-ġilda inkluż melanoma u disturbi tal-pigmentazzjoni, bħal kloasma u freckles [2,3]. Il-bijosintesi tal-melanin tinbeda minn stimoli multipli inkluż irradjazzjoni UV, ċitokini infjammatorji, u sinjalar ormonali. Speċifikament, l-ormon li jistimula -melanocyte ( -MSH) rilaxxat minn keratinoċiti esposti għall-UV jista 'jistimula l-bijosintesi tal-melanin f'melanoċiti epidermali billi jattiva l-assi cAMP-PKA-CREB (cyclic adenosine monophosphate-protein kinase A-cAMP response element binding protein) [3] . L-assi cAMP-PKA-CREB attivat iwassal għal żieda fl-mRNA li jikkodifika l-fattur tat-traskrizzjoni assoċjat mal-mikroftalmija (MITF). MITF iżid l-espressjoni tal-ġeni ta 'tyrosinase (TYR), proteina 2 relatata mat-tyrosinase (TYRP1), u proteina 2 relatata mat-tyrosinase (TYRP2) fuq stimulazzjoni -MSH fil-melanocytes [3,4]. Barra minn hekk, ħafna mogħdijiet ta 'sinjalazzjoni li jikkontrollaw it-tkabbir taċ-ċelluli, inklużi protein kinases attivati ​​minn mitoġenu (MAPKs), kinażi ta' rispons extraċellulari (ERK) u AKT, huma essenzjali għall-melanoġenesi billi jirregolaw l-istabbiltà u l-attività tal-MITF [5].

L-enzima tyrosinase, ossidasi multifunzjonali li fiha r-ram, għandha rwol essenzjali fil-bijosintesi tal-melanin billi tikkatalizza r-reazzjonijiet li fihom L-tyrosine jiġi idrossilat għal L-dihydroxyphenylalanine (L-DOPA) u L-DOPA jiġi ossidizzat f'o-quinone (dopaquinone). ) [5,6]. Għalhekk, xi inibituri ta 'tyrosinase jinibixxu wkoll il-bijosintesi tal-melanin, u dawn jinkludu resveratrol, arbutin u honokiol, li kollha ntużaw f'applikazzjonijiet kosmetiċi li jbajdu l-ġilda [7].

Plumbagin huwa hydroxyl-naphthoquinone sempliċi, li l-ewwel ġie estratt mill-għeruq tal-ġeneru tal-pjanti Plumbago u ntwera li għandu proprjetajiet mediċinali notevoli [8]. Attivitajiet anti-infjammatorji, kontra l-kanċer, anti-allerġiċi u antibatteriċi ta 'plumbagin ġew irrappurtati [8,9]. Tabilħaqq, ġie rrappurtat li plumbagin jinibixxi l-attivazzjoni tan-newtrofili, l-anġjoġenesi u l-espressjoni tal-collagenase billi jrażżan topoisomerase-II, li jissuġġerixxi l-użu ta 'plumbagin bħala mediċina potenzjali fit-trattament tal-artrite rewmatika [10]. Barra minn hekk, diversi rapporti wrew li plumbagin juri attività kontra l-kanċer f'diversi tipi ta' kanċer, inklużi kanċer tas-sider [11], tal-prostata [12], tal-ovarji [13], tal-pulmun [14], karċinoma tal-ġilda [15], u kanċer tal-fwied. [16]. Għalkemm qed isir ċar li plumbagin jista 'jkun utli bħala intervent terapewtiku fit-trattament ta' diversi mard tal-bniedem, l-effett inibitorju ta 'plumbagin fuq melanoġenesi marbuta ma' iperpigmentazzjoni qatt ma ġie rrappurtat.

2. Riżultati

2.1. Struttura Kimika u Effetti Ċitotossiċi ta' Plumbagin fiċ-Ċelloli tal-Melanoma tal-Ġurdien B16F10

Qabel ma studjaw l-effetti anti-melanoġeniċi ta 'plumbagin, l-ewwel ivvalutajna t-tossiċità tiegħu fiċ-ċelloli tal-melanoma tal-ġurdien B16F10 li jipproduċu l-melanin. L-istruttura kimika ta 'plumbagin tidher fil-Figura 1A. Ir-riżultati tal-assaġġ taċ-ċitotossiċità tagħna fejn konċentrazzjonijiet ta 'plumbagin inqas minn 5 µM ma affettwawx il-vijabbiltà taċ-ċelluli fiċ-ċelloli B16F10 huma murija fil-Figura 1B.

2.2. Plumbagin Jirażżan is-Sinteżi tal-Melanin Indotta mill-MSH fiċ-Ċelloli tal-Melanoma tal-Ġurdien B16F10

Imbagħad investigajna l-effetti inibitorji ta 'plumbagin fuq is-sintesi tal-melanin indotta minn -melanocyte stimulating hormone (-MSH) fiċ-ċelloli B16F10. Aħna wrejna li plumbagin irażżan bil-qawwa l-akkumulazzjoni ta 'melanin indotta minn -MSH f'mezz ikkultivat ta' ċelloli B16F10 (Figura 2A). Biex tikkonferma l-effett inibitorju ta 'plumbagin fuq is-sintesi tal-melanin indotta minn -MSH, iddeterminajna l-kontenut ta' melanin extraċellulari jew intraċellulari fin-nuqqas jew il-preżenza ta 'plumbagin f'ċelluli B16F10 stimulati minn -MSH. Figuri 2B, u C juru li plumbagin inaqqas b'mod sinifikanti l-kontenut ta 'melanin extraċellulari u intraċellulari.

2.3. Plumbagin Ma Jirregolax l-Espressjoni tal-Ġene u l-Kaskati tat-Trasduzzjoni tas-Sinjal tal-Melanoġenesi Indotta mill-MSH

Minħabba li l-fattur ta 'traskrizzjoni assoċjat mal-mikroftalmija (MITF) huwa fattur ta' traskrizzjoni essenzjali li jirregola l-espressjoni tal-ġeni assoċjata mal-melanoġenesi permezz tal-assi -MSH-PKA-CREB, investigajna jekk plumbagin jistax jirregola l-espressjoni tal-ġeni medjata minn MITF assoċjata mal-melanogenesis. L-ewwel, iddeterminajna punt ta 'żmien ta' espressjoni tal-ġeni tal-melanoġenesi massima għal MITF, tyrosinase (TYR), u proteina 1 relatata mat-tyrosinase (TYRP1) taħt stimulazzjoni -MSH. MITF huwa regolat b'mod qawwi wara t-trattament -MSH għal 2 sigħat (Figura 3A). TYR u TYRP1 ġew regolati b'mod drammatiku wara 48 siegħa ta 'trattament -MSH (Figura 3A). Il-livelli tal-proteina MITF u tyrosinase żdiedu b'reazzjoni għat-trattament -MSH u ma ġewx imrażżna bit-trattament plumbagin (Figura 3B). B'mod konsistenti, plumbagin ma inibixxix il-livelli ta 'mRNA ta' MITF, TYR, u TYRP1 wara stimulazzjoni -MSH, li jissuġġerixxi li plumbagin ma jirregolax il-makkinarju tat-traskrizzjoni relatat mal-espressjoni tal-ġeni tal-melanoġenesi fiċ-ċelloli B16F10 (Figura 3C). Minħabba li l-fosforilazzjoni u l-attivazzjoni ta 'AKT, ERK1/2, u CREB (kaskati ta' trasduzzjoni tas-sinjali maġġuri li jirregolaw il-melanoġenesi) huma meħtieġa għall-melanoġenesi [3], investigajna aktar jekk plumbagin jirregolax dawn il-mogħdijiet ta 'transduzzjoni tas-sinjali assoċjati mal-melanoġenesi. Ir-riżultati tagħna, deskritti fil-Figura 3D, juru li plumbagin ma jbiddilx is-sinjalar AKT, ERK1/2, jew CREB wara t-trattament -MSH.

2.4. Plumbagin Jinibixxi Attività Tyrosinase

Minħabba li huwa ċar li prodotti naturali li jinibixxu tyrosinase diretti jew indiretti jistgħu jkunu utli għall-iżvilupp ta 'kożmetiċi li jbajdu l-ġilda, aħna mbagħad investigajna l-effett inibitorju ta' plumbagin fuq l-attività tal-enzima tyrosinase. F'dan l-istudju, aħna wrejna li plumbagin irażżan b'mod sinifikanti l-attività enżimatika tat-tyrosinase ċellulari indotta minn -MSH fiċ-ċelloli B16F10 (Figura 4A). Biex tifhem jekk il-plumbagin jinibixxix l-attività tat-tyrosinase direttament jew indirettament, ġiet imkejla l-attività tat-tyrosinase mingħajr ċelluli. Plumbagin jinibixxi bil-qawwa l-attività ta 'ossidazzjoni L-DOPA ta' tyrosinase derivat mill-faqqiegħ ukoll, li jissuġġerixxi li plumbagin irażżan il-melanoġenesi billi jinibixxi direttament l-attività ta 'tyrosinase (Figura 4B). Barra minn hekk, ġiet osservata elevazzjoni sinifikanti fl-attivitajiet ta' tneħħija radikali bl-użu ta' 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH) assay f'kampjuni ttrattati b'vitamina Ċ u plumbagin f'konċentrazzjonijiet li jvarjaw minn 0.1 sa 5 mg/mL. Konsegwentement, 5 mg/mL ta 'plumbagin urew effett simili fuq l-attività ta' scavenging radikali għal dawk ta '0.1 mg/mL ta' vitamina Ċ (Figura 4C).

2.5. Plumbagin Mhuwiex Tossiku f'Keratinoċiti Normali u Ċelloli Epiteljali tal-Lenti

Minħabba li l-kożmetiċi bħall-krema tal-ġilda huma għal użu estern u ċ-ċitotossiċità tista 'tikkawża problemi fil-ġilda, aħna investigajna aktar jekk plumbagin huwiex tossiku għall-keratinoċiti normali (HaCaT) u ċ-ċelluli epiteljali tal-lenti (B3) u jekk jistax ikun utli għall-iżvilupp ta' jbajdu l-ġilda. kożmetiċi. Konsegwentement, sibna li konċentrazzjonijiet aktar baxxi ta 'plumbagin (1-5 µM) ma jikkawżawx tossiċità fiċ-ċelloli HaCaT u B3, iżda huma effettivi fl-inibizzjoni tas-sintesi tal-melanin (Figura 5A). Barra minn hekk, plumbagin ma induċiex H2AX relatat mal-ħsara fid-DNA u naqqas il-polimerażi (PARP) u l-proteini caspase-3 tal-polimerażi (ADP-ribose) relatata mal-apoptosi ċellulari fiċ-ċelloli HaCaT u B3 (Figura 5B), li tissuġġerixxi li plumbagin jista' ikunu aċċettabbli għall-użu fi prodotti li jbajdu l-ġilda mingħajr ma juru xi tossiċità dermali

Għal aktar informazzjoni: david.deng@wecistanche.com WhatApp:86 13632399501