WT1 Pulsed Human CD141+ Vaċċin taċ-Ċelloli Dendritiċi Għandu Potenzjal Għoli f'Immunoterapija Solida mmirata lejn Tumur

Astratt:

Iċ-ċelloli dendritiċi (DC) huma ċelloli qawwija li għandhom rwoli kritiċi fl-immunità kontra t-tumur, u l-użu tagħhom fl-immunoterapija tal-kanċer jiftaħ kapaċitajiet moħbija bħala terapewtika effettiva. Biex timmassimizza l-potenzjal sħiħ tad-DC, żviluppajna vaċċin DC bl-isem CellgramDC-WT1 (CDW). CDW kien pulsat b'WT1, antiġen komunement espress f'tumuri solidi, u indott b'zoledronate biex jgħin fil-maturazzjoni tad-DC. Għalkemm l-istudju preċedenti tagħna ffoka fuq l-użu ta 'Rg3 bħala induttur tal-maturazzjoni DC, problemi bil-kontroll tal-kwalità u l-aċċess wassluna biex nagħżlu zoledronate bħala alternattiva aħjar. Barra minn hekk, CDW ħarġet IL-12 u IFN- , li kkaġunaw id-divrenzjar ta' ċelluli T naïve għal ċelluli T CD8+ attivi u qanqal rispons ta' limfoċiti T ċitotossiċi (CTL) kontra ċelluli tal-kanċer b'antiġeni WT1. Billi nikkonferma l-identità u l-funzjoni ta 'CDW, nemmnu li CDW huwa vaċċin DC mtejjeb u għandu potenzjal promettenti fil-qasam tal-immunoterapija tal-kanċer.

cistanche tubulosa-titjib tas-sistema immuni

Kliem ewlieni:

Vaċċin DC; CD141; ċelluli dendritiċi; zoledronate; Attivazzjoni taċ-ċelluli T; immunoterapija tal-kanċer; tumur solidu; antiġeni tal-kanċer; tumur ta' Wilms1 (WT1); antiġeni assoċjati mat-tumur

1. Introduzzjoni

Il-kanċer huwa l-kawża ewlenija tal-mewt madwar id-dinja, u filwaqt li l-modi tradizzjonali ta 'trattament jinkludu kirurġija, kimoterapija u irradjazzjoni, ħafna drabi jikkawżaw effetti sekondarji avversi minħabba l-inabbiltà li ssir differenza bejn ċelluli kanċeroġeni u normali [1]. Madankollu, avvanzi reċenti fil-qasam tal-immunoterapija ppermettew l-iżvilupp ta’ vaċċini tal-kanċer, li għandhom l-għan li jattivaw is-sistema immuni tal-ġisem biex jimmiraw speċifikament għaċ-ċelloli tal-kanċer u konsegwentement jimminimizzaw l-effetti sekondarji [2]. Il-vaċċini tal-kanċer jużaw primarjament antiġeni assoċjati mat-tumur jew antiġeni speċifiċi għat-tumur biex jattivaw il-limfoċiti speċifiċi għall-antiġen tas-sistema immuni [3]. Limfoċiti attivati, prinċipalment ċelluli T, jassumu funzjonijiet effettur bħaċ-ċitotossiċità u l-produzzjoni taċ-ċitokini biex jikkontrollaw il-progressjoni tal-kanċer [4]. Tipi differenti ta’ vaċċini tal-kanċer jutilizzaw sett speċifiku ta’ ċelloli immuni, bħal ċelloli naturali killer (NK) [5] u ċelloli dendritiċi (DC) [6]. Minn dawn, DC huma ċelluli li jippreżentaw l-antiġen (APC) u għandhom rwol kritiku fl-attivazzjoni tar-rispons immuni permezz taċ-ċelluli T. Il-karatteristika ewlenija tad-DC tinvolvi l-abbiltà li jaqbdu l-antiġeni u tipproċessa l-proteina f'peptide biex tiġi ppreżentata liċ-ċelloli T minn molekuli ta 'kumpless maġġuri ta' istokompatibilità (MHC). Madankollu, DC jinkludi popolazzjoni eteroġenja b'kull subsett li jġorr fenotipi u funzjonijiet distinti [7].

sistema immunitarja li żżid il-pjanti cistanche

DCs huma maqsuma fil-biċċa l-kbira f'DC klassiku/konvenzjonali (cDC), DC plasmacytoid (pDC), u DC derivat minn monoċiti (mo-DC). Hemm żewġ gruppi wesgħin ta’ cDC: DC tat-tip 1 (cDC1), li primarjament jippreżenta antiġeni bl-użu ta’ MHC klassi I biex iqanqal rispons CTL miċ-ċellula CD8+ T (CTL), u DC tat-tip 2 (cDC2), li juża MHC klassi II biex tippromwovi rispons miċ-ċellula T CD4+ (ċellula T helper) [8]. Plasmacytoid DCs huma subsett uniku ta 'DC li huma speċjalizzati fit-tnixxija ta' interferon tat-tip I (IFN) [9]. Mo-DC huwa primarjament involut fl-infjammazzjoni u jippromwovi r-rispons immuni TH17 [10] (Figura 1A). Bħalissa, mo-DC huwa l-aktar użat fil-qasam tar-riċerka dwar l-immunoterapija kontra l-kanċer tad-DC [11-13]. Għalkemm mo-DC huwa tollerat tajjeb u sigur, effikaċja terapewtika baxxa fixklet l-użu mifrux tagħha. Il-limitazzjoni ta 'mo-DC hija murija in vitro, fejn juru kapaċità limitata li jemigraw lejn lymph nodes biex jattivaw risponsi qawwija ta' limfoċiti T ċitotossiċi (CTL) [14]. Biex jingħelbu l-limitazzjonijiet tal-modi attwali ta 'vaċċin DC, cDC1 intgħażel f'dan l-istudju, peress li għandu l-abbiltà ta' preżentazzjoni ta 'antiġeni l-aktar superjuri u juri rispons CTL għoli. Għalkemm l-istudji dwar il-vaċċini cDC1 qed jiżdiedu, cDC1 għadu ma ġiex esplorat fi prova klinika [15].

Ksibna ċelluli mononukleari (MNC) mill-mudullun u mbagħad ċelluli CD34+ iżolati (ċelloli staminali ematopojetiċi) bl-użu tat-teknika tas-Separazzjoni taċ-Ċelluli MACS®. Iċ-ċelloli ġew proliferati bl-użu ta' fattur li jistimula l-kolonja tal-granuloċiti-makrofagi (GM-CSF), fattur taċ-ċelluli staminali (SCF), u ligand tar-riċettur 3 ta' tyrosine kinase simili għal Fms (FLT3), li jinduċi direttament divrenzjar f'DC [16], u differenzjazzjoni f'DC ġie indott b'GM-CSF u interleukin 4 (IL-4). DC immatur jagħraf il-proteina WT1 bħala l-antiġen u jiġi mmaturat bl-użu ta 'zoledronate. L-antiġenu WT1 (Wilms' tumor1) huwa espress ħafna f'diversi tumuri malinni u varjetà ta 'tumuri solidi. Għalhekk, WT1 intuża bħala waħda mill-miri tal-immunoterapija għall-kanċer [17]. Zoledronate huwa mediċina tal-klassi tal-bisfosfonati, li tintuża ħafna għat-trattament kemm tal-osteoporożi kif ukoll tal-metastasi skeletriċi. Barra minn hekk, zoledronate jinibixxi l-enzima farnesyl diphosphate synthase, li għandha rwol fil-mogħdija mevalonate u fil-prenilation sussegwenti ta 'proteini GTPase żgħar, bħal Ras [18]. Id-DC immaturat imbagħad jiġi ffinalizzat bħala vaċċin DC (Figura 1A). B'mod ġenerali, DC immaturati inixxu diversi ċitokini biex jinduċu l-attivazzjoni ta 'ċelluli immuni [19] u jorbtu direttament ma' ċelluli T għall-preżentazzjoni ta 'antiġeni [20]. Iċ-ċelluli T irreaġixxew mad-DC biex isiru ċelluli T helper (CD4+) biex jgħinu lir-rispons immuni jew ċelluli T ċitotossiċi (CD8+) biex jibdew direttament effetti kontra l-kanċer [21] (Figura 1B). Il-kompożizzjoni tal-vaċċin DC ġiet ikkonfermata permezz taċ-ċitometrija tal-fluss, u l-funzjoni tal-vaċċin ġiet analizzata permezz tat-test tas-sekrezzjoni taċ-ċitokini, il-bidla taċ-ċelluli T u l-assaġġ tal-Limfoċiti T ċitotossiċi (CTL).

cistanche tubulosa-titjib tas-sistema immuni

Ikklikkja hawn biex tara l-prodotti Cistanche Enhance Immunity

【Staqsi għal aktar】 Email:cindy.xue@wecistanche.com / Whats App: 0086 18599088692 / Wechat: 18599088692

2. Riżultati

2.1. Profili taċ-Ċitometrija tal-Fluss li Jillustraw Vaċċin DC b'Espressjoni ta' CD141+ Għolja

Biex tiġi kkonfermata l-identità tad-DC, ġew analizzati diversi markaturi, inklużi CD141 (l-iktar markatur cDC1 użat), CD1c (markatur ta 'cDC2), u CD303a (markatur ta' pDC). Barra minn hekk, HLA-DR, CD80, u CD86, li huma markaturi ta 'attivazzjoni, ġew analizzati wkoll. B'kuntrast ma' 70% ta' cDC2 misjuba fid-DC tad-demm tal-bniedem, id-DC li kienet prodotta kienet tikkonsisti l-aktar minn cDC1 (ċelluli CD141+), u l-okkorrenza pożittiva doppja ta' CD141+CD1c+ fid-DC attivat kienet ikkonfermat ukoll [22,23]. Barra minn hekk, ir-riżultati wrew livell għoli b'mod sinifikanti ta 'attività għal DC (Figura 2A, B). Il-bidliet fil-morfoloġija taċ-ċelluli ġew segwiti wkoll bl-użu tal-għadd sħiħ tad-demm (CBC) għal punti ta 'żmien differenti fil-produzzjoni tad-DC. Filwaqt li ħafna miċ-ċelloli jipproliferaw bħala monoċiti fil-fażi ta 'proliferazzjoni (Tabella 1), il-fażi ta' differenzjazzjoni rriżultat fi tnaqqis gradwali fil-monoċiti għal livell ta 'għajbien lejn tmiem il-proċess ta' produzzjoni.

Figura 2. Identifikazzjoni ta 'subsettijiet CDW. Karatteristiċi fenotipiċi tad-DC. Matul il-proċess ta 'divrenzjar, id-DC ġew pulsati bil-proteina WT1 u ttrattati b'1 µM zoledronate għal 3 sigħat. Id-dejta turi l-espressjoni ta 'markatur stimulatorju u sottotip ta' DC rappreżentattiv ta 'DC uman (n=5) (A). Ir-riżultati huma murija bħala dot plots (B).

Tabella 1. Matul il-proċess ta 'proliferazzjoni u differenzjazzjoni minn ċelluli CD34+ għal DC, bidliet fenotipiċi ġew analizzati bl-użu ta' CBC.

2.2. Livell Plażmatiku ta' IL-12 u IFN-Citokines Determinati mill-ELISA

Mill-ħafna ċitokini mnixxija minn DC, l-aktar rappreżentattivi huma IL-12 u IFN- . IL-12 jirregola l-infjammazzjoni billi jgħaqqad ir-risponsi immuni innati u adattivi. Ħafna mill-effetti indotti mill-IL-12-huma medjati mis-sekrezzjoni ta' IFN- u rriżultaw li huma kritiċi għall-induzzjoni taċ-ċelluli Th1. IFN- għandu rwol ewlieni fl-attivazzjoni tal-immunità ċellulari u, sussegwentement, l-istimulazzjoni tar-rispons immuni kontra t-tumur [24-26]. Sabiex tiġi vverifikata l-effikaċja tal-livelli ta' sekrezzjoni CDW, IL-12, u IFN ġew analizzati permezz ta' interazzjoni maċ-ċelluli T. Filwaqt li ċ-ċelluli T biss u ċ-ċelluli T ttrattati b'kundizzjonijiet DC mhux pulsati rriżultaw f'livelli ta 'sekrezzjoni li kienu simili għal xulxin, meta l-gruppi tqabblu ma' dak tal-grupp taċ-ċelluli T + CDW, l-induzzjoni CDW fuq ċelluli T tat id-doppju tal-livell ta 'IL -12(Figura 3A) u żiedet b'mod sinifikanti l-livell ta 'IFN- (Figura 3B).

Figura 3. Tqabbil ta 'induzzjoni ta' CDW fuq ċelluli T permezz ta 'analiżi taċ-ċitokini. Is-sekrezzjoni ta' IL-12 (A) u IFN- (B) kienet imkejla f'ċellula T biss (IL-2 attivata u Trans ACT), ċellula T + DC mhux pulsata u ċellula T + ko-kultura CDW supernatant bl-użu ta' analiżi ELISA (n=3). ELISA saret bl-użu tas-supernatant fil-ħin tat-tlestija. L-analiżi saret permezz ta' SigmaPlot. *** p < 0.001.

2.3. Effett ta 'Zoledronate fuq id-Differenzjazzjoni u l-Maturazzjoni ta' cDC1 f'CDW

Fl-istudju preċedenti, Rg3 [27], ginsenoside misjub f'Panax ginseng, intuża biex jinduċi l-maturazzjoni tad-DC; madankollu, il-prodott finali kien jikkonsisti f'saff ta 'impuritajiet, li jikkawża diffikultajiet fil-kontroll tal-kwalità. Zoledronate intuża bħala sostitut għal Rg3 biex tingħeleb din il-problema, u l-effett tiegħu fuq l-induzzjoni tal-maturazzjoni DC ġie analizzat. L-aktar differenza sinifikanti bejn l-effetti taż-żewġ sustanzi hija l-kapaċità ta 'zoledronate li jagħti espressjoni eċċezzjonalment għolja ta' markatur tal-wiċċ cDC1 (CD141+ cell) (Figura 4A). Għalhekk, peress li cDC1 huwa magħruf li huwa s-sottotip ta 'DC l-aktar superjuri fil-preżentazzjoni ta' l-antiġen, zoledronate intgħażel għall-induzzjoni tal-maturazzjoni tad-DC [18]. L-aħjar ħin ta' trattament ta' zoledronate biex jinduċi l-maturazzjoni tad-DC ġie vvalutat ukoll. Għalkemm trattament ta' 24 siegħa ta proporzjon suffiċjenti ta' ċelluli CD141+, il-proporzjon taċ-ċelluli CD141+ fir-riżultat tat-trattament ta' 3 sigħat kien akbar b'madwar 20%, u s-CD86 (ko- markatur stimulatorju) proporzjon fit-trattament ta '3 sigħat kien ukoll akbar bi 30%. Barra minn hekk, b'kont meħud tal-mekkaniżmu ta' azzjoni ta' zoledronate, ħin ta' kura iqsar ta' 3 sigħat meta mqabbel ma' 24 siegħa kien meqjus aktar effettiv fil-produzzjoni ta' kwalità ogħla ta' DC (Tabella 2).

Figura 4. Effett ta 'zoledronate fuq id-divrenzjar u l-maturazzjoni ta' cDC1 fil-produzzjoni tal-vaċċin DC. Effetti ta 'zoledronate fil-vaċċin DC. Fil-proċess tal-produzzjoni tal-vaċċin DC, trattament ta '3 sigħat b'zoledronate jinduċi divrenzjar u maturazzjoni ta' DC għal cDC1 u jagħti livell ogħla ta 'markatur CD141. Il-markaturi tal-fenotip ġew analizzati permezz taċ-ċitometrija tal-fluss biex iqabblu Rg3 (n=4) u zoledronate (n=5), li ntużaw għall-induzzjoni tal-maturazzjoni tad-DC. *** p < 0.001.

Tabella 2. Effett tal-ħinijiet tat-trattament b'zoledronate (3 sigħat u 24 siegħa) fuq il-markaturi tal-wiċċ.

2.4. Tweġibiet taċ-Ċellola T Speċifiċi għall-Antiġenu WT1 Indotti mit-Tilqim CDW

Figura 5. Is-CDW iżid iċ-ċelluli CD8+ T biex jippromwovi ċ-ċitotossiċità kontra ċ-ċelloli tal-kanċer. Effett ta' CDW fuq ir-rispons taċ-ċelluli T evalwat permezz ta' CTL. IL-2 u Trans-Act huma stimulaturi taċ-ċelluli T u ntużaw biex jistimulaw iċ-ċelluli T. Iċ-ċelluli T attivati ​​ġew ko-kultivati ​​ma' DC għall-ewwel induzzjoni, li ddum għal sebat ijiem, u t-tieni induzzjoni li testendi għal 10 jum. Il-bidliet fis-sottotip taċ-ċelluli T ġew analizzati permezz taċ-ċitometrija tal-fluss (A). Iċ-ċelluli T ikkultivati ​​għal 10–14-il jum ġew ko-kultivati ​​ma' ċelluli tal-kanċer li jesprimu WT1 skont proporzjonijiet xierqa fi pjanċa ta' 96-bir. Wara-72 siegħa, ir-rata ta' sopravivenza taċ-ċelloli tal-kanċer ġiet analizzata bl-użu ta' CCK8 (B–D). Ċelloli T indotti mill-grupp CDW (B). Grupp taċ-ċelluli T biss (IL-2 attivat u Trans ACT) (C). Ċelloli T indotti minn grupp DC mhux pulsat (D). * p < 0.05, *** p < 0.001.

2.5. Konferma tas-Sigurtà tat-Tilqim CellgramDC

Fiż-żewġ gruppi ta' amministrazzjoni (3.4 × 104 ċelluli/annimal jew 1.7 × 105 ċelluli/annimal), ma ġew osservati l-ebda anormalitajiet fir-rigward tal-mewt jew sintomi ġenerali bħala riżultat tas-sustanza mogħtija.

Matul il-perjodu ta' osservazzjoni, ma ġew osservati l-ebda bidliet tossikoloġikament sinifikanti fil-gruppi ta' amministrazzjoni (3.4 × 104 ċelluli/annimal jew 1.7 × 105 ċelluli/annimal) bħala riżultat tas-sustanza amministrata. L-osservazzjonijiet kienu jinkludu piż tal-ġisem (Figura 6A), analiżi tal-awrina (Figura 6B), teħid ta 'għalf, eżami oftalmoloġiku, eżami ematoloġiku, eżami bijokimiku tad-demm, piż tal-organi, awtopsja u test ta' tolleranza lokali (Suppliment 1, Tabelli S1–S9). Diversi testijiet ġew ikkonfermati billi tqabbel DC derivat minn staminali (CellgramDC) u DC derivat minn monoċiti (mo-DC). Ġew ittestjati wkoll is-sopravivenza u d-daqs tat-tumur tal-ġrieden. Id-daqs tat-tumur fil-grupp stem-DC tnaqqas b'aktar minn 50% meta mqabbel ma 'dak tal-grupp mo-DC, u r-rata ta' sopravivenza żdiedet ukoll, u tikkonferma effett qawwi kontra l-kanċer (Suppliment 2).

Figura 6. Studju tat-tossiċità tad-doża taħt il-ġilda ta' CellgramDC fil-ġrieden C57BL/6. Biex jiġu ttestjati s-sigurtà u r-rispons tossiku taċ-CellgramDC, ġrieden nisa u irġiel tar-razza C57BL/6 ġew injettati taħt il-ġilda b'CellgramDC għal total ta' sitt ġimgħat (injezzjoni waħda fil-ġimgħa). Is-sigurtà ta' Cell gramDC ġiet ittestjata b'injezzjoni taħt il-ġilda fi ġrieden nisa u irġiel għal total ta' sitt ġimgħat (injezzjoni waħda fil-ġimgħa). Gruppi ta 'amministrazzjoni kienu jikkonsistu f'żewġ gruppi: 10 ġrieden injettati bi 3.4 × 104 ċelluli/annimal u 15-il ġrieden injettati b'1.7 × 105 ċelluli/annimal. Grupp ta 'kontroll negattiv kien magħmul minn 15-il ġrieden u ġie injettat ġol-vini b'soluzzjoni komposta minn eċċipjent, soluzzjoni fil-plażma-A/albumina tas-serum uman (HSA) 90% + DMSO 10%, u salina għal sitt ġimgħat (injezzjoni waħda fil-ġimgħa). Sabiex jiġi ttestjat għal rispons tossiku riversibbli, ħames ġrieden minn kull grupp ta 'tqabbil, grupp ta' kontroll negattiv, u 1.7 × 105 ċelluli/grupp ta 'amministrazzjoni ta' annimali ngħataw ġimgħatejn tal-perjodu ta 'rkupru. Matul il-perjodu ta 'rkupru, ġew osservati kontroll tal-piż (A), analiżi tal-awrina (B), sintomi ġenerali, kejl tal-konsum tal-għalf, u eżami oftalmoloġiku. Wara l-perjodu ta 'osservazzjoni, saru testijiet ematoloġiċi, testijiet bijokimiċi tad-demm, u kejl tal-piż tal-organi, kif ukoll eżamijiet viżwali u istopatoloġiċi fin-nekropsja.

Aħna kkonfermajna l-istabbiltà u l-effettività ta 'CellgramDC. CDW li huwa pulsat b'WT1 u trattat bi zoledronate se jiġi ttestjat ukoll għat-tossiċità u l-effikaċja u riżultati mtejba huma mistennija.

3. Diskussjoni

Fil-vaċċin CDW li ġie prodott, cDC1 kien l-ogħla fi proporzjon u wera livell għoli ta 'attività. Is-cDC1 huma ċelluli bl-aktar kapaċità superjuri tal-preżentazzjoni tal-antiġen u huma responsabbli għall-funzjoni ewlenija tad-DC. Meta wieħed iqis kif cDC1 jagħmel subsett rari ta' DC [~0.03% ta' PBMC] [28], il-predominanza tal-popolazzjoni CD141+ f'CDW hija vantaġġ ċar biex tiżdied l-effikaċja tal- vaċċin. Barra minn hekk, cDC1 f'CDW ħarġet ċitokini (IL-12 u IFN- ) f'livell għoli u kien kapaċi jinduċi d-divrenzjar ta' ċelluli T naïve għal ċelluli T CD8+ attivi. Fl-istudju preċedenti tagħna, Rg3 intuża bħala fattur ta 'maturazzjoni, iżda minħabba d-diffikultà biex tinkiseb provvista u kontroll tal-kwalità tal-prodott finali, zoledronate intuża bħala sostitut biex jingħelbu dawn l-isfidi. DC indott minn zoledronate ġie studjat biex janalizza r-rwol tiegħu bħala induttur tal-attivazzjoni taċ-ċelluli V 9 δ T [29]. Zoledronate huwa klassi ta 'bisfosfonati, u l-bisfosfonati jinduċu l-attività taċ-ċelluli δ T biex jipproduċu b'mod rapidu u abbundanti ċitokini proinfjammatorji [30], filwaqt li nqisu dan, iddisinjajna l-esperiment tagħna biex nittestjaw l-effetti ta' trattament għal żmien qasir. Fl-istudju tagħna, zoledronate (meta mqabbel ma 'Rg3) indotta attivazzjoni taċ-ċelluli CD8+ T f'CDW u żied ukoll il-livell ta' cDC1. L-ewwel prova klinika saret għal DC indotta minn Rg3 (NCT 046158-45) mill-istudju preċedenti tagħna, iżda r-riżultati ma ġewx irrappurtati. Madankollu, nistennew riżultati mtejba fi provi kliniċi futuri li jużaw DC indott minn zoledronate minħabba s-sejbiet attwali.

sistema immunitarja li żżid il-pjanti cistanche

Riċentement, kien hemm ħafna studji dwar l-immunoterapija kontra l-kanċer, u l-aktar terapiji riċerkati huma CAR-T [31,32] u CAR-NK [33,34]. Dawn it-terapiji kkonfermaw l-effikaċja tagħhom u huma mistennija ħafna għat-trattament tal-kanċer. Madankollu, CAR-T huwa limitat għat-trattament tal-kanċer tad-demm, li jinkludi proporzjon żgħir ħafna tat-tipi kollha tal-kanċer [35]. Barra minn hekk, il-pazjenti jistgħu jbatu minn effetti sekondarji tat-trattament, bħas-sindromu tar-rilaxx taċ-ċitokini (CRS) [36]. Sabiex jingħelbu dawn in-nuqqasijiet, qed tiġi riċerkata terapija immuni bl-użu ta 'ċelluli NK. Iċ-ċelloli NK huma limfoċiti qawwija ħafna u jimmiraw għall-kanċer permezz ta' ligandi attivanti multipli espressi b'mod wiesa'. Bħala riżultat, iċ-ċelluli NK jistgħu jindirizzaw il-limitazzjonijiet tat-terapija awtologa taċ-ċelluli CAR T. Madankollu, hemm diversi żvantaġġi potenzjali għall-użu taċ-ċelluli NK, bħal diffikultà fil-kultura taċ-ċelluli, immedjatezza fl-ogħla attività tal-kinetika ċellulari, u lonġevità intrinsika iqsar kif ukoll fenotip limitat tal-memorja fil-ħajja u r-rispons [34,37]. ,38]. Riċerka oħra tinvolvi terapiji kombinazzjonali li jużaw ċelluli DC jew T u inibituri tal-punti ta 'kontroll immuni bħal anti-PD1 (programmed cell death protein1) [39] jew anti-PD-L1 (programmed death-ligand1) [40]. Il-ko-amministrazzjoni ta 'dawn il-mediċini tippermetti l-immirar tal-mikroambjent tat-tumur immunosoppressiv u aktar riċerka għaddejja biex tiżdied l-effikaċja ta' dawn it-terapiji.

Benefiċċji ta' cistanche tubulosa-ssaħħaħ is-sistema immuni

Ir-riċerka għall-iżvilupp tal-vaċċin DC għall-immunoterapija qed tiżdied kontinwament, u qed isiru ħafna avvanzi f'dan il-qasam. DC għandu rwol ċentrali u kritiku fis-sistema immuni avvanzata, u l-vaċċin DC jista 'joffri vantaġġ meta mqabbel ma' modi oħra ta 'immunoterapija għall-kanċer. Minħabba li DC ma joqtolx direttament iċ-ċelloli tal-kanċer, iċ-ċelloli normali mhumiex affettwati, u jeliminaw l-effetti sekondarji avversi. Barra minn hekk, billi tiġbed DC b'WT1, antiġen espress b'mod komuni f'ħafna tumuri solidi [17], il-vaċċin DC jista 'jimmira mudelli ta' tumuri solidi. Qabel ma niddeċiedu dwar l-antiġen tal-proteina WT1, esperimentajna b'diversi tipi ta 'antiġeni. Bl-użu ta 'prodotti ta' kwalità garantita, kif ukoll diversi antiġeni bħal peptide, captivator, jew taħlita pop, l-antiġen bl-akbar effett kien meta jintuża bħala proteina. Konsegwentement, użajna l-proteina WT1 għall-pulsing tal-antiġen. L-aktar approċċ studjat fit-terapija DC juża mo-DC impulsed ma WT1 flimkien mal-kimoterapija [12]. Is-sigurtà u l-immunoġeniċità ta' mo-DC ġew ikkonfermati permezz ta' provi kliniċi [13]. Filwaqt li riċerka oħra dwar vaċċini DC tiżviluppa l-vaċċini tagħha bl-użu ta 'DC derivat minn monoċiti mid-demm, aħna mbassar li DC derivat minn ċelloli staminali se jkollu potenzjal akbar. Barra minn hekk, huwa magħruf li s-cDC għandu qawwa akbar minn mo-DC, li jmexxina lejn din ir-riċerka. Għalhekk, CDW jista 'jkun alternattiva aħjar għal mo-DC, peress li l-komponent primarju tiegħu huwa cDC1, subtip DC bl-aktar kapaċità ta' preżentazzjoni inkroċjata effettiva. Għalkemm l-attività ċitotossika kienet simili fiċ-ċelluli T + grupp DC mhux pulsat u grupp CDW, aħna ipoteżi dan huwa minħabba DC mhux pulsati hija wkoll tip ta 'ċellola cDC1. Indipendentement, CDW jista 'effettivament iqajjem rispons immuni qawwi kontra t-tumur billi jżid il-popolazzjoni cDC1. Permezz tal-istudju prekliniku, ittestjajna t-tossiċità tad-doża ripetuta tal-vaċċin DC. Il-proċess ta 'żvilupp u produzzjoni ta' CDW ġew ivverifikati, u nittamaw li nagħmlu aktar studji biex nittestjaw l-effetti mtejba tas-CDW. Filwaqt li l-effikaċja ġiet ikkonfermata in vitro, sar studju tat-tossiċità tad-doża għall-validazzjoni tal-effikaċja in vivo. Ladarba r-riżultati tal-provi kliniċi li jużaw CDW jiġu rrappurtati, għandna l-intenzjoni li niggwidaw ir-riċerka tagħna fid-direzzjoni li se ttejjeb ir-riċerka attwali.

Referenzi

1. Padma, VV Ħarsa ġenerali lejn it-terapija tal-kanċer immirata. BioMedicine 2015, 5, 19. [CrossRef] [PubMed]

2. Schirrmacher, V. Vaċċini tal-kanċer u viruses onkolitiċi jeżerċitaw effetti sekondarji profondament aktar baxxi f'pazjenti bil-kanċer minn terapiji sistemiċi oħra: Analiżi komparattiva. Biomedicines 2020, 8, 61. [CrossRef] [PubMed]

3. Smith, CC; Selitsky, SR; Chai, S.; Armistead, PM; Vincent, BG; Serody, JS Antiġeni alternattivi speċifiċi għat-tumur. Nat. Dun Kanċer 2019, 19, 465–478. [CrossRef] [PubMed]

4. Lu, H.; Zhao, X.; Li, Z.; Hu, Y.; Wang, H. Miċ-ċelloli CAR-T għal ċelloli CAR-NK: Metodu ta 'immunoterapija li qed jiżviluppa għal tumuri malinni ematoloġiċi. Quddiem. Oncol. 2021, 11, 720501. [CrossRef]

5. Chu, J.; Gao, F.; Yan, M.; Zhao, S.; Yan, Z.; Shi, B.; Liu, Y. Ċelloli qattiel naturali: Immunoterapija promettenti għall-kanċer. J. Transl. Med. 2022, 20, 240. [CrossRef] [PubMed]

6. Sabado, RL; Balan, S.; Bhardwaj, N. Immunoterapija bbażata fuq iċ-ċelluli dendritiċi. Ċellula Res. 2017, 27, 74–95. [CrossRef] [PubMed]

7. Patente, TA; Pinho, MP; Oliveira, AA; Evangelista, GCM; Bergami-Santos, PC; Barbuto, JAM Ċelloli dendritiċi tal-bniedem: L-eteroġeneità tagħhom u l-potenzjal ta 'applikazzjoni klinika fl-immunoterapija tal-kanċer. Quddiem. Immunol. 2019, 9, 3176. [CrossRef]

8. Collin, M.; Bigley, V. Sottogruppi taċ-ċelluli dendritiċi tal-bniedem: Aġġornament. Immunoloġija 2018, 154, 3–20. [CrossRef]

9. Fitzgerald-Bocarsly, P.; Dai, J.; Singh, S. Ċelloli dendritiċi Plasmacytoid u tip I IFN: 50 sena ta 'storja konverġenti. Cytokine Growth Factor Rev 2008, 19, 3–19. [CrossRef]

10. Segura, E.; Touzot, M.; Bohineust, A.; Cappuccio, A.; Chiocchia, G.; Hosmalin, A.; Dalod, M.; Soumelis, V.; Amigorena, S. Iċ-ċelloli dendritiċi infjammatorji tal-bniedem jinduċu divrenzjar taċ-ċelluli Th17. Immunità 2013, 38, 336–348. [CrossRef]

11. Geskin, LJ; Damiano, JJ; Patrun, CC; Butterfield, L.; Kirkwood, JM; Falo, LD Tliet metodi ta 'tagħbija ta' antiġen f'vaċċini ta 'ċelluli dendritiċi għal melanoma metastatika. Melanoma Res. 2018, 28, 211. [CrossRef] [PubMed]

12. Guo, Z.; Yuan, Y.; Chen, C.; Lin, J.; Ma, Q.; Liu, G.; Gao, Y.; Huang, Y.; Chen, L.; Chen, L.-Z.; et al. Rispons sħiħ dejjiemi għal vaċċin taċ-ċelluli dendritiċi mgħobbija b'neoantiġen wara terapija kontra l-PD-1 f'kanċer metastatiku tal-istonku. Npj Precis. Oncol. 2022, 6, 34. [CrossRef] [PubMed]

13. Bol, KF; Schreibelt, G.; Rabold, K.; Wculek, SK; Schwarze, JK; Dzionek, A.; Teijeira, A.; Kandalaft, LE; Romero, P.; Coukos, G.; et al. L-applikazzjoni klinika tal-immunoterapija tal-kanċer ibbażata fuq ċelluli dendritiċi li jiċċirkolaw b'mod naturali. J. Immunother. Kanċer 2019, 7, 109. [CrossRef] [PubMed]

14. Koya, T.; Data, I.; Kawaguchi, H.; Watanabe, A.; Sakamoto, T.; Togi, M.; Kato, JT; Yoshida, K.; Kojima, S.; Yanagisawa, R.; et al. Ċelloli dendritiċi pre-pulsati bit-Tumur 1 ta' Wilms f'kultura ottimizzata għat-tilqim tal-kanċer. Farmaċewtika 2020, 12, 305. [CrossRef] [PubMed]

15. Zhou, Y.; Slone, N.; Chrisikos, TT; Kyrysyuk, O.; Babcock, RL; Medik, YB; Li, HS; Kleinerman, ES; Watowich, SS Effikaċja tal-vaċċin kontra kanċer primarju u metastatiku b'ċelluli dendritiċi konvenzjonali CD103+ iġġenerati in vitro. J. Immunother. Kanċer 2020, 8, e000474. [CrossRef]

16. Cueto, F.; Sancho, D. L-assi Flt3L/Flt3 fil-bijoloġija taċ-ċelluli dendritiċi u l-immunoterapija tal-kanċer. Kanċers 2021, 13, 1525. [CrossRef]

17. Yanagisawa, R.; Koizumi, T.; Koya, T.; Sano, K.; Koido, S.; Nagai, K.; Kobayashi, M.; Okamoto, M.; Sugiyama, H.; Shimodaira, S. WT1-vaċċin taċ-ċelluli dendritiċi pulsati flimkien ma' kimoterapija għal kanċer tal-frixa resekat fi studju ta' fażi I. Kontra l-kanċer. Res. 2018, 38, 2217–2225. 18. Orsini, G.; Failli, A.; Leġittimu, A.; Adinolfi, B.; Romanini, A.; Consolini, R. L-aċidu Zoledronic jimmodula l-maturazzjoni taċ-ċelluli dendritiċi derivati ​​minn monoċiti umani. Exp. Biol. Med. 2011, 236, 1420–1426. [CrossRef] [PubMed]

19. Schmidt, SV; Nino-Castro, AC; Schultze, JL Ċelloli dendritiċi regolatorji: Hemm aktar minn sempliċi attivazzjoni immuni. Quddiem. Immunol. 2012, 3, 274. [CrossRef]

20. Tai, Y.; Wang, Q.; Korner, H.; Zhang, L.; Wei, W. Mekkaniżmi molekulari ta 'attivazzjoni taċ-ċelluli T minn ċelluli dendritiċi f'mard awtoimmuni. Quddiem. Pharmacol. 2018, 9, 642. [CrossRef]

21. Alfei, F.; Ho, P.-C.; Lo, W.-L. It-teħid ta' deċiżjonijiet fit-tumuri jirregola l-immunità kontra t-tumur taċ-ċelluli T. Oncogene 2021, 40, 5253–5261. [CrossRef] [PubMed]

22. Granot, T.; Senda, T.; Mastrudaxxa, DJ; Matsuoka, N.; Weiner, J.; Gordon, CL; Miron, M.; Kumar, BV; Griesemer, A.; Ho, S.-H.; et al. Iċ-ċelloli dendritiċi juru dinamiċi ta' maturazzjoni subsett u speċifiċi għat-tessuti matul il-ħajja tal-bniedem. Immunità 2017, 46, 504–515. [CrossRef] [PubMed]

23. Breton, G.; Lee, J.; Zhou, YJ; Schreiber, JJ; Keler, T.; Puhr, S.; Anandasabapathy, N.; Schlesinger, S.; Caskey, M.; Liu, K.; et al. Prekursuri li jiċċirkolaw taċ-ċelloli dendritiċi CD1c+ u CD141+ umani. J. Exp. Med. 2015, 212, 401–413. [CrossRef] [PubMed]

24. Tugues, S.; Burkhard, SH; Ohs, I.; Vrohlings, M.; Nussbaum, K.; vom Berg, J.; Kulig, P.; Becher, B. Intuwizzjonijiet ġodda fis-soppressjoni tat-tumur medjata minn IL-12-. Il-Mewt taċ-Ċelloli Jvarja. 2015, 22, 237–246. [CrossRef]

25. Ashour, D.; Arampatzi, P.; Pavlovic, V.; Förstner, KU; Kaisho, T.; Beilhack, A.; Erhard, F.; Lutz, MB IL-12 minn cDC1 endoġenu, u mhux DC vaċċin, huwa meħtieġ għall-induzzjoni Th1. JCI Insight. 2020, 5, e135143. [CrossRef]

26. Jorgovanovic, D.; Kanzunetta, M.; Wang, L.; Zhang, Y. Rwoli ta 'IFN- fil-progressjoni u r-rigressjoni tat-tumur: Reviżjoni. Bijomarka. Res. 2020, 8, 49. [CrossRef]

27. Iben, K.-j.; Choi, KR; Lee, SJ; Lee, H. Mewt taċ-ċelluli immunoġeniċi indotti minn ginsenoside Rg3: Sinifikat fl-immunoterapija kontra t-tumur ibbażata fuq iċ-ċelluli dendritiċi. Immune Netw. 2016, 16, 75–84. [CrossRef]

28. Jongbloed, SL; Kassianos, AJ; McDonald, KJ; Clark, GJ; Ju, X.; Anġlu, CE; Chen, C.-JJ; Dunbar, PR; Wadley, RB; Jeet, V.; et al. Ċelloli CD141+ tal-bniedem (BDCA-3)+ dendritic (DCs) jirrappreżentaw subsett DC majelojde uniku li jippreżenta antiġeni taċ-ċelluli nekrotiċi. J. Exp. Med. 2010, 207, 1247–1260. [CrossRef]

29. Noguchi, A.; Kaneko, T.; Kamigaki, T.; Fujimoto, K.; Ozawa, M.; Saito, M.; Ariyoshi, N.; Goto, S. L-immunoterapija bbażata fuq iċ-ċelluli V 9 δ T attivata bi S. Zoledronate hija fattibbli u tirrestawra l-indeboliment taċ-ċelluli δ T f'pazjenti b'tumuri solidi. Ċitoterapija 2011, 13, 92–97. [CrossRef]

30. Hewitt, RE; Lissina, A.; Aħdar, AE; Slay, ES; Prezz, DA; Sewell, AK Ir-rispons tal-fażi akuta tal-bisfosfonati: Produzzjoni rapida u abbundanti ta 'ċitokini proinfjammatorji minn ċelluli Gd T tad-demm periferali b'rispons għal amino bisphosphonates hija inibita minn statins. Clin. Exp. Immunol. 2005, 139, 101–111. [CrossRef]

31. Ġunju, CH; O'Connor, RS; Kawalekar, OU; Ghassemi, S.; Milone, immunoterapija taċ-ċelluli T MC CAR għall-kanċer tal-bniedem. Xjenza 2018, 359, 1361–1365. [CrossRef] [PubMed]

32. Sterner, RC; Sterner, terapija taċ-ċelluli RM CAR-T: Limitazzjonijiet kurrenti u strateġiji potenzjali. Blood Cancer J. 2021, 11, 69. [CrossRef] [PubMed]

33. Xie, G.; Dong, H.; Liang, Y.; Perżut, JD; Rizwan, R.; Chen, J. Ċelloli CAR-NK: Immunoterapija ċellulari promettenti għall-kanċer. EBioMedicine 2020, 59, 102975. [CrossRef] [PubMed]

34. Zhang, L.; Meng, Y.; Feng, X.; Han, Z. Ċelloli CAR-NK għall-immunoterapija tal-kanċer: Minn bank sal-komodina. Bijomarka. Res. 2022, 10, 12. [CrossRef] [PubMed]

35. Marofi, F.; Motavalli, R.; Safonov, VA; Thangavelu, L.; Yumashev, AV; Alexander, M.; Shomali, N.; Chartrand, MS; Pathak, Y.; Jarahian, M.; et al. Ċelloli CAR T f'tumuri solidi: Sfidi u opportunitajiet. Stem Cell Res. Ther. 2021, 12, 81. [CrossRef]

36. Santomasso, B.; Bachier, C.; Westin, J.; Rezvani, K.; Shpall, EJ In-naħa l-oħra tat-terapija taċ-ċelluli T CAR: Sindromu tar-rilaxx taċ-ċitokini, tossiċità newroloġika, u piż finanzjarju. Em. Soc. Clin. Oncol. Eduk. Ktieb 2019, 39, 433–444. [CrossRef]

37. Liu, S.; Galat, V.; Galat, Y.; Lee, YKA; Wainwright, D.; Wu, J. Immunoterapija tal-kanċer ibbażata fuq iċ-ċelluli NK: Mill-bijoloġija bażika għall-iżvilupp kliniku. J. Hematol. Oncol. 2021, 14, 7. [CrossRef]

38. Streltsova, M.; Ustiuzhanina, M.; Barsov, E.; Kust, S.; Velichinskii, R.; Kovalenko, E. Telomerase reverse transcriptase iżid il-proliferazzjoni u l-ħajja taċ-ċelloli NK umani mingħajr immortalizzazzjoni. Biomedicines 2021, 9, 662. [CrossRef]

39. Garris, CS; Arlauckas, SP; Kohler, RH; Trefny, MP; Garren, S.; Piot, C.; Engblom, C.; Pfirschke, C.; Siwicki, M.; Gungabeesoon, J.; et al. L-immunoterapija tal-kanċer kontra l-PD-1 b'suċċess teħtieġ crosstalk taċ-ċelluli T taċ-ċelluli dendritiċi li tinvolvi ċ-ċitokini IFN- u IL-12. Immunità 2018, 49, 1148–1161.e7. [CrossRef]

40. Thongchot, S.; Jirapongwattana, N.; Luangwattananun, P.; Chirapapphaiboon, W.; Chuangchot, N.; Sa-Nguanraksa, D.; O Charoenrat, P.; Thuwajit, P.; Yenchitsomanus, P.-T.; Thuwajit, C. Trasferiment adottiv ta 'ċelluli anti-nukleolin T flimkien ma' inibizzjoni PD-L1 kontra kanċer tas-sider triplu-negattiv. Mol. Kanċer Ther. 2022, 21, 727–739. [CrossRef]