Echinacoside Jipproteġi Kontra 6-Disfunzjoni Mitokondrijali Indotta minn Hydroxydopamine U Rispons Infjammatorji fiċ-Ċelloli PC12 Permezz tat-Tnaqqis tal-Produzzjoni ta' ROS

Kuntatt: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 Email:audrey.hu@wecistanche.com

Yue-Hua Wang,1,2 Zhao-Hong Xuan,3 Shuo Tian,1 u Guan-Hua Du1,2

Il-marda ta' Parkinson (PD) hija disturb newrodeġenerattiv ikkaratterizzat minn telf progressiv ta' newroni dopaminerġiċi (DA) fis-substantia nigra. Disfunzjoni mitokondrijali u risponsi infjammatorji huma involuti fil-mekkaniżmu tal-ħsara taċ-ċelluli fil-PD. 6-Hydroxydopamine (6-OHDA), analogu tad-dopamina, jagħmel ħsara speċifikament lin-newroni dopaminerġiċi.Echinacoside(ECH) huwa phenylethanoid glycoside iżolat miż-zkuk ta 'Cistanche Salsa, li juri varjetà ta 'effetti newroprotettivi fi studji preċedenti. L-istudju preżenti kien li jinvestiga l-effett tiegħu kontra n-newrotossiċità indotta minn 6-OHDA u mekkaniżmi possibbli fiċ-ċelloli PC12. Ir-riżultati wrew li 6-OHDA naqqas il-vijabbiltà taċ-ċelluli, naqas l-attività ta 'ossidazzjoni-tnaqqis, naqas il-potenzjal tal-membrana mitokondrijali, u indotta apoptożi medjata mill-mitokondrija meta mqabbla ma' ċelluli PC12 mhux ittrattati. Madankollu,echinacosideit-trattament attenwat b'mod sinifikanti dawn il-bidliet indotti minn 6-OHDA. Barra minn hekk,echinacosidejista' wkoll itaffi b'mod sinifikanti r-risponsi infjammatorji indotti minn 6-OHDA. Aktar riċerka wriet liechinacosidejista' jnaqqas 6-produzzjoni ta' ROS indotta mill-OHDA fiċ-ċelloli PC12. Dawn ir-riżultati jissuġġerixxu li l-mekkaniżmu sottostanti ta 'echinacosidekontra 6-in-newrotossiċità indotta mill-OHDA forsi tinvolvi fl-attenwazzjoni ta' disfunzjoni mitokondrijali u risponsi infjammatorji billi titnaqqas il-produzzjoni ta' ROS.

1. Introduzzjoni

il-marda ta' Parkinson (PD)huwa disturb newrodeġenerattiv ikkaratterizzat mid-deġenerazzjoni progressiva bil-mod tan-newroni tad-dopamina fis-substantia nigra pars compacta [1]. Għalkemm il-karatteristiċi newropatoloġiċi tal-PD huma deskritti tajjeb, l-etjoloġija għadha mhix definita. Notevolment, bosta osservazzjonijiet jissuġġerixxu li disfunzjoni mitokondrijali hija involuta fil-patoġenesi tal-PD u d-deġenerazzjoni tan-newroni dopaminerġiċi [2, 3]. Il-mitokondrija fihom ħafna enzimi redox u ineffiċjenzi li jseħħu b'mod naturali ta 'fosforilazzjoni ossidattiva jiġġeneraw speċi ta' ossiġnu reattiv (ROS) [4]. Riċentement, evidenza dejjem akbar minn studji fuq il-bniedem u l-annimali ssuġġeriet li n-newroinfjammazzjoni hija wkoll kontributur importanti għat-telf newronali fil-PD [5].

6-Hydroxydopamine (6-OHDA) hija speċifika għan-newroni dopaminerġiċi f'mudelli ta' annimali gerriema intrastrijatali u f'xi ċelloli [6–11]. Iċ-ċellula PC12 saret mudell taċ-ċelluli popolari għar-riċerka tal-PD minħabba li din il-linja taċ-ċelluli għandha ħafna karatteristiċi ta 'newroni DAerġiċi. Intuża bħala mudell in vitro għall-istudju tal-PD u biex jiddetermina l-effett ta 'aġenti protettivi u terapewtiċi. Echinacoside (Figura 1) huwa phenylethanoid glycoside iżolat u ppurifikat mill-stemsofCistanche Salsa[12], pjanta parassitika indiġena għall-majjistral taċ-Ċina, li hija użata bħala mekkaniżmi sottostanti ta 'echinacoside kontra 6-OHDA-induceddamageinPC12cells.

2. Materjali u Metodi

2.1. Materjali. Echinacoside inkiseb mill-Istituti Nazzjonali għall-Kontroll tal-Ikel u d-Droga (Beijing, iċ-Ċina). RPMI-1640 u serum tal-fetu bovin inkisbu minn Gibco

(Grand Island, NY, USA). 6-OHDA, MTT, 2,7-dichlorodihydrofluorescein diacetate, propidium iodide (PI), u resazurin inxtraw minn Sigma-Aldrich (St. Louis, MO, USA). Il-kit tal-assaġġ bijoluminixxenti ATP inkiseb minn Promega (Madison, USA). 5,5,6,6 -Tetrachloro-1,1,3,3 -tetraethyl benzimidazolyl carbocyanine iodide (JC{-1) kit ta' analiżi nkiseb mill-Beyotime Institute of Biotechnology (Haimen, Jiangsu, iċ-Ċina). Kit Cytochrome C ELISA u substrat fluworoġeniku Ac-DVD-AMC inkisbu minn Invitrogen (Carlsbad, CA, USA). IL-1 u IL-6 kits ELISA nkisbu minn Boster Bio-engineer limited company (Wuhan, iċ-Ċina). Spectramax M5 microplate reader inxtara mill-kumpanija Molecular Devices (Sunnyvale, CA, USA).

2.2. Kultura taċ-Ċelloli u Trattament. Iċ-ċelluli PC12 tkabbru f'RPMI-1640 supplimentat b'10 fil-mija serum taż-żwiemel u 5 fil-mija serum tal-fetu bovin. Il-kundizzjonijiet inżammu f'37∘C f'atmosfera umidifikata li fiha 5 fil-mija CO2 [19]. Iċ-ċelluli ġew ibbanjati fi 96-pjanċi ta' sew f'densità ta' 2 × 105 ċelluli/mL. Wara konfluwenza ta' 80 fil-mija, iċ-ċelloli ġew inkubati minn qabel b'konċentrazzjonijiet differenti ta' echinacoside f'medja RPMI-1640 mingħajr serum għal siegħa. Imbagħad, 6-OHDA ġie miżjud mal-bjar f'konċentrazzjoni finali ta '100 M u inkubat għal ieħor Wara t-trattament, ġew osservati bidliet morfoloġiċi taħt mikroskopju. Il-vijabbiltà taċ-ċelluli ġiet evalwata b'assaġġ MTT [19]. Fil-qosor, wara t-trattament, MTT fil-konċentrazzjoni finali ta '0.5 mg/mL ġie miżjud ma' kull bir u inkubat għal 4 sigħat f'37∘C.

2.3.Bidliet Morfoloġiċi u Assaġġ tal-Vijabilità taċ-Ċelloli PC12. Wara t-trattament, bidliet morfoloġiċi ġew osservati taħt mikroskopju. Il-vijabbiltà taċ-ċelluli ġiet evalwata b'assaġġ MTT [19]. Fil-qosor, wara t-trattament, MTT fil-konċentrazzjoni finali ta '0.5 mg/mL ġie miżjud ma' kull bir u inkubat għal 4 sigħat f'37∘C. Imbagħad, is-supernatant tneħħa u l-prodott formazan ġie maħlul f'100 L dimethyl sulfoxide b'taħwid għal 15-il minuta fuq microtiter plate shaker u l-assorbiment inqrat f'570 nm bl-użu ta 'microplate reader Spectramax M5. Mediċina Kumplimentari u Alternattiva Ibbażata fuq l-Evidenza

2.4. Assaġġ tal-Livell ATP intraċellulari. Il-livell ATP ċellulari kien imkejjel b'kit ta 'assaġġ bijoluminixxenti ATP skond l-istruzzjonijiet tal-manifattur. Il-luminexxenza ġiet immonitorjata fuq microplate reader fil-modalità luminixxenza wara ż-żieda ta '100 L ta' luciferin u luciferase [20].

2.5. Kejl ta 'Attività ta' Ossidazzjoni-Tnaqqis tal-Mitokondrija minn Resazurin. Wara t-trattament, resazurin f'konċentrazzjoni finali ta '5 M ġie miżjud fil-bjar u l-intensità tal-fluworexxenza ġiet eżaminata f'eċitazzjoni ta' 530 nm u emissjoni ta '590 nm [21].

2.6. Kejl tal-Potenzjal tal-Membrana Mitokondrijali minn JC-1. Il-potenzjal tal-membrana mitokondrijali tkejjel bl-użu tal-kit tal-assaġġ JC-1 skont l-istruzzjonijiet tal-manifattur. Wara t-trattament, il-mezz tal-kultura tneħħa u tgħabba b'soluzzjoni JC-1 għal 15-il minuta f'37∘C fid-dlam. L-intensità tal-fluworexxenza tal-proporzjon aħmar/aħdar ġiet iddeterminata f'eċitazzjoni ta '490 nm u emissjoni ta' 530 nm (monomeri fluworexxenti ħodor) u 590 nm (aggregati fluworexxenti ħomor), rispettivament [22].

2.7. Kwantifikazzjoni ta 'Cytochrome C Rilaxx. Il-livelli taċ-ċitokromu Ċ ċitosoliku tkejlu bl-użu ta' kit ELISA skont l-istruzzjonijiet tal-manifattur [23]. Fil-qosor, wara t-trattament, iċ-ċelloli ġew lysed u ċentrifugati f'1000 g għal 15-il minuta, u mbagħad is-supernatant inġabar bħala frazzjoni ċitoplasmika u użat għall-kejl tar-rilaxx taċ-ċitokromu Ċ.

2.8. Determinazzjoni ta' l-Attività ta' Caspase-3. L-attività ta' Caspase-3 saret skont ir-referenzi b'modifika [24]. Fil-qosor, wara t-trattament, il-liżi buffer ġie miżjud ma' kull tajjeb u segwit minn ċentrifugazzjoni fi 12 000 g għal 10 min. L-attività ta' Caspase-3 ġiet ittestjata f'supernatanti li jirriżultaw billi tkejjel il-qsim proteolitiku tas-sottostrat fluworoġeniku Ac-DVD-AMC b'tul ta 'mewġ ta' eċċitazzjoni ta '380 nm u tul ta' mewġ ta 'emissjoni ta' 460 nm.

2.9. Assaġġ taċ-Ċitometrija tal-Fluss fiċ-Ċelloli PC12. Wara t-trattament, iċ-ċelloli ġew trypsinized, maħsula darbtejn b'PBS, ċentrifugati f'1000 r/min għal 5 min, u mbagħad iffissati b'70 fil-mija etanol matul il-lejl f'4 °C. Iċ-ċelloli ġew ċentrifugati u maħsula darbtejn b'PBS, sospiżi mill-ġdid f'PBS (li fih 50 g/mL RNaseA), imtebba' b'PI fil-konċentrazzjoni finali ta '10 M għal 30 min f'temperatura tal-kamra fid-dlam, u aqra f'ċitometru tal-fluss f'488. nm eċċitazzjoni [10].

2.10. Kejl tal-Livell IL-1 u IL-6 permezz ta' Assaġġ ELISA. Il-medja taċ-ċelluli PC12 kkultivati ​​nġabret wara t-trattament, u l-konċentrazzjonijiet ta' IL-1 u IL{-6 ġew imkejla b'kits ELISA disponibbli kummerċjalment skont il-protokoll tal-manifattur tal-bniedem.

2.11. Determinazzjoni tal-Livell ta' Speċi ta' Ossiġenu Reattiv Intraċellulari. Wara l-inkubazzjoni b'6-OHDA, iċ-ċelloli ġew mgħobbija b'10M H2DCFH-DA għal 30 min f'37∘C fid-dlam. L-intensità tal-fluworexxenza tad-DCF kienet imkejla f'eċitazzjoni

Tul tal-mewġ tal-Mediċina Kumplimentari u Alternattiva Ibbażata fuq l-Evidenza ta' 495 nm u wavelength ta' emissjoni ta' 530 nm fuq qarrej tal-mikroplate [25].

2.12. Analiżi Statistika. Id-dejta kollha hija espressa bħala l-medja ± SD. Analiżi statistika tar-riżultati twettqet b'analiżi one-way tal-varjanza (ANOVA), segwita minn -test. Is-sinifikat statistiku ġie aċċettat f'<>

3. Riżultati

3.1. Effetttal-Echinacosideon il-Morfoloġija u l-Vijabilità taċ-Ċelloli fiċ-Ċelloli PC12 Mħassra minn 6-OHDA. Kif muri fil-Figura 2(A), il-vijabbiltà taċ-ċelluli PC12 ma kellha l-ebda differenza sinifikanti fil-konċentrazzjoni ta '0.1 ~ 10 M ta' trattament ta 'echinacoside għal

24 h. Kif muri fil-Figura 2(B), fi żmien 24 siegħa mit-trattament b'6-OHDA waħdu, il-maġġoranza taċ-ċelluli PC12 kienu għaddew minn bidliet morfoloġiċi bħal blebbing tal-membrana u tnaqqis taċ-ċelluli. Kotrattament b'echinacoside ipproteġiet iċ-ċelluli mill-ħsara 6-OHDA. Assaġġ MTT wera li t-trattament taċ-ċelluli PC12 b'6-OHDA waħdu rriżultat fi tnaqqis ta' madwar 25 fil-mija fis-sopravivenza taċ-ċelluli fi żmien 24 siegħa, filwaqt li trattament konġunt b'{{10}}.1 M, 1 M, u 10 M echinacoside wera tnaqqis ta' ċitotossiċità medjata minn 6-OHDA (kollha < 0.01,="" figura="">

3.2. Effett ta 'Echinacoside fuq Disfunzjoni tal-Mitokondrija Indotta minn 6-OHDA fiċ-Ċelloli PC12. Il-livelli ta' ATP ċellulari naqsu b'mod sinifikanti wara inkubazzjoni ta' 24 siegħa b'100M 6-OHDA, filwaqt li trattament konġunt b'1 Mand 10 M ta' echinacoside ttaffi 6-ATP medjat minn OHDA inaqqas il-bidliet anaboliċi fiċ-ċelloli PC12 . Ir-riżultati wrew li trattament konġunt b'1 Mand 10 M ta 'echinacoside jista' jnaqqas b'mod sinifikanti l-indeboliment tal-attività tat-tnaqqis tal-ossidazzjoni tal-mitokondrija indott minn 6-OHDA (kemm <0.05 kif="" ukoll="" figura="">

Kif muri fil-Figura 3(c), it-trattament b'100 M ta' 6- OHDA għal 24 siegħa rriżulta fi tnaqqis sinifikanti tal-potenzjal tal-membrana mitokondrijali meta mqabbel mal-grupp mhux ittrattat (< {="" {11}}.01).="" madankollu,="" it-tnaqqis="" tal-potenzjal="" tal-membrana="" mitokondrijali="" indott="" minn="" 6-ohda="" kien="" attenwat="" b'mod="" sinifikanti="" minn="" kotrattament="" b'0.1="" m,="" 1="" m,="" u="" 10="" m="" ta="" 'echinacoside="" (kollha=""><>

3.3. Apoptożi Mmedjata mill-Mitokondrija ta' Echinacoside fiċ-Ċelloli PC12 kontra 6-Newrotossiċità ta' l-OHDA. Ir-riżultati wrew li l-espożizzjoni 6-OHDA rriżultat f'żieda fiċ-ċitokromju ċitosoliku Ċ b'167 fil-mija fuq il-grupp mhux ittrattat ( < 0.{{10}}1).="" echinacoside="" fid-doża="" ta'="" 0.1="" m,="" 1="" m,="" u="" 10m="" jista'="" jnaqqas="" b'mod="" sinifikanti="" r-rilaxx="" ta'="" cytochrome="" c="" f'cytosol="" indott="" minn="" 6-ohda="" (="">< 0.05,="">< 0.01,="" u="">< 0.01,="" rispett;="" figura="">

L-attività ta' caspase{{0}} żdiedet b'madwar 3.3-darbiet meta mqabbla mal-grupp mhux ittrattat wara 6-espożizzjoni għall-OHDA ( < 0.01="" ).="" b'kuntrast,="" trattament="" konġunt="" b'1="" m="" u="" 10="" m="" ta'="" echinacoside="" wera="" tnaqqis="" sinifikanti="" fl-attività="" ta'="" caspase-3="" meta="" mqabbel="" ma'="" 6-ċelloli="" ttrattati="" b'ohda,="" rispettivament="" (kemm="">< 0.05="" kif="" ukoll="" figura="" 4(="" b)).pi="" huwa="" permeabilità="" tal-membrana="" u="" ġeneralment="" huwa="" eskluż="" minn="" ċelloli="" vijabbli.="" għalhekk="" huwa="" komunement="" użat="" għall-identifikazzjoni="" ta="" 'ċelluli="" mejta="" f'popolazzjoni.="" ir-riżultati="" wrew="" li="" r-rata="" ta'="" apoptożi="" żdiedet="" b'mod="" sinifikanti="" wara="" inkubazzjonijiet="" ta'="" 24="" siegħa="" b'100="" m="" 6-ohda,="" filwaqt="" li="" trattament="" konġunt="" b'1="" u="" 10="" m="" echinacoside="" naqqas="" b'mod="" sinifikanti="" 6-apoptożi="" indotta="" mill-ohda="">< 0.05,="">< 0.01,="" resp.,="" figura="">

3.4. Effett Anti-Infjammatorju ta 'Echinacoside fiċ-Ċelloli PC12 Indotti minn 6-OHDA. Ir-riżultati wrew li l-livell ta' 6-espożizzjoni ta' l-OHDA riżultat ta' dinanincreaseinIL-1 meta mqabbel ma' grupp mhux ittrattat ( < 0.05;="" figura="" 4(a)).="" madankollu,="" 10="" m="" ta'="" echinacoside="" jistgħu="" jnaqqsu="" b'mod="" sinifikanti="" r-rilaxx="" ta'="" il-1="" indott="" minn="" 6-ohda="" (="">< 0.05;="" figura="">

Il-livell ta' IL{{{0}} żdied ukoll b'mod sinifikanti meta mqabbel ma' grupp mhux trattat ( < 0.01).="" madankollu,="" trattament="" konġunt="" b'0.1,="" 1,="" u="" 10="" m="" ta="" 'echinacoside="" kollha="" naqas="" b'mod="" sinifikanti="" r-rilaxx="" ta'="" il-6="" meta="" mqabbel="" ma="" 'ċelluli="" ttrattati="" 6-ohda="" (kemm=""><0.05 kif="" ukoll="" figura="">

3.5. Effett tal-ECH fuq il-Produzzjoni ROS Indotta minn 6-OHDA fiċ-Ċelloli PC12. Ċelloli ttrattati b'6-OHDA urew żieda sinifikanti (madwar 1.4-darbiet) ta' ROS intraċellulari meta mqabbla ma' ċelloli mhux ittrattati ( < 0.01).="" din="" iż-żieda="" kienet="" attenwata="" b'mod="" sinifikanti="" b'koinkubazzjoni="" ma'="" 0.1,="" 1,="" u="" 10="" m="" echinacoside="" (="">< 0.05,="">< 0.01,="" u="">< 0.01,="" rispons;="" figura="" 6)="">

4. Diskussjoni

Echinacoside huwa wieħed mill-kostitwenti prinċipali ta 'phenylethanoid glycosides estratti minn echinacoside tradizzjonali famuż irrappurtat għandu proprjetajiet anti-apoptotic u newroprotettivi f'mard newrodeġenerattiv [18]. Studju in vivo irrapporta li echinacoside kellu effetti newroprotettivi u titjib fl-imġieba fil-mudell tal-ġurdien ta’ ħsara newronali dopaminerġika indotta minn MPTP, filwaqt li aktar investigazzjoni wriet li echinacoside ikkawża downregulation ta’ caspase-3 u caspase-8 attivazzjoni f’MPP plus -apoptożi indotta ta 'newroni granuli ċerebellari [16]. Studju ieħor in vivo irrapporta l-effetti newroprotettivi tal-echinacoside fuq in-newroni dopaminerġiċi strijatali midruba minn 6-OHDA [17]. Madankollu, il-mekkaniżmi ċellulari u molekulari li huma l-bażi ta 'dawn l-azzjonijiet mhumiex mifhuma bis-sħiħ, speċjalment għall-influwenza tagħhom fuq il-funzjoni mitokondrijali u r-risponsi ta' infjammazzjoni. Allura l-istudju attwali tagħna investiga l-effetti ta 'echinacoside fuq il-funzjoni mitokondrijali u r-risponsi ta' infjammazzjoni biex jiċċaraw il-mekkaniżmu tiegħu kontra l-PD. Ir-riżultati l-ewwel urew li l-echinacoside ttaffi b'mod sinifikanti n-newrotossiċità indotta minn 6-OHDA fiċ-ċelloli PC12 permezz tal-protezzjoni tal-funzjoni mitokondrijali u l-anti-infjammazzjoni.

Disfunzjoni mitokondrijali ilha implikata fil-mewt ta 'newroni dopaminerġiċi nigrostriatali fil-marda ta' Parkinson u l-mudelli sperimentali tagħha [26]. Il-mitokondrija huma involuti b'mod profond fil-produzzjoni ta 'speċi ta' ossiġnu reattiv (ROS) permezz tat-trasportaturi tal-elettroni tal-katina respiratorja f'mard newrodeġenerattiv [27]. Varjetà wiesgħa ta 'ROS huma prodotti fil-kors tal-metaboliżmu normali fis-sistemi bijoloġiċi, iżda l-akkumulazzjoni tagħhom lil hinn mill-

ammont meħtieġ jista 'potenzjalment jagħmel ħsara lill-lipidi, proteini, u aċidi nuklejċi.

6-OHDA, analogu tal-katekolamina, jikkawża deġenerazzjoni speċifika tan-newroni substantia nigra. In-newrotossiċità indotta minn 6-OHDA hija, parzjalment, dovuta għall-produzzjoni ta' ROS [28-32].

OHDA twassal għal mewt newronali billi taffettwa l-funzjoni tal-mitokondrija, inkluż it-tnaqqis fil-produzzjoni ta 'ATP, disturb tal-metaboliżmu ROS, u l-induzzjoni ta' apoptożi [10, 33, 34]. Fl-istudju preżenti, ir-riżultati tagħna wrew ukoll li 6-OHDA għamel ħsara lill-funzjoni ta 'tnaqqis ossidattiv mitokondrijali, naqas il-potenzjal tal-membrana mitokondrijali, indotta apoptosi medjata mill-mitokondrija, u żiedet il-produzzjoni ta' ROS fiċ-ċelloli PC12.

Resazurin huwa indikatur fluworexxenti li huwa intermedju biss bejn it-tnaqqis finali ta 'ossiġnu molekulari u ċitokromossidażi. Għalhekk, il-potenzjal ta 'tnaqqis ossidattiv ta' resazurin jippermetti li l-katina respiratorja tiffunzjona sa kważi t-tlestija, li se tipprovdi indikazzjoni aktar preċiża u sensittiva tal-funzjoni mitokondrijali. JC-1 hija sonda sensittiva għall-potenzjal tal-membrana li tinlokalizza mal-membrana mitokondrijali ta' ġewwa fejn tifforma jew monomeri (aħdar) jew aggregati (aħmar) ibbażati fuq il-potenzjal tal-membrana mitokondrijali. Għalhekk, resazurin u JC-1 huma għodod analitiċi siewja għall-eżami tal-funzjoni mitokondrijali [35]. L-istudju preżenti indika li t-tnaqqis fl-attività ta 'tnaqqis ossidattiv mitokondrijali u l-potenzjal tal-membrana mitokondrijali jista' jkollhom rwoli importanti fin-newrotossiċità dopaminerġika indotta minn 6-OHDA. Ir-riżultat tagħna wera wkoll attività ta 'tnaqqis ossidattiv mitokondrijali u potenzjal tal-membrana mitokondrijali. Dawn ir-riżultati jipprovdu li t-titjib tad-disfunzjoni mitokondrijali jista 'jkun mod aħjar biex inaqqas in-newrodeġenerazzjoni dopaminerġika progressiva assoċjata b'mod komuni mal-PD.

Huwa ġeneralment aċċettat li l-apoptosi taċ-ċelluli indotta minn 6- OHDA hija medjata minn disfunzjoni mitokondrijali, ikkaratterizzata minn rilaxx ta 'ċitokrom C, u attivazzjoni ta' caspase-3 [36]. Stimulu apoptotiku jqanqal ir-rilaxx taċ-ċitokromu Ċ mill-mitokondrija fiċ-ċitosol fejn imbagħad jattiva caspase-3 u caspases oħra downstream. Fl-istudju preżenti, ir-riżultati wrew li ċ-ċelluli PC12 esposti għal 100 M ta '6-OHDA mtejba rilaxx ta' ċitokromu Ċ u caspase inibit b'mod dipendenti r-rilaxx ta 'ċitokromu Ċ u attivazzjonijiet ta' caspase- 3. Dawn ir-riżultati jissuġġerixxu li l-echinacoside jista' jinibixxi l-apoptożi medjata mill-mitokondrija billi jnaqqas ir-rilaxx taċ-ċitokromu Ċ mill-mitokondrija għall-attivazzjoni ta' cytosol u caspase-3.

L-infjammazzjoni hija karatteristika newropatoloġika tal-imħuħ Parkinsonjani u wkoll f'mudelli sperimentali tal-marda. Strateġiji terapewtiċi mmirati lejn it-tnaqqis tal-infjammazzjoni u l-inibizzjoni tal-produzzjoni ta 'dawn il-fatturi infjammatorji jistgħu jkunu strateġija newroprotettiva promettenti għat-trattament tal-marda ta' Parkinson u kundizzjonijiet relatati [37]. Diversi studji mwettqa wkoll fil-fluwidu ċerebrospinali u waqt analiżi postmortem f'pazjenti Parkinsonjani żvelaw livelli miżjuda ta' ċitokini, bħal interleukin-1 (IL-1) u interleukin-6 (IL{{4} }), li jissuġġerixxi l-attivazzjoni ta 'rispons aproinflammatory[38, 39]. Fl-istudju preżenti, ir-riżultati wrew li l-espożizzjoni għal 100 Mof6-OHDAindut IL-1 u IL-6 rilaxx fiċ-ċelloli PC12. Madankollu, it-trattament b'echinacoside jista' jinibixxi r-rilaxx ta' IL-1 u IL-6 indott minn 6-OHDA b'mod dipendenti fuq id-doża. Ir-riżultati jissuġġerixxu li t-tnaqqis tar-risponsi infjammatorji huma involuti wkoll fil-mekkaniżmi ta 'echinacoside kontra 6-newrotossiċità indotta mill-OHDA.

Bħala konklużjoni, ir-riżultati ta 'din ir-riċerka wrew li echinacoside kien kapaċi jimblokka 6-newrotossiċità indotta minn OHDA fiċ-ċelloli PC12, u l-mekkaniżmi jistgħu jkunu relatati mal-protezzjoni mitokondrijali u l-anti-infjammazzjoni permezz tat-tnaqqis tal-produzzjoni ROS. L-informazzjoni pprovduta minn dan ix-xogħol se tkun utli biex jiġi spjegat il-mekkaniżmu ta 'echinacoside għall-anti-PD. Huwa konkluż li echinacoside jista 'jkun għażla terapewtika promettenti għall-prevenzjoni u t-trattament tal-PD.

Kunflitt ta' Interessi

L-awturi ddikjaraw l-ebda kunflitt ta' interess

Rikonoxximenti

Dan ix-xogħol kien appoġġjat minn Għotjiet mill-Fondazzjoni Nazzjonali tax-Xjenza Naturali taċ-Ċina (81473383) u l-Proġett Maġġuri Nazzjonali tax-Xjenza u t-Teknoloġija (2012ZX09103101-078; 2013ZX09103-001-008; u 2013ZX09102106).