Kostitwenti Monoterpeni Minn Cistanche Tubulosa—Strutturi Kimiċi Ta Kankanosides A—E U Kankanol—

Cistanche tubulosa (SCHRENK) R. WLEJL(Orobanchaceae) hija pjanta parassitika perenni li tikber fuq l-għeruq ta 'SalvadorajewCalotropisspeċi u mqassma fl-Afrika ta’ Fuq, l-Għarabja, u l-pajjiżi Asjatiċi.1) Iz-zkuk ta 'dan l-impjant (Kanka-nikujuyou bil-Ġappuniż) intużaw tradizzjonalment għat-trattament ta' impotenza, sterilità, lumbago, u dgħjufija tal-ġisem.2) Preċedentement, diversi iridojdi, monoterpenojdi,phenylethanoids, u lignans kienu iżolati miċ-Ċiniż u l-PakistanC. tubulosa. 1,3–7) Matul l-istudji serjali tagħna dwar kostitwenti bijoattivi minn mediċini naturali Ċiniżi,8–18) erba 'glikożidi iridojdi ġodda, kankanosides A (1), B (2), C (3), u D (4), iridojde klorinat, kankanol (5), u monoterpene glycoside aċikliku, kankanoside E (6), ġew iżolati mill-estratt metanoliku ta’ din il-mediċina erbali flimkien ma’ 16-il kompost magħruf inkluż 12-il monoterpene (7-18). Dan id-dokument jittratta l-iżolament u l-eluċidazzjoni tal-istruttura ta’ kostitwenti monoterpeni ġodda (1-6). 

CISTANCHE TUBULOSA NATURALI GĦAT-TITJIB TAL-FUNZJONI SESSWALI PHGS75% ECH 30% ACT 12%

L-estratt metanoliku minn zkuk imnixxfa ta 'C. tubulosa (26.8% minn din il-mediċina tal-ħxejjex) kien soġġett għal kromatografija tal-kolonna tas-silika b'fażi normali u fażi inversa u HPLC ripetut biex jagħti kankanosides A (1, 0.{{7} }{{10}}54%), B (2, 0.{030%), C (3, 0.{ {32}}027%), u D (4, {{40}}.0{015%), kankanol (5, {{57} }}.0{034%), u kankanoside E (6, 0.027%) flimkien ma' aċidu mussaenosidic19) (7, 0 .020%), geniposidic acid19) (8, 0.030%), 8-epiloganic acid7) (9, 0.033%), gluroside19) (10, 0.14%), antirrhide20) (11, 0.0079) %), ajugol19) (12, 0.011%), bartsioside19) (13, 0.21%), 6-deoxycatalpol19) (14, 0.11%), argyol21) (15, 0.0030%), cistanin22,23) (16) , 0.0040%), cistachlorin22) (17, 0.0035%), (2E,6Z)-8-bD-glukopiranosilossi-2,6-dimetil-2,6- aċidu ottadienojku24) (18, 0.0028%), Dmannitol25) (4.19%), uridine25) (0.0069%), (3R)-3-idrossi-2- pirrolidinone26,27) (0.0020%), u (3R) )-3-idrossi-1-metil- 2-pirrolidinone27) (0.0059%).

Struttura ta' Kankanoside A (1)

Kankanoside A (1) inkiseb bħala trab amorfu u wera rotazzjoni ottika negattiva ([a]D 25 - 107.4 grad f'MeOH). L-ispettru IR ta '1 wera faxxa ta' assorbiment f'1647 ċm- 1 assenjabbli għall-funzjoni tal-olefini flimkien ma 'meded ta' assorbiment qawwija f'3410 u 1076 ċm- 1 li jissuġġerixxu porzjon ta 'glycoside. Fil-bumbardament ta' atomu mgħaġġel b'jone pożittiv u negattiv (FAB)-MS ta' 1, ġew osservati qċaċet ta' joni kważimolekulari f'm/z 369

(M Na) u 345 (M- H)-, u analiżi FAB-MS b'riżoluzzjoni għolja wriet li l-formula molekulari ta '1 hija C16H26O8. Idroliżi aċiduża ta' 1 b'1.0 M aċidu idrokloriku (HCl) liberat D-glukożju, li ġie identifikat permezz ta' analiżi HPLC bl-użu ta' detector ta' rotazzjoni ottika.8,10-12,15-18) Il- 1 H- (CD3OD, Tabella 1) u 13C-NMR (Tabella 2) spettri ta '1, li ġew assenjati minn diversi esperimenti NMR,28) urew sinjali assenjati għal żewġ metili [d 1.31 (s, 10-H3) , 1.51 (br s, 11-H3)], żewġ metilini [d 1.49, 2.02 (it-tnejn m, 6a- u 6b-H), 1.64, 1.67 (it-tnejn m, 7b- u 7a-H)], żewġ metini [d 2.21 (dd, J= 2.7, 9.5 Hz, 9-H), 2.71 (m, 5-H)], u grupp a,b-aċetal mhux saturat [d 5.33 (d, J= 2.7 Hz, 1-H), 5.95 (br s, 3-H)] flimkien ma' frazzjoni b-glukopiranosil [d 4.62 (d, J= 7.9 Hz, 1' -H)]. Kif muri fil-Fig. 1, l-esperiment ta 'l-ispettroskopija ta' korrelazzjoni 1 H-1 H (1 H-1 H COSY) fuq 1 indika l-preżenza ta 'strutturi parzjali miktuba b'linji grassi. Fl-esperiment ta' korrelazzjonijiet ta' bonds multipli eteronukleari (HMBC) fuq 1, ġew osservati korrelazzjonijiet fuq medda twila bejn il-protoni u l-karbonju li ġejjin (3-H, 1' -H u 1-C; {{88} }H3 u 3-C 3-H, 5-H, 6-H2, 9-H, 11-H3 u 4- C; 11-H3 u 5-C 10-H3 u 7-H, 7-H2, 9-H; , 10-H3 u 8-C 10-H3 u 9-C 7-H2 u 10-C) kif muri fil-Fig. L-idroliżi enżimatika ta' 1 b'b-glucosidase tat aglycon, kankagenin a (1a) kif muri f'Fig. 3. Tqabbil tal-ispettru 13CNMR għal 1 ma' dawk għal 1a wera ċ-ċaqliq tal-glycosylation madwar il-pożizzjoni 1- f'1 [ 1: d C 94.1 (1-C), 134.6 (3-C), 53.3 (9-C); 1a: d C 92.9 (1-Ċ), 135.3 (3-Ċ), 54.7 (9-Ċ)]. Għalhekk, il-konnettività tal-parti bD-glucopyranosyl f'1 ġiet iċċarata wkoll li tkun fil-{151}}pożizzjoni ta' 1a. Sussegwentement, l-isterjostruttura relattiva ta '1 kienet ikkaratterizzata minn esperiment ta' spettroskopija ta 'titjib Overhauser nukleari (NOESY), li wera korrelazzjonijiet NOE bejn il-fol-

pari ta' protoni li jbaxxu ({{0}}H u 10-H3; 3-H u 11-H3; {5-H u 6b-H, {{9 }}H; 6b-H u 7b-H u 10-H3 u 9-H) kif muri fil-Fig. 22}}Pożizzjoni f'1 ġiet iddeterminata bl-applikazzjoni tar-regola 13CNMR glycosylation shift ta '1,1' -disaccharide,29) li nstabet li tapplika għall-komposti hemiacetal.30,31) L-isterjostruttura tal-pożizzjoni 1- f'1 ġie kkonfermat li jinżamm f'1a b'paragun tal-analiżi 1 H- NMR inkluż l-esperiment NOESY. Il-valuri tal-bidla tal-glycosylation [Dd 1.2 ppm (1' -C) u 0.9 ppm (1- C), f'pyridine-d5] instabu li kienu karatteristiċi tal-kombinazzjoni R, Rdihemiacetal, li tikkorrispondi għall-isterjostruttura assoluta ta ' 1 kif muri fil-Fig. 3. Konsegwentement, il-konfigurazzjoni assoluta fil-pożizzjoni 1- ta '1 ġiet iddeterminata li tkun konfigurazzjoni S u l-isterjostruttura assoluta ta' 1 ġiet spjegata kif muri.

NATURALI CISTANCHE TUBULOSA MEDIĊINI TRADIZZJONALI ĊINIŻI PHGS75% ECH 30% ACT 12%

Strutturi ta' Kankanosides B (2) u C (3)

Kankanoside B (2) kien iżolat ukoll bħala trab amorfu b'rotazzjoni ottika negattiva ([a]D 26 - 118.7 grad f'MeOH). L-ispettru IR ta '2 wera meded ta' assorbiment f'3410, 1647, u 1085 ċm{- 1 askrivibbli għall-funzjonijiet ta 'hydroxyl, olefin, u etere. Il-formula molekulari C15H24O10 ta' 2 kienet determinata mill-qċaċet tal-jone kważi molekulari f'FABMS ta' joni pożittiv u minn FAB-MS b'riżoluzzjoni għolja. Idroliżi aċiduża ta' 2 b'1.0 M HCl liberat D-glukożju, li ġie identifikat permezz ta' analiżi HPLC bl-użu ta' detector ta' rotazzjoni ottika.8,10-12,15-18) L-1 H- ( CD3OD, Tabella 1) u 13C-NMR (Tabella 2) spettri28) ta '2 wrew sinjali assenjati għal żewġ metileni [d 1.40 (ddd, J= 5.2, 7.3, 13.5 Hz, 6a-H), 2.52 ( ddd, J= 7.0, 9.2, 13.5 Hz, 6b-H), 3.85, 3.99 (it-tnejn d, J{= 11.9 Hz, 10-H2)], erba' metini [ d 2.21 (dd, J= 6.4, 8.6 Hz, 9-H), 2.83 (m, 5-H), 4.02 (dd, J{= 5.2, 7.0 Hz, 7-H), 5.49 (d, J= 6.4 Hz, 1-H)], u par cis-olefin [d 4.95 (dd, J{{84 }}.0, 6.1 Hz, 4-H), 6.22 (dd, J= 1.8, 6.1 Hz, 3-H)], flimkien ma' frazzjoni b-glukopiranosil [d 4.72 (d, J= 7.9 Hz, 1' -H)]. Is-sinjali tal-protoni u tal-karbonju fid-dejta 1 H- u 13C-NMR ta' 2 kienu simili għal dawk ta' 6-deoxycatalpol (14), ħlief għas-sinjali minħabba l-7- u 8- pożizzjonijiet. Kif muri fil-Fig. 1, l-esperiment 1 H-1 H COSY fuq 2 indika l-preżenza ta 'strutturi parzjali miktuba f'linji grassi, u, fl-esperiment HMBC, korrelazzjonijiet fuq medda twila ġew osservati bejn il-pari ta' protoni u karbonju li ġejjin ({ {117}}H, 1' -H u 1-H u 10-H2 u 7- C; }H, 7-H, 9-H, 10-H2 u 8-C 7-H, 10-H2 u 9-; C; 7-H u 10-C). L-isterjostruttura relattiva ta' 2 kienet ikkaratterizzata mill-esperiment NOESY, li wera korrelazzjonijiet NOE bejn il-pari ta' protoni li ġejjin (1-H u 10-H2; 3- H u 4-H; 4-H; {144}}H u 6b-H, 9-H; 6b-H u 7-H 7-H u 9-H) kif muri fil-Fig , trattament alkalin ta '14 b'5% idrossidu tal-potassju milwiema (KOH) ta 2 u 19, 32) sabiex l-isterjostruttura ta' 2 ġiet iċċarata.

KankanosideC (3) kien iżolat bħala trab amorfu b'rotazzjoni ottika negattiva ([a]D 26 - 34.0 grad f'MeOH). Fil-jone negattiv FAB-MS ta '3, ġew osservati par ta' qċaċet tal-jone kważimolekulari isotopi f'm/z 399 u 401 (M- H)-. Il-formula molekulari ta' 3 ġiet iddeterminata li hija C15H25ClO10 permezz ta' kejl FAB-MS b'riżoluzzjoni għolja. Idroliżi aċiduża ta' 3 b'1.0 M HCl liberat D-glukożju, li ġie identifikat b'analiżi HPLC bl-użu ta' detector ta' rotazzjoni ottika.8,10-12,15-18) L-1 H- (CD3OD, Tabella 1) u 13C-NMR (Tabella 2) spettri28) ta' 3 wera sinjali assenjati għal tliet metileni [d 1.70 (br dd, J= ca. 3, 13 Hz, 4a-H), 2.70 (br dd, J{{{ 41}} ca. 6, 13 Hz, 4b-H), 1.68 (br d, J= ca. 13 Hz, 6aH), 2.44 (m, 6b-H), 4.01, 4.04 (it-tnejn d, J= 11.3 Hz, 10-H2)], ħames metini [d 2.47 (dd, J{= 2.5, 7.9 Hz, 9-H), 2.61 (m , 5- H), 3.94 (br s, 7-H), 5.10 (br d, J{= ca. 3 Hz, 3-H), 5.48 (d, J= 2.5 Hz, 1-H)], u frazzjoni b-glukopiranosil [d 4.60 (d, J{= 8.0 Hz, 1' -H)]. Is-sinjali tal-protoni u tal-karbonju fl-ispettri 1 H- u 13C-NMR ta' 3 kienu superponibbli fuq dawk ta' 2, ħlief għas-sinjali minħabba l-pożizzjonijiet 3- u 4-. Il-pożizzjonijiet tal-bD-glucopyranosyl u l-funzjoni tal-kloru fi 3 ġiet spjegata mill-esperimenti H-H COSY u HMBC kif muri fil-Fig. 1. Konsegwentement, l-istruttura planari ta '3 kienet mibnija biex tkun kif muri. L-isterjostruttura relattiva ta' 3 ġiet iddeterminata minn esperiment NOESY, li fih ġew osservati korrelazzjonijiet NOE bejn il-pari ta' protoni li ġejjin (1-H u 3-H, 10-H2; 3- H u 4a-H u 5- H u 6b-H, 7- H; }H u 9-H) kif muri fil-Fig. 2.

CISTANCHE TUBULOSA NATURALI GĦAT-TITJIB TAL-FUNZJONI SESSWALI PHGS75% ECH 30% ACT 12%

Strutturi ta' Kankanoside D (4) u Kankanol (5)

Kankanoside D (4) kien iżolat bħala trab amorfu b'rotazzjoni ottika negattiva ([a]D 25 - 30.6 grad f'MeOH). L-ispettru IR ta' 4 wera faxxa ta' assorbiment f'1655 cm- 1 askrivibbli għall-funzjoni ta' olefin u meded ta' assorbiment b'saħħithom f'3410 u 1078 cm- 1 li jissuġġerixxu l-glikosidiku tiegħu struttura. Fil-FAB-MS ta 'jone pożittiv ta' 4, quċċata ta 'jone kważi molekulari ġiet osservata f'm / z 341 (M Na). Il-formula molekulari C15H26O7 ta '4 kienet determinata b'kejl FAB-MS b'riżoluzzjoni għolja. Idroliżi aċiduża ta' 4 b'1.0 M HCl liberat D-glukosju,8,10-12,15-18) filwaqt li (R)-rotundiol (4a) 33,34) inkisbet permezz ta' idroliżi enżimatika ta' 4 b'b- glukosidase. L-1 H-NMR (Tabella 3, CD3OD) u 13C-NMR (Tabella 4) spectra28) ta '4 wrew sinjali assenjati għal metil [d 1.69 (s, 10-H3)], tliet metileni [d 1.41, 2.06 (it-tnejn m, 4-H2), 1.51, 2.01 (it-tnejn m, 6a- u 6b-H), 2.23 (br dd, J{= ca. 8, 15 Hz, 7a-H) , 2.37 (br dd, J= ca. 8, 15 Hz, 7b-H)], metina [d 2.90 (m, 5-H)], u żewġ metilini li jkollhom funzjoni ta' ossiġnu { d [3.56 (ddd, J= 2.8, 7.4, 13.2 Hz), 3.97 (ddd, J{= 4.9, 8.0, 13.2 Hz), 3-H2], 4.04, 4.18 (it-tnejn d, J= 12.2 Hz, 1-H2)} flimkien ma' parti b-glukopiranosil [d 4.25 (d, J{{= 7.7 Hz, 1' -H )]. Il-pożizzjoni tal-parti bD-glucopyranosyl f'4 ġiet iċċarata mill-esperiment HMBC biex tkun pożizzjoni 3- (Fig. 1). Ibbażat fuq din l-evidenza, l-isterjostruttura assoluta ta '4 ġiet determinata li tkun kif murija.

Kankanol (5) inkiseb bħala trab amorfu b'rotazzjoni ottika pożittiva ([a]D 25 11.1 grad ). L-jonizzazzjoni kimika (CI)-MS ta '5 wriet par ta' qċaċet tal-jone isotopi f'm/z 221 u 223 minħabba jone kważi molekulari (MH). Il-kejl CI-MS ta 'riżoluzzjoni għolja ta' 5 wera li l-formula molekulari kienet C9H13ClO4. L-1 H-NMR (Tabella 1, CD3OD) u 13C-NMR (Tabella 2) spectra28) ta’ 5 wrew il-preżenza tal-funzjonijiet li ġejjin: tliet metilini [d 1.60 (ddd, J= 2 .5, 5.5, 13.1 Hz, 4a-H), 1.80 (br dd, J= ca. 3, 13 Hz, 4bH), 1.83 (br d, J{= ca. 12 Hz, 6a-H), 2.57 (m, 6b-H), 3.75, 3.88 (it-tnejn d, J= 9.2 Hz, 10-H2)], ħames metini [d 2.76 (dd, J{ {58}}.3, 8.0 Hz, 9-H), 2.50 (m, 5-H), 3.80 (br s, 7-H), 5.17 (br d, J{ {71}} ca. 3 Hz, 3-H), 5.26 (d, J{= 4.3 Hz, 1-H)]. L-istruttura planari ta '5 ġiet ikkonfermata minn esperimenti 1 H-1 H COSY u HMBC. Jiġifieri, l-esperiment 1 H-1 H COSY fuq 5 indika l-preżenza tal-istrutturi parzjali miktuba f'linji grassi, u fl-esperiment HMBC, korrelazzjonijiet fuq medda twila ġew osservati kif muri fil-Fig. 1. L-isterjostruttura relattiva ta '5 kienet determinat mill-esperiment NOESY, li fih ġew osservati korrelazzjonijiet NOE bejn il-pari ta' protoni li ġejjin (1-H u 9-H; 3-H u 4a-H; 4b-H u {{95 }} H; 5-H u 6b-H, 9-H; 7-H 7-H u 9-H); Fig. 2. B'paragun tad-dejta 1 H- u 13C-NMR għal 5 ma 'dawk għal 14a, li nkisbet bit-trattament ta' 14 b'5% HCl akweju kif muri fil-Ċart 1,35) il-pożizzjoni tal-grupp tal-kloru f'5 kien appoġġjat biex tkun il-{117}}pożizzjoni. Barra minn hekk, l-aċetilazzjoni ta' 5 b'anidride aċetika (Ac2O) u piridina tat-3,7-ossidu (5a), filwaqt li 14a ta d-diaċetat (14b) taħt l-istess kundizzjoni ta' aċetilazzjoni. Din l-evidenza wasslitna wkoll biex nikkonfermaw li l-pożizzjoni tal-funzjoni tal-kloru tkun il-pożizzjoni 3b (Ċart 3). Konsegwentement, l-isterjostruttura ta '5 ġiet determinata li tkun kif murija.

Struttura ta 'Kankanoside E (6) Kankanoside E (6) kien iżolat bħala trab amorfu b'rotazzjoni ottika negattiva ([a]D 25 - 20.0 grad f'MeOH). L-ispettru IR ta '6 wera meded ta' assorbiment f'3410, 1647, u 1085 cm- 1 askrivibbli għal funzjonijiet glikosidiċi u karboniliċi, filwaqt li l-ispettru UV tiegħu wera assorbiment massimu f'211 nm (log e 4.63), li jindika il-preżenza ta' a,b-aċidu karbossiliku mhux saturat. Il-formula molekulari C16H28O8 ta '6 kienet ikkaratterizzata mill-FAB-MS tal-jone pożittiv u negattiv u minn kejl MS b'riżoluzzjoni għolja. Idroliżi aċiduża ta' 6 D-glukożju liberat,8,10-12,15-18) filwaqt li (2E,6R)-8-idrossi-2,6-dimetil{{31 }}octanoic acid (6a) 36) inkiseb permezz ta 'idroliżi enżimatika ta' 6 b'b-glucosidase. L-1 H-NMR (Tabella 3, CD3OD) u 13C-NMR (Tabella 4) spettri28) ta' 6 indikaw il-preżenza ta' (2E,6R)-8-idrossi-2,6- porzjon ta' aċidu dimetil-2-ottenojku [d 0.95 (d, J= 6.4 Hz, 10-H3), 1.30, 1.48 (it-tnejn m, 5-H2), 1.45, 1.70 (it-tnejn m, 7-H2), 1.65 (m, 6-H), 1.81 (s, 9-H3), 2.22 (2H, m, 4-H2) , 3.61, 3.94 (it-tnejn m, 8-H2), 6.78 (dd, J{= 1.2, 7.3 Hz, 3-H)] flimkien ma' parti bD-glukopiranosil [d 4.26 (d, J= 7.6 Hz, 1' -H)]. B'paragun tas-sinjali tal-karbonju fl-ispettru 13C-NMR ta '6 ma' dawk ta '6a, il-bidla tal-glikosilazzjoni kienet osservata madwar il-pożizzjoni 8- ta' 6. Il-pożizzjoni tar-rabta tal-glukoside kienet ikkonfermata wkoll minn esperimenti HMBC kif muri f' Fig. 1. Konsegwentement, l-isterjostruttura assoluta ta' 6 ġiet iċċarata bħala (2E,6R)-8-bD-glucopyranosyloxy-2,6-dimetil-2-octenoic acid.

CISTANCHE TUBULOSA NATURALI GĦAT-TITJIB TAL-FUNZJONI SESSWALI PHGS75% ECH 30% ACT 12%