Evalwazzjoni Tossikoloġika U Effetti Protettivi Ta' Estratt ta' Weraq Etanoliku Ta' Cassia Spectabilis DC Fuq Funzjoni tal-Fwied u tal-Kliewi ta' Ġrieden Infettati bil-Plasmodium Berghei
Oct 30, 2023
1. Introduzzjoni
Sal-lum, il-problema taPlasmodiumreżistenza parassitika lejn mediċini antimalarja eżistenti għadha problema kbira għall-qerda tal-malarja [1-3]. għalhekk, tkompli ssir riċerka dwar l-iskoperta ta’ sorsi ġodda ta’ mediċini kontra l-malarja, li waħda minnhom hija minn pjanti mediċinali [4].In vivouin vitromudelli ilhom jintużaw fit-testijiet kontra l-malarja. Fl-aħħar nofs tas-seklu 20,Plasmodium bergheijewPlasmodium yoeliiintuża biex jinfetta annimali gerriema. Sadanittant,P. bergheisaret l-aktar speċi użata komunement għall-istudju fl-istadju tal-fwied, partikolarment il-formazzjoni ta 'hypnozoite biex tinvestiga r-rikorrenza tal-malarja [5-7].
IKKLIKKJA HAWN BIEX TIKSEB FORMULAZZJONI TAL-ĦEJAR TA' CISTANCHE GĦALL-KLIEI
Waħda mill-pjanti tradizzjonali fl-Indoneżja, Cassia spectabilis DC tal-familja Caesalpiniaceae, ġiet ippruvata b'mod sperimentali in vitro kontra P. falciparum u fit-trattament tal-malarja in vivo kontra P. berghei [8, 9], li jindika li l-pjanta C. spectabilis DC hija potenzjal ħafna li jiġi żviluppat aktar bħala kandidat għal mediċini kontra l-malarja. Xogħlijiet preċedenti rrappurtaw li test in vivo fuq estratt etanoliku ta’ 90% ta’ weraq ta’ C. spectabilis DC kontra P. berghei ANKA fi ġrieden BALB/c wera li valur ED50 kien 131.5 mg/kg BW [9], u huwa kkategorizzat bħala ħafna. attività tajba kontra l-malarja [10].
Barra minn hekk, l-estratt, il-frazzjonijiet, is-subfrazzjonijiet, u l-komposti iżolati ta 'C. spectabilis DC ġew ittestjati in vitro għall-attivitajiet kontra l-malarja tagħhom. *Il-kompost attiv ta' dan l-impjant ġie identifikat b'suċċess bħala kompost li huwa identiku għal (–){{0}}hydroxycassine, u t-test ta' attività antimalarja in vitro tiegħu wera IC50 baxx ħafna ta' 0.016 ug/mL [ 11], li hija kklassifikata bħala attività kontra l-malarja qawwija ħafna [12].
Ir-riċerka fuq dan l-impjant dwar it-tegħleb tar-reżistenza għall-mediċina mal-malarja kompliet billi teżamina s-sigurtà u l-effetti tat-titjib tal-estratt tal-weraq C. spectabilis DC fuq il-funzjonijiet tal-fwied u tal-kliewi fi ġrieden infettati minn P. berghei ANKA. Studji ta 'riċerka dwar l-effett ta' pjanti mediċinali li għandhom attività kontra l-malarja fuq il-funzjonijiet tal-fwied u tal-kliewi ta 'ġrieden infettati bil-parassiti twettqu b'mod wiesa' [13-16], kif ukoll testijiet ta 'tossiċità akuta u sub-akuta [17-20]. Il-fwied għandu rwol importanti fir-regolazzjoni tal-proċessi fiżjoloġiċi. huwa organu huwa involut f'diversi funzjonijiet vitali bħall-metaboliżmu, is-sekrezzjoni, u l-ħażna. Barra minn hekk, il-fwied għandu rwol importanti fid-ditossifikazzjoni u l-eskrezzjoni ta 'komposti endoġeni u eżoġeni [21-24].
L-infezzjoni tal-malarja tibda meta l-isporozoites jiġu infettati minn gidma tan-nemus Anopheles femminili infettata bil-parassita tal-malarja. Waqt it-tmigħ tad-demm, Anopheles femminili infettati tinjetta l-istadju sporozoite tal-parassita [25, 26]. Wara madwar siegħa ta 'vjaġġar fil-ġisem tal-bniedem, sporozoites imbagħad jidħlu fil-fwied, jattakkaw l-epatoċiti, u jibdew iċ-ċiklu asesswali ta' skizogony exoerythrocytic. Ġewwa ċ-ċelloli tal-fwied, il-parassiti jimmultiplikaw b'mod asesswali, sakemm jilħqu skizont matur, u finalment, numru kbir ta 'merozoites jipproduċu u jidħlu fid-demm wara li jinfettaw il-fqigħ tal-epatoċiti. * epatoċiti infettati li jikkawżaw ħsara fil-fwied minħabba l-qsim ta 'epatoċiti u merozoites infettati jidħlu fid-demm u jibdew iċ-ċiklu eritroċitiku fiċ-ċelluli ħomor tad-demm [27, 28]. Ħsara li sseħħ fiċ-ċelloli tal-fwied tista 'żżid l-enzimi li jaħdmu fuq il-funzjoni tal-fwied, speċjalment l-enzima transaminase, u bidliet morfoloġiċi fid-dehra tal-fwied [29, 30], bħall-epatomegalija. L-epatosplenomegalija hija karatteristika komuni ta' infezzjoni tal-malarja fil-bnedmin [31] u fil-ġrieden [32] ikkawżata minn espożizzjoni kronika għal parassiti tal-malarja. Madankollu, l-ebda tkabbir tal-kliewi fl-infezzjoni tal-malarja.
Il-funzjoni ħażina tal-fwied tista 'tinstab permezz ta' transaminazzjoni epatoċellulari ta 'transaminase glutamic oxaloacetic transaminase (SGOT) u transaminase piruviku glutamic glutamic (SGPT) fil-plażma rilaxxati fil-plażma, jew b'eżami istoloġiku tat-tessut [33]. L-iktar ħsara komuni hija l-attivazzjoni ta 'mewt taċ-ċelluli apoptotiċi jew nekrożi tal-epatoċiti [34-36]. Involviment klinikament sinifikanti tal-kliewi huwa assoċjat ma' l-infezzjoni minn P. falciparum u P. malariae. * L-infezzjoni ta 'P. falciparum tipproduċi manifestazzjonijiet akuti, li jvarjaw minn asintomatiċi, sa disturbi fl-awrina, u disturbi ħfief tal-elettroliti għal insuffiċjenza renali akuta (ARF) jew ħsara akuta fil-kliewi (AKI) li jeħtieġu appoġġ tad-dijalisi [27, 37]. *Il-każijiet ta' AKI fil-kumplikazzjoni tal-malarja huma magħrufa li jikkontribwixxu għal rata għolja ta' mortalità, li hija madwar 75% tal-każijiet. * Studju istoloġiku jissuġġerixxi l-preżenza ta 'glomerulonefrite, nekrożi tubulari akuta, u nefrite interstizjali bħala l-fattur emodinamiku ewlieni fl-AKI assoċjat mal-malarja [38]. Ġeneralment, il-grad ta 'disfunzjoni tal-kliewi jista' jiġi skopert bil-preżenza ta 'ammonti adegwati ta' proteina fl-awrina u żieda fil-livelli ta 'urea fil-plażma, kreatinina, u elettroliti fil-plażma [39].
*e tossiċità ta '90% estratt etanoliku ta' C. spectabilis DC (EECS) weraq fil-ġrieden BALB/c, segwita mill-eżamijiet ta 'enżimi, tista' taffettwa l-istopatoloġija u l-funzjonijiet tal-fwied u tal-kliewi wara l-amministrazzjoni ta 'EECS.
2. Materjali u Metodi
2.1. Materjal tal-Pjanti u Preparazzjoni tal-EECS. *e C. spectabilis
Il-weraq DC inxtraw u ġew determinati f'LIPI (Ċentru ta 'Riċerka tal-Indoneżja), Ġnien Botaniku, Purwodadi, East Java, Indoneżja (B-160/IPH.06/KS.02/III/ 2019). *E kampjun ġie depożitat bħala l-erbarju fid-Dipartiment tal-Farmakognożija u l-Fitokimika, Fakultà tal-Farmaċija, Universitas Airlangga. * Il-weraq tlaħlaħ sewwa bl-ilma tal-vit biex ineħħu kontaminanti estranji, imnixxef f'45 grad, u mitħun fi trab bi grinder. * L-estrazzjoni twettqet billi tħaffef il-materjali tal-pjanti tat-trab (500 g) fi flixkun li fih 2,500 mL ta '90% etanol (f'25-30 grad) għal 3 × 24 siegħa. *e solvent ta 'estrazzjoni ġie separat, iffiltrat permezz ta' karta tal-filtru, u evaporat taħt pressjoni mnaqqsa permezz ta 'evaporazzjoni rotatorja. *E-rendiment ta 'estratt etanoliku ta' 1000 g piż imnixxef ta 'trab tal-weraq C. spectabilis DC kien 10.20% (w/w) u ntuża f'dan l-esperiment.
2.2. Annimali.
Ġrieden maskili BALB/c ta 'età 6-8 ġimgħat, piż ta' 25-30 g, intużaw fl-istudju. Il-ġrieden kollha nkisbu minn Farma Veterinary Center, Direttorat Ġenerali tal-Bhejjem u Saħħa tal-Annimali Ministeru tal-Agrikoltura, Surabaya, East Java, Indoneżja. *L-annimali kienu miżmuma taħt kundizzjonijiet standard u mitmugħa b'dieta ta' stokk u ilma ad libitum. *L-approvazzjoni tal-protokoll tal-istudju nkisbet mill-Kumitat tal-Etika għar-Riċerka tal-Annimali, Universitas Air langga, Indoneżja, Numru 2.KE.181.10.2018.
2.3. Test ta' Tossiċità Akuta.
EECS ġie peżat u sospiż mill-ġdid b'0.5% sodium carboxymethyl cellulose (Na CMC) biex jinkisbu d-dożi mixtieqa. Il-ġrieden BALB/c sawmu għal 24 siegħa qabel ma ġew mitmugħa bl-estratt. * L-annimali kienu maqsuma fi tliet gruppi, kull grupp kien fih ħames ġrieden. *e dożi għal kull grupp kienu 1,250; 2,500; u 5,000 mg/kg BW, rispettivament. L-imġieba ġenerali ta 'kull ġurdien kienet osservata kontinwament għal siegħa wara kull doża, b'mod intermittenti kull erba' sigħat, u minn hemm 'il quddiem fuq perjodu ta' 24 siegħa [40-42].
2.4. Test ta' Tossiċità Subakuta.
Fit-test tat-tossiċità subakuta, il-ġrieden ġew miġbura fi tliet gruppi u kull grupp ġie ttrattat b'EECS f'daqqa, ħames darbiet, u għaxar darbiet ta 'doża orali ta' kuljum ta '150 mg/kg BW għal 28 jum; il-grupp ta' kontroll normali ngħata biss ikel u xorb ad libitum [43]. *l-annimali ġew osservati għal 28 jum għal kwalunkwe sinjal ta' tossiċità. Fl-aħħar tal-perjodu ta 'osservazzjoni, l-annimali kollha ġew sagrifikati taħt anestesija ta' l-etere u organi vitali bħall-fwied u l-kliewi tneħħew mill-annimali kollha għal eżamijiet grossi u istopatoloġiċi.
2.5. Parassita tal-gerriema.
Is-sensittività tal-chloroquine ta 'Plasmodium berghei ANKA inkisbet mill-Istitut tal-Bijomolekulari Eijkman, Jakarta, l-Indoneżja, u miżmuma permezz ta' passaġġ serjali li ntuża f'dan l-istudju.
2.6. Effett tal-EECS fuq il-Livell tal-Plażma ta' SGOT u SGPT.
*dan l-esperiment kien test soppressiv ibbażat fuq Peters [44]. *dan it-test soppressiv sar qabel l-evalwazzjoni tal-EECS fuq il-livell tal-plażma ta 'SGOT u SGPT. *l-annimali ġew infettati b'P. berghei ANKA u maqsuma f'ħames gruppi ta' A, B, C, D, u E. *e annimali ġew ittrattati ftit wara l-infezzjoni fil-jum 0 (D0) u kompliet kuljum għal tlett ijiem (D1–D3). Grupp A bħala kontroll negattiv irċieva 0.5% Na CMC bil-fomm. Gruppi B u C bħala l-gruppi kkurati ngħataw EECS f'doża orali waħda ta' 150 u 200 mg/kg BW, rispettivament. Grupp D kien kontroll pożittiv mogħti chloroquine f'doża orali waħda ta' 100 mg/kg BW. Barra minn hekk, il-grupp E bħala kontroll b'saħħtu ma kienx infettat bil-parassiti u ngħata biss ikel u xorb ad libitum. Fir-raba 'ġurnata (D4), it-tiċrit tad-demm ta' kull ġurdien ġew ippreparati u eżaminati mikroskopikament. Barra minn hekk, il-plażma nġabret qabel il-kejl tal-livelli SGOT u SGPT.
2.7. Effett tal-EECS fuq l-Istopatoloġija tal-Fwied u l-Kliewi.
Fl-aħħar tal-perjodu ta 'osservazzjoni, l-annimali kollha ġew sagrifikati taħt anestesija ta' l-etere qabel it-tneħħija tal-fwied u l-kliewi. Wara li jintiżnu l-organi, it-tessuti mbagħad ġew iffissati f'soluzzjoni ta '10% formaldehyde u pproċessati aktar għal tbajja ta' ematossilin-eosina (H&E). *Twettqet osservazzjoni istopatoloġika biex issir taf l-effett tossikoloġiku tal-EECS fuq iċ-ċelloli deġenerattivi u nekrotiċi tat-tessuti. *e danni ġew iggradati bbażati fuq Gibson-Corley et al. [45].
2.8. Analiżi Statistika.
*e data kienet rappreżentata bħala medja ± devjazzjoni standard (SD). Analiżi one-way tal-varjanza (ANOVA) intużat biex titqabbel id-dejta normalment distribwita fost it-trattamenti, segwita minn test ta 'tqabbil multiplu post hoc meta nkisbet sinifikat differenti. Meta d-dejta ma kinitx imqassma b'mod normali, it-test Kruskal-Wallis u t-test U Mann-Whitney intużaw biex jevalwaw id-differenzi bejn it-trattamenti.
Servizz ta 'Appoġġ Ta' Wecistanche-L-akbar esportatur ta' cistanche fiċ-Ċina:
Email:wallence.suen@wecistanche.com
Whatsapp/Tel:+86 15292862950
Shop Għal Aktar Speċifikazzjonijiet Dettalji:
https://www.xjcistanche.com/cistanche-shop
