Effett Terapewtiku Ta 'Cistanche Deserticola Fuq id-Defekazzjoni fil-Mudell tal-Firien ta' Stitikezza Senile
Mar 27, 2022
Kuntatt:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791
Xia Zhang, Fa-Juan Zheng, Zhen Zhang
Astratt
SFOND
Stitikezza hija waħda mill-mard funzjonali gastrointestinali kroniku. Taffettwa serjament il-kwalità tal-ħajja. Cistanche deserticola (C. deserticola) jista 'jikkura l-istitikezza ovvjament, iżda l-mekkaniżmu tiegħu ma ġiex iċċarat. Supponejna li l-mekkaniżmu tiegħu tejjeb il-motilità intestinali billi stimula l-interstizjali Cajalcells (ICC). L-attivazzjoni tar-riċettur C-kit fuq il-wiċċ tal-ICC hija relatata mill-qrib mal-funzjoni tal-ICC, u l-mogħdijiet tas-sinjalar tal-fattur taċ-ċelloli staminali (SCF)/C-kit għandhom rwol importanti fih. Biex tinvestiga l-mekkaniżmu ta 'kif C. deserticola tittratta l-istitikezza, dan l-istudju kellu l-għan li jistabbilixxi mudell ta' stitikezza fil-firien u jesplora r-rwol tal-mogħdija ta 'sinjalazzjoni SCF/C-kit fit-trattament.
GĦAN
Biex tesplora l-mogħdijiet ta 'sinjalazzjoni SCF/C-kit fir-rwol ta' C. deserticola trattament ta 'stitikezza minn mudell ta' far ta 'stitikezza.
METODI
Tmienja u erbgħin 8-mo-qodma firien Sprague–Dawley ġew maqsuma f'4 gruppi b'metodu ta' piż każwali: Grupp normali (n=12), grupp mudell (n=12), grupp C. deserticola (n=12) u grupp li jimblokka (n=12). Il-grupp normali rċieva saline bygavage normali; il-grupp mudell irċieva loperamide bil-gavage; il-grupp imblokkatur irċieva loperamide u C. deserticola permezz ta 'gavage, u STI571 ġie injettat intraperitoneally. Matul it-trattament, il-piż, il-granuli tal-ippurgar, u l-kwalità tal-ippurgar ġew irreġistrati kull 10 d. Fl-20 jum wara l-induzzjoni tal-mudell, it-tessuti tal-kolon ta 'kull grupp tneħħew. It-tbajja' ta' ematossilin u eosina ntużaw biex jiġu osservati bidliet patoloġiċi. Livelli ta 'espressjoni ta' ġeni SCF, C-kit, u Aquaporin ġew skoperti permezz ta 'immunohistochemistry, western blotting, u reazzjoni kwantitattiva fil-katina tal-polimerażi f'ħin reali. Il-mitokondrija epiteljali tal-kolon u ċ-ċelluli goblet ġew osservati permezz ta 'mikroskopija elettronika ta' trasmissjoni.
RIŻULTATI
Meta mqabbel mal-grupp normali, hekk kif it-trattament mexa 'l quddiem, il-piż tal-firien fil-gruppi tal-mudell u tal-imblokkaturi naqas b'mod sinifikanti, il-piż tal-ippurgar naqas, u l-kwalità tal-ippurgar kienet niexfa (P <{{0}}.{{6} }5).="" c.="" deserticola="" qalbet="" it-tnaqqis="" fil-piż="" tal-ġisem="" u="" l-piż="" tal-ippurgar="" u="" tejbet="" il-kwalità="" tal-ippurgar.="" l-analiżi="" istopatoloġika="" indikat="" li="" l-epitelju="" tal-mukuża="" tal-kolon="" fil-grupp="" mudell="" kien="" inkomplet,="" u="" l-arranġament="" tal-glandoli="" kien="" irregolari="" jew="" bil-ħsara.="" it-trattament="" b'c.="" deserticola="" tejbet="" l-integrità="" u="" l-kontinwità="" taċ-ċelluli="" epiteljali="" u="" l-arranġament="" regolari="" tal-glandoli.="" l-aġenti="" ta="" 'l-imblukkar="" inibdew="" l-effetti="" ta'="" c.="" deserticola="" immunohistochemistry="" u="" reazzjoni="" kwantitattiva="" fil-katina="" tal-polimerażi="" f'ħin="" reali="" wrew="" li="" l-espressjoni="" ta="" 'scf="" u="" c-kitprotein="" jew="" ġeni="" fit-tessut="" tal-kolon="" tal-grupp="" mudell="" naqset="" (p=""><0.05), filwaqt="" li="" t-trattament="" b'c.="" deserticola="" żiedet="" l-espressjoni="" tal-proteina="" jew="" tal-ġeni="" (p=""><0.05).western blotting="" wera="" li="" l-espressjoni="" ta="" 'aquaporin="" apq3="" żdiedet,="" filwaqt="" li="" l-espressjoni="" ta'="" cx43="" naqset="" fil-grupp="" mudell.="" trattament="" b'espressjoni="" c.="" deserticolainhibited="" ta="" 'apq3="" u="" espressjoni="" promossa="" ta'="" cx43.="" il-mikroskopija="" tat-trażmissjoni="" elettronika="" wriet="" li="" l-mitokondrija="" tal-epitelju="" tal-kolon="" fil-grupp="" tal-mudell="" kienu="" minfuħin="" u="" rranġati="" b'mod="" diżordinat,="" u="" l-mikrovilli="" kienu="" sparse.="" il-kundizzjoni="" kienet="" aħjar="" fil-grupp="" c.="" deserticola.="" ġrieden="" ittrattati="" bl-imblokkatur="" sti571="" ikkonfermaw="" li="" l-imblukkar="" tal-mogħdija="" scf/c-kit="" inibixxi="" t-titjib="" tal-istitikezza="" minn="" c.="">
KONKLUŻJONI
C. deserticola tejbet id-defekazzjoni fil-firien bi stitikezza, u l-passaġġ SCF/C-kitsignaling, li huwa rabta ewlenija tal-funzjoni ICC, kellha rwol importanti fit-trattament.
Kliem Ewlenin:Cistanche deserticola; Stitikezza senile; Fatturi taċ-ċelloli staminali; C-kit
materja prima friska ta' cistanche
INTRODUZZJONI
Stitikezza senile (SC) hija waħda mill-mard funzjonali gastrointestinali kroniku komuni f'pazjenti ġerjatriċi, li jinduċi jew jaggrava avvenimenti ċerebrovaskulari u mard ieħor u jaffettwa serjament il-kwalità tal-ħajja tal-popolazzjoni anzjana[1,2].Skond il-mediċina tradizzjonali Ċiniża, il-prinċipali etjoloġija u patoġenesi ta 'SCare sħana gastrointestinali, defiċjenza ta' Yin u Jin, u t-tixrib intestinali[3,4], filwaqt li Cistanche deserticola (C. deserticola) jista 'jsaħħan il-kliewi u jirrilassaw l-imsaren. Ir-riċerkaturi rrappurtaw li l-effett ta' intestinali it-titjib tal-motilità u t-trattament tal-SC huwa ċar, iżda l-mekkaniżmu tiegħu ma ġiex iċċarat[5,6]. Interstizjali Cajalcells (ICCs) huma tip speċjali ta 'ċelluli mesenchymali fil-passaġġ gastrointestinali. L-attivazzjoni tar-riċettur C-kit fuq il-wiċċ ta' ICCs hija relatata mill-qrib mal-proliferazzjoni, id-divrenzjar u l-funzjoni taċ-ċelluli. ICCs jipparteċipaw fil-patoġenesi ta 'ħafna disfunzjonijiet tal-mutur gastrointestinali[7,8]. L-attivazzjoni tas-C-kit tiddependi fuq l-irbit tal-fattur taċ-ċelluli staminali ligand tiegħu (SCF)[9]. Biex tinvestiga l-effett u l-mekkaniżmu ta 'azzjoni ta'C. deserticola fuq SC, dan l-istudju kellu l-għan li jistabbilixxi mudell SC fil-firien indotti bil-byloperidol biex jesplora r-rwol tal-mogħdija ta 'sinjalazzjoni SCF/C-kit fit-trattament ta' stitikezza minn C. deserticola.
MATERJALI U METODI
Materjali sperimentali
Annimali esperimentali:L-annimali sperimentali kienu 48 firien Sprague Dawley ta' 8-mo-qodma maskili li jiżnu 500-550 g; kollha mixtrija minn Changsha Tianqin BiotechnologyCo. Ltd Il-firien tkabbru fil-laboratorju tal-annimali ta 'Chongqing Weisiteng BiomedicalTechnology Co. Ltd., mogħtija dawl normali ta' ġurnata u bil-lejl, ikel u xorb. Il-proċeduri kollha kienu konformi mal-linji gwida ta 'ġestjoni maħruġa mill-Kumitat tal-Etika tal-Isptar tal-Mediċina Tradizzjonali Ċiniża ta' Chongqing.
Reaġenti primarji:Ir-reaġenti primarji kienu jinkludu loperamide (Sigma, St. Louis, MO, l-Istati Uniti), C. deserticola minn Hubei Jurui Traditional Chinese Medicine DecoctionCo. Ltd., STI571 minn Chinese Selleck Co. Ltd., u SCF, C-kit, connexin 43 (Cx43), aquaporin 3 (AQP3) u antikorpi -actin (Abcam, Cambridge, MA, Stati Uniti), PrimeScript II 1st Strand cDNA Kit ta' Sintesi u Premix Taq™ (Ex Taq™ Verżjoni 2.0)(Takara Co. Ltd., Ġappun).
supplimenti ta 'estratt ta' ħwawar cistanche
Metodi
Preparazzjoni u raggruppament tal-mudell SC:Biex tiġi evitata l-influwenza ta 'fatturi ta' konfużjoni bħall-piż tal-ġisem fuq ir-riżultati sperimentali, il-firien ġew raggruppati bl-addoċċ bil-metodu ta 'grupp każwali blokk. Tmienja u erbgħin firien ġew mitmugħa b'mod adattiv għal ġimgħa 1, u l-firien kienu nnumerati f'ordni ta 'piż minn ħfief għal tqal. Skont l-ordni tal-piż tal-ġisem, il-firien kienu maqsuma fi 12-il żona (il-piż tal-firien f'kull żona kien simili), b'4 firien f'kull żona. It-12-il żona kienu maqsuma f'4 gruppi ta '12 (normali, mudell, C. deserticola, u blocker). Il-firien fil-grupp mudell ingħataw loperamide (0.0625/100 g, 10 mL/kg) bil-gavage. L-ewwel doża gavage ġiet irdoppjata, u l-mediċina ngħatat fl-10:00 kuljum, darba kuljum għal 20 jum konsekuttiv. Il-grupp normali ngħata l-istess ammont ta’ salina normali permezz ta’ gavage. Barra minn hekk, il-grupp tal-mudell ġie ttrattat b'C. deserticola (0.156 g/100 g, 10 ml/kg) bil-gavage. Il-grupp tal-imblokkatur ingħata C. deserticola (0.156 g/100 g, 10 mL/kg) bil-gavage u STI571 (25 mg/mL, 1 mL/kg) b'injezzjoni intraperitoneali. Matul l-esperiment, il-piż tal-ġisem, il-piż tal-ippurgar u l-kundizzjoni tal-ippurgar ġew irreġistrati kull 10 d. L-ebda accidentaldeath ma seħħet fi kwalunkwe mill-firien. Għoxrin jum wara, il-firien inqatlu, u t-tessut tekoloniku tneħħa għall-eżami u l-preservazzjoni tan-nitroġenu likwidu. Il-partijiet li kien fadal ġew iffissati u inkorporati.
Analiżi istopatoloġika:Il-firien sajmu matul il-lejl ġew anestetizzati b'injezzjoni intraperitoneali b'7 fil-mija chloral hydrate (5 mL/kg) l-għada. L-addome infetaħ biex jissepara t-tessut tal-kolon, u 8-10 mm tal-kolon tneħħa. Il-kontenut intestinali tneħħa billi tħawwad bil-mod f'polybutylenesuccinate imkessaħ minn qabel u ffissat għal 24 siegħa f'soluzzjoni ta 'paraformaldehyde fissative ta' 4 fil-mija. Twettqet inkorporazzjoni konvenzjonali tal-paraffin. Sezzjonijiet tat-tessuti (5 μm) tneħħew għat-tbajja' ta' hematoxylin u eosin, u l-morfoloġija istopatoloġika ġiet osservata taħt mikroskopju.
Sejbien ta' espressjoni ta' SCF u C-kit permezz ta' tbajja' immunoistokimika:It-tessuti tal-paraffin eżaminati mill-istopatoloġija hawn fuq ġew imqassma, reidratati b'etanol gradjent dewaxed xylene sectioned, antiġenu rimedjat bis-sħana, u ssiġillati għal siegħa b'serum tal-mogħoż f'temperatura ambjentali. L-antikorpi primarji SCF u C-kit ġew miżjuda qatra, u t-tessuti nżammu matul il-lejl f'4 gradi. Wara t-tlaħliħ bil-polybutylenesuccinate, horseradish peroxidase twaqqa' biex ittikketta l-antikorp sekondarju, laħlaħ bil-polybutylene succinate għal 5 min, qatra 2,4-diaminobutyric acid chromogensolution, żebgħa mill-ġdid b'ematoxylin, deidrazzjoni ta 'alkoħol gradjent invers, trasparenti permezz ta' xylene u newtrali siġill tar-reżina. Mikroskopikament, in-nuklei kienu vjola-blu, u l-prodotti tar-riżultat pożittiv kienu partiċelli isfar kannella jew isfar.
Sejbien ta' espressjoni ta' mRNA C-kit fit-tessut tal-kolon permezz ta' reazzjoni tal-katina tal-polimerażi kwantitattiva f'ħin reali (RT-qPCR):Tessut tal-kolon tal-firien iffriżat ġie mitħun b'omoġenizzatur, u ġie miżjud 1 mL RNAiso Plus. L-RNA totali tat-tessut tal-kolon ġie estratt bil-metodu tal-kloroform/isopropanol, u l-kwalità tal-RNA ġiet skoperta permezz tal-elettroforesi tal-ġel. Wara li ġew identifikati minn Bio-Rad gel imager, 1 ug RNA ġie retraskritt f'cDNA minn Takara PrimeScript II 1st Strand cDNA Synthesis Kit.Skond id-database NCBI Gene ID: 64030, ir-reġjun CDS tal-ġene C-kit instab u kkombinat ma ' Disinn NCBI Primer-Blast Primer sekwenza, li wassynthesized minn Sangon Biotech Co Ltd, C-kit primer sekwenza sens strand 5'-AGGT GTACCGTTCCTGTCC-3', strand antisens 5'-GGCTGGATTTGCTCTTTGCTGT-3', - actin sens linja 5'-CTTCCTTCCTGGGTATGGAATC-3', linja antisens 5'-CTGTGTTGGCATAGAGGTCTT-3'. L-amplifikazzjoni tal-PCR saret fuq strument tal-PCR Real-Time Bio-RadCFX90. Il-kundizzjonijiet għall-analiżi tal-PCR kienu denaturazzjoni inizjali f'95 grad għal 5 min, 30 ċiklu ta '95 grad għal 30 s, 60 grad għal 30 s u 72 grad għal 1min segwit minn estensjoni finali f'72 grad għal 10 min. 2-ΔΔCt (ΔCt=valur Ct - -actin Ctvalue) ittieħed biex tanalizza l-espressjoni relattiva tal-ġeni.
Sejbien tal-livell ta' espressjoni tal-proteini ta' Cx43 u AQP3 fit-tessut tal-kolon permezz ta' Western blotting:Madwar 1 ċm ta 'tessut tal-kolon iffriżat inġabar u lysed b'likwidu ta' piroliżi qawwija ta 'RIPA (100 μL). It-tessut ġie omoġenizzat b'omoġenizzatur tal-ħġieġ 20 darba u trasferit għal tubu ċentrifugu ta '1.5 mL. Is-supernatant ġie estratt wara ċ-ċentrifugazzjoni f'12000 rpm f'4 gradi għal 5 min, u l-konċentrazzjoni tal-proteina totali fis-supernatant ġiet iddeterminata bil-metodu BCA. Neħħejna 25ug proteina żnaturata biex twettaq elettroforesi tal-ġel tas-sodju dodecyl sulfate-polyacrylamide u mbagħad ittrasferixxiet il-proteini fil-ġel għal polyvinylidene fluoridemembrane f'kurrent kostanti ta '200 mA imbagħad issiġillat b'5 fil-mija ħalib xkumat confiningliquid għal 2 h f'temperatura tal-kamra. Antikorpi primarji korrispondenti ġew dilwiti bil-fluwidu tas-siġillar, inkubati f'4 gradi matul il-lejl, imbagħad maħsula ir-reżistenza tal-membrana u miżjuda t-tieni antikorpi. Wara li żiedu l-fluwidu ECL, tpoġġew taħt il-miter tal-espożizzjoni għat-test b'analiżi tad-densità ottika.
Mikroskopija elettronika ta' trażmissjoni:Ħadna madwar 1 ċm ta 'tessut tal-kolon prossimali, iffissah f'2.5 fil-mija glutaraldehyde għal 24 siegħa, iddeidrata b'aċetun gradat, inkorporat f'Epon812, u qatgħet sezzjonijiet ultrathin ta' 50 nm fuq ultramicrotome. Is-sezzjonijiet kienu mtebbgħin b'aċetat tad-dijossidu tal-uranju u likwidu taż-żebgħa taċ-ċitrat taċ-ċomb f'temperatura tal-kamra għal 10 min. Osservajna villi tal-kolon, mitokondrija taċ-ċelluli epiteljali, u ċelluli goblet taħt mikroskopju elettroniku ta' trasmissjoni Philips Tecnai-10.
Analiżi statistika
Intuża softwer SPSS 19.0 għall-analiżi tad-dejta, u softwer GraphPad Prism8.4 intuża biex jiġu plottjati r-riżultati. It-test ta' Shapiro-Wilk intuża għall-ittestjar tan-normalità. Data b'distribuzzjoni normali kienet rappreżentata b'medja ± SD. Oġġetti ta' żball intużaw biex jirrappreżentaw il-medja ± SD ta' l-emoglobina wara t-trattament. It-test t tal-istudent intuża għal tqabbil bejn żewġ gruppi. Intużat analiżi tal-varjanza għal tqabbil bejn gruppi multipli. Il-metodu Student-Newman-Keuls intuża għall-paragun bejn gruppi multipli f'pari, u t-test ta 'Dunnett intuża biex ikejjel id-differenzi bejn kull grupp sperimentali u grupp ta' kontroll f'sekwenza. immexxija. Jekk it-test tal-isferiċità wera P > 0.{{10}}5, intużat analiżi ta' varjanza tad-dejta tal-kejl ripetut. Jekk P < 0.05,="" ittieħdet="" l-ekwazzjoni="" ta'="" stima="" ġeneralizzata.="" dejta="" li="" ma="" kinitx="" konformi="" ma="" 'distribuzzjoni="" normali="" kienet="" rappreżentata="" minn="" m="" (p25,="" p75),="" u="" t-test="" ta'="" rank-sum="" kruskal-wallis="" h="" intuża="" għal="" tqabbil="" bejn="" il-gruppi.="" it-test="" χ2="" intuża="" biex="" iqabbel="" bejn="" gruppi="" meta="" d-dejta="" kienet="" dejta="" mhux="" ordnata,="" u="" ntuża="" t-test="" χ2="" ta="" 'pearson="" jekk="" il-proporzjon="" ta'="" ċelloli="" bi="" frekwenza="" teoretika="">< 5="" kien="">< 20="" fil-mija.="" jekk="" il-proporzjon="" taċ-ċelloli="" bi="" frekwenza="" teoretika="">< 5="" kien="" akbar="" minn="" jew="" ugwali="" għal="" 20="" fil-mija,="" intuża="" t-test="" eżatt="" ta'="" fisher.="" p="">< 0.05="" intuża="" biex="" jiġi="" ddeterminat="" li="" d-differenza="" kienet="" statistikament="">
Figura 1 Bidliet istopatoloġiċi tal-kolon.
RIŻULTATI
Kundizzjonijiet ġenerali
Ġurnata wara l-gavage tal-loperamide meta mqabbla mal-grupp normali, il-piż tal-ġisem u l-piż tal-ippurgar fil-grupp tal-mudell tnaqqsu b'mod sinifikanti (P <{{0}}.05), iżda="" ma="" kien="" hemm="" l-ebda="" differenza="" sinifikanti="" fil-kwalità="" tal-ippurgar="" punteġġ="" (p=""> 0.05). C. deserticolatreatment fil-grupp mudell naqas it-tnaqqis fil-piż tal-ġisem u l-piż tal-ippurgar (P< 0.05),="" but="" the="" bodyweight="" in="" the="" blocker="" group="" was="" not="" significantly="" reduced.="" after="" 10="" d="" of="" treatment,="" compared="" with="" the="" normal="" group,="" the="" body="" weight="" and="" stool="" volume="" of="" rats="" in="" the="" model="" group="" were="" further="" significantly="" reduced,="" and="" the="" stools="" were="" dry="" and="" almost="" contained="" no="" water="" (p="" <="" 0.05).="" the="" body="" weight="" loss="" of="" rats="" was="" also="" significantly="" reduced="" by="" treatment="" with="" c.="" deserticola="" (p="" <="" 0.05).="" the="" bodyweight="" of="" rats="" in="" the="" blocker="" group="" was="" not="" significantly="" different="" from="" that="" in="" the="" model="" group="" (p="" >="" 0.05).="" on="" day="" 20="" before="" sampling,="" the="" bodyweight="" of="" rats="" in="" the="" model="" group="" was="" significantly="" lower="" than="" that="" in="" the="" normal="" group,="" and="" the="" stool="" quality="" score="" was="" significantly="" increased="" (p="" <="" 0.05),="" while="" the="" weight="" loss="" caused="" by="" constipation="" was="" inhibited="" by="" c.="" deserticola="" treatment,="" and="" the="" stool="" quality="" score="" was="" decreased="" (p="" <="">
Istopatoloġija tal-kolon
Tbajja ta 'l-ematossilina u l-eosina tat-tessut tal-kolon tal-firien tidher fil-Figura 1. Fil-grupp normali, villi intestinali kienu intatti, mukuża intestinali kienet intatta u kontinwa, ċelloli u glandoli kienu rranġati regolarment. Il-mukuża u s-sottomukoża ma kinux infiltrati minn ċelluli infjammatorji, u l-istruttura tat-tessut kienet normali. Fil-grupp mudell, l-intestinvilli u l-mukoża ġew meqruda fil-biċċa l-kbira, il-villi lokali ġew imxerrda u rranġati b'mod laxk, u parti mill-istruttura glandulari sparixxew. Fil-grupp C. deserticola, tbajja istopatoloġika kienet inqas minn dik tal-grupp mudell, iżda kien hemm nekrożi f'ċelluli somegoblet. Wara injezzjoni intraperitoneali fil-grupp imblokkatur, meta mqabbel mal-grupp C.deserticola, kien għad hemm it-telf lokali ta 'villi intestinali, u kien hemm ksur u telf ta' mukoża intestinali.
Figura 2 Espressjoni tal-fattur taċ-ċelluli staminali u l-proporzjon tad-densità ottika relattiva fit-tessut tal-kolon permezz ta 'skoperta immunoistokimika.
Sejbien ta 'espressjoni ta' fattur taċ-ċelluli staminali u proteina C-kit permezz ta 'tbajja' immunoistokimika
Tbajja immunoistokimika wriet li SCF u C-kit kienu espressi fil-kolonof-grupp ta 'kontroll. Meta mqabbel mal-grupp ta 'kontroll, l-espressjoni ta' SCF u C-kit fil-grupp mudell naqset b'mod sinifikanti (P <0.05). meta="" mqabbel="" mal-grupp="" tal-mudell,="" l-espressjoni="" ta="" 'scf="" u="" c-kit="" fil-grupp="" c.="" deserticola="" żdiedet="" b'mod="" sinifikanti="" (p=""><{8}}.05). ma="" kien="" hemm="" l-ebda="" differenza="" fl-espressjoni="" ta="" 'scf="" u="" c-kit="" bejn="" l-imblokkatur="" u="" l-gruppi="" mudell="" (p=""><0.05, figuri="" 2="" u="">
RT-qPCR
RT-qPCR showed that expression of C-kit mRNA in the model group was significantly lower than in the normal group (Figure 4, P < 0.05). Compared with the model group, C-kit in the C. deserticola group was significantly increased (P < 0.05). There was no significant difference in C-kit mRNA level between the model and blocker groups (P >0.05). Dawn ir-riżultati indikaw li l-espressjoni ta 'C-kit aġġustata minn C. deserticola pparteċipat fit-titjib ta' stitikezza, u l-imblokkaturi inibixxu l-effikaċja ta 'C. deserticola.
cistanche salsa benefiċċji
Western blotting
Western blotting wera li l-proteina AQP3 kienet espressa f'livell baxx fil-grupp ta 'kontroll normali, filwaqt li żdiedet b'mod sinifikanti fil-grupp tal-mudell meta mqabbla mal-grupp ta' kontroll (Figura 5) (P <0.05) .="" l-espressjoni="" tal-proteina="" aqp3="" naqset="" wara="" t-trattament="" b'c.="" deserticola,="" u="" l-effett="" inibitorju="" ta="" 'c.deserticola="" fuq="" l-espressjoni="" ta'="" aqp3="" kien="" inibit="" minn="" trattament="" imblokkatur="" (p=""><0.05). l-espressjoni="" ta="" 'cx43="" kienet="" l-oppost="" ta'="" dik="" ta="" 'aqp3.="" dawn="" ir-riżultati="" ssuġġerew="" li="" l-effett="" farmakoloġija="" ta="" 'c.="" deserticola="" fuq="" firien="" b'sc="" inkiseb="" billi="" tippromwovi="" l-espressjoni="" ta'="" cx43="" u="" inibixxi="" l-espressjoni="" ta="" 'aqp3="" (figuri="">
Mikroskopija elettronika ta' trażmissjoni
Wara l-induzzjoni ta 'loperamide, nefħa mitokondrijali u awtofaġija seħħew f'xi wħud miċ-ċelloli epiteljali tal-mukuża tal-kolon fil-grupp mudell. In-numru u t-tul tal-mikrovilli intestinali naqsu, u seħħet il-pyknosis taċ-ċelluli goblet (Figura 8). Wara t-trattament b'C. deserticola, in-numru ta 'microvilli intestinali żdied. Themicrovilli kienu rranġati pulit, u l-istruttura kienet kompluta. Iċ-ċelluli goblet tul iqsar, morfoloġija irregolari ta 'mitokondrija, u pyknosis severa ta' gobletcells.
Figura 3 Espressjoni ta 'C-kit u proporzjon tad-densità ottika relattiva fit-tessut tal-kolon permezz ta' skoperta immunoistokimika.
DISKUSSJONI
Stitikezza hija komuni fil-popolazzjoni anzjana u hija waħda mis-sintomi komuni li jaffettwaw l-istat tas-saħħa u l-kwalità tal-ħajja tal-anzjani[10,11]. Interms tal-mediċina tradizzjonali Ċiniża, Bai et al[12] jemmnu li l-patoġenesi bażika tal-SC kienet id-disfunzjoni tal-funzjoni tal-konduzzjoni tal-musrana l-kbira, insuffiċjenza tal-ġisem senile, telf gradwali tal-funzjonijiet tal-fwied u tal-kliewi, nuqqas ta 'qi u demm, u telf ta' fluwidu tal-ġisem. , li wassal għal ippurgar niexef, li rriżulta fi stitikezza[13]. SC tpoġġi pressjoni fuq il-pazjenti u l-familji tagħhom f'ħafna aspetti, u huwa importanti li tiġi esplorata l-patoġenesi tagħha.
C. deserticola għandu l-funzjonijiet li tonifying kidney Yang, jibbenefika d-demm, u jirregola l-immunità tal-ġisem[14]. C. deserticola u decoction veġetali Ċiniż containingC. deserticola intużaw ħafna fit-trattament ta 'stitikezza, u l-effett kliniku huwa notevoli. Du et al[15] sabu f'mudell ta 'firien ta' defiċjenza ta 'Yang u stitikezza li C. deserticola tejbet l-amplitudni tal-kontrazzjoni tal-kolon iżolat, saħħet il-kuntrattilità tal-passaġġ intestinali, u rritorna l-livell tal-ormoni gastrointestinali għan-normal. Barra minn hekk, fibra tad-dieta ta 'C. deserticola, prodott sekondarju ta' l-ipproċessar ta 'C. deserticola, ittejjeb il-kapaċità li żżomm l-ilma tal-ħmieġ u għandha l-vantaġġ ta' doża baxxa u effett tajjeb fit-nutrizzjoni tal-intestini u t-titjib tad-defekazzjoni[16]. L-istudju tagħna sab li t-trattament ta 'C. deserticola tejbet l-umdità tal-ippurgar u l-istopatoloġija tal-kolon tal-firien bi stitikezza.
L-ICCs jinstabu fil-passaġġ intestinali kollu u għandhom rwol vitali fil-kontroll newrali tal-moviment intestinali bħala pacemakers u trasmissjoni tan-nervituri intestinali[17].Proto-oncogen coding receptor tyrosine kinase, C-kit, huwa espress minn ICCs, u SCFis ligand ta ' C-kit[18]. Is-sistema SCF/C-kit hija kruċjali fl-iżvilupp tal-ICCs. Il-mogħdija tas-sinjalar SCF/C-kit ġiet analizzata waqt it-trattament ta' stitikezza bil-mod tat-trasferiment fil-firien bl-acupuncture[19]. L-elettroacupuncture fil-punt Tianshu żiedet in-numru ta 'ICCs tal-kolon fil-ġrieden ittrattati ACK2-, irregolat l-espressjoni ta' proteini SCF u C-kit, u reġġa' lura l-fenotip ta 'ICC. Preskrizzjoni għat-tisħiħ tal-qi u l-milsa tista 'żżid l-espressjoni ta' ICC fit-tessut tal-kolon u tirregola l-espressjoni ta 'C-kit u SCF mRNA, u b'hekk ittejjeb is-sintomi ta' stitikezza[20]. Fl-istudju tagħna, l-immunoistokimika wriet li C. deserticola irregolat b'mod sinifikanti l-espressjoni ta 'SCF u proteina C-kit f'mudell ta' far ta 'SC, u RT-qPCR wera li C. deserticola irregola b'mod sinifikanti l-espressjoni ta' C-kitmRNA. L-imblokkatur ta 'C-kit inibixxi l-upregulation ta' SCF u espressjoni ta 'C-kit indotta minn C. deserticola.
Il-kontenut tal-ilma fekali u t-trasport tal-ilma tal-kolon huma relatati mill-qrib mal-AQPs, li għandhom rwol importanti fil-metaboliżmu tal-ilma intestinali[21]. Fi studju tal-firien bi stitikezza tat-trasport bil-mod, id-decoction tad-Defecation tejbet b'mod sinifikanti s-sintomi ta 'stitikezza billi rregola l-assorbiment tal-ilma intestinali permezz ta' downregulating AQP3 u AQP4[22]. F'mudell tal-far ta 'stitikezza funzjonali, il-mekkaniżmu ta' trattament ta 'Oral Xiaofu Tongjie Fluid għal stitikezza funzjonali jista' jiġi realizzat billi tirregola l-espressjoni ta 'polypeptide intestinali vażoattiv u AQP3 fil-kolon[23]. Gapjunctions għandhom rwol essenzjali fil-medjazzjoni tal-kontrazzjoni sinkronika taċ-ċelloli tal-muskoli lixxi. Cx43 hija l-aktar proteina importanti matul dak il-proċess[24]. Telf ta 'Cx43expression jista' jkun parzjalment responsabbli għal disfunzjoni tal-mutur tal-muskoli lixxi[25].Tiswija tal-istruttura tan-netwerk tas-sistema nervuża intestinali fil-firien bi stitikezza ta 'transitu bil-mod tista' ttejjeb l-espressjoni ta 'Cx43 eċċ u sintomi ta' stitikezza[26].Dawn ir-riżultati jindikaw li ż-żieda espressjoni ta 'AQP3 inaqqas il-kontenut ta' ilma ippurgar, li jwassal għal stitikezza, li tista 'tkun mekkaniżmu importanti ta' stitikezza. L-espressjoni ta 'Cx43 tista' tkun relatata mal-kontrazzjoni tal-muskolu lixx intestinali u tnaqqas l-okkorrenza ta 'stitikezza. Fl-istudju tagħna, western blotting wera li l-espressjoni Cx43 żdiedet u l-espressjoni AQP3 kienet inibita minn trattament ta 'C.deserticola, li rriżulta f'żieda fil-kontrazzjoni tal-muskoli lixxi u tnaqqis fl-assorbiment tal-ilma, u trattament imblokkatur reġġa' lura dawn l-effetti.
Għal aktar informazzjoni, jekk jogħġbok ikklikkja hawn.
KONKLUŻJONI
Bħala konklużjoni, C. deserticola jista 'jinibixxi l-espressjoni ta' AQP3 u jippromwovi l-espressjoni ta 'Cx43 permezz tal-mogħdija SCF/C-kit, u b'hekk itejjeb stitikezza indotta byloperamine u jnaqqas il-ħsara fit-tessut tal-kolon fil-firien ta' età. Dan l-istudju pprovda bażi teoretika tajba għall-użu kliniku ta 'C. deserticola.
