Resistenza Temporali Ta 'Benefiċċji Indotti mill-Eżerċizzju Fuq Memorja dipendenti mill-Hippocampus U Plasticità Sinaptika fil-Ġrieden Femminili Parti 1

Astratt

L-eżerċizzju jiffaċilita n-newroġenesi tal-hippocampal u n-newroplastiċità li mbagħad, tippromwovi l-funzjoni konjittiva. L-istudji preċedenti tagħna wrew li fil-ġrieden maskili, l-eżerċizzju volontarju jippermetti tagħlim dipendenti fuq il-pocampus f'kundizzjonijiet li normalment huma taħt il-limitu għall-formazzjoni ta 'memorja fit-tul f'annimali sedentarji. Tali titjib konjittiv jista 'jinżamm għal żmien twil wara li l-eżerċizzju jkun waqaf u jista' jerġa 'jiġi ingaġġat b'sessjoni ta' eżerċizzju sussegwenti taħt il-limitu, li jissuġġerixxi li l-benefiċċji indotti mill-eżerċizzju huma dinamiċi temporalment.

In-newroplastiċità tirreferi għall-kapaċità tan-newroni li jadattaw kontinwament għal stimuli esterni u attivitajiet interni. Din il-ħila għandha rwol kruċjali fil-formazzjoni u l-ħażna tal-memorja. Cela dit, newroplasticity hija relatata mill-qrib mal-memorja.

In-newroplastiċità sseħħ permezz ta' konnessjonijiet sinaptiċi bejn in-newroni. Meta nirċievu ħaġa ġdida, il-konnessjonijiet bejn in-newroni fil-moħħ se jinbidlu, u jiffurmaw konnessjonijiet sinaptiċi ġodda. Dan il-proċess jeħtieġ prattika ripetuta u ripetizzjoni biex jipproduċu konnessjonijiet sinaptiċi stabbli u fit-tul. Din il-konnessjoni sinaptika fit-tul biss tista 'taffettwa l-memorja u taħżenha.

In-newroplastiċità tinbidel ukoll bl-età u l-esperjenza. In-newroplastiċità hija qawwija ħafna meta nkunu żgħar, u l-moħħ jista’ jifforma konnessjonijiet sinaptiċi ġodda malajr ħafna meta nitgħallmu affarijiet ġodda. Iżda hekk kif nixjieħu, in-newroplastiċità tonqos, li jfisser li jsir aktar diffiċli biex titgħallem informazzjoni ġdida. Madankollu, jekk inżommu attitudni pożittiva u rieda u vizzju biex nitgħallmu affarijiet ġodda b'mod proattiv, xorta nistgħu nżommu ċertu livell ta 'newroplastiċità. Dan ifisser li nistgħu nkomplu nitgħallmu u nikbru, intejbu l-memorja u l-intelliġenza tagħna.

Fil-qosor, in-newroplastiċità u l-memorja huma relatati mill-qrib. Iż-żamma ta 'attitudni pożittiva u l-vizzju li nitgħallmu b'mod attiv għarfien ġdid jistgħu jgħinuna nżommu newroplastiċità tajba, u b'hekk niksbu memorja u intelliġenza aħjar. Ejja nistudjaw bla waqfien, inżommu attitudni pożittiva, u ntejbu kontinwament l-abbiltajiet u l-kwalitajiet tagħna. Wieħed jista 'jara li għandna bżonn ntejbu l-memorja tagħna. Cistanche deserticola jista 'jtejjeb b'mod sinifikanti l-memorja minħabba li Cistanche deserticola huwa materjal mediċinali tradizzjonali Ċiniż b'ħafna effetti uniċi, li wieħed minnhom huwa li jtejjeb il-memorja. L-effikaċja tal-laħam ikkapuljat ġejja mid-diversi ingredjenti attivi li fih, inklużi l-aċidu, il-polisakkaridi, il-flavonoids, eċċ. Dawn l-ingredjenti jistgħu jippromwovu s-saħħa tal-moħħ b'diversi modi.

Ikklikkja taf 10 modi biex ittejjeb il-memorja

Fin-nisa, il-punt sa fejn il-benefiċċji tal-eżerċizzju jistgħu jinżammu u l-mekkaniżmi sottostanti din il-manutenzjoni għadhom iridu jiġu definiti. Hawnhekk, eżaminajna l-parametri tal-eżerċizzju meħtieġa biex nibdew u nżommu l-benefiċċji tal-eżerċizzju fil-ġrieden C57BL/6J nisa. Bl-użu ta 'verżjoni subthreshold tal-kompitu dipendenti mill-hippocampus imsejjaħ kompitu tal-memorja tal-lokazzjoni tal-oġġett (OLM), aħna nuru li 14d ta' eżerċizzju volontarju jippermetti t-tagħlim taħt kundizzjonijiet ta 'akkwist subthreshold fil-ġrieden nisa. Wara l-eżerċizzju inizjali, dewmien sedentarju 7d jirriżulta fi prestazzjoni mnaqqsa, li tista’ terġa’ tiġi ffaċilitata meta l-annimali jirċievu eżerċizzju ta’ riattivazzjoni 2d wara d-dewmien sedentarju.

Il-valutazzjoni taċ-ċiklu tal-estru tiżvela attività mtejba ta' ġiri tar-roti matul il-fażi tal-estru relattiva għall-fażi tal-estrus, filwaqt li l-fażi tal-estrus fuq it-taħriġ jew it-test ma affettwax il-prestazzjoni tal-OLM. Bl-użu tal-istess parametri tal-eżerċizzju, aħna nuru li 14d ta' eżerċizzju jtejjeb il-potenzjal fit-tul ( LTP) fir-reġjun CA1 ta 'l-ippokampus, effett li jippersisti matul dan id-dewmien dentari u wara s-sessjoni ta' eżerċizzju ta 'riattivazzjoni. Studji preċedenti pproponew regolazzjoni 'l fuq tal-BDNF indotta mill-eżerċizzju bħala l-mekkaniżmu sottostanti benefiċċju medjat mill-eżerċizzju fuq il-plastiċità sinaptika u l-konjizzjoni.

Madankollu, il-valutazzjoni tagħna tal-espressjoni tal-mRNA tal-Bdnf tal-hippocampal wara l-irkupru tal-memorja ma tiżvela l-ebda differenza bejn il-kundizzjonijiet tal-eżerċizzju u l-kontroll, li tissuġġerixxi li r-regolazzjoni persistenti tal-Bdnf tista 'ma tkunx meħtieġa għaż-żamma tal-benefiċċji indotti mill-eżerċizzju. Flimkien, id-dejta tagħna tindika li 14d ta 'eżerċizzju volontarju jista' jagħti bidu għal benefiċċji fit-tul fuq in-newroplastiċità u l-funzjoni konjittiva fil-ġrieden nisa, li jistabbilixxi l-ewwel evidenza tar-reżistenza temporali ta 'benefiċċji indotti mill-eżerċizzju fin-nisa.

Kliem ewlieni

Eżerċizzju; Tagħlim; Hippokampus; Plastiċità sinaptika; BDNF; Ċiklu estrus.

1. Introduzzjoni

L-effetti tal-eżerċizzju fiżiku fuq l-appoġġ u ż-żamma tas-saħħa tal-moħħ huma dokumentati tajjeb. Fil-moħħ, l-ippokampus huwa kritiku għat-tagħlim u l-formazzjoni tal-memorja peress li t-tfixkil ta 'din l-istruttura tal-moħħ iwassal għal indebolimenti tal-memorja (Packard & McGaugh, 1996; Riedel et al., 1999; Scoville & Milner, 1957). Għalhekk, alterazzjonijiet morfoloġiċi u funzjonali aberranti fl-ippokampus huma attribwiti għal indebolimenti konjittivi assoċjati ma 'xjuħija u stati ta' mard (Bettio et al., 2017).

Studji kemm fil-bnedmin (ten Brinkeet al., 2015; Erickson et al., 2011; Pajonk et al., 2010; Teixeira et al., 2018) kif ukoll mudelli tal-annimali (Cooper et al., 2018; Neeper et al., 1996; O'Callaghan et al., 2007; Van Praag, 2008) wrew l-effetti tal-eżerċizzju fuq l-appoġġ tal-integrità strutturali u funzjonali tal-ippokampus, li jissuġġerixxu li l-eżerċizzju fiżiku huwa intervent mhux farmakoloġiku effettiv għal indeboliment konjittiv kemm f'kundizzjonijiet fiżjoloġiċi kif ukoll patoloġiċi (Intlekofer & Cotman, 2013; Lauretta et al., 2021; Liu et al., 2011; Muscari et al., 2010).

Minkejja riċerka abbundanti dwar l-effetti ta 'benefiċċju tal-eżerċizzju u r-relazzjoni bejn l-ippokampus u l-funzjoni konjittiva, ftit hu magħruf dwar id-dinamika temporali tal-benefiċċji indotti mill-eżerċizzju. Jiġifieri, x'inhu t-tul tal-eżerċizzju meħtieġ biex tiżdied il-funzjoni tal-hippocampal, u kemm idum jippersistu dawn il-benefiċċji wara li jieqaf l-eżerċizzju?

Anke inqas studji ppruvaw jinvestigaw il-mekkaniżmi molekulari sottostanti għaż-żamma ta 'benefiċċji indotti mill-eżerċizzju. Minħabba li l-korsijiet ta’ eżerċizzju fil-bnedmin huma inqas riġidi u konsistenti minn dawk użati fi studji fuq l-annimali (Lee & Skerrett, 2001), huwa importanti li jiġu żviluppati protokolli ta’ eżerċizzju li jkunu flessibbli u ma jeħtiġux rutina ta’ eżerċizzju ta’ kuljum iżda xorta jistgħu jimpenjaw ruħhom u jżommu konjittivi indotti mill-eżerċizzju. benefiċċji. Fi studji fuq l-annimali, huwa diffiċli li tidentifika t-tul minimu ta 'eżerċizzju meħtieġ biex jinbdew u jinżammu l-benefiċċji ta' l-eżerċizzju minħabba varjabbiltà konsiderevoli fil-protokolli ta 'eżerċizzju użati madwar l-istudji (Loprinzi et al., 2019). Għalhekk, jibqa 'importanti li jiġi eżaminat il-limitu ta' eżerċizzju li jinduċi u jżomm benefiċċji konjittivi u l-mekkaniżmi sottostanti.

L-eżerċizzju jiffaċilita n-newroplastiċità, in-newroġenesi, u sussegwentement, it-tagħlim u l-memorja permezz ta’ mekkaniżmi li jinduċu l-azzjoni newrotrofika ta’ fattur newrotrofiku derivat mill-moħħ (BDNF) fl-ippokampus (Alomari et al., 2013; Cotman et al., 2007; Cotman & Berchtold, 2002; D. et al., 2011; Triviño-Paredes et al., 2016; Van Praag, Christie, et al., 1999; Van Praag, Kempermann, et al., 1999). F'annimali gerriema kemm nisa kif ukoll maskili, l-eżerċizzju jtejjeb il-prestazzjoni tal-imġieba f'varjetà wiesgħa ta' ħidmiet tal-memorja, inklużi l-kompiti orjentati lejn l-ispazju, ibbażati fuq l-ippokampus: Morris water maze (MWM), object-locationmemory (OLM) u labirint tad-driegħ radjali flimkien ma 'oħrajn Ħidmiet tal-memorja bbażati fuq l-ippokampu bħall-kondizzjonament tal-biża' kuntestwali, l-evitar passiv u r-rikonoxximent ta' oġġetti ġodda (Intlekofer et al., 2013; Lambert et al., 2005; O'Callaghan et al., 2007; Van Praag, Christie, et al., 1999; Van Praag, Kempermann, et al., 1999; Vivar, Potter, & Van Praag, 2012).

L-annimali gerriema maskili, l-istudji tagħna u oħrajn identifikaw li tul ta’ eżerċizzju minimu ta’ ġimagħtejn huwa meħtieġ għal benefiċċji fuq it-tagħlim u l-memorja li jistgħu jinżammu permezz ta’ perjodu ta’ inattività u jerġgħu jiġu ingaġġati permezz ta’ introduzzjoni mill-ġdid għal sessjoni qasira ta’ eżerċizzju 2d taħt il-limitu (Berchtold et al., 2010; Butler et al., 2019; Intlekofer et al., 2013). Fuq il-livell molekulari, ġimgħatejn ta 'eżerċizzju jinduċu regolazzjoni 'l fuq tal-proteina tal-fattur newrotrofiku derivat mill-moħħ tal-hippocampal fil-firien maskili (Berchtold et al., 2005).

Wara t-tnaqqis ta 'livelli ta' BDNF elevati għal-linja bażi, introduzzjoni mill-ġdid sussegwenti għal sessjoni ta 'eżerċizzju qasira, subthreshold 2d tista' tiffaċilita mill-ġdid livelli elevati ta 'BDNF tal-hippocampal (Berchtold et al., 2005). Dan jissuġġerixxi regolazzjoni 'l fuq tal-BDNF medjata mill-eżerċizzju bħala mekkaniżmu potenzjali li jmexxi bidliet newronali fit-tul biex jippermetti stimolu ta' frekwenza ta 'eżerċizzju aktar baxx biex jikkapitalizza fuq dawn l-adattamenti u jiffaċilita l-benefiċċji konjittivi.

Is-sinjalar BDNF jippromwovi mekkaniżmi li jiddependu mis-sintesi tal-proteini biex jinduċu l-potenzazzjoni fit-tul tal-hippocampal (LTP), korrelazzjoni ċellulari tat-tagħlim u l-memorja (Panja & Bramham, 2014; Silva, 2003). Għalhekk, it-titjib ta 'l-LTP ta' l-ippocampal wara l-eżerċizzju huwa ssuġġerit bħala bażi ta 'tagħlim iffaċilitat mill-eżerċizzju (L. Bettio et al., 2019; Liuet al., 2011). Sa fejn nafu tagħna, l-ebda studju s'issa ma investiga jekk it-titjib tal-LTP jippersistix wara l-waqfien tal-eżerċizzju fiż-żewġ sess. Diversi studji wrew eżerċizzju biex itejbu b'mod effiċjenti l-LTP fil-ġirnu dentat (Farmer et al., 2004; Van Praag, Christie, et al., 1999; Vasuta et al., 2007), madankollu, hemm nuqqas sorprendenti ta 'riċerka li tinvestiga kif l-eżerċizzju jimmodula l-plastiċità sinaptika fis-subfield CA1 (Cotman et al.,2007), li sservi bħala l-aktar żona studjata fl-ippokampus fil-kuntest tal-memorja spazjali (Patten et al., 2015). Għalhekk, ir-relazzjoni bejn l-eżerċizzju u l-plastiċità CA1 għadha trid tiġi esplorata.

Diversi studji appoġġaw l-ipoteżi li l-benefiċċji indotti mill-eżerċizzju huma temporalment dinamiċi (Berchtold et al., 2005, 2010; Butler et al., 2019; YP Kim et al., 2003). Rigward l-annimali nisa, il-fehim tagħna ta 'dan il-proċess huwa inqas prominenti peress li ħafna mix-xogħol sar primarjament fl-irġiel. Studji dwar it-tagħlim u l-memorja pprovdew evidenza li riżultati ta’ mġiba simili bejn is-sessi jistgħu jinvolvu mekkaniżmi newrali differenti (Becker & Koob, 2016; Keizer & Wood, 2019; Sase et al., 2019). Minkejja d-dejta li tindika li l-eżerċizzju jtejjeb in-newroplastiċità u l-konjizzjoni fiż-żewġ sessi, hemm evidenza ċara għall-effetti speċifiċi għas-sess tal-eżerċizzju u l-mekkaniżmi sottostanti.

Inumani, l-eżerċizzju jtejjeb il-memorja tal-lokazzjoni tal-oġġett fl-irġiel u mhux fin-nisa (Colemanet al., 2018). F'annimali gerriema, l-eżerċizzju jtejjeb b'mod selettiv il-prestazzjoni ta 'sess wieħed f'ċerti kompiti tal-memorja (Barha et al., 2017). Fuq il-livell molekulari, id-distribuzzjoni tal-BDNFacross strutturi multipli tal-moħħ u sottoreġjuni tal-hippocampus hija differenti bejn is-sessi (Bakos et al., 2009; Franklin & Perrot-Sinal, 2006). L-evidenza akkumulata enfasizzat ukoll differenzi bejn is-sess fil-funzjonijiet u l-mekkaniżmi tal-BDNF (Chan & Ye, 2017). al., 2014; Moreno-Piovano et al., 2014; Chan & Ye, 2017).

Il-livelli tal-proteina HippocampalBDNF ivarjaw tul iċ-ċiklu tal-estrous bl-ogħla espressjoni osservata waqt l-estru u l-proestrus, li jissuġġerixxu varjazzjonijiet fil-livelli tal-estroġenu matul iċ-ċiklu tal-estrous fin-nisa jaffettwaw b'mod differenzjali l-espressjoni tal-BDNF (Scharfman et al., 2003). Barra minn hekk, iċ-ċiklu tal-estru jista 'wkoll jimmodula miri downstream tal-mogħdijiet tas-sinjalar tal-BDNF fl-ippokampus (Spencer et al., 2008; Spencer-Segal et al., 2011). L-espressjoni ta 'diversi ġeni involuti fil-funzjoni tal-hippocampal tgħaddi wkoll minn bidliet dinamiċi matul iċ-ċiklu tal-estru (Iqbal et al., 2020). B'mod kollettiv, din id-dejta tenfasizza l-ħtieġa li jiġu eżaminati l-benefiċċji indotti mill-eżerċizzju separatament fin-nisa u l-irġiel.

Peress li l-istudju preċedenti tagħna stabbilixxa l-limitu ta 'eżerċizzju li jimpenja u jżomm funzjoni konjittiva mtejba bl-eżerċizzju fil-ġrieden maskili (Butler et al., 2019), aħna użajna l-istess paradigma ta' eżerċizzju biex neżaminaw id-dinamika temporali tal-benefiċċji indotti mill-eżerċizzju fil-ġrieden nisa. F'dan l-istudju, aħna nuru li fil-ġrieden nisa, 14d ta 'eżerċizzju volontarju jippermetti formazzjoni ta' memorja fit-tul taħt kundizzjonijiet ta 'akkwist subthreshold tal-kompitu tal-memorja tal-lokazzjoni tal-oġġett (OLM). Simili għall-irġiel (Butler et al., 2019), il-benefiċċji inizjali indotti mill-eżerċizzju jinżammu permezz ta 'perjodu ta' dewmien sedentarju 7d u jistgħu jerġgħu jiġu ingaġġati b'perjodu qasir ta '2d ta' eżerċizzju ta 'riattivazzjoni biex jippermettu formazzjoni tal-memorja fit-tul taħt kundizzjonijiet ta' akkwist taħt il-limitu.

Il-prestazzjoni tal-OLM ma kinitx affettwata mill-fażijiet taċ-ċiklu tal-estrous fil-ħin tat-taħriġ jew tat-test. Madankollu, l-attività volontarja tar-roti kienet imsaħħa matul il-fażi ta 'estru. Barra minn hekk, nuru li l-eżerċizzju jtejjeb l-LTP fir-reġjun CA1 tal-ippokampus fin-nisa, u dan l-effett jippersisti anke wara perjodu ta 'dewmien sedentarju, li jistabbilixxi l-ewwel evidenza tar-reżistenza temporali ta' newroplastiċità indotta mill-eżerċizzju fin-nisa. B'sorpriża tagħna, il-valutazzjoni tal-espressjoni tal-Bdnf tal-ippokampju wara l-irkupru tal-memorja ma tat l-ebda differenza bejn il-gruppi esperimentali, li tissuġġerixxi li r-regolazzjoni persistenti tal-BDNF tista' ma tkunx meħtieġa biex jinżammu benefiċċji konjittivi indotti mill-eżerċizzju.

2. Materjali u metodi

2.1. Annimali

Ġrieden C57BL/6J nisa, 8-ta' ġimgħa (Jackson Laboratory) kienu miżmuma individwalment kundizzjonijiet mifhuma (20 grad ± 1 grad; 70% ± 10% umdità; 12 h: 12 h ċiklu tad-dawl u d-dlam) u pprovdew ad aċċess libitum għall-ikel u l-ilma. L-esperimenti kollha saru matul il-fażi tad-dawl. L-esperimenti kollha twettqu mil-linji gwida tal-Istitut Nazzjonali tas-Saħħa għall-kura u l-użu tal-annimali u ġew approvati mill-Kumitat Istituzzjonali għall-Kura u l-Użu tal-Annimali tal-Università ta 'Kalifornja, Irvine.

2.2. Trattament ta 'eżerċizzju

Il-ġrieden kienu maqsuma fi gruppi ({{0}}–0–0: n=8, 14–0–0: n=7, 14–7–0: n=8, 14–7–2; n=8)u miżmuma individwalment jew f'gaġeġ tal-eżerċizzju (mgħammra b'rota tal-ġiri) jew gaġeġ sedentarji (gaġġa standard ). Il-gaġeġ tal-eżerċizzju huma magħmula minn polikarbonat ta '9.3 in × 13.9 in × 7.7 in (tul × wisa' × għoli) u mgħammra b'rota tal-ġiri ta '40 ċm fiċ-ċirkonferenza, dijametru ta' 12.7cm (Lafayette Instruments).

It-tħaddim volontarju tar-roti kien immonitorjat permezz ta' {{0}},110Sensor/Kontro mqabbad f'interface ċentrali konnessa ma' PC dedikat b'Softwer ta' Monitoraġġ ScurryActivity (Lafayette Instruments). Il-parametri ta' l-eżerċizzju jikkonsistu f'perjodu inizjali ta' eżerċizzju (0 jew 14d) segwit minn dewmien sedentarju (0 jew 7d), li matulu tneħħiet ir-rota tal-ġirja. Wara dan il-perjodu ta 'inattività, xi ġrieden ġew assenjati biex jirċievu sessjoni ta' eżerċizzju ta 'riattivazzjoni, li tikkonsisti f'aċċess 2D għar-roti tal-ġiri (ara Fig. 1).

2.3. Identifikazzjoni tal-istadju taċ-ċiklu tal-estrous tal-ġurdien

Il-fażijiet taċ-ċiklu tal-estru ġew segwiti u mmonitorjati madwar l-istess ħin (~ 10 am) kuljum, li jibdew fl-ewwel jum tat-tħaddim tar-roti. Kemm il-valutazzjoni viżwali kif ukoll il-vaġinali saru darba kuljum kif deskritt minn McLean et al. (2012) u Ajayi andAkhigbe (2020). Bl-użu ta 'pipetta, ittieħdu spots vaġinali mxarrba f'5 uL ta' salina.

Biex jiġu evitati l-effetti psewdotqala (Adler & Zoloth, 1970), il-ponta tal-pipetta ġiet imqiegħda bir-reqqa biex ma tippenetrax l-orifiċju vaġinali. Il-fluwidu tal-ġbir tpoġġa fuq slide tal-ħġieġ u imnixxef bl-arja atRT. Ladarba t-tiċrit kien niexef kompletament, il-pjastri ġew imtebba 'b'tebgħa vjola tal-kristall ta' 0.1% (McLean et al., 2012). Il-valutazzjoni taċ-ċitoloġija saret kif xieraq biex tidentifika l-fażijiet taċ-ċiklu tal-estru (ara Fig. 2E).

2.4. Kompitu tal-memorja tal-Oġġett-Lokazzjoni (OLM) subthreshold

2.4.1. Apparat—Il-kompitu subthreshold, 3-minuta tal-memorja tal-lokazzjoni tal-oġġett (OLM) twettqet bl-użu ta' sett ta' 4 kmamar identiċi. Kull kamra kienet magħmula minn abjad-coloredplastic b'dimensjonijiet ta '333 mm × 320 mm × 310 mm (tul × wisa' × għoli) andcontained ~ 1 ċm fond Sani-Chips (PJ Murphy Forest Products). Strixxa ta 'blackmarking matte vertikali ġiet imwaħħla ma' naħa waħda ta 'kull kamra biex isservi bħala l-kueċ ta' navigazzjoni spazjali. Kull kuntest kien imdawwal b'dawl isfar baxx (~ 15 lx). L-imġieba esploratorja ġiet irreġistrata u skurjat offline bl-użu ta 'softwer ta' traċċar tal-labirint (Stoelting Co.).

2.4.2. Disinn sperimentali — It-taħriġ, l-ittestjar u l-analiżi tal-OLM saru kif deskritt minn Vogel-Ciernia et al. (2015) bit-tul tal-akkwist aġġustat għal 3 min, li qabel urejna li huwa subthreshold għall-kodifikazzjoni, li jirriżulta fi prestazzjoni fqira kemm fil-memorja għal żmien qasir kif ukoll fit-tul (Butler et al., 2019; Intlekofer et al.,2013; Malvaez et al., 2013; McQuown et al., 2011). Qabel it-taħriġ tal-OLM, il-ġrieden ġew immaniġġjati u mbagħad abituati mal-kuntest sperimentali. Il-ġrieden ġew immaniġġjati għal 2 min kuljum għal 4 ijiem konsekuttivi bl-aħħar jumejn ta 'tqandil jikkoinċidu ma' l-abitazzjoni. L-abitazzjoni seħħet fuq 6 ijiem, li matulhom il-ġrieden ġew esposti għall-kuntest sperimentali għal 5 minuti kuljum. Sessjonijiet ta 'abitwazzjoni ġew analizzati (biex jiddeterminaw id-distanza vjaġġata u l-veloċità) bl-użu ta' softwer ta 'analiżi tal-imġieba ANY-maze. L-attività mnaqqsa matul il-jiem intużat bħala indikatur ta' abitazzjoni b'suċċess (Figura Supplimentari S1, S2). Irrispettivament mir-reġim ta 'eżerċizzju, ir-roti tal-ġiri tneħħew il-lejl qabel it-taħriġ OLM biex jiġu eliminati l-effetti immedjati tat-tħaddim tar-roti fuq l-imġieba.

Wara l-abitazzjoni, il-ġrieden irċevew sessjoni ta' akkwist ta' 3-minuti fejn żewġ oġġetti identiċi (100-mL tazzi tal-ħġieġ mimlija bis-siment) tqiegħdu f'postijiet distinti (post A1, fuq ix-xellug, jone A2, fuq il-lemin). L-oġġetti tqiegħdu 9 ċm 'il bogħod minn xulxin, 6 ċm mill-ħitan tal-ġenb, u 1 ċm mill-ħajt ta' quddiem. Biex jevalwaw il-memorja fit-tul, il-ġrieden għaddew minn test ta' 5 minuti, 24 siegħa wara t-taħriġ li matulu oġġett wieħed familjari (kontrobilanċjat) ġie mċaqlaq għal post ġdid (lokazzjoni A3, nofs t'isfel) pożizzjonat 2.5 ċm mill-ħajt tal-qiegħ. L-esplorazzjoni tal-oġġett fir-rumanz (post A3) vs. il-post familjari/fiss (A1) ġiet eżaminata.

L-esplorazzjoni ngħatat punteġġ biss meta r-ras tal-maws ippuntat lejn l-oġġett u daħlet sa 1 ċm jew meta l-imnieħer mess l-oġġett. Il-ħin totali tal-esplorazzjoni ġie rreġistrat (t) u l-preferenza għall-oġġett ġdid kienet espressa bħala indiċi ta’ diskriminazzjoni (DI=( novell −familjari) / (rumanz + familjari) × 100%). Għas-sessjonijiet ta' taħriġ, l-oġġett magħżul biex jiġi mċaqlaq matul is-sessjoni tat-test intuża bħala l-oġġett ġdid biex jippermetti t-taħriġ u l-ittestjar tad-DI li jitqabblu direttament.

Ġrieden li esploraw<2 s during testing or training were excluded from the study. Mice that showed a preference for either object during training (DI > ± 20) were also excluded. All habituation, training, test, and scoring were performed by experimenters blinded to the experimental groups. Mice were sacrificed 60 min after the test and the dorsal hippocampi were dissected and stored at −80 °C until processing for RT-qPCR.

For more information:1950477648nn@gmail.com