PARTI 1 Iżolament U Identifikazzjoni ta' Phenylethanoid Glycosides Minn Aloysia Polystachya U l-Attività Tagħha Bħala Inibituri Ta' Monoamine Oxidase-A
Mar 10, 2022
X'inhi r-raġuni għaliex Cistanche Actosides jista 'jinibixxi l-attività ta' l-enżimi?
Il-prinċipju tal-effett antiossidant ta 'Cistanche
Affiljazzjonijiet
1 Departamento de Biotecnologia em Plantas Medicinais, Universidade de Ribeirão Preto (UNAERP), Ribeirão Preto, SP, Brażil2 Departamento de Química, Faculdade de Filosofifia, Ciências e Letras de Ribeirão Preto, Universidade de São Paulo (USP), Monte Alegre, Ribeirão Preto , SP, Brażil
Kliem ewlieni
aloysia polystachya, verbenaceae, attività antidipressanti, feniletanojdi, inibituri tal-monoamine oxidase
Astratt
Aloysia polystachya jintuża bħala sedattiv u antidipressant mill-popolazzjonijiet indiġeni tal-Arġentina u l-Paragwaj, iżda l-komposti assoċjati ma 'dawn l-attivitajiet ma ġewx determinati. Aħna sseparajna u identifikajna l-kostitwenti ewlenin tal-estratt idroetanoliku ta 'A. polystachya permezz ta' kromatografija likwida ultra-prestazzjoni spettrometrija tal-massa u kkonfermajna l-preżenza ta 'acteoside,isoacteoside, 6'-acetylatteoside, u 4',4''',5,5''-tetrahydroxy-6,6'',3'''-trimethoxy-[C7–O–C7'']-biflavone permezz ta' spettroskopija NMR. Attivitajiet inibitorji ta 'l-estratt idroetanoliku u phenylethanoid glycosides purifikati kontra monoamine oxidase-A ġew ivvalutati bl-użu ta' analiżi fluworometrika standard. L-estratt idroetanoliku inibixxa l-attività tal-monoamine oxidase-A b'mod dipendenti mid-doża b'IC5{{20}} ta' 9.2 µg/mL, filwaqt li l-inibitur selettiv tal-monoamine oxidase clorgyline wera IC50 ta' 0.06µg/mL ( 0.22µM). Acteoside kien l-iktar inibitur b'saħħtu ta' monoamine oxidase-A (valur IC50 ta' 5µM), filwaqt liisoacteosideu 6'-acetylatteosidewera valuri IC50 ta' madwar 10 µM. Ir-riżultati wrew li l-phenylethanoids minn estratt idroetanoliku ta 'A. polystachyahave nstabu li għandhom attività inibitorja kontra monoamine oxidase-A. Huwa probabbli li l-mod ta 'azzjoni tal-acteosideshuwa multi-mira, li jinvolvi t-tnaqqis ta 'molekuli infjammatorji u newtralizzazzjoni ta' reazzjonijiet ta 'ossidazzjoni kif ukoll inibizzjoni ta' monoamine oxidase-A.
Għal aktar informazzjoni jekk jogħġbok ikkuntattja:joanna.jia@wecistanche.com
Cistanche deserticola għandha ħafna effetti, ikklikkja hawn biex tkun taf aktar
Introduzzjoni
Skont rapport reċenti mill-Organizzazzjoni Dinjija tas-Saħħa [1], aktar minn 320 miljun ruħ (4.4 fil-mija tal-popolazzjoni dinjija) ibatu minn dipressjoni u disturbi ta’ ansjetà, b’madwar 800 elf suwiċidju fis-sena jiġu kommessi bħala riżultat ta’ dawn il-kwistjonijiet mentali. . Għalkemm il-kura b'antidipressanti sintetiċi hija disponibbli, ħafna pazjenti jsofru minn effetti sekondarji bħal ħalq xott, stitikezza, sturdament, vista mċajpra, żieda fl-aptit, żieda fil-piż, nuqqas ta' rqad u problemi tal-kliewi [2]. Għal din ir-raġuni, approċċi li jużaw mediċina komplementari u alternattiva, inkluża l-fitoterapija, intużaw fit-trattament ta 'diversi tipi ta' disturbi mentali [3].
Diversi studji prekliniċi u kliniċi pprovdew evidenza b'appoġġ għall-benefiċċji tal-mediċini bbażati fuq il-pjanti fit-trattament ta 'disturbi ta' ansjetà ġenerali u speċifiċi [4, 5]. Ta’ interess partikolari huma investigazzjonijiet dwar il-proprjetajiet ansjolitiċi ta’ Aloysia polystachya (Griseb.) Moldenke (Verbenaceae), speċi aromatika misjuba prinċipalment fl-Arġentina u l-Paragwaj. Skont studji etnofarmakoloġiċi, il-popolazzjonijiet lokali jużaw il-pjanta, li hija komunement magħrufa bħala burrito, bħala toniku diġestiv, sedattiv u antidipressant [6, 7]. Għalkemm il-proprjetajiet ansjolitiċi u antidipressanti ta 'estratti idroetanoliċi minn A. polystachya ġew ikkonfermati minn studji prekliniċi [8-10], ma saru l-ebda investigazzjonijiet fitokimiċi bil-għan li jiġu identifikati l-komposti assoċjati ma' dawn l-attivitajiet. Preċedentement intwera li l-attivitajiet antidipressanti ta 'xi pjanti mediċinali, pereżempju, Hypericum perforatum L. (Hy-pericaceae) u Peganum harmala L. (Nitrariaceae), huma assoċjati mal-inibizzjoni ta' monoamine oxidase-A (MAO-A) [11–13]. Il-familja MAO hija mqassma fis-sistemi nervużi ċentrali u periferali u l-espressjoni żejda ta 'dawn l-enzimi tippromwovi d-deaminazzjoni ossidattiva ta' monoamini bi tnaqqis fil-livelli tan-newrotrasmettituri serotonin, norepinephrine, u dopamine, li jirriżultaw fil-bidu ta 'disturbi psikjatriċi. Tali proċessi ta 'deamination jiġġeneraw ukoll sustanzi bħall-perossidu tal-idroġenu, radikali ħielsa mill-ossiġnu, u aldeidi li huma responsabbli għall-istress ossidattiv taċ-ċelloli. MAOs jeżistu f'żewġ isoformi ewlenin li huma differenti fir-rigward tad-distribuzzjoni, l-ispeċifiċità tas-sottostrat, u s-sensittività għall-inibituri. L-isoforma MAO-A għandha rwol importanti fid-depressjoni u d-disturbi ta 'ansjetà, filwaqt li MAO-B hija involuta f'mard newrodeġenerattiv [13-17]. Fid-dawl ta' dan ta 'hawn fuq, aħna ipoteżijna li l-proprjetajiet ansjolitiċi u antidipressanti ta' A. polystachya joħorġu, mill-inqas parzjalment, mill-preżenza ta 'inibituri ta' MAO-A. Sabiex nittestjaw din l-ipoteżi, identifikajna l-prinċipji attivi preżenti fl-estratt idroetanoliku minn weraq ta 'A. polystachya u vvalutajna l-effetti tal-estratt mhux raffinat u l-kostitwenti ewlenin iżolati minnu fuq l-attività MAO-A.
Riżultati u diskussjoni
L-estratt idroetanoliku mill-weraq ta 'A. polystachya ġie sottomess għal kromatografija likwida ultra-prestazzjoni spettrometrija tal-massa (UPLC-MS), u l-kromatogramma hekk miksuba hija ppreżentata f'▶Fig. 1a. Il-komponenti ewlenin tal-estratt ġew ippurifikati permezz ta' kromatografija tal-kolonna u kromatografija likwida ta' prestazzjoni għolja b'fażi inversa (RP-HPLC), u identifikati bħala acteoside (syn verbascoside), isoacteoside, 6'-acetylatteoside, u 4',4',5 ,5'-tetrahydroxy-6,6'',3'-trimethoxy-[C7–O–C7'']-biflavone b'paragun tal-1H- u 13C-NMR tagħhom, HSQC, HMBC (▶Tabella 1S, 2S, Informazzjoni ta' Appoġġ), u data MS (▶Fig. 1b-e) b'valuri rrappurtati fil-letteratura [18–20]. Il-konċentrazzjoni ta 'acteoside fl-estratt idroetanoliku, kif determinat mill-HPLC, kienet 108.65 ± 1.3 µg/mg ta' estratt imnixxef. Dan jirrappreżenta l-ewwel rekord tal-kostitwenti tal-estratti tal-weraq minn A. polystachya, għalkemm iż-żejt essenzjali tal-pjanta ġie analizzat qabel u nstab li fih il-monoterpenes carvone u limonene bħala l-komponenti ewlenin [21]. L-estratt idroetanoliku mhux raffinat mill-weraq ta 'A. polystachya inibixxa l-attività MAO-A b'mod dipendenti fuq id-doża (▶Fig. 2a) b'IC50 ta' 9.2 µg/mL, filwaqt li l-clorgyline ta' inibitur selettiv MAO wera IC50 ta' 0.06µg/mL (0.22µM). Il-purifikatacteosideswera wkoll attivitajiet inibitorji kontra MAO-A (▶Fig. 2b), bl-acteoside jippreżenta l-inqas valur IC50 ta’ 5µM (3.1µg/mL) segwit minnisoacteosideb'IC50 ta' 10.1 µM (6.3 µg/mL) u 6'-acetylatteosideb'IC50 ta' 9.5µM (6.3µg/mL). L-inibizzjoni ta 'MAO-A twassal għall-istabbiliment mill-ġdid tal-livelli ta' serotonin, norepinephrine, dopamine, u tyramine, li huma newrotrasmettituri ewlenin fil-kontroll tal-ansjetà u d-dipressjoni [16]. Għalhekk, il-preżenza ta 'diversi inibituri MAO-A fil-weraq ta' A. polystachya tispjega, għall-inqas parzjalment, l-attività antidipressanti u ansjolitika rrappurtata qabel tal-ispeċi [8-10]. L-użu ta 'taħlitiet ta' pjanti b'ħafna komponenti jista 'jkun ta' vantaġġ fit-trattament ta 'mard ta' etjoloġija kumplessa bħal ansjetà, depressjoni, u kundizzjonijiet newroloġiċi oħra. Bħalissa, l-użu ta 'phytomedicines fit-trattament ta' mard li jaffettwa s-sistema nervuża huwa bbażat fuq il-paradigma ta 'ligands multi-mira diretti, jiġifieri, farmaċewtiċi li għandhom attivitajiet multi-mira li jirriżultaw mill-preżenza ta' sustanzi bħal polifenoli b'anti- proprjetajiet infjammatorji, antiossidanti u inibitorji MAO li huma kapaċi jagħtu newroprotezzjoni [20,22-25]. Ta 'min jinnota, madankollu, li l-karattru polari ta' sustanzi polifenoliċi jista 'jfixkel l-interazzjonijiet mal-miri molekulari tagħhom. Madankollu, studji kliniċi wrew li l-kuntatt bejn il-polifenoli u l-metaboliti sekondarji mhux polari preżenti fl-estratti jistgħu jimmodifikaw il-permeabilità tal-membrani taċ-ċelluli u jiffaċilitaw l-assorbiment ta 'komposti polari [23]. Għalhekk, estratti kumplessi tal-pjanti li fihom aġenti multi-mira li jinteraġixxu mar-riċetturi tagħhom b'mod plejotropiku jiġġeneraw sinerġiżmu farmakoloġiku li jaffettwa bosta proċessi, inkluż il-moviment ta 'metaboliti polari tul il-membrani taċ-ċelluli. F'dan il-kuntest, Li et al. [26] uża mudell ta 'zebrafish biex juri li l-acteoside jista' jippenetra l-barriera tad-demm u l-moħħ, u ppropona li l-phenylethanoid glycoside jista 'jkollu effett terapewtiku potenzjali fil-marda ta' Parkinson. In-newrotrażmettituri monoaminerġiċi huma l-miri ewlenin tal-antidipressanti moderni peress li n-nuqqasijiet tagħhom huma responsabbli għas-sintomi debilitanti tad-dipressjoni. Studju reċenti in vivo wera li l-estratti etanoliċi u akwei ta' Lippia citriodora (Verbenaceae) u l-acteoside tal-komponent ewlieni tagħhom urew effetti ansjolitiċi, ipnotiċi u rilassanti tal-muskoli, u dawn il-proprjetajiet ġew attribwiti, parzjalment, għal interazzjoni mal-gamma tat-tip A. -aminobutyric acid (GABAA) riċettur [27]. Studji kliniċi wrew li mediċini bil-kapaċità li jimblokkaw ċitokini infjammatorji, bħal TNF-, jew komponenti oħra tal-mogħdija tas-sinjalar infjammatorju, pereżempju, cyclooxygenase-2 (COX{-2), huma effettivi fit-tnaqqis sintomi depressivi f'pazjenti b'artrite rewmatojde, psorjasi u kanċer, kif ukoll dawk li jbatu minn disturbi psikjatriċi kbar [28]. F'dan il-kuntest, ġie rrappurtat li l-acteoside jista' jnaqqas il-produzzjoni u r-rilaxx ta' molekuli infjammatorji, bħal nitriku ossidu (NO), TNF-, u interleukin 12 (IL-12) f'lipopolysaccharide/interferon-gamma (LPS). Makrofaġi stimulati minn /IFN- ) [29], kif ukoll istamina u aċidu arakidoniku fiċ-ċelloli mast RBL-2H3 [30]. Barra minn hekk, l-acteoside jista' jnaqqas il-livelli ta' TNF-, IL-1, IL-8, IL{-6, u NO, u jattiva caspase-1, fattur nukleari -kappa-B
(NF-κB), NO synthase u proteina attivatur-1 [31] indotta minn IL-32 u/jew LPS fiċ-ċelloli TH-1 u makrofaġi [32]. Xi wħud minn dawn il-medjaturi infjammatorji, bħal IFNs, IL-6, IL-8, u IL{-1, instabu f'livelli anormali kemm f'kampjuni ta' tessut periferali kif ukoll post-mortem minn individwi depressi , u kienu relatati mas-sintomi tad-dipressjoni [33]. L-attivazzjoni ta 'dawn il-molekuli minn stressors psikosoċjali tista' tippromwovi bidliet funzjonali sinifikanti fil-moħħ, li jwasslu għall-iżvilupp ta 'mġieba depressiva u disturbi psikjatriċi oħra. IFNs, IL-1, u TNF- , pereżempju, jistgħu jżidu l-espressjoni u l-funzjoni ta 'serotonin, noradrenaline, u pompi tar-riċetturi tad-dopamine, u b'hekk inaqqsu d-disponibbiltà ta' dawn in-newrotrasmettituri fil-qasma sinaptika [28]. Barra minn hekk, IFN- , IL-6, TNF- , u stress ossidattiv jistgħu jattivaw indoleamine 2,3 dioxygenase (IDO), enzima responsabbli għad-degradazzjoni tat-triptofan u, b'hekk, inaqqsu l-konċentrazzjoni tal-prekursur primarju ta' sintesi tas-serotonin [34].Acteoside, isoacteoside, u 6'-acetylatteosidefihom frazzjonijiet ta 'hydroxy-phenylethyl u caffeoyl li huma magħrufa li huma assoċjati ma' proprjetajiet antiossidanti [35, 36], u l-acteoside innifsu juri attività antiossidant konsiderevoli [37]. Studji wrew liacteosidejinibixxi l-aggregazzjoni ta '-amyloid peptide (A) b'mod dipendenti mid-doża, jiffunzjona bħala aġent newroprotettiv, u jsaħħaħ il-memorja, u dawn il-proprjetajiet ġew attribwiti għall-attività antiossidant tal-aġent [38,39]. Meta wieħed iqis li bosta speċi fenoliċi b'ħafna proprjetajiet antiossidanti jintużaw fit-trattament ta 'disturbi newroloġiċi [15], ġie ssuġġerit li l-effetti antidipressanti u ansjolitiċi tal-phenylethanoid glikosidiiżolati minn A. polystachya jistgħu jirriżultaw ukoll mill-attivitajiet antiossidanti tagħhom. Din is-suppożizzjoni kienet appoġġjata minn Xu et al. [40], li ppreżenta evidenza dwar ir-relazzjoni bejn iż-żieda fl-istress ossidattiv u d-dipressjoni/ansjetà. Ibbażat fuq dan ta 'hawn fuq, nikkonkludu li l-proprjetajiet antidipressanti tal-estratt idroetanoliku mill-weraq ta' A. polystachya, u tal-feniletanojdi purifikati iżolati minnu, jistgħu jiġu spjegati b'modi ta 'azzjoni multi-mira li jinvolvu l-inibizzjoni ta' MAO-A, downregulation ta ' molekuli infjammatorji, u newtralizzazzjoni ta 'reazzjonijiet ta' ossidazzjoni. Għalhekk, ir-riżultati ppreżentati hawnhekk isostnu l-ipoteżi oriġinali tagħna li l-attivitajiet ansjolitiċi u antidipressanti tal-estratt idroetanoliku ta 'A. polystachya jirriżultaw, għall-inqas parzjalment, mill-inibizzjoni ta' MAO-A. Madankollu, ir-relazzjoni struttura-attività tal-phenylethanoid glycosides identifikati f'dan l-istudju teħtieġ aktar attenzjoni sabiex molekuli ġodda jkunu jistgħu jiġu ddisinjati għat-trattament ta 'disturbi newroloġiċi speċifiċi.
Materjali u metodi
Materjal tal-pjanti
Weraq ta’ A. polystachya nħasad fil-Farmacia da Natureza da Terra de Ismael (Jardinópolis, SP, Brażil) f’Jannar 2016. Materjal tal-pjanti ġie identifikat minn Dr Lúcia Rossi (Instituto Botânico, São Paulo, SP, Brażil), u kampjun tal-vawċer ġie depożitat fl-Erbarju tal-Pjanti Mediċinali fl-UNAERP bin-numru tal-vawċer
HPM-1213. Il-permess biex jiġu evalwati l-bijoattivitajiet tal-estratti mill-pjanti Brażiljani ngħata mill-Instituto Brasileiro do Meio Ambiente e dos Recursos Naturais Renováveis (nru 02001.005074/2011-19).
Preparazzjoni ta' l-estratt idroetanoliku ta' Aloysia polystachya
Il-weraq (1000g) ġew imnixxfa għal 72 siegħa f'forn ta 'l-arja li jiċċirkola f'45 grad, pulverizzat, u mgħoddi minn għarbiel tal-malja 40-. Il-materjal trab kien mgħaddas fl-ilma: etanol (20:80; v/v) għal 7 ijiem u sussegwentement iffiltrat minn karta tal-filtru Whatman Nru 41. Il-filtrat ġie mnaqqas għal nixfa fuq evaporatur li jdur u lajofilizzat biex jagħti 130.2g ta 'estratt mhux raffinat niexef, li jirriżulta fi proporzjon ta' estratt tad-droga ta '7.6:1.
Phenylethanoid Glikosidificistanche
