Pjanti Tajlandiżi B'Livelli Għoli ta' Antiossidanti, Attività ta' Tkessiħ ta' Radikali Ħieles, Attività Anti-tyrosinase u Anti-collagenase

Kuntatt:

Kuntatt:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

Moragot Chatatikun1 u Anchalee Chiabchalard2

Astratt

Sfond:Ir-radjazzjoni ultravjola mid-dawl tax-xemx tinduċi produzzjoni żejda ta 'speċi ta' ossiġnu reattiv (ROS) li tirriżulta f'tixjiħ tal-ġilda u disturbi ta 'iperpigmentazzjoni. Komposti ġodda li jbajdu u kontra t-tikmix minn prodotti naturali reċentement saru ta 'interess dejjem jiżdied. L-iskop ta 'dan l-istudju kien li jinstabu prodotti li jnaqqsu ROS f'14-il estratt tal-pjanti Tajlandiżi.

Metodi:Biex tiddetermina fenoliċi totali uflavonojdikontenut,antiossidantattività,kontra l-tyrosinaseattività, u attività kontra l-collagenase, qabbilna estratti ta '14-il pjanta Tajlandiża ppreparati bl-użu ta' solventi differenti (etere tal-petroleum, dichloromethane, u etanol).Antiossidantattivitajiet ġew determinati minn analiżi DPPH u ABTS.

Riżultati:Il-kontenut fenoliku totali tal-14-il estratt tal-pjanti Tajlandiż instab fl-ogħla livelli fl-etanol segwit minn estratti tad-diklorometan u tal-etere tal-pitrolju, rispettivament, filwaqt liflavonojdikontenut kien normalment misjub fil-frazzjoni thedichloromethane. L-attività ta 'skavenging varjat minn 7 sa 99 fil-mija ta' scavenging kif evalwat minn analiżi DPPH u ABTS. L-estratt tal-weraq ta 'l-etanol ta' Ardisia elliptica Thunb. kellu l-ogħla kontenut fenoliku, attività antiossidant, u collagenaseinhibition, filwaqt li Cassia alata (L.) Roxb. estratt kellu l-aktar sinjuriflavonojdikontenut. Interessanti, tliet estratti ta 'pjanti, li kienu l-frazzjonijiet etanoliċi ta' Annona squamosa L., Ardisia elliptica Thunb. u Senna alata (L.) Roxb. kellha għoljaantiossidantkontenut u attività u inibit b'mod sinifikanti t-tnejntyrosinaseu collagenase.

Konklużjoni:Is-sejbiet tagħna juru li l-frazzjonijiet ta 'etanol ta' Annona squamosa L., Ardisia elliptica Thunb. u Senna alata(L.) Roxb. turi wegħda bħala ingredjenti potenzjali għal prodotti kosmetiċi bħal aġenti kontra t-tikmix u prodotti li jbajdu l-ġilda.

Kliem ewlieni:Ardisia elliptica Thunb.,Antiossidantkontenut, attività ta' tkessiħ,Anti-tyrosinaseattività, Anti-collagenaseactivity

Flavonoid huwa wieħed mill-elementi tacistanche

Sfond

Ir-radjazzjoni ultravjola (UVR) mid-dawl tax-xemx hija l-aktar fattur ta 'riskju sinifikanti għal kanċers tal-ġilda mhux tal-melanoma u tal-melanoma [1]. L-espożizzjoni żejda għad-dawl tax-xemx, b'mod partikolari l-UVA u l-UVB, tinduċi espressjoni żejda ta' speċi ta' ossiġenu reattiv (ROS) li jagħmlu ħsara lil lipidi, proteini u aċidi deossiribonuklejċi. Il-kollaġen huwa l-pedament ewlieni tal-matriċi extraċellulari fis-saff tad-dermis tal-ġilda. ROS eċċessiv iżid l-espressjoni tal-collagenase, protease li tiddegrada l-collagen li jista 'jirriżulta f'photoaging u t-tikmix tal-ġilda [2]. Barra minn hekk, l-espożizzjoni UV tinduċi produzzjoni ta 'melanin li tirriżulta inhyperpigmentation.Tyrosinasehija l-enzima ewlenija li tibda l-pigmentazzjoni tal-ġilda. L-ewwelnett, L-tyrosine huwa hydroxylated toform 3,4-dihydroxyphenylalanine (L-DOPA) minn tyrosinase. Sussegwentement, L-DOPA jiġi ossidizzat għal DOPA quinone minn tyrosinase. DOPA quinone jiġi kkonvertit aktar f'DOPAchrome li jista' jiġi kkonvertit f'5,6-dihydroxyindole(DHI) jew 5,6-dihydroxyindole-2-carboxylic acid (DHICA)[3]. It-trattamenti attwali għat-tixjiħ tal-ġilda jinvolvu hydroxylacid biex titqaxxar is-saff epidermali, retinojdi biex inaqqsu l-ġilda mhux maħduma, u mili tal-ġilda amministrat billi tinjetta collagen fil-ġilda. Madankollu, dawn it-trattamenti għandhom effetti avversi, bħal iperpigmentazzjoni, infjammazzjoni, ċitotossiċità, irritazzjoni u infezzjoni batterjali [4]. L-iktar aġent popolari li jbajdu l-ġilda huwa hydroquinone, li jinibixxityrosinase, iżda l-effetti sekondarji tagħha jinkludu dermatite, edema, reazzjonijiet allerġiċi, u ochronosis [5]. Riċentement, ir-riċerkaturi ffukaw fuq prodotti naturali li jinibixxu ROS indotti mill-UV, soppressenzymes, u jnaqqsu l-formazzjoni tal-melanin bħala alternattivi għal trattamenti kurrenti. Pereżempju, fitokomposti attivi, bħal arbutin, aloesin, aċidu gentisic,flavonojdi, hesperidin, licorice, niacinamide, derivattivi tal-ħmira, u polifenoli, jinibixxu melanoġenesi mingħajr tomelanocytes ċitotossiċità [6]. Għalhekk, il-pjanti jistgħu jnaqqsu l-formazzjoni tat-tikmix u l-iperpigmentazzjoni kkawżata mill-espożizzjoni għad-dawl tax-xemx.

L-għan ta 'dan l-istudju kien li janalizza 14-il pjanta Tajlandiż estratti bi tliet solventi differenti għall-potenzjal tagħhom bħala ingredjenti kontra t-tikmix u jbajdu l-ġilda. In-numru taantiossidantfenoli uflavonojdiwasevaluated għal korrelazzjoni ma 'attivitajiet ta' scavenging radikali ħielsa, u anti-collagenase uanti-tyrosinaseattivitajiet. L-estratti kellhomantiossidantili scavenged freeradicals u inibit enzimi involuti fil-formazzjoni tat-tikmix andpigment. Aħna nidentifikaw Ardisia elliptica Thunb.,Annona squamosa L., u Senna alata (L.) Roxb huwa kandidat verypromising għall-użu fi prodotti kożmetiċi.

bodybuilding cistanche

Metodi

Kimiċi u reaġenti

Reaġent tal-fenol Folin Ciocalteu, karbonat tas-sodju (Na2CO3), aċidu galliku, quercetin, 10 fil-mija klorur tal-aluminju, etanol, 2, 2-diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH), ascorbicacid, 2,2′-Azino- bis(3-ethylbenzthiazoline-6-sulphonic acid)(ABTS), persulfate tal-potassju, kojic acid, faqqiegħ tyrosinase (EC 1.14.18.1), 3,4-dihydroxy-L-phenylalanine (L- DOPA), N-[3-({2-furyl) acryloyl]-Leu-Gly-Pro-Ala (FALGPA), collagenase minn Clostridium histolyticum (EC3.4.24.3), epigallocatechin gallate (EGCG) , klorur tas-sodju, klorur tal-kalċju u dimethyl sulfoxide (DMSO) inxtraw minn Sigma-Aldrich Chemical Co. (St. Louis, MO, USA). Etere tal-pitrolju, dichloromethane, etanol assolut, metanol, disodium hydrogen phosphate, u sodium dihydrogen phosphate inxtraw minn Merck (Darmstadt, il-Ġermanja). Il-kimiċi u r-reaġenti kollha kienu grad analitiku.

Materjali tal-pjanti u estrazzjoni

Tlettax-il speċi ta 'weraq Tajlandiż inġabru mill-HRH Princess Sirindhorn Herb Garden, provinċja ta' Rayong, it-Tajlandja. Mangostan nkisbu mill-provinċja ta 'Chanthaburi, it-Tajlandja. Dawn il-pjanti ġew awtentikati u depożitati fl-Erbarju, id-Dipartiment tal-Botanika, il-Fakultà tax-Xjenza, l-Università ta 'Chulalongkorn, it-Tajlandja. L-ismijiet xjentifiċi, in-numri tal-vawċers, u l-partijiet tal-pjanti huma murija fit-Tabella 1. Il-pjanti ġew estratti bl-użu tal-apparat Soxhlet. Fil-qosor, 10 g tal-pjanta mnixxfa ġew estratti separatament b'petroleumether, dichloromethane u etanol. Is-solventi tneħħew bl-użu ta' evaporatur li jdur bil-vakwu taħt pressjoni mnaqqsa bl-użu tal-konċentratur MiVac Quattro. Kampjuni kkonċentrati ġew maħlula f'DMSO f'100 mg/ml u maħżuna fi grad -20 sakemm jintużaw. Rendimenti ta 'estratti niexfa huma ppreżentati fit-Tabella 1 bħala perċentwali w/w materjali tal-pjanti niexfa.

Determinazzjoni tal-kontenut fenoliku totali

Il-kontenut fenoliku totali tal-estratti tal-pjanti ġie evalwat bl-użu tal-metodu Folin-Ciocalteu [7]. Fil-qosor, 50 ul ta' estratti f'1 mg/ml f'ilma distillat tħalltu ma' 50 ul ta' 10 fil-mija reaġent Folin-Ciocalteu u 50 ul ta' 0.1 M Na2CO3. It-taħlita ta' reazzjoni ġiet inkubata għal siegħa f'temperatura ambjentali fid-dlam. L-assorbiment f'750 nmwas imkejjel b'microplate reader (Biotek, USA.). L-aċidu galliku minn 1.56 sa 100 ug/ml intuża bħala l-istandard. Il-kontenut fenoliku totali ta' l-estratti huwa espress bħala mg ekwivalenti ta' aċidu galliku (GAE) għal kull g materjal ta' pjanta niexfa. Il-kampjuni kollha ġew analizzati fi tliet kopji.

Determinazzjoni tal-kontenut tal-flavonojdi

Totalflavonojdikontenut (TFC) ġie determinat bl-użu ta 'assaġġ kolorimetriku thealuminum chloride (AlCl3) [7]. Fil-qosor, 50 ul ta 'l-estratti f'1 mg/ml fi 80 fil-mija etanol tħallat ma' 50 ul ta 'soluzzjoni ta' 2 fil-mija AlCl3 fil-bir ta 'wallplate 96. Il-pjanċa ġiet inkubata għal 15-il minuta f'temperatura tal-kamra. L-assorbiment f'435 nm kien imkejjel permezz ta 'qarrej tal-mikroplate. Quercetin minn 1.56 sa 100 ug/ml serva bħala standard. Il-kontenut totali ta' flavonojdi huwa espress bħala mg ekwivalenti ta' quercetin (QE) għal kull g materjal ta' pjanta niexfa. Il-kampjuni ġew analizzati fi tliet kopji.

Attività ta' tneħħija tad-DPPH

Assaġġ ta 'attività ta' scavenging DPPH sar kif deskritt minn Yamasaki et al. [8]. Is-soluzzjoni DPPH kienet ippreparata friska għal kull assaġġ. Fil-qosor, 100 estratti ug/ml jew 1.56 sa 100 ug/ml standard ta' aċidu askorbiku f'metanol assolut tħallat ma' 180 ul ta' reaġent DPPH fi 96 well-plate. It-taħlita tar-reazzjoni ġiet inkubata għal 30 minuta f'temperatura tal-kamra fid-dlam. Imbagħad, l-assorbenza f'517 nm kienet imkejla b'qarrej tal-mikroplate. L-esperimenti saru fi tliet kopji. L-assorbenza f'517 nm ofDPPH kienet 0.70 ± 0.02 u naqset l-attività tat-tkessiħ imkejla bl-assorbiment. Il-ħila ta' scavenging wascalculated bħala attività ta' scavenging ( fil-mija )=100 fil-mija × [(훥A517 tal-kontroll - 훥A517 tal-kampjun)/ 훥A517 tal-kontroll]. Il-perċentwali tal-attività ta' tneħħija tad-DPPH tal-estratti tqabblu ma' dawk tal-aċidu askorbiku, u huma espressi bħala ekwivalenti ta' mgvitamina Ċantiossidantkapaċità (VCEAC) għal kull materjal tal-pjanti niexef. IC50 ġie determinat minn graff ta' inibizzjoni perċentwali kontra l-konċentrazzjoni (minn 0.78-100 ug/ml ta' kull estratt).

Attività ta' tneħħija tal-ABTS

L-attività ta' tneħħija tar-radikali ħielsa ABTS twettqet kif deskritt qabel [9]. Ir-reagent tax-xogħol ABTS• plus ippreparat billi tħallat 7 mM ABTS• u 2.45 mM persulfate tal-potassju fi proporzjon ta 'volum/volum ta' 8:12. Is-soluzzjoni tax-xogħol inżammet għal 16 sa 18-il siegħa f'temperatura tal-kamra fid-dlam. Is-soluzzjoni ABTS• plus ġiet dilwita b'etanol assolut biex tagħti assorbenza f'734 nm ta'0.70 ± 0.02. Imbagħad, 100 ug/ml estratti jew 1.56 sa 100 ug/ml aċidu askorbiku standard f'etanol assolut ġie miżjud ma '180 ul ta' ABTS• flimkien ma 'reaġent tax-xogħol fil-bjar ta' pjanċa 96well. Il-pjanċa ġiet inkubata għal 45 min f'temperatura tal-kamra, u l-assorbiment tkejjel f'734 nm. L-esperimenti saru fi tliet kopji. Il-kapaċità ta' tkessiħ ġiet ikkalkulata bħala attività ta' tkessiħ ( fil-mija )=100 × [(훥A734 tal-kontroll - 훥A734 tal-kampjun)/ 훥A734 tal-kontroll]. Il-perċentwali tal-attività ta' tneħħija tal-ABTS tal-estratti kienu mqabbla ma' dawk tal-aċidu askorbiku, u huma ppreżentati bħala ekwivalenti ta' vitamina Ċ.antiossidantkapaċità (VCEAC) għal kull g materjal tal-pjanti niexef. IC50 ġie determinat minn graff ta 'inibizzjoni fil-mija kontra l-konċentrazzjoni (from15.62-1000 ug/ml ta' kull estratt).

Determinazzjoni tal-inibizzjoni tat-tyrosinase tal-faqqiegħ

Il-metodu dopachrome sar b'modifikazzjoni żgħira [10]. Fil-qosor, 20 ul ta 'estratti tal-pjanti jew DMSO (bħala kontroll), 20 ul ta' 203.3 unitajiet / ml tyrosinase tal-faqqiegħ u 140 ul ta '20 mM phosphate buffer atpH 6.8 ġew inkubati minn qabel għal 10 min f'25 grad. Wara l-inkubazzjoni minn qabel, ġew miżjuda 20 ul ta '2.5 mM L-DOPA u mbagħad il-kampjuni ġew inkubati għal 20 min addizzjonali f'25 grad. L-ammont ta 'dopachrome kien imkejjel f'492 nm b'qarrej tal-mikroplate. Kojic acid(KA) serva bħala kontroll pożittiv għall-inibizzjoni. L-inibizzjoni perċentwali ta 'attività ta' tyrosinase (perċentwali) kienet espressa fil-mijatyrosinaseinibizzjoni {{0}} × [(훥A492 tal-kontroll –훥A492 tal-kampjun)/ 훥A492 tal-kontroll]. Il-konċentrazzjonijiet finali tal-estratti u l-aċidu kojic kienu 1 u 0.1 mg/ml, rispettivament. IC50 ġie determinat minn graff tal-mijatyrosinaseinibizzjoni kontra l-konċentrazzjoni (minn 15.62-1000 ug/ml ta 'kull estratt).

bodybuilding cistanche

Determinazzjoni ta 'inibizzjoni ta' collagenase

L-inibizzjoni tal-collagenase ġiet iddeterminata b'metodu deskritt qabel [11]. Fil-qosor, 40 ul ta' collagenase minn Clostridium histolyticum f'0.25 unitajiet/ml f'50 mM Tricine buffer li fih 10 mM CaCl2 u 400 mM NaCl, u 10 ul ta' 50 mM Tricine buffer tħalltu ma'10ul. tal-estratti jew DMSO (bħala kontroll). Epigallocatechin gallate (EGCG) intuża bħala kontroll pożittiv. Wara 15-min inkubazzjoni f'temperatura ambjentali, ġew miżjuda 50 ul ta' N-[3-({2-furil)akriloil]-Leu-Gly-Pro-Ala (FALGPA). L-assorbiment tkejjel f'340 nm immedjatament u kontinwament għal 20 min. L-attività ta' l-enżima ġiet evalwata permezz ta' tnaqqis fl-assorbiment matul l-intervall tal-ħin. Il-perċentwali ta' inibizzjoni tal-attività tal-collagenase ġie kkalkulat bħala 100 × [(Attività ta' kontroll – Attività tal-kampjun)/ Attività ta' kontroll]. Konċentrazzjonijiet finali ta 'l-estratti u epigallocatechin gallate kienu 1 u 0.1 mg/ml, rispettivament. IC50 ġie ddeterminat minn graff tal-perċentwali ta 'inibizzjoni tal-collagenase kontra l-konċentrazzjoni (minn 15.62-1000 ug/ml ta' kull estratt).

Analiżi statistiċi

L-esperimenti kollha twettqu fi tliet kopji u r-riżultati huma espressi bħala medja ± żball standard. Il-koeffiċjenza ta' korrelazzjoni (R2) bejnantiossidantil-kontenut u l-attivitajiet antiossidanti ġew determinati bl-użu tas-softwer SigmaPlotversion 12.2. Id-differenza bejn iż-żewġ mezzi ġiet evalwata bl-użu tat-test t ta' Student. Id-differenzi kienu kkunsidrati sinifikanti meta l-valur P kien inqas minn 0.05.

Riżultati

Rendimenti ta 'estrazzjoni

It-Tabella 1 turi l-ismijiet xjentifiċi, in-numri tal-vawċers u l-partijiet tal-pjanti tal-14-il pjanta Tajlandiża użati f'dan l-istudju. Ardisia elliptica Thunb. kellu l-ogħla rendiment fl-etere tal-pitrolju (19.89 fil-mija) u estratti tal-etanol (31.11 fil-mija), filwaqt li Garcinia mangostanaL. kellu l-ogħla rendiment fil-mija minn dichloromethaneextraction (11.07 fil-mija).

Kontenut fenoliku ta '14-il pjanta Tajlandiża

Għalhekk, il-kontenut fenoliku totali fil-pjanti kien iddeterminat bil-metodu Folin-Ciocalteu. L-estratti kellhom firxa wiesgħa fin-numru ta 'fenoli kif muri fit-Tabella 2, u l-valuri varjaw b'33-darbiet fost l-estratti. Ardisiaelliptica Thunb. kellu l-ogħla kontenut ta 'fenol fit-tliet tipi ta' estratti, filwaqt li l-inqas kontenut fenoliku kien preżenti fil-Hook ta 'Stemona curtissi. f. estratt tal-etere tal-pitrolju.

Kontenut ta 'flavonoid ta' 14-il pjanta Tajlandiża

Simili għall-fenoli, totaliflavonojdikontenut varja sostanzjalment fost l-ispeċi tal-pjanti, li jvarjaw minn 2.04 ± 0.16 sa 31.38 ± 0.81 mg QE għal kull g materjal niexef (Tabella 2). B'mod ġenerali, l-estrazzjoni tad-dichloromethane tat l-ogħlaflavonojdilivell meta mqabbel mas-solventi l-oħra. Mill-estratti kollha, l-ogħla kwantità ta 'flavonoid instabet fl-estratt ta' l-etanol mill-weraq Senna alata (L.) Roxb (31.38 ± 0.81 mg QE perg materjal niexef). Min-naħa l-oħra, Ardisia elliptica Thunb.(23.14 ± 1.10 mg QE għal kull g materjal niexef). kellu l-kontenut tal-flavonoid l-aktar sinjuri fil-frazzjoni tad-diklorometan. Barra minn hekk, Ipomoea pes-caprae (L.) R.br. kellu l-ogħla kontenut ta 'flavonojdi fost l-estratti tal-etere tal-pitrolju (27.48 ± 2.59 mg QE għal kull g materjal niexef). L-inqas livell ta' flavonoid li jista' jinduna kien fl-estratt ta' etanol minn Daturametel L. B'kuntrast qawwi,flavonojdima nstabux fl-estratti tal-etere tal-petroleum u tad-diklorometan minn Stemona curtisii Hook.f., u estratti tal-etere tal-pitrolju minn Streblus asper Lour. u Phyllanthus acidus (L.) Skeels.Kontenut totali ta 'flavonoid ma kienx jikkorrelata mal-kontenut fenoliku totali (R2=0.0284, Fig. 1a).

Attività ta' tneħħija radikali DPPH f'estratti differenti minn 14-il pjanta Tajlandiża

L-attività ta' tneħħija tar-radikali ħielsa li tuża DPPH bħala indikatur hija bażikaantiossidantassaġġ [12]. Kif muri fit-Tabella 3, l-attivitajiet tat-tkessiħ tal-estratti varjaw ħafna, li jvarjaw minn 7.11 ± 0.59 fil-mija għal 96.17 ± 0.05 fil-mija. L-estratt ta 'l-etanol Ardisia ellipticaThunb kellu l-ogħla attività ta' tkessiħ f'96 fil-mija. Barra minn hekk, l-aktar b'saħħitha li jmissantiossidant activities (>90 fil-mija ) ġew osservati fi frazzjonijiet ta 'etanol minn Stemonacurtisii Hook.f., Annona squamosa L., Phyllanthus acidus(L.) Skeels. u Garcinia mangostana Linn. F'termini ta 'solventi l-oħra, Ardisia elliptica Thunb kellha wkoll l-attività ta' scavenging sinjuri fost il-frazzjonijiet tal-etere tal-pitrolju, u Garcinia mangostana L. kellha l-ogħla attività antiossidanti fil-frazzjonijiet tad-dichloromethane. L-iktar kapaċità ta 'scavenging baxxa ġiet skoperta f'Croton sublyratus Kurz fil-frazzjoni tal-etere tal-pitrolju. L-ebda attività ta' tkeċċija ma ġiet osservata f'7 estratti tal-etere tal-pitrolju, u 2 estratti tad-diklorometan.

Attività ta' tkessiħ radikali ABTS f'estratti differenti minn 14-il pjanta Tajlandiża

Antiossidantl-attività tal-fażijiet milwiema u tal-lipidi fil-pjanti ġiet ukoll evalwata b'assaġġ ta' dekolorizzazzjoni bl-użu ta' ABTS [13]. Għal darb'oħra, l-aċidu askorbiku serva bħala l-istandardantiossidant. As with the DPPH assay, scavenging activity in the ABTS assay varied greatly among the plant preparations with a similarly broad range from 8.03 ± 0.54% to 99.84 ± 0.07% (Table 4). Furthermore, the next strongest scavenging activities (> 90%) were observed in the same 4 ethanol fractions as shown by the DPPH assay. In addition, no scavenging activity was found in the same 5 petroleum ether extracts. In general, the values obtained with the ABTS assay were higher than the DPPH values. Hence, activity in the ethanol extract from Senna alata (L.) Roxb. was now observed as >90 fil-mija, u attività kenniesa ġiet skoperta fl-estratti kollha tad-dichloromethane, u l-etherextracts tal-petroleum minn Annona squamosa L. u Ipomoea pes-caprae(L.) R.br. li ma kienx skopert mill-assaġġ DPPH.

Inibizzjoni tal-attività tat-tyrosinase minn estratti tal-pjanti

Il-kapaċità ta 'komposti mill-pjanti Tajlandiżi li jinibixxu l-faqqiegħtyrosinasel-attività ġiet evalwata bl-użu ta’ assaġġ invitro b’L-DOPA bħala s-sottostrat. Kojic acidserved bħala inibitur magħruf u kkawża inibizzjoni maximalenzymatic ta '93.38 ± 1.63 fil-mija. Kif muri fit-Tabella 5, estratti ta 'etanol biss inibixxu b'mod sinifikanti l-attività ta' tyrosinase, b'Ardisia elliptica Thunb. preparazzjonijiet huma l-eċċezzjoni. Il-frazzjonijiet tal-etere tal-pitrolju u tad-diklorometan ta' Ardisia elliptica Thunb. inibixxi l-attività tyrosinase b'madwar 20 fil-mija. Il-frazzjoni tal-etanol minn Rhinacanthus nasutus (L.) Kurz (valur IC 50 ta' 271.50 ug/ml) kienet l-aktar inibitur tat-tyrosinase qawwi, segwit mill-estratti tal-etanol minn Ardisia ellipticaThunb. u Phyllanthus acidus (L.) Skeels. Etanolfrazzjonijiet oħra naqsu b'mod sinifikanti l-attività enżimatika b'aktar minn 20 fil-mija (Tabella 5), ​​filwaqt li l-estratti li jifdal ma kellhomx attività inibitorja li tista' tinkixef (dejta mhux murija).

Inibizzjoni tal-attività tal-collagenase minn 14-il pjanta

Estratti ġew ittestjati għall-attività kontra l-collagenase bl-użu ta' Clostridium histolyticum collagenase, u N-[3-({2-furyl)acryloyl]-Leu-Gly-Pro-Ala (FALGPA) bħala s-sottostrat. Epigallatecatechin gallate huwa a inibitur tal-collagenase magħruf u tnaqqis fl-attività enżimatika b'90.51 ± 2.79 fil-mija. Kif muri fit-Tabella 5, 4 estratti ta' etanol biss kien fihom attività inibitorja ta' collagenase detectable. Minn dawk li jikkawżaw inibizzjoni, Ardisia elliptica Thunb. (IC 50 valur ta '157.78 ug/ml) esibit l-ogħla livell ta' collagenaseinhibition, segwit minn Annona squamosa L. (IC 50 valur ta '426.67 ug/ml), Senna alata (L.) Roxb., u Croton sublyratusKurz fil-grad ordni. Estratti oħra tal-pjanti ma inibixxux b'mod sinifikanti l-attività tal-collagenase taħt il-kundizzjonijiet tar-reazzjoni użati f'dan l-istudju (dejta mhux murija).

Diskussjoni

Ir-radjazzjoni solari hija fattur ambjentali sinifikanti fil-ħsara fil-ġilda u tista 'tikkawża kanċer tal-ġilda [14]. Ir-radjazzjoni UV tikkawża rispons pro-infjammatorju, degradazzjoni tal-matriċi extraċellulari uantiossidanttnaqqis [15, 16]. L-UV jikkawża l-formazzjoni ta 'speċi ta' ossiġnu reattiv (ROS) li jinduċu l-iperpigmentazzjoni u l-espressjoni tal-collagenase [17, 18]. L-istudju tagħna investiga 14-il pjanti Tajlandiżi estratti bi tliet solventi differenti għall-potenzjal tagħhom bħala ingredjenti kontra t-tikmix u jbajdu l-ġilda. F'dan l-istudju, użajna etere tal-pitrolju, dichloromethane u etanol għall-estrazzjoni tal-pjanti bl-użu tal-apparat Soxhlet. Ardisia elliptica Thunb. hadthe ogħla rendiment fl-etere tal-pitrolju u estratti etanol, billi Garcinia mangostana L. kellu l-ogħla rendiment mill-estrazzjoni dichloromethane. Dawn is-solventi huma serje ta 'solventi organiċi b'polaritajiet dejjem jiżdiedu. Varjazzjoni fost il-perċentwali tal-produzzjoni tiddependi fuq l-ispeċi tal-pjanti, u probabbilment kienet tirrifletti differenzi fil-kompożizzjoni kimika tal-pjanti.

Il-fenoliċi huma l-akbar grupp ta’ fitokimiċi misjuba fil-pjanti u għandhom diversi attivitajiet bijoloġiċi fl-annimali, inklużi l-bnedmin [19]. Il-kontenut fenoliku totali fil-pjanti kien iddeterminat bil-metodu Folin Ciocalteu. B'mod ġenerali, il-frazzjoni ta 'l-etanol kellha l-iktar kontenut fenoliku sinjur, segwit minn diklorometan, filwaqt li l-etere tal-pitrolju b'polarità baxxa kellu l-kontenut fenoliku l-aktar baxx meta mqabbel mas-solventi l-oħra. F'dan l-istudju, Ardisia elliptica Thunb. kellu l-ogħla kontenut fenoliku fit-tliet tipi ta 'estratti. Fi studji preċedenti, l-estratti tal-weraq tad-dichloromethane ta 'Ardisia elliptica Thunb. għandhom kontenut fenoliku ta' 101 ± 1.3 mg GAE għal kull g materjal ta 'pjanti niexfa, li huwa aktar mill-kontenut fi twigextract [20]. Barra minn hekk, estratt tal-metanol tal-frott misjur Ardisia kien fih 5.64 ± 0.37 g GAE għal kull 100 g estratt [21]. Għalhekk, weraq u frott ta 'Ardisia ellipticaThunb. għandhom kontenut fenoliku għoli li jista 'jiġi faċilment estratt b'metanol, dichloromethane, u etanol.

Flavonojdihuma pigmenti fil-fjuri, weraq, frott, andseeds. Dawn il-komposti huma metaboliti sekondarji tal-pjanti u huma mqassma ħafna fost l-ispeċi tal-pjanti [22]. Sussegwentement, il-kontenut tal-flavonojdi fi ħdan il-pjanti Tajlandiżi ġie evalwat bl-użu tal-assaġġ kolorimetriku tal-klorur tal-aluminju. Ourresults wrew li l-ogħla kwantità flavonoid wasfound fl-estratt ta ' l-etanol minn Senna alata (L.) Roxbleaves. Fi studju preċedenti, kontenut għoli ta 'flavonoid kien misjub fl-ilma (4.25 mg QE għal kull 100 g) u frazzjonijiet tal-metanol (3.97 mg QE għal kull 100 g) ta' Senna alata (L.) Roxb.[23]. Għalhekk, preparazzjonijiet Senna alata (L.) Roxb għandhom kontenut għoli ta 'flavonoid meta estratti b'solventi ta' polarità għolja inklużi etanol, metanol u ilma. Ardisiaelliptica Thunb. kellu l-aktar kontenut flavonoid sinjuri fil-frazzjoni tad-dichloromethane. Il-frott ta 'dan l-impjant għandu wkoll kontenut għoli ta' flavonoid ta '36.91 ± 2.37 mg QE għal kull g estratt [24].Għalhekk, il-frott u l-weraq ta' Ardisia elliptica Thunb. huma flavonoids sinjuri. Il-kontenut totali ta' flavonojdi ma kienx jikkorrelata mal-kontenut fenoliku totali. Madankollu,flavonojdigħandhom ħafna attivitajiet bijoloġiċi bħall-protezzjoni UVB [25], anti-infjammatorji [26], kontra l-epatotossiċità [27] u kontra l-kanċer [28].

Attività ta 'scavenging radikali ħielsa bl-użu ta' DPPH u ABTSassay. Fl-assaġġ DPPH, DPPH jirċievi hydrogenatom minn anantiossidant[29]. Sibna li l-estratt ta 'l-etanol ta' Ardisiaelliptica Thunb kellu l-ogħla attività ta 'keħnien. Investigaturi oħra rrappurtaw ukoll frazzjonijiet ta’ dichloromethane ta’ Ardisia elliptica Thunb.il-weraq u z-zkuk għandhom livelli għoljin ta’antiossidantattività kif determinata mill-assaġġ DPPH, u, għalhekk, din il-pjanta hija interessanti ħafna biex tiġi investigata aktar bħala trattament erbali [20]. L-estratti mill-frazzjoni tal-etanol b'polarità għolja urew b'mod ċar aħjarantiossidantattività minn frazzjonijiet b'polaritajiet aktar baxxi li fihom dichloromethane u petroleum ether. L-estratti ta ' l-etanol contentainedthe ogħla livelli ta ' l-attività ta ' scavenging radikali ħielsa meta mqabbla ma ' l-estratti l-oħra, u l-estratti etanol kollha kienu attivi. Fl-assaġġ ABTS, ABTS huwa kkonvertit għar-radikazzjoni tiegħu biż-żieda ta 'persulfate tal-potassju. Fil-preżenza ta' antiossidant, il-katjoni ABTS reattiv (jew ABTS• plus ) jiġi kkonvertit għall-forma naturali bla kulur tiegħu [9]. Bi qbil ma 'l-assaġġ DPPH, estratti ta' etanol kien fihom l-ogħla livelli ta 'attività kennies meta mqabbla ma' estratti l-oħra. Għal darb'oħra, l-ogħla attivitajiet ta 'tkessiħ inethanol, dichloromethane, u petroleum ether extractswere mill-istess pjanti kif muri mill-assaġġ DPPH. Ir-riżultati tal-assaġġi DPPH u ABTS kienu korrelatati ħafna kif mistenni (Fig. 1f).

Madankollu, it-totalflavonojdikontenut ta 'l-estratti tal-pjanti ma jikkorrelatawx mal-attività kennies radikali ħielsa asdetected mill-assaġġ DPPH (Fig. 1c) jew mill-ABTSassay (Fig. 1e). Is-sejbiet tagħna ta 'l-ebda relazzjoni sinifikanti bejnflavonojdiil-kontenut u l-attività ta' kennies bl-użu tal-assaġġ ABTS huma konsistenti mar-riżultati ta' investigaturi oħra [30]. B'kuntrast, il-kontenut fenoliku totali tal-preparazzjoni tal-pjanta kkorrelata b'mod pożittiv ma 'l-attività ta' kenniesa mkejla miż-żewġ analiżi (Fig. 1b u d) ma jaqblux ma 'studju preċedenti [31]. B'mod notevoli, l-attività ta 'scavenging tiddependi fuq il-kontenut fenoliku totali u s-solventi b'polaritajiet għoljin, bħall-etanol u d-dichloromethane. Dawn ir-riżultati jissuġġerixxu li l-phenoliccontent huwa l-kostitwent ewlieni maantiossidantattività fl-14-il impjant Tajlandiż.

Il-melanin, il-pigment ewlieni tal-kulur tal-ġilda u tax-xagħar, huwa sintetizzat minn melanoċiti fi ħdan il-melanożomi. Produzzjoni żejda u akkumulazzjoni ta 'melanin fil-ġilda jistgħu jwasslu għal disturbi topigmentarji u problemi estetiċi. L-iperpigmentazzjoni sseħħ f'żoni tal-ġilda esposti għax-xemx [32]. Fil-melanoġenesi,tyrosinasehija l-enzima ewlenija fil-pass li jillimita r-rata li fih L-tyrosine jiġi idrossilat għal L-DOPA, li jiġi ossidizzat aktar f'DOPAquinone. Wara dan, huwa kkonvertit f'DOPAchrome li huwa sottostrat għas-sintesi tal-melanin [3]. Downregolazzjoni ta'tyrosinaseattività ġiet proposta li tkun responsabbli għal tnaqqis fil-produzzjoni tal-melanin. L-iżvilupp ta 'komposti fitokimiċi ġodda li jbajdu minn prodotti naturali reċentement sar xejra li qed tikber. Is-sejba tagħna wriet li l-frazzjoni tal-etanol minn Rhinacanthus nasutus (L.) Kurzwas l-inibitur tat-tyrosinase l-aktar qawwi, segwit minn estratti tal-etanol minn Ardisia elliptica Thunb. u Phyllanthus acidus (L.) Skeels. Ovvjament, 7 pjanti minn 14plants kellhom kontenut fenoliku għoli, speċjalment Ardisiaelliptica Thunb. u Annona squamosa L. Barra minn hekk,Senna alata (L.) Roxb. kellu l-aktar sinjuriflavonojdikontenut li jista 'jinibixxi l-attività tyrosinase. Komposti attivi mill-pjanti bħal arbutin, aloesin, aċidu gentisic, flavonoids, hesperidin, licorice, niacinamide, derivattivi tal-ħmira, u polifenoli, jistgħu jinibixxu melanoġenesi mingħajr ċitotossiċità għal melanocytes [6].

Collagenase huwa peptidase taż-żingu transmembrana li jaqsam ir-rabta X-Gly tal-collagen. Il-kollaġen huwa proteina strutturali abbundanti u komponent tal-matriċi extraċellulari [33].Tnaqqis fil-fibri tal-kollaġen u l-elastin jiżdiedu bl-età u ħsara mir-radjazzjoni UV li tinduċi ġilda mkemmxa[34]. L-inibizzjoni tal-collagenase ġiet proposta biex tipprevjeni t-tixjiħ tal-ġilda. Minn dawk li jikkawżaw inibizzjoni fl-istudju tagħna, Ardisiaelliptica Thunb. esebit l-ogħla livell ta 'collagenaseinhibition, segwit minn Annona squamosa L., Senna alata(L.) Roxb., u Croton sublyratus Kurz f'ordni ta' rank. Fi studju preċedenti, l-estratt tal-miżwed tal-kawkaw kellu aċidu fenoliku uflavonojdili inibixxa l-attività ta' elastase u collagenase [35].Notevolment, tliet estratti ta' etanol (Ardisia elliptica Thunb.,Annona squamosa L., u Senna alata (L.) Roxb. inibdew it-tnejn.tyrosinaseu collagenase. Dawn il-pjanti kellhom ukoll livelli highphenolic u flavonoid, uantiossidantattività.Interessanti, dawn l-estratti għandhom użi possibbli bħala ingredjenti għal prodotti kożmetiċi.

Konklużjoni

Ir-riżultati tagħna juru li estratti ta '14-il pjanta Tajlandiż għandhom gradi differenti ta' fenoliċi totali uflavonojdikontenut kif ukoll attivitajiet ta' tneħħija ta' radikali ħielsa, jiddependi mis-solventi ta' estrazzjoni. Kien hemm korrelazzjoni għolja bejn il-kontenut fenoliku totali u l-ħmar ta 'attività ta' tneħħija ta 'radikali ħielsa evalwat mill-assaġġi DPPH u ABTS. Il-frazzjoni ta' l-etanol ta' Ardisia ellipticaThunb. kellu l-ogħla kontenut fenoliku, segwit minnAnnona squamosa L. Iż-żewġ pjanti inibixxu b'mod sinifikanti l-attivitajiet ta 'tyrosinase u collagenase, filwaqt li Rhinacanthusnasutus (L.) Kurz wera l-ogħla inibizzjoni ta' tyrosinase. Barra minn hekk, Senna alata (L.) Roxb. kien l-aktar sinjuri fil-kontenut ta 'flavonoid, u esebit ukolltyrosinaseu imġieba inibitorja tal-collagenase. Il-frazzjoni tal-etanol tat-tliet pjanti, jiġifieri Annona squamosa L., Ardisia elliptica Thunb, u Senna alata (L.) Roxb., għandhom il-potenzjal li jkunu ingredjenti fi prodotti kożmetiċi għal kontra t-tikmix kif ukoll biex jbajdu l-ġilda. Hemm bżonn ta' aktar studji biex jiġu investigati l-komponenti attivi u s-sigurtà ta' dawn l-estratti.

bodybuilding cistanche

Referenzi

1. Moehrle M. Sport fil-beraħ u kanċer tal-ġilda. Klin Dermatol. 2008;26(1):12–5.

2. Lopez-Camarillo C, Ocampo EA, Casamichana ML, Perez-Plasencia C,Alvarez-Sanchez E, Marchat LA. Kinażi tal-proteini u attivazzjoni tal-fatturi tat-traskrizzjoni b'rispons għar-radjazzjoni UV tal-ġilda: implikazzjonijiet għall-karċinoġenesi.Int J Mol Sci. 2012;13(1):142–72.

3. Iwata M, Corn T, Iwata S, Everett MA, Fuller BB. Ir-relazzjoni bejn l-attività tat-tyrosinase u l-kulur tal-ġilda fil-prepuzzi tal-bniedem. J Investig Dermatol.1990;95(1):9–15.

4. Poppa RS. Trattament ta 'Photoaging. N Engl J Med. 2004;350(15):1526–34.

5. Levin CY, Maibach H. Okronożi eżoġena. Aġġornament dwar il-karatteristiċi kliniċi, l-aġenti kawżali, u l-għażliet ta 'trattament. Am J Clin Dermatol. 2001;2(4):213–7.

6. Zhu W, Gao J. L-użu ta 'estratti botaniċi bħala aġenti topiċi għat-tħaffif tal-ġilda għat-titjib ta' disturbi tal-pigmentazzjoni tal-ġilda. J Investig DermatolSymp Proc. 2008;13(1):20–4.

7. Zongo C, Savadogo A, Ouattara L, Bassole IHN, Ouattara CAT, Ouattara AS,Barro N, Koudou J, TraoreI AS. Kontenut ta 'polifenoli, attivitajiet antiossidanti u antimikrobiċi ta' Ampelocissus grantii (furnar) Planch. (Vitaceae): pjanta mediċinali mill-Burkina Faso. Int J Pharmacol. 2010;6(880–887)

8. Yamasaki K, Hashimoto A, Kokusenya Y, Miyamoto T, Sato T. Metodu elettrokimiku għall-istima tal-effetti antiossidattivi tal-estratti tal-metanol ta 'drogi mhux raffinati. Chem Pharm Bull (Tokyo). 1994;42(8):1663–5.

9. Re R, Pellegrini N, Proteggente A, Pannala A, Yang M, Rice-Evans C.Attività antiossidant li tapplika assaġġ imtejjeb ta 'kattiondecolorization radikali ABTS. Free Radic Biol Med. 1999;26(9–10):1231–7.

10. Nithitanakool S, Pithayanukul P, Bavovada R, Saparpakorn P. Studji Moleculardocking u attività ta 'anti-tyrosinase ta' kernelextract taż-żerriegħa tal-mango Tajlandiż. Molekuli. 2009;14(1):257–65.

11. Bonvicini F, Antognoni F, Iannello C, Maxia A, Poli F, Gentilomi GA. Attività rilevanti u selettiva ta 'Pancratium Illyricum L. kontra iżolati kliniċi ta' Candida Albicans: effett kombinat fuq it-tkabbir u l-virulenza tal-ħmira. BMCComplement Altern Med. 2014;14(1):409.

12. Sharma OP, Bhat TK. Assaġġ antiossidant DPPH rivedut. Chem tal-Ikel. 2009;113(4):1202–5.

13. MacDonald-Wicks LK, Wood LG, Garg ML. Metodoloġija għad-determinazzjoni tal-kapaċità antiossidant bijoloġika in vitro: reviżjoni. J Sci Food Agric. 2006;86(13):2046–56.

14. Armstrong BK, Kricker A. L-epidemjoloġija tal-kanċer tal-ġilda kkaġunat mill-UV. JPhotochem Photobiol B Biol. 2001;63(1–3):8–18.

15. Bashir MM, Sharma MR, Werth VP. L-UVB u ċ-ċitokinessinerġikament pro-infjammatorji jattivaw il-produzzjoni ta' TNF fil-keratinoċiti permezz tat-traskrizzjoni msaħħa. J Investig Dermatol. 2009;129(4):994–1001.

16. Watson RE, Gibbs NK, Griffiths CE, Sherratt MJ. Ħsara lill-ġilda extracellularmatrix indotta minn espożizzjoni UV. Sinjal Antioxid Redox. 2014;21(7):1063–77.

17. D'Orazio J, Jarrett S, Amaro-Ortiz A, Scott T. Ir-radjazzjoni UV u l-ġilda. Int JMol Sci. 2013;14(6):12222–48.

18. Pittayapruek P, Meephansan J, Prapapan O, Komine M, Ohtsuki M. Role ofmatrix Metalloproteinases in Photoaging u Photocarcinogenesis. Int J MolSci. 2016;17(6):868.

19. Sulaiman CT, Balachandran I. Fenoliċi totali u flavonoids totali inselected pjanti mediċinali Indjani. Indjan J Pharm Sci. 2012;74(3):258–60.

20. Mamat N, Jamal JA, Jantan I, Husain K. Xanthine Oxidase inibitorji u attivitajiet ta 'tneħħija radikali DPPH ta' xi speċi Primulaceae. SainsMalaysiana. 2014;43(12):1827–33.

21. Wetwitayaklung P, Charoenteeraboon J, Limmatvapirat C, Phaechamud T.Attivitajiet antiossidanti ta 'xi frott Tajlandiż u eżotiku kkultivat fit-Tajlandja.Res J Pharm, Biol Chem Sci. 2012;3(1):12–21.

22. Falcone Ferreyra ML, Rius SP, Casati P. Flavonoids: bijosintesi, funzjonijiet bijoloġiċi, u applikazzjonijiet bijoteknoloġiċi. Quddiem Pjanti Sci. 2012;3:222.

23. Devendra K, Kiran D, Ritesh V, Satyendra B, Abhishek K. Għall-evalwazzjoni ta 'Total Phenolics u Flavonoids f'Pjanti differenti ta' Chhattisgarh. JPharmacognosy Phytochem. 2013;2(4):116–8.

24. Siti-Azima AM, Northam A, Nurhuda M. Attivitajiet antiossidanti ta' SyzygiumCumini u ArdisiaElliptica fir-rigward tal-kompożizzjonijiet Fenoliċi u l-proprjetajiet kromatiċi stmati tagħhom. Int J Biosci Biochem Bioinform. 2013;3(4):314–7.

25. Solovchenko A, Schmitz-Eiberger M. Sinifikat tal-flavonoids tal-ġilda għall-protezzjoni UV-B fil-frott tat-tuffieħ. J Exp Bot. 2003;54(389):1977–84.

26. Gonzalez-Gallego J, Sanchez-Campos S, Tunon MJ. Proprjetajiet anti-infjammatorji ta 'flavonoids tad-dieta. Nutr Hosp. 2007;22(3):287–93.

27. Sudha A, Sumathi K, Manikandaselvi S, Prabhu NM, Srinivasan P. Attività kontra l-epatotossiċi tal-frazzjoni Flavonoid mhux raffinata ta 'Lippia Nodiflora L. korriment tal-fwied indott mill-onethanol fil-firien. Asjatiku J Anim Sci. 2013;7(1):1–13.

28. Sak K. Cytotoxicity of dietary flavonoids on different human cancer types.Pharmacogn Rev 2014;8(16):122–46.

29. Kedare SB, Singh RP. Ġenesi u żvilupp tal-metodu DPPH ta 'assaġġ antiossidant. J Food Sci Technol. 2011;48(4):412–22.

30. Boo HO, Kim TS, Koshio K, Shin JH, Chon SU. Livelli totali ta 'fenoliċi u proprjetajiet antiossidanti f'estratti tal-metanol minn diversi pjanti selvaġġi Vjetnamiżi. Korean J Plant Res. 2011;24(6):659–65.

31. Dudonne S, Vitrac X, Coutiere P, Woillez M, Merillon JM. Studju komparattiv ta 'proprjetajiet antiossidanti u kontenut fenoliku totali ta' 30 estratti ta 'pjanti ta' interess industrijali bl-użu ta 'assaġġi DPPH, ABTS, FRAP, SOD, u ORAC. J AgricFood Chem. 2009;57(5):1768–74.

32. Slominski A, Tobin DJ, Shibahara S, Wortsman J. Melanin pigmentation inmammalian skin and its ormonal regulation. Physiol Rev 2004;84(4):1155–228.

33. Spallejn MD, Raines RT. Struttura u stabbiltà tal-kollaġen. Annu RevBiochem. 2009;78:929–58.

34. Cua AB, Wilhelm KP, Maibach HI. Proprjetajiet elastiċi tal-ġilda tal-bniedem: relazzjoni mal-età, is-sess, u r-reġjun anatomiku. Arch Dermatol Res. 1990;282(5):283–8.

35. Karim AA, Azlan A, Ismail A, Hashim P, Gani SSA, Zainudin BH, Abdullah NA.Kompożizzjoni fenolika, anti-ossidanti, attivitajiet inibitorji kontra t-tikmix u tyrosinase ta 'estratt tal-miżwed tal-kawkaw. BMC Kumpliment Altern Med. 2014;14(381):1–13.