Trażmissjoni tal-Virus tad-Deni Klassiku tal-Ħnieżer fi Qżieqeż Koabitanti Bi Statijiet Immuni varji Wara Vaċċin Ħaj Attenwat

Sommarju sempliċi:

Id-deni klassiku tal-ħnieżer huwa patoġenu perikoluż ħafna li jaffettwa l-ħnieżer domestiċi. It-tilqim bil-vaċċin ħaj modifikat huwa kritiku għall-prevenzjoni u l-kontroll tad-deni klassiku tal-ħnieżer. Madankollu, ħafna fatturi, bħall-antikorpi derivati ​​mill-omm permezz tal-kolostru, jistgħu jinterferixxu mal-effikaċja tal-vaċċin ħaj, li jwassal għal protezzjoni mhux kompluta fil-merħliet kummerċjali. F'dan l-istudju, investigajna t-trażmissjoni tal-virus tad-deni klassiku tal-ħnieżer fi qżieqeż sperimentali b'diversi status immuni wara t-tilqim. Qżieqeż mingħajr patoġenu speċifiku infettat bil-virus tad-deni klassiku tal-ħnieżer serva bħala d-donatur virali u l-invażur primarju u kien koabitat ma 'ħnienes b'antikorpi derivati ​​mill-omm li kellhom jew ma kinux għaddew minn tilqim. Skont ir-riżultati, il-biċċa l-kbira tal-ħnienes b'antikorpi derivati ​​mill-omm li ġew imlaqqma kienu protetti bis-sħiħ mit-trasmissjoni ta 'kuntatt mid-donatur virali u mblukkat it-trażmissjoni virali lill-parti terza (dawk il-qżieqeż esposti sekondarjament permezz tal-koabitazzjoni). L-immunità medjata minn ċelluli, rappreżentata minn ċelluli speċifiċi li jxerrdu l-interferon- -, serviet bħala ċ-ċavetta għat-tneħħija u l-irkupru virali. Għall-kuntrarju, il-ħnienes mhux imlaqqma b'livelli baxxi ta' antikorpi derivati ​​mill-omm kienu aċċelleraw l-infezzjoni tal-virus tad-deni klassiku tal-ħnieżer wara l-invażjoni virali. Bħala konklużjoni, it-tilqim għadu jinduċi immunità solida fil-merħliet kummerċjali taħt interferenza ta 'antikorpi derivati ​​mill-omm u jista' jimblokka t-trażmissjoni virali fil-merħliet.

sistema immunitarja li żżid il-pjanti cistanche

Astratt:

Id-deni klassiku tal-ħnieżer (CSF) huwa marda emorraġika sistemika li taffettwa l-ħnieżer domestiċi u l-ħnieżer selvaġġi. Il-vaċċin ħaj modifikat (MLV) jinduċi protezzjoni rapida u soda kontra l-infezzjoni tal-virus CSF (CSFV). Antikorpi derivati ​​mill-omm (MDAs) permezz tal-kolostru jistgħu jinterferixxu mal-effikaċja tal-MLV, li jwasslu għal protezzjoni mhux kompluta kontra l-infezzjoni CSFV fil-ħnieżer. Dan l-istudju investiga t-trasmissjoni tas-CSFV fost ħnienes sperimentali b'diversi status immuni post-MLV. Dsatax-il ħanżir, 18 b'MDAs u ħanżir 1 ħieles minn patoġenu speċifiku infettat b'CSFV li serva bħala d-donatur tas-CSFV, kienu koabitati ma' ħnienes li kienu jew ma kinux ġew amministrati l-MLV. Ħames sitta tal-ħnieżer b'MDAs li kienu ngħataw doża waħda ta' MLV kienu protetti bis-sħiħ mit-trażmissjoni ta' kuntatt mid-donatur ta' CSFV u ma ttrasmettx CSFV lill-ħnienes esposti sekondarjament permezz ta' koabitazzjoni. L-immunità medjata miċ-ċelluli, irrappreżentata miċ-ċelluli li jxerrdu l-interferon- -speċifiċi kontra l-CSFV, kienet essenzjali għat-tneħħija u l-irkupru virali. Wara koabitazzjoni ma' donatur ta' CSFV, il-ħnienes mhux imlaqqma b'livelli baxxi ta' MDA wrew infezzjoni CSFV u xerrdu CSFV lil ħnienes oħra permezz ta' kuntatt; dawk b'livelli għoljin ta' MDA rkupraw iżda aġixxew bħala trasportaturi bla sintomi. Bħala konklużjoni, l-MLV għadu jinduċi immunità solida f'merħliet kummerċjali taħt interferenza tal-MDA u jimblokka t-trażmissjoni ta' CSFV f'dawn il-merħliet.

Kliem ewlieni:

deni klassiku tal-ħnieżer; vaċċin ħaj modifikat; antikorp derivat mill-omm; trasmissjoni

1. Introduzzjoni

Id-deni klassiku tal-ħnieżer (CSF) huwa marda transkonfini, li tittieħed ħafna, emorraġika li taffettwa l-ħnieżer domestiċi u ċ-ċingjali u hija kkawżata mill-virus tad-deni klassiku tal-majjali (CSFV) [1,2]. Is-CSF hija marda notifikabbli mill-Organizzazzjoni Dinjija għas-Saħħa tal-Annimali (WOAH), u CSF għadha marda endemika fl-Asja, l-Amerika t'Isfel, l-Amerika Ċentrali u l-Karibew. Il-pajjiżi tal-Amerika ta’ Fuq, tal-Oċeanja u tal-Ewropa tal-Punent biss qerdu b’suċċess is-CSF [3–6].

CSFV huwa virus RNA ta 'strain wieħed enveloped tal-Pestivirusġeneru tal-familja Flaviviridae li jinkludi wkoll il-virus tad-dijarea virali bovina u l-virus tal-marda tal-fruntiera [1,2]. Il-ġenoma virali fih madwar 12.3 kb u jikkodifika 3898 aċidu amminiku ta 'poliproteina, li aktar tard jiġu pproċessati f'erba' strutturali (C, Erns, E1, u E2) u tmien mhux strutturali (Npro, p7, NS2, NS3, NS4A, NS4B, NS5A, u NS5B) proteini minn proteases virali u ċellulari [7]. Ibbażat fuq is-sekwenzi E2 jew NS5B, CSFV huwa kklassifikat fi tliet ġenotipi bi tlieta jew erba' sottotipi (1.1, 1.2, 1.3; 2.1, 2.2, 2.3; 3.1, 3.2, 3.3, 3.4) [8]. Skont il-virulenza tas-CSFV u l-fatturi tal-ħnieżer, inklużi l-età, ir-razza, il-kundizzjoni tas-saħħa u l-istatus immuni, il-ħnieżer infettati bis-CSFV jistgħu juru sinjali kliniċi akuti, subakuti jew kroniċi [9-11]. Ħnieżer infettati b'CSFV ta 'virulenza għolja jippreżentaw deni akut u leżjonijiet emorraġiċi severi u jeħilsu tagħbijiet virali għoljin fil-ħmieġ, il-bżieq u t-tnixxijiet tagħhom matul il-jiem qosra tagħhom ta' sopravivenza. B'kuntrast, ħnieżer infettati b'CSFV ta' virulenza moderata u ta' virulenza baxxa jippreżentaw sinjali kliniċi subakuti u kroniċi u leżjonijiet ħfief u jeħilsu livelli moderati-baxxi ta' CSFV fil-ħmieġ, il-bżieq u t-tnixxijiet tagħhom matul il-jiem relattivament itwal ta' sopravivenza tagħhom [12,13] ]. Fil-qasam, ħnieżer infettati primarjament jista 'jkollhom rwol prominenti fit-trasmissjoni sekondarja ta' CSFV lil ħnieżer oħra b'immunità varjabbli għal CSFV. It-trasmissibbiltà ta 'CSFV ta' virulenza moderata u ta 'virulenza għolja hija ogħla minn dik ta' CSFV ta 'virulenza baxxa [12,13].

It-tilqim huwa kruċjali għall-prevenzjoni u l-kontroll tas-CSF fil-pajjiżi endemiċi. Il-vaċċin ħaj modifikat (MLV) huwa vaċċin ta 'effikaċja għolja, sikur u affordabbli li huwa l-aktar użat fost il-merħliet kummerċjali. L-MLV jista 'malajr jinduċi immunità biex jipprovdi protezzjoni parzjali fi 3 ijiem wara t-tilqim, u protezzjoni sħiħa f'5 ijiem wara t-tilqim [14–16]. Madankollu, ħafna fatturi, inkluż l-istat tas-saħħa tal-ħnieżer ta 'kwalità tal-vaċċin, u l-livell ta' antikorpi derivati ​​mill-omm (MDAs), jistgħu jnaqqsu l-effikaċja tal-MLV, li jwasslu għall-protezzjoni mhux kompluta tal-ħnieżer imlaqqma [14-16]. F'merħliet endemiċi tas-CSF, iż-żmien tat-tilqim MLV jiddependi fuq il-livelli ta' MDA tal-ħnieżer; livelli għoljin ta 'MDAs jinterferixxu mal-effikaċja tal-MLV, u livelli baxxi ta' MDA jżidu r-riskju ta 'infezzjoni tal-qżieqeż [17,18]. Għalhekk, il-formulazzjonijiet ta' programmi ta' tilqim MLV fil-merħliet għandhom ikunu bbażati fuq tnaqqis fil-livelli ta' MDAs. Programm ta’ tilqim implimentat regolarment kontra l-CSF fit-Tajwan jinvolvi t-tilqim ta’ majjali nisa tqal biex jipprovdu MDAs permezz tal-kolostru tagħhom lit-trabi tat-twelid u mbagħad jamministraw l-ewwel doża ta’ MLV lill-qżieqeż fl-età ta’ 3-12-il ġimgħa. Skont is-sorveljanza fit-Tajwan, it-titri medji tal-antikorpi newtralizzanti (NAs) kontra l-CSFV tal-MDAs fil-ħnienes fil-ħin tal-ewwel tilqim MLV tagħhom huma ogħla minn 1:32 [19], li jistgħu jfixklu l-effikaċja tal-MLV u jirriżultaw f’diversi status immuni fil-merħliet. Dan l-istudju jiddeskrivi esperiment fuq l-annimali biex jeżamina l-kapaċità tal-MLV biex jipproteġi ħnieżer b'livelli varji ta' MDAs wara koabitazzjoni ma' qżieqeż infettat b'CSFV li aġixxa bħala donatur tas-CSFV (jiġifieri, l-'invażur primarju').

2. Materjali u Metodi

2.1. Ċelloli u Virus

Ċelloli tal-kliewi tal-ħnieżer tat-tip -1-ħnieżer ċirkovirus ħielsa-15 (PK-15) ġew ikkultivati ​​f'medja essenzjali minima (Thermo Fisher Scientific, Carlsbad, CA, USA) b'5% serum bovin tal-fetu (FBS) u inkubat f'37 ◦C f'5% CO2. Iċ-ċelloli PK-15 appoġġaw il-propagazzjoni tas-CSFV, inkluż ir-razza tal-vaċċin Lapinized Philippines Coronel (LPC) tal-ġenotip 1.1 u r-razza TD/96 tal-ġenotip 2.1. It-titri tal-virus tar-razez LPC u TD/96 kienu 107.71 u 105.87 doża infettiva tal-kultura tat-tessuti 50% (TCID50), rispettivament.

2.2. Disinn Sperimentali

Total ta' {{0}}qżieqeż ta' ġimgħa li jinkludi ħanżir 1 ħieles minn patoġeni speċifiċi (SPF) mingħajr NA anti-CSFV (Grupp 1) u 18-il ħnieżer b'saħħithom (Gruppi 2–5) mill-LPC imlaqqma majjali nisa ta 'merħla ħielsa mill-CSFV (Figura 1) intużaw fl-esperiment. It-18-il ħnieżer b'saħħithom ġew maqsuma b'mod każwali f'erba' gruppi (Gruppi 2-5); il-mezzi tat-titru NA anti-LPC (log2) fost il-Gruppi 2-5 kienu, rispettivament, 3.7 ± 2.2, 3.7 ± 2.3, 4.3 ± 2.2, u 4.3 ± 1.3 log2 darbiet u ma kinux differenti b'mod sinifikanti f'{53}} jiem wara l-esperiment (DPE). Il-qżieqeż SPF (Grupp 1) ġie mlaqqam ironikament bl-użu tar-razza 5 × 105 TCID50 TD/96 f'7 DPE u serva bħala l-invażur primarju jew donatur tas-CSFV meta kien jikkoabita f'Kamra 12 mal-Gruppi 2 u 3 (Figura 1). Biex jiġi ttestjat jekk l-MDAs naqqsux l-effikaċja tal-MLV, Grupp 2 (n=6) ġie mlaqqam b'doża waħda ta' vaċċin LPC (aktar minn 1 × 104 TCID50/doża) f'0 DPE. Biex tiġi ttestjata l-abbiltà tal-protezzjoni tal-MDA, Grupp 3 (il-kontroll għall-Grupp 2; n=3) ma ġiex imlaqqam bil-vaċċin LPC, u dawn il-qżieqeż għalhekk urew tħassir tal-MDA wara 7 ijiem wara l-ewwel kuntatt mal-invażur primarju. Grupp 1 (invażur primarju) koabita mal-Gruppi 2 u 3 għal 10 ijiem (minn 7 sa 17 DPE). Il-Grupp 2 imbagħad ġie trasferit għal Kamra 2 biex iservi bħala invażuri sekondarji permezz ta' koabitazzjoni mal-Grupp 4 (n=6) minn 17 sa 36 DPE. Grupp 3 ġie trasferit għal Kamra 4 biex jikkoabita mal-Grupp 5 (n=3). Gruppi 4 u 5 kienu għalhekk ħnienes bi 17-il jum ta 'tħassir MDA wara l-ewwel kuntatt ma' l-invażuri sekondarji. Il-Kumitat Istituzzjonali għall-Kura u l-Użu tal-Annimali tal-Istitut tar-Riċerka dwar is-Saħħa tal-Annimali approva dan l-esperiment tal-annimali (numru tal-approvazzjoni A09007).

Figura 1. Disinn sperimentali.

L-annimali ġew immonitorjati kuljum għal sinjali kliniċi, u kull parametru ġie skurjat minn 0 sa 3, li jirrappreżenta minn normali għal sever, skont il-metodu ta' Mittelholzer [19]. It-temperatura tar-rektum ġiet imkejla, u kampjuni tad-demm, tal-bżieq u tal-ħmieġ inġabru darbtejn fil-ġimgħa sa 35 DPE. Il-kampjuni ġew analizzati għal tagħbijiet CSFV u antikorpi anti-CSFV. Saret nekropsja f'18 DPE għall-Grupp 1, f'36 DPE għall-Gruppi 2 u 3, u f'39 DPE għall-Gruppi 4 u 5. Il-kampjuni ambjentali (jiġifieri, tampuni mill-ilqugħ, ħmieġ fuq l-art, il-ħawt tal-għalf, u l-funtana tax-xorb) ġew analizzati wkoll għal CSFV.

2.3. Reazzjoni kwantitattiva tal-katina tal-polimerażi f'ħin reali ta' traskrizzjoni inversa (QRRT-PCR) ta' CSFV

L-RNAs virali tal-kampjuni ġew estratti mill-QIAamp® Viral RNA Mini Kit (QIAGEN, Hilden, il-Ġermanja), u ġew skoperti permezz ta 'reazzjoni kwantitattiva tal-katina tal-polimerażi tat-traskrizzjoni inversa (QRRT-PCR) [20]. Il-QRRT-PCR intuża biex jinstabu d-diversi ġenotipi u jiġu analizzati kwantitattivament it-tagħbijiet CSFV tal-kampjuni.

benefiċċji cistanche għall-irġiel isaħħu s-sistema immuni

Ikklikkja hawn biex tara l-prodotti Cistanche Enhance Immunity

【Staqsi għal aktar】 Email:cindy.xue@wecistanche.com / Whats App: 0086 18599088692 / Wechat: 18599088692

2.4. NAs kontra l-CSFV

It-tisħin tas-sera tal-qżieqeż għal 56 ◦C komplement inattivat ippermetta l-iskoperta ta 'anti-LPC u TD/96 NAs. Fil-qosor, 2-darbiet kampjuni tas-serum dilwiti serjali, li jibdew minn 1:4, tħalltu ma 'volumi ugwali ta' 100 TCID50 tar-razza LPC jew TD/96. It-taħlitiet ġew inkubati f'37 ◦C għal siegħa u sussegwentement trasferiti għal ċelluli PK-15 fi pjanċi 96-bjar. Wara l-inkubazzjoni għal 3 ijiem, iċ-ċelloli ġew iffissati u mtebbgħin biex tinstab il-preżenza ta 'antiġen CSFV permezz ta' analiżi ta 'fluworexxenza indiretta. It-titer newtralizzanti tal-antikorp huwa l-log2 tal-fattur tat-trattib tal-antikorp (reċiproku tad-dilwizzjoni) meta 50% tal-bjar huma protetti mill-infezzjoni.

2.5. CSFV-Interferon Speċifiku (IFN)- -Ċelloli ta' Sekrezzjoni

Biex tiġi evalwata l-immunità medjata minn ċelluli anti-CSFV (CMI) tal-qżieqeż, sar test ta' rispons IFN speċifiku għal CSFV ex vivo taċ-ċelluli mononukleari tad-demm periferali (PBMCs). Il-PBMCs mid-demm antikoagulat bl-EDTA ġew soġġetti għal ċentrifugazzjoni f'400× g bl-użu ta' Histopaque-1077 (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA). Il-PBMCs ġew sospiżi f'medja RPMI 1640 (Thermo Fisher Scientific, Carlsbad, CA, USA) li kien fih 10% (vol/vol) FBS inattivat bis-sħana, 100 unità/mL peniċillina G, 100 µg/mL strep tomycin, u 0.25 µg/ mL amphotericin B. In-numru ta' PBMCs li jxerrdu IFN- -CSFV speċifiċi ġie skopert permezz ta' analiżi ELISPOT enżimatika ta' IFN-kulur wieħed tal-ħnieżer (CTL, Shaker Heights, OH, USA). Fi 96-pjanċi tal-bir, PBMCs f'5 × 106 ċelluli/mL f'100 µL kull bir b'antikorp tal-qbid tal-IFN tal-ħnieżer ġew allokati għall-grupp finta (imlaqqma b'medja RPMI 1640), il-grupp TD/96 (infettat b' 0.1 MOI), u l-grupp ConA (supplimentat b'5 µg/mL concanavalin A; Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA), li jservi bħala l-kontroll pożittiv. Stimuli duplex ġew impjegati kull darba. Wara 48 siegħa ta' stimulazzjoni, il-bjar ġew maħsula, l-antikorp misjub IFN- -nrabat, u s-sottostrat ġie miżrugħ. It-tikek f'kull bir ġew skrinjati u ttestjati bl-użu ta' CTL Analyzer.

2.6. Immunoistokimika

It-tessuti limfoid ġew eżaminati permezz ta 'assaġġ immunoistokimiku bl-użu tas-sistema ta' skoperta Super Sensitive Polymer HRP IHC (BioGenex, The Hague, The Netherlands) u l-antikorp monoklonali 1C7A1 kontra l-ġenotip 2.1 razez CSFV [21]. L-iżvilupp ta' kulur kannella jindika l-preżenza ta' CSFV.

2.7. Statistika

Intużaw analiżi tal-varjanza u t-test tal-firxa multipla ta' Duncan biex jiddeterminaw id-differenzi statistikament sinifikanti fost il-gruppi. L-analiżi tad-dejta saret bl-użu ta 'SAS (SAS Institute, Cary, NC, USA). Valur p ta' inqas minn 0.05 indika sinifikat statistiku.

3. Riżultati

3.1. Sinjali Kliniċi

Il-qżieqeż kollha kienu b'saħħithom qabel l-esperiment (Tabella 1). Il-qżieqeż tal-Grupp 1 kien id-donatur tas-CSFV (invażur primarju) u ġie mlaqqam bir-razza TD/96. Id-deni u s-sinjali kliniċi assoċjati ma 'CSFV fi Grupp 1 ġew skoperti fi 12 DPE u 13 DPE, rispettivament, b'punteġġi dejjem jiżdiedu minn 13-18 DPE li laħqu l-ogħla punteġġ ta' 20 fi 18 DPE. Għall-ħnienes fil-Gruppi 2 u 3 li koabitaw mad-donatur tas-CSFV, Grupp 2, li kien jikkonsisti mill-ħnienes b'MDAs li kienu ġew imlaqqma bil-vaċċin LPC, kienu b'saħħithom u ma wrew l-ebda deni jew xi sinjali kliniċi assoċjati ma' CSFV matul l-esperiment. . Madankollu, dawk fil-Grupp 3, li kienu jinkludu l-ħnieżer b'MDAs li ma kinux għaddew minn tilqim LPC, urew deni f'23 DPE (16-il jum wara l-ewwel kuntatt, DP1C), u n-numru ta 'ħnieżer bid-deni żdied minn 23-36 DPE. Id-deni kien korrelatat ma' sinjali kliniċi assoċjati ma' CSFV li dehru f'24 DPE (17 DP1C). Għalkemm qżieqeż wieħed (8138) ippreżenta sinjali kliniċi ħfief (punteġġi taħt 5), iż-żewġ qżieqeż l-oħra ddeterjoraw klinikament minn 24-36 DPE, bil-punteġġi tagħhom ivarjaw bejn 12 u 16. Qżieqeż 8136 tal-Grupp 3 miet f'29 DPE. Il-ħnienes tal-Grupp 4 li kienu f'kuntatt (koabitati) ma' dawk tal-Grupp 2 kienu wkoll b'saħħithom u ma kellhomx deni jew sinjali kliniċi assoċjati ma' CSFV matul il-perjodu sperimentali. Il-ħnienes tal-Grupp 5 li kienu f'kuntatt ma' dawk tal-Grupp 3 urew deni f'27 DPE (10 ijiem wara t-tieni kuntatt, DP2C) u sinjali kliniċi assoċjati ma' CSFV f'30 DPE (13 DP2C). In-numru ta' ħnienes bid-deni u l-punteġġi kliniċi fi Grupp 5 żdiedu maż-żmien; il-punteġġ f'39 DPE kien 21 ± 1.4, li jvarja bejn 19 u 22.

Tabella 1. Perċentwal ta 'ħnienes bid-deni f'kull grupp matul il-perjodu sperimentali.

Skont il-parametri kliniċi, il-preżenza ta 'MDAs biss (Grupp 3) ma setgħetx tipproteġi l-qżieqeż minn trasmissjoni ta' kuntatt indotta mill-invażur primarju (Grupp 1). Doża waħda tal-vaċċin LPC flimkien ma 'MDAs (Grupp 2; jiġifieri, il-prattika applikata b'mod wiesa') offriet protezzjoni minn trażmissjoni ta 'kuntatt indotta mill-invażur primarju (Grupp 1; Tabella 1). Il-prattika tat-tilqim applikata b'mod wiesa 'bbenefikat ukoll għall-ħnienes invaditi sekondarjament (jiġifieri, Grupp 4, li kellhom biss MDAs iżda kienu ħielsa mid-deni u sinjali kliniċi). Klinikament, is-sitwazzjoni fil-Grupp 5 (il-qżieqeż bi trasmissjoni ta 'kuntatt indotta mill-invażuri sekondarji) rikapitulat is-sitwazzjoni fil-Grupp 3 (trasmissjoni ta' kuntatt indotta mill-invażur primarju).

3.2. CSFV Viremia

Ir-razza CSFV TD/96 ma ġietx skoperta fid-demm ta 'xi wieħed mill-ħnienes qabel l-esperiment (Figuri 2A u 3A). Wara t-tilqim TD/96, viremja TD/96 fil-qżieqeż tal-Grupp 1 kienet l-ewwel skoperta f'10 DPE (3 ijiem wara l-inokulazzjoni, POI) u kontinwament misjuba sa 17 DPE. It-tagħbijiet tas-CSFV żdiedu minn 101.2 TCID50/mL f'10 DPE għal 106.4 TCID50/mL f'17 DPE. Fil-Grupp 2, li jinkludi l-qżieqeż b'tilqim LPC li kienu koabitaw mal-invażur primarju, TD/96 viremija ġiet skoperta f'qżieqeż wieħed biss (8134) minn 21-35 DPE. It-tagħbijiet ta' CSFV fid-demm ta' Piglet 8134 laħqu l-ogħla livell (104.9 TCID50/mL) f'24 DPE u sussegwentement naqsu għal 101.7 TCID50/mL f'35 DPE. Fil-Grupp 3, li jinkludi l-ħnienes mingħajr tilqim LPC li kienu koabitaw mal-invażur primarju, TD/96 viremja ġiet skoperta l-ewwel darba f'66.7% (2/3) tal-qżieqeż f'21 DPE (14 DP1C), u kollha kienu pożittivi b'24. DPE. Madankollu, Piglet 8138 kien negattiv għal viremja TD/96 minn 28-35 DPI (Figura 2A). Fil-Grupp 4, li jikkonsisti mill-ħnienes li koabitaw mal-Grupp 2 f'Kamra 2, viremija TD/96 ma nstabitx matul il-perjodu sperimentali. Il-ħnienes kollha tal-Grupp 5, li kienu jinkludu l-ħnienes li kienu f'kuntatt mal-Grupp 3, kienu pożittivi għal viremja TD/96 minn 31-35 DPE. It-tagħbijiet tas-CSFV varjaw bejn 105.1 u 106.7 TCID50/mL f'35 DPE (Figura 3A). Fil-Gruppi 2 u 3, il-preżenza ta 'MDAs ittardjat l-ewwel skoperta ta' viremja sa 10 DP1C (jiġifieri, il-qżieqeż baqgħu mingħajr sintomi sa 17 DPE; Tabella 1) bl-invażur primarju, meta mqabbel ma 'jum 3 POI fi Grupp 1 fil-grupp akut. fażi. Id-doża waħda addizzjonali tal-vaċċin LPC (Grupp 2) naqqset il-perċentwal ta 'ħnieżer viremiċi bi 83% (Figura 2A). Bl-istess mod, id-doża waħda addizzjonali tal-vaċċin LPC naqqset it-tagħbijiet virali fid-demm minn 28-35 DPE (Figura 3A). It-tilqim LPC tal-Grupp 2 ibbenefika wkoll lill-ħnieżer tal-Grupp 4 li sussegwentement koabitaw magħhom (invaduti sekondarjament), minkejja li wieħed mill-qżieqeż tal-Grupp 2 kellu viremja temporanja (Figura 2A) u bżieq (Figura 2B) u tixrid tal-ħmieġ (Figura 2C) ta 'TD. /96. Din il-bidla fl-istatus viremic ikkorrelata ma' dak iddeterminat fuq il-bażi tal-parametri kliniċi (Taqsima 3.2), għalkemm l-iskoperta fil-laboratorju kienet aktar sensittiva.

Figura 2. Numru (perċentwal) ta’ ħnieżer pożittivi għal TD/96 kif misjuba permezz tal-QRRT-PCR [20] tad-demm (A), (B) bżieq, u (C) ħmieġ tal-ħnieżer f’kull wieħed. grupp matul il-perjodu sperimentali. Il-qżieqeż tal-Grupp 1 ġie mlaqqam ironikament b'TD/96 f'7 DPE u serva bħala d-donatur tas-CSFV (jiġifieri, invażur primarju) għall-Gruppi 2 u 3. Il-ħnienes fil-Grupp 2 li għaddew minn tilqim LPC f'0 DPE u dawk fil-Grupp 3 li ma għaddax minn tilqim LPC koabitat mal-qżieqeż tal-Grupp 1 minn 7-17 DPE. Il-qżieqeż fil-Gruppi 4 u 5 koabitaw ma 'dawk fil-Gruppi 2 u 3 (jiġifieri, invażuri sekondarji), rispettivament, minn 17-36 DPE.

Figura 3. Tagħbijiet CSFV huma preżenti fid-demm (A), (B) bżieq, u (C) ħmieġ tal-ħnienes f'kull grupp.

3.3. Tqassim tas-CSFV fil-bżieq

Ir-razza CSFV TD/96 ma ġietx skoperta fil-bżieq ta 'xi wieħed mill-ħnienes qabel l-esperiment (Figuri 2B u 3B). Il-bżieq tal-qżieqeż tal-Grupp 1 kien l-ewwel pożittiv għal TD/96 f'14 DPE (7 DP1C), li kompla sa 17 DPE. It-tagħbijiet tas-CSFV żdiedu minn 105.8 TCID50/mL f'14 DPE għal 107.6 TCID50/mL f'17 DPE. Notevolment, fil-qżieqeż tal-Grupp 2 li kienu ġew imlaqqma bl-LPC u li kienu koabitaw mad-donatur tas-CSFV, TD/96 ġie misjub għall-ewwel darba f'66.7% (4/6) tal-kampjuni tal-bżieq f'14 DPE (7 DP1C), li saru negattivi. minn dakinhar. Aktar tard, qżieqeż ieħor (1/6, Piglet 8134 b'TD/96 viremja; Figura 2A), tefa' TD/96 fil-bżieq tiegħu minn 21-24 DPE f'101.2 u 102.7 TCID50/mL, livell aktar baxx minn dawk tal-qżieqeż imsemmija hawn fuq. . Fil-Grupp 3 mal-ħnienes bl-MDAs biss u mingħajr tilqim LPC li kienu koabitaw mad-donatur tas-CSFV, TD/96 inizjalment instab f'66.7% (2/3) tal-kampjuni tal-bżieq f'21 DPE, u l-kampjuni kollha tal-bżieq kienu pożittivi minn 24 DPE. Fil-Grupp 4 li jinkludi l-qżieqeż li koabitaw ma’ dawk fil-Grupp 2, TD/96 ma nstabx fil-kampjuni tal-bżieq matul l-esperiment, filwaqt li fil-Grupp 5, li jinkludi l-ħnienes li koabitaw ma’ dawk fil-Grupp 3, il-kampjuni kollha tal-bżieq kienu pożittivi għal TD/96 minn 24–35 DPE. It-tagħbijiet tas-CSFV żdiedu maż-żmien u varjaw minn 105.9 sa 107.3 TCID50/mL b'35 DPE. Total ta' erba' sitti tal-ħnienes fil-Grupp 2 (b'tilqim LPC b'doża waħda) kellhom bżieq TD/96-pożittiv f'14 DPE qabel viremija. Is-CSFV ġie skopert aktar kmieni fil-ħnienes tal-Grupp 2 li kienu f'kuntatt mal-qżieqeż tal-Grupp 1 matul it-twaqqigħ TD/96 tiegħu. Qżieqeż wieħed (Qżieqeż 8134) fi Grupp 2 aktar tard wera twaqqigħ temporanju minn 21-24 DPE, li huwa aktar probabbli rappreżentattiv tar-replikazzjoni tas-CSFV fil-glandoli tal-bżieq wara viremija. Skont it-tqabbil bejn il-Gruppi 2 u 3, it-tilqim LPC naqas it-tixrid tas-CSFV.

3.4. CSFV Tfaqqigħ fil-Ħmieġ

Ir-razza CSFV TD/96 ma ġietx skoperta fil-ħmieġ ta 'xi wieħed mill-ħnienes qabel l-esperiment (Figuri 2C u 3C). Il-ħmieġ tal-qżieqeż tal-Grupp 1 kienu TD/96 pożittivi l-ewwel f'14 DPE (7 DPIC), li kompla sa 17 DPE. It-tagħbijiet tas-CSFV żdiedu minn 105.1 TCID50/g f'14 DPE għal 108.8 TCID50/mL f'17 DPE. Fil-Grupp 2, li jinkludi l-qżieqeż b'tilqim LPC li koabitaw mad-donatur ta' CSFV tal-Grupp 1, Piglet 8134 biss kien imxerred b'mod temporanju f'24 DPE (17 DPIC), filwaqt li l-ħnienes l-oħra kollha fi Grupp 2 kienu negattivi. Fil-Grupp 3, li jinkludi l-ħnienes mingħajr tilqim LPC li koabitaw mad-donatur tas-CSFV, żewġ terzi tal-ħnienes (kollha ħlief Piglet 8138) kienu pożittivi bejn 21 (14 DP1C) u 35 DPE, li matulu t-tagħbijiet tas-CSFV żdiedu minn 105.1. TCID50/g f'21 DPE sa 107.5 TCID50/mL f'31 DPE. Madankollu, il-kampjuni tal-ħmieġ ta' Piglet 8138 b'viremja temporanja TD/96 ma kinux pożittivi għal TD/96. Fil-Grupp 4, li jikkonsisti mill-ħnienes li koabitaw ma' dawk fil-Grupp 2, il-kampjuni tal-ħmieġ kollha kienu negattivi għal TD/96 matul il-perjodu sperimentali. Fil-Grupp 5, li kien jinkludi l-qżieqeż li koabitaw mal-Grupp 3, in-numru ta' kampjuni tal-ħmieġ TD/96-pożittivi żdied maż-żmien minn 24–35 DPE, u t-tagħbijiet varjaw minn 105.7 sa 107.2 TCID50/g f'35 DPE . Fil-Grupp 5, l-ewwel skoperta seħħet f'24 DPE (7 DP2C), li kienet simili għal dik fil-Grupp 1 (14 DPE), u l-profil ġenerali kien parallel dak tal-viremja (Figura 2A), li jissuġġerixxi li CSFV irreplikat lokalment wara viremja. . Kif iddettaljat fit-Taqsimiet 3.3 u 3.4, il-ħmieġ u l-bżieq kienu l-vetturi primarji tat-trasmissjoni tal-kuntatt CSFV.

cistanche tubulosa-titjib tas-sistema immuni

3.5. CSFV Tagħbijiet f'Tessuti Miksuba permezz ta' Necropsy

Tessuti tal-qżieqeż donatur tal-Grupp 1 CSFV u tal-qżieqeż fil-Gruppi 3 u 5 li koabita magħhom kienu TD/96 pożittivi (Tabella 2). It-tagħbijiet TD/96 fit-tessuti tal-qżieqeż tal-Grupp 1 varjaw bejn 103.76 u 109.37 TCID50/g. Fil-Grupp 5, li jinkludi l-ħnienes li kienu f'kuntatt ma' dawk fil-Grupp 3, TD/96 ġie skopert fil-qżieqeż kollha u mqassam fit-tessuti kollha, b'tagħbijiet ogħla fl-organi ematolimfoid (tunsilli, lymph nodes, u milsa) u dawk l-organi. bi provvista tad-demm aktar abbundanti (fwied, pulmuni, qalb, u kliewi), kif ippreżentat fil-Figura 2A, C. L-ogħla tagħbijiet TD/96 kienu fit-tessuti limfoid (aktar minn 109.0 TCID50/g). B'kuntrast, it-tessuti mhux hematolymphoid mill-ħnienes koabitati tal-Gruppi 2 u 4, ħlief għall-Qżieqeż 8134 tal-Grupp 2, li kellhom viremija TD/96 temporanja, kienu TD/96 ta' livell baxx pożittiv biss fid-demm, fit-tunsilli, lymph nodes ingwinali. , u lymph nodes submaxillary, b'dawn il-livelli jvarjaw bejn 101.65 u 103.78 TCID50/g. Fil-Grupp 3, li jinkludi l-ħnienes mingħajr tilqim LPC li kienu f'kuntatt mad-donatur ta' CSFV tal-Grupp 1, TD/96 instab fit-tessuti kollha ta' tnejn mit-tliet qżieqeż (ħlief għal Piglet 8138). Qżieqeż 8138 tal-Grupp 3, li kellu viremja TD/96 temporanja, kellu TD/96 fit-tunsilli, lymph nodes submaxillary, u lymph nodes tal-bronki, għalkemm it-tagħbijiet virali kienu inqas mill-medja, li jvarjaw bejn 103.08 u 104.69 TCID50/mL.

Tabella 2. Tagħbijiet ta' CSFV misjuba f'diversi tessuti tal-ħnienes permezz ta' CSFV QRRT-PCR

3.6. CSFV fl-Ambjent Sperimentali

L-ilqugħ, il-ħmieġ fuq l-art, il-ħawt tal-għalf u l-funtana tax-xorb ta 'kull kamra sperimentali ġew ittestjati għal TD/96 permezz tal-QRRT-PCR (Tabella 3). TD/96 ġie skopert f'14 u 17 DPE fl-ippurgar fl-art tal-Kamra 12, fejn id-donatur tal-Grupp 1 CSFV kien jikkoabita mal-ħnienes fil-Gruppi 2 u 3. L-ilqugħ, il-ħawt tal-għalf u l-funtana tax-xorb kollha rriżultaw negattivi. Il-kampjuni minn Kamra 2 li fiha l-Gruppi 2 u 4 koabitaw kienu kollha negattivi minn 21-35 DPE. TD/96 ġie misjub għall-ewwel darba fl-ippurgar fl-art tal-Kamra 4 (Gruppi 3 u 5) f'24 DPE. Sussegwentement, TD/96 instab fuq iċ-ċint, il-ħawt tal-għalf u l-funtana tax-xorb tal-Kamra 4 minn 28–35 DPE. Dawn ir-riżultati jindikaw li l-ħmieġ (li jista 'jkun potenzjalment preżenti fit-tipi kollha ta' kampjuni ambjentali) u l-bżieq (li x'aktarx ikun preżenti fil-kampjuni tal-ħawt tal-għalf u tal-funtana tax-xorb) kienu l-vetturi primarji għat-trasmissjoni tal-kuntatt. It-twaqqigħ virali temporanju tal-ħnienes tal-Grupp 2 (Figuri 2 u 3) ma ġiex introdott fil-Kamra 2, fejn koabitaw mal-qżieqeż fi Grupp 4.

Tabella 3. Tagħbijiet CSFV ta 'kampjuni ambjentali mill-kmamar sperimentali.

3.7. PBMCs ta' Secreting IFN- -Speċifiku għal CSFV

Ċelloli ta' sekrezzjoni ta' IFN- -speċifiċi għas-CSFV ġew eżaminati fil-PBMCs tal-ħnienes fil-Gruppi 2 sa 5 bejn 7 u 35 DPE (Figura 4). Fil-qżieqeż tal-Grupp 2, in-numri ta' ċelluli li sekretaw IFN- -, għalkemm bi frekwenza ta' inqas minn 0.1% tal-PBMCs, kienu ogħla b'mod sinifikanti minn dawk tal-Gruppi 3, 4, u 5 bejn 7 u 35 DPE. In-numri ta' ċelluli li sekretaw IFN- -fil-Qżieqeż 8134 tal-Grupp 2, li kellhom viremija temporanja TD/96 fi żmien simili (Figura 2A), ikkorrelataw man-numri sinifikament aktar baxxi ta' 56 (21 DPE) u 62 (28). DPE; medja tal-grupp Akbar minn jew ugwali għal 116); madankollu, dawn in-numri laħqu l-medja tal-grupp b'35 DPE. In-numru ta' ċelluli li jissekretaw IFN- -CSFV speċifiċi fil-Gruppi 3, 4, u 5 ma kinux differenti b'mod sinifikanti.

Figura 4. Ċelloli ta' sekrezzjoni ta' IFN- -speċifiċi għas-CSFV ġew eżaminati fil-PBMCs tal-qżieqeż fi Gruppi 2 sa 5 bejn 7 u 35 DPE. Il-ħnienes fi Grupp 2 b'tilqim LPC f'0 DPE u dawk fi Grupp 3 mingħajr tilqim LPC koabitaw mal-qżieqeż donatur tal-Grupp 1 CSFV minn 7 sa 17 DPE. Il-ħnienes fil-Gruppi 4 u 5 koabitaw ma' dawk fil-Gruppi 2 u 3, rispettivament, minn 17 sa 35 DPE. Valuri b'ittri superscript differenti, a u b, jindikaw differenza statistikament sinifikanti (p < 0.05) minn xulxin. Ma jeżistux differenzi sinifikanti bejn il-valuri li fihom l-istess ittra

3.8. NAs kontra l-CSFV

L-NAs anti-CSFV fis-sera tal-qżieqeż ġew iġġenerati bi tweġiba jew għar-razza LPC (Figura 5A) jew ir-razza TD/96 (Figura 5B). NAs anti-CSFV ma ġewx skoperti fid-donatur ta' CSFV tal-Grupp 1 bejn 7 u 17 DPE. Is-serum tal-qżieqeż fi Gruppi 2 sa 5 f'{{10}} DPE urew titri li jvarjaw bejn 5 u 7 log2 (bejn 32- u 128-darbiet). Wara li l-ħnienes tal-Grupp 2 tlaqqmu bil-vaċċin LPC u kkoabitaw mad-donatur tas-CSFV, it-titer medju ma naqasx bejn 0 u 28 DPE. Minħabba ż-żieda fl-NAs anti-LPC f'Piglet 8134 minn 31-35 DPE, it-titer medju tal-Grupp 2 żdied b'mod sinifikanti. Fil-ħnienes tal-Grupp 3 mingħajr tilqim LPC li koabitaw mad-donatur tas-CSFV, it-titer medju naqas gradwalment bejn 0 u 28 DPE. Hekk kif it-titer tal-Piglet 8138 żdied gradwalment bejn 21 u 35 DPE, it-titer medju tal-Grupp 3 bil-maqlub żdied bejn 31 u 35 DPE. It-titli medji tal-Gruppi 4 u 5 naqsu maż-żmien. B'mod ġenerali, il-profil NA anti-TD/96 ta 'kull grupp kien parallel dak tal-profili NA anti-LPC, għalkemm il-medja NA anti-TD/96 kienet bejn 1.3 u 3.7 log2 (bejn wieħed u ieħor 2–12-darbiet; Figura 5B), li kienet inqas mill-medja NA anti-LPC.

Figura 5. L-NAs anti-LPC (A) jew TD/96 (B) fis-serum tal-qżieqeż f'kull grupp matul il-perjodu sperimentali. Il-qżieqeż tal-Grupp 1 ġie mlaqqam ironikament b'TD/96 f'7 DPE u serva bħala d-donatur tas-CSFV (jiġifieri, invażur primarju), sussegwentement koabita mal-ħnienes tal-Gruppi 2 u 3 minn 7 sa 17 DPE. Il-ħnieżer tal-Grupp 2 kienu mlaqqma bl-LPC f'0 DPE, u l-ħnienes tal-Grupp 3 ma ġewx imlaqqma bl-LPC. Il-ħnienes fil-Gruppi 4 u 5 koabitaw ma' dawk fil-Gruppi 2 u 3, rispettivament, minn 17 sa 35 DPE.

Il-half-life stmata tal-MDAs derivati ​​mit-titri tal-antikorpi tal-qżieqeż tal-Grupp 4 trasferiti permezz tal-kolostru tal-majjali nisa mlaqqma bl-LPC kienet ta '10.7 ijiem (Figura 5A). Din l-istima hija sostnuta mid-deni negattiv u sinjali kliniċi (Tabella 1), viremja negattiva, bżieq, u tagħbijiet virali fekali (Figuri 2 u 3), u t-tessuti (Tabella 2; ara Taqsima 3.9) u kampjuni ambjentali (Tabella 3). ) tal-ħnienes tal-Grupp 4, li indikaw li ma kinux ġew infettati bil-virus TD/96 matul il-perjodu sperimentali.

3.9. Immunoistokimika Tiskopri Sinjali ta' l-Antiġen CSFV f'Kampjuni ta' Tessuti tan-Necropsy

Is-sinjali ta 'CSFV TD/96 ġew skoperti fit-tessuti limfoid tad-donatur tal-Grupp 1 CSFV (Figura 6I), ta' qżieqeż wieħed fi Grupp 2 (Piglet 8134, li kellu tagħbijiet ta 'CSFV fid-demm li kienu fl-ogħla livell ta' 104.9 TCID50). /mL f'24 DPE u li sussegwentement naqas għal 101.7 TCID50/mL f'35 DPE), ta 'tliet ħnienes fi Grupp 3, u ta' tliet ħnienes fi Grupp 5. Il-qżieqeż tal-Grupp 4 ma kinux pożittivi għal TD/96 (Figura 6J). Is-sinjali qawwija CSFV TD/96 tqassmu b'mod wiesa' fit-tunsilli, il-milsa, u l-lymph nodes tal-ħnienes fil-Gruppi 1, 3 (ħlief għal Piglet 8138), u 5. Għal Piglet 8134 (Grupp 2) b'viremja temporanja TD/96 , sinjali TD/96-pożittivi mxerrdin kienu jinsabu l-aktar fir-reġjuni parenkimali tat-tunsilli, medulla tal-lymph nodes inguinali, u submaxillary lymph nodes (Figura 6A–D), li hija konsistenti mar-riżultati tat-tagħbija virali kwantifikazzjoni ta’ dawn it-tessuti (Tabella 2). Il-morfoloġija u d-distribuzzjoni taċ-ċelloli TD/96-pożittivi kienu makrofaġiċi ħafna. F'Piglet 8138 (Grupp 3) b'viremja temporanja TD/96, in-numru u d-distribuzzjoni tas-sinjali TD/96-pożittivi (Figura 6E–H) kienu simili għal dawk f'Piglet 8134.

Figura 6. L-antiġeni CSFV fit-tessuti limfoid kienu mmarkati mill-antikorp monoklonali 1C7A1. Nodu limfatiku (A, B) u tunsilli (C, D) tal-Qżieqeż 8134 (Grupp 2), li kellhom viremija temporanja TD/96, jippreżentaw is-sinjal pożittiv kannella TD/96-. Nodu limfatiku (E, F) u tunsilli (G, H) tal-Qżieqeż 8138 (Grupp 3), li kellhom viremija temporanja TD/96, jippreżentaw is-sinjal TD/96-pożittiv kannella. Nodu limfatiku (I) ta' Piglet 8150 (Grupp 1) jippreżenta sinjal TD/96-pożittiv kannella diffuż fil-parakortex. Nodu limfatiku (J) ta' Piglet 8146 (Grupp 4) kien negattiv għal TD/96

F'Piglet 8134 (Grupp 2) u Piglet 8138 (Grupp 3), it-tnejn b'viremja temporanja ta' livell baxx (Figuri 2A u 3A; Tabella 2), l-antiġeni CSFV kienu għadhom jinstabu fil-makrofaġi tat-tessuti tat-tunsilli (Figura 6A-H) , li għal darb'oħra wera li t-tunsilli huma tessut ideali għad-dijanjosi tas-CSFV.

4. Diskussjoni

It-tilqim huwa kruċjali għall-prevenzjoni u l-kontroll tas-CSF f’żoni endemiċi tas-CSF. Prattika applikata b'mod wiesa 'hija li jiġu pprovduti trabi tat-twelid b'MDAs permezz tal-kolostru tal-majjali nisa mlaqqma u mbagħad li tingħata doża waħda ta' MLV (bħal LPC) meta l-ħnienes ikollhom 3 sa 6 ġimgħat; din il-proċedura ġiet impjegata għall-Grupp 2 fl-istudju preżenti (Figura 1). Ħafna fatturi, inklużi l-kwalità tal-vaċċin, il-proċeduri tal-programm tat-tilqim (eż., skedi, tipi u rotot), u l-livelli tal-MDA tal-ħnieżer u l-istatus tas-saħħa (inkluża varjazzjoni individwali), jistgħu jinfluwenzaw l-effikaċja tat-tilqim CSFV, u jnaqqsu l-protezzjoni kontra l-infezzjoni [14– 16]. Fl-istudju preżenti, għalkemm il-qżieqeż fil-Gruppi 2 u 3 kellhom livelli għoljin ta' MDA f'1:32–128- darbiet f'7 DPE (Figura 5A; jiġifieri, 0 DP1C mad-donatur tal-Grupp 1 CSFV; Figura 1), l-MDAs dewmu l-progress tal-infezzjoni, kif indikat mid-dehra tard tal-viremja f'10 DP1C (Gruppi 2 u 3; Figura 2A). Dan wassal biex il-qżieqeż ikunu asintomatiċi (Tabella 1), għalkemm xi wħud mill-qżieqeż għadhom xerrdu l-virus fil-bżieq u l-ħmieġ tagħhom (Figura 2B, C). Dawn it-tixrid virali okkażjonali fi Grupp 2 irrappreżentaw varjazzjonijiet individwali fl-istatus tas-saħħa tal-grupp jew risponsi immuni analizzati f'dan l-istudju. L-MDAs waħedhom jistgħu joffru biss protezzjoni parzjali qabel ma sseħħ replikazzjoni virali fid-demm u fit-tessut. Il-livell anti-CSFV TD/96 NA ma kienx ikkonvertit b'mod pożittiv wara t-tilqim LPC (Figura 5B), anke wara li l-qżieqeż koabitaw mal-invażur primarju tal-Grupp 1. Dan x'aktarx seħħ minħabba li l-livell tal-MDA tabilħaqq interferiet mal-effikaċja tal-MLV u minħabba n-natura immunosoppressiva tas-CSFV TD/96 li jinvadi.

cistanche tubulosa-titjib tas-sistema immuni

It-titri tan-NAs u CMI anti-CSFV rappreżentati min-numru ta 'ċelluli li jxerrdu IFN- -speċifiċi għal CSFV huma relatati mill-qrib mal-protezzjoni tal-ħnieżer kontra l-infezzjoni CSFV [17,22-24]. Qżieqeż 8134 (Grupp 2), b'livelli baxxi ta' anti-CSFV NA u numri baxxi ta' ċelluli li jxerrdu IFN- -speċifiċi għal CSFV wara t-tilqim ta' MLV (Figuri 4 u 5), wera viremja temporanja ta' CSFV u tixrid wara kuntatt mas-CSFV donatur (Figuri 2 u 3). B'kuntrast, il-ħnienes l-oħra fil-Grupp 2, b'NAs anti-CSFV baxxi iżda ċelluli li jxerrdu IFN- -speċifiċi għal CSFV relattivament għoljin wara t-tilqim ta' MLV, ma kinux infettati b'CSFV, anke wara li koabitaw mad-donatur tas-CSFV għal 10 ijiem. . Barra minn hekk, għalkemm Piglet 8138 (Grupp 3) kellu titru NA anti-LPC għoli (aktar minn 128-darbiet) mingħajr tilqim MLV u b'ċelluli minimi ta' sekrezzjoni ta' IFN- -specifici għal CSFV, wera wkoll CSFV temporanju viremja wara li koabita mad-donatur TD/96 iżda kien ħieles minn CSFV sa tmiem il-perjodu sperimentali. Il-qżieqeż l-oħra fil-Grupp 3, b'livelli baxxi ta' anti-LPC NA (inqas minn 64-darbiet) u mingħajr tilqim MLV, ippreżentaw sinjali kliniċi severi assoċjati ma' CSFV, leżjonijiet, u tagħbijiet għolja ta' tessuti CSFV, li rriżultaw f'mewt. Tqabbil tar-riżultati tal-Gruppi 2 u 3, li kellhom titri u profili anti-CSFV simili (Figura 5), ​​jindika li CMI huwa l-fattur ewlieni fit-tneħħija u l-irkupru virali. Il-ħnienes tal-Grupp 2 kellhom aktar CMI (Figura 4), li hija konsistenti mal-punteġġi kliniċi ħielsa (Tabella 1) u l-parametri kollha ttestjati (Figura 2, Figura 3, u Figura 6).

Notevolment, fil-Grupp 2 u l-gruppi l-oħra, il-livelli tas-CMI ma żdiedux b'mod notevoli (u biss bi frekwenza inqas minn 0.1% tal-PBMCs) matul il-perjodu sperimentali (Figura 4), minkejja l-qżieqeż. espożizzjoni kostanti għat-tixrid virali tad-donatur tal-Grupp 1 CSFV u l-ħnienes tal-Grupp 3 minn 7-17 DPE (Figuri 2 u 3). Il-frekwenzi baxxi taċ-ċelluli li jxerrdu IFN- -x'aktarx jirriflettu dan li ġej: (1) in-natura immunosoppressiva ta' CSFV, (2) interferenza tal-MDA, u (3) il-limitazzjoni teknika tal-assaġġ li wettaqna. Għalhekk, id-determinazzjoni ta' tieqa xierqa li fiha l-livell ta' MDA huwa baxx biżżejjed biex tiġi evitata interferenza u madankollu għoli biżżejjed biex jipprovdi protezzjoni inizjali u jtejjeb is-CMI anti-CSFV huwa essenzjali għat-titjib tal-immunità tal-merħliet.

Għall-ħnienes tal-Grupp 2 ittrattati bil-proċedura ta 'tilqim applikata b'mod wiesa', it-twaqqigħ okkażjonali ta 'CSFV fil-bżieq u l-ħmieġ seħħ għal perjodu qasir (Figura 2) f'tagħbijiet baxxi ta' CSFV (Figura 3); għalhekk, il-ħnienes fil-Grupp 4 (bl-MDAs biss) imblukkaw it-trażmissjoni tas-CSFV lill-Grupp 4, kif indikat mir-riżultati negattivi għall-CSFV tal-kampjuni ambjentali miġbura minn Kamra 2 (Tabella 3), in-nuqqas ta’ deni u sinjali kliniċi (Tabella 1). ), u n-nuqqas ta 'bżieq u t-tixrid tal-ħmieġ u viremja (Figuri 2 u 3) waqt il-koabitazzjoni. Madankollu, it-trasportaturi asintomatiċi tas-CSFV fil-Grupp 2 setgħu kienu responsabbiltà li ma tistax tiġi osservata fil-qasam.

Ir-rispons immuni jista' jiġi indott malajr u b'mod stabbli fi qżieqeż SPF imlaqqma bl-MLV. Ir-risponsi immuni ċellulari u umorali tal-ħnienes imlaqqma bl-MLV huma żvelati fi żmien 5 u 12-il jum wara t-tilqim, rispettivament, l-aktar kmieni [14-16,22]. Meta l-MLV jintuża f'merħliet kummerċjali, l-MDAs inaqqsu l-effikaċja tal-MLV. Fl-istudju preżenti, is-CMI tal-ħnieżer tal-Grupp 2 b'livelli sostanzjali ta' MDA żdiedet malajr f'0 DP1C (7 DPE; Figura 4; jiġifieri, ħafna aktar malajr milli fil-ħnieżer SPF mingħajr MDAs), għalkemm la l-antikorp u lanqas CMI. il-profili nbidlu b'mod drammatiku (Figuri 4 u 5). Żieda mgħaġġla bħal din f'7 DPE (Figura 4) wara t-tilqim LPC tissuġġerixxi li l-kolostru jista 'jipprovdi komponenti immunoloġiċi oħra, minbarra l-MDAs, li jinduċu rispons simili anamnestiku.

L-NA anti-CSFV huma komunement użati biex jevalwaw l-effikaċja tal-vaċċin u biex jistħarrġu għall-infezzjoni CSFV fil-merħliet. Skont ir-razza CSFV, it-titer tan-NAs anti-CSFV kontra razez omoloġi (eż., LPC tal-ġenotip 1.1) huwa ogħla minn dak kontra razez eteroġeni (eż., TD/96 tal-ġenotip 2.1) u, ​​f'dan l-istudju, kien log2 1.3 sa 3.7 (Figura 5A) ogħla minn dak kontra r-razza TD/96 (Figura 5B) [14]. Differenza tat-titru NA simili kienet osservata wkoll f'razez differenti tal-virus tas-sindromu riproduttiv u respiratorju tal-ħnieżer (PRRSV) u SARS-CoV-2 [25,26]. Peress li l-MDAs huma fattur ta' interferenza vitali għall-effikaċja tal-MLV, l-iskeda ottimali ta' tilqim għat-tilqim tal-MLV fil-qżieqeż hija meta l-MDAs tal-qżieqeż huma inqas minn 1:32-darbiet tat-titer NA anti-LPC. Għalhekk, il-ħin ottimali tat-tilqim MLV fl-istudju preżenti kien fi 28 DPE, li huwa konsistenti mal-istima tagħna li l-half-life tal-MDAs kienet 10.7 ijiem (Grupp 2; Figura 5A) u simili għar-riżultati tal-analiżi tal-anti- Titri LPC NA tal-Gruppi 4 u 5. Paradossalment, il-livell ta' 32-darbiet tat-titru NA anti-CSFV (bejn wieħed u ieħor ekwivalenti għal 1:128-darbiet ta' NAs anti-LPC) huwa meqjus bħala l-indiċi protettiv għal Infezzjoni CSFV [17]. Ħafna mill-ħnienes fil-Gruppi 4 u 5 kellhom inqas minn 1:{40}}darbiet kontra t-TD/96 NA titri minn 7 DPE 'l quddiem. Għalhekk, il-perjodu ta 'tieqa meta l-livelli ta' MDA huma baxxi b'mod xieraq biex ma jinterferixxux mat-tilqim MLV iżda għoljin biżżejjed biex ikunu protettivi huwa dejjaq, filwaqt li t-tieqa għar-riskju ta 'infezzjoni CSFV hija wiesgħa. Il-perjodu xieraq għat-tilqim MLV jista' jiġi estiż biss jekk l-MLV jiġi prodott minn razez omoloġi, li normalment ma jkunux disponibbli fil-biċċa l-kbira taż-żoni endemiċi tas-CSFV.

L-immunità tal-merħla tikkorrelata b'mod negattiv mat-tixrid tal-patoġenu fil-prevenzjoni u l-kontroll tal-mard. Immunità miżjuda tal-merħla tista 'tnaqqas kemm is-suxxettibilità għall-infezzjoni kif ukoll il-kobor tat-tixrid tal-patoġenu fil-merħla [27,28]. It-tilqim huwa komunement użat bħala għodda diretta u rapida biex tiżdied l-immunità tal-merħla. It-titjib tal-kopertura tal-immunità tal-merħla permezz tal-immunizzazzjoni tal-vaċċin biex jitnaqqas it-tixrid tal-patoġenu intwera li huwa effettiv għall-kontroll tal-PRRSV, iċ-ċirkovirus tal-ħnieżer tat-tip 2, il-CSFV, il-virus tal-psewdorabja, u s-SARS-CoV-2 [29–36]. Fi studji CSFV, l-amministrazzjoni kemm tal-vaċċini tas-subunità MLV kif ukoll tal-E2 naqqset ukoll it-trażmissjoni tas-CSFV fil-merħliet [14–16,22,32]. Fl-istudju preżenti, għalkemm ftit qżieqeż imlaqqma bl-MLV urew viremja u t-twaqqigħ temporanju tas-CSFV (Gruppi 2 u 3; Figuri 2 u 3), it-tilqim MLV mhux biss offriet protezzjoni sħiħa lill-ħnieżer imlaqqma iżda żgurat ukoll li r-razza TD/96 ma ġietx trażmessa mill-invażur primarju (Grupp 1) għall-grupp invadat sekondarjament (Grupp 4). B'kuntrast, TD/96 infirex mid-donatur ta' CSFV tal-Grupp 1 għal Grupp 3 (mingħajr tilqim MLV) u 'l fuq għal Grupp 5, li juri li t-tilqim MLV kontra CSFV jista' jimblokka t-trażmissjoni ta' CSFV, u b'hekk iżżid il-probabbiltà tal-qerda ta' CSFV billi tnaqqas il-valur ta' CSFV. in-numru bażiku tar-riproduzzjoni (R0) tal-patoġenu [28]. Kopertura ta' vaċċin aktar estensiva hija meħtieġa biex jinqered mard b'patoġeni ta' R0 għolja. Ir-R0 ta' CSFV huwa assoċjat mar-razza virulenza u d-doża ta' tilqim ta' CSFV. Il-livelli ta' patoġenu R0 ta' dożi ta' innokulazzjoni moderata u ta' innokulazzjoni għolja ta' razza moderatament virulenti u d-doża ta' innokulazzjoni baxxa ta' razza virulenti ħafna huma sostanzjalment ogħla minn dik ta' doża ta' innokulazzjoni għolja ta' virulenza baxxa. razza [13]. Dawn ir-riżultati jindikaw li aktar kopertura tal-immunità tal-merħla hija meħtieġa f'żoni endemiċi tas-CSF b'razez CSFV moderati jew virulenti ħafna.

Iċ-ċelloli tan-nisel tal-monoċiti-makrofagi huma ċelloli tropiżmu CSFV li għandhom rwol fit-trażmissjoni CSFV [37-39]. Fl-istudju preżenti, il-ħnienes li rkupraw kienu b'saħħithom u bla sintomi; madankollu, CSFV jista 'jinfetta u jaħbi b'mod persistenti fit-tessuti limfoid (Figura 6), u b'hekk jevita t-tneħħija immuni; dan jappoġġja wkoll l-użu ta 'tessuti limfoid bħala kampjuni ideali għad-dijanjosi. Infezzjoni virali persistenti ġiet osservata wkoll b'CSFV, virus tal-immunodefiċjenza umana tip 1, u virus respiratorju sinċizjali [40-42]. Is-CSFV għandu l-kapaċità li jbiddel l-espressjoni ta 'ċitokini, riċetturi taċ-ċitokini, chemokines, interferoni, u riċetturi li jixbħu lill-pedaġġ fil-makrofaġi, li jirriflettu n-natura immunosoppressiva tiegħu u l-inattività qrib l-antikorp (Figura 5) u CMI (Figura 4) profili tal- ħnieżer sperimentali, minkejja l-espożizzjoni kontinwa tagħhom għat-tixrid tas-CSFV fil-bżieq u l-ħmieġ tal-invażuri primarji (Grupp 1) u sekondarji (Grupp 3). L-immunoregolazzjoni tal-ħnieżer wara l-infezzjoni CSFV kienet tinvolvi żidiet fil-fatturi proinfjammatorji (IL-1, IL-6, IL{-8, u MCF) u antivirali (IFN- u ) [43]. Madankollu, il-mekkaniżmi evolvew u l-infezzjoni persistenti ta 'CSFV għadhom mhux ċari.

benefiċċji cistanche għall-irġiel isaħħu s-sistema immuni

5. Konklużjonijiet

MDAs segwiti minn tilqim MLV jistgħu jinduċu immunità suffiċjenti, partikolarment CMI, li jippermettu t-tneħħija u l-irkupru virali. Għalkemm ftit ħnienes imlaqqma bl-MLV kellhom viremja temporanja ta' livell baxx u tixrid virali fil-bżieq u l-ħmieġ tagħhom, it-trażmissjoni ta' CSFV lill-parti terza (Grupp 4) setgħet tiġi mblukkata permezz ta' tilqim MLV, u b'hekk tnaqqas ir-R0 ta' CSFV. u tiżdied il-possibbiltà tal-qerda tas-CSF.

Referenzi

1. WOAH. Kapitolu 15.2: Infezzjoni bil-virus tad-deni klassiku tal-ħnieżer. Fil-Kodiċi tas-Saħħa tal-Annimali Terrestri; WOAH: Pariġi, Franza, 2022.

2. Ganges, L.; Crooke, HR; Bohórquez, JA; Postel, A.; Sakoda, Y.; Becher, P.; Ruggli, N. Virus tad-deni klassiku tal-ħnieżer: Il-passat, il-preżent u l-futur. Virus Res. 2020, 289, 198151. [CrossRef] [PubMed]

3. WOAH (Sistema Dinjija ta' Informazzjoni dwar is-Saħħa tal-Annimali). Deni Klassiku tal-Ħnieżer: Status Uffiċjali tal-Mard. Disponibbli onlajn: www.woah. org/en/disease/classical-swine-fever/#ui-id-2 (aċċessat fl-1 ta' Settembru 2022).

4. Sawai, K.; Nishi, T.; Fukai, K.; Kato, T.; Hayama, Y.; Yamamoto, T. Analiżi filoġenetika u filodinamika ta 'tifqigħa tal-virus tad-deni klassiku tal-ħnieżer fil-Ġappun (2018-2020). Transbound. Emerġenza. Dis. 2022, 69, 1529–1538. [CrossRef] [PubMed]

5. De Oliveira, LG; Gatto, IRH; Mechler-Dreibi, ML; Almeida, HMS; Sonálio, K.; Storino, GY Kisbiet u sfidi tal-qerda tad-deni klassiku tal-ħnieżer fil-Brażil. Viruses 2022, 12, 1327. [CrossRef] [PubMed]

6. Zhu, X.; Liu, M.; Wu, X.; Ma, W.; Zhao, X. Analiżi filoġenetika ta 'iżolati tal-virus tad-deni klassiku tal-ħnieżer miċ-Ċina. Arch. Virol. 2021, 166, 2255–2261. [CrossRef] [PubMed]

7. Lindenbach, BD; Thiel, HJ; Ross, CM Flaviviridae: Il-viruses u r-replikazzjoni tagħhom. Fl-Oqsma Viroloġija, il-5 ed.; Knipe, DM, Howley, PM, Griffin, DE, Eds.; Lippincott Williams & Wilkins: Philadelphia, PA, USA, 2007; pp. 1101–1152.

8. Paton, DJ; McGoldrick, A.; Greiser-Wilke, I.; Parchariyanon, S.; Kanzunetta, JY; Liou, PP; Stadejek, T.; Lowings, JP; Bjorklund, H.; Belak, S. Ittajpjar ġenetiku tal-virus tad-deni klassiku tal-ħnieżer. Vet. Microbiol. 2000, 73, 137–157. [CrossRef] [PubMed]

9. Depner, KR; Hinrichs, U.; Bickhardt, K.; Greiser-Wilke, I.; Pohlenz, J.; Moennig, V.; Liess, B. Influwenza ta 'fatturi relatati mar-razza fuq il-kors ta' infezzjoni tal-virus tad-deni klassiku tal-ħnieżer. Vet. Rec. 1997, 140, 506–507. [CrossRef]

10. Floegel-Niesmann, G.; Bunzenthal, C.; Fischer, S.; Moennig, V. Virulenza ta' iżolati reċenti u preċedenti tal-virus tad-deni klassiku tal-ħnieżer evalwati bis-sinjali kliniċi u patoloġiċi tagħhom. J. Vet. Med. Ser. B 2003, 50, 214–220. [CrossRef]

11. Moennig, V.; Floegel-Niesmann, G.; Greiser-Wilke, I. Sinjali kliniċi, u epidemjoloġija tad-deni klassiku tal-ħnieżer: Reviżjoni ta 'għarfien ġdid. Vet. J. 2003, 165, 11–20. [CrossRef]

12. Durand, B.; Davila, S.; Cariolet, R.; Mesplède, A.; Le Potier, MF Tqabbil ta 'stimi bbażati fuq viremja u klinika ta' trażmissjoni fi ħdan u bejn il-pinna tal-virus tad-deni klassiku tal-ħnieżer minn tliet esperimenti ta 'trażmissjoni. Vet. Microbiol. 2009, 135, 196–204. [CrossRef]

13. Weesendorp, E.; Backer, J.; Stegeman, A.; Loeffen, W. Effett tar-razza u d-doża tat-tilqim tal-virus tad-deni klassiku tal-ħnieżer fuq it-trasmissjoni ġewwa l-pinna. Vet. Res. 2009, 40, 59. [CrossRef]

14. Huang, YL; Deng, MC; Wang, FI; Huang, CC; Chang, CY L-isfidi tal-kontroll tad-deni klassiku tal-ħnieżer: Vaċċini modifikati tal-ħajja u tas-subunità E2. Virus Res. 2014, 179, 1–11. [CrossRef] [PubMed]

15. Suradhat, S.; Damrongwatanapokin, S.; Thanawongnuwech, R. Fatturi kritiċi għal tilqim b'suċċess kontra d-deni klassiku tal-ħnieżer f'żoni endemiċi. Vet. Microbiol. 2007, 119, 1–9. [CrossRef] [PubMed]

16. Van Oirschot, JT Vaċċinoloġija tad-deni klassiku tal-ħnieżer: Mill-laboratorju għall-għalqa. Vet. Microbiol. 2003, 96, 367–384. [CrossRef]

17. Terpstra, C.; Wensvoort, G. Il-Valur protettiv tat-titri ta 'antikorpi newtralizzanti indotti mill-vaċċin fid-deni tal-ħnieżer. Vet. Microbiol. 1988, 16, 123–128. [CrossRef]

18. Vandeputte, J.; Wisq, HL; Ng, FK; Chen, C.; Chai, KK; Liao, GA Adsorbiment ta 'antikorpi kolostrali kontra d-deni klassiku tal-ħnieżer, persistenza ta' antikorpi materni, u effett fuq ir-rispons għat-tilqim fil-ħnieżer tat-trabi. Em. J. Vet. Res. 2001, 62, 1805–1811. [CrossRef] [PubMed]

19. Ma, WJ; Chen, QL; Chang, CC Investigazzjoni tal-prestazzjoni tal-antikorpi u l-preżenza ta 'RNA virali qabel u wara t-tilqim tar-razza tal-vaċċin tad-deni klassiku tal-ħnieżer fl-irziezet tal-ħnieżer tat-Tajwan. Vet tat-Tajwan. J. 2010, 36, 45–54.

20. Mittelholzer1, C.; Moser, C.; Tratschin, JD; Hofmann, MA Analiżi tal-kinetika tar-replikazzjoni tal-virus tad-deni klassiku tal-majjali tippermetti differenzjazzjoni ta 'razez virulenti ħafna minn avirulenti. Vet. Microbiol. 2000, 74, 293–308. [CrossRef]

21. Huang, YL; Pang, VF; Pan, CH; Chen, TH; Jong, MH; Huang, TS; Jeng, CR Żvilupp ta' PCR f'ħin reali multiplex ta' traskrizzjoni inversa għall-iskoperta u l-ġenotipi tal-virus tad-deni klassiku tal-ħnieżer. J. Virol. Metodi 2009, 160, 111–118. [CrossRef]

22. Huang, YL; Meyer, D.; Postel, A.; Tsai, KJ; Liu, HM; Yang, CH; Huang, YC; Berkley, N.; Deng, MC; Wang, FI; et al. Identifikazzjoni ta' epitope konformazzjonali komuni fuq il-glikoproteina E2 tal-virus tad-deni klassiku tal-ħnieżer u tal-virus tal-marda tal-fruntiera. Viruses 2021, 13, 1655. [CrossRef]

23. Graham, SP; Everett, HE; Haines, FJ; Johns, HL; Sosan, OA; Salguero, FJ; Clifford, DJ; Steinbach, F.; Drew, TW; Crooke, H. L-isfida tal-ħnieżer b'viruses tad-deni klassiku tal-ħnieżer wara t-tilqim tar-razza C tiżvela protezzjoni u għarfien rapidu b'mod notevoli dwar l-immunità bikrija. PLoS ONE 2012, 7, e29310. [CrossRef]

24. Graham, SP; Haines, FJ; Johns, HL; Sosan, O.; Rocca, SAL; Fanal, B.; Rumenapf, T.; Everett, H.; Crooke, H. Karatterizzazzjoni ta' risponsi taċ-ċelluli T li sekretaw IFN inkroċjati mill-vaċċin, b'mod wiesa' li jikkorrelataw mal-protezzjoni rapida kontra l-virus tad-deni klassiku tal-ħnieżer. Vaċċin 2012, 30, 2742–2748. [CrossRef] [PubMed]

25. Suradhat, S.; Intrakamhaeng, M.; Damrongwatanapokin, S. Il-korrelazzjoni tal-produzzjoni tal-interferon-gamma speċifika għall-virus u l-protezzjoni kontra l-infezzjoni tal-virus tad-deni klassiku tal-ħnieżer. Vet. Immunol. Immunopathol. 2001, 83, 177–189. [CrossRef] [PubMed]

26. Planas, D.; Veyer, D.; Baidaliuk, A.; Staropoli, I.; Guivel-Benhassine, F.; Rajah, MM; Planchais, C.; Porrot, F.; Robillard, N.; Puech, J.; et al. Sensittività mnaqqsa tal-varjant delta tas-SARS-CoV-2 għan-newtralizzazzjoni tal-antikorpi. Natura 2021, 596, 276–280. [CrossRef]

27. Zhang, C.; Hu, J. Vaċċini tal-virus tas-sindromu riproduttiv u respiratorju tal-ħnieżer: Istatus kurrenti u strateġiji għal Vaċċin universali. Transbound. Emerġenza. Dis. 2014, 61, 109–120.

28. Andre, FE; Booy, R.; Bock, HL; Clemens, J.; Datta, SK; John, TJ; Lee, BW; Lolekha, S.; Peltola, H.; Ruff, TA; et al. It-tilqim inaqqas bil-kbir il-mard, id-diżabilità, il-mewt, u l-inugwaljanzi madwar id-dinja. Bull. Organu Dinji tas-Saħħa. 2008, 86, 140–146. [CrossRef] [PubMed]

29. Rose, N.; Andraud, M. L-użu ta 'vaċċini biex jikkontrolla t-tixrid tal-patoġenu fil-popolazzjonijiet tal-ħnieżer. Maniġer tas-Saħħa tal-Ħnieżer 2017, 3, 8. [CrossRef] [PubMed]

30. Andraud, M.; Grasland, B.; Durand, B.; Cariolet, R.; Jestin, A.; Madec, F.; Rose, N. Kwantifikazzjoni taċ-ċirkovirus tal-ħnieżer tat-tip 2 (PCV-2) trasmissjoni fi ħdan u bejn il-pinna fil-ħnieżer. Vet. Res. 2008, 39, 43. [CrossRef]

31. Rose, N.; Andraud, M.; Bigault, L.; Jestin, A.; Grasland, B. Vaċċin kummerċjali ibbażat fuq PCV2a jnaqqas b'mod sinifikanti t-trażmissjoni ta 'PCV2b f'kundizzjonijiet sperimentali. Vaċċin 2016, 34, 3738–3745. [CrossRef]

32. Rose, N.; Renson, P.; Andraud, M.; Paboeuf, F.; Le Potier, MF; Bourry, O. Vaċċin ħaj modifikat tal-virus tas-sindromu riproduttiv u respiratorju tal-ħnieżer (PRRSv) inaqqas it-trażmissjoni tal-virus f'kundizzjonijiet sperimentali. Vaccine 2015, 33, 2493–2499. [CrossRef]

33. Bouma, A.; De Smit, AJ; De Jong, MCM; De Kluijver, EP; Moormann, RJM Determinazzjoni tal-bidu tal-immunità tal-merħla indotta mill-vaċċin tas-subunità E2 kontra l-virus tad-deni klassiku tal-ħnieżer. Vaċċin 2000, 18, 1374–1381. [CrossRef]

34. De Smit, AJ; Bouma, A.; Van Gennip, HGP; De Kluijver, EP; Moormann, RJM Chimeric (markatur) virus C-razza jinduċu protezzjoni klinika kontra virus virulenti tad-deni klassiku tal-ħnieżer (CSFV) u jnaqqsu t-trażmissjoni ta 'CSFV bejn ħnieżer imlaqqma. Vaċċin 2001, 19, 1467–1476. [CrossRef] [PubMed]

35. Van Nes, A.; Stegeman, JA; De Jong, MCM; Loeffen, WLA; Kimman, TG; Verheijden, JHM L-ebda tifqigħa maġġuri tal-virus tal-psewdorabja f'merħliet tal-majjali immunizzati sew. Vaccine 1996, 14, 1042–1044. [CrossRef] [PubMed]

36. Shrestha, NK; Burke, PC; Nowacki, AS; Terpeluk, P.; Gordon, SM Neċessità tat-tilqim tal-marda tal-koronavirus 2019 (COVID-19) f'persuni li diġà kellhom COVID-19. Clin. Infetta. Dis. 2022, 75, e662–e671. [CrossRef] [PubMed]

37. Gómez-Villamandos, JC; Ruiz-Villamor, E.; Bautista, MJ; Sánchez, CP; Sánchez-Cordón, PJ; Salguero, FJ; Jover, A. Bidliet morfoloġiċi u immunoistokimiċi fil-makrofaġi tal-milsa tal-ħnieżer infettati bid-deni klassiku tal-ħnieżer. J. Comp. Pathol. 2001, 125, 98–109. [CrossRef]

38. Sánchez-Cordón, PJ; Romanini, S.; Salguero, FJ; Ruiz-Villamor, E.; Carrasco, L.; Gómez-Villamandos, JC Studju istopatoloġiku, immunoistokimiku u ultrastrutturali tal-imsaren fil-ħnieżer imlaqqma bil-virus tad-deni klassiku tal-ħnieżer. Vet. Pathol. 2003, 40, 254–262. [CrossRef]

39. Sah, V.; Kumar, A.; Dhar, P.; Upmanyu, V.; Tiwari, AK; Wani, SA; Sahu, AR; Kumar, A.; Badasara, SK; Pandey, A.; et al. Firma tal-espressjoni tal-ġeni madwar il-ġenoma kollu f'makrofaġi infettati bil-virus tad-deni klassiku tal-ħnieżer u PBMCs ta' ħnieżer indiġeni vis-a-vis imqabbda. Gene 2020, 731, 144356. [CrossRef]

40. Coronado, L.; Bohórquez, JA; Muñoz-González, S.; Perez, LJ; Rosell, R.; Fonseca, O.; Delgado, L.; Perera, CL; Frías, MT; Ganges, L. Investigazzjoni ta 'infezzjonijiet kroniċi u persistenti tad-deni klassiku tal-ħnieżer taħt kundizzjonijiet tal-post u l-impatt tagħhom fuq l-effikaċja tal-vaċċin. BMC Vet. Res. 2019, 15, 247. [CrossRef]

41. Rivera-Toledo, E.; Gómez, B. Il-persistenza tal-virus sinċizjali respiratorju fil-makrofaġi tbiddel il-profil tal-espressjoni tal-ġeni ċellulari. Viruses 2012, 4, 3270–3280. [CrossRef]

42. Kruize, Z.; Kootstra, NA Ir-rwol tal-makrofaġi fil-persistenza u l-patoġenesi tal-HIV-1. Quddiem. Microbiol. 2019, 10, 2828. [CrossRef]

43. Borca, MV; Gudmundsdottir, I.; Fernandez-Sainz, IJ; Holinka, LG; Risatti, GR Mudelli ta 'espressjoni tal-ġeni ċellulari f'makrofaġi tal-ħnieżer infettati bir-razza Brescia tal-virus tad-deni klassiku tal-ħnieżer virulenti ħafna. Virus Res. 2008, 138, 89–96. [CrossRef]