Kuntatt:jerry.he@wecistanche.com

Mi Young Ahn1*, Ban Ji Kim1, Ha Jeong Kim1, Jae Sam Hwang1, Yi-Sook Jung2 u Kun-Koo Park3

Cistanche għandu effett kontra t-tixjiħ

Astratt

Sfond: Dan l-istudju kellu l-għan li jevalwa l-kontra t-tixjiħeffett ta 'kompost derivat minn insetti ppreparat ġdid, dung beetle glycosaminoglycan (GAG), mogħti intraperitonealment lil firien SD qodma bħala parti mid-dieta tagħhom għal xahar. L-amministrazzjoni ta 'l-insetti GAG instabet li kienet relatata ma' tnaqqis fil-ħsara ossidattiva, livelli ta 'bijomarkatur epato-ċellulari, kontenut ta' proteina karbonil, u konċentrazzjoni ta 'malondialdehyde. Il-kontra t-tixjiħ-mekkaniżmi ġenetiċi molekulari relatati ta ' dung beetle GAG ​​għadhom mhumiex ċari għal kollox.

Riżultati: Catharsius molossus (tip ta' ħanfusa tad-demel) GAG (CaG) fil-pussesskontra t-tixjiħattivitajiet; naqqas il-livell tas-serum tal-creatinine kinase, kellu attivitajiet vasorelaxant aortiku u azzjonijiet kardjoprotettivi, u żamm livell normali ta 'glucose fil-firien ittrattati. Twettqet analiżi tal-mikroarray b'array ta' kloni ta' 30 K cDNA tal-firien biex tidentifika l-profili tal-espressjoni tal-ġeni ta' firien SD ta' 14-xhur ittrattati b'glycosaminoglycan tal-ħanfusa tad-demel 5 mg/kg (CaG5) fuq 1- perjodu ta’ xahar, li sar biex tiġi investigatakontra t-tixjiħeffett meta mqabbel ma 'dak jew ta' Bombus ignitus (tip ta 'bumblebee) reġina GAG 5 mg/kg (IQG5) jew chondroitin sulfate 10 mg/kg. CaG5 u IQG5 kellhom effetti anti-infjammatorji mmarkati, li wasslu għall-inibizzjoni tal-valuri ta' aċidu xaħmi ħieles, aċidu uriku, sGPT, IL-1 beta, u CK. Barra minn hekk, dehru effetti antikoagulanti u antitrombotiċi: il-konċentrazzjoni tal-fattur 1 (fibrinoġen) żdiedet fil-plażma tal-firien ittrattati b'CaG. Il-grupp tal-firien ittrattati b'CaG5-, meta mqabbel mal-kontroll, wera regolazzjoni 'l fuq ta' 131 ġene, inkluż lipocalin 2 (Lbp) u inibitur tas-serine peptidase, Kaszal type3 (Spink3), u 64 ġeni regolati 'l isfel, inkluż lysyl oxidase (Lox). ), serine dehydratase (sds), u retinol saturase (Retsat).

Konklużjoni: Id-dejta tagħna tissuġġerixxi li l-glycosaminoglycan tal-ħanfusa tad-demel jista 'jkun trattament utli għall-firien ta' età, li jindika l-potenzjal tiegħu bħala bijomaterjal terapewtiku għat-tixjiħ.

Kliem ewlieni: Effett kontra t-tixjiħ, Ħanfusa tad-demel (Catharsius molossus), Reġina ta' B. ignitus, Glycosaminoglycan

Sfond

impjegat, permezz ta' purifikazzjoni, estrazzjoni, u identifikazzjoni ta' kostitwenti attivi potenti, bħala ikel jew drogi funzjonali. Estratti tal-ħanfusa tad-demel Catharsius molossus, li tinsab fiċ-Ċina, wrew attività fibrinolitika mmarkata u effetti anti-ossidattivi u anti-ipergliċemiċi fuq firien mitmugħa dieta b'ħafna xaħam [9, 10]. Il-kontenut tal-proteina karbonil tad-demm u l-konċentrazzjoni tal-malondialdehyde tat-tessut tal-fwied ittrattat b'etanol tal-ħanfusa tad-demel jew estratt tal-aċetun fuq perjodu ta' 1-xahar, naqas b'mod sinifikanti meta mqabbel mal-kontrolli [10]. Riċentement, peptide tal-ħanfusa tad-demel tal-Korea, LLCIALRKK-NH2, li huwa peptide 9-mer derivat minn Copris tripartitus Coprisin, instab li jeżerċita attività batteriċida kontra E. coli u attività antimikrobika billi jikkawża ħsara serja fid-DNA. , li jinduċi mewt bħal apoptosi [11]. Prodott apikulturali, l-estratt tal-alkoħol B. ignitus queen (BIQ) għandu l-ogħla effikaċja potenzjali fost l-estratti kollha tal-bumblebee ittestjati għat-trattament tal-infjammazzjoni fil-firien SD, peress li naqqas b'mod sinifikanti l-edema tas-sieq [12]. Għalhekk, ħejjejna GAGs derivati ​​mill-akbar numru akkwistabbli ta’ irġejjen C. molossus jew B. ignitus biex jittestjaw tagħhomkontra t-tixjiħproprjetajiet. It-tixjiħ jinvolvi tnaqqis progressiv fil-kapaċità fiżjoloġika ta 'organiżmu, u huwa manifestat minn alterazzjonijiet akkumulati u destabilizzazzjoni fil-livell tas-sistema kollha [13]. It-tixjiħ huwa assoċjat ukoll ma' mudell differenzjali ta' espressjoni tal-ġeni indikattiv ta' rispons ta' stress imnaqqas fost ġeni metaboliċi u bijosintetiċi [14]. B'mod partikolari, żieda relatata mal-età jew l-obeżità fit-tessut xaħmi vixxerali hija ġeneralment akkumpanjata minn infjammazzjoni kronika ta' grad baxx, li ġiet ipposposta bħala kawża ta' diversi mard metaboliku inkluż kanċer, mard kardjovaskulari, u, l-aktar prominenti, tip. żewġ dijabete [15]. Dawn il-GAGs tal-insetti jistgħu jintużaw f'qasam li qed jiżviluppa malajr bil-prospett li jintużaw l-inġinerija tat-tessuti u l-bijomaterjali bħala terapiji ġodda [16].

F'dan l-istudju, nirrapportaw li GAG mill-ħanfusa tad-demel u BIQ murijakontra t-tixjiħproprjetajiet u, għalhekk, dawn il-komposti jżommu wegħdiet kbar għall-użu bħalakontra t-tixjiħaġenti. Ukoll, aħna nuru l-valur potenzjali ta 'C. molossus dung beetle glycosaminoglycan fit-tnaqqis tal-aspetti ta' ħsara tat-tixjiħ, kif imkejjel kemm fis-serum kif ukoll fil-mudelli tal-espressjoni tal-ġeni ta 'firien SD ta' 14-xahar wara t-trattament għal xahar.

Metodi

Materjali

Preparazzjoni ta 'insetti glycosaminoglycan

C. molossus imnixxef inxtara f'suq lokali fiċ-Ċina; bumble bee (reġina ta 'Bombus ignitus) ġiet imrobbija u mnixxfa bil-friża, fid-Dipartiment tal-Bijoloġija Agrikola, Akkademja Nazzjonali tax-Xjenza Agrikola, Korea t'Isfel. Chondroitin sulfate u r-reaġenti kollha ġew fornuti minn Sigma Aldrich (St. Louis, Mo., USA).

Kull insett imnixxef ta' kilogramm wieħed (1 kg) ġie mxarrba u estratt tliet darbiet bl-etanol permezz ta' ultrasonifikazzjoni (Branson, Colorado, MI, USA) għal 30 min. Ir-residwi sseparati mill-estratti ta 'l-alkoħol ġew neħħiet ix-xaħam darbtejn b'2 volumi ta' aċetun. Madwar 200 g ta' trab imnixxef, bla xaħam u polverizzat ġew sospiżi f'2 L ta' 0.05 M sodium carbonate buffer (pH 9). Is-sospensjoni ġiet inkubata għal 48 siegħa f'60 grad wara li żiedet 28 ml (1.4 fil-mija) ta 'Alcalase (Sigma Aldrich, St. Louis, Mo., USA). It-taħlita tad-diġestjoni tkessaħ għal 4 gradi, u l-aċidu trichloroacetic ġie miżjud għal konċentrazzjoni finali ta '5 fil-mija. Il-kampjun tħallat, jitħalla joqgħod għal siegħa, u mbagħad ċentrifugat għal 30 min f'8000 × g (Hanil Science Industrial, Incheon, Korea t'Isfel). Tliet volumi ta '5 fil-mija aċetat tal-potassju fl-etanol ġew miżjuda ma' volum wieħed ta 'supernatant. Wara t-taħlit, is-suspensjoni kienet maħżuna matul il-lejl f'4 gradi u mbagħad ċentrifugata. Il-preċipitat li jammonta għal 20 g ġie maħlul f'40 ml ta '0.2 M NaCl u ċentrifugat. Il-klorur taċ-ċetilpiridinju (5 fil-mija) ġie miżjud ma '0.2 darbiet il-volum tas-supernatant, u l-preċipitat inġabar permezz ta' ċentrifugazzjoni. Il-preċipitat ġie maħlul f'20 ml ta' 2.5 M NaCl. Ġew miżjuda ħames volumi ta 'etanol, u l-preċipitat ġie separat permezz ta' ċentrifugazzjoni. Il-preċipitat ġie maħlul fl-ilma u djalizzat kontra 100 volum ta 'ilma [17], u l-glycosaminoglycan mhux raffinat dijaliż ġie mnixxef bil-friża biex tikseb madwar 1.1 g ta' CaG, 4.89 g ta 'IQG bħala trab. GAG mhux raffinat ġie mgħobbi fuq kolonna kromatografika tal-ġel DEAE Sephadex A -25 (40 x 1.2 cm) ekwilibrata b'50 mM buffer tal-fosfat (pH 7.4). Il-frazzjonijiet ġew elużi bl-użu ta 'gradjent lineari tal-klorur tas-sodju minn 0 sa 2.5 M NaCl f'buffer tal-fosfat b'rata ta' fluss ta '20 ml/h, u l-glycan dialyzed ġie mnixxef bil-friża għal GAG pur.

Annimali

Firien Sprague Dawley (SD) (irġiel), ta' 8-xhur, ġew fornuti minn Samtako Co. Ltd. (Osan, Korea). Il-proċeduri kollha kienu skont il-Linji Gwida tal-NIH għall-Kura u l-Użu tal-Annimali tal-Laboratorju. L-esperimenti kollha ġew approvati mill-Kumitat Etiku tal-Annimali tal-Laboratorju tal-Akkademja Nazzjonali tax-Xjenza Agrikola, RDA, Korea t'Isfel (NAAS1503) u segwew linji gwida nazzjonali għall-kura u l-użu tal-annimali (akkomodazzjoni individwali). Il-firien ġew akklimatizzati għal 6 xhur taħt kundizzjonijiet normali ta' trobbija (23 ± 2 grad C, 55 ± 10 fil-mija umdità u ċiklu ta' dawl/dlam 12-il siegħa) u mitmugħa dieta normali (D10001, AIN-76Dieta ta' annimali gerriema, Riċerka Diet Inc., New Brunswick, NJ, USA) u ilma ad libitum. Il-firien ta' 14-xhur ġew segregati f'4 gruppi ta' trattament ta' 10 firien kull wieħed u mqassma skont ix-xebh fil-piż (680.2 ± 9.20 g). It-trattamenti ngħataw fil-PBS kuljum u kull wieħed kien amministrat intraperitonealment.

Il-gruppi kienu kontroll, 5 mg/kg CaG (CaG5), 5 mg/kg IQG (IQG5), u 10 mg/kg CS (CS10) (Sigma Aldrich Co., USA), mogħtija. Kull grupp inżamm fuq id-dieta normali (AIN-76Dieta ta' annimali gerriema, Dieta ta' Riċerka) u trattament ta' kampjun għal xahar (Skema 1).

Piżijiet tat-tessut xaħmi

Ġew determinati l-proporzjonijiet tax-xaħam addominali u tal-piż tal-ġisem tal-epididimal. Il-kejl kien wara s-sagrifiċċju fl-aħħar tal-perjodu ta' trattament ta' 1- xahar.

Id-densità tal-adipocyte

L-organi eċiża u t-tessut xaħmi ġew iffissati 10 fil-mija formalin newtrali. Wara l-inkorporazzjoni tal-paraffin, ġew imtebba 'b'ematossilina u eosina, u Toluidine blu O, eżaminati b'mikroskopija tad-dawl (Leica CTR6000, Hesse, il-Ġermanja), u fotografati. Id-densità ta 'l-adipocyte (ċelluli/mm2) ġiet iddeterminata f'tessut trattat u ta' kontroll permezz ta 'tebgħa ta' toluidine blue O (ingrandiment oriġinali, x400).

Teħid ta 'kampjuni tad-demm u demm, plażma, analiżi tas-serum

Fuq erba 'gruppi msemmija CON, CaG5, IQG5, CS10 (n =10), wara xahar ta' trattament, inġabar demm (~5 ml) mill-vina cava ta 'wara taħt inalazzjoni ħafifa ta' CO2 u użat għall-kejl tal-kimika tas-serum. Il-parametri eżaminati kienu jinkludu fosfolipidi, aċidu hyaluronic, aċidu xaħmi ħieles, albumina, alkaline phosphatase (ALP), glutamic oxaloacetic transaminase (GOT), glutamic pyruvic transaminase (GPT), lactic dehydrogenase (LDH), CK (creatinine phosphokinase), glukożju , trigliċeridi tal-kolesterol totali, kolesterol HDL, kolesterol LDL, krejatinina, nitroġenu urea fid-demm (BUN), proteina totali, aċidu uriku, u proteina c-reattiva (CRP). Il-parametri kollha ġew evalwati bl-użu ta 'awtoanalizzatur (analizzatur kliniku awtomatiku Hitachi 7060, Tokyo).

Teħid ta' kampjuni tad-demm u analiżi tal-plażma għal skoperta ta' attività anti-koagulanti

Wara t-trattamenti ta' 1-xahar, madwar 4 ml ta' plażma inġabru mill-vina cava ta' wara taħt inalazzjoni ħafifa ta' CO2 u ċentrifugati. Is-supernatant intuża għall-ħin tat-tagħqid bħala test ta 'attività antikoagulanti: ħin ta' tromboplastina parzjali attivat (APTT), ħin ta 'trombin, ħin ta' protrombina, u fattur 1 (fibrinoġenu) bħala assaġġ ta 'attività fibrinolitika bl-użu ta' analizzatur kliniku awtomatiku msemmi qabel skont il-manwal ta 'Green Cross Lab.

Ħsara tal-lipidi ossidattivi

Biex tiġi ddeterminata l-ħsara tal-lipidi ossidattivi fl-epatoċiti tal-firien, il-livelli tal-malondialdehyde (MDA) ġew imkejla b'assaġġ tal-perossidazzjoni tal-lipidi bl-użu tal-metodu tal-kulur li jinvolvi sustanzi reattivi tal-aċidu thiobarbituric (TBARS) f'535 nm [18].

Ħsara tal-proteina ossidattiva

Supernatanti omoġenati tal-fwied u demm, miksuba wara ċ-ċentrifugazzjoni intużaw għad-determinazzjoni tal-kontenut tal-karbonil. L-istress ossidattiv tal-proteini ġie evalwat billi tkejjel il-kontenut tal-proteina karbonil fid-demm. Il-kontenut tal-karbonil ġie ddeterminat b'immunoassay marbut mal-enżimi skont il-protokoll tal-manifattur għall-kitt ELISA tal-proteina carbonyl OxiSelect™ (Cell Biolabs, Inc., San Diego, CA, USA). L-attività CAT (proteina U/mg) ġiet imkejla abbażi tad-dekompożizzjoni ta' H2O2 medjata minn CAT [19].

Preparazzjoni ta' omoġenat tal-fwied għall-iskoperta ta' enzimi ossidattivi

Madwar erba 'gruppi bl-isem CON, CaG5, IQG5, CS10, it-tessuti tal-fwied ġew omoġenizzati fuq is-silġ f'soluzzjoni ta' estrazzjoni ta 'proteina ta' 10-volum lysis buffer PRO-PREP™ (iNtRON, Busan, Korea). Is-supernatant tal-omoġenat tal-fwied wara ċ-ċentrifugazzjoni (800 g, 10 min) ġie ttestjat għal catalase, glutathione peroxidase, glutathione s-transferase u superoxide

attività dismutase skont il-manwal tal-assaġġ (kit OxiSelect™ ELISA, Cell BioLabs, InC., San Diego, CA, USA).

Assaġġ taċ-ċitokin IL-1, IL-6 u IL-10

Fuq erba' gruppi msejjħa CON, CaG5, IQG5, CS10, il-livell IL- 1 jew IL - 6 jew IL - 10 fis-serum tal-firien trattat bl-insetti GAG tkejjel bl-użu ta' kits Elisa kummerċjali (Quantikine, R&D Systems, Inc. , Minneapolis, MN, USA) skond l-istruzzjonijiet tal-manifattur.

Preparazzjoni tal-RNA u analiżi PCR kwantitattiva f'ħin reali

L-RNA totali ġie iżolat mill-fwied bl-użu ta 'reaġent TRIzol (Invitrogen, Carlsbad, CA, USA), u l-konċentrazzjoni u l-purità tal-RNA ġew imkejla bl-użu ta' spettrofotometru UV/Vis (Beckman Coulter Co., Miami, FL, USA). DNA Kumplimentari (cDNA) ġie sintetizzat minn 1 g ta 'RNA totali bl-użu ta' cDNA Reverse Transcription Kit ta 'kapaċità għolja (Amersham Biosciences Co., Piscataway, NJ, USA). L-amplifikazzjoni tar-reazzjoni tal-katina tal-polimerażi (PCR) f'ħin reali twettqet b'Power SYBR Green Master Mix bl-użu ta' Sistema PCR Real-Time 7500 (it-tnejn minn Applied Biosystems), skont l-istruzzjonijiet tal-manifattur. Għall-iskoperta ta 'traskrizzjonijiet tal-ġeni fil-mira, iddisinjajna speċifikament primers oligonucleotide bil-quddiem u b'lura bl-użu ta' softwer Beacon Designer (PREMIER Biosoft, Palo Alto, CA, USA). Is-sekwenzi tal-primer huma elenkati fl-Iskema 2. Il-livelli tal-mRNA fil-mira ġew normalizzati bl-użu tal-glyceraldehyde 3- phosphate dehydrogenase (GAPDH) bħala kontroll intern biex jikkwalifika l-espressjoni relattiva tal-mRNA fil-mira skont il-metodu tal-limitu taċ-ċikli. Il-kampjuni kollha ġew analizzati fi tliet kopji.

Primer sekwenzi għall-amplifikazzjoni tal-ġeni involuti fil-mekkaniżmu tat-tiswija taċ-ċelluli u standard intern GAPDH (Skema 2).

Proċedura ta' mikroarray tad-DNA

Wara l-analiżi tal-istopatoloġija, saret ibridizzazzjoni tal-mikroarray fuq kampjuni tal-fwied [20]. L-RNA totali ġie iżolat mit-tessut tal-fwied bl-użu ta 'Qiagen RNeasy Midi Kit (Qiagen, Valencia, CA, USA). Kit ta' tikkettjar FairPlay™ microarray (Stratagene, La Jolla, CA, USA) intuża skond l-istruzzjonijiet tal-manifattur. Id-DNA ttikkettjat ġie mgħobbi fuq ċippa microarray. Ġiet immuntata kamra ta 'ibridizzazzjoni biċ-ċippa microarray, Rat Genome 230 2.0 Array (Affymetrix Inc., Santa Clara, USA), u mgħaddsa f'banju ta' l-ilma matul il-lejl f'60 grad. Iċ-ċippa tal-microarray ġiet maħsula f'wash buffer I, wash buffer II, u mbagħad aħsel buffer III għal 5 jew 15-il minuta. Il-pjastra kienet imnixxfa permezz ta 'ċentrifugazzjoni f'500 g għal 15-il minuta u skannjata b'BMS Array Scanner, applikat preċiżjoni Array Worx eBiochip Reader (BioRad, Dallas, TX, USA), bl-użu tal-kanali Cy3 u Cy5 [21].

Analiżi iżolata tal-qalb tal-firien

Firien maskili Sprague-Dawley li jiżnu 350 ± 50 g ġew anestetizzati b'pentobarbital (100 mg/kg). Il-vina tad-denb ġiet injettata b'eparina (1000 U/kg), u mbagħad it-trakea ġiet intubata. Filwaqt li l-firien kienu ventilati mekkanikament b'ventilatur tal-gerriema (Mudell 7025; Ugo Basile, Comerio-Varese, l-Italja), il-qlub tagħhom kienu mxerrda in situ b'buffer tal-bikarbonat Krebs-Henseleit modifikat ossiġenat permezz ta 'kannulazzjoni aortika retrograda. Il-qlub imbagħad ġew imnaqqsa u mċaqalqa għal apparat Langendorff (Hugo Sachs Electronik, March-Hugstetten, il-Ġermanja), fejn ġew imxerrda b'buffer tal-bikarbonat Krebs-Henseleit modifikat ossiġenat fi pressjoni ta 'perfużjoni kostanti ta' 75 mmHg. Ventrikulu tal-lattiċe mimli bl-ilma ġie introdott mill-vina pulmonari u mqabbad ma 'transducer tal-pressjoni Isotec (Hugo Sachs Electronik) biex titkejjel il-pressjoni ventrikulari tax-xellug (LVP). Il-qlub tħallew jibbilanċjaw għal 15-il minuta, f'liema ħin il-pressjoni end-diastolic ventrikulari tax-xellug (EDP) ġiet aġġustata għal 10 mmHg, u dan il-volum tal-bużżieqa inżamm matul l-esperiment. Imbagħad, il-funzjoni kontrattili tal-linja bażi, ir-rata tal-qalb, u l-fluss koronarju (sonda tal-fluss elettromanjetiku extrakorporali; narco Bio-systems, Houston,

TX, USA) ġew imkejla. Il-funzjoni kontrattili tal-qalb ġiet ikkalkulata billi naqqas l-LVEDP mill-ogħla pressjoni sistolika LV (LVSP), li tagħti pressjoni żviluppata (LVDP). Wara ekwilibrazzjoni ta 'siegħa, ċrieki aortiċi ġew ittrattati b'vettura (salina) jew CaG (10 ug/ml, 100 ug/ml) 10 min qabel ma ġiet indotta l-kontrazzjoni minn phenylephrine 1 μM. Imbagħad, ir-rilassament dipendenti fuq l-endotelju kien indott minn acetylcholine (0.1-100 μM) [22].

Analiżi Statistika

Il-mezzi u l-iżball standard tal-parametri kollha studjati ġew determinati għal kull grupp bl-użu tat-test ANOVA. Twettaq test t ta' Student biex jiddetermina differenzi sinifikanti bejn il-gruppi ta' kontroll u dawk ittrattati. Valur p<0.05 was="" considered="">

Riżultati

Piż tal-ġisem u xaħam xaħmi bidliet

Ma kien hemm l-ebda differenzi sinifikanti fil-piż medju tal-ġisem bejn il-gruppi ta 'trattament (Fig. 1). Matul il-perjodu ta' 1-xahar ta' amministrazzjoni, il-piżijiet tal-ġisem tal-firien maskili ta' età kienu komparabbli fil-gruppi ta' kontroll u ttrattati b'CaG, IQG, u CS. Il-piżijiet medji tal-ġisem fil-ġimgħa huma ppreżentati f'Fig. 2a: CON, 685.16 ± 9.14 g; CaG5, 659.54 ± 14.21 g; IQG5, 646.50 ± 11.56 g, u CS10, 662.93 ± 7.82 g. Il-kwantità medja ta 'xaħam addominali naqset b'mod sinifikanti fil-gruppi IQG5 u CS10 meta mqabbla mal-kontroll: 21.84 ± 7.46 g għall-kontroll; 20.66 ± 8.47 g għal CaG5; 16.56 ± 5.97 g għal IQG5 (IQG5 vs CON, p <0.05); u="" 16.93="" ±="" 5.17="" g="" għal="" cs10="" (cs10="" vs="" con,="" p=""><0.05) (fig.="" 2a).="" ix-xaħam="" epididimidali="" naqas="" ukoll="" b'mod="" sinifikanti="" fil-gruppi="" iqg5="" u="" cs10="" meta="" mqabbel="" mal-kontroll:="" 10.38="" ±="" 2.58="" g="" għall-kontroll;="" 8.19="" ±="" 4.00="" g="" għal="" cag5;="" 7.00="" ±="" 1.35="" g="" għal="">

(IQG5 vs CON, p < 0.05);="" u="" 8.56="" ±="" 2.53="" g="" għal="" cs10="" (cs10="" vs="" con,="" p=""><0.05) (fig.="">

Id-densità tal-adipocyte

Id-densità ta' l-adipocyte [numru ta' ċelluli/erja (mm2)] tat-tessuti tal-fwied tal-firien ittrattati b'GAG f'HFD, kif evalwat permezz ta' tbajja 'toluidine blue O, tnaqqset b'CaG5 (33.00 ± 1.73), IQG5 (45). .00 ± 4.36), jew CS10 (26.00 ± 2.52) (CS10 vs CON, p < 0.05) meta mqabbla mal-kontroll (51.00 ± 5.29) (Fig. 2b).

Tibdil fil-pressjoni tad-demm u r-rata tal-qalb

Ma ġew osservati l-ebda differenzi sinifikanti fil-pressjoni tad-demm (pressjoni tad-demm sistolika jew rata tal-qalb) bejn il-gruppi ttrattati b'5 mg/kg CaG-, IQG-, jew CS u l-grupp ta 'kontroll (dejta mhux murija).

Ematoloġija u kimika tad-demm

Ġew osservati xi bidliet dipendenti mid-doża bejn il-gruppi ta' trattament u ta' kontroll fir-rigward tal-parametri ematoloġiċi eżaminati fi tmiem l-esperiment. Kien hemm żieda ta '27.5 fil-mija fl-APTT (sec.) fil-grupp trattat CaG5-: CON, 35.68 ± 5.68; CaG5, 45.49 ± 10.91; IQG5, 29.93 ± 3.57; CS10, 36.83 ± 23.95 (Fig. 3). Il-ħin tat-trombina (sec.) kien kif ġej: CON, 40.18 ± 2.04; CaG5, 42.13 ± 3.23; IQG5, 36.15 ± 6.67; CS10, 45.02 ± 21.89. Kien hemm żieda sinifikanti (62.6 fil-mija) fil-Fattur I (fibrinoġenu, mg/dL) fil-grupp trattat CaG5-: CON, 429.33 ± 142.22; CaG5, 698.29 ± 120.28 (CaG5 vs CON, p <0.05); iqg5,="" 627.14="" ±="" 160.67;="" cs10,="" 790.00="" ±="" 274.22="" (cs10="" vs="" con,="" p="">< 0.05).="" il-ħin="" tal-protrombina="" (sec.)="" kien="" kif="" ġej:="" con,="" 62.86="" ±="" 47.30;="" cag5,="" 52.71="" ±="" 4.96;="" iqg5,="" 52.14="" ±="" 5.58;="" cs10,="" 55.00="" ±="">

Bijokimika tas-serum

Fis-sera mill-gruppi ttrattati b'IQG u CS (Tabella 1), il-livelli ta 'fosfolipidi (mg/dL) kienu aktar baxxi b'mod sinifikanti milli fis-sera ta' kontroll wara xahar f'firien ta 'età: CON, 271.78 ± 91.74; CaG5, 233.67 ± 71.0; IQG5, 173.2 ± 32.{{20}}2 (IQG5 vs. CON, p < 0}.05);="" cs10,="" 259.7="" ±="" 57.27="" (cs10="" vs="" con,="" p=""><0.05). livelli="" ta="" 'aċidu="" xaħmi="" ħieles="" (μeq/l)="" naqsu:="" con,="" 686.78="" ±="" 104.67;="" cag5,="" 431.33="" ±="" 66.22="" (cag5="" vs="" con,="" p=""><0.05); iqg5,="" 405.6="" ±="" 63.39="" (iqg5="" vs="" con,=""><0.05); cs10,="" 566.9="" ±="" 115.38="" (cs10="" vs.="" con,="" p=""><0.05). also,="" serum="" gpt="" (alt)="" levels="" (iu/l)="" in="" the="" cag-="" and="" iqg-="" treated="" groups="" were="" significantly="" lower="" than="" those="" in="" the="" control="" group="" in="" aged="" rats:="" con,="" 76.33="" ±="" 40.21;="" cag5,="" 36.78="" ±="" 8.0="" iu/l;="" iqg5,="" 43.22="" ±="" 13.86="" (iqg5="" vs.="" con,p="" <="" 0.05);="" cs10,="" 53.44="" ±="" 11.36="" (cs10="" vs.="" con,="" p=""><0.05). fur-="" thermore,="" the="" mean="" creatinine="" phosphokinase="" (ck="" u/l)="" level="" in="" the="" cag-treated="" group="" was="" lower="" than="" that="" in="">

grupp ta 'kontroll fil-firien ta' età: CON, 125.78 ± 91.66; CaG5, 1{{10}}2.89 ± 65.73 (CaG5 vs. CON, p < 0}.05);="" iqg5,="" 91.22="" ±="" 24.74;="" cs10,="" 131.2="" ±="" 62.56.="" il-glukożju="" medju="" fis-serum="" (mg/dl)="" naqas="" b'mod="" sinifikanti="" fil-firien="" ta="" 'età="" (kull="" grupp="" vs="" con,="" p=""><0.05): con,="" 435.11="" ±="" 105.42;="" cag5,="" 304.0="" ±="" 44.44;="" iqg5,="" 275.9="" ±="" 43.18;="" cs10,="" 317.8="" ±="">

Il-livell medju tal-kolesterol totali (mg/dl) fil-grupp ikkurat bl-IQG kien aktar baxx milli fil-grupp ta 'kontroll fil-firien ta' età, u dik id-differenza kienet sinifikanti wkoll: CON, 212.67 ± 92.82; CaG5, 181.44 ± 68.4; IQG5, 124.1 ± 23.6 (IQG5 vs CON, p < 0.05);="" cs10,="" 198.9="" ±="">

Barra minn hekk, il-livelli tat-trigliċeridi (mg/dL) kienu kif ġej: CON, 207.89 ± 101.95; CaG5, 136.22 ± 61.6; IQG5, 103.3 ± 35.59 (IQG5 vs. CON, p < 0.05);="" cs10,="" 183.4="" ±="" 104.74.="" il-livelli="" tal-kolesterol="" ldl="" (mg/dl)="" naqsu:="" con,="" 74.67="" ±="" 44.91;="" cag5,="" 69.0="" ±="" 31.3;="" iqg5,="" 41.44="" ±="" 10.14="" (iqg5="" vs="" con,="" p=""><0.05); cs10,="" 65.22="" ±="" 18.52.="" tnaqqis="" sinifikanti="" fil-livell="" ta="" 'aċidu="" uriku="" (mg/dl)="" deher="" fil-gruppi="" kollha="" ttrattati="" b'gag="" meta="" mqabbla="" mal-kontroll="" (kull="" grupp="" vs="" con,="" p=""><0.05): con,="" 10.9="" ±="" 2.26;="" cag5,="" 8.12="" ±="" 1.48;="" iqg5,="" 6.49="" ±="" 0.89;="" cs10,="" 8.14="" ±="" 2.17,="" tabella="">

Tnaqqis ta 'ħsara ossidattiva

Malondialdehyde (MDA, nmol/ml) ġie ttestjat wara xahar ta 'kull trattament GAG [CON, 252.9 ± 13.1; CaG5, 175.1 ± 5.8 (30.32 fil-mija tnaqqis). Kull trattament GAG u chondroitin sulfate naqqas il-perossidazzjoni tal-lipidi fl-epatoċiti (Fig. 4a). Il-konċentrazzjoni tal-proteina karbonil fid-demm naqset bi proporzjon ta '68.52 fil-mija, 36.89 fil-mija u 53.70 fil-mija f'GaG5, IQG5 u CS10, rispettivament (Fig. 4b). Iżda, kull GAG ma kellu l-ebda differenzi statistiċi meta mqabbel mal-kontroll fil-kontenut tal-carbonyl tal-epatoċiti (dejta mhux murija).

Kwantifikazzjoni ta 'enżimi ossidattivi (catalase, GPx, GST, SOD).

L-attività ta 'catalase (mg proteina/min) fl-epatoċiti wara xahar ta' trattament GAG kienet kif ġej: CON, 17.72 ± 2.81; CaG5, 19.87 ± 3.88; IQG5, 17.22 ± 4.55; CS10, 19.23 ± 3.55. L-attività tal-catalase fil-gruppi kollha tal-epatoċiti trattati b'CaG żdiedet. Super oxide dismutase (SOD) hija enzima li tneħħi r-radikali ħielsa (super oxide). L-attività SOD (nmol/min/ml) żdiedet fil-gruppi ta' trattament meta mqabbla mal-kontroll: kontroll, 381.44 ± 85.32; CaG5, 400.56 ± 60.62; IQG5, 386.72 ± 69.22; CS10, 513.05 ± 60.07. L-attività ta’ glutathione peroxidase (unità/mg proteina) fil-grupp ta’ epatoċiti trattati b’CaG żdiedet b’mod sinifikanti bit-trattament (CaG5 vs. CON, p < 0.05),="" u="" attività="" ta’="" glutathione="" s-="" transferase="" (nmol/min/ml)="" fil-="" il-grupp="" cag="" żdied="" ukoll="" b'mod="" sinifikanti="" meta="" mqabbel="" ma="" 'dak="" fil-grupp="" ta'="" kontroll="" (cag5="" vs="" con,="" p=""><0.05) (tabella="">

Produzzjoni taċ-ċitokini IL-1 u IL-10

Żidiet fil-livelli ta' IL-10 kienu osservati fil-grupp ittrattat b'CaG. Il-livelli ta' IL-1 (ρg/ml) fis-serum tnaqqsu b'1

Tabella 1 Sejbiet seroloġiċi ta' firien ta' età kkurati b'CaG jew IQG għal xahar

xahar ta 'trattament CaG jew IQG, li juri l-azzjonijiet anti-infjammatorji tal-komposti: kontroll, 251.3 ± 70.7; CaG5, 102.9 ± 9.5; IQG5, 110.4 ± 5.2; CS10, 110.4 ± 10.1 (kull grupp vs CON, p <0.05). l-attività="" il-10="" (ρg/ml)="" wara="" xahar="" ta'="" trattament="" b'cag="" fil-firien="" żdiedet:="" con,="" 34.9="" ±="" 11.5;="" cag5,="" 67.4="" ±="" 13.3="" (cag5="" vs="" con,=""><0.05); iqg5,="" 55.5="" ±="" 24.7;="" cs10,="" 28.0="" ±="" 3.8="" (fig.="" 5).="" the="" il-10="" levels="" in="" the="" cs10="" group,="" was="" statistically="" different="" from="" that="" in="" the="" con="" group="" (cs10="" vs.="" con,p=""><>

Espressjoni tal-ġeni b'analiżi PCR kwantitattiva f'ħin reali

The data represented that PCR cycle required number (Ct value) when the concentration of PCR amplicon are equilibrated by sample amplicon. Median CT values of 5 sample's represented, but there was no difference from the control group (Ct vale >2.0) fuq sekwenza primer użata (dejta mhux murija).

mikroarray tad-DNA

Twettqet analiżi tal-mikroarray bl-użu ta’ firxa ta’ kloni cDNA ta’ Mouse 28 K sabiex jiġu identifikati l-profili tal-espressjoni tal-ġeni fil-fwied tal-firien SD ta’ 15- xahar ittrattati b’CaG, IQG, u CS, u biex tiġi pprovduta informazzjoni dwar il-potenzjal.kontra t-tixjiħmarkaturi.

Meta mqabbel mal-grupp ta' kontroll, il-grupp CaG5 wera żieda ta' 2- għal 4-darbiet f'118-il ġene, żieda ta' 4- 8-darbiet fi 11-il ġene, u akbar minn 8-darbiet żieda f'2 ġeni. Il-livelli ta' espressjoni tal-~30,000 ġeni li fadal baqgħu l-istess. Sittin ġene ġew irregolati 'l isfel minn 2- għal 4-darbiet, u 4 wrew tnaqqis ta' 4- għal 8-darbiet.

Fil-grupp IQG5 meta mqabbel mal-grupp ta' kontroll, 162 ġene żdiedu bi 2- għal 4-darbiet, 10 ġeni żdiedu bi 4- għal 8-darbiet, u 3 ġeni żdiedu bi aktar minn 8- darbiet. Min-naħa l-oħra, 66 ġew irregolati bi 2- għal 4-darbiet u 7 tnaqqsu bi 4- għal 8-darbiet.

Tabella 2 Attivitajiet ta' enzimi antiossidanti ta' glycosaminoglycan tal-ħanfusa tad-demel fil-fwied tal-firien anzjan

Fil-grupp CS10 meta mqabbel mal-grupp ta' kontroll 63 ġeni ġew regolati 'l fuq minn 2- għal 4-darbiet, 2 ġeni żdiedu b'4- għal 8-darbiet, u 2 ġeni ġew regolati 'l fuq b'aktar minn 8- darbiet. Tmienja u tletin ġeni ġew irregolati b'2- għal 4-darbiet, 4 ġew irregolati b'4- għal 8-darbiet, u 4 naqsu b'aktar minn 8-darbiet.

Meta mqabbel mal-grupp ta' kontroll, il-ġene lipocalin2 (Lcn2) żdied b'madwar 10-darbiet f'tessut tal-fwied trattat CaG5-, 46-darbiet fil-grupp IQ5, u {{6} }tinja fil-grupp CS10. Fit-tessuti tal-fwied tal-ġrieden ittrattati b'CaG5-, lysil oxidase (Lox) kien irregolat bi proporzjon ta' 0.13, jiġifieri, l-espressjoni tal-ġeni naqset. Grupp tal-firien ittrattati b'CaG5, meta mqabbel mal-kontroll, wera li 131 ġene inkluż lipocalin 2, proteina li torbot oligosaccharide (Lbp), u inibitur tas-serine peptidase, Kaszal type3 (Spink3) kienu regolati 'l fuq (Tabella 3) u 64 ġene inkluż lysyl oxidase (Lox), serine dehydratase (sds) u retinol saturate (Retreat) kienu regolati 'l isfel (Tabella 4). Il-grupp ittrattat CaG5-, meta mqabbel mal-grupp ta 'kontroll, wera regolamentazzjoni 'l fuq ta' 131 ġene, inkluż lipocalin 2, proteina li torbot oligosakkaridi (Lbp), u l-inibitur tas-serine peptidase Kaszal tip 3 (Spink3) (Tabella 3) ) u downregulation ta '64 ġeni, inkluż lysyl oxidase (Lox), serine dehydratase (sds), u retinol saturate (Retsat) (Tabella 4). Din id-dejta tindika lipocalin 2 u adipokines, bħala ġeni regolati 'l fuq, u lysyl oxidase (relatata ma' heparanase), bħala ġene regolat 'l isfel, bħala markaturi terapewtiċi potenzjali li jaħdmu kontra t-tixjiħ u l-obeżità

Karatterizzazzjoni ta 'CaG

Il-kompożizzjonijiet tal-mono-saccharides amminiċi, aċidużi u newtrali ta 'GaG ġew determinati minn GC-MS (Tabella 5). L-amino monosaccharides primarji ta' CaG huma fl-ordni li ġejja: D-glucosaminic acid > N-acetyl-galactosamine > N-acetyl-D-gactosaminitol > galactosamine HCl > galactosaminic acid > galactosamine > glucuronic acid. Ukoll, il-monosaccharides newtrali misjuba f'CaG huma prinċipalment - glucose u mannitol, filwaqt li dawk minuri jinkludu arabinose u rhamnose.

Indikaturi tal-kardjoprotezzjoni

F'dan l-esperiment, aħna kkaratterizzajna l-effett dirett ta 'CaG fuq l-arterji ta' reżistenza bl-użu ta 'bastimenti inkubati in vitro b'kontrazzjoni indotta mill-phenylephrine u rilassament indott mill-acetylcholine. CaG ġie evalwat bħala aġent kardjoprotettiv. Il-kurva tar-rispons tal-konċentrazzjoni għal CaG ġiet imċaqalqa 'l isfel meta mqabbla ma' dik li tidher wara t-trattament ta 'kontroll (PBS biss), u turi li l-istimulazzjoni tal-qalb seħħet b'mod dipendenti fuq il-konċentrazzjoni (Fig. 6).

Diskussjoni

It-tixjiħ huwa proċess ta’ tnaqqis progressiv fil-kapaċità fiżjoloġika ta’ organiżmu, manifestat minn alterazzjonijiet akkumulati u destabilizzazzjoni fil-livell tas-sistema kollha [13]. Glycosaminoglycan huwa maħsub li jnaqqas l-effetti ħżiena tat-tixjiħ billi jipprevjeni l-qerda tal-qarquċa, għadam, diski, ġilda [23], is-sistema vaskulari [8], eċċ. Riċentement, Tip ta 'GAG bħala materjali multifunzjonali, polyurethane bażi eparina jew huma preżentament meqjus bħala wieħed mill-bijokompatibbli u kompatibbli tad-demm stabbiliti

bijomaterjali li joffru relazzjoni tremenda struttura-proprjetà bħal immobilizzazzjoni tal-eparina fuq tilqim tal-polyurethane modifikat bil-chitosan bi proprjetajiet anti-adeżivi u antimikrobiċi [24]. Illum il-ġurnata, il-miġja tal-kontroll tat-temperatura għamlet possibbli d-disinn ta 'sistemi ta' trobbija ta 'insetti fuq skala kbira. Għalhekk, glycosaminoglycan

jista 'jinkiseb mill-kortiċi tal-insetti bħala residwu tal-estratt tal-alkoħol. Tali drogi mhux raffinati mill-ħanfusa tad-demel u l-irġejjen B. ignitus ġew studjati fi sforz biex jiġu identifikati l-komponenti attivi tagħhom jew biex l-estratti jkunu aktar sikuri għall-użu mill-bniedem. Il-ħanfusa tad-demel C. molossus ġiet ippurifikata biex tagħti dimeri N-acetyl-dopamine, molossusamide AC (1-3), li turi

Attività inibitorja COX-1 u COX-2 [25]; kitosan [26]; melanin [27]; u serine proteases [9, 28]. Intwera li estratt tal-bumblebee (Bombus ignitus) fih velenu tan-naħal serine protease [29], peroxiredoxins [30], u proteina ta' rikonoxximent tal-peptidoglycan (PGRP-S) [31].

Strateġiji biex jipprevjenu jew idewmu t-tixjiħ inkludew l-inġestjoni ta 'antiossidanti għat-tiswija tal-ħsara ċellulari ossidattiva lid-DNA, proteini u lipidi, kif ukoll riġenerazzjoni tat-tessuti medjata minn ċelloli staminali u terapija tal-ġeni [32]. Bħala markatur tal-ħsara ossidattiva tal-lipidi fl-istati tal-istress ossidattiv tal-lipidi tal-epatoċiti, malondialdehyde naqas bit-trattament b'CaG. Ukoll, il-kontenut tal-karbonil fid-demm, speċjalment newtrofili, naqas bit-trattament CAG u wera tiswija ta 'ħsara tal-proteina ossidattiva ċellulari.

Glycosaminoglycans minn C. molossus u B. ignitus queens jikkonsistu prinċipalment minn D-glucosaminic acid bħala monosaccharide aċiduż u N-acetyl-galactosaminitol bħala amino

monosaccharide, flimkien ma '-glucose u D-mannitol bħala monosaccharides newtrali. Għalhekk, il-kompost jista 'jaċċessa riċetturi tal-membrana taċ-ċelluli u jista' jipprevjeni l-kawżi ta 'mard relatat mal-età billi jbiddel il-metaboliżmu tal-enerġija. Glycosaminoglycans jistgħu jsewwu t-tessuti konnettivi [23], il-qarquċa, id-diski, l-għadam u l-glikoproteini mnaqqsa fil-livell molekulari, bil-GAG jifforma rabta bejn il-proteini [9]. F'dan l-esperiment, il-firien użati kienu qodma u kienu jiżnu madwar 680 g, għalhekk, ma kienx ikun faċli li ġġib tnaqqis fil-piż tal-ġisem, iżda aħna osservajna tnaqqis fil-piż tax-xaħam tax-xaħam u n-numri tal-adipocyte. Bħal fil-biċċa l-kbira tal-glycosamino-glycans, CaG u IQG wasslu għal tnaqqis fil-livelli tas-serum ta’ parametri relatati mal-infjammazzjoni: aċidu xaħmi ħieles, AST (SGPT), kreatinina kinażi (funzjoni tal-qalb relatata), glukożju, aċidu uriku, u ipergliċemija relatati. livelli: kolesterol, totali, trigliċeridi, kolesterol LDL, eċċ. Il-livelli ta 'aċidu xaħmi ħieles (fwied xaħmi relatat) tal-gruppi kkurati kienu naqsu b'mod statistiku b'mod sinifikanti, 36.7 fil-mija fil-grupp CaG u 40.94 fil-mija fil-grupp IQG. Ukoll, il-livell sGPT (funzjoni tal-fwied relatata) tnaqqas b'mod sinifikanti, 51.58 fil-mija fil-grupp CaG u 43.38 fil-mija fil-grupp IQG.

Dejta ġġenerata mill-analiżi tal-mikroarray tad-DNA appoġġjat il-kontra t-tixjiħeffett ta' IQG, b'bidliet sinifikanti fil-profili tal-espressjoni tal-ġeni fil-firien SD ta' 14-xahar osservati wara perjodu ta' trattament ta' 1-xahar. Il-firien ittrattati b'CaG5-, meta mqabbla mal-grupp ta' kontroll, kellhom żidiet f'131 ġene, inkluż lipocalin 2 [33], proteina li tgħaqqad lipo- saccharide (Lbp) [34], u inibitur serine peptidase, Kazal tip3 (Spink3) [35] u tnaqqis f'64 ġene, inkluż lysyl oxidase (Lox) [36], serine dehydratase (sds) [37], u retinol saturase (Retsat) [38]. Id-dejta tindika lipocalin 2 u adipokines, li kienu regolati 'l fuq, u lysyl oxidase (relatata ma' heparanase), li kienet irregolata 'l isfel, bħala markaturi terapewtiċi potenzjali għalkontra t-tixjiħeffetti f'annimali obeżi.

L-istudju preżenti osserva bidliet sinifikanti fil-profili tal-espressjoni tal-ġeni fil-firien ta 'età wara trattament b'CaG jew IQG għal xahar. L-espressjoni tal-ġeni ta' lipocalin-2, li hija adipokine implikata fir-reżistenza għall-insulina [39] u proteina sekretorja bi prosperitajiet li jgħaqqdu l-lipidi, żdiedet b'madwar 10 darbiet. Dan bi qbil ma' studju tal-microarray li rrapporta li l-inġestjoni tal-fażola tas-sojja tikkawża żieda ta 'amyloid-chaperone endoġenu, prostaglandin D2 synthase tat-tip lipocalin (Ptgds), li jwassal għal soppressjoni ta' amyloid- u jipprevjeni disfunzjoni konjittiva [4{{ 22}}]. Lipopolysaccharide (LPS) li torbot il-proteina (LBP), markatur surrogat ta 'traslokazzjoni mikrobjali, hija assoċjata ma' funzjoni fiżika mnaqqsa u żieda fl-infjammazzjoni [41]. Il-proċess normali tat-tixjiħ jibdel is-sistema tal-koagulazzjoni tad-demm fil-bnedmin; Antikoagulanti naturali, inklużi anti-trombina III, kofattur ta 'eparina II, proteina Ċ, proteina S, u inibitur tal-passaġġ tal-fattur tat-tessut, jistgħu jimmodulaw ir-reazzjonijiet tas-sistema tal-koagulazzjoni tad-demm [42]. F'dan l-istudju, kien hemm żidiet sinifikanti fil-fattur I (fibrinoġenu) f'CaG (162.6 fil-mija), IQG (146.0 fil-mija), u CS10 (184.0 fil-mija) —gruppi ttrattati meta mqabbla mal-grupp ta 'kontroll, ittrattat b'PBS. Ukoll, il-livell ta 'LBP (proteina li torbot LPS) ġie regolat 'il fuq fid-dejta tal-mikroarray tad-DNA tagħna, li jissuġġerixxi li l-eparina (GAG) tingħaqad ma' LBP, tiffaċilita t-trasferiment ta 'LPS għal CD14, u ttejjeb l-attivazzjoni medjata minn LPS ta' monoċiti tad-demm periferali, li jirriżulta f' attività antikoagulanti [43]. A inibitur trypsin, serine protease inibitur Kazal-tip 3 (Spink3), kien uppregu- lated f'dan l-esperiment, li jindika rwol għall-modulazzjoni paracrine; hija involuta wkoll fl-impjantazzjoni tal-embrijuni [44]. Peress li Spink3 huwa inibitur importanti tas-serine protease, ir-regolazzjoni 'l fuq tagħha tista' tirrifletti mekkaniżmu ċitoprotettiv endoġenu importanti li jipprevjeni aktar korriment [45]. Ir-regolazzjoni 'l isfel ta' lysyl oxidase tista 'tindika li heparin (GAG) li jinibixxi r-rabta stretta ta' lysyl oxidase ma 'fibrils iffurmati minn qabel bilkemm kienet affettwata [46]. It-tnaqqis tar-retinol saturate li deher f'dan l-esperiment huwa notevoli, peress li retinol saturase jippromwovi l-adipoġenesi u huwa rregolat fl-obeżità [47]. Skont ipoteżi, id-densità tat-tessut xaħmi, bijomarkatur ġdid li jbassar ir-riskju tal-mortalità f'adulti anzjani li ma jidhirx li huwa relatat mal-infjammazzjoni [48], barra minn hekk, CaG naqqas b'mod sinifikanti d-densità tax-xaħam u wiegħed potenti.kontra t-tixjiħaġent.

Konklużjonijiet

Il-glycosaminoglycan tal-ħanfusa tad-demel naqas il-livelli tal-kolesterol u t-trigliċeridi fis-serum, ikkawża tnaqqis fil-piż tat-tessut xaħmi u n-normalizzazzjoni tal-livelli tas-serum ta 'aċidu xaħmi ħieles, GPT, glukożju u aċidu uriku, u titwil tal-ħin tal-koagulazzjoni li jipprevjeni l-aggregazzjoni tad-demm u l-lipidi. akkumulazzjoni f'barrieri endoteljali vaskulari li jikkontribwixxu għall-omeostażi fis-sistema ċirkolatorja. IL{{0}} (pg/ml) fis-serum tnaqqset b'xahar ta' trattament b'CaG jew IQG, li wera azzjoni anti-infjammatorja. Barra minn hekk, il-ġene protettiv tal-fwied lipocalin kien ferm (10-darbiet) uppregulated u lysyl oxidase kien downregulated (0.1-darbiet) fil-firien ittrattati b'CaG. CaG derivat mill-insetti jista 'jkun a

sostituzzjoni aktar sigura għall-eparina u GAGs oħra minn sorsi tal-mammiferi, peress li s-sorsi tal-insetti jnaqqsu l-possibbiltà ta’ trażmissjoni ta’ viruses infettivi minn annimali bħall-ħnieżer. Dawn ir-riżultati jissuġġerixxu li CaG u BIQ jistgħu mhux biss ikunu naturalikontra t-tixjiħaġenti iżda wkoll ikunu ikel funzjonali, simili għal chitosan u bijomaterjali futuri li għandhom rwol vitali fil-ħajja tagħna ta’ kuljum.

Abbrevjazzjonijiet

ALP: Fosfatażi alkalina; ALT(GPT): Glutamate pyruvate transaminase; aPTT: Ħin ta' tromboplastin parzjali attivat; AST(GOT): Glutamate oxaloacetate transaminase; BUN: Nitroġenu urea tad-demm; CaG 5: ħanfusa tad-demel (Catharsius molossus) glycosaminoglycan 5 mg/kg; CK: Creatinine phosphokinase; CON: Grupp ta 'kontroll; CRP: proteina C-reattiva;

CS10: Chondroitin sulfate (10 mg/kg); GAG: Glycosaminoglycan; GGT: - glutamyl transferase; H. Chol: Kolesterol għoli; IQG5: Queen of Bombus ignitus (tip ta 'bumblebee) glycosaminoglycan 5 mg/kg; l.Chol: Kolesterol baxx; LDH: Lactate dehydrogenase; PT: Ħin tal-protrombina; T. Chol: Kolesterol totali; TG: Trigliċeridi

Rikonoxximenti

L-awturi jirrikonoxxu l-Akkademja Nazzjonali tax-Xjenza Agrikola għal appoġġ finanzjarju (RDA, PJ011853) u tekniku.

Finanzjament

Dan ix-xogħol kien appoġġjat mill-proġett tar-Riċerka Bażika tal-Amministrazzjoni tal-Iżvilupp Rurali, PJ011853.

Disponibbiltà ta 'data u materjali

Id-dejta kollha hija disponibbli fuq il-portali tal-Ġurnal fil-manuskritt sottomess. Ebda fajls/dejta oħra ta' appoġġ ma huma meħtieġa flimkien ma' din is-sottomissjoni.

Interessi li jikkompetu

L-awturi jiddikjaraw li m'għandhom l-ebda interessi li jikkompetu.

Kontribuzzjonijiet tal-awturi

MY wettaq il-biċċa l-kbira tal-esperimenti, ħejja l-manuskritt: ikkonċepita l-istudju, ipparteċipa fid-disinn u l-koordinazzjoni tiegħu, ġabar u analizzat id-dejta, u pprepara l-manuskritt. BJ wettaq l-istudji fuq l-annimali, ipparteċipa f'assaġġ ta 'enżimi relatati ossidattiv. HJ wettaq analiżi taċ-ċitokini. JS ipparteċipa fl-allinjament tas-sekwenza ġenetika. KK ipparteċipa fil-mikroarray tad-DNA. YS wettaq studju in vivo tar-rispons ta 'l-arterja tar-reżistenza. L-awturi kollha qraw u approvaw il-manuskritt finali.

Kunsens għall-pubblikazzjoni

Dan il-manuskritt ma fih l-ebda dejta ta’ persuna individwali fl-ebda forma.

Approvazzjoni etika

Studji li jinvolvu l-annimali ġew approvati mill-Kumitat Etiku tal-Annimali tal-Laboratorju tal-Akkademja Nazzjonali tax-Xjenza Agrikola, RDA, Korea t'Isfel (NAAS1503).

Manuskritti li jirrappurtaw studji ma kienx fihom parteċipanti umani, dejta umana jew tessuti umani.

Nota tal-Pubblikatur

Springer Nature tibqa' newtrali fir-rigward ta' pretensjonijiet ġurisdizzjonali f'mapep ippubblikati u affiljazzjonijiet istituzzjonali.

Dettalji tal-awtur

1Dipartiment tal-Bijoloġija Agrikola, Akkademja Nazzjonali tax-Xjenza Agrikola, Amministrazzjoni tal-Iżvilupp Rurali (RDA), Wanju-Gun 55365, Korea t'Isfel. 2Kulleġġ tal-Ispiżerija, Ajou University, Suwon 442-749, Korea t'Isfel. 3Pharmacogenechips Inc., Chuncheon 200-160, il-Korea t'Isfel.