Glycosides Totali Miz-Zkuk Ta 'Cistanche Tubulosa Ittaffi l-Imgieba Tixbah Dipressjoni

Kuntatt:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

Li Fan, Ying Peng, Jingwen Wang, Ping Ma, Lijuan Zhao, Xiaobo Li *

ASTRATT

Sfond:Bħala l-aktar użati ta 'spissħwawar ditossifikanti tal-kliewi-yangfil-mediċina tradizzjonali Ċiniża, zkuk sukkulenti mnixxfa ta 'Cistanche tubulosa (Schenk) Wight (CT) intwerew li huma effettivi fit-trattament tad-dipressjoni. Madankollu, il-komponenti antidipressanti u l-mekkaniżmu sottostanti tagħhom għadhom mhux ċari.

Għan:Biex tesplora l-komponenti attivi ta 'CT kontra d-dipressjoni, kif ukoll il-mekkaniżmi potenzjali. Disinn u metodi ta' studju: Intużaw testijiet ta' disprament fl-imġieba biex jevalwaw l-attivitajiet antidipressanti ta' polysaccharides, oligosaccharides, u frazzjonijiet differenti arrikkiti bil-glycoside separati minn CT, kif ukoll il-metaboliti tipiċi tal-mikrobijota tal-musrana inkluż 3-hydroxyphenylpropionic acid ({{2 }}HPP) u hydroxytyrosol (HT). Barra minn hekk, l-effetti ta 'frazzjonijiet bijoattivi u metaboliti fuq mudelli ta' stress ħafif kroniku imprevedibbli (CUMS) ġew esplorati b'farmakodinamiċi multipli u analiżi bijokimiċi. Bidliet fl-istoloġija tal-kolon u l-barriera intestinali ġew osservati permezz ta 'tbajja' u analiżi immunoistokimika. Il-karatteristiċi tal-mikrobi tal-imsaren u l-metaboliżmu ta 'tryptophan-kynurenine ġew esplorati bl-użu ta' sekwenzar 16S rRNA u western-blotting, rispettivament.

Riżultati:Il-glikożidi totali (TG) itaffu b'mod drammatiku imġieba bħal dipressjoni meta mqabbla ma 'frazzjonijiet separati differenti, li jirriflettu fl-effetti sinerġistiċi ta' phenylethanoid u iridoid glycosides fuq l-iperattivazzjoni tal-assi ipotalamika-pitwitarja-adrenali (HPA), newro-, u infjammazzjoni periferali severa, u nuqqasijiet fl-5-hydroxytryptamine (5-HT) u fattur newrotrofiku derivat mill-moħħ fl-ippokampus. Barra minn hekk, TG itaffu l-infjammazzjoni ta 'grad baxx fil-kolon u t-tfixkil tal-barriera intestinali, u l-abbundenzi ta' diversi ġeneri batterjali kkorrelati ħafna mal-assi HPA u l-infjammazzjoni fil-firien CUMS. B'mod konsistenti, l-espressjoni ta 'indoleamine 2, 3-dioxygenase 1 (IDO1) fil-kolon tnaqqset b'mod sinifikanti wara l-amministrazzjoni ta' TG, akkumpanjata mis-soppressjoni tal-metaboliżmu tryptophan-kynurenine. Min-naħa l-oħra, HT eżerċita wkoll effett antidepressant immarkat billi tejjeb il-funzjoni tal-assi HPA, ir-rilaxx ta 'ċitokini pro-infjammatorji, u l-metaboliżmu ta' tryptophan-kynurenine, filwaqt li ma kienx kapaċi jaġġusta l-biċċa l-kbira tal-mikrobijota tal-musrana diżordinata bl-istess mod bħal TG. B'mod sorprendenti, superjuri għal fluoxetine, TG u HT jistgħu jtejbu aktar id-disfunzjoni tal-assi ipotalamika-pitwitarja-gonadi u l-metaboliżmu anormali tan-nukleotidi ċikliku.

cistanche salsa benefiċċjitista 'tkompliittejjeb id-disfunzjoni.

Introduzzjoni

Id-dipressjoni hija disturb mentali kroniku, rikorrenti, u potenzjalment ta’ theddida għall-ħajja li jaffettwa sa 20 fil-mija tal-popolazzjoni madwar id-dinja (Nabavi et al., 2017). Fil-preżent, għalkemm bosta antidipressanti ġew approvati, l-effetti sekondarji huma ta 'tħassib. Notevolment, trattament fit-tul b'inibituri selettivi tar-reuptake tas-serotonin (SSRIs) bħal fluoxetine, l-aġent farmakoloġiku ewlieni għad-dipressjoni, problemi aggravati bħal disfunzjoni sesswali kronika (Bijlsma et al., 2014); dan ġibed dejjem aktar attenzjoni għall-iskoperta ta 'antidipressanti ġodda minn ħwawar naturali (Wang et al., 2019). Fit-teorija tal-mediċina tradizzjonali Ċiniża (TCM), id-defiċjenza tal-kliewi-yang tirriżulta f'karatteristika ta 'prestazzjoni simili għas-sintomi kliniċi tad-dipressjoni bħal tħossok imniżżel fil-miżbliet, telf ta' interess, u sentimentalità (Yang et al., 2020), tippromwovi l-ħsibijiet. biex ittaffi l-imġieba bħal dipressjoni billi tonifying kidney-yang. B'kumbinazzjoni, ħafna ħxejjex aromatiċi li tonifikaw il-kliewi-yang għandhom il-vantaġġ li jtejbu l-funzjoni sesswali (Wu et al., 2015). Studji bħal dawn jagħmluna nagħtu attenzjoni għall-applikazzjoni potenzjali ta 'Cistanches Herba, li hija l-iktar ħwawar tat-tonifikazzjoni tal-kliewi-yang użata ta' spiss fit-TCM u hija effettiva fit-trattament ta 'disfunzjoni sesswali maskili (Wang et al., 2020), f'termini ta' żviluppi antidipressanti. Cistanches Herba, irreġistrat uffiċjalment bħala z-zkuk sukkulenti mnixxfa ta 'Cistanche tubulosa (Schrenk) Wight (CT) u Cistanche deserticola (YC Ma) fil-Farmakopea Ċiniża (Wang et al., 2017), intuża fiċ-Ċina u pajjiżi oħra tal-Asja tal-Lvant. mis-seklu 15 biex jittrattaw kundizzjonijiet bħal defiċjenza tal-kliewi-yang, impotenza, u infertilità femminili. Studji farmakoloġiċi moderni jindikaw li Cistanches Herba għandha bijoattivitajiet multipli, bħal titjib tal-immunità, newroprotezzjoni, effetti antiossidanti, kontra t-tixjiħ u kontra l-għeja (Wang et al., 2017). Il-proprjetajiet newroprotettivi ta 'Cistanches Herba jissuġġerixxu l-potenzjal terapewtiku tiegħu f'mard konjittiv relatat bħal puplesija, depressjoni u marda ta' Alzheimer (Wang et al., 2020). Fl-istudju preċedenti tagħna, sibna li l-estratt CT itaffu l-imġieba bħal dipressjoni ta 'firien kroniċi ta' stress ħafif mhux prevedibbli (CUMS) (Li et al., 2018). Sal-lum, l-analiżi kimika ta 'CT wriet li l-kostitwiti ewlenin tagħha jinkludu glikożidi feniletanojdi, glikożidi iridojdi, polisakkaridi, u oligosakkaridi (Jiang and Tu, 2009), madankollu, it-tip ta' kompost li għandu rwol dominanti fl-effett antidipressant tiegħu għadu mhux ċar.

Bosta studji kkonfermaw li l-azzjoni fiżjoloġika tal-imsaren (speċjalment mikrobijota kommensali) għandha rwol importanti fl-iżvilupp tad-dipressjoni u tista 'tirregola n-newroendokrini, is-sistema nervuża awtonomika, u s-sistemi immuni (Yang et al., 2020). Barra minn hekk, ir-relazzjoni li torbot il-metaboliżmu tat-triptofan, il-mikrobijota tal-musrana u d-dipressjoni gradwalment ġibdet ħafna attenzjoni. Il-mikrobijota tal-imsaren mibdula tista' tattiva l-mogħdija tat-tryptophan-kynurenine, sussegwentement tnaqqas id-disponibbiltà tat-triptofan periferali u ċerebrali, li tirriżulta f'defiċjenza ta' 5-HT (Agus et al., 2018). L-istudju preċedenti tagħna wera li phenylethanoid glycosides fis-CT ġeneralment jeżerċitaw bijodisponibilità baxxa, u jistgħu jiġu metabolizzati malajr għal 3-hydroxy-phenyl propionic acid (3-HPP) u hydroxytyrosol (HT) mill-mikrobijota tal-musrana (Li et al., 2016). Barra minn hekk, l-estratt CT ġie rrappurtat li jirrestawra l-omeostażi tal-mikrobijota tal-musrana fil-firien CUMS (Li et al., 2018). Ibbażat fuq riċerka bħal din, iddeduċejna li l-interazzjoni bidirezzjonali tal-fitokimiċi u l-mikrobijota tal-musrana tista 'tirregola l-effetti antidipressanti ta' komponenti bijoattivi speċifiċi ta 'CT. Speċifikament, il-komposti jistgħu jiġu trasformati f'metaboliti assorbibbli (bħal 3-HPP u HT) fil-passaġġ gastrointestinali mill-mikrobijota tal-musrana, u sussegwentement, jeżerċitaw effetti antidipressanti. Min-naħa tagħhom, alterazzjonijiet strutturali tal-mikrobijota tal-musrana indotti minn komponenti bijoattivi jistgħu fl-istess ħin ikollhom rwol vitali fl-attività antidipressanti.

Materjali u metodi

Materjali

L-istandards kollha użati għall-analiżi kimika nxtraw minn Durst (Sichuan, iċ-Ċina). 3-HPP, HT, fluoxetine, u imipramine nxtraw minn Aladdin (Shanghai, iċ-Ċina). Il-kit kwantitattiv tal-proteina BCA inxtara minn Boster (Wuhan, iċ-Ċina). Nanjing Jiancheng (Nanjing, iċ-Ċina) ipprovda 5-HT, BDNF, fattur-alfa tan-nekrosi tat-tumur (TNF- ), interleukin-1beta (IL{-1 ), u interferon-gamma (IFN- ), ) kits ta' analiżi immunosorbenti marbuta ma' enżimi (ELISA). Kortikosterone (CORT), ormon adrenokortikotropiku (ACTH), u kits ELISA tal-ormon li jirrilaxxa l-kortikotrofina (CRH) inxtraw minn Multi Sciences (Hangzhou, iċ-Ċina). Adenosine monofosfat ċikliku (cAMP), monofosfat ta 'guanosine ċikliku (cGMP), testosterone (T), u kits ELISA ta' l-ormon li jirrilaxxa l-gonadotropin (GnRH) inxtraw minn Bijoteknoloġija marbuta ma 'Enżimi (Shanghai, iċ-Ċina). Kitts ELISA ta 'Tryptophan u kynurenine inkisbu minn Antikorpi ta' Molekula Żgħar (Bordeaux, Franza). Antikorpi primarji/sekondarji inklużi zonula occludens 1 (ZO-1), indoleamine 2, 3-dioxygenase 1 (IDO1), -actin, u HRP mogħoż anti-fenek IgG (H plus L) inxtraw mingħand Proteintech (Wuhan, iċ-Ċina). Ir-reaġenti l-oħra kollha ta 'grad analitiku jew purità ogħla nkisbu minn fornituri kummerċjali.

Suppliment ta 'estratt ta' cistanche

Preparazzjoni ta' frazzjonijiet differenti separati minn CTE

CT inġabret f'Novembru 2015 f'Hetian, Xinjiang, iċ-Ċina, u awtentikata mill-Prof Xiaobo Li. Il-kampjun tal-vawċer (20151108) ġie depożitat fl-Iskola tal-Farmaċija fl-Università ta 'Shanghai Jiao Tong.

Kampjuni mgħaffġa ġew estratti tliet darbiet b'ilma distillat (1:10, w/v) għal 2 h f'80 ~ 90 ◦C biex tinkiseb CTE (ir-rendiment kien 57.1 fil-mija). CTE ġie maħlul f'ilma distillat u mbagħad imħawwad bil-mod bl-etanol (1:4, v/v) u mqiegħed f'4 ◦C għal 24 siegħa. Imbagħad, il-preċipitat u s-supernatant inġabru permezz ta 'ċentrifugazzjoni f'4000 rpm għal 20 min. Il-polisakkaridi totali (TP; ir-rendiment kien 5.7 fil-mija) inkisbu bil-ħasil bi 80 fil-mija etanol, u deproteinizzazzjoni b'reaġent Sevage tliet darbiet mill-preċipitat miġbur. Is-supernatant li kien fadal kien imbagħad kromatografiku fuq kolonna tar-reżina mikroporuża D101 u eluwit b'ilma distillat u 40 fil-mija etanol. L-ilma eluwit u l-frazzjonijiet ta 'etanol ta' 40 fil-mija kien fihom oligosakkaridi totali (TO; ir-rendiment kien 35.1 fil-mija) u glikosidi totali (TG; ir-rendiment kien 12.1 fil-mija), rispettivament. TG ġie eluwit aktar b'ilma distillat u 5 fil-mija, 10 fil-mija, u 40 fil-mija etanol permezz ta 'reżina mikroporuża D101 għal darb'oħra, u l-frazzjonijiet elużi ta' 5 fil-mija u 40 fil-mija etanol kienu glikożidi iridojdi totali (TG-IrG; ir-rendiment kien 2.7 fil-mija) u phenylethanoid glycosides totali (TG-PhG; ir-rendiment kien 8.7 fil-mija), rispettivament.

Analiżi kimika

L-ewwel, il-kostitwenti kimiċi ewlenin ta 'frazzjonijiet differenti separati minn CTE kienu kkaratterizzati minn UPLC-QTOF-MS. It-tieni, il-kontenuti relattivi tal-karboidrati u l-glikosidi totali ġew determinati bil-metodu UV-Vis. It-tielet, il-komponenti ewlenin (echinacoside, verbascoside, isoverbascoside, 8-epiloganic acid, u geniposidic acid) ġew ikkwantifikati b'metodu HPLC validat. Il-parametri dettaljati u l-validazzjoni tal-metodu huma murija fil-Materjali Supplimentari.

Fig. 1. Flow chart ta' esperimenti fuq l-annimali

Tabella 1 Suġġetti u d-dożaġġ għal ġrieden jew firien f'kull grupp.

Esperimenti fuq l-annimali

L-iskedi esperimentali speċifiċi tal-annimali huma murija fil-Fig. 1. L-annimali sperimentali kollha ġew miżmuma u akklimatizzati għal ġimgħa 1 qabel l-esperimenti fiċ-Ċentru tal-Annimali tal-Laboratorju tal-Università ta 'Shanghai Jiao Tong (Shanghai, iċ-Ċina), taħt temperaturi tal-kamra kkontrollati (25 ± 2). ◦C; 55 ± 10 fil-mija umdità relattiva) b'ċiklu ta 'dawl-dlam ta' 12: 12 h. Din ir-riċerka saret skont il-Linji Gwida għall-Kura u l-Użu tal-Annimali tal-Laboratorju tal-SJTU. Il-faċilitajiet u l-protokolli tal-annimali ġew approvati mill-Kumitat tal-Etika tal-Annimali tal-SJTU (Nru A2019008).

Mija u ħamsin ġrieden ICR maskili (li jiżnu 18-20 g, 6 ġimgħat) inxtraw minn Shanghai Slack Biotechnology Company (Shanghai, iċ-Ċina) u nqasmu b'mod każwali f'10 gruppi (n=15/grupp). Is-suġġetti u d-dożi għall-ġrieden ta 'disprament fl-imġieba f'kull grupp huma murija fit-Tabella 1. Id-dożi ta' CTE u l-frazzjonijiet separati tiegħu ġew ikkalkulati bil-formula li ġejja: dożaġġ=4.55 g/kg.d.bw × rendiment, li kien determinat skont tliet kalkoli ta’ doża ekwivalenti għall-bniedem ibbażati fuq l-erja tas-superfiċje tal-ġisem. Id-dożi tad-droga pożittiva imipramine u metaboliti tal-mikrobijota tal-musrana (3-HPP u HT) ġew stabbiliti skont l-istudji preċedenti (Gupte et al., 2016; Pablos et al., 2019). Wara amministrazzjoni intragastrika darba kuljum għal 7 ijiem, it-test tal-kamp miftuħ (OFT), it-test tas-sospensjoni tad-denb (TST), u t-test tal-għawm sfurzat (FST) saru fit-8, id-9 u l-10 jum, rispettivament. Il-metodi speċifiċi tat-testijiet tal-imġieba huma deskritti fil-Materjali Supplimentari.

Tnejn u sebgħin firien Sprague-Dawley maskili (li jiżnu 160-180 g, 6 ġimgħat) inxtraw minn Shanghai Slack Laboratory Animal Company (Shanghai, iċ-Ċina). Qabel l-esperimenti formali, il-firien kollha ġew soġġetti għat-test tal-preferenza tas-sukrożju (SPT) wara t-taħriġ korrispondenti. Il-firien kienu maqsuma fi 8 gruppi (n=9/grupp) skont il-preferenza tagħhom tas-sukrożju (Fig. S1 Supplimentari). Is-suġġetti u d-dożi għall-firien f'kull grupp huma murija fit-Tabella 1. Id-dożi ġew stabbiliti skond il-koeffiċjent ta 'konverżjoni bejn il-ġrieden u l-far ibbażat fuq id-dożi effettivi tagħhom fil-ġrieden ta' disperazzjoni fl-imġieba. U d-doża tal-mediċina ta 'kontroll pożittiv fluoxetine kienet konsistenti mal-istudju preċedenti (Hou et al., 2017). Il-gruppi kollha rċevew serje ta 'stress ħafif kroniku imprevedibbli (CUMS) ħlief għall-grupp ta' kontroll. Stressors ġew applikati kontinwament u b'mod każwali għal ġimgħat 4 (ara Tabella Supplimentari S1 għad-dettalji). L-ikel u l-ilma kienu disponibbli b'mod ħieles għall-firien ta 'kontroll, li baqgħu mhux disturbati f'kamra oħra, ħlief għat-testijiet tal-imġieba. Is-suġġetti ngħataw intragastrikament siegħa qabel il-proċedura CUMS matul 4 ġimgħat. Wara 28 jum ta 'stressers kontinwi u amministrazzjoni tad-droga, l-OFT, SPT, u FST saru fid-29, il-31 u t-33 jum, rispettivament. Il-metodi speċifiċi tal-esperimenti tal-imġieba huma murija fil-Materjali Supplimentari.

Tabella 2 Kontenut ta' echinacoside, verbascoside, isoverbascoside, 8-epiloganic acid, u geniposidic acid f'kull frazzjoni.

Ġbir tal-kampjuni u analiżi bijokimika

Wara t-testijiet tal-imġieba, il-firien sawm ġew anestetizzati b'pentobarbital sodium, u nġabar demm sħiħ biex jinkisbu kampjuni tas-serum. Wara l-perfużjoni tal-qalb bis-salina, l-ippokampus, il-kolon, u l-kontenut taċ-ċekali inġabru u nħażnu f'-80 ◦C. Is-segmenti tal-kolon distali tneħħew u ġew iffissati f'4 fil-mija paraformaldehyde. Il-livelli ta' CORT, CRH, ACTH, TNF- , IL-1 , IFN- , cAMP, cGMP, T, GnRH, tryptophan, u kynurenine fis-serum, 5-HT, BDNF, u TNF- fl-ippokampus, u TNF- u IFN- fil-kolon ġew imkejla skond l-istruzzjonijiet ipprovduti mal-kit ELISA korrispondenti.

Istoloġija, immunohistochemistry u western-blotting assay

Hematoxylin u eosin (H & E) u t-tbajja 'Alcian blue-periodic acid-Schiff (AB-PAS) intużaw biex josservaw il-bidliet patoloġiċi fit-tessut tal-kolon. Barra minn hekk, saru valutazzjonijiet tal-immunoistokimika ta 'dawn it-taqsimiet biex tiġi osservata l-espressjoni tal-proteina ZO-1 fiċ-ċelloli epiteljali tal-kolon (Ding et al., 2020). Dettalji dwar il-preparazzjoni tal-kampjun u l-assaġġ tal-western-blotting biex tiġi ddeterminata l-espressjoni tal-proteina IDO1 fil-kolon u l-ippokampus huma deskritti wkoll fil-Materjali Supplimentari.

Analiżi tal-profil tal-kompożizzjoni tal-mikrobijota tal-musrana

Is-sekwenzjar ta 'veloċità għolja 16S rRNA sar minn MajorBio Co., Ltd. (Shanghai, iċ-Ċina), u l-metodu dettaljat u l-ipproċessar tad-dejta huma murija fil-Materjali Supplimentari.

Analiżi statistika

Id-dejta hija espressa bħala l-medja ± żball standard tal-medja (SEM). Intużat analiżi tal-varjanza f'direzzjoni waħda (ANOVA) biex tqabbel gruppi multipli bl-użu ta' softwer SPSS 20.0. Differenza kienet ikkunsidrata sinifikanti f'p < 0.05.="" il-korrelazzjonijiet="" bejn="" il-mikrobi="" tal-imsaren="" u="" ċerti="" fatturi="" fiżjoloġiċi="" relatati="" mad-dipressjoni="" ġew="" analizzati="" bl-użu="" tal-koeffiċjent="" ta="" 'korrelazzjoni="" spearman="" ibbażat="" fuq="" analiżi="" tal-mappa="">

Riżultati

Analiżi kimika ta' frazzjonijiet differenti separati minn CTE

Il-komponenti ewlenin kienu kkaratterizzati bl-użu ta 'UPLC-QTOF-MS (Tabella Supplimentari S2 u Fig. S2), u total ta' 21 kostitwent ġew identifikati, inklużi 16-il kostitwent ta 'phenylethanoid glycosides, 2 kostitwenti ta' phenolic glycosides f'CTE, TG, u TG- PhG; u 3 kostitwenti ta 'glikożidi iridojdi f'CTE, TG, u TG-IrG. B'mod ġenerali, il-kontenuti relattivi tal-karboidrati totali f'TP u TO kienu 60.3 fil-mija u 80.8 fil-mija, rispettivament. Il-kontenuti relattivi ta 'glycosides totali f'TG kienu 87.7 fil-mija. B'mod korrispondenti, phenylethanoid u iridoid glycosides ammontaw għal 86.7 fil-mija u 53.4 fil-mija ta 'TG-PhG u TG-IrG, rispettivament. Il-kontenut ta' echinacoside, verbascoside, isoverbascoside, 8-epiloganic acid, u geniposidic acid f'kull frazzjoni huma murija fit-Tabella 2, u l-kromatogramma HPLC u d-dejta tal-validazzjoni tal-metodu huma elenkati fit-Tabella Supplimentari S3 u Fig. S3.

Fig. 2. L-effetti ta 'frazzjonijiet differenti separati minn CTE u l-metaboliti tipiċi mill-mikrobijota tal-musrana fuq l-FST, TST, OFT fil-ġrieden.

Effetti ta' frazzjonijiet differenti separati minn CTE u l-metaboliti tipiċi mill-mikrobijota tal-musrana fuq testijiet ta' disperazzjoni fl-imġieba fil-ġrieden

Kif muri f'Fig. 2, meta mqabbla mal-grupp ta 'kontroll, ġrieden soġġetti għal 7 ijiem ta' amministrazzjoni ta 'imipramine (kontroll pożittiv) urew tnaqqis sinifikanti fil-ħinijiet ta' immobilità kemm fl-FST kif ukoll f'TST u ma wrew l-ebda effett sinifikanti fuq id-distanza totali vvjaġġata fl-OFT. . Alterazzjonijiet simili ġew osservati wkoll fil-gruppi CTE, TG, u HT, li jindikaw li CTE, TG, u HT eżerċitaw l-attività antidipressanti u l-effetti ma kinux relatati mal-eċitabbiltà. Għalhekk, TG u HT kienu l-frazzjoni bijoattiva dominanti separata minn CTE u metaboliti tipiċi mill-mikrobijota tal-musrana, rispettivament. Interessanti, l-ebda tibdil sinifikanti fil-ħinijiet tal-immobbiltà fl-FST ma kien muri wara l-amministrazzjoni ta 'TG-PhG u TG-IrG meta mqabbla ma' dawk tal-kontrolli, jew fit-TST wara l-amministrazzjoni ta 'TG-PhG, li jindika li l-preżenza ta' phenylethanoid u iridoid glycosides tista 'tagħmel. tkun essenzjali fl-attività antidipressanti tas-CTE.

Tabella 3 L-effetti ta 'frazzjonijiet differenti arrikkit bil-glycoside u HT fuq l-FST, SPT, u OFT fil-firien CUMS.

Effetti farmakodinamiċi u bidliet bijokimiċi ta' frazzjonijiet differenti arrikkit bil-glycoside u HT fuq firien CUMS

Kif muri fit-Tabella 3, firien suġġetti għal 28 jum tal-paradigma CUMS urew tnaqqis sinifikanti (p <0.001) fil-preferenza="" tas-sukrożju="" fl-spt,="" id-distanza="" totali="" vvjaġġata,="" u="" n-numru="" ta="" 'trobbija="" fl-oft,="" kif="" ukoll="" żieda="" sinifikanti="" (p=""><0.01) fil-ħin="" totali="" ta'="" immobilità="" fl-fst="" meta="" mqabbel="" mal-kontrolli,="" li="" jissuġġerixxi="" l-induzzjoni="" ta="" 'fenotipi="" li="" jixbħu="" d-depressjoni="" fil-firien="" cums.="" il-prestazzjonijiet="" depressivi="" ġew="" maqluba="" fil-grupp="" flx="" (kontroll="" pożittiv).="" bl-istess="" mod,="" it-trattament="" cte,="" tg,="" tg-phg,="" tg-irg,="" u="" ht="" irriżulta="" fir-restawr="" tal-preferenza="" tas-sukrożju="" għal-livelli="" normali="" fil-firien="" cums,="" li="" kienu="" 102.7="" fil-mija,="" 94.1="" fil-mija,="" 89.8="" fil-mija,="" 91.9="" fil-mija="" u="" 94.3="" fil-mija="" tal-="" kontrolli,="" rispettivament.="" b'mod="" konsistenti="" fil-gruppi="" fst,="" cte="" u="" tg="" urew="" l-aktar="" effetti="" ovvji,="" u="" l-ħinijiet="" tal-immobbiltà="" laħqu="" 103.3="" fil-mija="" u="" 93.4="" fil-mija="" ta="" 'dawk="" tal-grupp="" ta'="" kontroll,="" rispettivament,="" filwaqt="" li="" l-ħinijiet="" tal-immobbiltà="" tal-gruppi="" tg-phg,="" tg-irg="" u="" ht="" biss="" laħaq="" 62.1="" fil-mija,="" 73.2="" fil-mija,="" u="" 69.9="" fil-mija="" ta="" 'dawk="" tal-grupp="" ta'="" kontroll.="" żidiet="" sinifikanti="" simili="" (p=""><0.05) kienu="" osservati="" fid-distanza="" totali="" vvjaġġata="" u="" n-numru="" tat-trobbija="" fl-oft="" wara="" l-amministrazzjoni="" ta="" 'cte,="" tg,="" u="" ht,="" u="" t-trattament="" tg-phg="" u="" tg-irg="" xejra="" lejn="" ir-reviżjoni="" tan-numru="" tat-trobbija="" fil-firien="" cums.="" ir-riżultati="" indikaw="" li="" tg="" kienet="" il-frazzjoni="" antidipressant="" bijoattiva="" dominanti="" separata="" minn="" cte,="" u="" phenylethanoid="" u="" iridoid="" glycosides="" kienu="" indispensabbli="" biex="" jeżerċitaw="" l-effett="" antidepressant="" tiegħu.="" barra="" minn="" hekk,="" ht="" intwera="" li="" huwa="" wieħed="" mill-metaboliti="" attivi="" ta="" 'tg="" in="">

B'mod konsistenti, it-tbatija minn CUMS żiedet b'mod sinifikanti l-livelli ta' CORT, CRF, ACTH, TNF- , IL-1 , u IFN- fis-serum u TNF- fl-ippokampus tal-firien meta mqabbla ma 'dawk tal-grupp ta' kontroll (p< 0.05),="" resulting="" in="" significant="" reductions="" (p="" <="" 0.05)="" in="" the="" levels="" of="" hippocampal="" 5-ht="" and="" bdnf="" (fig.="" 3).="" except="" for="" a="" non-significant="" difference="" in="" the="" level="" of="" hippocampal="" bdnf="" between="" flx="" and="" cums="" groups,="" the="" above-mentioned="" alterations="" in="" cums="" rats="" could="" be="" significantly="" reversed="" (p="" <="" 0.05)="" after="" administration="" of="" fluoxetine,="" cte,="" tg,="" and="" ht,="" indicating="" that="" cte,="" tg,="" and="" ht="" showed="" ameliorative="" effects="" on="" the="" hyperactivation="" of="" hpa="" axis,="" severe="" peripheral="" and="" neural="" inflammation,="" and="" deficiencies="" in="" 5-ht="" and="" bdnf.="" likewise,="" tg-irg="" and="" tgphg="" treatment="" significantly="" reduced="" the="" levels="" of="" serum="" cort,="" tnf-α,="" ifn-γ,="" and="" hippocampal="" tnf-α,="" and="" increased="" the="" level="" of="" hippocampal="" 5-ht="" in="" cums="" rats="" (p="" <="" 0.05).="" significant="" decreases="" (p="" <="" 0.05)="" in="" the="" levels="" of="" serum="" crf="" and="" acth="" were="" also="" observed="" in="" the="" tg-irg="" group="" compared="" with="" cums="" group.="" interestingly,="" the="" levels="" of="" serum="" cort,="" tnf-α,="" acth,="" and="" crf="" in="" tg-phg="" and="" tg-irg="" groups="" were="" significantly="" higher="" than="" those="" in="" the="" tg="" group="" (p="" <="" 0.05),="" and="" the="" levels="" of="" hippocampal="" 5-ht="" and="" bdnf="" exhibited="" the="" opposite="" expression="" pattern="" (p="" <="" 0.05).="" these="" results="" showed="" that="" the="" effects="" of="" tg-phg="" and="" tg-irg="" on="" the="" hyperactivity="" of="" the="" hpa="" axis,="" peripheral="" and="" neural="" inflammation="" and="" shortage="" of="" 5-ht="" were="" clearly="" inferior="" to="" tg,="" indicating="" that="" phenylethanoid="" and="" iridoid="" glycosides="" might="" exert="" synergistic="" effects="" on="" the="" above-mentioned="" multiple="">

TG u HT jirregolaw l-assi HPG u l-metaboliżmu tan-nukleotidi ċikliku fil-firien CUMS

Il-livelli ta 'T, GnRH, cAMP, u cGMP u l-proporzjon ta' cAMP u cGMP (cAMP/cGMP) fis-serum soġġett għal CUMS ġew imkejla, u r-riżultati huma murija fit-Tabella 4. Il-konċentrazzjonijiet ta 'T, GnRH, cAMP, u cAMP/cGMP fis-serum naqsu b'mod sinifikanti, u l-livell ta 'cGMP żdied b'mod sinifikanti (p <0.05) fil-grupp="" cums="" meta="" mqabbel="" mal-kontrolli,="" li="" jindika="" li="" suġġett="" għal="" cums="" irriżulta="" f'="" soppressjoni="" tal-assi="" hpg="" u="" disfunzjoni="" tal-metaboliżmu="" tan-nukleotidi="" ċikliku.="" meta="" mqabbel="" mal-grupp="" cums,="" ma="" kien="" hemm="" l-ebda="" tibdil="" sinifikanti="" fil-grupp="" flx.="" b'mod="" sorprendenti,="" wara="" t-trattament="" tg="" u="" ht,="" żidiet="" sinifikanti="" (p=""><0.05) ġew="" esebiti="" fil-livelli="" ta="" 'serum="" t,="" gnrh,="" camp,="" u="" camp/cgmp,="" filwaqt="" li="" l-livell="" ta'="" cgmp="" fis-serum="" tnaqqas="" b'mod="" sinifikanti="" (p="">< 0.05).="" dawn="" ir-riżultati="" indikaw="" li="" tg="" u="" ht="" irregolaw="" l-assi="" hpg="" u="" l-metaboliżmu="" tan-nukleotidi="" ċikliku,="" li="" kien="" nettament="" superjuri="" għall-fluoxetine="" ta="" 'kontroll="">

Fig. 3. Effetti ta’ frazzjonijiet differenti arrikkit bil-glycoside u HT fuq il-livelli ta’ CORT, ACTH, CRF, TNF-, IL-1, IFN- fis-serum u 5-HT, BDNF, TNF- fl-ippokampus tal-firien CUMS.

TG u HT itaffu l-infjammazzjoni ta 'grad baxx fil-kolon u t-tfixkil tal-barriera intestinali fil-firien CUMS

It-tbajja 'H & E intużat biex tiġi vvalutata l-ħsara morfoloġika tal-kolon, u ma ġew osservati l-ebda differenzi sinifikanti fil-kolon fost il-gruppi sperimentali (Fig. 4a). Barra minn hekk, ġew analizzati wkoll l-effetti ta 'TG u HT fuq l-infjammazzjoni fil-kolon u t-tfixkil tal-barriera intestinali (Fig. 4b-d). Meta mqabbla ma 'dawk tal-grupp ta' kontroll, in-numru ta 'ċelluli goblet u l-ħxuna tas-saff tal-mukus tnaqqsu fil-grupp CUMS. B'mod konsistenti, l-espressjoni tal-proteina ta' ZO-1, u l-livelli ta' IFN- u TNF- fil-kolon naqsu b'mod sinifikanti (p < 0.05)="" u="" żdiedu="" (p="">< {{="" {13}}.05),="" rispettivament,="" li="" jissuġġerixxi="" li="" għalkemm="" ma="" ġiet="" indotta="" l-ebda="" ħsara="" istoloġika="" ovvja,="" suġġett="" għal="" cums="" irriżulta="" f'infjammazzjoni="" ta="" 'grad="" baxx="" fil-kolon="" u="" tfixkil="" tal-barriera="" intestinali.="" wara="" trattament="" ta="" 'fluoxetine,="" tg,="" u="" ht,="" in-numru="" ta'="" ċelluli="" goblet="" u="" l-ħxuna="" tas-saff="" tal-mukus="" żdiedu,="" u="" l-livelli="" ta="" 'ifn-="" u="" tnf-="" tal-kolon="" tnaqqsu="" b'mod="" sinifikanti="" (p=""><0.05). barra="" minn="" hekk,="" tg="" u="" ht="" żiedu="" b'mod="" sinifikanti="" (p="">< 0.05)="" l-espressjoni="" tal-proteina="" ta="" 'zo-1="" għal="" livell="" simili="" għal="" dak="" tal-grupp="" ta'="" kontroll.="" dawn="" ir-riżultati="" wrew="" li="" tg="" u="" ht="" jistgħu="" itaffu="" l-infjammazzjoni="" ta="" 'grad="" baxx="" fil-kolon="" u="" t-tfixkil="" tal-barriera="" intestinali="" fil-firien="">

Tabella 4 Effetti ta 'TG, HT, jew fluoxetine fuq ormoni relatati mal-assi HPG u indiċijiet relatati mal-metaboliżmu tan-nukleotidi fis-serum tal-firien CUMS.

Effetti ta 'TG u HT fuq il-kompożizzjoni tal-mikrobijota tal-musrana

Wara li tneħħew sekwenzi mhux kwalifikati, inkisbu total ta' 1,874,721 qari effettivi. Ir-riżultati tad-diversità alfa (Fig. 5a) u d-diversità beta (Fig. 5b) wrew li għalkemm ir-rikkezza (Chao) u d-diversità (Shannon) tal-mikrobijota tal-musrana fil-kontenuti taċ-ċekali ma kinux differenti, l-istruttura ġenerali tal-mikrobijota tal-imsaren f' il-plott tal-analiżi tal-koordinati prinċipali (PCoA) indikat differenza impressjonanti bejn il-gruppi ta 'kontroll u CUMS. Barra minn hekk, it-trattament TG u HT żied b'mod sinifikanti r-rikkezza batterjali tal-firien CUMS u indotta differenzi mmarkati fil-plott tal-PCoA meta mqabbel ma 'dawk tal-firien CUMS, u wera xebh ċari mal-kontrolli, speċjalment meta t-TG ġie ttestjat.

Il-bidliet tassonomiċi fil-mikrobijota kkonfermaw aktar li TG eżerċita effett regolatorju drammatiku fuq il-kompożizzjoni tal-mikrobijota tal-musrana. Wara l-amministrazzjoni ta 'TG, l-abbundanza tal-maġġoranza tat-taxa mibdula fil-firien CUMS ġiet maqluba għal livell simili għal dawk tal-grupp ta' kontroll. Tnaqqis sinifikanti (14.2 fil-mija, p <{2}}.05) u="" arrikkiment="" (53.6="" fil-mija,="">< 0.05)="" in="" the="" abundances="" of="" the="" phylum="" firmicutes="" and="" bacteroidetes="" were="" observed="" in="" the="" tg="" group="" compared="" with="" cums="" group="" (fig.="" 5c),="" respectively.="" consistently,="" at="" the="" family="" level="" (supplementary="" table="" s4),="" tg="" decreased="" the="" abundances="" of="" ruminococcaceae="" (phylum="" firmicutes)="" and="" peptococcaceae="" (phylum="" firmicutes)="" by="" 33.9%="" and="" 82.9%,="" respectively,="" compared="" with="" cums="" group="" (p="" <="" 0.05).="" conversely,="" significant="" enrichments="" in="" the="" abundances="" of="" family="" erysipelotrichaceae="" (phylum="" firmicutes,="" 78.4%,="" p="" <="" 0.05)="" and="" muribaculaceae="" (phylum="" bacteroidetes,="" 77.3%,="" p="" <="" 0.05)="" existed="" in="" tg="" group.="" consistently="" at="" the="" genus="" level="" (fig.="" 5d),="" the="" abundances="" of="" anaerotruncus,="" harryflintia,="" ruminiclostridium_9,="" unclassified_f_ruminococcaceae="" (members="" of="" the="" family="" ruminococcaceae),="" and="" peptococcus="" (a="" member="" of="" the="" family="" peptococcaceae)="" were="" significantly="" decreased="" while="" norank_f_erysipelotrichaceae,="" allobaculum,="" dubosiella="" (members="" of="" the="" family="" erysipelotrichaceae)="" and="" norank_f_muribaculaceae="" (a="" member="" of="" the="" family="" muribaculaceae)="" displayed="" higher="" abundances="" in="" tg="" group="" than="" those="" of="" cums="" group="" (p="">< 0.05).="" in="" addition,="" tg="" decreased="" the="" abundances="" of="" tyzzerella_3,="" acetatifactor,="" and="" norank_f_lachnospiraceae="" assigned="" to="" the="" family="" lachnospiraceae="" (p="" <="" 0.05),="" although="" the="" abundance="" of="" the="" family="" lachnospiraceae="" was="" similar="" across="" all="" experimental="" groups.="" unlike="" tg,="" ht="" decreased="" the="" abundances="" of="" partially="" altered="" taxa="" induced="" by="" cums,="" including="" the="" family="" ruminococcaceae,="" 3="" genera="" (anaerotruncus,="" harryflintia,="" and="" ruminiclostridium_9)="" assigned="" to="" the="" family="" ruminococcaceae="" and="" 2="" genera="" (tyzzerella_3,="" acetatifactor)="" assigned="" to="" the="" family="" lachnospiraceae.="" additionally,="" converse="" variations="" were="" observed="" in="" the="" abundances="" of="" ruminococcaceae_ucg_013="" and="" streptococcus="" in="" the="" ht="" group.="" these="" results="" indicated="" that="" tg="" and="" ht="" exerted="" clear="" differences="" in="" the="" regulation="" of="" gut="" microbiota="" composition,="" and="" the="" effect="" of="" tg="" was="" superior="" to="" that="" of="" tg="" especially="" in="" altering="" the="" genera="" assigned="" to="" the="" family="" erysipelotrichaceae,="" peptococcaceae,="" and="">

Fig. 4. Effetti ta' TG, HT, jew fluoxetine fuq il-bidliet morfoloġiċi, espressjoni tal-proteina ZO-1, konċentrazzjonijiet ta' IFN-, u TNF- fil-kolon tal-firien CUMS.

Analiżi ta' korrelazzjoni ta' ġeneri mikrobjali mibdula affettwati minn TG u HT, ormoni relatati mal-assi HPA, ċitokini pro-infjammatorji, 5-HT u BDNF

Biex jiġu eluċidati l-assoċjazzjonijiet bejn il-bidliet fil-kompożizzjoni tal-mikrobijota tal-musrana affettwati minn TG u HT, u karatteristiċi korrispondenti relatati mad-dipressjoni, saret l-analiżi ta 'korrelazzjoni ta' Spearman. Kif muri fil-Figura 6, il-livelli ta' 5-HT u BDNF fl-ippokampus kienu biss korrelatati b'mod pożittiv b'mod sinifikanti ma' norank_f_Muribaculaceae. Inkella, jistgħu jiġu identifikati korrelazzjonijiet ċari bejn il-ġeneri mikrobjali mibdula u l-ormoni relatati mal-assi HPA. B'mod partikolari, Dubosiella, norank_f_Muribaculaceae, norank_f{_ Erysipelotrichacea, u Peptococcus kienu relatati b'mod qawwi mal-funzjoni tal-assi HPA. Serum CORT, CRF, u ACTH kellhom korrelazzjonijiet negattivi ma' Dubosiella, norank_f_Muribaculaceae, u norank_f{_Erysipelotrichacea, u assoċjazzjonijiet pożittivi ma' Peptococcus. Barra minn hekk, Dubosiella u norank_f{_ Erysipelotrichacea urew assoċjazzjonijiet negattivi ma' IFN- u hippocampal TNF- tal-kolon, filwaqt li relazzjonijiet simili kienu jeżistu f'Allobaculum, Harryfinita, u serum u TNF-hippocampal, kif ukoll fin-norank _f_Lachnospiracea, u IFN- u TNF- fis-serum. B'kuntrast, Peptococcus kien assoċjat b'mod pożittiv ma 'TNF-koloniku u TNF- serum. Bl-istess mod, norank_f{_Muribaculaceae kien relatat b'mod pożittiv ma' IFN- u TNF- fis-serum. Dawn ir-riżultati indikaw li l-ġeneri mikrobjali mibdula, speċjalment ċerti ġeneri li jappartjenu għall-familja Erysipelotrichaceae, Peptococcaceae, u Muribaculaceae, li kienu affettwati speċifikament minn TG, urew assoċjazzjonijiet qawwija ma 'ormoni relatati mal-assi HPA u ċitokini pro-infjammatorji simultanjament, li juru r-rwol kritiku. tal-mikrobijota tal-musrana fir-regolazzjoni tal-funzjoni tal-assi HPA u l-infjammazzjoni.

cistanche propiedades

TG u HT jinibixxu l-metaboliżmu tryptophan-kynurenine fil-firien CUMS

Ġew determinati l-effetti ta 'TG u HT fuq il-livelli ta' tryptophan u kynurenine fis-serum tal-firien, kif ukoll l-espressjoni ta 'IDO1 fil-kolon u l-ippokampus. Kif muri f'Fig. 7 u Fig. 8, meta mqabbel ma 'dak tal-grupp ta' kontroll, il-livell ta 'tryptophan fis-serum kien imnaqqas b'mod sinifikanti fil-grupp CUMS, b'kuntrast mal-livell miżjud ta' kynurenine u proporzjon kynurenine-to-tryptophan (Kyn /Trp) u espressjoni tal-proteina IDO1 fil-kolon u l-ippokampus. Meta mqabbel mal-grupp CUMS, is-serum Kyn/Trp fil-grupp FLX kien imnaqqas b'mod sinifikanti (p< 0.05).="" tg="" and="" ht="" treatment="" resulted="" in="" a="" significant="" increase="" in="" the="" serum="" tryptophan="" level="" in="" cums="" rats="" (p="" <="" 0.05),="" and="" a="" decrease="" in="" the="" levels="" of="" serum="" kynurenine="" and="" kyn/trp="" (p="" <="" 0.05).="" in="" addition,="" tg="" significantly="" inhibited="" the="" expression="" of="" ido1="" protein="" in="" the="" colon="" of="" cums="" rats="" (p="" <="" 0.05),="" while="" a="" non-significant="" difference="" in="" the="" expression="" of="" ido1="" protein="" in="" the="" hippocampus="" was="" observed="" between="" cums="" and="" tg="" groups.="" however,="" the="" effect="" of="" ht="" on="" the="" expression="" of="" ido1="" protein="" in="" the="" colon="" and="" hippocampus="" was="" contrary="" to="" that="" of="" tg,="" indicating="" that="" tg="" and="" ht="" inhibited="" tryptophan-kynurenine="" metabolism="" by="" decreasing="" the="" expression="" of="" ido1="" in="" the="" colon="" and="" hippocampus="" of="" cums="" rats,="">

Fig. 5. Analiżi tad-diversità, il-kompożizzjoni, u d-differenzi tal-mikrobijota tal-musrana f'kampjuni taċ-ċekali.

Diskussjoni

F'dan l-istudju, intużaw żewġ mudelli ta 'annimali differenti biex jiġu skrinjati għal komposti bijoattivi f'CT li jtaffu l-imġieba bħal dipressjoni għall-ewwel darba. TP u TO x'aktarx kienu ingredjenti ineffettivi f'CTE, filwaqt li TG wera l-aktar potenzjal fit-trattament tad-dipressjoni. Studji preċedenti dwar CT, kif ukoll pjanti Cistanche, iffokaw l-aktar fuq il-bijoattivitajiet ta 'phenylethanoid glycosides bl-ogħla kontenuti u ttraskuraw l-importanza ta' iridoid glycosides u ingredjenti oħra inqas abbundanti. Interessanti, l-istudju tagħna wera li phenylethanoid u iridoid glycosides wera effetti sinerġistiċi fuq l-iperattività tal-assi HPA, infjammazzjoni periferali u newrali severa, u nuqqasijiet fl-hippocampal 5-HT u BDNF, li jistgħu jkunu r-raġuni kritika għall-antidipressant vantaġġuż. effett ta 'TG. Dawn ir-riżultati jissuġġerixxu aktar il-karatteristiċi b'ħafna komponenti u multi-mira tal-mediċina tal-ħxejjex u jfakkruna li l-kostitwenti b'livelli aktar baxxi, anke ingredjenti traċċi jista 'wkoll ikollhom rwol ewlieni fl-effetti farmakoloġiċi.

L-istress kroniku jinduċi l-iperattività tal-assi HPA, li tippromwovi l-bidu tad-dipressjoni, kif ukoll is-soppressjoni tal-assi HPG permezz ta 'rilaxx ta' GnRH imnaqqas u/jew sensittività pitwitarja ta 'GnRH (Kirby et al., 2009). Sadanittant, cAMP u cGMP huma ċentri intermedji importanti li jiddependu fuq ħafna newrotrasmettituri u ormoni biex jeżerċitaw l-effetti fiżjoloġiċi tagħhom (Siawrys et al., 2002). Studji riċenti wrew b'mod konsistenti li l-okkorrenza ta 'defiċjenza tal-kliewi-yang hija relatata mill-qrib ma' disfunzjoni tal-assi tal-glandola hypothalamus-pitwitarja-mira (Zhang et al., 2019). Fis-sindromu tad-defiċjenza tal-kliewi-yang, ġew osservati wkoll tnaqqis notevoli fil-livelli ta' cAMP fis-serum u cAMP/cGMP. F'dan l-istudju, sibna li TG jista 'jinibixxi l-livelli tas-serum CORT, CRF, u ACTH, u jżid il-kontenut tas-serum T u GnRH fil-firien CUMS, li jindika l-irkupru ta' disfunzjoni tal-assi HPA u HPG wara l-amministrazzjoni ta 'TG. Barra minn hekk, TG qaleb tnaqqis sinifikanti fil-livell ta 'cAMP/cGMP fis-serum fil-firien soġġetti għal CUMS. Għalhekk, il-mekkaniżmu sottostanti potenzjali ta 'CT fit-trattament tad-depressjoni u d-defiċjenza tal-kliewi-yang jista' jkun parzjalment simili u jistħoqqlu li jiġi esplorat aktar. Barra minn hekk, il-produzzjoni tax-xewqa u l-imġieba sesswali hija proċess ta 'rifless newrali kumpless. L-ormoni sesswali huma sorsi ewlenin ta 'eċċitament sesswali ċentrali, u n-nuqqas ta' ormoni sesswali jistgħu jikkawżaw inqas xewqa sesswali jew disfunzjoni sesswali (Holloway and Wylie, 2015). B'mod partikolari, 5-HT eċċessiv jinibixxi r-rilaxx ta 'GnRH, li hija raġuni dominanti għall-okkorrenza ta' disfunzjoni sesswali kronika wara trattament fit-tul bl-SSRIs (Prasad et al., 2015). Fl-istudju tagħna, fluoxetine (rappreżentant ta 'SSRIs) ma kienx effettiv fid-disfunzjoni tal-assi HPG. Madankollu, għalkemm TG tejbet b'mod sinifikanti l-livell ta' 5-HT fl-ippokampus, ġew osservati wkoll alterazzjonijiet simili fil-livelli ta' T u GnRH fis-serum, u b'hekk tjiebu s-soppressjoni tal-assi HPG. Dawn ir-riżultati juru l-vantaġġ distint ta 'CT fit-trattament tad-dipressjoni, u l-mekkaniżmu intrinsiku responsabbli għal dawn l-effetti jeħtieġ li jiġi studjat aktar.

Evidenza dejjem akbar wriet li l-imsaren huwa mira potenzjali għat-trattament ta 'mard kroniku bl-użu ta' komposti naturali b'bijodisponibilità baxxa (Zhou et al., 2020). Riċerka reċenti (Wei et al., 2019) indikat li t-trattament CUMS jinduċi alterazzjonijiet tal-mikrobijoma fekali u difetti fil-barriera intestinali, li jiffaċilitaw l-invażjoni batterjali fil-mukuża tal-kolon u jaggravaw reazzjonijiet infjammatorji fil-kolon. B'mod konsistenti ma' dak ir-rapport, ir-riżultati tagħna wrew li 4 ġimgħat ta 'espożizzjoni għal CUMS wasslu għal tnaqqis estensiv tan-numru ta' ċelluli goblet u ħxuna tas-saff tal-mukus fil-kolon tal-firien, kif ukoll il-bidu ta 'tfixkil tal-barriera intestinali rappreżentata minn żieda fil-permeabilità tal-musrana, li kienet determinata minn kejl tal-proteina ZO-1. Barra minn hekk, ġew osservati espressjonijiet miżjuda ta 'fatturi pro-infjammatorji (bħal TNF- u IFN- ) fil-kolon. Għaldaqstant, dawn is-sejbiet indikaw li għalkemm ma ġiet indotta l-ebda ħsara istoloġika ovvja, it-trattament CUMS beda infjammazzjoni tal-kolon u tfixkil tal-barriera intestinali. Studji preċedenti rrappurtaw li CT eżerċitat effikaċja mtejba fil-prevenzjoni tal-kolite indotta mid-DSS fil-ġrieden (Jia et al., 2014). Inkonsistenti, TG intwera wkoll li ttaffi l-infjammazzjoni ta 'grad baxx fil-kolon u t-tfixkil tal-barriera intestinali tal-firien CUMS, li jenfasizza l-potenzjal tiegħu għat-trattament kliniku ta' mard relatat mal-infjammazzjoni tal-kolon.

Studji estensivi wrew ukoll li r-relazzjoni li torbot il-mikrobijota tal-imsaren commensal, l-assi HPA u l-infjammazzjoni hija kumplessa u għandha rwol kruċjali fl-iżvilupp tad-dipressjoni (Misiak, et al., 2020). Alterazzjonijiet fil-kompożizzjoni tal-mikrobijota tal-musrana jistgħu jikkontribwixxu għar-rilaxx imtejjeb ta 'ċitokini u s-sintesi ta' molekuli bijoattivi żgħar (Du et al., 2020). Ċerti ċitokini (bħal TNF-) jistgħu jgħaddu mill-barriera tad-demm-moħħ u huma attivaturi qawwija tal-assi HPA (Misiak et al., 2020). Min-naħa tagħha, l-iperattivazzjoni tal-assi HPA tista 'tikkontribwixxi għal disbiożi tal-mikrobijota tal-musrana, infjammazzjoni kronika fil-kolon, u permeabilità tal-musrana mibdula (Misiak et al., 2020). B'mod konsistenti ma 'studji preċedenti, il-modifika tal-mikrobijota tal-musrana medikata b'TG x'aktarx hija responsabbli għall-effetti ta' titjib tagħha fuq id-dipressjoni. Aħna osservajna li TG qaleb l-abbundenzi ta 'taxa mikrobjali f'livelli differenti fil-firien soġġetti għal CUMS għal livell simili għal dawk tal-kontrolli. B'mod partikolari, il-ġeneri mibdula ewlenin li jappartjenu għall-familja Peptococcaceae, Erysipelotrichaceae, u Muribaculaceae instabu li huma korrelatati ħafna mal-assi HPA u l-infjammazzjoni. B'mod konsistenti mar-riżultati tagħna, il-familja Peptococcaceae, Erysipelotrichaceae u Muribaculaceae ġew irrappurtati li għandhom rwol importanti fiż-żamma tal-integrità tal-barriera tal-mukuża u l-okkorrenza ta 'infjammazzjoni (Kankoush, 2015; Borton et al., 2017; Zhang et al., 2020). Għalhekk, konġejna li TG jista 'jimmodera l-abbundenzi ta' xi ġeneri assenjati lill-familja Erysipelotrichacea, Peptococcaceae, u Muribaculaceae, sussegwentement itaffu l-infjammazzjoni ta 'grad baxx fil-kolon, iperattività tal-assi HPA, u tfixkil tal-integrità tal-barriera mukoża. Interessanti, fl-istudju tagħna, ġeneru wieħed biss jismu nor ank_f{_Muribaculaceae kien korrelatat ma' 5-HT u BDNF fl-hippocampus. Il-mekkaniżmu speċifiku tar-relazzjoni għadu mhux ċar u jeħtieġ li jiġi skrutinizzat aktar. Inkella, is-sejbiet jissuġġerixxu wkoll li huwa estremament diffiċli għall-maġġoranza tal-ġeneri mibdula kkawżati minn TG li jaffettwaw direttament il-livelli ta' 5-HT fl-ippokampus. Biex tispjega kif il-bidliet fil-kompożizzjoni tal-mikrobijota tal-musrana jinfluwenzaw il-livell ta' 5-HT tal-ippokampju wara t-trattament ta' TG, ir-relazzjoni kkomplikata li tgħaqqad il-metaboliżmu tat-triptofan, l-assi HPA, ċitokini infjammatorji, u 5-HT ġibdet l-attenzjoni tagħna. Tryptophan huwa aċidu amminiku essenzjali għall-bnedmin u inqas minn 1 fil-mija jintuża fis-sintesi tal-proteini, bil-maġġoranza (aktar minn 90 fil-mija) jiġu kkonvertiti minn IDO1 u tryptophan 2,3-dioxygenase 2 (TDO2) f'kynurenines, u bejn wieħed u ieħor 5 fil-mija qed jiġu misjuqa minn tryptophan hydroxylase fil-mogħdija tas-serotonin (Duan, et al. 2018). Il-livell ta' 5-HT fil-moħħ jiddependi ħafna fuq id-disponibbiltà ta' triptofan periferali, peress li t-triptofan jiġi ttrasportat fil-moħħ permezz ta' trasportaturi newtrali ta' amino acid (Duan et al., 2018). IDO1, l-enzima li tillimita r-rata fl-ewwel pass tal-passaġġ tal-kynurenine, hija primarjament indotta minn IFN- , u ċitokini pro-infjammatorji oħra, bħal IL-1 u TNF- (Kennedy et al., 2017), li ntwerew li huma assoċjati mal-mikrobijota tal-musrana fl-istudju tagħna. Kif irrappurtat, aktar tryptophan jiġi metabolizzat permezz tal-mogħdija tal-kynurenine, u b'hekk titnaqqas b'mod kompetittiv il-konverżjoni ta' tryptophan għal 5-HT, u tingħaqad mat-tnaqqis 5-HT komunement misjub fid-dipressjoni (O'Mahony et al., 2015). Għalhekk, livelli aktar baxxi ta 'triptofan u Kyn/Trp ogħla huma komuni u jikkoinċidu ma' riskju akbar ta 'burdata depressiva. Wara l-amministrazzjoni ta 'TG, l-espressjoni żejda ta' IDO1 fil-kolon ġiet inibita, li rriżultat f'livelli ogħla ta 'triptofan fis-serum u tnaqqis fis-serum Kyn/Trp, li żvelat ir-rabta potenzjali bejn il-mikrobijota tal-musrana u l-livell tal-ippokampus 5-HT affettwat minn TG. Sadanittant, BDNF, membru tal-familja newrotrofina, huwa essenzjali għad-divrenzjar taċ-ċelluli, is-sopravivenza newronali, il-formazzjoni tas-sinapsi u l-proċessi ta 'newroplastiċità fid-dipressjoni (Greenberg et al., 2009). Studji reċenti wrew li BDNF instab li huwa assoċjat mill-qrib mal-funzjoni tal-barriera tal-mukuża intestinali u l-mikrobijota tal-musrana (Maqsood and Stone, 2016). Barra minn hekk, il-bidliet fil-mikrobijota tal-musrana ġew irrappurtati li għandhom il-potenzjal li jżidu l-livelli ta 'espressjoni ta' BDNF u b'hekk jinfluwenzaw l-iżvilupp ta 'imġieba bħal depressiva (Du et al., 2020). Madankollu, simili għall-varjazzjoni 5-HT, kien estremament impossibbli għall-biċċa l-kbira tal-ġeneri mibdula kkawżati minn TG fl-istudju tagħna li jaffettwaw direttament il-livelli ta 'BDNF fl-ippokampus, u l-konnessjoni molekulari intrinsika u l-mekkaniżmu jeħtieġu aktar eżami.

B'kuntrast, HT, metabolit tal-mikrobijota tal-musrana ta 'TG, wera wkoll effett antidipressant fl-istudju preżenti, li huwa konsistenti mal-attività newroprotettiva vantaġġjata tiegħu (Hu et al., 2014). Ta’ tħassib, HT jista’ wkoll jimmodera ċitokini pro-infjammatorji, ormoni relatati mal-assi HPA u HPG, u konċentrazzjonijiet ta’ 5-HT ta’ l-ippokampju għal livell simili għal dak tal-kontrolli fil-firien CUMS, filwaqt li ħafna mill-ġeneri mikrobjali mibdula affettwati. minn HT kellu korrelazzjonijiet dgħajfa ma 'l-indiċi fiżjoloġiċi ta' hawn fuq, li jissuġġerixxi li l-mikrobijota tal-musrana tista 'ma tkunx il-mira tal-attività antidipressanti ta' HT. Barra minn hekk, HT irażżan l-espressjoni żejda ta 'IDO1 fl-ippokampus iżda mhux fil-kolon, akkumpanjata minn livelli miżjuda ta' triptofan fis-serum. L-okkorrenza tad-differenzi apparenti bejn TG u HT tista 'tkun dovuta għall-assorbiment eċċellenti ta' HT fid-demm u l-kapaċità li HT jaqsam il-barriera tad-demm-moħħ (Robles-Almazan et al., 2018), li jindika wkoll li l- kapaċità metabolika qawwija tal-mikrobijota tal-musrana hija speċjalment importanti fl-attività antidipressanti ta 'TG, minbarra l-funzjonijiet fiżjoloġiċi tagħha. Għalhekk, aħna ppruvajna b'mod preliminari li l-interazzjoni bidirezzjonali tal-fitokimiċi u l-mikrobijota tal-musrana għandha rwol kritiku fit-trattament tad-dipressjoni bl-amministrazzjoni ta 'TG (kif muri fil-Fig. 9).

Supplimenti tad-dieta Cistancheplay arwol kritiku fit-trattament tad-dipressjoni.

Għal aktar informazzjoni, jekk jogħġbok ikklikkja

Konklużjoni

Fil-qosor, TG kien prinċipalment responsabbli għall-attività antidipressanti ta 'CT, li jirrifletti fl-effetti sinerġistiċi ta' phenylethanoid u iridoid glycosides fuq l-iperattivazzjoni tal-assi HPA, infjammazzjoni periferali u newrali severa, u nuqqasijiet f'5-HT u BDNF f' l-ippokampus. Barra minn hekk, il-mekkaniżmu molekulari potenzjali tal-effett antidipressant ta 'TG inkiseb permezz tal-interazzjoni bidirezzjonali tal-fitokimiċi u l-mikrobijota tal-musrana. Barra minn hekk, it-titjib tal-assi HPG mrażżna u l-anormalità tan-nukleotidi ċikliku minn TG u HT, li ma kinux regolati minn trattament b'SSRIs rappreżentati minn fluoxetine, indika l-vantaġġ distint ta 'CT fit-trattament tad-dipressjoni. Modulazzjonijiet bħal dawn jirrappreżentaw strateġija promettenti għat-trattament tad-dipressjoni bl-użu ta 'CT u mediċini erbali tradizzjonali simili.