Analiżi tal-Kompożizzjoni U Attivitajiet Immunoloġiċi ta' l-Oligosakkaridi Iżolati mid-deżertifikazzjoni tal-Cistanche

Aktar tagħrif: emily.li@wecistanche.com

Astratti.Oligosakkaride (CDOS) inkiseb minnCistanche deserticolabl-estrazzjoni bl-alkali (pH=10), preċipitazzjoni ta' l-etanol, u frazzjonata f'żewġ frazzjonijiet ippurifikati (i.e., CDOS-1 u CDOS-2)permezz ta' Sephadex G-100 u Sephadex G-25 kolonna ta' kromatografija ta' filtrazzjoni. Il-kompożizzjoni monosakkarika tas-CDOS ġiet assaġġata permezz ta' kromatografija likwida ta' prestazzjoni għolja (HPLC). Instab li CDOS-1 kien magħmul biss minn sucrose u CDOS-2 kien magħmul prinċipalment minn sucrose, rhamnose, u mannitol, bi proporzjon mole ta' 1:0.73:3.61. Testijiet immunoloġiċi indikaw li CDOS ippreżenta effett sinifikanti fuq l- indiċi tal- milsa tal- ġrieden, u żied l- attività ta ' fagoċitożi tal- makrofaġi u jistimula l- proliferazzjoni taċ- ċelluli li jipproduċu l- antikorpi. Huwa ttamat li s-CDOS jiġi żviluppat f'ikel jew mediċina funzjonali.

Kliem ewlieni:Cistanchedeżerticola, oligosakkarid, purifikazzjoni, kompożizzjoni, attivitajiet immunoloġiċi.

Cistanche deserticola għandhom ħafna effetti, ikklikkja hawn biex tkun taf aktar

1. Introduzzjoni

CistancheY.C.Ma tad-deżert. (Family Orobanchaceae) hija pjanta parassitika qasira indiġena fil-majjistral taċ-Ċina. L-impjant imnixxef kollu (mingħajr fjuri) huwa magħruf bħala toniku u jissejjaħ "Rou Congrong". Fil-mediċina orjentali, hija kklassifikata bħala ħelwa u mielħa fit-togħma, ta' natura sħuna, u attribwibbli għall-kanali tal-kliewi u tal-imsaren il-kbar, bil-funzjoniinvigoratinggħad-Kliewiu s-supplimentar tal-essenza, moisturizing l-imsaren, u l-bowels rilassanti [1]-[3]. L-istudju farmakoloġiku modern wera li jista 'jwassal għas-sinteżi tad-DNA u jdewwem il-proċess tas-senilità, iżid l-antiossidattiv [4] , jipprevjeni u jittratta mard kardjovaskulari [3]. Barra minn hekk, jista 'wkoll jikkawża analġeżiku uKontra-infjammatorjieffetti [5], ittejjeb it-tagħlim u l-memorja billi tinduċi fatturi ta 'tkabbir tan-nervituri [6]. Xi studji indikaw li l-estratti ta' C. deserticola setgħu jattivaw il-funzjoni fagoċitika tal-makrofaġi intra-addominali fil-ġrieden [7]-[9] uittejjeb il-ġisem"sImmunità[10]. Skont l-istudji preċedenti, dan l-impjant fih kostitwenti attivi multipli li jinkludu glikosidi tal-fenilentanojdi, iridojdi, lignans, sakkaridi, alkalojde, eċċ.deżerticolafenitanojdeglikosidiu l-polisakkaridi huma rikonoxxuti bħala l-komponenti attivi ewlenin, bosta studji ffukaw fuq l-istrutturi u l-bijoakti funzjonalitajiet tagħhom matul l-aħħar deċennji [12]-[17]. Fir-rigward tal-oligosakkaridi ta' valur fiC. deserticola, ir-rapporti huma pjuttost limitati. Oligosakkaridi, sakkarid ta' katina qasira li fih homo- jew etero-zokkor, huma magħrufa sew għall-effetti ta' benefiċċju tagħhom fuq il-ħajja tal-bniedem u ilhom jintużaw b'mod estensiv għal żmien twil [18]. Oligosakkaridi funzjonali, li għandhom funzjoni fiżjoloġika bħal karjoġenjoġenika baxxa u fattur ta' tkabbir tal-bijofikobatterji [19], itejbu s-saħħa tal-bnedmin u tal-annimali. Ġew utilizzati bħala ingredjent tal-ikel. Reċentement, ġew irrappurtati funzjonijiet ġodda ta 'oligosakkaridi, li għandhom il-kapaċità li jimmodulaw is-sistema immunitarja fil-bnedmin, l-annimali u l-ħut [20]. F'dan id-dokument, aħna nirrapportaw l-ewwel parti tar-riżultati tal-programm ta 'riċerka, il-frazzjonament tal-oligosakkaridi totali miksuba mill-estratt alkali ta' C. deserticola b'taħlita ta 'kromatografija ta' permeazzjoni ta 'ultrafiltrazzjoni u ġell, u l-analiżi tal-kompożizzjoni tagħhom permezz ta' kromatografija likwida ta 'prestazzjoni għolja (HPLC). Barra minn hekk, aħna nippreżentaw ukoll l-attivitajiet immunoloġiċi tal-oligosakkaridi C. deserticola. Sa fejn nafu aħna, hemm ftit rapporti ppubblikati dwar l-istudji ta' attività immunostimulazzjoni ta'C. deserticolaoligosakkaridi.

2. sperimentali

2.1. Materjali

Is-C. deserticola ġie kkultivat u miġbur mil-Lega Alxa (Il-Mongolja Interna, iċ-Ċina). Ġrieden kunming (GradeII, sitt ġimgħat) inxtraw miċ-Ċentru Sperimentali Farmakoloġiku tal-Università tal-Mongolja Interna. Sephadex G-100,Sephadex G-25, aċidu trifluworoaċetiku (TFA), 1-phenyl-3-methyl-5- pyrazolone(PMP), D-glucose, D-galattożju, D-fruttożju, D-xylose, D-mannose, aċidu D-galacturonic, aċidu D- glukuroniku, sukrożju, rhamnose, mannitol, fucose, rhamnose, inxtraw minn Sigma (St. Louis, MO, USA). RPMI-1640 medju nxtara minn Gibco Invitrogen Co. (San Diego, CA, l-Istati Uniti). Is-sustanzi kimiċi l-oħra kollha kienu ta' grad analitiku.

2.2. Estrazzjoni ta' oligosakkaridi

Il-korpi mnixxfa ta' C. deserticola nqatgħu f'biċċiet iżgħar u aktar mitħun fi trab minn mitħna ġew estratti bl-etanol anidru (3×5000 ml) f'70° għal 3 siegħa taħt pressjoni atmosferika. Ġie ffissat kondensatur reflux biex ineħħi l-lipidi. Ir-residwu li fadal imbagħad ġie estratt bl-alkali (pH=10) f'60 °C għal 3 darbiet (2h kull darba). Wara ċ-ċentrifugazzjoni (2000 g għal 15-il minuta, f'20°), is-supernatant kien ikkonċentrat għal wieħed minn għaxra tal-volum f'evaporatur rotatorju taħt pressjoni mnaqqsa f'50°C u ffiltrat. Imbagħad il-filtrat ġie deproteinat bl-użu tar-reaġent Sevag [21], u dekolorat b'karbonju attivat.

2.3. Iżolament u purifikazzjoni ta' oligosakkaridi

L-oligosakkaridi mhux raffinati mnixxfa bil-friża ġew maħlula f'ilma distillat, ċentrifugati, u mbagħad is-supernatant ġie ppurifikat b'kolonna Sephadex G-100 (1×50 cm), ekwilibrata b'ilma ultrapure. Wara t-tagħbija bil-kampjun, il-kolonna ġiet eluted b'ilma ultrapure b'rata ta 'fluss ta' 5 ml / min. Inġabru frazzjonijiet differenti bl-użu ta' tubi tat-test. Il-kontenut totali ta' karboidrati ta' kull tubu tkejlet f'490nm bil-metodu fenol-H2SO4 [22]. Is-soluzzjoni eluted ta' l-ilma ġiet separata f'żewġ frazzjonijiet CDOS-1 u CDOs-2. Żewġ frazzjonijiet ġew ippurifikati rispettivament aktar fuq kolonna Sephadex G-25 (2.7×85 cm) bl-użu ta' ilma ultrapure (b'rata ta' fluss ta' 1 ml/min). Wara li ġabret il-frazzjoni ppurifikata, ġiet lajofilizzata.

2.4. Analiżi tal-kompożizzjoni monosakkarid

Il-kompożizzjoni monosakkarika tas-CDOs inkisbet permezz ta' analiżi HPLC. Is-CDOs (2 mg) ġew idrolizzata l-ewwel b'metanol anidru li fih 2 M HCl f'80 °C għal 16-il siegħa f'atmosfera ta' nitroġenu u mbagħad b'2 M TFA f'120 °C għal 1 siegħa. Wara li t-TFA tneħħa bl-evaporazzjoni, l-idrolisati sussegwentement ġew derivati b'PMP skont il-metodu rrappurtat [23] u analizzati mill-HPLC. Is-separazzjoni hplc twettqet fuq is-sistema HPLC EF-2002 (kumpanija KNAUER, il-Ġermanja). Id-derivattivi tal-PMP ġew kromatografati bl-użu tal-volum Sugar-PAK (6.5×300mm, tazzi tal-kumpanija tal-ilma, l-Amerika), u l-assorbenza tkejlet f'245 nm. Il- volum ta ' l- injezzjoni kien ta ' 20μL, u l- fażi mobbli, magħmula minn PBS (solvent A) u acetonitrile (solvent B), intużat għal elużjoni isokratika fil- proporzjon tal- volum ta ' 82% (A) sa 18% (B). Il-ħin totali tal-ġirja hplc kien 40 min, u r-rata tal-fluss kienet ta '0.5 mL / min.

2.5 Attivitajiet Immunobijoloġiċi

2.5.1. Funzjoni fagoċitika tal-monoċiti-makrofaġi

Sittin ġrieden Kunming (GradeII, sitt ġimgħat) inxtraw miċ-Ċentru Sperimentali Farmakoloġiku tal-Università tal-Mongolja Interna u ġew akklimatizzati għal ġimgħa qabel l-użu. Il- ġrieden kollha kienu maqsuma b' mod każwali f' erba ' gruppi, li jikkonsistu fi grupp ta ' kontroll tas- salina, grupp ta ' dożaġġ għoli ta ' CDOs, grupp ta ' dożaġġ moderat, u grupp baxx ta ' dożaġġ ta ' CDOs. Il- ġrieden ġew injettati intraperitonealment b' soluzzjoni ta ' 0. Il-grupp ta' dożaġġ għoli, moderat jew baxx tas-CDOs irċieva CDOs ta' 100, 50, jew 25 mg/kg/BW, rispettivament; u salina ta '0.5ml ġiet injettata fil-grupp ta' kontroll. Fis-seba' jum sar esperiment ta' tneħħija ta' partiċelli tal-karbonju, skont Hou [24], u tkejlu l-indiċi tal-milsa u l-indiċi tat-timu. Fil-qosor, 0.05 mL/10 g/bw Linka tal-Indja ġiet injettata f'kull ġurdien minn ġol-vena caudalis, imbagħad 20μL demm inkiseb mill-orbitalis vena posterior 3 u 7 minuti wara l-injezzjoni. Il-kampjuni tad-demm tqiegħdu f'tubi b'2mL 0.1% Na2CO3, u l-valuri tal-OD tkejlu f'600 nm. L- indiċi ta ' spazju (K), indiċi fagoċitiku (α), u l- indiċi ta ' l- organi immuni ġew ikkalkulati kif ġej (1), t2 u t1 tfisser 7 minuti u 3 minuti rispettivament.

2.5.2. Il-proliferazzjoni taċ-ċelluli li jipproduċu l-antikorpi

Gruppi ta ' ġrieden Kunming (ħamsa għal kull grupp) ġew immunizzati b' injezzjoni intraperitoneali ta ' 2 x 107 SRBC f' 1. Ġimgħa wara, l-isplenoċiti (106 ċelloli għal kull 2 ml għal kull bir) mill-ġrieden Kunming kienu kkoltivati b'materjali tat-test jew mingħajrhom għal 72 siegħa f'10% RPMI 1640 medju taħt il-5% CO2 fl-arja, fi tliet kopji għal kull kultura. L-għadd ta' PFC kontra l-SRBC għal kull 106 splenoċiti ġie ddeterminat [25], [26].

2.6. Analiżi statistika

Id-dejta ġiet espressa bħala valuri medji ±SD. Id-differenza bejn il-gruppi ttestjati u l-kontroll ġiet analizzata mit-test-t-test tal-Istudent. P< 0.05="" was="" considered="" to="" be="">

3. Riżultati u Diskussjoni

3.1. Iżolament u purifikazzjoni ta' oligosakkaridi

Is-CDOs ġew iżolati mill-estratt alkali tal-korpi mnixxfa ta' C. deserticola b'rendiment ta' 3.07%. Żewġ frazzjonijiet ta' CDOS-1 u CDOS-2 ġew iżolati minn elut tal-ilma distillat mill-kolonna Sephadex G-100, rispettivament (Fig.1). Il-frazzjonijiet ippurifikati ta' CDOS-1 u CDOS-2 urew quċċata waħda fuq il-kolonna Sephadex G-25, li tindika li l-ebda oligosakkaridi oħra ma kienu preżenti fil-kampjun. Ir- riżultati tal- kompożizzjonijiet monosakkarid urew li CDOS- 1 kien magħmul biss minn sucrose (Fig. 2) u CDOS- 2 kien magħmul prinċipalment minn sucrose, rhamnose, u mannitol (Fig.3), bi proporzjon mole ta ' 1: 0.73: 3.61.

3.2. Attivitajiet immunobijoloġiċi tas-CDOs

Ħafna evidenza in vivo u in vitro wriet li oligosakkaridi naturali wrew funzjoni immunomodulazzjoni billi stimulaw kemm ċellulari kif ukoll umoriżmuimmuni Risposti[27], [28]. F'dan id-dokument, 100 mg/kg/BW CDOs żiedu l-indiċi tal-milsa tal-ġrieden, iżda ma kien hemm l-ebda differenza sinifikanti fl-indiċi tat-timu bejn il-gruppi ttrattati u l-gruppi ta' kontroll (Tabella 1). Il-makrofaġi huma komponent importanti tad-difiżi ospitanti kontra l-infezzjoni virali billi jinibixxu r-replikazzjoni intraċellulari tal-viruses u billi joqtlu ċelloli infettati bil-virus [29]. Meta jiġu attivati, varjetà ta' sustanzi intermedji ta' ossiġnu jew nitroġenu u ċitokini jiġu rilaxxati mill-makrofaġi u jipparteċipaw f'diversi funzjonijiet bijoloġiċi importanti, bħal attivitajiet anti-infjammatorji u kontra t-tumur [30]-[32]. Għalhekk, l-attività fagoċitika tal-makrofaġi hija indikatur importanti tal-funzjonijiet immuni tal-organiżmu. F' dan l- istudju, id- dożi moderati u għoljin ta ' CDOs żiedu l- attività ta ' phagocytosis tal- makrofaġi (Tabella 1). Il-proliferazzjoni taċ-ċelloli li jipproduċu l-antikorpi kkawżati mis-CDOs ġiet studjata permezz ta' eżami taż-żieda fil-PFC hemolytic fil-milsa tal-ġrieden Kunming li ġew immunizzati bl-SRBC flimkien mal-kampjun tat-test. Ir- riżultati indikaw li dożi moderati u għoljin ta ' CDOs isaħħu b' mod sinifikanti l- proliferazzjoni taċ- ċelluli li jipproduċu l- antikorpi (Tabella 2). Dożi għoljin ta' CDOs ikkawżaw żieda sinifikanti ħafna fl-għadd ta' PFC (P<>

Referenzi

[1] J. Li, Y. Jiang, R. Fan. Rikonoxximent ta 'Sinjal Bijoloġiku Mħallat Ibbażat fuq Analiżi Wavelet. In: Y. Jiang, et al (eds). Proc. tal-Workshop tal-Inġinerija Sportiva tar-Renju Unit-Ċina. Liverpool: Unjoni Akkademika Dinjija. 2007, pp. 1-8.

[2] J. Ouyang, XD Wang, B. Zhao, et al. Effetti ta' elementi terrestri rari fuq it-tkabbir taċ-ċelloli Cistanche deserticola u l-produzzjoni ta' glikosidi tal-fenitanojdi. J B io-technol, 2003, 102 (2) : 129-134

[3] Xu Zhaohui, Yang Junshan, Lu Ruimian, et al. Prodott naturali ġdid mill-Y.C.MA ta' Cistanche deserticola. Ġurnal tax-Xjenzi Farmaċewtiċi Ċiniżi, 1999, 8 (2):61-63.

[4] X. Wang, L. Li, Muhuyati, X. Wanag, N. Du. Azzjoni anti-ossidattiva tal-glikosidi ta' Cistanche fit-tessut tal-ġrieden. Zhongguo Zhong Yao Za Zhi. 1998, 23(9):554-5.

[5] Lin L.W, Hsieh M.T, Tsai F.H, Wang W.H, Wu C.R.Anti-nociceptive u anti-infjammatorju attività kkawżata minn Cistanche deserticola f'annimali gerriema. J Ethnopharmacol. 2002, 83(3):177-82.

[6] Choi, J.G; Qamar, M; Jeong, H.U; Kim, M.C; Kim, S.Y; Oh, M.S. Cistanches Herba jtejjeb it-tagħlim u l-memorja billi jinduċi fattur ta 'tkabbir tan-nervituri. Riċerka dwar il-Moħħ fl-Imġieba. 2011, 216 (2): 652–8.

Zong G, He W, Wu G, Chen M, Shen X, Shi M. Paragun bejn Cistanche deserticola Y. C. Ma u C, tubulosa (Shenk) Wight fuq xi azzjonijiet farmakoloġiċi. Zhongguo Zhong Yao Za Zhi. 1996, 21(7):436-7.

[8] He W, Shu X.F, Zeng G.Z, et al . Studju tat-titjib tal-qawwa tas-sess ta 'C. deserticola. J Chin Med.1996, 21(9): 534-537.

[9] Zeng G.Z, He W, Wu G.L, et al. Paraguni bejn Cistanche deserticola Y. C. Ma u C.tubulosa piż fuq xi azzjonijiet farmakoloġiċi. J Chin Med. 1996, 21(7): 436-438.

[10] Zeng Q.L, Zheng Y.F, Lu Z.L. Effetti immunomodulatorji tal-polisakkarid ta' Cistanche deserticola Y. C. Ma. J Zhejiang Univ, Med Sci. 2002, 31(4): 284-287.

[11] Li Yuan,Kanzunetta Yuanyuan,Zhang Hongquan. Avvanzi fir-Riċerka ta' Kostitwenti Kimiċi u Attività Mediċinali ta' Cistanche. Riżorsi tal-Pjanti Selvaġġi Ċiniżi, 2010, 29 (1): 7-11.

[12] Du N.S, Wang H, Yi YH. Iżolament u identifikazzjoni tal-glikosidi tal-fenilentanojdi mid-deżertifikazzjoni tal-Cistanche. Nat Prod R & D, 1993, 5(4): 5-8.

[13] Lu N.S, Liu J.L. Determinazzjoni tal-glikosidi tal-fenilinettanojdi f'Cistanche deserticola permezz ta' spettrofotometrija makro retikulari tar-reżina. Nat Prod R & D, 1993, 5(3): 30-33.

[14] Xiong Q.B, Tezuka Y, Kaneko T, et al. Inibizzjoni ta' l-ossidu nitriku mill-fenitanojdi fil-makrofaġi attivati.

Ġurnal Ewropew tal-Farmakoloġija, 2000, 400: 137- 144.

[15] Zhao Wei, Yan Hong, Liang Zhong-Yan, et al. Analiżi Strutturali ta' SPA polisakkarid solubbli fl-ilma Iżolata miż-Zokk tal-Cistanche Deserticola Ma. Ġurnal Kimiku tal-Universitajiet Ċiniżi, 2005, 26(3):461-463.

[16] Wang Xiangyan. Studju dwar il-farmakoloġija immuni u l-karattru ta ' assorbiment tal- polisakkaridi ta ' Cistanche deserticola. 2011, Nru S1, Mediċina u Xjenzi tas-Saħħa, E057-235-1-70.

[17] Xiong Q, Hase K, Tezuka Y, Tani T, Namba T, Kadota S. Attività epatoprotettiva tal-fenitanojdi minn Cistanche deserticola. Planta Med. 1998, 64(2):120-5.

[18] Manwal tal-Amylases u l-Enzimi Relatati (ed. mis-Soċjetà tar-Riċerka Amylase tal-Ġappun), Pergamon Press (1988)

[19] Araya, S. (ed.) Proċedimenti tal-5 Konferenza dwar Il-Kari u l-Akkoppjar Dentali (bil-Ġappuniż), l-Istitut Nazzjonali tas-Saħħa, Tokyo (1980)

[20] Kodo Otaka. Oligosaccharide Funzjonali u l-Aspett il-Ġdid tiegħu bħala Modulazzjoni Immuni. J. Biol. Macromol. 2006, 6(1), 3-9.

[21] Navarini L, Gilli R, Gombac V, Abatangelo A, Bosco M, Toffanin R. Polysaccharides minn estratti tal-ilma sħun ta' fażola ankaljata ta' Coffea arabica: Iżolament u karatterizzazzjoni. Carbohydr. Polym.1999, 40:71–81.

[22] Dubois M, Gilles K.A, Hamilton JK, Rebers PA, Smith F. Metodu kolorimetriku għad-determinazzjoni ta' zokkor u sustanzi relatati. Anal. Chem. 1956, 28:350–356.

[23] Yang X, Zhao Y, Wang Q, Wang H, Mei Q. Analiżi tal-komponenti monosakkaridi f'Angelica polysaccharides permezz ta' kromatografija likwida ta' prestazzjoni għolja. Imqass Anali 2005, 21:1177–1180.

[24] Yufang Hou, Yubao Hou, Liu Yanyan, et al. Estrazzjoni u Purifikazzjoni ta 'Lectin minn Fażola tal-Kliewi Ħamra u Studji Preliminari tal-Funzjoni Immuni tal-Lectin u Erba' Polisakkaridi Veġetali Ċiniżi. Ġurnal tal-Bijomediċina u l-Bijoteknoloġija, 2010: 1-9.

[25] Cunningham, A. J., u A. Szenberg. Aktar titjib fit-teknika tal-plakka għall-iskoperta ta' ċelloli singoli li jiffurmaw antikorpi. Immunoloġija.1968, 14:599-600.

[26] Haruhiko Takada, Tomohiko Ogawa, Fuminobu Yoshimura, et al. Attivitajiet Immunobijoloġiċi ta' Frazzjoni tal-Porin Iżolati minn Fusobacterium nucleatum ATCC 10953 [J]. Infezzjoni u Immunità. 1988, 56(4): 855-863.

[27] Wang M.Q, Guilbert LJ, Ling L, Li J, Wu YQ, Xu S.R, Pang P, Shan JJ Attività immunomodulating ta' CVT- E002: estratt proprjetarju mill-ġinseng tal-Amerika ta' Fuq (Panax quinque folium). J Pharm Farmakol.2001, 53:1515–1523.

[28] Nergard C.S, Kiyohara H, Reynolds JC, Thomas-Oates J.E, Matsumoto T, Yamada H, Patel T, Petersen D, Michaelsen TE, Diallo D, Paulsen B.S. Strutturi u relazzjonijiet ta'attività ta' struttura ta' tliet arabinogalactans pikultiċi mitoġeniċi u li jiffissaw il-komplement mill-pjanti antikulturi Taljani Cochlospermum tinctorium A. Rich u Vernonia kotschyana Sch Bip. ex Walp. Bijomakromolecules. 2006, 7:71–79.

[29] E.-M. Choi, A.-J. Kim, Y.-O. Kim, u J.-K. Hwang, Attività immunomodulata ta 'Arabinogalactan u Fucoidan in vitro. Ġurnal ta ' l-Ikel Mediċinali. 2005, 8(4):446–453.

[30] Y. Chen, J.-A. Duan, D. Qian, et al. Valutazzjoni u tqabbil tal-attività immunoregolatorja ta' erba' frazzjonijiet idrosolabbli ta' Angelica Sinensis in vitro fuq il-makrofaġi peritoneali fil-ġrieden ICR. Immunofarmekoloġija Internazzjonali. 2010, 10:422–430.

[31] Y. S. Lee, O. K. Han, C. W. Park, et al. Espressjoni tal-ġene taċ-ċitokina pro-infjammatorja u regolazzjoni tal-ossidu nitriku ta' astragali radix estratt bl-akweju fiċ-ċelloli tal-makrofaġi RAW 264.7. Ġurnal tal-Etnopharmakoloġija. 2005, 100(3): 289–294.

[32] K. Y. Lee u Y. J. Jeon. Polysaccharide iżolat mill- Poria cocos sclerotium jinduċi l- attivazzjoni NF- κB/ Rel u l- espressjoni iNOS fil- makrofaġi tal- ġrieden. Immunofarmekoloġija Internazzjonali. 2003, 3(10-11):1353–1362.