Effetti Benefiċi tal-Frazzjoni Totali tal-Glycoside Phenylethanoid Iżolat Minn Cistanche Deserticola Fuq il-Mikrostruttura tal-għadam fil-Firien Ovariectomized

Lingling Yang, Shuqin Ding, Bo Zhang, Jingjing Liu, Yanhong Dong, Qiwen Tang, Pingping Yang, u Xueqin Ma

1 Dipartiment tal-Analiżi Farmaċewtika, Skola tal-Farmaċija, Ningxia Medical University, 1160 Shenli Street, Yinchuan 750004, iċ-Ċina

2 Skola tal-Mediċina Klinika, Ningxia Medical University, 692 Shenli Street, Yinchuan 750004, iċ-Ċina

3 Laboratorju Ewlenin tal-Modernizzazzjoni tal-Mediċina Etnika Hui, Ministeru tal-Edukazzjoni, Ningxia Medical University, 1160 Shenli Street, Yinchuan 750004, iċ-Ċina

Dan huwa artiklu b'aċċess miftuħ imqassam taħt il-Liċenzja ta' Attribuzzjoni Creative Commons, li tippermetti użu, distribuzzjoni, u riproduzzjoni mingħajr restrizzjonijiet fi kwalunkwe mezz sakemm ix-xogħol oriġinali jiġi kkwotat kif suppost.

Kuntatt:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

Astratt

L-istudju preżenti kien iddisinjat biex jistma l-attività antiosteoporotika tal-frazzjoni totali ta 'phenylethanoid glycoside iżolata minnCistanchedeserticola(CDP) fuq firien indotti minn ovariectomy (OVX) kif ukoll il-mekkaniżmi relatati. Wara 3 xhur ta 'amministrazzjoni orali, id-densità minerali mnaqqsa tal-għadam, is-serum Ca, u P fil-firien OVX ġew irkuprati u l-mikroarkitettura tal-għadam trabekulari ddeterjorat tjiebet parzjalment bl-intervent ta' Cistanche deserticola (60, 120, u 240 mg/kg), l-attivitajiet ta 'markaturi ta' assorbiment mill-ġdid tal-għadam kienu regolati 'l isfel, u l-bijoattiv tal-indiċi tal-formazzjoni tal-għadam kien upregulated; sadanittant, il-kontenut ta 'MDA naqas, u GSH żdied bi trattament CDP. Kompożizzjonilment, ġew identifikati 8 komposti phenylethanoid glycoside fiCistanchedeserticola(CDP), bil-kontenut totali kkwantifikat bħala 50.3 fil-mija bl-użu tal-metodu HPLC. Mekkanikament,Cistanchedeserticola(CDP)naqqas il-livelli ta 'TRAF6, RANKL, u RANK, u b'hekk irażżan RANKL/RANK/TRAF6-attivazzjoni indotta ta' mogħdijiet ta' sinjalar NF-κB u PI3K/AKT 'l isfel u fl-aħħar mill-aħħar jipprevjenu attivitajiet tal-proteini osteoklastoġeniċi ewlenin ta' NFAT2 u c -Fos. Id-dejta kollha ta 'hawn fuq implikat li CDP wera effetti ta' benefiċċju fuq il-mikrostruttura tal-għadam fil-firien ovariectomized, u dawn l-effetti jistgħu jkunu relatati mal-mogħdijiet ta 'sinjalazzjoni NF-κB u PI3K/AKT li ġew attivati ​​mill-irbit ta' RANKL, RANK, u TRAF6.

Cistanche tubulosagħandha ħafna effetti, ikklikkja hawn biex tkun taf aktar

1. Introduzzjoni

L-osteoporożi ta’ wara l-menopawża, fejn 1 minn kull 3 mara ta’ aktar minn 50 sena se tbati, qed issir il-periklu ewlieni għas-saħħa li qed jolqot aktar minn 200 miljun mara fid-dinja kollha [1]. Fil-menopawsa, it-tnaqqis qawwi tal-livell tal-estroġenu ġeneralment iwassal għal assorbiment mill-ġdid tal-għadam inqabeż ikkawżat minn osteoklastoġenesi msaħħa; imbagħad, il-bilanċ bejn il-formazzjoni tal-għadam indotta mill-osteoblasti u r-riassorbiment tal-għadam indott mill-osteoklasti kien imfixkel, u r-riassorbiment tal-għadam aċċellerat finalment ikkawża osteoporożi u anke ksur tal-ġenbejn jew tas-sinsla [2]. Kien maħsub li d-differenzjazzjoni ta 'l-osteoclast kienet attivata meta l-attivatur tar-riċettur tal-fattur nukleari kappa B (RANK) kien marbut ma' RANKL, il-ligand ta 'RANK. Madankollu, il-kombinazzjoni ta 'RANK għal RANKL ma tistax tiġi attivata sakemm il-fattur 6 assoċjat mar-riċettur tal-fattur tan-nekrożi tat-tumur tal-proteini (TRAF6) ma jkunx ingħaqad fiha [3], segwita mill-istimulazzjoni ta' mogħdijiet ta 'sinjalazzjoni downstream inklużi PI3K/AKT u NF-κB. U fl-aħħarnett, l-espressjonijiet tal-fattur nukleari taċ-ċelluli T attivati ​​c2 (NFAT2) u c-Fos ġew regolati [4] biex jimmodulaw id-divrenzjar tal-osteoclast kif ukoll ir-riassorbiment tal-għadam. Għalhekk, il-fatturi u r-regolaturi li huma direttament jew indirettament relatati mal-attivazzjoni u d-divrenzjar tal-osteoclast kienu maħsuba bħala miri kruċjali għall-prevenzjoni tat-telf tal-għadam.

Tabilħaqq hemm xi mediċini ta 'terapija ta' sostituzzjoni tal-ormoni kliniċi u sintetiċi bħal estradiol valerate li huma effettivi fit-trattament tal-osteoporożi ta 'wara l-menopawża. Sfortunatament, xi wħud minn dawn tejbu r-riskju ta 'kanċer serji inklużi kanċer tas-sider u endometrijali [5], li llimitaw l-applikazzjonijiet kliniċi tagħhom. Għalhekk, huwa meħtieġ li jintgħażlu alternattivi oħra kemm b'effikaċja kif ukoll b'effetti sekondarji minimi. Il-mediċini tradizzjonali Ċiniżi (TCM), kif ukoll il-komposti u l-frazzjonijiet bijoattivi iżolati [6–9], ġew ippruvati effettivi fuq diversi mard inkluż l-osteoporożi wara l-menopawża. Fost dawn il-komponenti u l-frazzjonijiet bijoattivi, il-komposti tal-phenylethanoid glycoside (PhG) b'effikaċja potenzjali kienu maħsuba bħala aġenti promettenti għat-trattament tal-osteoporożi [10-12]. L-istrutturi ta 'PhGs jikkonsistu f'aglycone ta' l-aċidu cinnamic, grupp ta 'hydroxyl phenyl ethyl li huwa kkombinat ma' -glucopyranose, apiose, galactose, rhamnose, jew xylose permezz ta 'bond glycosidic. Jeżistu b'mod wiesa 'fi speċi mediċinali ta' ġeneruCistanche[13]. CistanchedeserticolaYC Ma hija TCM uffiċjali li hija rreġistrata fil-farmakopea Ċiniża, u minbarra li hija TCM importanti [14], C deserticola hija wkoll ħaxixa tonika kontra t-tixjiħ bi ftit effetti sekondarji li ġiet żviluppata f'likur mediċinali u likwidu nutrittiv approvat mill-Ikel tal-Istat. u Amministrazzjoni tad-Droga. Ibbażat fuq ir-rekord tal-farmakopea Ċiniża, C. deserticola kienet tradizzjonalment użata minn indiġeni biex jimmaniġġaw problemi ta 'defiċjenza ta' essenza tal-kliewi bħal debbilità tal-muskoli u dgħjufija lumbari, u komposti ta 'phenylethanoid glycoside inklużi echinacoside u acteoside huma l-kostitwenti bijoattivi ewlenin f'dan il-ħaxix. Skont it-teorija tat-TCM ta '"kidney-govern-bone", is-sistema tal-għadam hija rregolata mill-essenza tal-kliewi [15], u problemi relatati mal-għadam bħall-osteoporożi jistgħu jiġu rkuprati minn ħxejjex aromatiċi jew komposti li għandhom l-attività li jrawmu l-essenza tal-kliewi. Għalhekk, aħna ipoteżijna li l-frazzjoni totali ta 'phenylethanoid glycoside iżolata minn C. deserticola, għall-inqas parzjalment, kienet ta' benefiċċju fit-trattament tal-osteoporożi. L-esperiment attwali għalhekk tfassal biex jivvalida l-ipoteżi tagħna billi juża mudell ta 'far ovariectomized (OVX); minbarra l-markaturi tar-riassorbiment u l-formazzjoni tal-għadam li jridu jiġu stmati, l-indiċi tal-antiossidazzjoni kif ukoll il-mogħdijiet ta’ sinjalazzjoni PI3K/AKT u NF-κB indotti minn RANKL/RANK/TRAF6- ġew impjegati wkoll biex jinvestigaw il-mekkaniżmi ewlenin tal-bijoattività antiosteoporotika .

2. Materjali u Metodu

2.1. Materjali tal-Pjanti u Preparazzjoni.

Total ta '30 kg zkuk ta'CistanchedeserticolaY.C. Ma nġabru mill-Kontea ta' Yongning f'Settembru tat-2015 bil-koordinati 106.026597 u 38.262816, Provinċja ta' Ningxia, iċ-Ċina. Il-ħaxix ġie identifikat minn Dr Lin Dong (Dipartiment tal-Farmakognożija, Ningxia Medical University), u kampjun korrispondenti (#201509{{40}}1) kien ippreservat fid-Dipartiment tal-Analiżi Farmaċewtika. L-ewwelnett, 30.0 kg ta 'C. deserticola trab ġew estratti bl-użu tal-metodu ta' rifluss b'70 fil-mija etanol bħala solvent; il-proporzjon tal-materjal għas-solvent ġie stabbilit bħala 1: 10, u l-ħin tar-rifluss kien 2 h għal 3 darbiet. Imbagħad, il-filtrati kollha ġew magħquda u kkondensati taħt pressjoni mnaqqsa f'60 grad C. It-tieni, kolonni tar-reżina makroporuża AB-8 intużaw għas-separazzjoni preliminari, u proporzjonijiet differenti ta 'etanol fl-ilma (0 fil-mija, 20 fil-mija, 30 fil-mija, 40 fil-mija, 50 fil-mija, u 60 fil-mija, kull 60 L) ġew impjegati għall-elużjoni. It-tielet, l-40 fil-mija u l-50 fil-mija eluwenti ġew ikkombinati u ppurifikati aktar bl-użu ta' kolonni ripetuti tar-reżina makroporuża AB-8 bl-eluwenti ta' 0 fil-mija, 20 fil-mija, 30 fil-mija, 40 fil-mija, u 50 fil-mija etanol fl-ilma, u kull eluwent kien 12 L. Fl-aħħarnett, il-frazzjoni ta '40 fil-mija ġiet miġbura u kkondensata taħt pressjoni mnaqqsa biex tikseb 150 g frazzjoni ta' phenylethanoid glycoside sediment isfar ċar ta 'C. deserticola (CDP, ir-rendiment kien 0.5 fil-mija). Għal esperimenti in vivo, 0.5 fil-mija tas-solvent CMC-Na kien impjegat biex jinħall CDP; amministrazzjoni orali lill-annimali kienet stabbilita bħala 1 mL/100 g ta 'piż tal-ġisem; għall-analiżi in vitro Western blot, CDP ġie maħlul b'DMSO u mbagħad dilwit b'DMEM biex jinkisbu l-konċentrazzjonijiet finali ta '0.1 mg/mL, 0.01 mg/ml, u 0.001 mg/mL.

2.2. Kimiċi u Solventi.

Estradiol valerate (EV) kien minn Delpharm Lille SAS, Franza; alkaline phosphatase (ALP), għadam gla-protein (BGP), tartrate-resistant acid phosphatase (TRAP), u deoxypyridinoline (DPD) crosslink ELISA kits minn Xinyu Biological Engineering Co. Ltd., Shanghai, Ċina, 201605; malondialdehyde (MDA, 20181221), super oxide dismutase (SOD, 20121218), u settijiet ta 'reaġent glutathione (GSH, 20181221) mill-Istitut ta' Nanjing Jiancheng Biological Engineering, Nanjing, iċ-Ċina; lntact parathormone (l-PTH, NEWASHE7UZ), calcitonin (2L9ISN7AIU), u riċettur alfa relatat mal-estroġenu (ERR , Y3AY8QEWB3) crosslink ELISA kits minn Elabscience Biotechnology Co. Ltd., Wuhan, iċ-Ċina; kit tar-reaġent cathepsin K ELISA minn BioVision, l-Amerika, 1l300141; antikorpi primarji ta' RANKL (GR3193842-5), RANK (AA02113656), TRAF6 (2), c-Fos (AG12059411), NFAT2 (AO11015648), NF-κB p65 (AH04138226), PI3 alpha kinase (AC260226), PI3 alpha (p86015648) , AKT 1 (AF05173234), -actin (17AV0411), u antikorpi sekondarji ta 'mogħoż kontra l-fniek konjugat ma' horseradish peroxidase IgG minn ZSGB-BIO, iċ-Ċina, 136080; totali BCA pro tein assay kit u l-kit kummerċjali għall-iskoperta ta 'oste oclast formazzjoni u serum bovin fetali u Dulbecco's modifikat Eagle's medium (DMEM) minn HyClone, Logan, UT, USA; membrana tal-polyvinylidene flfluoride (PVDF) minn Millipore Life Sciences, Billerica, MA, USA; peniċillina u streptomycin minn Gibco, Rockville, MD, USA. L-aġenti kimiċi l-oħra kollha użati kienu ta 'grad AR.

2.3. Kwantifikazzjoni HPLC ta' Cistanche Deserticola P.

Ġie użat strument Agilent 1220 HPLC biex jidentifika u jikkwantifika l-kompożizzjoni tas-CDP. Il-kundizzjonijiet tal-kromatografija kienu kif ġej: kolonna C18 (TSK-GEL, 4 6 I d × 250 mm, 5 μm); l-elużjoni tal-gradjent kien fiha solventi A (aċetonitrile) u B (ilma li fih 0.5 fil-mija aċidu aċetiku) (0-10 min: 17-20 fil-mija A; 10-30 min: 20-25 fil-mija A; u 30-40 min: 25-30 fil-mija A); il-wavelength ta 'skoperta kien 333 nm; temperatura ambjentali; fluss ir-rata kienet 1.0 mL/min; volum ta 'injezzjoni tal-kampjun kien 5 μL. Tmien komposti PhG, jiġifieri, cistanoside F, echinacoside, 6′-acetylacteoside, cistanoside C, cistanoside A, acteoside, 2′-acetylacteoside, u isoacteoside, ġew identifikati; bl-użu tas-sustanzi ta 'referenza korrispondenti u metodu standard estern, il-kontenut tat-8 PhGs ta' hawn fuq ġew ikkwantifikati b'analiżi HPLC (Figura 1).

2.4. Protokoll Sperimentali dwar l-Annimali.

Total ta '60 firien adulti nisa Sprague-Dawley ta' 3 xhur kienu maħsuba miċ-ċentru ta 'ttestjar fuq l-annimali ta' Ningxia Medical University, bil-piżijiet inizjali medji tal-ġisem ta 'madwar 234 ± 25 g. Il-firien kienu miżmuma f'ambjent standard ħieles mill-patoġeni biex jakklimataw għal ġimgħa. Imbagħad, il-firien kollha ġew anestetizzati (idrat tal-kloral, 100 mg/kg, ip) biss jew sham ovariectomized (SHAM), jew żewġ ovarji tneħħew it-tnejn u mbagħad qasmu b'mod każwali f'5 sottogruppi: ittrattati oralment b'vettura (0.5 fil-mija CMC- Na) ġie stabbilit bħala l-grupp mudell (OVX), estradiol valerate (1 mg / kg / jum) bħala l-grupp pożittiv (EV), u 60, 120, u 240 mg / kg / jum ta 'CDP bħala baxx (CDPL), gruppi ta' dożaġġ moderat (CDPM), u għoli (CDPH), rispettivament. Il-firien kollha ngħataw mill-ħalq kuljum u damu għal 3 xhur bid-dożaġġ aġġustat kull ġimagħtejn li tiddependi fuq il-bidla tal-piżijiet tal-ġisem kollu. Fl-aħħar jum tal-esperiment tal-annimali, 24-siegħa awrina nkisbet bl-użu ta' gaġeġ metaboliċi; serum inġabar mill-arterja femorali tal-firien anestetizzati; il-femora tal-lemin, il-qasba tas-sieq, u l-organi kollha ġew dissected u maħżuna fi -80 grad Ċ għal aktar analiżi. L-esperimenti fuq l-annimali li għamilna ġew approvati mill-Kumitat Istituzzjonali għall-Kura u l-Użu tal-Annimali tal-Università Medika ta 'Ningxia.

2.5. Determinazzjoni tad-densità minerali tal-għadam u Analiżi Mikro-CT.

L-ewwelnett, intużat magna tal-assorbiment tar-raġġi X b'enerġija doppja (Lunar, USA) biex tiġi stmata d-densità minerali totali tal-għadam tal-wirk tal-lemin ta 'kull far; it-tieni nett, l-istess wirk intuża biex tiġi stmata l-immaġni 3D tal-mikroarkitettura tal-għadam trabekulari billi uża apparat tal-iskaner mikro-CT (GE, l-Amerika). Ir-riżoluzzjoni iżotropika ġiet stabbilita bħala 14 μm biex tinkiseb immaġini 3D ideali; ir-reġjun ta 'interess (ROI) intgħażel billi ġew stabbiliti l-istess koordinati fil-pjanċa tat-tkabbir tal-wirk ta' kull kampjun; u l-parametri morfometriċi tal-għadam inklużi separazzjoni trabekulari (Tb. Sp), numru trabekulari (Tb. N), ħxuna trabekulari (Tb. Th), kontenut minerali tal-għadam (BMC), densità minerali tat-tessut (TMD), u kontenut minerali tat-tessut (TMC). ) inkisbu bl-analiżi tar-ROI.

2.6. Assaġġ Bijokimiku tas-Serum u l-Awrina.

L-attivitajiet tas-serum cathepsin K, TRAP, SOD, u GSH, kif ukoll il-kontenut tas-serum PTH, calcitonin, ERR , MDA, BGP, u awrina DPD, ġew determinati bl-użu ta 'kits ta' reaġent korrispondenti skond l-istruzzjoni tal-manifattur, u l- livell ta 'fosfatażi alkalina (ALP) u l-kontenut tas-serum u l-awrina kalċju (Ca) u fosfru (P) ġew stmati bl-impjegar ta' magna awtomatika (Ciba-Corning 550 Diagnostics Corp., Oberlin, OH, USA).

2.7. Analiżi Western Blot.

L-osteoklasti ġew indotti bl-użu ta 'ċelluli RAW 264.7 miżjuda b'fattur li jistimula l-kolonji tal-makrofagi (MCSF) u RANKL. Fil-qosor, 1 × 107 ċelluli RAW 264.7 ġew ikkultivati ​​fi 6-platt ta' bir fil-preżenza ta' 30 ng/mL ta' MCSF u 25 ng/mL ta' RANKL. Wara 6 ijiem ta 'induzzjoni, iċ-ċelluli osteoclast immaturati ġew identifikati bl-użu tal-metodu mtebba' TRAP mal-kit korrispondenti, imbagħad ittrattati b'CDP (0.1, 0.01, u 0.001 mg/mL) , rispettivament) għal 24 siegħa; imbagħad, iċ-ċelloli ġew lysed b'liżi buffer li kien fih 0.5 mmol phenylmethylsulfonyl fluoride, protease, u inibituri tal-phosphatase. Il-lisat imbagħad ġie separat bl-użu ta' 10 fil-mija SDS-PAGE u trasferit għal membrana PVDF, li ġiet ittestjata b'AKT1, NF-κB-p65, RANKL, PI3K-p85, RANK, NFAT2, TRAF6, c-Fos, u -actin. (1: 400) wara li jimblokka b'5 fil-mija ħalib bla xaħam għal 2 sigħat. L-istess membrani ġew imqaxxar u sondati mill-ġdid bid-9 antikorpi korrispondenti ta 'hawn fuq, rispettivament, imbagħad ġew skoperti mis-softwer Image Lab fl-aħħar. L-esperimenti ġew ripetuti tliet darbiet.

2.8. Analiżi Statistika.

Id-dejta kollha miksuba minn esperimenti in vivo u in vitro, deskritta bħala l-medja ± SD, ġiet analizzata bl-użu ta' ANOVA one-way segwit mit-test ta' Dunnett (softwer SPSS 22.0, SPSS, USA); p < 0="" 05="" kien="" statistikament="">

Riżultati

3.1. Kompożizzjoni Kimika ta' Cistanche Deserticola P.

Bl-użu tal-metodu HPLC, tmienjaphenylethanoid glycosidekomposti nstabu f'din il-frazzjoni, kif turi l-Figura 1. Bl-użu ta' referenzi standard u metodu standard estern, il-komposti u l-kontenut tagħhom ġew identifikati u kkwantifikati kif ġej: (1) acteoside F (3.6 fil-mija), (2) echinacoside (8.8 fil-mija), (3) cistanoside A (5.{ {9}} fil-mija), (4) acteoside (13.3 fil-mija), (5) isoacteoside (3.3 fil-mija), (6) acteoside C (3.6 fil-mija), (7) 2′-acetylatteoside (9.9 fil-mija), u (8) ) 6′-acetylatteoside (3.2 fil-mija). Il-kontenut totali ta 'dawn it-tmien komponenti kienu kkwantifikati bħala 50.7 fil-mija.

3.2. Effetti ta 'Cistanche Deserticola P fuq id-densità minerali tal-għadam u l-mikroarkitettura ta' Trabecula.

Id-densità minerali tal-għadam totali tal-firien f'sottogruppi differenti tidher fil-Figura 2. Xejra ta' tnaqqis fil-kontenut tad-densità minerali tal-għadam kienet osservata fil-firien tal-grupp tal-mudell OVX, li naqsu bi kważi 12.0 fil-mija wara 12-il ġimgħa tal-operazzjoni meta mqabbla mal-firien tal-grupp SHAM (p <0 001).="" il-firien="" ittrattati="" b'cdp="" kollha="" wrew="" żieda="" sinifikanti="" fid-densità="" minerali="" tal-għadam="" bi="" 11.2="" fil-mija,="" 12.0="" fil-mija,="" u="" 10.7="" fil-mija="" (p=""><0 01),="" rispettivament,="" meta="" mqabbla="" mal-firien="" tal-mudell="" ovx="" grupp.="" barra="" minn="" hekk,="" konsistenti="" mad-dejta="" tad-densità="" minerali="" totali="" tal-għadam,="" ir-rikostruzzjoni="" mikro-ct="" kif="" ukoll="" id-determinazzjoni="" istomorfometrika="" tal-wirk="" urew="" li="" l-firien="" fil-grupp="" ovx="" wrew="" deterjorazzjoni="" ovvja="" fl-arkitettura="" trabekulari="" evidenzjata="" bin-numru="" u="" l-erja="" ta’="" trabekula="" li="" naqsu="" notevolment="" ukoll="" kif="" tb="" żdied="" b'mod="" notevoli.="" sp="" meta="" mqabbla="" mal-firien="" tal-grupp="" sham.="" it-trattament="" b'cdp="" ipprevjeni="" d-deterjorazzjoni="" indotta="" mill-ovx="" fl-arkitettura="" trabekulari;="" kif="" turi="" l-figura="" 3,="" il-bmc,="" tmc,="" u="" tb.="" il-valuri="" n="" żdiedu="" b'mod="" sinifikanti="" u="" l-erja="" ta="" 'tb.="" sp="" naqas="" notevolment,="" filwaqt="" li="" l-valuri="" ta="" 'tmd="" u="" tb.="" th="" dehru="" mhux="" affettwati="" b'mod="" sinifikanti="" mill-operazzjoni="" ovx="" u="" l-intervent="" cdp="">

3.3. Effetti ta 'Cistanche Deserticola P fuq Parametri Bijokimiċi ta' l-Awrina u Serum.

Kif turi l-Figura 4, ġew skoperti xejriet ta’ tnaqqis sinifikanti tal-livell urinarju ta’ P u l-kontenut tas-serum ta’ calcitonin fil-firien tal-grupp tal-mudell OVX, li kien kważi 30 fil-mija u 60 fil-mija inqas mill-firien SHAM (p < 0="" 001="" ),="" rispettivament,="" filwaqt="" li="" ma="" ġew="" osservati="" l-ebda="" xejriet="" ovvji="" ta="" 'żieda="" jew="" tnaqqis="" fil-livelli="" urinarji="" ta'="" ca="" u="" serum="" ca="" kif="" ukoll="" serum="" p="" u="" serum="" pth="" bejn="" il-gruppi="" ovx="" u="" sham.="" trattament="" b'cdp="" ipprevjeni="" b'mod="" sinifikanti="" t-telf="" tas-serum="" p="" u="" ca="" fil-firien="" ovx,="" evidenzjat="" mill-livelli="" tas-serum="" p="" u="" ca="" notevolment="" regolati="" 'l="" fuq="" (p=""><0 05)="" meta="" mqabbla="" mal-firien="" tal-grupp="" mudell="" ovx.="" barra="" minn="" hekk,="" ġew="" osservati="" xejriet="" miżjuda="" iżda="" mhux="" statistikament="" sinifikanti="" ta'="" calcitonin="" kemm="" fil-gruppi="" ta'="" dożaġġ="" baxx="" kif="" ukoll="" għoli="" ta'="" cdp="" meta="" mqabbla="" mal-grupp="" mudell="">

3.4. Effetti ta 'Cistanche Deserticola P fuq il-Formazzjoni ta' l-għadam u Markers ta 'Riassorbiment ta' l-għadam.

L-effetti ta 'benefiċċju ta' CDP fuq l-indiċi tal-formazzjoni ta 'l-għadam, kif ukoll influwenzi ta' inibizzjoni fuq markaturi ta 'assorbiment mill-ġdid ta' l-għadam, ġew deskritti fil-Figura 5. bidliet sinifikanti osservati fil-gruppi kollha kkurati, filwaqt li titjib statistikament sinifikanti ta' ALP fis-serum inkiseb kemm f'dożi baxxi (60 mg/kg) kif ukoll moderati (12{0 mg/kg) ta' gruppi ta' intervent CDP meta meta mqabbla mal-firien tal-grupp SHAM (p < 0="" 01).="" rigward="" l-indiċi="" ta’="" assorbiment="" mill-ġdid="" tal-għadam,="" il-livelli="" ta’="" serum="" cathepsin="" k="" u="" dpd,="" kif="" ukoll="" trap="" fil-firien="" tal-grupp="" tal-mudell="" ovx,="" tjiebu="" b’mod="" sinifikanti="" b’madwar="" 75.0="" fil-mija,="" 41.4="" fil-mija="" u="" 21.0="" fil-mija,="" rispettivament,="" meta="" mqabbla="" mal-firien="" sham="" ,="" u="" meta="" ttrattati="" b'cdp,="" speċjalment="" id-dożaġġ="" baxx="" ta="" '60="" mg/kg,="" il-proprjetajiet="" ta'="" cathepsin="" k="" u="" dpd="" kif="" ukoll="" trap="" fil-grupp="" tal-mudell="" ovx="" kienu="" notevolment="" inibiti="" minn="" 67.3="" fil-mija,="" 41.4="" fil-mija="" u="" 25.9="" fil-mija,="" rispettivament,="" kif="" meta="" mqabbla="" mal-firien="" fil-grupp="" tal-mudell="">

3.5. Effetti ta 'Cistanche Deserticola P fuq il-Vaġina u l-Utru kif ukoll il-Piżijiet tal-Korp Sħiħ.

Differenzi mhux sinifikanti fil-piżijiet inizjali tal-ġisem kollu tal-firien ġew osservati qabel it-trattament f'sitt gruppi (Figura 6). Madankollu, l-operazzjoni ovariectomized wasslet għal żieda sinifikanti fil-piż finali tal-ġisem tal-firien fil-grupp tal-mudell OVX li hija kważi 36.0 fil-mija, filwaqt li l-piżijiet imxarrbin tal-utru u tal-vaġina naqsu drastikament bi kważi 9{{4 }}.0 fil-mija u 60.0 fil-mija, rispettivament, meta mqabbla mal-firien SHAM (p < 0="" 001).="" għalkemm="" il-kontenut="" ta="" 'err="" ma="" wera="" l-ebda="" differenza="" sinifikanti="" bejn="" il-gruppi="" ovx="" u="" sham,="" il-gruppi="" ta'="" trattament="" kollha="" inklużi="" cdp="" u="" ev="" żiedu="" b'mod="" sinifikanti="" l-livell="" ta="" 'err.="" barra="" minn="" hekk,="" meta="" ttrattat="" b'ev,="" il-piżijiet="" tal-ġisem="" kollu="" ta'="" hawn="" fuq="" kisbu,="" kif="" ukoll="" it-telf="" tal-piżijiet="" tal-vaġina="" u="" tal-utru="" tal-firien="" ovx,="" ġew="" parzjalment="" maqluba="" (p=""><0 001)="" ​​iżda="" mhux="" affettwati="" mill-intervent="">

3.6. Effetti ta 'Cistanche DeserticolaP fuq Livelli ta' Serum MDA, SOD, u GSH.

Ma kien hemm l-ebda differenza statistikament sinifikanti fil-proprjetajiet tas-serum SOD u GSH bejn il-gruppi tal-mudell SHAM u OVX; kif tiddeskrivi l-Figura 7, tista 'tiġi osservata xejra dejjem tiżdied fil-GSH bejn iż-żewġ gruppi ta' hawn fuq. Barra minn hekk, il-livell tas-serum MDA kien regolat b'mod qawwi bi kważi 50 fil-mija fil-firien tal-grupp tal-mudell OVX meta mqabbel mal-firien SHAM. L-attività ta 'SOD ma kinitx influwenzata mit-trattament CDP, filwaqt li l-proprjetà ta' GSH tjiebet b'mod sinifikanti bl-intervent CDP, u CDP naqqas notevolment il-livell ta 'MDA bi 33.9 fil-mija u 42.4 fil-mija fid-dożi ta' 60 u 240 mg / kg, rispettivament ( p < 0="">

3.7. Effetti ta 'Cistanche deserticola P fuq Livelli ta' Espressjoni tal-Proteini.

Id-dejta tagħna, murija fil-Figura 8, issuġġeriet li t-trattament CDP naqqas b'mod sinifikanti l-livelli ta 'proteini ta' TRAF6, RANK, u RANKL meta mqabbla mal-kontroll. Il-mogħdijiet tas-sinjali downstream inklużi NF-κB ġew mrażżna, u PI3K/AKT ġie stimulat minn intervent CDP, evidenzjat mill-espressjoni ta 'regolazzjoni 'l isfel ta' NF-κB-p65, filwaqt li PI3K-p85 u AKT1 ġew regolati 'l fuq. Konsegwentement, l-espressjoni ta 'NFAT2 naqset b'mod sinifikanti, u c-Fos żdied wara trattament b'CDP f'konċentrazzjoni ta' 0.001-0.1 mg/mL. Mekkaniżmu ssuġġerit huwa deskritt fil-Figura 9, fejn CDP irregola l-livelli ta 'RANKL u RANK, li wassal għat-tnaqqis tal-kwantitajiet li jorbtu ta' dan il-ligand mar-riċettur tiegħu, u l-konnessjoni ta 'RANKL ma' RANK naqset aktar bir-regolazzjoni baxxa ta 'TRAF6, segwit mis-soppressjoni tal-mogħdijiet downstream inkluż il-mogħdija NF-κB billi l-mogħdija tas-sinjali PI3K/AKT ġiet stimulata, li finalment twassal għat-tnaqqis tal-espressjoni NFAT2 u żieda fil-livell c-Fos.

4. Diskussjoni

Phenylethanoid glycosides huma komponenti li jinħallu fl-ilma naturali li jeżistu ħafna fir-renju tal-pjanti mediċinali [11]. S'issa, il-komposti ta 'phenylethanoid glycosides kienu ġibdu aktar u aktar riċerkaturi minħabba r-rwol evidenti tagħhom fl-immaniġġjar ta' diversi mard u anormalitajiet umani [13]. Numri ta 'frazzjonijiet u komposti bijoattivi antiosteoporotiċi, inklużi polyphenol u phenylethanoid glycosides, ġew identifikati u iżolati minn għexieren ta' ħxejjex mediċinali naturali [5, 10, 12, 16, 17]. C. deserticola hija magħrufa sew bħala "ġinseng tad-deżert" li implika l-profil tas-sigurtà ta 'dan it-TCM li jittiekel [18, 19]. Bħala ħaxix toniku ġenerali u ikel tas-saħħa naturali li ilu jintuża f'pajjiżi Asjatiċi, C. deserticola wera funzjoni ta 'benefiċċju għat-titjib tas-saħħa tal-kliewi. Instab li t-TCM, tradizzjonalment użata biex isaħħaħ u jżomm l-essenza tal-kliewi, kien normalment użat biex jikkura l-osteoporożi, kemm in vitro kif ukoll in vivo dejta ppubblikata wriet l-attività antiosteoporotika ta 'C. deserticola [20-23], u kostitwenti phenylethanoid glycoside inklużi echinacoside u acteoside huma l-komponenti bijoattivi ewlenin li jeżistu f'din l-impjant mediċinali li jittiekel; li kollha ssuġġerew li mhux biss l-echinacoside u l-acteoside nfushom iżda wkoll komponenti oħra ta 'phenylethanoid glycoside li jinsabu f'C. deserticola tqiesu bħala responsabbli għall-proprjetà antiosteoporotic ta' dan il-ħaxix. Fl-istudju preżenti tagħna, intużat reżina makroporuża ta 'sigurtà favorevoli biex tiżola u tarrikkixxi l-frazzjoni ta' phenylethanoid glycoside minn C. deserticola, u bl-użu tal-metodu HPLC, tmien komponenti ewlenin ta 'phenylethanoid glycoside, jiġifieri, acteoside F, echinacoside, cistanoside A, acteoside, isoacteoside, acteoside C, 2′-acetylacteoside, u 6′-acetylacteoside, instabu fil-frazzjoni iżolata ta 'phenylethanoid glycoside, u l-kontenuti kienu 3.6 fil-mija, 8.8 fil-mija, 5.0 fil-mija, 13.3 fil-mija, 3.3 fil-mija, 3.9 fil-mija, 3.9 fil-mija, 3.9 fil-mija. u 3.2 fil-mija, rispettivament. Echinacoside, wieħed mill-komposti ta' attività prinċipali rreġistrati f'C. deserticola [14], kien ġie ppruvat li għandu attività antiosteoporotika; madankollu, id-dożaġġ ta '270 mg/kg kien tant għoli li llimitat l-applikazzjoni klinika ulterjuri tiegħu [24]. Fl-esperimenti attwali, il-frazzjoni totali ta 'phenylethanoid glycoside b'dożaġġ aktar baxx ta' 60-240 mg/kg piż tal-ġisem/-jum intużat fuq firien OVX, u l-kontenuti ta 'kostitwenti identifikati kienu kważi 50 fil-mija pur f'din il-frazzjoni bl-użu il-metodu HPLC.

Kien magħruf sew li OVX jista 'jikkawża l-osteoporożi, u far OVX kien maħsub bħala mudell klassiku u adattat biex jissimula l-osteoporożi tal-bniedem wara l-menopawża. Fl-istess ħin, tnaqqis sinifikanti fid-densità minerali tal-għadam, mikroarkitettura tal-għadam trabekulari, piżijiet imxarrba tal-utru u tal-vaġina, u livell tal-estroġenu, kif ukoll it-titjib ovvju fir-risorbiment tal-għadam u l-piż tal-ġisem, ġew osservati wara kirurġija tal-ovarjiktomija, li minnhom kienu f' parti minħabba telf ta' estroġenu [25]. Id-dejta tagħna, s'issa, wriet biċ-ċar li OVX tabilħaqq wassal għall-osteoporożi ta' wara l-menopawża u dejjem hija akkumpanjata mit-tnaqqis qawwi fil-kwalità tal-għadam, il-mikroarkitettura tal-għadam, u l-piżijiet imxarrbin tal-utru u tal-vaġina. Peress li l-EV huwa aġent ġenerali tas-sostituzzjoni tal-ormoni li ntuża fil-prattika klinika, intuża bħala kontroll pożittiv fl-esperiment in vivo tagħna, u l-piż tal-ġisem miksub u l-piżijiet tal-utru tal-atrofija, kif ukoll densità minerali tal-għadam deterjorata u mikroarkitettura tal-għadam trabekulari , kienu mistennija maqluba permezz ta 'supplimentazzjoni EV. Differenti mill-kontroll pożittiv, it-tnaqqis tal-piż tal-vaġina u tal-utru, kif ukoll il-piż tal-ġisem kollu miksub tal-firien fil-grupp tal-mudell OVX, ma ġewx affettwati mit-trattament CDP, li implika li CDP jista 'jtejjeb il-formazzjoni tal-għadam mingħajr ma jinduċi l-effetti sekondarji. fuq il-ġisem u tessuti organiċi utru. Għalkemm il-livelli ta 'ERR kienu rregolati b'mod sinifikanti minn trattament CDP, kien bħal effett fitoestroġenu li ma ġew osservati l-ebda effetti sekondarji fuq it-tessuti organiċi tal-utru u tal-vaġina. Barra minn hekk, it-trattament tas-CDP saħħet b'mod sinifikanti l-kwalità tal-għadam fil-firien OVX li kienu ġew iddeterjorati minn kirurġija tal-ovarektomija.

Barra minn hekk, il-livelli ta 'P u Ca fl-awrina u fis-serum ta' firien OVX intużaw ukoll biex jirriflettu l-effett antiosteoporotic, u l-konċentrazzjonijiet ta 'Ca u P inorganiku kienu ġeneralment dipendenti fuq il-livelli ta' calcitonin u PTH [26]. Fl-istudju preżenti, għalkemm ma nkisbu l-ebda xejriet sinifikanti ta' tnaqqis jew żieda fil-livell ta' eskrezzjoni fl-awrina ta' Ca, serum P, serum Ca, u PTH fil-firien tal-grupp mudell OVX, il-livelli urinarji sinifikanti ta 'P u calcitonin (p < {="" {1}})="" ġew="" osservati.="" b'mod="" konsistenti="" mad-dejta="" ppubblikata="" li="" d-defiċjenza="" tal-estroġenu="" kkawżata="" minn="" kirurġija="" tal-ovarektomija="" dejjem="" wasslet="" għal="" livell="" imnaqqas="" ta="" 'kalċitonin="" fid-demm,="" dan="" il-kalċitonin="" fis-serum="" imnaqqas="" finalment="" wassal="" għal="" livell="" ogħla="" ta'="" pth,="" fejn="" ca="" kien="" maħsub="" bħala="" r-regolatur="" ewlieni="" tas-sekrezzjoni="" ta="" 'pth.="" minħabba="" li="" l-konċentrazzjoni="" ta="" 'pth="" ma="" wriet="" l-ebda="" differenza="" sinifikanti="" bejn="" il-gruppi="" ovx="" u="" sham="" fl-istudju="" preżenti,="" il-livell="" ta'="" ca="" kemm="" fis-serum="" kif="" ukoll="" fl-awrina="" ma="" wera="" wkoll="" l-ebda="" tibdil="" ovvju="" bejn="" iż-żewġ="" gruppi="" ta="" 'hawn="" fuq.="" madankollu,="" inkisbet="" tendenza="" ta="" 'tnaqqis="" sinifikanti="" fil-livell="" ta'="" calcitonin="" bejn="" il-gruppi="" ovx="" u="" sham,="" u="" konsegwentement,="" il-kontenut="" ta="" 'p="" fl-awrina="" ta'="" ovx="" naqas="" b'mod="" qawwi.="" aħna="" nemmnu="" li="" d-dejta="" ta="" 'hawn="" fuq="" tista'="" tispjega="" l-fenomenu="" kontradittorju="" ta="" 'għaliex="" l-eliminazzjoni="" urinarja="" tal-livell="" ta'="" ca="" fil-firien="" ovx="" ma="" wriet="" l-ebda="" bidla="" ovvja="" meta="" mqabbla="" mal-firien="" sham,="" u="" dan="" il-fenomenu="" jista="" 'jkun="" ukoll="" relatat="" mar-rata="" miżjuda="" ta'="" turnover="" tal-għadam="" [27]="" .="" wara="" t-trattament="" b'cdp,="" il-livelli="" ta="" 'p="" u="" ca="" fis-serum="" kienu="" notevolment="" regolati="" 'l="" fuq,="" u="" l-kontenut="" ta'="" p="" fl-awrina="" kien="" regolat="" 'l="" isfel="" fil-firien="" ovx,="" li="" jirrifletti="" li="" cdp="" mhux="" biss="" jista'="" jipprevjeni="" l-eskrezzjoni="" tal-element="" minerali="" tal-għadam="" iżda="" wkoll="" itejjeb="" il-kontenut="" tas-serum="" ta="" 'dawk.="" elementi,="" u="" b'hekk="" indirettament="" jrażżnu="" t-telf="">

Barra minn hekk, il-markaturi tal-formazzjoni u l-assorbiment mill-ġdid tal-għadam, kif ukoll l-enzimi antiossidanti inklużi SOD u GSH, ġew impjegati wkoll biex jispjegaw il-mekkaniżmi antiosteoporotiċi sottostanti tas-CDP. Simili għad-dejta ppubblikata, il-livell ta 'ALP fil-firien tal-grupp tal-mudell OVX wera xejra ta' żieda mhux statistikament sinifikanti li tindika rata aċċellerata ta 'tibdil tal-għadam fl-osteoporożi ta' wara l-menopawża [10]. Madankollu, wara t-trattament bis-CDP (60, 120, u 240 mg/kg/jum), il-proprjetà ta 'ALP tjiebet b'mod sinifikanti. Kien magħruf sew li l-OVX ikkawża tnaqqis qawwi fil-livelli ta’ estroġenu li normalment iwassal għal assorbiment mill-ġdid tal-għadam u stress ossidattiv [28], evidenzjat mill-livelli ta’ TRAP, cathepsin K, u DPD kif ukoll MDA notevolment upregolati fil-firien tal- Grupp mudell OVX. Madankollu, dawk id-deterjorazzjonijiet ġew parzjalment imtejba bl-intervent tas-CDP. Barra minn hekk, it-trattament tal-firien OVX b'CDP (60 u 240 mg/kg) wera żieda sinifikanti fl-attività ta' GSH (p < 0="" 05).="" ir-riżultati="" ta="" 'hawn="" fuq="" implikaw="" li="" cdp="" wera="" effett="" terapewtiku="" fuq="" l-osteoporożi="" indotta="" minn="" ovx="" u="" dawn="" l-effetti="" kienu="" kemm="" billi="" jtejbu="" l-formazzjoni="" tal-għadam="" u="" jrażżnu="" r-riassorbiment="" tal-għadam="" kif="" ukoll="" itejbu="" s-sistema="" antiossidant="">

L-attivazzjoni ta 'RANK mil-ligand tiegħu RANKL stimulat l-espressjonijiet ta' NFAT2 u c-Fos permezz ta 'sinjalazzjoni PI3K / AKT u NF-κB [29]. NF-κB ġie ppruvat essenzjali għall-osteoklastoġenesi peress li t-tfixkil ta 'NF-κB jista' jwassal għal differenzjazzjoni osteoclast indebolita b'fenotip osteoporotiku, u NF-κB irregolat 'l fuq c-Fos u espressjonijiet NFAT2 downregolati matul osteoclastogenesis indotta minn RANKL/RANK/TRAF. Biex tiġi stmata l-influwenza ta 'benefiċċju ta' CDP fuq l-osteoklastoġenesi medjata minn NFAT2 u c-Fos, ġew analizzati l-livelli ta 'espressjoni ta' RANKL u RANK. B'mod mistenni, CDP inibixxi b'mod sinifikanti NFAT2 u stimula l-livelli ta 'c-Fos billi rregola l-espressjonijiet ta' RANKL u RANK. Sadanittant, RANK innifsu ma kellux proprjetà intrinsika tal-kinase sakemm ma ngħaqadx minn TRAF6 biex tiskatta s-sinjalar downstream [3]. CDP irregola wkoll l-espressjoni ta 'TRAF6, li wassal biex il-kwantitajiet vinkolanti ta' RANKL u RANK jitnaqqsu b'mod sinifikanti. Mekkaniżmu antiosteoporotic ipotetizzat ta’ CDP fuq firien OVX kopra l-mogħdijiet ta’ sinjalazzjoni ta’ hawn fuq, u r-regolaturi ġew deskritti fil-Figura 9. B’mod konċiż, CDP naqas il-livelli ta’ TRAF6, RANKL, u RANK, u b’hekk irażżan il-mogħdijiet ta’ sinjalazzjoni downstream inklużi PI3K/AKT u NF-κB li huma attivati ​​minn RANKL/RANK, u finalment naqqsu l-espressjonijiet u l-attivitajiet tal-proteini osteoklastoġeniċi ewlenin NFAT2 u c-Fos. Għalhekk, ħjiel multipli ta 'dejta implikaw l-effett ta' benefiċċju ta 'CDP fuq il-metaboliżmu tal-għadam tal-firien OVX prinċipalment permezz ta' mogħdijiet PI3K/AKT u NF-κB medjati minn RANKL/RANK/TRAF6-.

5. Konklużjoni

Fil-qosor, il-glikożidi feniletanojdi totali, iżolati minn C. deserticola, urew effetti ta 'benefiċċju sinifikanti fuq l-osteoporożi ta' wara l-menopawża tal-firien OVX, u l-potenzjal terapewtiku fit-trażżin tat-telf tal-għadam kien prinċipalment permezz tal-istimulazzjoni tal-formazzjoni tal-għadam u l-inibizzjoni tar-riassorbiment tal-għadam kif ukoll it-titjib tal-antiossidant tal-għadam. sistema; il-mekkaniżmi jistgħu jkunu relatati ma 'RANKL/RANK/TRAF6-attivazzjoni NF-κB indotta u inattivazzjoni PI3K/AKT kif ukoll stimulazzjoni c-Fos u soppressjoni NFAT2, u finalment, id-divrenzjar tal-osteoclast ġie inibit.

Abbrevjazzjonijiet

AKT: Protein kinase B

ALP: Alkaline phosphatase

BGP: Proteina GLA tal-għadam

BMC: Kontenut minerali fl-għadam

CDP: Phenylethanoid glycoside frazzjoni ta 'C. deserticola

CK: Cathepsin K

CT: Calcitonin

DPD: Deoxypyridinoline

ERR: Riċettur alfa relatat mal-estroġenu

EV: Estradiol valerate

GSH: Glutathione l-PTH: parathormone intatt

MCSF: Fattur li jistimula l-kolonji tal-makrofagi

MDA: Malondialdehyde

NFAT2: Fattur nukleari taċ-ċelluli T attivati ​​c2

NF-κB: Fattur nukleari-kappa B

OPG: Osteoprotegerin

OVX: Ovariectomized

PhGs: Phenylethanoid glycosides

PI3K: Phosphoinositide 3-kinase

RANK: Attivatur tar-riċettur tal-fattur nukleari-kappa B

RANKL: Attivatur tar-riċettur tal-fattur nukleari-kappa

B ligand ROI: Reġjun ta' interess

SOD: Superoxide dismutase

Tb. N: Numru Trabecular

Tb.Sp: Separazzjoni Trabecular

Tb.Th: Ħxuna Trabecular

TCM: Mediċina tradizzjonali Ċiniża

TMC: Kontenut minerali tat-tessut

TMD: Densità minerali tat-tessut

TNF: Fattur tan-nekrożi tat-tumur

TRAF6: Fattur 6 assoċjat mar-riċettur tal-fattur tan-nekrożi tat-tumur

NASSA: Fosfatażi tal-aċidu reżistenti għat-tartrat.

Disponibbiltà tad-Data

Id-dejta użata biex tappoġġja s-sejbiet ta 'dan l-istudju hija disponibbli mill-awtur korrispondenti fuq talba.

Kunflitti ta' Interess

L-awturi ma kellhom l-ebda kunflitt ta' interess.

Kontribuzzjonijiet ta' l-Awturi

XM iddisinja u ssorvelja l-esperimenti; SD u LY wettqu ħafna mill-esperimenti u abbozzaw il-manuskritt; BZ u JL wettqu l-analiżi Western blot u pparteċipaw f'esperimenti fuq l-annimali; YD analizzat id-data; QT u PY irrevedew il-manuskritt. L-awturi kollha rrevedew il-manuskritt. Lingling Yang u Shuqin Ding ikkontribwew bl-istess mod għall-manuskritt.

Rikonoxximenti

Dan ix-xogħol kien appoġġjat minn għotjiet mill-Fondazzjoni tat-Teknoloġija tax-Xjenza ta 'Edukazzjoni Ogħla ta' Ningxia (NGY2017090), il-Fondazzjoni Nazzjonali tax-Xjenza Naturali taċ-Ċina (Nru. 81560684), il-Programm Ewlenin ta 'Riċerka u Żvilupp ta' Ningxia (2018BHF2001), ir-Riċerka Ewlenija ta 'Ningxia u Programm ta 'Invenzjoni ta' Kooperazzjoni fix-Xjenza u t-Teknoloġija tal-Lvant u l-Punent (Nri 2017BY084 u 2017BY079), u l-Fondazzjoni tad-Dawl tal-Punent tal-Akkademja tax-Xjenzi Ċiniża-Xjentisti Żgħażagħ tal-Punent 2017.

Referenzi

[1] LJ Melton III, EA Chrischilles, C. Cooper, AW Lane, u BL Riggs, "Perspettiva. Kemm-il nisa għandhom l-osteoporożi?," Ġurnal ta 'l-għadam u r-riċerka minerali, vol. 7, Nru. 9, pp 1005–1010, 1992.

[2] S. Schnell, SM Friedman, DA Mendelson, KW Bingham, u SL Kates, "The 1-year mortality of patients treated in a hip fracture program for anzjani," Geriatric Orthopaedic Surgery & Rehabilitation, vol. 1, Nru. 1, pp. 6–14, 2010.

[3] EM Tan, L. Li, IR Indran, N. Chew, u EL Yong, "TRAF6 jimmedja soppressjoni ta 'osteoklastoġenesi u prevenzjoni ta' telf ta 'għadam ikkaġunat mill-ovarektomija minn prenylflavonoid ġdid," Journal of Bone and Mineral Research, vol. 32, Nru. 4, pp. 846–860, 2017.

[4] JH Kim u N. Kim, "Regolament ta' NFATc1 fid-differenzjazzjoni tal-osteoklasti," Ġurnal tal-Metaboliżmu tal-Għadam, vol. 21, Nru. 4, pp. 233–241, 2014.

[5] Q. Ye, XQ Ma, CL Hu et al., "Attività antiosteoporotika u kostitwenti ta' Podocarpium podocarpus," Phytomedicine, vol. 22, Nru. 1, pp. 94–102, 2015.

[6] SA Jang, HS Song, JE Kwon, et al., "Protocatechuic acid attenuates trabecular bone loss in ovariectomized mice," Oxidative Medicine and Cellular Longevity, vol. 2018, Artikolu ID 7280342, 11-il paġna, 2018.

[7] AB Abdel-Naim, AA Alghamdi, MM Algandaby, et al., "Rutin iżolat minn Chrozophora tinctoria issaħħaħ il-proliferazzjoni taċ-ċelluli tal-għadam u l-markaturi tal-ossifikazzjoni," Oxidative Medicine and Cellular Longevity, vol. 2018, Artikolu ID 5106469, 10 paġni, 2018.

[8] J. Wattanathorn, C. Thipkaew, W. Thukham-mee, S. Muchimapura, P. Wannanon, u T. Tong-un, "L-estratt tal-weraq Morindacitrifolia L. jipproteġi kontra l-iskemija ċerebrali u l-osteoporożi f'mudell sperimentali in vivo tal-menopawsa," Mediċina Ossidattiva u Lonġevità Ċellulari, vol. 2018, Artikolu ID 1039364, 13-il paġna, 2018.

[9] S. Sungkamanee, J. Wattanathorn, S. Muchimapura, u W. Thukham-mee, "Effett antiosteoporotiku ta 'estratt kombinat ta' Morus alba u Polygonum odoratum," Mediċina Ossidattiva u Lonġevità Ċellulari, vol. 2014, Artikolu ID 579305, 9 paġni, 2014.

[10] J. Liu, Z. Zhang, Q. Guo, Y. Dong, Q. Zhao, u X. Ma, "Syringin jipprevjeni t-telf tal-għadam fil-ġrieden ovariectomized permezz ta' inibizzjoni medjata minn TRAF6 ta 'NF-κB u stimulazzjoni ta' PI3K/AKT ," Phytomedicine, vol. 42, pp. 43–50, 2018.

[11] CW Lu, SK Huang, TY Lin, u SJ Wang, "Echinacoside, an active costent of Herba Cistanche, suppresses epileptiform activity in hippocampal CA3 pyramidal newrons," The Korean Journal of Physiology & Pharmacology, vol. 22, Nru. 3, pp 249–255, 2018.

[12] X. Xu, Z. Zhang, W. Wang, H. Yao, u X. Ma, "Effett terapewtiku ta 'cistanoside A fuq il-metaboliżmu tal-għadam tal-ġrieden ovariectomized," Molecules, vol. 22, Nru. 2, p. 197, 2017.

[13] K. Alipieva, L. Korkina, IE Orhan, u MI Georgiev, "Verbascoside–a review of its okkorrenza, (bijo)sinteżi u sinifikat farmakoloġiku," Biotechnology Advances, vol. 32, Nru. 6, pp 1065–1076, 2014.

[14] Kumitat Editorjali tal-Farmakopea Ċiniża, Farmakopea tar-Repubblika Popolari taċ-Ċina, China Medical Science and Technology Press, Beijing, Ċina, 10 edizzjoni ed, 2015.

[15] H. Zhang, WW Xing, YS Li et al., "Effetti ta 'preparazzjoni veġetali tradizzjonali Ċiniża fuq osteoblasts u osteoclasts," Maturitas, vol. 61, Nru. 4, pp. 334–339, 2008.

[16] X. Ma, J. Liu, L. Yang, B. Zhang, Y. Dong, u Q. Zhao, "Cynomorium songaricum jipprevjeni r-riasorbiment tal-għadam fil-firien ovariectomized permezz ta' soppressjoni medjata minn RANKL/RANK/TRAF6 ta' PI3K/AKT u mogħdijiet NF-κB," Life Sciences, vol. 209, pp. 140–148, 2018.

[17] XQ Ma, T. Han, X. Zhang, et al., "Kaempferitrin jipprevjeni t-telf tal-għadam fil-firien ovariectomized," Phytomedicine, vol. 22, Nru. 13, pp. 1159–1162, 2015.

[18] PL Liao, CH Li, LS Tse, JJ Kang, u YW Cheng, "Valutazzjoni tas-sikurezza tal-prodott tal-ikel tas-saħħa Cistanche tubulosa Memoregain®: test ta' tossiċità ta' ġenotossiċità u 28-ġurnata ripetuta ta' doża," Tossikoloġija tal-Ikel u Kimika , vol. 118, pp. 581– 588, 2018.

[19] CC Wong, HB Li, KW Cheng, u F. Chen, "Stħarriġ sistematiku ta 'attività anti-ossidanti ta' 30 pjanta mediċinali Ċiniża li jużaw l-assaġġ tal-qawwa antiossidant li jnaqqas il-ferriku," Food Chemistry, vol. 97, Nru. 4, pp. 705–711, 2006.

[20] D. Song, Z. Cao, Z. Liu, et al., "Cistanche deserticola polysaccharide attenuates osteoclastogenesis u assorbiment mill-ġdid tal-għadam permezz ta 'inibizzjoni ta' sinjalazzjoni RANKL u produzzjoni ta 'speċi ta' ossiġnu reattiv," Journal of Cellular Physiology, vol. 233, Nru. 12, pp 9674–9684, 2018.

[21] HD Liang, F. Yu, ZH Tong, HQ Zhang, u W. Liang, "Cistanches Herba akweous estratt li jaffettwa BGP u TRAP tas-serum u tal-mudullun Smad1 mRNA, Smad5 mRNA, TGF- 1 mRNA, u TIEG1 Livelli ta' espressjoni tal-mRNA fil-marda tal-osteoporożi," Rapporti tal-Bijoloġija Molekulari, vol. 40, Nru. 2, pp. 757–763, 2013.

[22] TM Li, HC Huang, CM Su et al., "L-estratt ta 'Cistanche deserticola iżid il-formazzjoni tal-għadam fl-osteoblasts," Ġurnal tal-Farmaċija u l-Farmakoloġija, vol. 64, Nru. 6, pp. 897–907, 2012.

[23] H. Liang, F. Yu, Z. Tong, u Z. Huang, "Effect of Cistanches Herba aqueous extract on bone loss in ovariectomized far," International Journal of Molecular Sciences, vol. 12, Nru. 8, pp 5060–5069, 2011.

[24] F. Li, X. Yang, Y. Yang, et al., "Attività antiosteoporotika ta 'echinacoside fil-firien ovariectomized," Phytomedicine, vol. 20, Nru. 6, pp. 549–557, 2013.

[25] H. Nian, MH Ma, SS Nian, u LL Xu, "Attività antiosteoporotika ta' icariin fil-firien ovariectomized," Phytomedicine, vol. 16, Nru. 4, pp. 320–326, 2009.

[26] SR Fahmy, AM Soliman, AA Sayed, u M. Marzouk, "Mekkaniżmu antiosteoporotic possibbli ta 'estratt ta' Cicer arietinum fil-firien ovariectomized," Ġurnal Internazzjonali ta 'Patoloġija Klinika u Sperimentali, vol. 8, Nru. 4, pp 3477– 3490, 2015.

[27] R. Swaminathan, "Biochemical markers of bone turnover," Clinica Chimica Acta, vol. 313, Nru. 1-2, pp. 95–105, 2001.

[28] S. Muthusamy, I. Ramachandran, B. Muthusamy, et al., "Ovariectomy jinduċi stress ossidattiv u tfixkel is-sistema antiossidant tal-għadam fil-firien adulti," Clinica Chimica Acta, vol. 360, Nru. 1-2, pp. 81–86, 2005.

[29] WJ Boyle, WS Simonet, u DL Lacey, "Differenzjazzjoni u attivazzjoni tal-osteoklasti," Nature, vol. 423, Nru. 6937, pp. 337– 342, 2003.