Preparazzjoni ġdida tal-Albumina tas-Serum Uman S-sulfidrat trażżan is-Sinteżi tal-Melanin

Kuntatt:jaslyn.ji@wecistanche.com

Albumina tas-serum uman (HSA) hija l-aktar proteina abbundanti fis-serum u tintuża ħafna bħala ġarriera tal-mediċina minħabba l-bijokompatibilità tagħha u l-proprjetajiet twal taż-żamma tal-plażma [14,15]. HSA fih total ta' 35 residwu ta' Cys u wieħed minnhom, Cys34, huwa preżenti fil-forma ta' grupp ta' thiol b'xejn [16]. Cys34 kultant hija mira għal sit li jorbot il-mediċini, minħabba l-grupp reattiv tiegħu ta 'thiol [17,18]. Pereżempju, fil-preżenza ta' ossidu nitriku (NO) il-grupp thiol Cys34 huwa S-nitrosated. Aħna qabel iddestrated li S-nitrosated HSA (SNO-HSA) jippermetti li LE jinżamm għal perjodi twal fis-serum [19]. SNO-HSA għandu diversi func-tions bijoloġiċi, inkluż effett protettiv tal-fwied kontra l-iskemija/reperfużjoni [20] u effetti li jrażżnu t-tumur [21].

Konsegwentement, aħna ipotizzaw li HSA tista 'tintuża bħala trasportatur RSS (bħal SNO-HSA) permezz tal-S-sulfhydration ta' Cys34-SH. Bħala sors ta 'polysulfur, DATS u DMTS huma limitati minħabba l-li- lifiliċità u l-volatilità tagħhom. Għalhekk, f'dan l-istudju ntuża Na2Sn (Na2Sn, Na2S2, Na2S3 u Na2S4) disponibbli kummerċjalment. Ogasawara et al. albumina tas-serum ippreparata minn qabel irreaġixxiet b'sulfid tas-sodju (NaHS) b'taħlit sempliċi tar-reaġenti [22]. Il-kubrit minn NaHS ġie miżjud ma 'Cys34 u l-preparazzjoni li tirriżulta tipproteġi l-ħsara tal-fwied ikkawżata mill-perossidu lipidu. Adottajna dan il-metodu għall-paring ta 'RSS-miżjud-HSA bl-użu ta' Na2Sn għall-kunsinna RSS.

F'dan ix-xogħol, aħna rrappurtajna t-tħejjija tal-HSA trattat minn Na2Sn u l-użu tiegħu bħala sistema ġdida ta 'kunsinna ta' RSS. Il-kubrit miżjud ġie analizzat permezz ta' sonda tal-kubrit tas-sulfane [23] u l-eliminazzjoni tas-sulfid mill-polysulfide [24]. Biex jiġi evalwat l- effett ta ' HSA trattat b' Na2Sn fuq it- tibjid tal- ġilda, l- effett ta ' l- HSA trattat b' Na2Sn fuq il- melanin synth- esis ġie studjat bl- użu ta ' linja ta ' ċelluli melanoma B16.

2. Materjal u metodi

2.1. Materjali

L- albumina tas- serum uman (HSA) inxtrat minn KAKETSUKEN (Kumamoto, il- Ġappun) u l- kampjuni kollha ta ' HSA tneħħew bix- xaħam permezz ta ' trattament tal- faħam tal- kannol. Is-sulfid tas-sodju u t-tetrasulfid tas-sodju nxtraw mil-Laboratorju DOJINDO (Kumamoto, il-Ġappun). Is-sonda tal-kubrit sulfane 4 (SSP4) tħejjiet kif deskritt qabel [23]. L-DOPA, glu- tathione, (DTNB), l-aċidu askorbiku u r-reaġent Griess satiriku tas-sodju (sulfanilamide, naphthylethylenediamine-HCl) inxtraw minn Nakarai Chemicals (Kyoto, il-Ġappun). Sephadex G-25 desalting column (φ 1.6 × 2.5 cm) inxtara minn GE Healthcare (Kyoto, il-Ġappun). Il-midjum modifikat tal-Ajkla ta' Dulbecco (DMEM) u 2,2-diphenyl-1-pi- crylhydrazyl (DPPH) inkisbu minn Wako Pure Chemical (Osaka, il-Ġappun). It-tyrosinase tal-faqqiegħ inxtara mingħand Sigma-Aldrich. Is-sustanzi kimiċi l-oħra kollha kienu tal-aħjar grad li kien disponibbli kummerċjalment, u s-soluzzjonijiet kollha tħejjew f'ilma dejonizzat u distillat.

estratt taċ-cistanche

2.2. Analiżi tal-proteina BCA

Il- konċentrazzjonijiet tal- proteini tkejlu bl- użu ta ' assaġġ tal- proteina BCA. 10 μL alikwoti ta' kampjuni u standards ta' albumina tas-serum bovin (BSA) ġew inkubati f'100 μL ta' buffer ta' reazzjoni f'temperatura ta' 25 °C għal 30 min. Wara r-reazzjoni, il-qarrej tal-mikro-plate intuża biex ikejjel l-assorbenza ta '540 nm. Il-BSA ntużat biex tinbena kurva standard.

2.3. Sinteżi ta' Na2Sn ittrattat-HSA

HSA (300 μM) ġie inkubat b'1 mM ta' polysulfids tas-sodju (Na2Sn) fil-PBS (pH 7.4) għal siegħa f'temperatura ta' 37 °C. Wara r-reazzjoni, polysulfids żejda tad-dium tneħħew permezz ta 'filtrazzjoni tal-ġell b'kolonna Sephadex G-25.

2.4. Determinazzjoni tar-rata ta' rbit tal-kubrit bil-metodu ta' eliminazzjoni għas-sulfid mill-polisulfid (EMSP)

EMSP tħejja kif deskritt qabel (3×EMSP biż-żieda ta' 792 mg ta' aċidu L-askorbiku ma' 5 mL ta' 3 N ta' NaOH) [24]. Kampjuni (7.5 μM, 133 μL) ġew inkubati b'66.7 μL ta' 3×EMSP għal 3 siegħa f'temperatura ta' 37 °C. Soluzzjoni ta ' 1% ta ' l- aċetat taż- żingu (600 μL) imbagħad ġiet miżjuda mas- soluzzjoni ta ' azzjoni mill- ġdid, segwita b' vorexing immedjatament. Il-kampjuni ġew ċentrifugati fi 8,000×g għal 5 min u maħsula b'salina mewwieta tal-fosfat (PBS) darbtejn. Wara li jitneħħew is-supernatanti, l-ilma dejonizzat u distillat (200 μL) ġie miżjud mal-preċipitati. Wara li żdied 1% aċetat taż-żingu (300 μL), 50 μL ta' 20 mM N,N-dimethyl-p-phenylenedia- minjiera u 20 mM FeCl3 f'7.2 N HCl, is-soluzzjoni ġiet inkubata għal 30 minuta f'temperatura ta' 25 °C. Il-kampjuni ġew ċentrifugati fi 8000×g għal minuta u trasferiti fi pjanċi ta' 96 bir u l-OD f'665 nm imkejla. Na2S intuża biex tinbena kurva standard.

2.5. Sejbien tal-kubrit tal-sulfan bl-SSP4

Kull kampjun (20 μM) ġie inkubat b'5 μM ta' SSP4 f'1 mM Cetyltrimethylammonium Bromide / PBS (pH 7.4) għal 10 min f'temperatura ta' 25 °C. Wara l-inkubazzjoni, il-fluworexxenza mkejla bi spettrofotometru (Korporazzjoni JASCO) b'escitation f'457nm, emissjoni f'490–535 nm.

2.6. Testijiet radikali DPPH

DPPH (250 μM) fl-etanol kien imħallat ma' l-istess ammont ta' buffer MES (50 mM, pH 7.4). L-HSA trattata b'Na2Sn (40 μM) kienet iż-żieda ma' din is-soluzzjoni DPPH, li mbagħad ġiet inkubata għal 30 minuta f'25 °C u l-assorbiment tar-radikali tad-DPPH ġie mkejjel f'540nm. Ir-rati radikali mkaxkra ġew ikkonvertiti bl-użu tal-formula li ġejja;

Radikali mkaxkra (%) = (Abssample- Abspbs)/ Abspbs × 100

2.7. Analiżi NO u SNO

L-HSA trattat minn Na2Sn (50 μM) ġie inkubat b'donatur no, NOC7 (200 μM), għal 30 minuta f'temperatura ta' 25 °C. Wara r-reazzjoni, il-konċentrazzjoni ta' NO u SNO tkejlet b'analiżi ta' Griess b'modifiki żgħar [25]. Is- soluzzjoni tar- reaġent Griess tħejja billi tħallat 0. Il-buffer ta 'reazzjoni kien magħmul minn 0.1 M NaCl, 0.5 mM DTPA u 10 mM AcONa・AcOH (pH 5.5). Il-kampjuni (20 μM) ġew irreaġixxew bis-soluzzjoni tar-reaġent Griess (60 μL) fir-riżerva ta' reazzjoni (110 μL) bi 3 mM HgCl2 f'10 mM Na Acetate (pH 5.5). Wara inkubazzjoni ta' 15-il minuta, l-assorbenza ta' 540 nm ġiet imkejla permezz ta' qarrej tal-mikroplate. Il-proporzjon NO/SNO li jifdal (%) kien ikkalkulat u mqabbel mal-valuri PBS għall-kampjuni.

2.8. Kultura taċ-ċelloli

Iċ-ċelloli melanoma B16 ġew ipprovduti mill-Bank Ġappuniż tar-Riżorsi tar-Riċerka tal-Kanċer (JCRB, Tokyo, il-Ġappun), u kienu kkoltivati fid-DMEM li fihom 10% serum bovin tal-fetu u soluzzjoni tal-antibijotiċi. Iċ-ċelloli tkabbru b'temperatura ta' 37 °C f'arja umidifikata li fiha 5% CO2 f'inkubatur (passaġġ numru 10–20).

2.9. Produzzjoni tal-Melanin

B16 iċ-ċelloli melanoma nżergħu f'24 platt tal-bir f'konċentrazzjoni ta' 2.5×104 ċelloli/bir u kkoltivati taħt il-5% CO2 f'temperatura ta' 37 °C għal 24 siegħa. Il-kampjuni ġew ittrattati b'0.4mM tyrosine u 10mM NH4Cl f'DMEM li fihom 10% FBS u mbagħad inkubati taħt 5% CO2 f'temperatura ta' 37 °C għal 72 siegħa. Wara l-inkubazzjoni, iċ-ċelloli nħaslu darbtejn bil-PBS u ġew maħlula f'1 N NaOH (200 μL). Wara inkubazzjoni ta' 2 h fuq 60 °C, l-assorbiment (405 nm) ġie mkejjel permezz ta' qarrej tal-mikroplaċa.

Cistanche jinibixxi l-produzzjoni tal-melanin.

2.10. Radjazzjonijiet UV

Lampa UV li tinżamm fl-idejn intużat biex tirriradja l-kampjuni f'distanza ta' distanza ta' 5 cm mill-pjanċa tal-bir. Din il-lampa UV tipprovdi UV in-tensity ta' 614 jew 743 μW/cm2 rispettivament b'radjazzjoni ta' 254 nm jew 365 nm minn distanza ta' 5 ċm.

2.11. Attività ta' scavenging ta' HSA trattata minn Na2S4 kontra ROS intraċellulari, NO, RSS

Iċ-ċelloli tal-melanoma B16 tkejlu minn kull waħda mis-sondi tal-fluworexxenza, CM-H2DCF-DA u DAF-FM-DA, rispettivament. B16 ċelluli melanoma nżergħu fi pjanċi ta' 96 bir f'konċentrazzjoni ta' 1 × 104 ċelloli/bir u kkoltivati f'37 °C, 5% CO2 għal 24 siegħa. Wara l-kultura, il-midja tneħħiet u ġiet sostitwita b'CM-H2DCF-DA (5 μM) jew DAF-FM-DA (10 μM) fil-PBS. Is-sondi ttieħdu miċ-ċelloli billi inkubawhom f'temperatura ta' 37 °C għal 30 minuta. Wara r-reazzjoni, is-super-natants tneħħew, il-kampjuni dilwiti fil-PBS u l-fluworexxenza mkejla immedjatament. Iċ-ċelloli ġew irradjati minn lampa UV għal 15-il minuta. Wara l-irradjazzjoni, l-intensità tal-fluworexxenza (Ex. 485 nm, Em. 535 nm) tkejlet permezz ta' qarrej tal-mikroplaċenza fluworexxenti.

2.12. Attività tat-tyrosinase tal-faqqiegħ u aggregazzjoni tal-melanin

Soluzzjonijiet ta ' Tyrosinase u L- DOPA tħejjew f' PBS (pH 7. 4) immedjatament qabel l- assaġġ. Tyrosinase, iżolat mill-faqqiegħ, intuża biex tiġi eżaminata l-attività inibitorja tal-HSA trattata minn Na2Sn. Porzjon ta' 20 μL ta' tyrosinase tal-faqqiegħ (537 U/mL) u 100 μL ta' HSA trattat minn Na2Sn (40 μM) tħalltu tajjeb mal-PBS (60 μL) f'96 platti tal-bir u 20 μL ta' L-DOPA (5 mM) imbagħad ġew miżjuda. Wara inkubazzjoni ta '30 min, il-livell ta' melanin sintetizzat ġie analizzat billi tkejjel l-OD 490 nm. Għall-analiżi tal-aggregazzjoni tal-melanin, it-taħlita ġiet ċentrifugata f'20,000 g, 15 min għal 3 h. Il-vleġġa bajda turi l-materjal aggregat. Melanin mhux aggregat fis-supernatant ġie mkejjel f'OD ta' 490 nm.

2.13. Testijiet ta' sigurtà

Il-krema topika użata f'dan l-istudju tħejja billi tħallat l-ilma (30 mL) Jojoba Oil (15 mL) u 5 g ta 'xama' emulsifika f'60 °C. Wara t-tkessiħ, l-HSA (20 μM) ittrattat min-Na2S4 u s-sospensjoni li rriżultat tħalltu tajjeb. It-Test tal-Irritazzjoni tal-Ġilda sar wara l-Linja Gwida 439 tat-Test oecD bl-użu tal-LabCyte Epi-Model (mudell tal-ġilda tal-bniedem kulturat 3D).

2.14. Analiżi statistika

Is-sinifikat statistiku tad-dejta miġbura ġie evalwat mill-analiżi ANOVA segwita mill-metodu Newman-Keuls għal aktar minn żewġ mezzi. Id-differenzi bejn il-gruppi ġew evalwati mit-test t-ta 'Student. P< 0.05="" was="" regarded="" as="" being="" statistically="">

3. Riżultati

3.1. Preparazzjoni tal-HSA sulfydrated S

L-HSA trattata b'Na2Sn tħejjiet mill-HSA li kienet ġiet inkubata b'Na2Sn u soġġetta għal filtrazzjoni tal-ġell wara r-reazzjoni. Biex jiġi vvalutat l-ammont ta' kubrit tas-sulfan fil-kampjun, l-EMSP, intuża metodu kwantitattiv ġdid li żviluppajna qabel [24]. Għalhekk, HSA trattata minn Na2S4 tħejja minn HSA u Na2Sn billi ppermettiet lill-aġenti li jerġgħu jirreaġixxu għal 1 siegħa f'temperatura ta' 37 °C. Ammonti differenti ta ' poly- sulfids tas- sodju tħallew jirreaġixxu ma ' hSA. Imbagħad, il-kampjuni HSA ġew inkubati b'soluzzjoni EMSP, li tħejjiet fil-ħin tal-użu, għal 3 h f'temperatura ta' 37 °C. Ibbażat fuq l-analiżi EMSP, il-livell ta 'S-sulfydration żdied indipendentement mill-ammont ta' kubrit (Fig. 1A). Min-naħa l-oħra, kif muri fi Fig. 1B, it-trattament Na2S3- jew Na2S4 tejjeb l-intensità tal-fluworexxenza SSP4 (sonda fluworexxenti għall-kubrit sulfan) meta mqabbla mat-trattamenti Na2S- jew Na2S2, li jissuġġerixxi li SSP4 possibilment irreaġixxa bil-polisulfid tal-proteina b'mod mhux lineari (Fig. 1B).

3.2. Antiossidant u EBDA effett ta' trażżin tal-HSA trattat b'Na2S

Aħna poġġejna li l-HSA trattata minn Na2Sn trażżan il-produzzjoni tal-melanin minħabba l-attività antiossidanti tagħha. Għalhekk, sar test radikali DPPH [26,27] biex janalizza l-attività antiossidanti in vitro. Bħala riżultat, l-HSA trattata minn Na2Sn kellha konċentrazzjoni sinifikament ogħla ta 'kubrit miżjud (Fig. 2A). Biex jiġi spjegat l-effett ta' NO, NOC7 (donatur no) ġie inkubat b'mod ko-inkubat ma' HSA trattat minn Na2S4 f'temperatura ta' 25 °C. Wara perjodu ta' inkubazzjoni ta' 30 min, il-konċentrazzjoni ta' NO li jifdal ġiet ikkwalitata minn analiżi Griess. Kif jidher fil-vireg magħluqa ta 'Fig. 2B, l-HSA trattata minn Na2S4 scavenged b'mod sinifikanti aktar NO meta mqabbla mal-kontroll u l-HSA (Fig. 2B). Il-merkurju elementali (Hg) huwa magħruf li jnaqqas l-SNO u jirrilaxxa NO2-. Meta Hg ġie miżjud ma 'soluzzjoni ta' HSA trattata minn Na2S4, NO2- ġie rilaxxat, li jissuġġerixxi li l-HSA trattata minn Na2S4 kienet imkaxkra permezz ta 'S-nitrosation.

3.3. Effett ta' trażżin melanin tal-HSA trattat b'Na2Sn

B16 ġrieden ċelloli melanoma kienu kkoltivati u s-sinteżi tal-melanin ġiet promossa billi żżid tyrosine mal-midja. Kif muri fi Fig. 3, l-HSA trattata minn Na2Sn inibixxiet is-sinteżi tal-melanin u l-inibizzjoni kienet tiddependi fuq il-kontenut tal-kubrit. Immaġnijiet taċ-ċelloli taċ-ċelloli tal-melanoma B16 wara l-applikazzjoni tal-HSA trattat b'Na2Sn urew ukoll li l-HSA trattat b'Na2Sn naqqas il-proporzjon tal-produzzjoni tal-melaninċelloli pożittivi (Fig. 3).

3.4. L-effett antiossidanti tal-HSA trattat b'Na2S4 b'irradjazzjoni tal-UV

Biex jiġi eżaminat jekk l-HSA trattat b'Na2Sn rażżanx il-forma ta' ROS jew NO indotta mill-UV, sar test tal-istress ossidattiv bl-użu taċ-ċelloli melanoma B16 bħala mudelli. Produzzjoni ta' ROS minn HSA trattata minn Na2S4 fiċ-ċelloli melanoma B16 permezz ta' irradjazzjoni b'2 apparati UV differenti għal 15-il minuta tkejlet b'CMH2-DCF-DA. Is-sejbiet jindikaw li l-HSA trattat b'Na2S4 ikkawża tnaqqis sinifikanti fil-fluworexxenza ta' CMH2-DCF-DA għall-PBS u l-HSA permezz ta' irradjazzjoni f'254 nm u 365 nm (Fig. 4AB). Min-nhar, l-HSA trattata b'Na2S4 rażżan ukoll il-produzzjoni ta' NO fiċ-ċelloli melanoma B16 permezz ta' irradjazzjoni b'254 nm UV (Fig. 4CD). Dawn ir- riżultati jindikaw li HSA trattat b' Na2Sn irażżan is- sintesi tal- melanin billi jinibixxi l- ROS u l- LE prodott mill- irradia- zzjoni UV.

3.5. Trażżin dirett tal-aggregazzjoni tat-tyrosinase u tal-melanin minn HSA trattat minn Na2Sn

Xi aġenti kummerċjali kontra l- melanin huma magħrufa li jinibixxu direttament l- attività tat- tyrosinase. Għalhekk, aħna ttestjajna jekk l-HSA trattata minn Na2Sn bidlitx l-attività tat-tyrosinase. Is-sejbiet indikaw li l-HSA trattata minn Na2Sn inibixxi t-tyrosinase tal-faqqiegħ b'mod aktar wiesa' mill-HSA mhux ittrattata (Fig. 5A). Wara li jiġi ġġenerat, melanin faċilment ma jneħħix l-aggregazzjoni u jinduċi l-formazzjoni tal-medulla [28]. Għalhekk, aħna sussegwentement indirizzajna l-kwistjoni dwar jekk HSA trattat minn Na2Sn timpedixxix l-aggregazzjoni tal-melanin. Konsegwentement, meta t-tyrosinase u l-L-DOPA ġew inkubati flimkien għal 3 h, il-pigmenti melanin ġew aggregati, iżda l-HSA trattata b'Na2Sn ma ħallietx l-aggregazzjoni (Fig. 5B). Minn naħa, HSA nstabet ukoll li tinibixxi l- aggregazzjoni, u indikat li HSA nnifisha setgħet tipprevjeni l- irbit ta ' L- DOPA ma ' tyrosinase.

3.6. Test tas-sikurezza tal-HSA trattat b'Na2Sn bl-użu ta' ġilda tal-bniedem koltivata 3D

Testijiet ta ' irritazzjoni tal- ġilda għall- HSA trattata b' Na2S4 saru bl- użu ta ' ċelloli tal- ġilda tal- bniedem koltivati 3D skond il- linji gwida ta ' l- OECD. B'riżultat ta' dan, in-numru ta' ċelloli superstiti ma tnaqqasx b'HSA trattat b'Na2S4 bl-użu ta' krema topika (Fig. 6A). L- użu ta ' kit ta ' skoperta ta ' ċitotossiċità LDH wera wkoll li ċ- ċelloli tal- ġilda ma ġarrbux ħsara mill- HSA trattat b' Na2S4 (Fig. 6B). Din id- dejta indikat li l- HSA trattat b' Na2Sn huwa sigur ħafna għall- użu kontra l- ġilda tal- bniedem taħt il- konċentrazzjonijiet eżaminati f' dan l- istudju.

4. Diskussjoni

Melanin huwa sintetizzat bl-ossidazzjoni ta 'tyrosine. Tyrosine huwa ossidizzat għal L- DOPA, u mbagħad dopaquinone bl- azzjoni ta ' tyrosinase. Dopaquinone huwa spontanjament ossidizzat għal melanin. Melanin jinduċi l-formazzjoni ta 'pigmenti suwed u freckles, iżda għandu wkoll rwol fil-protezzjoni tal-ġilda milli tkun bil-ħsara mir-radjazzjoni UV. Fil- ġilda tal- bniedem, il- melanoċiti jipproduċu ROS u LE meta stimulati minn uv ra- diation [2,29,30]. ROS jippromwovi s- sintesi ta ' melanin billi jattiva tyr- osinase permezz ta ' l- azzjoni ta ' ATP synthase, phenylalanine hydroxylase, u l- fosforilazzjoni ta ' MAPKs [31, 32]. NO jattiva tyrosinase billi jżid il- livell ċellulari ta ' cGMP [6]. Għalhekk, ROS u NO sca-vengers huma kkunsidrati bħala aġenti anti-melanoġenesi. Hawnhekk, aħna in-vestigati l-effett ta 'sinteżi kontra l-melanin ta' HSA trattat minn Na2Sn. HSA trattata b' Na2Sn rażżan bil- qawwa l- livelli ċellulari ta ' ROS u NO prodotti mir- radjazzjoni UV (Fig. 4). Barra minn hekk, HSA trattata b'Na2Sn kellha effett dirett fuq l-inibizzjoni tal-azzjoni tat-tyrosinase (Fig. 5A) u l-aggregazzjoni tal-melanin (Fig. 5B). Ma stajniex niċċaraw il-mekkaniżmu għal kif il-kubrit sulfane ġie trasferit mill-HSA trattat minn Na2Sn għal ċellula. Għalhekk, in-natura ta' kif l-effetti diretti tal-funzjoni HSA trattata minn Na2Sn jibqgħu mhux ċari. Yamashita et al. demon- strated li dopaquinone jeħel ma ' proteini thiol permezz ta ' residwi ta ' cysteine [33]. Flimkien, l- inibizzjoni ta ' l- aggregazzjoni melanin minn HSA u HSA trattata b' Na2Sn tista ' tinvolvi wkoll il- formazzjoni ta ' rabtiet ta ' disulfid ma ' dopaquinone jew melanin. Min-naħa l-oħra, l-inibizzjoni tat-tyrosinase kienet tiddependi fuq il-kontenut ta 'kubrit miżjud (Fig. 5A). GSH huwa magħruf li jorbot it- tyrosinase u jnaqqas l- attività tiegħu [34]. Minħabba li S- sulfhydrated cysteine għandu reattività aktar b' saħħitha minn cysteine normali [11], glu- tathione persulfide (GSSH) jista ' jinibixxi l- azzjoni ta ' tyrosinase aktar minn GSH. Aktar studji dwar il- kwistjoni ta ' jekk hSA trattat minn Na2Sn iżidx il- GSSH intraċellulari fil- futur.

ROS huma prodotti minn irradjazzjoni UV jew stress estern jinduċi sinjali ta 'tixjiħ, mhux biss fil-forma ta' sintesi melanin iżda wkoll mid-dehra ta 'tikmix u ġilda sagging, ikkawżata minn ħsara fid-DNA u l-formazzjoni ta' kollaġen marbut inkroċjat. Huwa magħruf ukoll li ROS huma fattur aggravanti f'diversi tipi ta 'infjammazzjoni bħal pimples u psorjasi. Diversi aġenti li jbajdu l-ġilda, bħall-aċidu tranexamiku [35] u l-arbutin [36], ġew iddisinjati biex jindirizzaw dawn il-kwistjonijiet. Madankollu, dawn il-komposti jinibixxu biss is-sintesi tal-melanin u m'għandhom l-ebda effett fuq l-istress ossidattiv. Għalhekk, ir-riskji ta' tossiċità kkaġunata minn ROS baqgħu. Vantaġġ li tuża HSA trattat minn Na2Sn huwa li b'mod effiċjenti jkaxkru ROS (Figs. 2 u 4).

Is-sulfid ta 'l-idroġenu ġie studjat bħala t-tielet molekula essenzjali wara l-ossidu nitriku u l-monossidu tal-karbonju. Intwera li l-effetti terapewtiċi tas-sulfid tal-idroġenu huma applikabbli għat-trattament tal-iskemija/reperfużjoni [37], l-aterosklerożi [38], is-sepsis [39] u t-tossiċità kkawżata minn dieta għolja tax-xaħam [40]. Barra minn hekk, l-idroperulfid għandu attività ogħla mis-sulfid tal-idroġenu. Pereżempju, Na2S4 effettivament jiddetossifika l-merkurju metil u jinibixxi d-differenzjazzjoni taċ-ċelloli tan-newroblastoma, filwaqt li Na2S ma [12,41]. Għalhekk, mhux biss effett li jbajdu l-ġilda iżda wkoll effetti pożittivi oħra ta 'HSA trattat b'Na2Sn huma possibbli.

Bħala konklużjoni, aħna rrappurtjajna dwar l- iżvilupp ta ' sistema ġdida RSS de- livery bl- użu ta ' albumina tas- serum bħala trasportatur stabbli. Kubrit reattiv, meta kkombinat ma 'HSA, kellu effett anti-ossidanti aktar b'saħħtu mill-HSA u waqqaf is-sinteżi tal-melanin fiċ-ċelloli melanoma. Il-mekkaniżmu ta 'anti-melanoġenesi jinvolvi mhux biss ROS u NO scavenging, iżda wkoll soppressjoni ta' attività ta 'tyrosinase u aggregazzjoni melanin. Għalhekk, HSA trattat minn Na2Sn għandu potenzjal konsiderevoli għall-użu bħala aġent sikur li jbajdu l-ġilda.

Dan huwa l-prodott tagħna.

Għal aktar informazzjoni, jekk jogħġbok ikklikkja l-istampa.