PARTI 1 Effetti Bħas-Antidepressanti Ta' Estratt ta' Cistanche Tubulosa Fuq Firien Stress Kroniċi Imprevedibbli Permezz Ir-Restawr tal-Mikrobijota Omeostażi

Evidenza dejjem tikber turi li disturbi newropsikjatriċi, bħad-dipressjoni, huma marbuta mal-mikrobijoma tal-imsaren permezz tal-assi tal-imsaren-moħħ.Cistanches Herbahija magħrufa sew għat-trattament ta 'defiċjenza "kidney-yang" fil-mediċina tradizzjonali Ċiniża (TCM) u ġiet użata għat-trattament ta' mard newrodeġenerattiv f'dawn l-aħħar snin. F'dan l-istudju, il-mudell ta' depressjoni indotta minn stress kroniku imprevedibbli (CUS) ġie stabbilit biex jesplora l-impatt ta'Cistanche tubulosaestratt (CTE) fuq testijiet tal-imġieba, newrotrasmettituri monoamini, u fatturi newrotrofiċi fl-ippokampus u l-kolon, il-kompożizzjoni tal-mikrobijota tal-musrana, u l-produzzjoni ta 'aċidi grassi ta' katina qasira (SCFAs). Barra minn hekk, intużat analiżi ta 'korrelazzjoni biex tevalwa r-relazzjoni funzjonali bejn mikrobijota tal-musrana mibdula, newrotrażmettituri mibdula u newrotrofini fl-ippokampus u l-kolon, u konċentrazzjoni disturbata ta' SCFAs. CTE tejbet b'mod sinifikanti l-imġieba bħal dipressjoni fil-firien taħt CUS. Il-livell tal-moħħ ta' 5-hydroxytryptamine (5-HT) u l-espressjoni tal-fattur newrotrofiku derivat mill-moħħ (BDNF) fil-firien CUS ġie restawrat b'CTE. L-abbundanza relattiva tal-mikrobijota tal-musrana u l-konċentrazzjonijiet ta 'aċetat u aċidu hexanoic jistgħu wkoll jiġu modulati bit-trattament CTE. Aħna wrejna wkoll li l-applikazzjoni ta 'CTE fil-firien CUS wasslet għal korrelazzjoni qawwija fost il-kompożizzjoni tal-mikrobijota tal-musrana mfixkla, livelli ta' newrotrasmettitur tal-hippocampus, u produzzjoni ta 'SCFAs metaboliti newroattivi. B'kollox, dawn ir-riżultati jidentifikaw CTE bħala trattament potenzjali għal sintomi depressivi billi jirrestawraw l-omeostasi tal-mikrobijota tal-musrana għal disturbi tal-assi mikrobijota-musrana-moħħ, u jiftħu toroq ġodda fil-qasam tan-newropikofarmakoloġija.

Kliem ewlieni: Cistanche tubulosa, antidipressant, stress kroniku imprevedibbli, mikrobijota tal-musrana, assi mikrobijota-musrana-moħħ

Għal aktar informazzjoni jekk jogħġbok ikkuntattja:Joanna.jia@wecistanche.com

Cistanche deserticola għandha ħafna effetti, ikklikkja hawn biex tkun taf aktar

INTRODUZZJONI

Cistanches Herba(Rou Cong-Rong fiċ-Ċiniż) huwa uffiċjalment irreġistrat bħala z-zkuk sukkulenti mnixxfa ta 'Cistanche deserticola(YC Ma) uCistanche tubulosa(Schrenk) fil-Kummissjoni tal-Farmakopea Ċiniża (2015). Hija mediċina tradizzjonali Ċiniża magħrufa (TCM) għat-trattament ta 'defiċjenza tal-kliewi, impotenza, infertilità femminili, lewkorrea morboża, metrorraġija abbundanti,

Echinacosidein cistanche jistgħu jippromwovufejqan tal-feriti

u stitikezza senile (Kummissjoni tal-Farmakopea Ċiniża, 2015). Studji preċedenti wrew diversi kostitwenti kimiċi ewlenin ta 'Cistanches Herba, inklużi phenylethanoid glycosides (PhGs), iridojdi u iridojdi glycosides, lignans, alditols, oligosaccharides, u polysaccharides. Analiżi farmakoloġika wriet li Cistanches Herba turi firxa wiesgħa ta 'attivitajiet newroprotettivi, immunomodulatorji, anti-infjammatorji u epatoprotettivi (Jiang and Tu, 2009; Fu et al., 2017). PhGs ġew meqjusa bħala l-komponenti attivi ewlenin ta 'Cistanches Herba li għandhom diversi attivitajiet farmakoloġiċi, bħal newroprotettivi, immunomodulatorji, anti-infjammatorji, epatoprotettivi, anti-ossidattivi, eċċ (Jiang and Tu, 2009; Fu et al., 2017). Cistanches Herba kienet oriġinarjament irreġistrata fil-Klassiku tal-Mediċina Veġetali ("Shennong Bencao Jing" fiċ-Ċiniż), ktieb magħruf dwar pjanti mediċinali miktub bejn madwar 200 u 250 AD, bħala "ħwawar għolja" li tista 'tirregola "ħamsa (vixxeri). ) razez u sebgħa (ikel iżżejjed, rabja, umdità, kesħa, inkwiet, riħ u xita, u biża) nuqqasijiet" (Huang, 1982). Illum il-ġurnata Cistanches Herba hija aċċettata b'mod wiesa 'bħala toniku tal-ħxejjex għal debbilità ġenerali (Fu et al., 2017).C. tubulosaKapsuli glycoside (Memoregain®) qed jintużaw għat-trattament tal-marda ta 'Alzheimer (Guo et al., 2013). Sistema dopaminerġika li ma tiffunzjonax hija waħda mill-patoġenesi ewlenin tal-ipoteżi monoamina tad-dipressjoni (Duman et al., 1997; Krishnan and Nestler, 2008). Echinacoside (wieħed mill-PhGs) u PhGs minn Cistanche salsa nstabu li jipproteġu n-newroni dopaminerġiċi kontra n-newrotossiċità tad-dopamina (DA) indotta minn 1-methyl-4-phenyl-1,2,3,{ {8}}tetrahydropyridine (MPTP) li jista 'jżid il-livelli ta' DA fl-istriatum tal-ġrieden C57 (Tian u Pu, 2005; Geng et al., 2007). Barra minn hekk, catalpol u geniposide huma żewġ iridojdi rappreżentattivi f'Cistanches Herba, u nstabu li jtejbu l-imġieba bħal dipressjoni indotta minn stress kroniku imprevedibbli (CUS) permezz tar-restawr ta' disfunzjonijiet tal-assi ipotalamika-pitwitarja-adrenali (HPA) u catalpol jista' jirregola l-moħħ- espressjoni tal-fattur newrotrofiku derivat (BDNF) (Cai et al., 2015; Wang et al., 2015). Barra minn hekk, l-aħħar pubblikazzjoni tagħti biċċa evidenza ġdida li d-decoction ta 'Cistanches Herba naqqas b'mod sinifikanti l-perjodu ta' immobilità fit-test tas-sospensjoni tad-denb tal-ġurdien, li jissuġġerixxi bil-qawwa li Cistanches Herba jippossjedi kwalitajiet potenzjali li jixbħu l-antidipressanti (WangD. et al., 2017).

Il-mediċina tradizzjonali Ċiniża tiġbed l-attenzjoni dejjem tikber bħala trattament tad-dipressjoni minħabba l-effetti sekondarji komparattivament moderati tagħha (Sarris et al., 2011; Feng et al., 2016). Diversi tipi ta 'TCMs, bħal komposti individwali mid-drogi mhux raffinati (ginsenoside Rb1, ginsenoside Rg3, u Yuanzhi-1) (Jin et al., 2015; Kang et al., 2017; Wang GL et al., 2017; ), materjali mediċinali Ċiniżi singoli (għerq Panax ginseng, riżoma Acorus tatarinowii, u Morinda Officinalis) (Dang et al., 2009; Han et al., 2013; Xu et al., 2016), u decoctions TCM (Kai-Xin- San, Chaihu-Shu-Gan-San, Xiaoyaosan, u Xiaochaihutang) (Dai et al., 2010; Su et al., 2011; Su et al., 2014; Yan et al., 2016) ġew studjati u murija fil-fond biex ireġġa' lura jew itaffu sintomi bħal dipressjoni. Pereżempju, Kai-Xin-San instab li ttaffi b'mod notevoli s-sintomi ta 'firien depressivi indotti minn CUS billi jżid in-numru ta' newrotrażmettituri, fatturi newrotrofiċi, u r-riċetturi korrispondenti tagħhom, u jippromwovi l-espressjoni ta 'sinaptotagmin u densità tas-sinsla dendritika (Yan et al. , 2016).

Madankollu, studji preċedenti ta 'TCM jiddependu fuq riżultati f'testijiet ta' mġieba bħal dipressanti u jiffokaw fuq il-mekkaniżmu ta 'azzjoni farmakoloġiku konvenzjonali. Il-konnessjoni bejn l-effikaċja antidipressanti ta 'TCM amministrat oralment u mikrobijota tal-musrana mhix mifhuma tajjeb. Evidenza dejjem tikber tappoġġja li l-mikrobijota tal-musrana għandha rwol kruċjali fir-regolazzjoni tal-funzjonijiet tal-moħħ, partikolarment id-dipressjoni u disturbi oħra relatati mal-istress (Foster u Neufeld, 2013; Sherwin et al., 2017). Pereżempju, stress kroniku jirriżulta f'disregolazzjoni tal-istruttura mikrobjali tal-musrana tal-firien, bi tnaqqis fil-proporzjon Firmicutes/Bacteroidetes, u aktar speċifikament, tnaqqis fl-abbundanza relattiva ta 'Lactobacillus u żieda f'Oscillibacter (Meng et al., 2017). Barra minn hekk, trapjant tal-ippurgar ta’ mikrobijota disregolata minn pazjenti depressi għal ġrieden ħielsa mill-mikrobi ta fenotip bħal dipressjoni f’dawn l-annimali, li jindika li mikrobijota tal-musrana disregolata tikkawża sintomi fl-imġieba u fiżjoloġiċi ta’ depressjoni u ansjetà (Kelly et al., 2016; Zheng et al. ., 2016). F'esperimenti fuq l-annimali, xi modulaturi tal-mikrobijota bħal probijotiċi u prebijotiċi nstabu li jtejbu l-imġieba bħal dipressjoni fi ġrieden stressati kronikament billi jtejbu l-mikrobijota tal-musrana (Bravo et al., 2011; Bharwani et al., 2017; Burokas et al., 2017; ).

Minħabba l-assoċjazzjoni bejn il-mikrobijota tal-musrana u l-iżvilupp tal-mard, kif ukoll il-plastiċità tal-istruttura tal-mikrobijota tal-musrana, iddeċidejna li ninvestigaw l-effetti tal-mikrobijota tal-musrana għall-medjazzjoni tad-dipressjoni ġibdet l-attenzjoni tagħna u ġiet investigata (Chang et al., 2017; Xu et al. ., 2017). Biex jinkiseb dan, is-sekwenzjar tal-ġeni 16S rRNA ikkombinat analiżi Meta stats (White et al., 2009) twettqet biex tanalizza l-kompożizzjoni tal-mikrobijota tal-musrana. Fl-istudju preżenti,C. tubulosantgħażlet biex tevalwa l-effetti tiegħu li jixbħu l-antidipressanti minħabba li għandu livell ogħla ta 'PhGs meta mqabbel ma'C. deserticola. Ġie stabbilit mudell ta 'depressjoni kkaġunata mill-firien CUS biex jesplora l-impatt ta'C. estratt tubulosa(CTE, li jikkonsisti minn 48.6 fil-mija PhGs, 6.9 fil-mija iridojdi glikosidi, u 20.0 fil-mija saccharides totali) fuq testijiet tal-imġieba, newrotrasmettituri monoamini, u fatturi newrotrofiċi fl-ippokampus u l-kolon, il-kompożizzjoni tal-mikrobijota tal-musrana, u katina qasira produzzjoni ta' aċidu xaħmi (SCFA). Barra minn hekk, ir-relazzjoni funzjonali bejn il-mikrobijota tal-musrana mibdula bidlet in-newrotrasmettituri u n-newrotrofini kemm fl-ippokampus kif ukoll fil-kolon, u ġiet studjata konċentrazzjoni disturbata ta 'SCFAs. Intużat analiżi ta 'korrelazzjoni biex tissostanzja l-evidenza li CTE timmira għall-mikrobijota tal-musrana għat-trattament tad-dipressjoni billi timmodula l-assi mikrobijota-musrana-moħħ.

MATERJALI U METODI

Materjali

Fluoxetine (FLX) inxtara minn Aladdin Industrial Inc. (Shanghai, iċ-Ċina). 5-hydroxytryptamine (5-HT), norepinephrine (NE), u kits BDNF ELISA inxtraw minn Nanjing Jiancheng Bioengineering Institute (Nanjing, iċ-Ċina). Acetonitrile ta 'grad HPLC inxtara minn Merck (Darmstadt, il-Ġermanja). Ilma dejonizzat ġie ppreparat minn ilma distillat bl-użu ta 'sistema ta' purifikazzjoni tal-ilma Milli-Q (Millipore, Bedford, MA, l-Istati Uniti). Ir-reaġenti u l-kimiċi l-oħra kollha użati kienu ta' grad analitiku.

Zkuk imnixxfin taC. tubulosainġabru mill-Kontea ta’ Hetian (Xinjiang, iċ-Ċina). Il-kampjuni tal-kampjuni tal-vawċers ġew awtentikati mill-Prof Xiaobo Li u ddepożitati fl-erbarju tal-Iskola tal-Farmaċija, l-Università ta 'Shanghai Jiao Tong (Shanghai, iċ-Ċina). It-trab omoġenjuC. tubulosazkuk ġew sospiżi f'għaxar darbiet ta '70 fil-mija etanol, u sħana-refluxed tliet darbiet, kull wieħed għal siegħa f'100 grad. L-estratti ġew iffiltrati bl-użu ta 'garża, evaporati taħt vakwu f'65 grad u lajofilizzati. Il-kampjun ġie maħlul mill-ġdid u mbagħad separat b'reżina makroporuża D101. Wara l-assorbiment, il-frazzjoni elużita bl-ilma ġiet mormija. CTE inkiseb wara elużjoni b'40 fil-mija etanol, imbagħad evaporat taħt vakwu f'65 grad u lajofilizzat.

Analiżi tal-Kompożizzjoni Kimika tas-CTE

Il-kontenut relattiv ta 'PhGs f'CTE ġie ddeterminat permezz ta' spettrofotometrija UV f'330 nm bl-użu ta 'echinacoside bħala l-istandard. Il-kontenut relattiv ta’ iridojdi u glikosidi iridojdi tkejjel permezz ta’ spettrofotometrija UV bil-metodu ta’ tul ta’ mewġ doppju biex tiġi evitata l-interferenza spettrali minn PhGs (237 nm intuża għal kwantifikazzjoni spettroskopika, intuża punt isosbestic 280 nm għal wavelength ta’ referenza), intuża geniposide bħala l-istandard. Il-kontenut totali ta 'karboidrati ta' CTE kien iddeterminat bil-metodu kolorimetriku tal-aċidu fenol-sulfuriku bil-glukożju bħala l-istandard (Chow u Landhausser, 2004).

Il-kostitwenti kimiċi ewlenin tas-CTE kienu kkaratterizzati minn UPLC-Q-TOF-MS. Analiżi UPLC-Q-TOF-MS saret fuq sistema Waters ACQUITY UPLC (Waters Corp., Milford, MA, Stati Uniti) b'kolonna ACQUITY UPLC BEH C18 (100 mm x 2.1 mm id, 1.7 段m, Waters Corp., l-Istati Uniti) permezz ta' elużjoni tal-gradjent bl-użu ta' 0.1 fil-mija aċetonitrile ta' aċidu formiku (A) u 0.1 fil-mija ta' aċidu formiku fl-ilma (B) f'temperatura rata tal-fluss ta '0.4 ml/min. Il-profil tal-gradjent kien: 0-5 min (A: 5-20 fil-mija ), 5-7.5 min (A: 20-30 fil-mija ), 7.5-10 min ( A: 30-70 fil-mija ), 10-11 min (A: 70-100 fil-mija ), u miżmuma għal 1.5 min. Il-gradjent ġie riċiklat lura għal 5 fil-mija f'0.5 min u miżmum għal 2.5 min għall-ġirja li jmiss. Il-volum tal-injezzjoni kien 3 [il. It-temperatura tal-forn tal-kolonna kienet issettjata għal 35 grad.

L-ispettrometrija tal-massa twettqet bl-użu ta' spettrometru tal-massa Waters Vion IMS (Waters Corp., Milford, MA, l-Istati Uniti). L-jonizzazzjoni saret fil-modalità elettrospray negattiva (ESI). Il-parametri MS kienu kif ġej: vultaġġ kapillari, 2.0 kV; vultaġġ tal-konu, 20 V; temperatura tas-sors, 120 grad; temperatura ta' desolvazzjoni, 500 grad; flussi ta' gass ta' kon u desolvazzjoni, 50 u 1,000 L/h, rispettivament. Għal kejl preċiż tal-massa, il-leucine-enkephalin intuża bħala l-massa tal-lock biex tiġġenera jone [MH]- (m/z 554.2615). Twettaq esperiment MSE (Mass SpectrometryElevatedEnergy) f'żewġ funzjonijiet ta' skanjar kif ġej: funzjoni 1 (enerġija baxxa): m/z 50-1,000, ħin ta' skanjar ta' 0.25 s, dewmien ta' skanjar ta' 0.02 s , Enerġija tal-ħabta 6 eV; funzjoni 2 (enerġija għolja): m/z 50-1,000, 0.25 s ħin tal-iskannjar, 0.02 s dewmien bejn l-iskannjar, rampa tal-enerġija tal-ħabta ta '20-45 eV. Id-dejta ġiet ipproċessata bl-użu tas-softwer UNIFI 1.8.1 (Waters Corp., Milford, MA, l-Istati Uniti).

cistanchejistaittejjeb il-funzjoni tal-kliewi

Esperimenti fuq l-Annimali

Firien maskili Sprague-Dawley (200 土 20 g) ġew akkwistati minn Beijing Vital River Laboratory Animal Technology Company (Beijing, iċ-Ċina), u miżmuma fiċ-Ċentru tal-Annimali tal-Laboratorju ta 'Shanghai Jiao Tong University (Shanghai, iċ-Ċina). L-annimali kienu miżmuma fi gruppi taħt temperatura tal-kamra kkontrollata (25 土 2 grad, 55 土 10 fil-mija umdità relattiva) b'ċiklu ta 'dawl-dlam ta' 12:12 h. Il-firien tħallew aċċess liberu għal firien tal-laboratorju regolari chow u ilma għal ġimgħa. Il-faċilitajiet u l-protokolli tal-annimali ġew approvati mill-Kumitat tal-Etika tal-Annimali tal-Università ta 'Shanghai Jiao Tong (Shanghai, iċ-Ċina).

Wara ġimgħa ta’ akklimazzjoni, 40 firien naive ġew soġġetti għal perjodu ta’ 72 siegħa ta’ taħriġ fuq is-sukrożju u ttestjar tal-linja bażi tas-sukrożju. Il-firien ġew maqsuma f'ħames gruppi (n=8) ibbażati fuq il-preferenza tagħhom tas-sukrożju fit-test tal-linja bażi tas-sukrożju (Figura Supplimentari S1). Il-grupp ta' kontroll u l-grupp CUS ingħataw salina (10 ml/kg). Għat-tliet gruppi l-oħra, CTE f'doża għolja (CTEH) (400 mg/kg), doża baxxa (CTEL) (200 mg/kg), u FLX (10 mg/kg) ġew amministrati intragastrikament siegħa qabel il-proċedura CUS (8:00 am sa 9:00 am) matul 4 ġimgħat.

Stress kroniku imprevedibbli ġie żviluppat kif deskritt qabel (Willner, 1997; Xue et al., 2013), ħlief għall-grupp ta 'kontroll mhux stressat, serje ta' stressors ġew applikati għall-firien: illuminazzjoni stroboskopika ta 'intensità baxxa matul il-lejl (120 fwawar / min), storbju abjad (100 dB) għal siegħa, privazzjoni tal-ilma għal 24 siegħa, fliexken tal-ilma vojta għal siegħa (wara ċaħda tal-ilma), privazzjoni tal-ikel għal 24 siegħa, għawm sfurzat (5 min), trażżin fiżiku ({{11 }} h), gaġġa maħmuġa għal 24 siegħa (200 ml ilma f'friex tas-serratura ta '100 g), niskata tad-denb (1 min), tilt ta' gaġġa ta '45 grad għal 24 siegħa, xokk għal 30 min, u illuminazzjoni matul il-lejl (12 h). Stressors ġew applikati kontinwament u b'mod każwali għal ġimgħat 4, li d-dettalji tagħhom huma deskritti fit-Tabella Supplimentari S1. L-ikel u l-ilma kienu disponibbli liberament għall-firien ta 'kontroll mhux stressati, li baqgħu mhux disturbati f'kamra oħra, ħlief għall-perjodu ta' 14-il siegħa ta 'privazzjoni qabel kull test tas-sukrożju. Far wieħed miet waqt il-proċedura CUS. It-test tal-għawm sfurzat (FST) sar wara

4 ijiem amministrazzjoni akuta u wara 28 jum ta 'stress, test ta' preferenza sukrożju (SPT) (jum 29), test fuq il-post miftuħ (OFT) (jum 31), u test ta 'tmigħ imrażżan in-novità (NSFT) (jum 33). Il-kontorn ta 'disinn għal CUS u testijiet tal-imġieba jidher fil-Figura Supplimentari S2.

Twettaq test ta 'għawm sfurzat kif deskritt qabel (Porsolt et al., 1978). Il-proċedura kienet tikkonsisti f'sessjonijiet ta' qabel it-test u tat-test, bl-użu tal-istess apparat u kundizzjonijiet (dijametru 20 ċm, għoli 45 ċm, li fih 25 ċm ta 'ilma miżmuma f'26 grad). Matul is-sessjoni ta 'qabel it-test, il-firien kienu sfurzati jgħumu għal 15-il minuta; 24 siegħa wara, il-firien tqiegħdu fl-istess apparat għal sessjoni tat-test tal-għawm ta '5 minuti. L-imġieba tal-għawm ġewwa

5 min ġie osservat b'kamera tal-vidjo, u t-tul ta 'immobbiltà ġie mkejjel u analizzat.

Għal SPT, il-firien l-ewwel ġew imħarrġa biex jikkunsmaw soluzzjoni ta 'sukrożju 1 fil-mija (v/v) għal 72 siegħa qabel l-SPT. It-test tal-linja bażi tas-sukrożju qabel il-proċedura CUS u l-SPT fit-tmiem tal-CUS saru kif deskritt qabel (Xue et al., 2013).

It-test fuq il-post miftuħ sar fi tmiem il-proċedura CUS, l-apparat u l-metodu kienu l-istess kif iddettaljati qabel (Xue et al., 2013). Intużat sistema ta 'traċċar tal-vidjo (Shanghai Mobile Datum Information Technology Co., Ltd.) biex tirreġistra d-distanza totali vvjaġġata.

Test ta 'tmigħ imrażżan in-novità ġie vvalutat kif deskritt qabel (Xue et al., 2013) u ġiet irreġistrata u analizzata l-latenza biex tibda tiekol fi żmien 5 min.

Kejl ta 'Newrotrasmettituri u Fatturi Newrotrofiċi

Wara testijiet tal-imġieba, inkisbu mill-inqas erba 'gerbub tal-ħmieġ minn kull far, imqiegħda f'tubi konikali sterili, u ffriżati immedjatament f'-80OC għall-analiżi tal-komunità mikrobjali u SCFAs. Wara dan, il-firien ġew sagrifikati; l-ippokampus u l-kolon ġew iżolati u miżun immedjatament. Il-kampjuni tat-tessut ġew maħsula bis-salina, iffriżati snap fin-nitroġenu likwidu, u miżmuma fi -80OC għall-ħażna. Wara tidwib sekwenzjali f'-20OC u 4OC, il-kampjuni tat-tessut ġew omoġenizzati fis-salina u ċentrifugati għal 25 min f'2,500 rpm/4OC. Is-supernatant li jirriżulta nġabar u maħżun f'4OC sakemm jintuża. Il-livelli ta' 5-HT fl-ippokampus u l-kolon, NE fl-ippokampus, u BDNF fl-ippokampus ġew determinati minn kits ELISA kummerċjali skont il-protokolli tal-manifattur (Hou et al., 2017).

Analiżi tal-Profil Kompożizzjonili tal-Mikrobijota tal-Imsaren

Id-DNA totali tal-mikrobijota tal-musrana minn kampjuni tal-ħmieġ ġie estratt kif deskritt qabel (Wei et al., 20{{20}}4). Kull kampjun tal-ħmieġ (0.2 g) ġie mħallat f'1 ml PBS, u omoġenizzat għal kollox darbtejn, imbagħad ċentrifugazzjoni f'200 g għal 6 min. Is-supernatant ġie miżjud b'20 以 20 fil-mija PVP u ċentrifugat fi 300 g għal 6 min. Is-supernatant li jirriżulta mbagħad ġie ċentrifugat fi 12,000 g għal 6 min u gerbub taċ-ċelluli ġew maħsuda. Il-gerbub taċ-ċelluli ġew maħsula mill-PBS u mbagħad ġew sospiżi mill-ġdid fi 300 lysates I (150 mM NaCl, 100 mM EDTA・Na2・2H2., pH 8.0). Is-sospensjoni tħallat ma 'soluzzjoni ta' 100 以 lysozyme (100 mg/ml) u 20 以 1 fil-mija RNase, 37OC mgħum sħun għal 30 min, imbagħad miżjuda 300 段l lysate II (100 mM NaCl, 500 mM Tris bażi), pH 80. . Is-sospensjoni taċ-ċelluli tħallat bil-mod ma '50 以 20 fil-mija SDS, għamet fis-silġ għal 5 min. Id-DNA mbagħad ġie purifikat b'estrazzjoni sekwenzjali b'1 fil-mija PVP, fenol ekwilibrat Tris u alkoħol kloroform-isoamyl (vol/vol/vol/vol, 3.125:25:24:1), u kloroform-alkoħol isoamyl (vol/vol, 24). :1) segwit minn preċipitazzjoni fi -20OC għal 2 sigħat b'żewġ volumi ta 'etanol u 50 [il 3 M NaAc. DNA kien miġbur permezz ta 'ċentrifugazzjoni, imnixxef bl-arja, u maħlul fl-ilma dejonizzat sterili 100 il. Il-purità tal-aċidu nuklejku ġiet ittestjata bl-użu ta 'Spettrofotometru NanoDrop 2000c (Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA, l-Istati Uniti). Id-DNA ġenomika totali mbagħad ġie soġġett għal amplifikazzjoni tal-PCR bl-użu ta' primers speċifiċi għar-reġjuni V3-V4 tal-ġene 16S rRNA: forward primer 338F (5'-ACTCCTACGGGAGGCAGCA-3') u r-reverse primer 806R (5 '-GGACTACHVGGGTWTCTAAT- 3'). L-amplicons tal-PCR ġew ippurifikati bi żibeġ Agencourt AMPure (Beckman Coulter, Indianapolis, IN, l-Istati Uniti) u kkwantifikati bl-użu tal-PicoGreen dsDNA Assay Kit (Invitrogen, Carlsbad, CA, l-Istati Uniti). Wara l-pass ta 'kwantifikazzjoni individwali, l-amplicons ġew miġbura f'ammonti ugwali, u sekwenzar ta' par-end 2 x 300 bp sar bl-użu tal-pjattaforma Illumina MiSeq b'MiSeq Reagent Kit v3 f'Shanghai Personal Biotechnology Co., Ltd (Shanghai, Ċina). Il-qari tat-tarf paired ġew immuntati bl-użu ta 'softwer FLASH (verżjoni 1.2.7), il-qari ta' sekwenza mhux ipproċessat ġew mirquma ta 'kwalità bl-użu tas-softwer QIIME (verżjoni 1.8.0) biex jitneħħew barcodes mhux imqabbla u sekwenzi taħt il-limiti tat-tul. Wara, is-sekwenzi ffiltrati ġew miġbura f'unitajiet tassonomiċi operattivi (OTUs) b'limitu ta 'xebh ta' sekwenza ta '97 fil-mija bl-użu ta' QIIME ma 'UCLUST. Id-diversità beta twettqet fuq QIIME għal analiżi tal-koordinati prinċipali UniFrac peżata (PCoA). Fl-aħħarnett, intuża softwer Meta stats biex iqabbel id-differenzi fil-kompożizzjoni tassonomika tal-mikrobi tal-musrana fost gruppi differenti.

Analiżi tal-Konċentrazzjoni tal-SCFAs

Il-konċentrazzjoni ta' SCFAs (inklużi aċetat, propionate, butyrate, isobutyrate, valeric acid, isovaleric acid, u hexanoic acid) f'kampjuni tal-ħmieġ tal-firien ġew determinati bil-kromatografu tal-gass GC{{0}} (Shimadzu, Ġappun), imwaħħal b'kolonna DB-FFAP (30 mx 0.25 mm x {{10}}.25 ċm, Agilent, l-Istati Uniti). Soluzzjonijiet standard ta' aċetat, propionate, butyrate, isobutyrate, valeric acid, isovaleric acid, u hexanoic acid ġew ippreparati f'1, 0.4, 0.2, 0.1, {{ 21}}.05, 0.01, u 0.005 mg/ml bl-etere (inkluż 2- metil valeric acid 0.1 mg/ml bħala standard intern), rispettivament. Kull kampjun tal-ippurgar (0.2 g) tħallat f'0.8 ml ilma dejonizzat permezz ta' vortex u ċentrifugazzjoni f'5,000 rpm għal 20 min f'4OC, 450 il ta' supernatant ġew miżjuda b'50 il 50 fil-mija H2SO4 u 500 il standard intern soluzzjoni, vortex għal 1 min u ċentrifugata fi 12,000 rpm għal 10 min, imbagħad it-taħlita tqiegħdet f'4OC għal 30 min. Is-supernatant ittieħed għall-analiżi GC. L-analiżi ta 'SCFAs twettqet kif deskritt qabel (Wang et al., 2016).

Analiżi Statistika

Id-dejta kollha ġiet ippreżentata bħala mezz 土 SEM. Analiżi statistika saret bl-użu tas-softwer SPSS 21.0 (SPSS Inc., Chicago, IL, l-Istati Uniti) b'ANOVA one-way segwit mit-test ta' Dunnett jew it-test t ta' Student. Id-dejta kienet eskluża mill-analiżi jekk tkun akbar minn żewġ devjazzjonijiet standard mill-medja. Valuri ta' p < 0.05="" tqiesu="" statistikament="" sinifikanti.="" l-analiżi="" ta="" 'korrelazzjoni="" ta'="" pearson="" ġiet="" impjegata="" biex="" tevalwa="" l-assoċjazzjoni="" bejn="" l-abbundanza="" relattiva="" ta="" 'mikrobijota="" tal-musrana,="" scfas,="" livelli="" tal-hippocampus="" 5-ht,="" ne,="" u="" bdnf,="" u="" kolon="">

RIŻULTATI

Analiżi tal-Kompożizzjoni Kimika tas-CTE

Il-kompożizzjoni kimika tas-CTE l-ewwel ġiet analizzata b'mod komprensiv. Kif muri fit-Tabella 1, PhGs kienu l-komponent ewlieni ta 'CTE, b'kontenut relattiv ta' 48.6 fil-mija, iridojdi u glikosidi iridojdi kienu 6.9 fil-mija, u saccharides totali kienu 20.0 fil-mija. Dawn

komponenti ta 'CTE imbagħad ġew ikkaratterizzati bl-użu ta' UPLC-Q-TOF-MS. Ġie skopert u identifikat total ta '27 kostitwent, inklużi 20 kostitwent ta' PhGs, ħames iridojdi u glikożidi iridojdi, u żewġ oligosakkaridi. Informazzjoni dettaljata inkluż ħin ta 'żamma, MS preċiża, u jonji frammenti MS/MS huma elenkati fl-Informazzjoni ta' Appoġġ (Tabella Supplimentari S2). Il-kromatogramma tal-jone totali (TIC) UPLC-Q-TOF-MS ta 'CTE tidher fil-Figura Supplimentari S3.

CTE Tejbet l-Imġieba Depressiva fil-Firien CUS

Fil-firien CUS, il-ħin totali ta 'immobbiltà fl-FST u l-latenza biex tiekol f'NSFT naqsu b'mod sinifikanti bit-trattament CTE, u l-preferenza tas-sukrożju fl-SPT u d-distanza totali koperta f'OFT żdiedu.

Figura 1A turi l-effetti akuti ta 'CTE fuq il-ħin ta' immobilità f'FST fil-firien CUS. Meta mqabbel mal-grupp tal-mudell CUS, 3- jum ta' amministrazzjoni orali akuta ta' CTE naqqas b'mod sinifikanti l-ħin totali ta' immobilità f'FST [one-way ANOVA, F(3,26)=4.983, p {{7} }.007]. Analiżi posthoc ulterjuri żvelat dik l-amministrazzjoni

TABELLA 1|kompożizzjoni kimika taC. tubulosaestratt ta 'CTE bi grupp ta' doża għolja (test ta 'Dunnett, p <{{0}}.05) u grupp ta' doża baxxa (test ta 'Dunnett, p < 0.05) wrew tnaqqis immarkat fuq il-ħin totali ta' immobilità fl-FST .

L-effetti tas-CTE fuq il-preferenza tas-sukrożju fl-SPT fil-firien CUS huma murija fil-Figura 1B. Tmienja u għoxrin jum proċedura ta’ stress ikkawżat tnaqqis sinifikanti fil-preferenza tas-sukrożju fil-grupp tal-mudell CUS meta mqabbel mal-firien ta’ kontroll mhux stressati [one-way ANOVA, F(4,34)=3.993, p {{8 }}.{{10}}09; It-test ta' Dunnett, p < 0.05],="" li="" jindika="" li="" l-mudell="" cus="" ġie="" żviluppat="" b'suċċess.="" bħala="" l-kontroll="" pożittiv,="" il-grupp="" flx="" żied="" b'mod="" sinifikanti="" l-preferenza="" tas-sukrożju="" fil-firien="" cus="" [one-way="" anova,="" f(4,34)="3.993," p="0.009;" it-test="" ta'="" dunnett,="" p=""><0.05], li="" juri="" l-validità="" ta'="" tbassir="" tal-mudell="" cus.="" amministrazzjoni="" orali="" kronika="" ta'="" cte="" fi="" grupp="" ta'="" doża="" għolja="" wriet="" effetti="" ewlenin="" fuq="" preferenza="" ta'="" sukrożju="" [one-way="" anova,="" f(4,34)="3.993,p=0.009;" it-test="" ta'="" dunnett,="" p="">< 0.01],="" li="" rrestawraha="" għal-livelli="" normali="" fil-firien="" cus.="" cte="" bil-grupp="" ta'="" doża="" baxxa="" wera="" xejra="" ta'="" żieda="" iżda="" l-effett="" ma="" kienx="" statistikament="" sinifikanti="" (test="" ta'="" dunnett,="" p="">

Kif muri fil-Figura 1C, id-distanza totali koperta fl-OFT intużat ukoll biex tevalwa l-effetti ta 'CTE fuq il-firien CUS. Meta mqabbel ma 'firien mhux stressanti, il-grupp tal-mudell CUS wera distanza totali ħafna iqsar [one-way ANOVA, F(4,34)=7.845, p=0.0{{ 19}}01; It-test ta' Dunnett, p <0.001] wara="" 4-ġimgħa="" espożizzjoni="" għal="" cus,="" u="" t-trattament="" flx="" ta'="" kontroll="" pożittiv="" żiedu="" d-distanza="" totali="" fil-firien="" cus="" [one-way="" anova,="" f(4,34)="7.845," p="0.0001;" it-test="" ta'="" dunnett,="" p="">< 0.05].="" amministrazzjoni="" orali="" ta'="" kuljum="" ta'="" cte="" b'doża="" għolja="" u="" doża="" baxxa="" wriet="" effett="" evidenti="" fuq="" id-distanza="" totali="" fil-firien="" cus="" [one-way="" anova,="" f(4,34)="7.845," p="0.0001" ;="" it-test="" ta'="" dunnett,="" p="">< 0.01="" għal="" grupp="" ta'="" doża="" għolja,="" p="">< 0.001="" għal="" grupp="" ta'="" doża="" baxxa,="" rispettivament].="" il-figura="" supplimentari="" s4="" turi="" l-mappa="" tal-binarji="" tal-attività="">

Il-Figura 1D turi l-effetti ta 'CTE fuq latency biex tiekol fl-NSFT fil-firien CUS. Tmienja u għoxrin jum proċedura ta 'stress ikkawżat żieda sinifikanti fil-latency biex tibda tiekol fil-grupp tal-mudell CUS meta mqabbla mal-firien ta' kontroll mhux stressati [one-way ANOVA, F(4,33)=3.434, p { {8}}.{{10}}19; It-test ta' Dunnett, p < 0.05],="" li="" jindika="" li="" l-mudell="" cus="" ġie="" żviluppat="" b'suċċess.="" amministrazzjoni="" orali="" fit-tul="" ta="" 'cte="" b'doża="" għolja="" wriet="" effetti="" evidenti="" fuq="" latency="" biex="" tibda="" tiekol="" meta="" mqabbla="" mal-grupp="" cus="" (t-test="" ta'="" l-istudent,="" t="2.759," p="">< 0.05),="" filwaqt="" li="" doża="" baxxa="" ta="" 'cte="" wriet.="" ebda="">

CTE Irrestawra l-Livell ta 'Newrotrasmettituri u Fatturi Newrotrofiċi fil-Firien CUS

L-effetti tas-CTE fuq il-livelli {{{{10}}}}HT u NE fl-ippokampus tal-firien CUS huma murija fil-Figuri 2A,B. Erba' ġimgħat proċedura ta' stress ikkawżat tnaqqis sinifikanti ta' 5-HT [one-way ANOVA, F(4,34)=17.13, p=0.0{{39 }}01; It-test ta' Dunnett, p < 0.001]="" u="" ne="" [one-way="" anova,="" f(4,34)="6.376,p=0.0006;" it-test="" ta'="" dunnett,="" p="">< 0.001]="" konċentrazzjoni="" fl-ippokampus="" tal-firien="" cus="" meta="" mqabbel="" ma'="" dak="" fil-grupp="" ta'="" kontroll,="" u="" l-antidipressant="" flx="" irrestawra="" b'mod="" sinifikanti="" l-livelli="" 5-ht="" fl-ippokampus="" [one-way="" anova,="" f(4,34)="" {="" {25}}.13,="" p="0.0001;" it-test="" ta'="" dunnett,="" p="">< 0.001].="" wara="" l-għoti="" orali="" ta'="" cte="" fi="" grupp="" ta'="" doża="" għolja,="" ġiet="" osservata="" żieda="" sinifikanti="" fil-livell="" ta'="" 5-ht="" [one-way="" anova,="" f(4,34)="17.13," p="0.0001" ;="" it-test="" ta'="" dunnett,="" p="">< 0.001]="" filwaqt="" li="" l-konċentrazzjonijiet="" ne="" ma="" nbidlux.="" bl-istess="" mod,="" l-espressjoni="" ta="" 'bdnf="" tnaqqset="" b'mod="" sinifikanti="" fil-grupp="" tal-mudell="" cus="" meta="" mqabbel="" mal-firien="" mhux="" stressati="" (t-test="" tal-istudent,="" t="4.171," p=""><0.01) (figura="" 2c).="" kemm="" amministrazzjoni="" orali="" fit-tul="" ta'="" cte="" b'doża="" għolja="" (t-test="" tal-istudent,="" t="2.548," p="">< 0.05)="" u="" flx="" (t-test="" tal-istudent,="" t="2.263," p="">< 0.05)="" )="" żieda="" fl-espressjoni="" tal-bdnf="" meta="" mqabbla="" mal-grupp="" tal-mudell="" cus.="" cte="" b'doża="" baxxa="" ma="" wriet="" l-ebda="" effett="" sinifikanti="" fuq="" l-espressjoni="" ta'="">

Il-livell {{0}}HT fil-kolon tal-firien CUS kien differenti minn dak fl-ippokampus, u l-4-proċedura tal-istress tal-ġimgħa ma kellha ebda impatt fuq il-kolon 5-HT (Figura 2D ). Bil-maqlub, l-għoti orali ta' CTE b'doża għolja stimula livelli ta' 5-HT fil-kolon meta mqabbla mal-grupp tal-mudell CUS (T-test tal-Istudent, t=2.173, p < 0.05).="" cte="" b'doża="" baxxa="" ma="" wriet="" l-ebda="" effett="" fuq="" il-livell="" tal-kolon="">

CTE Irregolat il-Kompożizzjoni Mikrobjali tal-Imsaren tal-Firien CUS

L-effett ta 'CTE fuq il-kompożizzjoni mikrobjali tal-imsaren tal-firien CUS ġie evalwat bil-metodu bbażat fuq is-sekwenzjar tal-ġeni rRNA 16S. Instab li 28 jum ta’ amministrazzjoni orali ta’ CTE biddlu l-kompożizzjoni mikrobjali tal-imsaren tal-firien CUS u kellhom impatt fuq diversi

livelli tassonomiċi mikrobiċi fost gruppi tal-firien (livell tal-klassi 1, livell tal-ordni 1, livell tal-familja 1, livell tal-ġeneru 8, u livell tal-ispeċi 2). Dan jissuġġerixxi li l-komunità mikrobjali tal-imsaren jista 'jkollha rwol fl-effetti anti-dipressanti ta' CTE. Informazzjoni dettaljata ta 'taxa mikrobjali tal-musrana mibdula b'mod sinifikanti f'livelli tassonomiċi differenti tidher fit-Tabella 2.

Is-sekwenzjar ta 'MiSeq ta total ta' 2,132,980 qari mhux ipproċessat, wara kontroll tal-kwalità, denoising, u proċess ta 'tneħħija tal-kimera. Sussegwentement, il-qari ġew miġbura f'OTUs, li ġew assenjati lil taxa minn phylum għal-livell ta 'speċi. L-istudju tal-analiżi tad-diversità beta sar biex jesplora x-xebh tal-mudelli tal-komunità batterjali fost il-ħames gruppi tal-firien. PCoA bbażat fuq distanzi UniFrac peżati tal-mikrobijota tal-musrana mill-ħames gruppi ta 'firien ta' studju jidher fil-Figura 3A. L-analiżi tad-diversità beta minn PCoA wriet separazzjoni ċara tal-komunità mikrobjali mill-grupp ta 'kontroll u l-grupp tal-mudell CUS, filwaqt li s-CTE b'grupp ta' doża għolja kellu tendenza li jkun eqreb lejn il-grupp ta 'kontroll meta mqabbel mal-grupp CUS.

Metastatic analysis was used to investigate the differences in gut microbial taxonomic composition among different groups. At the phylum level, the most dominant microbial taxa in the five rat groups were Firmicutes and Bacteroidetes (Figure 3B). Lactobacillus, Ruminococcus, Blautia, Bacteroides, and Prevotella were the most highly abundant microbial taxa at the genus level (Figure 3C). The two dominant phyla, Firmicutes and Bacteroidetes, accounted for a combined relative abundance of >90 fil-mija. Kif muri fil-Figuri Supplimentari S5A, B, proċedura ta 'stress ta' ġimgħat 4 ikkawżat tendenza mhux sinifikanti lejn livell miżjud ta 'Firmicutes u tnaqqis mhux sinifikanti ta' Bacteroidetes fil-grupp tal-mudell CUS meta mqabbel mal-grupp ta 'kontroll. Wara l-għoti ta 'kuljum ta' CTE b'doża għolja u doża baxxa, l-abbundanza relattiva ta 'Firmicutes u Bacteroidetes reġgħet lura għal livelli simili tal-grupp ta' kontroll, għalkemm mingħajr sinifikat statistiku. U għalkemm ġew osservati bidliet simili għall-proporzjon Firmicutes/Bacteroidetes fost il-gruppi tal-firien, ma ntwerew l-ebda differenzi statistiċi (Figura Supplimentari S5C). Instabet xejra mhux sinifikanti lejn livell imnaqqas ta 'phyla Cyanobacteria fil-grupp tal-mudell CUS meta mqabbel mal-firien ta' kontroll mhux stressati; billi l-amministrazzjoni ta 'CTE b'doża għolja rriżultat f'żieda sinifikanti fl-abbundanza relattiva ta' Cyanobacteria meta mqabbla mal-grupp CUS (Figura Supplimentari S5D).

Fil-livell tal-ġeneru, Bacteroides u Ruminococcus kienu tnejn mill-aktar taxa mikrobjali abbundanti ħafna li ammontaw għal madwar 30 fil-mija abbundanza relattiva fil-ħames gruppi tal-firien kollha. Erba 'ġimgħat proċedura ta' stress ikkawżat tnaqqis sinifikanti fl-abbundanza relattiva ta 'Bacteroides u żieda sinifikanti ta' Ruminococcus fil-grupp tal-mudell CUS meta mqabbla mal-firien ta 'kontroll mhux stressati (Figuri 4A, B). Amministrazzjoni fit-tul ta 'CTE irriżulta f'żieda sinifikanti fl-abbundanza ta' Bacteroides kif ukoll tnaqqis sinifikanti ta 'Ruminococcus meta mqabbla mal-firien CUS. Barra minn hekk, sitt ġeneri ta 'Parabacteroides, Butyricimonas, Deinococcus, Weissella, Trichococcus u Brachybacterium wrew differenzi statistikament sinifikanti bejn il-grupp tal-mudell CUS u l-grupp ta' kontroll (Figuri 4C-H). Wara 28 jum ta' trattament ta' CTE, l-abbundanza relattiva tas-sitt ġeneri msemmija hawn fuq inbidlet rispettivament għal livelli simili għall-grupp ta' kontroll.

Abbundanza baxxa ta' Deinococcus f'livelli tassonomiċi differenti inkluż livell ta' klassi (Deinococci), livell ta' ordni (Deinococcales), livell ta' familja (Deinococcaceae), u livell ta' ġeneru (Deinococcus) ġiet skoperta fil-grupp tal-firien CUS, filwaqt li naqset milli tiġi skoperta fil-kontroll. grupp u l-gruppi ta 'amministrazzjoni (Figuri 5A-D).

Fil-livell tal-ispeċi, Weissella beninensis kienet ħafna aktar baxxa fil-grupp CUS milli fil-grupp ta 'kontroll, u ġiet osservata żieda sinifikanti fl-abbundanza relattiva wara l-għoti ta' CTE b'doża għolja (Figura 5E). Bil-maqlub, l-amministrazzjoni ta 'CTE qalbet iż-żieda sinifikanti fl-abbundanza relattiva tal-konglomerat ta' Brachybacterium osservata fil-firien CUS (Figura 5F).

SCFAs Modulati CTE fil-Firien CUS

Il-konċentrazzjonijiet SCFAs (inklużi aċetat, propionate, butyrate, isobutyrate, valeric acid, isovaleric acid, u hexanoic acid) f'kampjuni tal-ħmieġ tal-firien ġew analizzati b'GC u huma murija fil-Figura 6. Il-livelli ta 'aċetat [one-way ANOVA, F( 4,32)=2.721, p=0.0467; It-test ta' Dunnett, p < 0.05]="" u="" l-aċidu="" hexanoic="" [one-way="" anova,="" f(4,30)="3.028," p="" {{15="" }}.0328;="" it-test="" ta="" 'dunnett,="" p=""><0.05] żdiedu="" b'mod="" sinifikanti="" fil-firien="" tal-grupp="" tal-mudell="" cus="" meta="" mqabbla="" mal-grupp="" ta'="" kontroll.="" wara="" amministrazzjoni="" fit-tul="" ta'="" cte="" b'doża="" għolja,="" aċetat="" (t-test="" tal-istudent,="" t="2.182," p="">< 0.05)="" u="" aċidu="" hexanoic="" [one-way="" anova,="" f(4,30)="3" .028,="" p="0.0328;" il-konċentrazzjonijiet="" tat-test="" ta'="" dunnett,="" p="">< 0.05]="" kienu="" naqsu="" b'mod="" predominanti="" meta="" mqabbla="" mal-grupp="" cus,="" u="" dan="" jindika="" li="" cte="" jista'="" jeżerċita="" l-attività="" anti-dipressanti="" tiegħu="" permezz="" tal-modulazzjoni="" tal-metaboliti="" newroattivi="" diżordinati="" scfas.="" l-għoti="" ta'="" cte="" bi="" grupp="" ta'="" doża="" baxxa="" wera="" xejra="" ta'="" tnaqqis="" iżda="" l-ebda="" effett="" notevoli="" fuq="" il-konċentrazzjonijiet="" ta'="" aċetat="" u="" aċidu="">

Analiżi ta' Korrelazzjoni tal-Mikrobijota tal-Imsaren, Newrotrasmettituri u Newrotrofini fl-Hippocampus, 5-HT fil-Kolon, u SCFAs

Biex tesplora r-relazzjoni funzjonali ta 'mikrobijota tal-musrana mibdula fil-livell tal-ġeneru, newrotrasmettituri u newrotrofini mibdula fl-ippokampus u l-kolon, u l-konċentrazzjoni inkwetanti ta' SCFAs, ġew żviluppati koeffiċjenti ta 'korrelazzjoni ta' Pearson (Meng et al., 2017). Korrelazzjonijiet bejniethom (r > 0.4 jew r < -0.4,="" p="">< 0.05)="" huma="" murija="" fil-figura="" 7.="" il-koeffiċjenti="" indikaw="" korrelazzjonijiet="" qawwija="" bejn="" il-kompożizzjoni="" mibdula="" tal-mikrobijota="" tal-musrana="" fil-livell="" tal-ġeneru,="" il-konċentrazzjoni="" ta'="" seba'="" tipi="" ta'="" scfas,="" u="" newrotrasmettituri="" ta'="" monoamine="" relatati="" mad-dipressjoni="" (5-ht="" u="" ne).="" l-abbundanza="" ta'="" ruminococcus="" wriet="" korrelazzjoni="" negattiva="" sinifikanti="" ma'="" konċentrazzjoni="" 5-ht="" fl-ippokampus,="" li="" jfisser="" li="" l-proċedura="" cus="" twassal="" għal="" żieda="" fl-abbundanza="" relattiva="" ta'="" ruminococcus="" u="" tnaqqis="" fil-konċentrazzjonijiet="" 5-ht.="" wara="" t-trattament="" b'cte,="" l-abbundanza="" relattiva="" ta'="" ruminococcus="" tnaqqset="" għal-livell="" tal-grupp="" ta'="" kontroll,="" u="" l-livelli="" ta'="" 5-ht="" instabu="" li="" tjiebu.="" barra="" minn="" hekk,="" l-abbundanza="" relattiva="" ta'="" bacteroides="" kienet="" korrelatata="" b'mod="" pożittiv="" ma'="" livell="" 5-ht="">

hippocampus, u assoċjati negattivament mal-konċentrazzjoni ta 'butirrat, isobutyrate, aċidu valeriku, aċidu isovaleriku, u aċidu hexanoic; l-abbundanza ta 'Parabacteroides wriet korrelazzjoni pożittiva sinifikanti ma' livell 5-HT fil-konċentrazzjoni tal-hippocampus u propionate, filwaqt li wriet korrelazzjoni negattiva ma 'konċentrazzjonijiet ta' isobutyrate u isovaleric acid; ġiet osservata wkoll assoċjazzjoni pożittiva sinifikanti bejn l-abbundanza relattiva ta 'Butyricimonas u l-livell NE fl-hippocampus, u l-abbundanza relattiva ta' Deinococcus kienet korrelatata b'mod pożittiv mal-konċentrazzjoni ta 'aċetat. Dan wera li CTE jista 'jeżerċita l-attività anti-dipressanti tiegħu billi jibdel il-kompożizzjoni tal-mikrobijota tal-musrana, jiddisturba l-livelli ta' newrotrasmettitur tal-hippocampus, u jirrestawra l-metaboliti newroattivi SCFAs. Dejta dettaljata tal-analiżi tal-korrelazzjoni tidher fit-Tabella Supplimentari S3.

cistanchejistgħu jittrattawdijabete

DISKUSSJONI

Identifikazzjoni ta 'Attività Kontra d-depressjoni ta' CTE u l-Vantaġġi Kliniċi tagħha

Dan l-istudju evalwa l-attività antidepressiva ta 'CTE fil-firien CUS, ikkonferma l-effikaċja ta' mudelli in vivo bħal FST, SPT, OFT, u NSFT, u kkonferma l-attività anti-depressiva ta 'C. tubulosafil-firien CUS li spiss jintuża għat-trattament ta 'defiċjenza tal-kliewi, impotenza, u infertilità femminili fit-TCM. Bħalissa, l-aktar antidipressanti preskritti b'mod komuni huma l-inibitur tar-reuptake tas-serotonin u norepinephrine (SNRI) venlafaxine, segwit mill-inibitur selettiv tar-reuptake tas-serotonin (SSRI) FLX (Thase et al., 2001; Mcintyre, 2017). Madankollu, dawn l-antidipressanti intwerew li għandhom effetti sekondarji severi inkluż tossiċità kardijaka, pressjoni tad-demm, disfunzjoni sesswali, u disturbi fl-irqad (Ferguson, 2001; Jin et al., 2015). Fost il-klassijiet kollha ta 'antidipressanti, SSRI u SNRI huma korrelatati mal-ogħla inċidenza ta' disfunzjoni sesswali (Montejogonzalez et al., 1997; Clayton et al., 2014). Ta 'nota partikolari hija l-inċidenza ġenerali ta' disfunzjoni sesswali, li hija f'59.1 fil-mija (604/1,022) meta l-antidipressanti kollha huma kkunsidrati bħala ħaġa sħiħa; u madwar 40 fil-mija tal-pazjenti juru tolleranza baxxa għal disfunzjoni sesswali, għalhekk il-konformità mad-droga hija affettwata b'mod serju (Clayton, 2001). Fid-dawl tal-iżvantaġġi tat-trattament attwali tad-dipressjoni, Cistanches Herba juri potenzjal kbir għall-applikazzjoni klinika, mhux biss minħabba l-attività qawwija tiegħu bħall-antidipressanti iżda wkoll minħabba liCistanches Herbaintuża tradizzjonalment biex jikkura l-impotenza, li mill-inqas għandha telimina tħassib wieħed mill-aktar effetti sekondarji komuni kkawżati minn antidipressanti oħra (Fu et al., 2017). Barra minn hekk, Cistanches Herba ma juri l-ebda sinjali ta 'tossiċità u bidliet relatati mat-trattament