Intratumor Childhood Vaccin-specific CD4+ T-Recall Tikkoordina CD Antitumor 8+ Ċelloli T U Eosinophils
Oct 17, 2023
ASTRATT
Sfond
Mekkaniżmi kontra t-tumur taċ-ċelluli CD4+ T jibqgħu definiti b'mod mhux raffinat, u huma nieqsa mezzi biex l-għajnuna taċ-ċelluli T CD4+ tiġi sfruttata b'mod effettiv għall-immunoterapija tal-kanċer. Iċ-ċelloli T CD4+ tal-memorja pre-eżistenti għandhom il-potenzjal li jiġu sfruttati għal dan il-għan. Barra minn hekk, ir-rwol tal-immunità pre-eżistenti fil-viroterapija, partikolarment l-immunoterapija tal-poljovirus rikombinanti fejn l-immunità speċifika għall-vaċċin tal-poljo fit-tfulija hija kullimkien, għadu mhux ċar. Hawnhekk aħna ttestjajna l-ipoteżi li ċ-ċelluli T tal-memorja speċifiċi għat-tilqima tat-tfulija jimmedjaw l-immunoterapija kontra t-tumur u jikkontribwixxu għall-effikaċja kontra t-tumur tal-viroterapija tal-poljo.
Benefiċċji ta 'cistanche tubulosa-Antitumor
Metodi
L-impatt tal-immunizzazzjoni tal-poljo fuq il-viroterapija tal-poljo u l-effetti kontra t-tumur tal-irtirar tal-poljo u t-tetnu ġew ittestjati f'mudelli ta 'melanoma murina syngeneic u kanċer tas-sider. CD8+ Knockout taċ-ċelluli T u taċ-ċelluli B, CD4+ tnaqqis taċ-ċelluli T, CD4+ trasferiment adottiv taċ-ċelluli T, imblokk CD40L, valutazzjonijiet tal-immunità taċ-ċelluli T antitumorali, u it-tnaqqis tal-eosinophil iddefinixxa mekkaniżmi antitumorali tal-antiġeni tal-irtirar. Settijiet ta' dejta tat-traskriptome pan-kanċer u korrelati ta' provi kliniċi ta' viroterapija tal-poljo ntużaw biex tiġi vvalutata r-rilevanza ta' dawn is-sejbiet fil-bnedmin.
Riżultati
It-tilqim minn qabel kontra l-poljovirus saħħet sostanzjalment l-effikaċja kontra t-tumur tal-viroterapija tal-poljo fil-ġrieden, u l-irtirar intratumor tal-immunità tal-poljovirus jew tat-tetnu dewwem it-tkabbir tat-tumur. L-antiġeni tat-tifkira intratumor żiedu l-funzjoni taċ-ċelluli T antitumorali, ikkawżaw infiltrazzjoni ta 'tumur immarkata ta' ċelluli limfoid innati tat-tip 2 u eosinofili, u naqsu proporzjonijiet ta 'ċelluli T regolatorji (Tregs). Effetti kontra t-tumur ta' antiġeni ta' recall kienu medjati minn ċelluli CD4+ T, limitati minn ċelluli B, indipendenti minn CD40L, u dipendenti fuq eosinofili u ċelluli CD8+ T. Kienet osservata relazzjoni inversa bejn il-firem tal-eosinophil u Treg fit-tipi ta 'kanċer The Cancer Genome Atlas (TCGA), u t-tnaqqis tal-eosinophil impedixxa t-tnaqqis tat-Treg wara l-irtirar tal-poljo. It-titri ta’ antikorpi li jinnewtralizzaw il-poljo minn qabel kienu ogħla f’pazjenti li jgħixu aktar, u l-livelli ta’ eosinofili żdiedu fil-maġġoranza tal-pazjenti, wara viroterapija tal-poljo
Konklużjoni
L-immunità anti-poljo li teżisti minn qabel tikkontribwixxi għall-effikaċja kontra t-tumur tal-viroterapija tal-poljo. Dan ix-xogħol jiddefinixxi l-potenzjal tal-immunoterapija tal-kanċer tal-vaċċini tat-tfulija, jiżvela l-utilità tagħhom li jinvolvu l-għajnuna taċ-ċelluli CD4+ T għal ċelluli CD8+ T antitumorali, u jimplika l-eosinofili bħala effetturi antitumorali tas-CD4+ Ċelloli T.
INTRODUZZJONI
Għalkemm iċ-ċelluli CD4+ T huma medjaturi ewlenin tal-funzjonalità immuni adattiva u l-memorja, 1-3 rotot biex jisfruttaw il-potenzjal tagħhom għall-immunoterapija tal-kanċer huma nieqsa. Il-memorja immuni adattiva tippermetti risponsi immuni robusti għal patoġeni li ltaqgħu magħhom qabel. Għaldaqstant, tfakkar it-tweġibiet, jiġifieri l-attivazzjoni ta' ċelluli tal-memorja adattivi permezz ta' antiġenu konness, orkestra infjammazzjoni intrinsika u adattiva lokalizzata.4 5 Ibbażat fuq xogħol reċenti li juri l-utilità ta' immunoterapija tal-kanċer tar-risponsi taċ-ċelluli T intratumorali antivirali CD8+ , 6 7 aħna ipoteżijna li t-tumuri lokalizzati, it-tfulija assoċjati mal-vaċċin CD4+ T-tifkira taċ-ċelluli T jista 'jinvolvi funzjonijiet antitumorali taċ-ċelluli CD4+ T. PVSRIPO (issa magħruf bħala 'Lerapolturev'), il-vaċċin tal-poljovirus ħaj attenwat tat-tip 1 (Sabin) modifikat bis-sit intern tad-dħul tar-ribożomi tar-rhinovirus uman tat-tip 2,8 wera evidenza bikrija ta' effikaċja fil-glioblastoma rikorrenti (rGBM)9 u rikorrenti. , melanoma mhux resectable10 11 wara amministrazzjoni intratumor (it). It-tilqim tal-poljovirus (poljo) huwa parti mill-iskeda standard ta' tilqim pedjatriku mad-dinja kollha, jew bil-vaċċini ħajjin attenwati (Sabin), jew inattivati (IPOL). Is-sekwenza ta' kodifikazzjoni ta' PVSRIPO hija identika għall-vaċċin Sabin tat-tip 1. Ir-reattività tal-antikorpi tas-serum anti-PVSRIPO/poljo pre-eżistenti ġiet ikkonfermata fil-pazjenti kollha li qed jirċievu terapija PVSRIPO.9 10 12 Barra minn hekk, l-użu kliniku ta' PVSRIPO jinvolvi spinta minn qabel b'IPOL trivalenti mill-inqas ġimgħa qabel l-amministrazzjoni tiegħu, li kkawża n-newtralizzazzjoni ta' PVSRIPO fis-serum. l-antikorpi jiżdiedu fil-pazjenti kollha.9 10 L-effetti kontra t-tumur tal-viroterapija tal-poljo jinkludu ħsara taċ-ċelluli neoplastiċi u infezzjoni virali subletali taċ-ċelloli majelojdi li jmexxu s-sinjalar sostnut tal-interferon tat-tip I (IFN). fit-tumur iżda jista 'jipprovdi mekkaniżmu alternattiv ta' azzjoni kontra t-tumur permezz tiegħu tfakkar ta 'ċelluli T speċifiċi għall-vaċċin tal-poljo. Bl-użu ta' mudelli ta' tumuri tal-ġrieden tal-melanoma u l-kanċer tas-sider, aħna nuru li l-immunità pre-eżistenti għall-poljo ssaħħaħ l-effikaċja kontra t-tumur tal-viroterapija tal-poljo billi tidħol fil-funzjonijiet antitumorali taċ-ċelluli CD4+ T. L-irtirar tal-poljo jew tat-tetnu wassal għal ċellula CD4+ T immarkata, ċellula limfojde intrinsika tat-tip 2 (ILC2), u influss ta' eosinofili; li timmedja l-effikaċja kontra t-tumur permezz taċ-ċelluli CD8+ T u l-eosinofili b'mod indipendenti minn CD40L. F'koorti ta' pazjenti b'rGBM ikkurati b'Lerapolturev (PVSRIPO), livelli ogħla ta' antikorpi li jinnewtralizzaw il-poljo minn qabel kienu assoċjati ma' sopravivenza itwal, u induzzjoni periferali ta' eosinofili kienet osservata f'pazjenti b'melanoma wara t-trattament b'Lerapolturev. Għalhekk, il-viroterapija tal-poljo u l-antiġeni assoċjati mal-vaċċin tat-tfulija jikkoordinaw l-immunità tat-tip I u II kontra t-tumur permezz tal-irtirar taċ-ċelluli T CD4+.
cistanche suppliment benefiċċji-żieda l-immunità
MATERJALI U METODI
Materjali u metodi estiżi huma ppreżentati f'informazzjoni supplimentari onlajn.
Ġrieden, linji taċ-ċelluli, viruses, poly(I:C), u antikorpi grad in vivo
(Tokjo, Ġappun). Wildtype (wt) (#000664), CD8 knockout (k/o) (#002665), B-cell k/o (#002288), OT-I (#003831), u ġrieden CD45.1 C57BL/6 (# 002014) kienu minn The Jackson Laboratory. Ġrieden OT-I u CD45.1 C57BL/6 ġew imqassma biex jiġġeneraw CD45.1+Ġrieden OT-I. B16.F10 (Ġbir tal-Kultura tat-Tip Amerikan), E0771 (G. Palmer, Duke University, USA), E0771hCD155, B16.F10hCD155, u B16. Ċelloli F10.9hCD155-OVA tkabbru f'Medju tal-Ajkla Modifikat ta' Dulbecco b'livell għoli ta' glukożju (DMEM, Gibco) li kien fih 10% serum tal-fetu bovin (FBS) (Sigma-Aldrich). B16. Ċelloli F10.9hCD155-OVA, B{16-F10hCD155, u E0771hCD155 kienu derivati qabel.12 13 Il-linji taċ-ċelluli kollha ġew ikkonfermati li huma negattivi għall-mikoplażma. PVSRIPO ta 'grad tal-laboratorju, PVSRIPO adattat għall-ġurdien (mRIPO), u PVSRIPO inattivat bl-UV (UVP) ġew iġġenerati f'ċelloli HeLa segwiti minn purifikazzjoni ta' esklużjoni tad-daqs tas-supernatant riżultanti kif deskritt qabel.12 13 PVSRIPO intuża għat-tilqim; UVP intuża biex jiżola l-effetti tal-poljo capsid (li fih epitopi speċifiċi għat-tilqim tal-poljo); mRIPO hija verżjoni tal-PVSRIPO adattata għall-ġrieden li ntużat biex tittestja l-impatt sħiħ tal-viroterapija tal-poljo fil-ġrieden. VacciGrade piż molekulari għoli poly(I: C) (InvivoGen) ġie rikostitwit skont l-istruzzjonijiet tal-manifattur. Antikorpi ta' grad in vivo għal interleukin (IL)-5 (TRFK5) jew kontroll (HRPN), CD4 (GK1.5) jew kontroll (LTF{-2), CD40L (MR{-1) jew kontroll (#BP0091), u CD40 (FGK4.5) jew kontroll (2A3) kienu minn Bio X Cell.
Vaċċini, tilqim, u titri virali
Sakemm ma jkunx indikat mod ieħor, vaċċini li jużaw PVSRIPO (1×107 unitajiet li jiffurmaw plakka (pfu)/ġurdien), tossojd tat-tetnu (Tet) (MilliporeSigma; 0.5µg/ġurdien), jew limpet ta’ hemocyanin-keyhole (KLH, Sigma). -Aldrich; 100µg/ġurdien) ġew dilwiti f'salina buffered b'fosfat (PBS) b'Alhydrogel (1:1; InvivoGen); 50µL ta' vaċċin ġew amministrati bilateralment fil-muskoli quadriceps. It-tilqim kombinat ta' IPOL u Tenivac (Sanofi Pasteur) ingħataw unilateralment għal kull vaċċin. Żieda fit-tilqim seħħet 14-il jum wara. Għal dan it-titri virali, it-tumuri ġew maħsuda, miżuna, u omoġenizzati mekkanikament f'1 mL ta 'PBS. L-omoġenat ġie ttestjat b'assaġġ tal-plakka.16
Esperimenti tal-mudell tat-tumur tal-murine
Benefiċċji ta 'cistanche tubulosa-Antitumor
Għal impjanti B16, ċelluli 2×105 ġew impjantati taħt il-ġilda fil-ġenb tal-ġrieden maskili u femminili; għal impjanti E0771 ċelluli 5 × 105 ġew impjantati fir-raba 'kuxxinett tax-xaħam mammarju ta' ġrieden nisa. Il-ġrieden hCD155-tg C57BL/6 intużaw ma' mRIPO biex jirrikapitulaw viroterapija tal-poljo (replikazzjoni virali attiva ± immunità pre-eżistenti); billi l-ġrieden wt C57BL/6, li mhumiex permessibbli għall-poljo, intużaw mal-UVP biex jiżolaw l-effetti tal-irtirar tal-poljo. Tumuri ġew ittrattati jew b'DMEM jew PBS (vettura), mRIPO (1×107pfu), UVP (1×108 pfu pre-inattivat), Tet (0.5µg), u/jew poly(I: C) (30µg) kif indikat fil-leġġendi tal-figuri. Gruppi ta 'trattament kienu randomised bil-volum tat-tumur (kejl kalibru, bl-użu ta' l-ekwazzjoni L × W × W / 2) fl-ewwel jum ta 'trattament. Il-ġrieden ġew ewtanizzati meta l-volum tat-tumur qabeż l-1000mm3 sakemm ma jkunx preċedut minn ulċerazzjoni (li ma kinitx frekwenti u ma kinitx assoċjata ma 'xi trattament partikolari), f'liema każ il-ġrieden ġew esklużi mill-istudju. Id-daqsijiet tal-gruppi kienu bbażati fuq valutazzjonijiet tal-qawwa minn esperimenti pilota jew esperjenza preċedenti.12 Il-kejl tat-tumur sar blinded mal-grupp tat-trattament tal-it li beda wara l-aħħar doża tat-terapija/antiġen tal-it. Ġrieden b'volum tat-tumur li jibda barra fil-ħin tar-randomizzazzjoni (1 SD mill-medja) ġew esklużi.
Analiżi taċ-ċitometrija tal-fluss tat-tumuri
Tumuri nħasdu f'punti ta' ħin indikati fil-leġġendi tal-figura u dissoċjati f'midja RPMI-1640 (Thermo Fisher) li kien fihom 100µg/mL Liberase-TM (Sigma-Aldrich) u 10µg/mL DNAse I (Roche) għal 30min f'37 grad , segwit minn passaġġ minn passatur taċ-ċelluli 70µM (Olympus Plastics), ċentrifugazzjoni, u ħasil fil-PBS. Għal esperimenti bl-użu ta 'Zombie Aqua (BioLegend), iċ-ċelloli ġew imtebba' b'Zombie Aqua f'PBS (1:500) wara l-istruzzjonijiet tal-manifattur. Is-sospensjonijiet taċ-ċelluli mbagħad ġew inkubati b'1:50 ġurdien TruStain FcX (BioLegend) segwit minn tbajja speċifika għall-pannelli f'PBS li fih 2% FBS. Tbajja ta 'fatturi ta' traskrizzjoni intraċellulari, ċitokini, u granzyme B twettqet bl-użu ta 'Foxp3/Transcription Factor Staining Buffer Set (Thermo Fisher) wara l-istruzzjonijiet tal-manifattur. Ara informazzjoni supplimentari onlajn għal informazzjoni dwar pannelli u antikorpi użati. Id-dejta nġabret fuq Fortessa X20 fil-Faċilità Core Flow Cytometry ta' Duke Cancer Institute; Fajls FCS ġew analizzati bl-użu ta 'FlowJo V.10 (BD Biosciences). Strateġiji ta' gating huma ppreżentati f'informazzjoni supplimentari onlajn; Kontrolli tal-isotip, fluworexxenza nieqes kontrolli wieħed, u tqabbil ma 'popolazzjonijiet ta' ċelluli negattivi stabbiliti ntużaw biex jiddefinixxu l-pożittività.
Analiżi assoċjati ma' provi kliniċi
Twettqu assaġġi tat-titer tan-newtralizzazzjoni PVSRIPO skont il-protokoll tal-prova klinika,9, u ntużaw valuri għaż-żewġ provi kliniċi tal-rGBM minn assaġġi ta' reġistrazzjoni ta' provi kliniċi. It-titri tal-poljo tal-Fażi I tal-rGBM (NCT01491893) kienu rrappurtati qabel u s-sopravivenza ġiet aġġornata mid-29 ta' April 2020; is-sopravivenza tal-fażi II (NCT02986178) ġiet aġġornata mis-27 ta' April, 2021. Melanoma (NCT03712358)10 11 perċentwali ta' parteċipanti fil-prova klinika taċ-ċelluli bojod tad-demm ġew akkwistati minn testijiet tal-għadd kliniku sħiħ tad-demm (CBC).
Analiżi statistika u koorti ta' provi kliniċi
Testijiet statistiċi speċifiċi għall-assaġġ huma indikati fil-leġġendi tal-figura korrispondenti. GraphPad Prism V.8 intuża biex twettaq analiżi statistiċi. Analiżi ta 'varjanza f'żewġ direzzjonijiet (ANOVA) intużat biex tivvaluta d-differenza fit-tkabbir tat-tumur matul iż-żmien bejn il-gruppi, u l-ittestjar post hoc ANOVA intuża biex jagħti kont għal paraguni multipli sakemm ma jkunx innutat mod ieħor fil-figura u/jew il-leġġenda tal-figura. Probabbiltà statistika ta’ (p<0.05) was used unless otherwise noted; all p values are two-tailed. All data points reflect individual mice or patients.
RIŻULTATI
L-immunizzazzjoni tal-poljo ssaħħaħ il-viroterapija tal-poljo
L-ewwel ittestjajna l-produzzjoni ta’ antikorpi kontra l-poljo (jiġifieri, serokonverżjoni) fi ġrieden transġeniċi għar-riċettur tal-poljovirus uman CD155 (hCD155-tg) fuq immunizzazzjoni b’IPOL jew PVSRIPO (biex jimitaw it-tip 1 Sabin) bi u mingħajr adjuvant tal-alum ( Alhydrogel; ALH), parti mill-formulazzjonijiet tal-vaċċini liċenzjati (eż., Pentacel, Pediarix, Kinrix).17 45 jiem bejn l-immunizzazzjoni inizjali u l-impjantazzjoni tat-tumur ippermettew l-istabbiliment ta 'memorja immunoloġika. rispons tal-antikorpi; L-ALH saħħaħ ir-risponsi tal-antikorpi għat-tnejn (figura supplimentari onlajn S1A, B). Biex nirrikapitulaw livelli għoljin ta’ antikorpi kontra l-poljo f’pazjenti bil-kanċer,9 għażilna tilqim PVSRIPO+ALH (minn hawn ‘il quddiem ‘poljo’) biex niddeterminaw ir-rwol tal-immunità tal-poljo pre-eżistenti fl-immunoterapija PVSRIPO. Mudelli ta’ tumuri tal-marieni u ġrieden li jesprimu hCD155 kienu żviluppati qabel biex jippermettu d-dħul u r-replikazzjoni ta’ PVSRIPO, u PVSRIPO ġie adattat għal ċelloli tal-marieni biex jirrikapitola r-replikazzjoni virali f’ċelloli tal-kanċer tal-marieni (mRIPO). Mudelli ta’ tumuri tal-ġurdien sinġeniċi, injezzjoni waħda it ta’ mRIPO kienet teħtieġ imblokk tal-proteina tal-mewt taċ-ċelluli programmata-1 (PD1)/ligand tal-mewt programmata-1 jew espressjoni tat-tumur tal-proteina ovalbumin immunoġenika (OVA) biex timmedja effetti antitumorali dewwiema .12 13 Madankollu, mRIPO medja effikaċja antitumorali dejjiema fil-ġrieden immunizzati kontra l-poljo f'mudelli tal-kanċer tal-melanoma (B16) u tas-sider (E0771), relattiva għall-kontropartijiet immunizzati ta' kontroll (KLH) (figura 1A, B, figura supplimentari onlajn S1C) . Għalhekk, tilqim tal-poljo minn qabel isaħħaħ l-effikaċja kontra t-tumur tal-viroterapija tal-poljo. Il-viroterapija tal-poljo hija assoċjata ma' infjammazzjoni taċ-ċelluli T fit-tumur.12 13 Ir-replikazzjoni ta' mRIPO fit-tumuri tnaqqset sostanzjalment fil-ġrieden immunizzati bil-poljo jumejn u 5 ijiem wara t-trattament (figura 1C, D), konsistenti ma' antikorp newtralizzanti għoli titri (figura supplimentari onlajn S1B). Madankollu, osservajna żieda fid-densità totali taċ-ċelluli immuni (CD45.2+) fi ġrieden immunizzati bil-poljo wara terapija mRIPO, spjegata fil-biċċa l-kbira minn influss ta' ċelluli CD4+ T konvenzjonali u ċelluli majelojdi (CD11b+, Ly6GNeg, F4/80+ ) (figura 1E, figuri supplimentari onlajn S2A, S3). Analiżi sussegwenti wriet li ċ-ċelluli majelojdi CD11b+ miżjuda fil-ġrieden immunizzati bil-poljo kkurati b'mRIPO kienu eosinophils (figura 1F); livelli ta 'ċelluli dendritiċi (DCs) ma ġewx mibdula b'mod sinifikanti. Fattur ta' nekrożi tat-tumur elevat (TNF), fattur li jistimula l-kolonja tal-granuloċiti-makrofagi (GM-CSF), Livelli ta' IL-1 u IL-17A f'omoġenat tat-tumur u IL-4 u IL{ ogħla {51}} f'kulturi esplanted tumor-draining lymph node (TDLN) minn ġrieden immunizzati kontra l-poljo kkurati b'mRIPO indikaw reazzjonijiet infjammatorji distinti wara terapija mRIPO (figura supplimentari onlajn S2B). GM-CSF u IL-5 huma indutturi magħrufa tal-produzzjoni u r-reklutaġġ tal-eosinofili,20 possibbilment jispjegaw l-influss tal-eosinofili fit-tumuri (figura 1F). Ċelloli CD4+ T konvenzjonali u infiltrazzjoni eosinofili b'rispons għal trattament mRIPO ta 'ġrieden immunizzati bil-poljo ġew osservati wkoll f'mudell separat, E0771 (figura supplimentari onlajn S2C, D). Għalhekk, l-immunità pre-eżistenti għall-poljo taċċentwa risponsi infjammatorji għal mRIPO li huma assoċjati ma 'effikaċja msaħħa kontra t-tumur.
Figure 1 Polio immunization potentiates antitumor and inflammatory efficacy of polio virotherapy. (A) Polio or KLH-immunized hCD155-tg mice bearing hCD155-tg B16 or E0771 tumors were treated with DMEM (control) or mRIPO. (B) Survival cut-off was tumor volume >1000mm3; ara l-figura supplimentari onlajn S1C; rappreżentattiv minn żewġ esperimenti. (C) Skema għal esperimenti f'D–H. (D) Tittri virali omoġenati tat-tumur wara mRIPO; ND, mhux misjuba. (E) Analiżi taċ-ċitometrija tal-fluss ta 'tumuri f'jum 7 (n=13/grupp mock; n=14/grupp mRIPO). (F) Analiżi taċ-ċitometrija tal-fluss għal ċelluli majelojdi u ċelluli dendritiċi (DCs: Ly6CNeg, F480Neg, CD11c+, IA/IE+) f'jum 11. (G) Markers ta 'attivazzjoni f'TILs fil-jiem 7 u 12; ġew miġbura minn żewġ esperimenti; jintlew il-valuri medji KLH-DMEM huma murija. (H) Espressjoni tal-fattur ta 'traskrizzjoni TIL f'jum 12; l-istess kampjuni bħal jum 12 ta' (A); hija murija data rappreżentattiva ta' tliet ripetizzjonijiet. Ara l-figuri supplimentari onlajn S1–S4 għal dejta estiża. (E–H) It-test post hoc ta' Tukey p< 0.05 versus mock controls (*) or all other groups (#). Data bars and brackets indicate mean+SEM. mRIPO, mouse adapted PVSRIPO; DMEM, Dulbecco's Modified Eagle Medium; IFN, interferon; i.t., intratumor; KLH, hemocyanin keyhole limpet; OVA, ovalbumin; TIL, tumor-infiltrating lymphocyte; TNF, tumor necrosis factor.
Fenotipi funzjonali taċ-ċelluli T miżjuda fi ġrieden immunizzati bil-poljo kkurati b'mRIPO
CD8+ u CD4+ limfoċiti li jinfiltraw it-tumur (TILs) fi ġrieden imlaqqma bil-poljo esprimew livelli ogħla ta’ trattament intraċellulari ta’ IFN- , TNF, u granzyme B wara mRIPO, li jimplika status funzjonali mtejjeb (figura 1G , figura supplimentari onlajn S4). TILs minn ġrieden immunizzati bil-poljo kkurati b'mRIPO wrew ukoll espressjoni akbar tal-fatturi ta 'traskrizzjoni T-bet, GATA3, u ROR t; kif ukoll induzzjoni ta 'IRF4, promotur ta' attivazzjoni u funzjoni taċ-ċelluli T (figura 1H).21 Espressjoni tal-markaturi ta 'eżawriment taċ-ċelluli T PD1 u immunoglobulina taċ-ċelluli T u proteina 3 li fiha dominju muċin (TIM3) fuq CD{{20 }} Ċelloli T fit-tumur u TDLNs ta' ġrieden imlaqqma kontra l-poljo kkurati b'mRIPO tnaqqsu (figura supplimentari onlajn S2E). Bidliet fil-markaturi ta 'attivazzjoni/divrenzjar taċ-ċelluli T kienu konsistenti fil-mudell tal-kanċer tas-sider ortotopiku E0771 (figuri supplimentari onlajn S2F, G). Għalhekk, ir-reazzjonijiet ta 'recall għall-poljo jżidu l-fenotipi funzjonali f'TILs wara viroterapija tal-poljo intratumorali.
L-antiġeni tal-irtirar tal-poljo u t-tetnu jimmedjaw l-effikaċja kontra t-tumur
CD8+ ċelluli T tal-memorja speċifika għar-reovirus joqtlu direttament iċ-ċelluli tal-kanċer infettati bir-reovirus waqt terapija reovirus onkolitika,22 u ċ-ċelluli CD4+ T tal-memorja speċifika għat-tetnu joqtlu ċ-ċelluli tal-kanċer infettati bil-Listeria li jesprimu Tet.23 Alternattivament, reazzjonijiet infjammatorji ikkawżati minn memorja T-cell recall fil-mikroambjent tat-tumur (TME) jistgħu wkoll isaħħu s-sorveljanza immuni.6 7 Aħna ipoteżijna li l-infjammazzjoni kkaġunata mill-irtirar spjegat l-effikaċja aċċentwata kontra t-tumur tal-polio virotherapy fil-ġrieden imlaqqma bil-poljo minn replikazzjoni virali— meħtieġa għall-produzzjoni ta 'antiġen virali fiċ-ċelluli tat-tumur, onkolisi, u infjammazzjoni antivirali12-tnaqqas drastikament fil-ġrieden immunizzati kontra l-poljo (figura 1D). Biex nistudjaw l-effetti kontra t-tumur ta 'recall tal-poljo fit-TME użajna mudell nieqes minn hCD155 (ġrieden u tumuri; ġrieden wt C57BL/6) u ttrattati tumuri b'PVSRIPO inattivat bl-UV (UVP) biex jipprekludu infezzjoni virali/replikazzjoni. Inkludejna paraguni ma' antiġen ieħor ta' recall assoċjat ma' vaċċin, Tet, li ntwera li jimmedja l-effetti kontra t-tumur fi studji oħra.23 24 It-terapija b'UVP eżerċitat effikaċja kontra t-tumur esklussivament fi ġrieden immunizzati kontra l-poljo; It-trattament Tet medja effetti antitumorali temporanji fi ġrieden immunizzati Tet (figura 2A–C, fajl supplimentari onlajn 1). Rispons naturali ta 'recall iseħħu fil-preżenza ta' rispons immuni innat lokalizzat għar-replikazzjoni tal-patoġenu. Biex jimitaw dan, ġrieden Tet jew immunizzati bil-poljo ġew ittrattati b'poly(I: C) waħdu jew flimkien ma 'UVP jew Tet. Kemm l-UVP kif ukoll it-Tet medjaw effetti antitumorali pronunzjati f'dan il-kuntest (figura 2D). Din id-dejta tiżvela li tfakkar taċ-ċelluli T tal-memorja fit-TME-indipendenti mill-preżentazzjoni tal-espressjoni/kumpless tal-istokompatibilità maġġuri (MHC) tal-antiġenu konness tagħhom minn ċelluli malinni - timmedja l-effikaċja kontra t-tumur.
Iċ-ċelluli CD4+ T jimmedjaw l-effikaċja kontra t-tumur ta' antiġeni ta' recall
Biex niddeterminaw liema kompartiment(i) adattivi jispjegaw l-effikaċja kontra t-tumur tar-risponsi għall-irtirar tal-poljo (indipendenti mir-replikazzjoni virali), qabbilniha t-trattament bl-UVP fil-ġrieden CD8+ taċ-ċelluli T u taċ-ċelluli B k/o relattiva għall-wt ġrieden (figura 3A). Il-ġrieden CD4 k/o ma ġewx ittestjati minħabba r-rwol taċ-ċelluli CD4+ T li jippermettu kemm ir-rispons taċ-ċelluli CD8+ T kif ukoll taċ-ċelluli B għat-tilqim. Kif mistenni, l-immunizzazzjoni tal-poljo fil-ġrieden WT u CD8 k/o, iżda mhux ġrieden b-cell k/o, wasslet għall-produzzjoni ta 'antikorpi anti-PVSRIPO (figura 3B). It-tkabbir tat-tumur B16 kien simili f'kull kuntest ġenetiku wara trattament finta. Relattivament għall-ġrieden wt, l-effikaċja kontra t-tumur tal-UVP fil-ġrieden immunizzati bil-poljo kienet limitata f'ġrieden CD8 k/o f'punti ta' żmien aktar tard iżda tjiebet fil-ġrieden b-cell k/o (figura 3C; p=0.007wt vs B-cell k/o kurvi trattati UVP, ANOVA f'żewġ direzzjonijiet). Barra minn hekk, iċ-ċelluli B k/o ma pprovdewx l-influss ta' eosinofili jew CD4+ TILs (figura supplimentari onlajn S6A) assoċjati ma' sejħa lura tal-poljo (figura 1). Għalhekk, l-effikaċja kontra t-tumur tal-irtirar tal-poljo hija parzjalment dipendenti fuq iċ-ċelluli CD8+ T u hija limitata miċ-ċelluli B. Dawn l-osservazzjonijiet, flimkien ma' żieda ta' CD4+ TILs wara terapija mRIPO fi ġrieden immunizzati bil-poljo (figura 1E), jimplikaw li ċ-ċelluli CD{4+ T jiddettaw l-effikaċja kontra t-tumur tar-reazzjonijiet ta' recall tal-poljo. Għalhekk, imbagħad ittestjajna l-effett kontra t-tumur tal-irtirar tal-poljo bi u mingħajr tnaqqis temporanju taċ-ċelluli T CD4+ (figura 3D, li jibda 1-jum ta' trattament minn qabel). Minkejja tnaqqis qawwi taċ-ċelluli CD4+ T fit-TDLN, it-tnaqqis taċ-ċelluli CD4+ T fit-tumur ma kienx komplut u preferenzjali naqqas il-popolazzjonijiet regolatorji taċ-ċelluli T (Treg), possibilment jispjega effetti antitumorali modesti u CD miżjuda 8+ Id-densitajiet taċ-ċelluli T wara CD4+ T-tnaqqis taċ-ċelluli T (figura 3D, figura supplimentari onlajn S6B). Madankollu, it-tnaqqis taċ-ċelluli T CD4+ kważi neħħa l-effikaċja antitumorali tal-UVP fil-ġrieden immunizzati bil-poljo u pprevjeniet ir-reklutaġġ ta 'eosinophils bi tweġiba għall-UVP (figura 3D); It-tnaqqis taċ-ċelluli CD4+ T ipprevjeni wkoll l-induzzjoni tal-granżima B fiċ-ċelluli CD{8+ T wara trattament UVP (figura supplimentari onlajn S6B). Kollettivament dawn is-sejbiet jindikaw li l-effetti kontra t-tumur u infjammatorji ta' l-irtirar tal-poljo huma dipendenti fuq iċ-ċelluli T CD4+. Li tikkonferma li ċ-ċelluli CD4+ T speċifiċi għall-poljo huma biżżejjed biex isaħħu l-effikaċja kontra t-tumur tal-viroterapija tal-poljo (b'replikazzjoni virali attiva), trasferiment adottiv ta' ċelluli CD{4+ T mill-milsa ta' ġrieden immunizzati kontra l-poljo, iżda mhux dik ta 'Tet, saħħet l-effikaċja kontra t-tumur ta' mRIPO (figura 3E, figura supplimentari onlajn S6C).
Hija tfakkar it-terapija ta' l-antiġen isaħħaħ il-funzjoni taċ-ċelluli T CD8+ antitumorali
Ċelluli T CD4+ speċifiċi għat-tumur intwerew li joqtlu direttament iċ-ċelluli tat-tumur,25–27 jinvolvu ċelluli immuni ċitotossiċi intrinsika,28 29 u jipprovdu għajnuna liċ-ċelluli T CD8+ effetturi.1–{ {7}} B'mod konsistenti ma' dan tal-aħħar, l-effetti kontra t-tumur tal-antiġeni tal-irtirar ġew osservati wara l-kunsinna fit-TME (figuri 2 u 3), kienu parzjalment dipendenti fuq ċelluli CD8+ T (figura 3C), u CD{{12 }} TILs kellhom fenotipi polifunzjonali mtejba wara terapija mRIPO fi ġrieden imlaqqma kontra l-poljo (figura 1G).
Figura 2 L-antiġeni tal-irtirar tal-poljo u t-tetnu jimmedjaw l-effikaċja kontra t-tumur. Ġrieden B16 (A) jew E0771 (B) li jġorru t-tumur immunizzati bil-poljo jew Tet ġew ittrattati intratumor b'Tet jew PVSRIPO inattivat bl-UV (UVP). (C) Ġrieden naïve jew Tenivac u IPOL imqabbla skond l-età ġew ittrattati b'PBS, Tet, jew UVP. (D) Ġrieden immunizzati bħal f'(A, B) ġew ittrattati intratumor b'mock, poly(I: C) (30µg), poly(I: C) + Tet, jew poly(I: C) + UVP kif muri. (A-D) Medja + SEM minn esperiment rappreżentattiv ta 'mill-inqas żewġ ripetizzjonijiet hija murija; l-asterisks jindikaw it-test ta' Dunnett p< 0.05 versus all other groups; online supplemental figure S5 presents extended data. IPOL, inactivated polio vaccine; i.t., intratumor; PBS, phosphate buffered saline; UVP, UV-inactivated PVSRIPO; Tet, tetanus toxoid.
Għalhekk, wara fittxejna niddeterminaw jekk il-poljo (UVP) u l-irtirar tat-Tet itejbux il-funzjoni taċ-ċelluli CD8+ T antitumorali. Għal dan il-għan, ittrasferijna b'mod adottiv CD45.1+OT-I CD8+ ċelluli T (speċifiċi għall-OVA) lil ġrieden imlaqqma bil-poljo jew Tet u ddeterminajna l-impatt tal-UVP u t-tifkira indotta minn Tet fuq B{ {7}}OVA OT-I TIL fenotipi (figura 4A). Induzzjoni ta' risponsi ta' recall fit-tumur wara UVP jew Tet kienet assoċjata ma' tkabbir ittardjat tat-tumur u żieda fl-infiltrazzjoni tat-tumur ta' ċelluli CD45.2+ endoġeni, eosinofili, u ċelluli CD4+ T konvenzjonali; notevolment, il-livelli ta 'ċelluli T antitumorali OT-I żdiedu b'mod mhux sinifikanti (figura 4B). Madankollu, analiżi taċ-ċelluli OT-I CD8+ T li jinfiltraw it-tumur żvelat granzyme B, TNF, u IFN-; u espressjoni mnaqqsa tal-markatur tal-eżawriment terminali TIM3 wara l-irtirar tal-poljo jew Tet (figura 4C). Ġiet osservata espressjoni varjata tal-fattur tat-traskrizzjoni assoċjati ma 'Th kemm fiċ-ċelluli T OT-I kif ukoll endoġeni, inkluż dik ta' GATA3, ROR t, u BCL6 (figura 4C). Analiżi transcriptomic ta 'OT-I TILs wara sejħa għall-poljo żvelat espressjoni akbar ta' granzymes; ġeni marbuta mal-attivazzjoni taċ-ċelluli T, funzjoni, jew omeostażi (Taok3, CD86, CCR5, Egr2, Adgre1, Vdr, IRF4, u BCL6); ġeni assoċjati mal-immunità Th1 (Ptger4, Fgl2); kif ukoll ġeni assoċjati mal-immunità Th2 (Alox15, Ccl8, u GATA3) (figura 4D, figura supplimentari onlajn 8C). Aħna kkonfermajna dawn l-osservazzjonijiet billi ttestjajna l-impatt tat-tifkira tal-poljo fuq CD8+ TILs speċifiċi ta' TRP2-endoġenu (antiġen B16 endoġenu) f'tumuri B16 mingħajr espressjoni OVA. TRP2-CD speċifiċi{8+ TILs urew żieda fil-granżima B u espressjoni mnaqqsa ta' TIM3 wara l-irtirar tal-poljo b'mod dipendenti fuq iċ-ċelluli T CD{4+ (figura supplimentari S9 onlajn). Flimkien, din id-dejta tindika fenotipi ċitolitiċi u funzjonali mtejba taċ-ċelluli T antitumorali wara l-irtirar tal-poljo. Funzzjonalment juri immunità mtejba taċ-ċelluli T antitumorali wara li tfakkar, ċelluli T iżolati mill-milsa tal-ġrieden ittrattati biha jfakkru l-antiġen (UVP fil-poljo mlaqqma, jew Tet f'Tenivac mlaqqma) ittardja t-tkabbir tat-tumur wara t-trasferiment lil riċevituri naive (figura 4E). Iċ-ċelluli CD4+ T jgħinu biex jippromwovu l-funzjoni taċ-ċelluli T CD{8+ antitumorali parzjalment permezz tas-sinjalar CD40L lil CD40 fuq ċelluli li jippreżentaw l-antiġenu,1 iżda jistgħu jgħinu wkoll liċ-ċelluli CD8+ T antitumorali indipendenti ta 'CD40L.31 Imblokk CD40L ma pprevjenix eosinophil indott mill-UVP, ċellula CD4+ T konvenzjonali, jew influss ta' OT-I T antitumorali; lanqas ma antagonizza l-effetti kontra t-tumur (figura supplimentari onlajn S10). Barra minn hekk, il-ligazzjoni CD40 ma rrikapitulatx l-influss ta 'eosinophil osservat wara terapija ta' antiġeni ta 'recall (figura supplimentari onlajn S10). Għalhekk, l-irtirar taċ-ċelluli CD4+ T isaħħaħ il-funzjoni antitumorali taċ-ċelluli CD8+ T antitumorali b'mod indipendenti minn CD40L.
Figura 3 Iċ-ċelluli CD4+ T jimmedjaw l-effikaċja kontra t-tumur tal-irtirar tal-poljo. (A) Disinn għal esperimenti f'(B, C). (B) ELISA għal antikorpi kontra l-poljo f'kull sfond ġenetiku fil-jum 0 (n=4/grupp). (C) Volum medju tat-tumur + SEM wara trattament finta (xellug) jew trattament mock versus UVP (pannelli tal-lemin) għal kull kuntest tal-ġenotip; valuri p huma minn paragun ta 'analiżi ta' varjanza f'żewġ direzzjonijiet (ANOVA) ta 'UVP għall-grupp ta' kontroll. (D) Ġrieden immunizzati bil-poljo ġew ittrattati b'mock jew UVP bħal f'(A), b'injezzjonijiet intraperitoneali (ip) ta' IgG (kontroll) jew CD4+ antikorp li jbattu ċ-ċelluli T (250µg mogħtija kull 3 ijiem b'jum −1); volum medju tat-tumur + SEMand analiżi taċ-ċitometrija tal-fluss tat-tumuri li jinfiltraw ċelluli T CD4 u eosinophils huma murija; n=9 għal kull grupp; valur p huwa minn ANOVA f'żewġ direzzjonijiet li tqabbel UVP IgG kontra UVP CD4; (*) jindika l-post hoc ta' Tukey p<0.05. (E) CD4+ T cells from spleens of mice immunized with Tet (control) or polio were adoptively transferred to naïve B16 tumor-bearing recipients 1day-prior to intratumor treatment with DMEM or mRIPO. Mean tumor volume+SEM for mock or mRIPO treated mice for each CD4+ T-cell transfer condition; p values are from two-way ANOVA comparison of the two curves shown in each panel. See online supplemental figure S6 for extended data. DMEM, Dulbecco's Modified Eagle Medium; i.t., intratumor; UVP, UVinactivated PVSRIPO; Tet, tetanus toxoid; mRIPO, mouse adapted PVSRIPO; Tconv, conventional CD4+ T cells.
Figura 4 It-terapija ta' l-antiġen tat-tifkira ta' intratumor issaħħaħ il-funzjoni taċ-ċelluli T ta' CD8+ antitumor. (A) Ġrieden immunizzati kontra poljo jew Tet (Tenivac) ġew impjantati b'tumuri B16-OVA, segwiti minn trasferiment adottiv ta' ċelluli OT-I attivati (CD45.{1+), u trattament jew b'Tet jew UVP . (B) Analiżi taċ-ċitometrija tal-volum tat-tumur u tal-fluss taċ-ċelloli immuni (B) u sottosettijiet TIL (C); figura supplimentari onlajn S7 tippreżenta gating ta 'OT-I TILs. (D) Traskritomi ta 'OT-I TILs iżolati minn ġrieden immunizzati bil-poljo 12-il jum wara t-trattament (DMEM jew UVP) ġew analizzati. L-għadd medju normalizzat taċ-ċentru u l-iskala jintwera għal traskrizzjonijiet li kienu differenti b'mod sinifikanti wara aġġustament tal-valur p tar-rata ta' skoperta falza f'żewġ esperimenti separati (pannell ta' fuq, n=4/grupp, u n=3/grupp, rispettivament ) jew għal karatteristiċi rilevanti għal (C) li ressqu sinifikat fiż-żewġ settijiet ta’ dejta, inklużi granzymes, IRF4, BCL6, u GATA3 (pannell ta’ isfel); n=4 repliki/grupp jintwerew f'mappa tas-sħana. Il-figura supplimentari onlajn S8B u C tippreżenta għadd normalizzat għal kampjuni individwali u dejta estiża. (E) Progressjoni tat-tumur fil-ġrieden naïve trasferiti b'mod adottiv b'ċelluli T mill-milsa tal-ġrieden f'A-C. Il-volum medju tat-tumur+SEM huwa muri; il-valur p huwa minn analiżi f'żewġ direzzjonijiet tal-varjanza. Il-vireg tad-dejta kollha jirrappreżentaw il-medja + SEM; il-mapep tas-sħana f'(C) ġew normalizzati b'medja ta' darbiet tal-kontroll tal-antiġenu mhux imqabbel; It-test post hoc ta’ Tukey p<0.05 relative to all other groups (#) or respective DMEM control (*). (A–C) pooled results from two experiments; data in (E) were repeated twice. DMEM, Dulbecco's Modified Eagle Medium; TIM3, T cell immunoglobulin and mucin domain-containing protein 3; IFN, interferon; i.t., intratumor; OVA, ovalbumin; PD1, programmed cell death protein-1; UVP, UV inactivated PVSRIPO; Tet, tetanus toxoid; TIL, tumor-infiltrating lymphocytes; TNF, tumor necrosis factor.
L-eosinophils li jinfiltraw it-tumur jassoċjaw b'mod invers ma' Tregs f'tumuri umani
L-ingaġġ ta 'effettituri immuni kontra t-tumur oħra permezz ta' sekrezzjoni taċ-ċitokini huwa mekkaniżmu ewlieni indipendenti minn CD40L taċ-ċelluli CD4+ T.31 32 Huwa polio capsid (UVP) u virotherapy (mRIPO) b'mod konsistenti kkawżaw infiltrazzjoni robusta ta 'eosinophils ( figuri 1, 3 u 4), b'mod dipendenti fuq iċ-ċelluli T CD4+ (figura 3D). L-influss ta' eosinofili tat-tumur jassoċja mar-rispons ta' l-immunoterapija,33–35 u xogħol reċenti wera li ċ-ċelluli CD4+ T jimpjegaw funzjonijiet antitumorali ta' eosinofili wara l-imblokk ta' PD1 permezz ta' IL-5.36 L-ewwel, staqsejna jekk id-densità tal-eosinofili tikkorrelatax ma' dik taċ-ċelluli CD4+ T jew karatteristiċi oħra fit-TME ta’ tumuri umani billi wieħed jistaqsi sett ta’ dejta pan-kanċer minn The Cancer Genome Atlas (TCGA).37 Bl-użu ta’ CIBERSORT38 tbassir ta’ infiltrati taċ-ċelluli,37 kampjuni minn kull tip ta’ kanċer. kienu stratifikati bil-preżenza jew in-nuqqas ta 'firem ta' espressjoni tal-ġeni eosinophil misjuba (figura 5A, figura supplimentari onlajn S11,12); It-Tumuri taċ-Ċelloli Ġerminali Testikulari (TGCT) u l-Melanoma Uveali (UVM) ġew esklużi minħabba każijiet limitati b’arrikkiment eosinofili (n<3). While limited association of eosinophil presence was observed with CD8+ or CD4+ T-cell enrichment, eosinophil presence was associated with significantly lower Treg signatures across all cancer types (figure 5A, online supplemental figure S11B, C). Eosinophil presence was associated with longer survival in Low-Grade Glioma (LGG), where eosinophil density was also the highest (online supplemental figure S11A), but not in other tumor types (figure 5B, online supplemental figure S11D). Importantly, significant differences in Treg density on stratification by eosinophil enrichment were observed within several cancer types, with heterogenous relationships between CD4+ and CD8+ T-cell density (online supplemental figure S12). Notably, eosinophil influx was associated with reduced Treg proportions after polio recall in our studies (figures 1E and 4B, online supplemental figure S2). Together, these data may reflect a role for eosinophils in countering tumor-infiltrating Tregs.
cistanche tubulosa-titjib tas-sistema immuni
Ikklikkja hawn biex tara l-prodotti Cistanche Enhance Immunity
【Staqsi għal aktar】 Email:cindy.xue@wecistanche.com / Whats App: 0086 18599088692 / Wechat: 18599088692
Immunità tat-tip II kontra t-tumur wara trattament mRIPO ta 'ġrieden immunizzati bil-poljo
Sussegwentement fittxejna niddeterminaw is-sinifikat tal-infiltrazzjoni tal-eosinofili wara l-irtirar tal-poljo fil-ġrieden. L-eosinofili huma medjaturi tar-risponsi immuni tat-tip II, li għandhom rwoli fl-immunità kontra l-elminti u l-infjammazzjoni allerġika.39 Ir-reklutaġġ tal-eosinofili jista' jiġi medjat minn medjaturi immuni tat-tip II oħra, inklużi ILC2s, li jikkoordinaw risponsi Th2 permezz ta' interazzjonijiet diretti ma' CD{{4} } Iċ-ċelluli T,40 jesprimu l-fattur ta' traskrizzjoni GATA3 u l-eosinofili li jippromwovu ċ-ċitokin IL-5, iżda m'għandhomx espressjoni tar-riċettur taċ-ċelluli T. Tabilħaqq, iċ-ċelluli GATA3+ CD3Neg żdiedu fit-tumuri tal-ġrieden wara li tfakkar (figura 5C), possibbilment jirrifletti l-influss ILC2. Imbagħad ittestjajna kif l-eosinofili għandhom impatt fuq il-viroterapija tal-poljo (mRIPO) fi ġrieden immunizzati bil-poljo, u kejlu ILC2s direttament. It-tnaqqis tal-eosinofili (permezz ta' newtralizzazzjoni IL{-541) ttaffi l-effetti kontra t-tumur tal-mRIPO fil-ġrieden li jkollhom B{{16-OVAhCD155, immunizzati bil-poljo (figura 5D, E); ma naqqasx l-influss taċ-ċelluli T CD4+; iżda tnaqqis imblukkat fil-proporzjon Treg (figura 5F). Barra minn hekk, hija viroterapija tal-poljo (mRIPO) wasslet għal influss ILC2 (figura 5F) u mibdula fenotipi ILC2 fil-ġrieden immunizzati bil-poljo, b'IL-5 imnaqqsa u indotta espressjoni PD1 u granzyme B (figura 5G). Minbarra r-rwol tiegħu fil-kontroll tal-livelli tal-eosinofili, IL-5 huwa wkoll kritiku għad-divrenzjar taċ-ċelluli B.42 Madankollu, peress li l-effetti kontra t-tumur tal-irtirar tal-poljo huma indipendenti minn—u possibilment miġġielda minn—ċelluli B (figura 3C), u minħabba l-infiltrazzjoni konsistenti tal-eosinophil robusta fuq ir-recall tal-poljo, aħna nikkonkludu li n-newtralizzazzjoni tal-IL-5 tnaqqas l-effetti kontra t-tumur tal-polio recall permezz tat-tnaqqis tal-eosinophil. Kollettivament, din id-dejta turi rwoli antitumorali għall-eosinofili u r-reklutaġġ ta 'ILC2s b'fenotipi mibdula wara l-irtirar tal-poljo u timplika li l-eosinofili jirregolawha d-densitajiet Treg.
Antikorpi anti-poljo eżistenti minn qabel huma assoċjati ma' sopravivenza itwal wara terapija Lerapolturev (PVSRIPO); eosinophils periferali jiżdiedu wara Lerapolturev
In trials of Lerapolturev in rGBM9 and melanoma,10 all patients were confirmed seropositive for anti-PVSRIPO neutralizing antibodies (from polio vaccine crossreacting antibodies) at the time of enrollment, a feature anticipated to correlate with pre-existing PVSRIPO specific CD4+ T-cell immunity. We queried both phase I (n=61)9 and II (n=72 at the time of data cut-off) clinical rGBM cohorts for the relationship between pretreatment Lerapolturev neutralizing antibodies and survival. In both cohorts, patients living >18-il xahar wara Lerapolturev (sopravivenza medjana tipika fl-rGBM hija ta '~9 xhur)9 43 kellha titri ta' antikorpi newtralizzanti minn qabel it-trattament b'mod sinifikanti ogħla (figura 6A, B). Biex nindirizzaw jekk ir-risponsi immuni tat-tip II jistgħux ikunu involuti jew le f'pazjenti kkurati biha viroterapija tal-poljo, aħna analizzajna CBCs lonġitudinali disponibbli minn prova żgħira ta 'eskalazzjoni tad-doża ta' Lerapolturev f'melanoma rikorrenti u mhux resectable (fażi I, n=12) .10 11 Din id-dejta wriet żieda fil-livelli ta' eosinofili fid-demm wara Lerapolturev fi 8/12-il pazjent (figura 6C), li tikkoinċidi ma' tnaqqis fin-newtrofili (10/12-il pazjent). Dawn is-sejbiet jistgħu jindikaw li l-immunità pre-eżistenti tikkontribwixxi għall-effikaċja kontra t-tumur tal-viroterapija tal-poljo u li l-viroterapija tal-poljo tinduċi risponsi immuni tat-tip II f'pazjenti bil-kanċer.
Figura 5 Eosinophils jassoċjaw b'mod invers ma' Tregs f'tumuri umani; mRIPO jinduċi immunità tat-tip II kontra t-tumur fil-ġrieden immunizzati bil-poljo. (A) CIBERSORT dekonvoluted T-cell subsets fit-tipi ta 'kanċer The Cancer Genome Atlas (n=29) stratifikati skond l-istatus ta' eosinophil, valuri p minn t-test paired. (B) HRs (sopravivenza) ± 95% CIs għall-istatus ta 'eosinophil skond it-tip ta' kanċer; tipi ta' kanċer b'inqas minn 20 mewt ġew esklużi; Il-valuri p huma mit-test tal-log-rank Mantel-Cox. (C) Perċentwal ta 'ċelluli GATA3+ CD3Neg mid-dejta fil-figura 4C, il-valuri p huma mit-test t mhux imqabbad. (D) Disinn għal (E–H): ġrieden transġeniċi immunizzati kontra l-poljo, B{16-OVAhCD155 li jġorru t-tumur155-ġrieden transġeniċi ġew ittrattati b'finta jew PVSRIPO ± tnaqqis tal-eosinofili (anti-IL-5 jew kontroll IgG, 1mg kull ġimgħa). Volum medju tat-tumur+SEM (E), eosinofili u densità ta' ILC2 fit-tumuri (F), u fenotip ta' ILC2s li jinfiltraw it-tumur (lineageNegCD90+ CD127+ CD25+) kontra CD negattiv tan-nisel 90+ ċelloli għal tqabbil huma murija (G). (E) (*)Analiżi f'żewġ direzzjonijiet tal-varjanza p<0.05; (F–G) (*)Tukey's post hoc test p< 0.05 versus mock+IgG control. Online supplemental figure S11–S13 presents extended data. IL, interleukin; ILC2, type 2 innate lymphoid cell; i.p., intraperitoneal; i.t., intratumor; OVA, ovalbumin; PD1, programmed cell death protein-1; UVP, UV-inactivated PVSRIPO; Tet, tetanus toxoid; Tregs, regulatory T cells; mRIPO, mouse-adapted PVSRIPO.
Ċiniż herb cistanche plant-Antitumor
DISKUSSJONI
Dan ix-xogħol jiżvela l-potenzjal tal-immunoterapija tal-kanċer tal-irtirar taċ-ċelluli T CD4+ lokalizzati fit-tumur. CD4+ L-għajnuna taċ-ċelluli T hija essenzjali biex tiġġenera CD antitumorali kompletament funzjonali8+ immunità taċ-ċelluli T1 44 u memorja fit-tul.2 45 CD kontra t-tumur8+ Iċ-ċelluli T wrew fenotipi polifunzjonali akbar wara r-recall, it-trasferiment ta 'ċelluli T adottivi minn ġrieden ittrattati b'antiġen ta' recall ittardja t-tkabbir tat-tumur f'riċevituri naïve, u l-effetti antitumorali tal-UVP ġew ikkontrollati f'ġrieden immunizzati bil-poljo nieqsa minn ċelluli CD8+ T. Dan jindika li l-provvista ta' ċelluli CD4+ T tgħin għaċ-ċelluli CD8+ T antitumorali. Tabilħaqq, l-għajnuna taċ-ċelluli T CD4+ hija marbuta mar-regolazzjoni 'l isfel tal-markatur ta' l-eżawriment, espressjoni għolja ta' TNF/IFN-/granzyme B, u induzzjoni ta' Tbet/IRF4 f'ċelluli T effetturi 'megħjuna',3 li kollha seħħew bil-poljo. viroterapija fi ġrieden immunizzati. Tali għajnuna taċ-ċelluli T x'aktarx hija multidimensjonali, inkluż il-'liċenzjar' tad-DCs; Sekrezzjoni taċ-ċelluli T CD4+ taċ-ċitokini (eż., IL-21, IFN-); Riprogrammazzjoni TME; jew permezz ta' effetti pożittivi ta' eosinophils reklutati fuq is-sorveljanza immuni taċ-ċelluli CD8+ T.36 46 Possibbilment minħabba l-attività ta' antikorpi newtralizzanti tal-poljo li jillimitaw l-attivazzjoni taċ-ċelluli T CD{4+ billi titnaqqas id-disponibbiltà ta' l-antiġeni ta' recall. jew il-persistenza, iċ-ċelluli B kienu kontroproduttivi għall-effetti kontra t-tumur tal-irtirar tal-poljo. L-irtirar tal-poljo medja b'mod konsistenti risponsi antitumorali u infjammatorji aktar b'saħħithom minn dak ta 'Tet fl-istudji tagħna. Possibbiltà waħda hija li dan huwa dovut għal differenzi fl-intensità u/jew il-kwalità tal-immunità pre-eżistenti indotta wara t-tilqim kontra l-poljo kontra Tet fis-sistemi mudell tagħna. B'appoġġ għal din il-possibbiltà, l-effetti kontra t-tumur ta' Tet u UVP kienu simili meta ġrieden ġew immunizzati b'vaċċin IPOL ta' grad kliniku (figura 2C), li kkaġuna immunità kontra l-poljo aktar dgħajfa mill-istrateġija ta' tilqim kontra l-poljo (PVSRIPO + ALH) użata għal esperimenti oħra f' l-istudju tagħna (figura supplimentari onlajn S1B). Madankollu, huwa wkoll stabbilit sew li n-natura tal-antiġen (eż., id-densità tal-epitopi, li x'aktarx hija ogħla fil-kapsid tal-poljo) tista' tinfluwenza r-risponsi immuni adattivi. 47 48 L-effikaċja kontra t-tumur tat-tifkira tal-poljo tiddependi biss parzjalment fuq iċ-ċelluli CD8+ T. It-terapija tal-antiġeni ta 'recall ikkawżat influss ta' eosinofili u ILC2, u t-tnaqqis tal-eosinofili naqqas l-effetti kontra t-tumur fi ġrieden immunizzati bil-poljo kkurati b'mRIPO. Filwaqt li jenfasizzaw l-importanza tal-kuntest, kemm l-eosinofili kif ukoll l-ILC2s intwerew ukoll li jimmedjaw l-effetti protumoriġeniċi.49 50 Fl-ażma, iċ-ċelluli CD{4+ T jirreklutaw eosinophils51 permezz tal-ILC2s.52 ILC2s jesprimu MHC klassi II u jxerrdu r-risponsi Th2 f' infezzjonijiet tal-elminti.40 Fil-kanċer, l-infiltrazzjoni tal-eosinofili tat-tumur hija marbuta mar-rispons tal-immunoterapija,33 34 l-eosinofili intwerew li jappoġġjaw is-sorveljanza immuni taċ-ċelluli T CD{8+,46 u l-ILC2s jikkontribwixxu għall-effikaċja kontra t-tumur kontra PD1. 35 53 Ix-xogħol tagħna jindika li l-funzjonijiet antitumorali tal-eosinofili, u possibilment dik tal-ILC2s, jistgħu jiġu involuti miċ-ċelluli CD4+ T. Kif is-CD4+ t-tifkira taċ-ċelluli T tirrekluta l-eosinofili għat-tumur għad irid jiġi ddeterminat bis-sħiħ, madankollu, xogħol reċenti jipprovdi spjegazzjoni potenzjali billi juri li matul l-imblokk tal-PD1 sekrezzjoni IL{-5 minn CD4+ Iċ-ċelluli T jinduċu l-espansjoni tal-eosinofili u r-reklutaġġ tiegħu.36 Barra minn hekk, l-analiżi taċ-ċitokini tal-omoġenati tat-tumur u l-esplants tat-TDLN wara viroterapija tal-poljo wriet ukoll żieda fil-GM-CSF u IL-5 li jippromwovu l-eosinofili fi ġrieden immunizzati bil-poljo (figura supplimentari onlajn S2B ).
Figura 6 Antikorpi anti-poljo eżistenti minn qabel huma assoċjati ma' sopravivenza itwal wara terapija Lerapolturev (PVSRIPO); eosinophils periferali jiżdiedu wara Lerapolturev. (A, B) It-titri ta 'newtralizzazzjoni tas-serum Lerapolturev ta' qabel it-trattament ġew imkejla fi provi ta 'glioblastoma rikorrenti (rGBM) fażi I (A, Ph1, NCT01491893) u fażi II (B, Ph2, NCT02986178). Sopravivenza wara separazzjoni b'titru medjan ta' newtralizzazzjoni (1:2000), flimkien ma' titer medju + SEM għal pazjenti li jibqgħu ħajjin
Skoprejna wkoll relazzjoni inversa bejn l-influss tal-eosinofili tat-tumur u d-densità tat-Treg fit-tumuri tal-bniedem, u t-terapija tal-antiġen tat-tifkira wasslet għal proporzjonijiet imnaqqsa ta’ Tregs li kovarjaw mal-influss tal-eosinofili, li jimplika rwol reċiproku tal-eosinofili fil-kontroll taċ-ċelluli T CD4+ bijoloġija. Id-determinazzjoni preċiża ta' kif l-eosinofili jimmedjaw l-effetti kontra t-tumur wara t-tifkira taċ-ċelluli T CD4+, u jekk ILC2s jikkontribwixxux għal dan il-proċess jeħtieġ aktar studju. Id-differenzi fid-densità ta 'eosinofili waħedhom ma jidhrux li huma pronjostiċi fil-biċċa l-kbira tat-tipi ta' kanċer, bl-eċċezzjoni potenzjali ta 'LGG, fejn il-livelli ta' eosinofili kienu wkoll l-ogħla fost it-tipi ta 'tumur l-oħra kollha. Interessanti, korrelazzjoni negattiva bejn eosinophils periferali u l-grad glijoma ġiet irrappurtata54; u allerġiji respiratorji u atopy huma assoċjati ma 'inċidenza ta' glijoma aktar baxxa.55 Aħna użajna strateġiji ta 'vaċċinazzjoni polarizzanti Th2, konsistenti mal-użu kliniku ta' vaċċini kontra l-poljo u t-tetnu, biex niddeċifraw il-potenzjal kontra t-tumur tal-irtirar taċ-ċelluli T CD4+. Filwaqt li—kanonikament—il-polarizzazzjonijiet Th1/Tc1, Th2/Tc2, u Th17/Tc17 huma esklussivi reċiprokament, it-terapija tal-antiġen fakkru f’dan il-kuntest ipproduċiet Th1 (ingaġġ taċ-ċelluli T CD8+, espressjoni Tbet/IFN- f’CD{{ 20}} ċelluli T); Th2 (reklutaġġ ta' eosinofili/ILC2, espressjoni GATA3 fiċ-ċelluli CD4+ T); u sa ċertu punt, Th17 (espressjoni ROR t fiċ-ċelluli CD4+ /CD{8+ T) polarizzanti. Din id-dejta żżid ma’ evidenza dejjem tikber li polarizzazzjonijiet differenti taċ-ċelluli CD4+ T, lil hinn minn dak ta’ Th1, jistgħu jiġġeneraw risponsi immuni kontra t-tumur kompatibbli u produttivi.56–58 Ix-xogħol tagħna juri li, filwaqt li l-immunità pre-eżistenti tillimita r-replikazzjoni virali fi ħdan it-tumur, isaħħaħ l-effikaċja kontra t-tumur tal-viroterapija tal-poljo. Limitazzjoni ta' dan ix-xogħol hija li twettqet f'sistemi murini li ma jaqbdux l-eteroġeneità jew tar-risponsi taċ-ċelluli T CD4+ tal-memorja tal-poljo/Tet jew tat-TME fil-bnedmin. Barra minn hekk, minħabba t-tkabbir mgħaġġel tal-mudelli tat-tumur użati, it-tumuri kienu relattivament żgħar fil-ħin tal-bidu tat-trattament. Madankollu, li jissuġġerixxi l-applikabbiltà tal-osservazzjonijiet tagħna għall-bnedmin, it-titri tal-antikorpi li jinnewtralizzaw il-poljo minn qabel kienu ogħla f'pazjenti b'rGBM li għexu aktar wara viroterapija tal-poljo, u l-livelli ta' eosinofili fid-demm żdiedu fil-maġġoranza tal-pazjenti b'melanoma (8/12) wara t-trattament b'dan. viroterapija tal-poljo (Lerapolturev). Bħala twissija, titri ogħla ta' antikorpi newtralizzanti tal-poljo jistgħu jirriflettu status funzjonali immuni superjuri. Filwaqt li ma nistgħux neskludu din il-possibbiltà, din id-dejta għall-inqas tiżvela li l-immunità pre-eżistenti ma tipprekludix viroterapija tal-poljo b'suċċess fil-pazjenti. L-osservazzjonijiet tagħna jimplikaw ukoll li dożaġġ multiplu ta 'Lerapolturev jista' jkun iġġustifikat biex jaċċentwa l-effetti kontra t-tumur tal-irtirar tal-poljo. Tabilħaqq, ir-risponsi f'pazjenti b'melanoma kkurati b'Lerapolturev inġabru fil-koorti bl-ogħla numru ta' trattamenti tiegħu.10 Minħabba l-importanza eminenti taċ-ċelluli CD4+ T fl-immunoterapija tal-kanċer,1 32 sforzi li qed jikbru jimmiraw li jinfluwenzaw Iċ-ċelluli CD{42}} jgħinu fit-tumuri, pereżempju, b'antikorpi agonistiċi CD40,59 jew b'vaċċini peptidi inklużi epitopi MHC klassi II44 li jmexxu CD4+ u CD8+ T speċifiċi għan-neoantiġen ċelluli.60 Ix-xogħol tagħna jikxef il-potenzjal li jiġu sfruttati ċelluli CD4+ T tal-memorja speċifika għat-tilqima tat-tfulija biex jiġu involuti mekkaniżmi multidimensjonali kontra t-tumur taċ-ċelluli CD4+ T.
REFERENZI
1 Borst J, Ahrends T, Bąbała N, et al. Iċ-ċelloli Cd4+ T jgħinu fl-immunoloġija tal-kanċer u fl-immunoterapija. Nat Rev Immunol 2018;18:635–47.
2 Ahrends T, Busselaar J, Severson TM, et al. Iċ-ċelluli Cd4+ T jgħinu biex jinħolqu ċelluli CD8+ T tal-memorja b'kapaċitajiet ta' tfakkar innati u indipendenti mill-għajnuna. Nat Commun 2019;10:5531.
3 Ahrends T, Spanjaard A, Pilzecker B, et al. Iċ-ċelluli CD4+ t jgħinu biex jagħtu programm effettur taċ-ċelluli t ċitotossiċi inkluż ir-regolazzjoni baxxa tar-riċetturi koinibitorji u żieda fl-invażività tat-tessuti. Immunità 2017;47:848–61.
4 Schenkel JM, Fraser KA, Beura LK, et al. Memorja taċ-ċelluli T. ċelluli T CD8 tal-memorja residenti jqanqlu risponsi immuni protettivi innati u adattivi. Xjenza 2014;346:98–101.
5 Ariotti S, Hogenbirk MA, Dijkgraaf FE, et al. Memorja taċ-ċelluli T. ċelluli cd8+t tal-memorja residenti fil-ġilda jikkawżaw stat ta' twissija ta' patoġenu fit-tessut kollu. Xjenza 2014;346:101–5.
6 Rosato PC, Wijeyesinghe S, Stolley JM, et al. Iċ-ċelluli t tal-memorja speċifiċi għall-virus jimla t-tumuri u jistgħu jerġgħu jintużaw għall-immunoterapija tat-tumur. Nat Commun 2019;10:567.
7 Çuburu N, Bialkowski L, Pontejo SM, et al. L-użu tal-immunità kontra ċ-ċitomegalovirus għal immunoterapija lokali kontra tumuri solidi. Proc Natl Acad Sci USA 2022;119:e2116738119.
8 Gromeier M, Lachmann S, Rosenfeld MR, et al. Rekombinanti interġeneriċi tal-poljovirus għat-trattament tal-glijoma malinna. Proc Natl Acad Sci USA 2000;97:6803–8.
9 Desjardins A, Gromeier M, Herndon JE 2nd, et al. Glijoblastoma rikorrenti kkurata b'poljovirus rikombinanti. N Engl J Med 2018;379:150–61.
10 Beasley GM, Nair SK, Farrow NE, et al. Prova ta' Fażi I ta' PVSRIPO intratumorali f'pazjenti b'melanoma mhux resectable u refrattorja għat-trattament. J Immunother Cancer 2021;9:e002203.
11 Beasley GM, Brown MC, Farrow NE, et al. Analiżi multimodalità tagħti benefiċċju pronjostiku ta 'mikroambjent tat-tumur infiltrat taċ-ċelluli T u status immuni periferali f'pazjenti b'melanoma. J Immunother Cancer 2022;10:e005052.
12 Brown MC, Mosaheb MM, Mohme M, et al. Infezzjoni virali taċ-ċelloli fil-mikroambjent tat-tumur timmedja l-immunoterapija kontra t-tumur permezz ta' sinjalazzjoni selettiva ta' tbk1-irf3. Nat Commun 2021;12:1858.
13 Brown MC, Holl EK, Boczkowski D, et al. L-immunoterapija tal-kanċer b'poljovirus rikombinanti tinduċi attivazzjoni dominanti ta' IFN ta' ċelluli dendritiċi u CTLs speċifiċi għall-antiġen tat-tumur. Sci Transl Med 2017;9:eaan4220.
14 Holl EK, Brown MC, Boczkowski D, et al. Poliovirus onkolitiku rikombinanti, PVSRIPO, għandu effetti ċitotossiċi qawwija u infjammatorji intrinsiċi, li jimmedjaw terapija f'mudelli ta 'xenograft tal-kanċer tas-sider uman u tal-prostata. Oncotarget 2016;7:79828–41.
15 Yang Y, Brown MC, Zhang G, et al. Il-viroterapija tal-poljo timmira l-infiltrat majelojde tal-glijoma malinna b'attivazzjoni diffusa tal-mikroglia li tinġibed is-CNS. Neuro Oncol 2023:noad052.
16 Brown MC, Bryant JD, Dobrikova EY, et al. Induzzjoni ta' traduzzjoni virali, 7-methyl-guanosine indipendenti mill-kappa u onkolisi permezz ta' effetti medjati minn kinase li jinteraġixxu ma' protein kinase attivat minn mitoġenu fuq is-serine/arginine-rich protein kinase. J Virol 2014;88:13135–48.
17 Hawken J, Troy SB. Adjuvants u vaċċin tal-poljo inattivat: reviżjoni sistematika. Vaċċin 2012;30:6971–9.
18 Swain SL. Ġenerazzjoni u persistenza in vivo ta 'ċelluli tal-memorja polarizzati th1 u th2. Immunità 1994;1:543–52.
19 Mosaheb MMet al. Vetturi tal-poljovirus ġenetikament stabbli jattivaw ċelluli dendritiċi u l-immunità taċ-ċelluli T CD8 antitumorali ewlenija. Nat Commun 2020;11:524.
20 Blanchard C, Rothenberg ME. Bijoloġija ta 'l-eosinophil. Adv Immunol 2009;101:81–121.
21 Mittrücker HW, Matsuyama T, Grossman A, et al. Rekwiżit għall-fattur ta' traskrizzjoni lsirf/irf4 għall-funzjoni tal-limfoċiti b u t maturi. Xjenza 1997;275:540–3.
22 Groeneveldt C, Kinderman P, van Stigt Thans JJC, et al. L-immunità taċ-ċelluli t speċifika għar-reovirus indotta minn qabel ittejjeb l-effikaċja kontra l-kanċer tat-terapija tar-reovirus. J Immunother Cancer 2022;10:e004464.
23 Selvanesan BCet al. Listeria tagħti proteina tat-tossojde tat-tetnu lil tumuri tal-frixa u tinduċi mewt taċ-ċelluli tal-kanċer fil-ġrieden. Sci Transl Med 2022;14:eabc1600.
24 Tähtinen S, Feola S, Capasso C, et al. L-isfruttament tal-immunità preeżistenti biex ittejjeb l-immunoterapija tal-kanċer onkolitiku. Cancer Res 2020;80:2575–85.
25 Cachot A, Bilous M, Liu YC, et al. Ċelloli t cd4 ċitolitiċi speċifiċi għat-tumur jimmedjaw l-immunità kontra l-kanċer tal-bniedem. Sci Adv 2021;7:eabe3348.
26 Oh DY, Kwek SS, Raju SS, et al. Ċelloli intratumorali cd4+ t jimmedjaw iċ-ċitotossiċità kontra t-tumur fil-kanċer tal-bużżieqa tal-awrina tal-bniedem. Ċellula 2020;181:1612–25. 27 Quezada SA, Simpson TR, Peggs KS, et al. Iċ-ċelluli T CD4 (+) reattivi għat-tumur jiżviluppaw attività ċitotossika u jeqirdu melanoma kbira stabbilita wara t-trasferiment f'ospiti limfopeniċi. J Exp Med 2010;207:637–50.
28 Perez-Diez A, Joncker NT, Choi K, et al. Iċ-ċelloli Cd4 jistgħu jkunu aktar effiċjenti fir-rifjut tat-tumur minn ċelloli CD8. Demm 2007;109:5346–54.
29 Corthay A, Skovseth DK, Lundin KU, et al. Rispons immuni primarju kontra t-tumur medjat minn ċelluli CD4+ T. Immunità 2005;22:371–83.
30 Church SE, Jensen SM, Antony PA, et al. Ċelluli T CD4+ speċifiċi għat-tumur iżommu ċelluli T effeturi u memorja speċifiċi għat-tumur CD8+. Eur J Immunol 2014;44:69–79.
31 Lu Z, Yuan L, Zhou X, et al. Cd40-mogħdijiet indipendenti taċ-ċelluli T jgħinu għall-priming ta' limfoċiti T ċitotossiċi CD8 (+). J Exp Med 2000;191:541–50.
32 Hung K, Hayashi R, Lafond-Walker A, et al. Ir-rwol ċentrali taċ-ċelluli CD4 (+) T fir-rispons immuni kontra t-tumur. J Exp Med 1998;188:2357–68.
33 Simon SCS, Hu X, Panten J, et al. L-akkumulazzjoni tal-eosinofili tbassar rispons għat-trattament tal-melanoma b'inibituri tal-punti ta 'kontroll immuni. Onkoimmunoloġija 2020;9:1727116.
34 Mackensen A, Meidenbauer N, Vogl S, et al. Studju ta' Fażi I ta' terapija ta' ċelluli T adottivi bl-użu ta' ċelluli CD8+ T speċifiċi għall-antiġen għat-trattament ta' pazjenti b'melanoma metastatika. J Clin Oncol 2006;24:5060–9.
35 Jacquelot N, Seillet C, Wang M, et al. L-imblokk tal-molekula ko-inibitorja PD-1 joħroġ immunità kontra t-tumur dipendenti mill-ILC2-f'melanoma. Nat Immunol 2021;22:851–64.
36 Blomberg OS, Spagnuolo L, Garner H, et al. Ċelloli cd4+ li jipproduċu l-IL-5-t u eosinofili jikkooperaw biex itejbu r-rispons għall-imblokk tal-punti ta' kontroll immuni fil-kanċer tas-sider. Cancer Cell 2023;41:106–23.
37 Thorsson V, Gibbs DL, Brown SD, et al. Il-pajsaġġ immuni tal-kanċer. Immunità 2018;48:812–30.
38 Newman AM, Steen CB, Liu CL, et al. Id-determinazzjoni tal-abbundanza u l-espressjoni tat-tip taċ-ċelluli minn tessuti bl-ingrossa b'ċitometrija diġitali. Nat Biotechnol 2019;37:773–82.
39 Lloyd CM, Snelgrove RJ. Immunità tat-Tip 2: tespandi l-fehma tagħna. Sci Immunol 2018;3:eaat1604.
40 Oliphant CJ, Hwang YY, Walker JA, et al. Djalogu medjat minn MHCII bejn ċelluli limfoid innati tal-grupp 2 u ċelluli t cd4(+) isaħħaħ l-immunità tat-tip 2 u jippromwovi t-tkeċċija tal-elminti parassiti. Immunità 2014;41:283–95.
41 Moynihan KD, Opel CF, Szeto GL, et al. Eradikazzjoni ta' tumuri stabbiliti kbar fil-ġrieden permezz ta' immunoterapija kombinata li tinvolvi risponsi immuni intrinsiċi u adattivi. Nat Med 2016;22:1402–10.
42 Kouro T, Takatsu K. IL-5- u infjammazzjoni medjata mill-eosinofili: mill-iskoperta għat-terapija. Int Immunol 2009;21:1303–9.
43 Barthel FP, Johnson KC, Varn FS, et al. Trajettorji molekulari lonġitudinali ta 'glijoma diffusa fl-adulti. Natura 2019;576:112–20.
44 Alspach E, Lussier DM, Miceli AP, et al. In-neoantiġeni MHC-II jiffurmaw l-immunità tat-tumur u r-rispons għall-immunoterapija. Natura 2019;574:696–701.
45 Laidlaw BJ, Craft JE, Kaech SM. Ir-rwol multidimensjonali taċ-ċelluli T CD4 (+) fil-memorja taċ-ċelluli T CD8 (+). Nat Rev Immunol 2016;16:102–11.
46 Arnold IC, Artola-Boran M, Gurtner A, et al. L-assi tas-sinjalar GM-CSF-IRF5 fl-eosinofili jippromwovi l-immunità antitumorali permezz ta 'attivazzjoni ta' risponsi taċ-ċelluli T tat-tip 1. J Exp Med 2020;217:e20190706.
47 Bachmann MF, Rohrer UH, Kündig TM, et al. L-influwenza tal-organizzazzjoni tal-antiġeni fuq ir-rispons taċ-ċelluli B. Xjenza 1993;262:1448–51.
48 Link A, Zabel F, Schnetzler Y, et al. L-immunità innata timmedja t-trasport follikulari ta' antiġeni tal-proteini partikulati iżda mhux solubbli. J Immunol 2012;188:3724–33.
49 Trabanelli S, Chevalier MF, Derré L, et al. Ir-rwol favur u kontra t-tumur tal-ilc2s. Semin Immunol 2019;41:101276.
50 Simon SCS, Utikal J, Umansky V. Rwoli opposti ta 'eosinophils fil-kanċer. Cancer Immunol Immunother 2019;68:823–33.
51 Lloyd CM, Hessel EM. Funzjonijiet taċ-ċelluli T fl-ażma: aktar minn sempliċiment ċelluli T (H) 2. Nat Rev Immunol 2010;10:838–48.
52 Smith SG, Chen R, Kjarsgaard M, et al. Żieda fl-għadd ta 'ċelluli limfoid innate attivati tal-grupp 2 fil-passaġġi tan-nifs ta' pazjenti b'ażma severa u eosinophilia persistenti tal-passaġġi tan-nifs. J Allerġija Clin Immunol 2016;137:75–86.
53 Moral JA, Leung J, Rojas LA, et al. Ilc2S jamplifika l-imblokk tal-PD-1 billi jattiva l-immunità tal-kanċer speċifika għat-tessut. Natura 2020;579:130–5.
54 Huang Z, Wu L, Hou Z, et al. Eosinofili u bijomarkaturi oħra tad-demm periferali fil-gradazzjoni tal-glijoma: studju preliminari. BMC Neurol 2019;19:313.
55 Ostrom QT, Lu D, Lu R, et al. Prevalenza ta 'awtoimmunità u atopy fl-adulti Amerikani bi glijoblastoma u meninġjoma. Neuro Oncol 2022;24:1807–9.
56 Tuzlak S, Dejean AS, Iannacone M, et al. Il-pożizzjonament mill-ġdid tal-polarizzazzjoni taċ-ċelluli minn ċitokini singoli għal kumpless jgħin. Nat Immunol 2021;22:1210–7.
57 Nishimura T, Iwakabe K, Sekimoto M, et al. Rwol distint ta 'ċelluli T helper tat-tip 1 (Th1) u Th2 speċifiċi għall-antiġen fil-qerda tat-tumur in vivo. J Exp Med 1999;190:617–27.
58 Lorvik KB, Hammarström C, Fauskanger M, et al. It-trasferiment adottiv ta' ċelluli Th2 speċifiċi għat-tumur jeqred it-tumuri billi jqanqal rispons immuni infjammatorju in situ. Cancer Res 2016;76:6864–76.
59 Vonderheide RH. Antikorpi agonisti Cd40 fl-immunoterapija tal-kanċer. Annu Rev Med 2020;71:47–58. 60 Ott PA, Hu Z, Keskin DB, et al. Vaċċin neoantiġenu personali immunoġeniku għal pazjenti b'melanoma. Natura 2017;547:217–21.
