Astratt:Iż-żejt taż-żerriegħa tal-qara ħamra huwa prodott sekondarju, abbundanti f'nutrijenti u komponenti bijoattivi li jippromwovu diversi benefiċċji għas-saħħa. Dan l-istudju kellu l-għan li jqabbel il-kompożizzjonijiet kimiċi, l-antiossidanti u l-attivitajiet farmakoloġiċi taż-żjut taż-żerriegħa tal-qara ħamra estratti minn Cucurbita moschata Duch. Ex Poir. (PSO1) u Cucurbita moschata (qargħa Ġappuniża) (PSO2) b'estrazzjoni enżimatika milwiema. Taħlita ta 'enżimi li tikkonsisti minn pectinase, cellulase, u protease (1:1:1) intużat fil-proċess ta' estrazzjoni enżimatika. Il-kompożizzjoni tal-aċidu xaħmi taż-żjut ġiet iddeterminata bl-użu ta' spettrometrija tal-massa tal-kromatografika tal-gass tal-metil ester tal-aċidu xaħmi. L-analiżi ta' l-attività antiossidanti tkejlu bl-użu ta' radikali ħielsa stabbli diphenylpicrylhydrazyl, radical cation 2,20 -azinobis-({3- ethylbenzothiazoline{-6-sulfonate, ferric reducer/antiossidant power, u ferric thiocyanate assay. Inibizzjoni ta' Ġew investigati enzimi li jinvolvu t-tixjiħ tal-ġilda u proċess ta' jbajdu. L-aċidu linolejku kien komponent ewlieni taż-żjut taż-żerriegħa tal-qara ħamra kollha. Barra minn hekk, kien hemm ukoll ammont sinifikanti ta' aċidu olejku, aċidu palmitiku, u aċidu stearic. PSO1 u żjut kummerċjali taż-żerriegħa tal-qara ħamra (COM1 u COM2). Kemm PSO1 kif ukoll PSO2 urew effetti inibitorji ogħla fuq hyaluronidase, collagenase, u tyrosinase mir-riklami. Għalhekk, estrazzjoni enżimatika milwiema tista 'tipproduċi żjut taż-żerriegħa tal-qara ħamra b'antiossidant ogħla, anti-aging, u attivitajiet li jbajdu Dan huwa ta 'benefiċċju għal aktar studji farmakoloġiċi u jista' jintuża bħala ikel funzjonali għall-benefiċċji tal-ġilda.

Skont studji rilevanti,cistanchehija ħaxixa komuni li hija magħrufa bħala "l-ħaxix miraklu li jtawwal il-ħajja". Il-komponent ewlieni tiegħu huwaCistanoside, li għandha diversi effetti bħalantiossidant, anti-infjammatorji, upromozzjoni tal-funzjoni immuni. Il-mekkaniżmu bejn cistanche uġilda jbajdutinsab fl-effett antiossidant ta 'cistancheglikosidi. Melanin fil-ġilda tal-bniedem hija prodotta mill-ossidazzjoni ta 'tyrosine katalizzat minntyrosinase, u r-reazzjoni ta 'ossidazzjoni teħtieġ il-parteċipazzjoni ta' ossiġnu, għalhekk ir-radikali ħielsa mill-ossiġnu fil-ġisem isiru fattur importanti li jaffettwa l-produzzjoni tal-melanin. Cistanche fih cistanoside, li huwa antiossidant u jista 'jnaqqas il-ġenerazzjoni ta' radikali ħielsa fil-ġisem, u b'hekkjinibixxi l-produzzjoni tal-melanin.

Ikklikkja fuq is-Suppliment Cistanche Tubulosa

Għal aktar informazzjoni:

david.deng@wecistanche.com WhatApp:86 13632399501

1. Introduzzjoni

Il-qara hija fil-ġeneru Cucurbita u l-familja Cucurbitaceae, pjanta komuni u famuża li kienet ikkultivata fit-Tramuntana tal-Messiku u nfirxet fl-Ewropa, l-Amerika tal-Punent, u l-Asja [1]. Il-qara ħamra hija meqjusa bħala ikel funzjonali li fih nutrijenti abbundanti bħal proteini, karboidrati, lipidi, fibra, eċċ., Flimkien ma 'komposti fitokimiċi bħal tokoferoli, karotenojdi, u -sitosterol [2]. Il-fitonutrijenti minn diversi partijiet tal-qara ħamra nstabu li għandhom attivitajiet farmakoloġiċi [2]. L-estratt tal-qoxra tal-qara ħamra wera effetti ta 'benefiċċju fuq ferita ta' ħruq f'mudelli ta 'annimali [3]. Il-polpa tal-qara ħamra wriet attività antiossidanti, kontra l-infjammazzjoni u kontra l-anġjoġenesi [2], kif ukoll attività kontra l-għeja fil-ġrieden [4]. Barra minn hekk, iż-żerriegħa tal-qara ħamra hija sors naturali tajjeb ta 'aċidi grassi essenzjali u fitosteroli li jbaxxu r-riskju ta' mortalità kardjovaskulari [5,6]. Iż-żejt taż-żerriegħa tal-qara ħamra huwa prodott sekondarju tal-ipproċessar taż-żerriegħa tal-qara ħamra, li huma sinjuri f'diversi aċidi grassi u komposti bijoattivi bħal -karoteni, -tokoferol, vitamina B, lutein, fitosteroli, u minerali oħra [7,8]. Iż-żejt jeżerċita effetti antiossidanti, kontra l-infjammazzjoni, antibatteriċi u għall-fejqan tal-feriti [1,9]. Barra minn hekk, għandu diversi benefiċċji għas-saħħa kontra l-mard, bħal pereżempju pressjoni għolja, dijabete, u kanċer [8,10].

Ġew żviluppati metodi differenti għall-estrazzjoni taż-żejt taż-żerriegħa, inklużi metodi mekkaniċi bħal cold-pressing [11] u estrazzjoni bi pressjoni għolja [12]. L-estrazzjoni tas-solvent taż-żejt taż-żerriegħa bl-użu ta 'solventi organiċi bħal hexane, aċetat etiliku, aċetun u metanol ġiet ukoll dokumentata [13,14]. L-estrazzjoni assistita mill-enżimi hija metodu alternattiv għall-industrija taż-żejt tal-pjanti minħabba li hija teknoloġija favur l-ambjent u sigura. Il-mekkaniżmu ewlieni ta 'estrazzjoni enżimatika milwiema huwa l-idrolizzar u t-tkissir tal-ħitan taċ-ċelluli tal-materjal tal-pjanti, li jwassal għal aktar permeabilità u r-rilaxx ta' komponenti bijoattivi, inkluża l-fażi taż-żejt [15]. Diversi taħlitiet ta 'enżimi applikati f'din l-estrazzjoni huma komposti minn pectinases, cellulases, hemicellulases, arabinose, -glucanase, u xylanase [16,17]. Il-kundizzjonijiet ottimizzati ta 'taħlita ta' enzimi, pereżempju, temperatura, pH, ħin ta 'reazzjoni, daqs tal-partiċelli, u konċentrazzjoni ta' enzimi, tejbu wkoll l-attività ta 'enżimi [16]. Illum il-ġurnata, dan il-metodu intuża ħafna biex jiġi estratt iż-żejt minn ħafna frott u żrieragħ tal-pjanti [18,19]. Xi studji preċedenti wrew il-kundizzjoni ottimizzata taż-żejt taż-żerriegħa tal-qara ħamra biex tikseb rendiment għoli u attivitajiet farmakoloġiċi effettivi [20,21].

Bħalissa, in-nies jikkunsmaw żejt taż-żerriegħa tal-qara ħamra f'deżerti jew dressings għall-insalata, u huwa wkoll ingredjent popolari fil-kożmetiċi. It-tixjiħ tal-ġilda huwa proċess bijoloġiku kumpless li huwa kkaratterizzat minn tikmix, telf ta 'elastiċità, telf ta' umdità, u tessut mhux maħdum ikkawżat minn stress ossidattiv, ħsara fid-DNA, u akkumulazzjoni avvanzata tal-prodott finali ta 'glycation [22]. L-aċidu hyaluronic, il-collagen u l-elastin, li huma komponenti importanti tal-ġilda, jistgħu jiġu degradati mill-enzimi hyaluronidase, collagenase, u elastase, rispettivament, li jirriżultaw fit-tixjiħ tal-ġilda. Diversi żjut tal-pjanti, bħal żejt taż-żebbuġa, żejt taż-żerriegħa tal-ġirasol, żejt taż-żerriegħa tal-għeneb, u żejt tal-jojoba intużaw għal proprjetajiet kosmetiċi tal-ġilda biex iżommu l-umdità, itejbu l-funzjoni tal-barriera tal-ġilda u jipprevjenu t-tixjiħ tal-ġilda [23]. Barra minn hekk, il-pigmentazzjoni tal-ġilda hija fenotip varjabbli u notevoli fil-bnedmin li tinvolvi melanoġenesi u hija regolata mill-enzima tyrosinase [24]. Fil-preżent, diversi estratti tal-pjanti ġew ittestjati għall-kożmetiċi u l-farmaċewtiċi biex inaqqsu l-produzzjoni tal-melanin, li jaġixxu bħala aġenti li jbajdu [25,26].

2. Materjali u Metodi

2.1. Materjali tal-Pjanti

2.2. Kimiċi u Reaġenti 

2.3. Estrazzjoni Enżimatika milwiema

Żjut taż-żerriegħa tal-qara ħamra miż-żewġ C. moschata Duch. Ex Poir u C. moschata (qargħa Ġappuniża) ġew estratti b'metodu ta 'estrazzjoni enżimatika milwiema bl-użu tal-parametri ta' idroliżi enżimatika minn studju preċedenti minn Kanopka et al. (2016), inkluża l-konċentrazzjoni ta' l-enżimi, il-proporzjon ta' l-enzima għal-substrat, it-temperatura tar-reazzjoni, il-pH, u l-ħin tar-reazzjoni [21]. Tliet tipi differenti ta 'enzimi, inklużi pectinase, cellulase, u protease, ġew magħquda fi proporzjon ta' piż 1:1:1 biex jiġġeneraw cocktail ikkonċentrat ta 'enzimi. Minn hemm 'il quddiem, il-cocktail konċentrat li jirriżulta ġie dilwit f'ilma DI biex jiġġenera taħlita enżimatika milwiema ta' 2 fil-mija w/w. Iż-żerriegħa tal-qara ħamra mingħajr buq ġew imbagħad miżjuda mat-taħlita enżimatika milwiema li tirriżulta fi proporzjon ta 'piż ta' 1:1. It-taħlita mbagħad ġiet mitħun fin bl-użu ta' blender Moulinex DB81 f'temperatura tal-kamra sal-omoġeneità. Il-pH tad-demel likwidu li jirriżulta mbagħad ġie aġġustat għal 4.7 bl-użu ta '0.1 M HCl u inkubat f'54 ◦C għal 15-il siegħa. Wara li d-demel likwidu tkessaħ għat-temperatura tal-kamra, ġie ċentrifugat f'11,500 × g għal 10 min. Is-saff ta 'fuq ta' supernatanti, li kien il-fażi taż-żejt, inġabar. Il-krema prodotta matul il-proċess ta 'estrazzjoni ma ġietx emulsifikata iżda tneħħiet permezz ta' sifonu bl-użu ta 'mikropipetta. Ir-residwu taż-żerriegħa tal-qara ħamra tneħħa permezz ta' filtrazzjoni permezz ta' karta tal-filtru Whatman No.1 taħt vakwu [21]. Żejt taż-żerriegħa tal-qara ħamra minn C. moschata Duch. Ex Poir (PSO1) u C. moschata (qargħa Ġappuniża) (PSO2) inżammu f'kontenituri magħluqa sew u reżistenti għad-dawl f'temperatura tal-kamra sa aktar esperimentazzjoni.

2.4. Determinazzjoni tal-Kompożizzjoni Kimika taż-Żejt taż-Żerriegħa tal-Qara Ħamgħa Ħamra Ħamra Ħamra Ħamra Ħamra Ħamra Ħamra Ħamra Ħamra li tuża Metodu Spettrometriku tal-Massa (FAME/GC/MS) tal-Methyl Ester/Kromatografiku tal-Gass

2.5. Determinazzjoni ta' Attivitajiet Antiossidanti

2.5.1. 2,2-Diphenyl-1-Picrylhydrazyl (DPPH) Radical Scavenging Assay

L-attività tat-tħaffir tar-radikali DPPH (DPPH• ) ġiet iddeterminata bl-użu tal-metodu stabbilit minn Chaiyana et al. (2017) [27]. Fil-qosor, 20 µL ta’ kampjuni taż-żejt (PSO1, PSO2, COM1, COM2) u aċidu linolejku maħlul f’DMSO tħalltu ma’ 180 µL ta’ soluzzjoni etanolika 167 µM DPPH fi pjanċa ta’ 96-bir u mbagħad inkubati għal 30 min f’ temperatura tal-kamra fid-dlam. L-aċidu askorbiku (1 mg/mL) intuża bħala kontroll pożittiv. Id-densità ottika (OD) kienet imkejla f'520 nm bl-użu ta 'qarrej tal-mikroplate (qarrejja tal-mikroplate EZ Read 2000, Biochrome, l-Ingilterra). L-esperimenti saru fi tliet kopji u saru fi tliet indipendenti. Il-perċentwal tal-inibizzjoni tad-DPPH ġie kkalkulat bl-użu tal-Ekwazzjoni (1):

Inibizzjoni DPPH ( fil-mija )={[(ODA − ODB) − (ODC − ODD)]/(ODA − ODB)} × 100, (1)

2.5.2. 2,20 -Azino-Bis-3-Ethylbenzthiazoline-6-Assaġġ tal-Aċidu Sulfoniku (ABTS)

L-attività tat-tħaffir tar-radikali katjoniċi ABTS (ABTS• plus ) ġiet imkejla bil-metodu kolorimetriku skont Chaiyana et al. (2017) u Paradee et al. (2019) [27,28] b'modifika żgħira. ABTS• plus ġie ġġenerat billi żżid 2 mL ta '7 mM ABTS bi 3 mL ta' 2.45 mM persulfate tal-potassju u inkubat għal 16-24 siegħa f'temperatura tal-kamra fid-dlam. L-ABTS• plus li rriżulta sussegwentement ġie dilwit bl-etanol biex jinkiseb OD ta' 0.7 ± 0.1 f'750 nm. Fil-qosor, 20 µL ta’ kampjuni taż-żejt (PSO1, PSO2, COM1, COM2) u aċidu linolejku maħlul f’DMSO tħalltu ma’ 180 µL ta’ ABTS• flimkien ma’ soluzzjoni etanolika fi pjanċa ta’ 96-bir u inkubati għal 5 min f’temperatura tal-kamra . L-OD tkejjel f'750 nm bl-użu ta 'microplate reader (Microplate readers EZ Read 2000, Biochrome, l-Ingilterra). L-aċidu askorbiku (1 mg/mL) intuża bħala kontroll pożittiv. Il-kurva standard ġiet prodotta billi tpinġi l-assorbiment f'750 nm kontra konċentrazzjonijiet differenti ta 'Trolox li jvarjaw minn 2.5-30 µg/mL. ABTS• plus l-attività tat-tħaffir ġiet ikkalkulata mill-kurva standard Trolox (R2=0.9922) u espressa bħala kapaċità antiossidant ekwivalenti għal Trolox (TEAC). L-esperimenti saru fi tliet kopji u saru fi tliet indipendenti.

2.5.3. Assaġġ tal-Qawwa Antiossidanti li Tnaqqas Ferriku (FRAP).

Il-qawwa antiossidant li tnaqqas ferriku (FRAP) ta 'kull wieħed mill-kampjuni ġiet iddeterminata bl-użu ta' assaġġ FRAP kif deskritt fi studju preċedenti minn Chaiyana et al. (2017) li kienet ġiet immodifikata kemmxejn minn Saeio et al. (2011) [27,29]. Ir-reaġent FRAP ġie ġġenerat frisk billi tħallat 300 mM acetate buffer (pH 3.6), 10 mM 2,4,6 tripyridyl-s-triazine (TPTZ) f'40 mM HCl, u 20 mM FeCl3 fil-proporzjon ta '10:1:1. F'dan l-istudju, 20 µL ta 'kampjuni taż-żejt (PSO1, PSO2, COM1, COM2) u aċidu linolejku tħalltu ma' 180 µL ta 'reaġent FRAP fi 96-platt bir-bir u inkubati għal 5 min f'temperatura tal-kamra fid-dlam. L-OD tkejjel f'595 nm bl-użu ta' microplate reader (Microplate readers EZ Read 2000, Biochrome, l-Ingilterra). L-aċidu askorbiku (1 mg/mL) intuża bħala kontroll pożittiv. Il-kurva standard ġiet prodotta billi tpinġi l-assorbiment f'595 nm kontra konċentrazzjonijiet differenti ta 'sulfat ferriku (FeSO4) li jvarjaw minn 0.003-0.5 mM. Il-valur FRAP ġie kkalkulat mill-kurva standard FeSO4 (R2=0.9965) u espress bħala kapaċità ekwivalenti (EC1). L-esperimenti saru fi tliet kopji u saru fi tliet indipendenti.

2.5.4. Assaġġ Ferric Thiocyanate (FTC).

2.6. Determinazzjoni ta' Attivitajiet Kontra l-Aging

2.6.1. Attività kontra l-Hyaluronidase

Il-kejl tal-attività kontra l-hyaluronidase sar kif deskritt qabel minn Chaiyana et al. (2020) [31]. L-ewwel, 20 µL ta 'kampjuni taż-żejt (PSO1, PSO2, COM1, COM2) tħalltu ma' 100 µL ta 'soluzzjoni ta' 15 U/mL hyaluronidase u inkubati f'37 ◦C għal 10 min. Wara l-inkubazzjoni, ġew miżjuda 100 µL ta '0.03 fil-mija w/v aċidu hyaluronic li ġie maħlul f'20 mM buffer tal-fosfat (pH 5.35), imbagħad inkubat f'37 ◦C għal 45 min. Wara dan, 1 mL ta '0.1 fil-mija albumina tas-serum bovin ġie miżjud u inkubati f'temperatura tal-kamra għal 10 min. L-OD ġie determinat f'600 nm bl-użu ta 'ditekter multimode (Beckman Coulter DTX880, Fullerton, CA, USA). L-aċidu oleanoliku (0.25 fil-mija w/v) intuża bħala kontroll pożittiv. L-esperimenti saru fi tliet kopji u saru fi tliet indipendenti. Il-perċentwal ta' inibizzjoni ta' hyaluronidase ġie kkalkulat bl-użu tal-Ekwazzjoni (3):

2.6.2. Attività Kontra l-Collagenase

Il-kejl tal-attività kontra l-collagenase sar skont il-proċess stabbilit minn Chaiyana et al. (2019) u Thring et al. (2009) b'modifiki ħfief [32,33]. Fil-qosor, 20 µL ta 'kampjuni taż-żejt (PSO1, PSO2, COM1, COM2) tħalltu ma' 20 µL ta 'soluzzjoni ta' collagenase 0.1 U/mL minn Clostridium histolyticum u inkubati f'37 ◦C għal 15 min. Wara l-inkubazzjoni, 80 µL ta’ 50 mM tricine buffer (400 mM NaCl u 10 mM CaCl2, pH 7.5) u 40 µL ta’ N-[3-(2-furyl) acryloyl]-Leu-Gly- Ġew miżjuda soluzzjoni tas-sottostrat Pro-Ala (FALGPA). L-OD ġie skopert immedjatament f'340 nm u mbagħad imkejjel kontinwament għal 20 min bl-użu ta 'qarrej tal-mikroplate (Microplate readers EZ Read 2000, Biochrome, l-Ingilterra). L-aċidu oleanoliku (1 fil-mija w/v) intuża bħala kontroll pożittiv. L-esperimenti saru fi tliet kopji u saru fi tliet indipendenti. Il-perċentwal tal-inibizzjoni tal-collagenase ġie kkalkulat bl-użu tal-Ekwazzjoni (4):

2.6.3. Attività Kontra l-Elastase

Il-kejl tal-attività ta 'anti-elastase sar skond il-proċess stabbilit minn Chaiyana et al. (2019) u Thring et al. (2009) b'modifiki ħfief [32,33]. Fil-qosor, 10 µL ta’ kampjuni taż-żejt (PSO1, PSO2, COM1, COM2) tħalltu ma’ 40 µL ta’ 0.03 U/mL soluzzjoni elastase mill-frixa tal-ħnieżer, imbagħad 50 µL ta’ 200 mM Tris-HCL buffer (pH 8.0) u 100 µL ta’ Ġew miżjuda 0.8 mM soluzzjoni ta 'sottostrat N-Succinyl-Ala-Ala-Ala-p-nitroanilide (AAAPVN). L-OD ġie skopert immedjatament f'410 nm u mbagħad imkejjel kontinwament għal 20 min bl-użu ta 'qarrej tal-mikroplate (Microplate readers EZ Read 2000, Biochrome, England). L-aċidu oleanoliku (1 fil-mija w/v) intuża bħala kontroll pożittiv. L-esperimenti saru fi tliet kopji u saru fi tliet indipendenti. Il-perċentwal ta' inibizzjoni ta' elastase ġie kkalkulat bl-użu tal-Ekwazzjoni (5):

2.7. Determinazzjoni ta' Attivitajiet ta' Anti-Tyrosinase

L-effett li jbajdu ta 'estratt naturali ġie stabbilit permezz ta' kejl ta 'attività anti-tyrosinase li sar skond Saeio et al. (2011) u Laosirisathian et al. (2020) [29,34]. L-tyrosine u L-DOPA kienu s-sottostrati tal-enzima tyrosinase f'dan l-istudju. Fil-qosor, 10 µL ta’ kampjuni taż-żejt (PSO1, PSO2, COM1, COM2) tħalltu ma’ 30 µL ta’ tyrosinase fi pjanċa ta’ 96-bir, imbagħad inkubati f’temperatura tal-kamra għal 10 min. Wara l-inkubazzjoni, 100 µL tas-sottostrat, li huwa 2.5 mM ta 'L-tyrosine jew L-DOPA, ġew miżjuda u inkubati għal 30 min. L-OD ġie determinat f'450 nm bl-użu ta 'qarrej tal-mikroplate (Microplate readers EZ Read 2000, Biochrome, l-Ingilterra). L-aċidu kojiku (20 µg/mL) intuża bħala kontroll pożittiv. L-esperimenti saru fi tliet kopji u saru fi tliet indipendenti. Il-perċentwal ta' inibizzjoni ta' tyrosinase ġie kkalkulat bl-użu tal-Ekwazzjoni (6):

2.8. Analiżi Statistika

Id-dejta kollha ntweriet bħala medja ± devjazzjoni standard (SD). Is-sinifikat statistiku ġie analizzat bl-użu ta' analiżi one-way of variance (ANOVA) segwit mit-test post-hoc ta' Tukey bl-użu ta' GraphPad Prism (verżjoni 8.0, GraphPad Software), u p <0}.05 ġiet ikkunsidrata statistikament sinifikanti.

3. Riżultati u Diskussjoni

3.1. Karattru taż-Żejt taż-Żerriegħa tal-Qara Ħamra

F'dan l-istudju, użajna estrazzjoni enżimatika milwiema minflok estrazzjoni b'solvent organiku biex niġbdu ż-żejt taż-żerriegħa tal-qara ħamra minn C. moschata Duch. Ex Poir (PSO1) u C. moschata (PSO2) minħabba li huwa proċess sempliċi, effettiv u produttiv [15,21]. PSO1 kien likwidu kannella skur b'viskożità baxxa, filwaqt li, PSO2 kien likwidu kannella ħadrani b'viskożità baxxa. Iż-żewġ żjut taż-żerriegħa tal-qara ħamra kellhom ir-riħa karatteristika tagħhom. Ir-rendimenti ta 'PSO1 u PSO2 kienu 17.7 fil-mija v/w u 15.6 fil-mija v/w, rispettivament. Minbarra ż-żejt, iż-żerriegħa tal-qara ħamra ġiet irrappurtata li fiha varjetà ta 'komposti nutrittivi. Il-kompożizzjonijiet fil-qrib ta 'C. moschata kienu prinċipalment karboidrati (39.51 fil-mija), segwiti minn xaħam (28.49 fil-mija), proteini (19.23 fil-mija), ilma (7.67 fil-mija), u irmied (5.18 fil-mija), rispettivament [35]. Madankollu, meta mqabbel mal-istudji preċedenti bl-użu tas-solvent u l-ippressar mekkaniku, l-istudju preżenti żvela rendimenti aktar baxxi ta 'żejt C. moschata. Għalkemm l-estrazzjoni tas-solvent ġiet deskritta bħala l-aktar metodu effettiv ta 'estrazzjoni taż-żejt, estrazzjoni sa 98 fil-mija taż-żjut miż-żrieragħ, hemm xi kwistjonijiet li jikkonċernaw ir-residwi tas-solvent u l-purità taż-żejt prodott [36]. Barra minn hekk, is-solvent użat fil-proċess ta 'estrazzjoni affettwa r-rendiment taż-żejt iġġenerat. L-estrazzjoni b'hexane, petroleum ether, petroleum benzene, cyclohexane, isopropyl ether, ethyl acetate, tetrahydrofuran, propane-2-ol, u acetone tat 43.4-64.4 fil-mija [37,38]. Għalhekk, l-istampa kiesħa kienet preferibbli għall-estrazzjoni tas-solvent. Madankollu, pressa kiesħa tista 'tikkawża xi kumplessitajiet fl-istadju inizjali tal-użu ta' pressa bil-kamin [39]. Għalhekk, estrazzjoni enżimatika milwiema tista 'tkun metodu ta' estrazzjoni alternattiv peress li tat kontenut ogħla ta 'żejt taż-żerriegħa tal-qara ħamra (36.0 fil-mija) meta mqabbla ma' żejt ippressat bil-kesħa (33.5 fil-mija) [21]. Għalkemm il-proċess ta 'estrazzjoni enżimatika milwiema kien aktar ikkumplikat mill-istampa kiesħa, huwa jinkludi spiża ta' investiment relattivament irħas, tnaqqis kontinwu fl-ispiża ta 'preparazzjonijiet ta' enzimi kummerċjali, potenzjal li fl-istess ħin jiġu iżolati komponenti fitokimiċi uniċi u ta 'valur, kif ukoll li jiġu indirizzati. ix-xewqa mifruxa għall-implimentazzjoni ta' teknoloġiji ħodor [21]. Studji preliminari ddeskrivew li bosta enzimi bħal cellulases, pectinases, hemicellulase u protease ħafna drabi ntużaw biex jeqirdu l-istruttura tal-ħajt taċ-ċelluli tal-pjanti biex itejbu l-estrazzjoni bijoattiva mill-pjanti [16,17]. Għalhekk, iddisinajna dan l-istudju biex jiġi estratt iż-żejt taż-żerriegħa billi nużaw taħlita ta 'enżimi li fiha pectinase, cellulase, u protease (1: 1: 1) kif deskritt qabel minn Kanopka et al. (2016), li ottimizzaw il-kundizzjonijiet tal-idroliżi enżimatika biex jiksbu l-ogħla rendiment taż-żejt taż-żerriegħa tal-qara ħamra [21]. Barra minn hekk, dan il-metodu juri alternattivi aktar sikuri u ambjentalment sostenibbli għall-estrazzjoni tas-solvent, hawnhekk imsejħa "estrazzjoni ħadra".

3.2. Kompożizzjoni Kimika taż-Żejt taż-Żerriegħa tal-Qara Ħamra

Għall-analiżi tal-kompożizzjoni tal-aċidu xaħmi, żejt taż-żerriegħa tal-qara ħamra bl-użu ta 'estrazzjoni enżimatika milwiema (PSO1 u PSO2) tqabbel u analizzat flimkien ma' żejt taż-żerriegħa tal-qara ħamra kummerċjali (COM1 u COM2) prodott bl-estrazzjoni bil-pressa kiesħa. Il-kompożizzjonijiet ta 'aċidu xaħmi ta' PSO1, PSO2, COM1, u COM2 huma murija fit-Tabella 1. Il-kampjuni kollha taż-żejt taż-żerriegħa tal-qara ħamra kienu jikkonsistu f'aċidi grassi polyunsaturated (PUFA), monounsaturated (MUFA) u saturati. L-aċidu cis-linoleic (C18:2) kien il-komponent ewlieni fil-kampjuni taż-żejt kollha. COM2 kien fih l-ogħla kontenut ta 'aċidu xaħmi (51.74 fil-mija), segwit minn COM1 (48.00 fil-mija), PSO1 (39.09 fil-mija), u PSO2 (37.63 fil-mija), rispettivament. Bl-istess mod, l-aċidu cis-oleic (C18:1) kien preżenti f'persentaġġ għoli, speċjalment f'PSO2 (37.45 fil-mija), segwit minn COM1 (33.39 fil-mija), PSO1 (31.22 fil-mija) u COM2 (28.64 fil-mija). Aċidi grassi saturati bħal aċidu palmitiku (C16:0) u aċidu stearic (C18:0) instabu biss f'ammonti żgħar f'kull wieħed mill-kampjuni taż-żejt. Ġew osservati u identifikati wkoll traċċi ta' PUFA, MUFA, u aċidi grassi saturati oħra.

Fil-letteratura, l-aċidu linolejku huwa magħruf ukoll bħala omega-6, aċidu xaħmi essenzjali li ma jistax jiġi sintetizzat mill-ġisem tal-bniedem, riċevut biss permezz tal-konsum tad-dieta. L-aċidu linolejku huwa nutrijent importanti għall-funzjonijiet tas-saħħa fil-bnedmin, li jinvolvi prekursur għaċ-ċeramidi li huwa komponent ewlieni tal-membrani ċellulari, vitamina D, u varjetà ta 'ormoni [40,41]. Studji fuq l-annimali wrew li defiċjenza ta 'aċidu linolejku tista' tikkawża qxur u ħakk fil-ġilda [23]. Barra minn hekk, l-aċidu linolejku miż-żejt tal-pjanti appoġġa l-fejqan tal-feriti tal-ġilda, flimkien mal-prevenzjoni tal-infjammazzjoni tal-ġilda u l-akne [23]. Barra minn hekk, l-aċidu olejku, jew omega-9, kien ta 'benefiċċju fil-prevenzjoni tal-kanċer, mard awtoimmuni u infjammatorju [42]. Tabilħaqq, l-aċidu olejku naqqas b'mod sinifikanti l-produzzjoni ta 'ossidu nitriku fis-sit tal-ferita, li rriżulta f'għeluq aktar mgħaġġel tal-ferita [43]. Din id-dejta tappoġġja li ż-żejt taż-żerriegħa tal-qara ħamra, li tarrikkixxi l-aċidu linolejku (omega-6) ​​u l-aċidu olejku (omega-9), juri benefiċċji potenzjali għas-saħħa.

Mis-sejbiet tagħna, iż-żejt taż-żerriegħa tal-qara ħamra (PSO1, PSO2, COM1, u COM2) kien jikkonsisti f'ħafna aċidi grassi inklużi l-aċidu linolejku (C18:2), l-aċidu olejku (C18:2), l-aċidu palmitiku (C16:0) u aċidu steariku (C18:0) li huma komponenti komuni li jinsabu fiż-żejt taż-żerriegħa tal-qara ħamra [44]. L-aċidu linolejku (omega-6) u l-aċidi olejċi (omega-9) kienu dominanti fil-kampjuni taż-żejt kollha. L-ogħla ammont ta 'aċidu linolejku kien COM2, segwit minn COM1, PSO1, u PSO2, rispettivament. Ukoll, l-ogħla ammont ta 'aċidu olejku kien PSO2, segwit minn COM1, PSO1, u COM2. Dawn ir-riżultati jispjegaw li l-estrazzjoni enżimatika milwiema taż-żejt taż-żerriegħa tal-qara ħamra kellha aċidu linolejku kemmxejn aktar baxx, iżda mhux aċidu olejku minn estrazzjoni bil-pressa kiesħa. Ir-raġuni għall-kontenut aktar baxx ta 'aċidu linolejku fiż-żerriegħa tal-qara ħamra minn estrazzjoni enżimatika milwiema milli f'kampjuni taż-żejt kummerċjali kienet dovuta għal differenza fil-proċess ta' estrazzjoni. Studji preċedenti sabu inkonsistenzi fl-ammont ta 'aċidi grassi mhux saturati, speċjalment aċidu olejku, u aċidu linolejku, fiż-żjut taż-żerriegħa tal-qara ħamra minn estrazzjonijiet distinti [39]. Il-kontenut ta 'aċidu olejku varja minn 28.19 fil-mija fiż-żejt taż-żerriegħa tal-qara ħamra ppressat fil-kesħa għal 30.56 fil-mija fiż-żejt taż-żerriegħa tal-qara ħamra estratt bil-pentan, filwaqt li l-kontenut ta' aċidu linolejku varja minn 43.86 fil-mija fiż-żejt taż-żerriegħa tal-qara ħamra estratt bil-pentan għal 46.67 fil-mija fiż-żejt taż-żerriegħa tal-qara ħamra ppressat fil-kesħa [39]. Apparti minn metodi ta 'estrazzjoni differenti, is-solventi użati fil-proċess ta' estrazzjoni u t-temperatura matul il-maturazzjoni taż-żerriegħa affettwaw ukoll il-kontenut ta 'aċidu linolejku taż-żerriegħa tal-pjanti. Studju preċedenti enfasizza li l-etere tal-pitrolju ta żejt tal-kittien b'kontenut baxx ta 'linolejku (26.2 fil-mija), filwaqt li n-hexane ta riżultati kontradittorji b'kontenut ta' aċidu linolejku ta '46.5 fil-mija [45]. Barra minn hekk, l-aċidu linolejku huwa inversament proporzjonali għat-temperatura waqt il-maturazzjoni taż-żerriegħa tal-ġirasol [46].

Barra minn hekk, studju relattiv skopra li l-kompożizzjoni kimika f'termini ta 'kompożizzjoni ta' aċidu xaħmi wriet li l-aċidi linolejku u olejku kienu preżenti f'47.45 fil-mija u 35 fil-mija, rispettivament, fiż-żejt taż-żerriegħa tal-qara ħamra (C. maxima) estratt bl-użu ta 'etere dietiliku [47] . Skond Akin et al. (2018), il-kontenut ta 'aċidu linolejku varja minn 53.19 fil-mija għal 53.27 fil-mija, segwit minn aċidu olejku, li kien preżenti wkoll f'ammonti għoljin li jvarjaw minn 27.52 fil-mija għal 27.59 fil-mija fl-estrazzjoni taż-żejt taż-żerriegħa C. pepo L. ippressat kiesaħ [48 ]. Għalhekk, l-estrazzjoni enżimatika milwiema f'dan l-istudju kisbet ukoll rendimenti aktar baxxi ta 'aċidi grassi minn estrazzjoni tas-solvent u estrazzjoni bil-pressa kiesħa msemmija fi studji preċedenti. Fil-paragun tal-kultivari, sibna li PSO1 (C. moschata Duch. Ex Poir) wera ammont ogħla ta 'aċidu linolejku minn PSO2 (C. moschata, jew, qara ħamra Ġappuniża). B'mod differenti, PSO2 ippreżenta ammont ogħla ta 'aċidu olejku minn PSO1. Importanti, il-varjazzjonijiet fil-profili tal-aċidu xaħmi u l-ammonti ta 'żejt taż-żerriegħa tal-qara ħamra kienu dipendenti fuq l-oriġini ta' kultivari partikolari, kundizzjonijiet klimatiċi, u ġestjoni ta 'wara l-ħsad [49]. Minbarra differenzi fil-profili tal-aċidu xaħmi taż-żjut taż-żerriegħa tal-qara ħamra miksuba minn metodi ta 'estrazzjoni differenti, iż-żjut mit-teknoloġija enżimatika milwiema kienu rrappurtati li huma sinjuri fil-phytosterol u tocopherol [50]. Għalhekk, PSO1 u PSO2, li ġew prodotti mill-metodu ta 'estrazzjoni aħdar, huma ssuġġeriti bħala żjut taż-żerriegħa tal-qara ħamra alternattivi għal aktar applikazzjonijiet.

Għal aktar informazzjoni: david.deng@wecistanche.com WhatApp:86 13632399501