L-Estratt Metanoliku tal-Ispinaċi Jattenwa Id-Deġenerazzjoni tar-Retina fil-Firien Dijabetiċi Parti 2

Jekk jogħġbok ikkuntattjaoscar.xiao@wecistanche.comgħal aktar informazzjoni

3. Riżultati

3.1.L-Estratt Metanoliku tal-Ispinaċi (SME) Inibixxi l-Glycation In Vitro tal-Albumina tas-Serum Bovini (BSA) 3.1.1. L-Effett tal-SME fuq il-Formazzjoni ta' Prodotti Tmiem Avvanzati ta' Glycation (AGEs) u Fructosamine

Ġie determinat l-effett ta 'antiglycation f'konċentrazzjonijiet differenti ta' SME fuq BSA. Dan l-effett ġie evalwat permezz ta 'inibizzjoni tal-formazzjoni ta' AGEs u fructosamine fit-taħlitiet: zokkor li jnaqqsu BSA (glukożju jew fruttożju) u BSA-methylglyoxal (BSA-MGO) wara erba 'ġimgħat ta' inkubazzjoni. Tabella 1 turi r-riżultati tal-formazzjoni ta 'AGEs evalwati bil-fluworexxenza.tkabbir tal-pene cistancheFiz-zokkor li jnaqqas il-BSA u t-taħlitiet ta’ BSA-MGO inkubati ma’ SME f’200 mg/mL (SME-200), il-livell ta’ AGEs naqas meta mqabbel mal-kontrolli pożittivi (BSA-glucose, BSA-fructose, u BSA- MGO)(p<0.05). concentrations="" below="" 20mg/ml="" did="" not="" show="" significant="" differences="" compared="" to="" positive="" controls.="" the="" inhibition="" of="" ages="" formation="" by="" aminoguanidine(ag)="" in="" bsa-reducing="" sugars="" and="" bsa-mgo="" was="" higher="" than="" sme-200=""><0.05) and,="" therefore,="" than="" the="" positive="" controls=""><0.01). both="" sme-200="" and="" ag="" decreased="" fructosamine="" concentrations="" compared="" with="" controls=""><0.05).sme-200 compared="" to="" agin="" incubation="" with="" bsa-mgo="" further="" reduced="" the="" level="" of="" fructosamine=""><0.05)(table>

3.1.2. Effett ta 'SME fuq Livelli ta' Carbonyl u Gruppi ta 'Thiol Mnaqqsa

Biex jiġi ddeterminat jekk l-SME jinibixxix l-ossidazzjoni tal-BSA relatata mal-formazzjoni ta 'gruppi karboniliċi u t-tnaqqis tal-gruppi thiol matul il-glikazzjoni tagħha, twettqu analiżi in vitro. Tabella 1 turi l-livelli tal-gruppi tal-karbonil taħt kundizzjonijiet ta 'inkubazzjoni bl-użu tat-taħlitiet ta' zokkor li jnaqqsu l-BSA u BSA-MGO. F'dawn it-taħlitiet, kien hemm relazzjoni inversa bejn il-konċentrazzjonijiet tal-SME u l-livell tal-gruppi tal-karbonil. B'mod partikolari, l-SME-200 induċiet tnaqqis sinifikanti meta mqabbla mal-kontrolli pożittivi (p<0.05). as="" expected,="" ag="" significantly="" inhibited="" the="" formation="" of="" carbonyl="" groups="" in="" the="" bsa-reducing="" sugars="" and="" bsa-mgo="" (p=""><0.01), demonstrating="" its="" inhibitory="" effect="" on="" protein="" carbonylation,="" as="" reported="" [39].="" between="" sme="" and="" ag,="" there="" was="" no="" difference="" in="" carbonylation="">

Jekk jogħġbok ikklikkja hawn biex tkun taf aktar

Id-determinazzjoni tal-livelli tal-gruppi thiol fil-BSA saret waqt l-assaġġ tal-glikazzjoni. Konċentrazzjonijiet SME wrew tendenza li jikkonservaw gruppi thiol fit-taħlitiet kollha. Fl-SME-200, instab żieda sinifikanti fil-livell tal-gruppi thiol fi zokkor li jnaqqas il-BSA (p<0.05) and="" the="" bsa-mgo=""><0.01) compared="" to="" positive="" controls.="" ag="" induced="" the="" highest="" conservation="" of="" thiol="" groups="" in="" bsa-reducing="" sugars="" and=""><0.05). however,="" in="" the="" incubation="" of="" sme-200="" with="" bsa-mgo,="" thiol="" group="" levels="" are="" higher="" compared="" to="" ag="" (p=""><0.05) (table="">

Konċentrazzjonijiet ta '5, 10, u 25 mg/mL ta' SME studjati f'assaġġ preċedenti ma wrewx livelli sinifikanti għall-inibizzjoni ta 'AGEs, fructosamine, formazzjoni ta' grupp karbonil, u tnaqqis ta 'gruppi thiol tal-BSA (dejta mhux murija).

Fis-suppliment 2, il-komposti probabbli tal-karbonil u l-AGEs prodotti waqt l-inkubazzjoni ta 'BSA maz-zokkor li jnaqqas huma murija. Il-molekuli li jirriżultaw mit-trasformazzjoni tal-grupp ta' thiol ridott (cys34) ta' BSA prodott minn inkubazzjoni MGO jew glyoxal huma murija wkoll [40-42].

3.2.Studji ta 'SME fir-Retina ta' Firien Dijabetiċi Indotti minn STZ (STZ)

3.2.1.Effett ta 'SME fuq Formazzjoni Carboxymethyl-Lysine (CML) u l-Interazzjoni Tiegħu mar-Riċettur ta' AGEs (RAGE) f'STZ

Figura 1 turi l-effetti ta 'SME f'400 mg/kg fuq il-formazzjoni CML, espressjoni RAGE, u interazzjoni CML-RAGE (CML/RAGE) fuq ir-retina ta' STZ. Fil-Figura 1A, huwa osservat li kemm CML kif ukoll RAGE huma mqassma fis-saff taċ-ċelluli ganglion (GCL), saff taċ-ċelluli interni (INL), u saff nukleari ta 'barra (ONL), filwaqt li CML/RAGE magħquda kienet prinċipalment imqassma f'INL.cistanche salsa benefiċċjiIl-Figura 1B-D turi d-densità ottika integrata (OD) għal CML, RAGE, u CML/RAGE fis-saffi differenti tar-retina (preżentata bħala plot ta 'kaxxa u whisker minimu sa massimu). Id-dejta (medja ± SD) hija inkluża fl-Appendiċi A (Tabella A1).

Figura 1. Effett tal-estratt metanoliku tal-ispinaċi (SME) fuq carboxymethyl-lysine (CML), ir-riċettur għall-prodotti finali tal-glikazzjoni avvanzata (RAGE), u l-interazzjoni CML-RAGE (CML/RAGE) fir-retina tal-firien dijabetiċi indotti minn streptozotocin ( STZ). (A) Id-distribuzzjoni għat-tbajja' CML, RAGE u CML/RAGE huma murija fir-retini tal-firien normogliċemiċi (NG), STZ, ittrattati b'aminoguanidine (STZ-AG) u ttrattati b'SME (STZ-SME). (BD) uri d-densità ottika integrata (IOD, lum/pixel²) f'plott ta 'kaxxa u whisker fis-saff taċ-ċelluli tal-ganglion (GCL), saff nukleari ta' ġewwa (INL), u saff nukleari ta 'barra (ONL) għal kull immunostaining. *p<0.01 compared="" to="" ng;=""><0.01 compared="" to="" stz;="" and=""><0.01 compared="" to="" stz-ag.magnification="" 200×.n1="PR" =="" photoreceptors.="">cistanche tubulosa dożaġġ redditIl-Figura 1B turi li l-SME naqqas l-immunostaining CML fit-tliet saffi tar-retina meta mqabbla ma 'STZ (p<0.01). the="" treatment="" with="" ag(stz-ag)presented="" a="" more="" significant="" decrease="" than="" stz-sme="" in="" cml="" staining="" in="" both="" inl="" and=""><0.05). in="" gcl,="" there="" was="" no="" difference.="" in="" ng,="" cml="" staining="" was="" lower="" in="" the="" three="" retinal="" layers="" than="" in="" all="" those="" treated="" with="" stz(p≤0.05).="" figure="" 1c,="" and="" d="" show="" that="" stainings="" for="" rage="" and="" cml/rage="" were="" higher="" in="" stzthan="" stz-sme,="" stz-ag,="" and="" ng=""><>

Cistanche jista 'anti-aging

Rigward it-tbajja’ ta’ RAGE bejn STZ-SME u STZ-AG, ma kien hemm l-ebda differenza bejn GCL u INL, filwaqt li f’ONL, ġiet osservata żieda fl-STZ-SME (p<0.01).stz-sme decreased="" cml/rage="" in="" all="" three="" retinal="" layers="" compared="" to="" stz=""><0.01), whereas="" stz-agin="" gcl="" and="" onlinduced="" a="" more="" significant="" decrease="" than="" sme=""><0.01). in="" inl,="" between="" stz-ag="" and="" stz-sme,="" there="" was="" no="">

3.2.2. Effett Antiossidant ta 'SME fir-Retina ta' STZ

L-effett antiossidant ta 'SME ġie evalwat permezz ta' immunostaining għal NADPH oxidase-4 (Nox-4), nitric oxide synthase inducible (iNOS), u nitrotyrosine (NT). Figura 2A turi d-distribuzzjoni ta 'kull immunostaining fit-tliet saffi tar-retina (GCL, INL, u ONL). Il-Figura 2B-D turi l-perċentwal taċ-ċelloli pożittivi għal kull markatur ippreżentat bħala minimu għall-plott massimu tal-kaxxa u l-whisker. Id-dejta (medja ± SD) hija inkluża fl-Appendiċi A(Tabella A2). Għat-tbajja 'Nox4 (Figura 2B), it-trattament SME (STZ-SME) naqqas il-perċentwal ta' ċelloli mtebbgħin fit-tliet saffi tar-retina meta mqabbel ma 'STZ (p<0.05). comparing="" stz-sme="" with="" stz-ag,="" stz-sme="" showed="" a="" lower="" decrease="" for="" nox4="" in="" the="" three="" retinal="" layers="" (p=""><0.05).>L-immunostaining iNOS tqassmet ukoll fit-tliet saffi tar-retina (Figura 2A).Fil-Figura 2C, STZ-SME naqqas il-perċentwal ta 'ċelluli pożittivi għal iNOS fit-tliet saffi tar-retina meta mqabbel ma' STZ (p<0.01). comparing="" sme="" effect="" with="" ag="" in="" this="" immunostaining,="" stz-ag="" decreased="" significantly="" in="" the="" three="" retinal="" layers=""><0.01). figure="" 2dshows="" the="" percentage="" of="" the="" positive="" cells="" for="" nt="" in="" the="" different="" groups.="" sme="" decreased="" this="" value="" for="" all="" retinal="" layers="" compared="" to=""><0.01). when="" the="" percentage="" between="" sme="" and="" ag="" was="" compared,="" there="" was="" no="" difference="" in="" gcl,="" whereas,="" in="" inl="" and="" onl,="" stz-sme="" had="" a="" lower=""><0.01). the="" ng="" group="" showed="" the="" lowest="" oxidative="" markers="" than="" the="" stz="" group="" (p="" <="" 0.01).="">cistanche แอ ม เว ย์Ġie determinat ukoll l-effett antiossidant ta 'SME fir-retina dijabetika permezz ta' livelli ta 'formazzjoni ta' malondialdehyde (MDA). Figura 3 turi l-konċentrazzjonijiet MDA fil-gruppi studjati. F'STZ-SME u STZ-AG, il-livelli ta' MDA (5.1±0.1 u4.34±1.{{10}}) naqsu meta mqabbla ma' STZ (6.3±0.8;p<0.01). comparing="" stz-sme="" with="" stz-ag,="" the="" levels="" are="" increased="" in=""><0.05).in ng(2.07±0.42),="" the="" levels="" were="" lowest="" compared="" to="" the="" stz="" groups=""><>

Figura 2. Effett antiossidant ta 'SME fir-retina ta' STZ. (A) Mikrografi rappreżentattivi ta 'immunofluworexxenza għal NADPH oxidase 4(Nox-4)(A), nitric oxide synthase inducible (iNOS), u nitrotyrosine (NT). (BD) uri l-plottijiet tal-kaxxa u l-whisker tal-perċentwali ta 'ċelluli pożittivi f'GCL, INL, u ONL għal kull immunostaining fil-gruppi NG, STZ, STZ-AG, u STZ-SME. In-nuklei kienu mtebbgħin b'DAPI (blu).*p<0.01 compared="" to="" ng;="" α=""><0.05 compared="" to="" stz,="" and="" β=""><0.01 compared="" to="" stz-ag.magnification="" 200×.="" in="" supplement="" 3,="" dapi="" and="" each="" specific="" antibody="" stain="" are="" shown="" in="" a="" single="" channel="" and="" the="" fused="">

Figura 3. Effett antiossidant ta 'SME fir-retina dijabetika determinata mill-perossidazzjoni tal-lipidi. Il-livelli ta 'Malondialdehyde (MDA) fil-gruppi NG, STZ, STZ-AG u STZ-SME ġew analizzati. Il-konċentrazzjonijiet huma murija fil-plott tal-kaxxa u l-whisker.*p< 0.01="" compared="" to="" ng;=""><0.01 compared="" to=""><0.05compared to="">

3.2.3.Effett ta 'SME fuq l-Infjammazzjoni tar-Retina ta' STZ

Il-perċentwali ta 'tbajja' ta' NF-kB nukleari p65, fattur ta 'tkabbir endoteljali vaskulari (VEGF), u proteina aċiduża fibrillari glial (GFAP) ġew evalwati biex jiddeterminaw jekk it-trattament SME f'STZ jattenwax l-infjammazzjoni tar-retina.

It-tbajja nukleari ta 'NF-kB kienet tinsab fit-tliet saffi tar-retina (GCL, INL, u ONL) fil-gruppi kollha (Figura 4A). it-tliet lavers tar-retina (p<0.01)(figure 4b).="" similarly,="" diabetic="" rats="" treated="" with="" ag(stz-ag)showed="" that="" nf-staining="" is="" decreased="" in="" all="" three="" lavers="" of="" the="" retina="" compared="" to="" stz="" (p=""><0.05). the="" ng="" group="" showed="" the="" lowest="" values="" of="" the="" percentage="" of="" nf-kb="" staining="" in="" the="" three="" layers="" of="" the="" retina=""><0.01). the="" data="" (mean±="" sd)="" are="" included="" in="" appendix="" a(table="" a3).="" retinal="" vegf="" staining="" (figure="" 4a)="" and="" the="" percentage="" of="" positive="" cells="" were="" evaluated="" in="" the="" experimental="" groups="" (figure="" 4c).vegf="" staining="" was="" mainly="" localized="" to="" gcl="" (figure="" 4a).in="" stz,="" the="" percentage="" of="" vegf="" positive="" cells="" is="" increased(42.1="" ±="" 4.42)="" compared="" to=""><><0.01),and><0.01).however, there="" was="" no="" significant="" difference="" between="" smes="" and="" ag.="" the="" percentage="" of="" vegf="" staining="" in="" the="" ng="" group="" was="" the="" lowest="" of="" all=""><>

Figura 4. Effett ta 'SME fl-infjammazzjoni tar-retina ta' STZ. (A) Immaġini rappreżentattivi ta 'l-immunostaining għal NF-kB nukleari (rappreżentati minn vleġeġ ħomor), fattur tat-tkabbir endoteljali vaskulari (VEGF; rappreżentat mill-vleġeġ isfar), u fibrilari glial proteina aċiduża (GFAP; vleġeġ ħomor u bojod jindikaw l-intensità massima u minima tat-tebgħa, rispettivament) fil-gruppi NG, STZ, STZ-AG, u STZ-SME. (B, C) Plottijiet Box-and-whisker juru l-perċentwal ta 'tbajja' pożittiv għal NF-kB nukleari (GCL, INL, u ONL) u VEGF (fil-GCL), rispettivament. F'(D), jidher l-IOD għat-tbajja' tal-GFAP tul ir-retina.*p<0.01 compared="" to=""><0.01 compared="" to="" stz;="" andβ=""><0.01 compared="" to="" stz-ag.magnification="" 200×.="">L-infjammazzjoni tar-retina ġiet iddeterminata wkoll permezz ta 'tbajja' GFAP bħala markatur ta' astrogliosis (Figura 4A), u d-distribuzzjoni tagħha tul is-saffi tar-retina ġiet ikkwantifikata minn IOD (Figura 4D). Fir-retina ta 'STZ, il-preżenza ta' GFAP kienet osservata minn GCL għal INL (IOD=3126± 1018), filwaqt li fil-grupp NG, GFAP kien osservat prinċipalment fis-saff tal-fibra tan-nervituri (IOD=1160 ± 561;p<0.01). in="" stz-sme,="" gfap="" staining="" was="" decreased="" (iod="2192±752)" compared="" to=""><0.01)and compared="" to="" stz-ag(iod=""><0.0018). however,="" there="" were="" no="" significant="" differences="" between="" stz="" and="">

3.2.4.SME Effett fuq il-Livelli tal-Proteina B li torbot il-kalċju S100 (S100B) fir-Retina ta' STZ

Il-proteina S100B hija relatata ma 'infjammazzjoni tar-retina regolata mill-internalizzazzjoni nukleari ta' NF-kB. Għalhekk, biex jiġi investigat jekk SME taffettwax S100Bexpression fir-retina ta 'STZ, twettqet immunostaining (IOD) għal din il-proteina. Fil-gruppi kollha, it-tebgħa S100B tqassmet minn GCL għal ONL (Figura 5A). Il-Figura 5B turi li f'NG, l-IOD tat-tbajja' S100B kien l-ogħla f'ONL meta mqabbel ma' gruppi ttrattati (p<0.01), but="" was="" lower="" in="" gcl="" and=""><0.01).in sme,="" the="" iod="" of="" s100b="" staining="" was="" decreased="" in="" the="" three="" layers="" compared="" to=""><0.01 for="" all="" layers).="">kemm cistanche tieħuFl-SME, it-tebgħa S100B f'GCL u INL kienet inqas minn AG (it-tnejn, p<0.01); however,="" in="" onl,="" there="" was="" no="" difference.="" the="" data="" (mean="" ±="" sd)="" are="" included="" in="" appendix="" a="" (table="">

3.2.5. Effett tal-SMEs fuq id-Deġenerazzjoni tar-Retina f'STZ

L-effett protettiv ta 'SME fid-deġenerazzjoni tar-retina ta' GCL, INL, u ONL ta 'STZ ġie evalwat b'assaġġ ta' nick-end labeling (TUNEL) medjat minn deoxyuridine triphosphate (dUTP) terminal deoxynucleotidyl transferase (TdT).

Il-Figura 6A turi l-immaġini rappreżentattivi tad-distribuzzjoni tal-apoptożi fir-retina tal-gruppi studjati (NG, STZ, STZ-AG, u STZ-SME). Il-Figura 6B turi plott tal-kaxxa u l-whisker tal-IOD għat-tbajja’ ta’ TUNEL f’GCL, INL, u ONL.Fi STZ-SME u STZ-AG, l-apoptosi tonqos b’mod sinifikanti fis-saffi kollha meta mqabbla ma’ STZ (p<0.01). stz-ag="" had="" a="" more="" significant="" decrease="" in="" apoptosis="" compared="" to=""><0.01).in the="" three="" retinal="" layers="" of="" ng,="" the="" tunel="" staining="" is="" lower="" than="" those="" treated="" with="" stz=""><0.01). in="" onl,="" stz-ag="" and="" ng="" did="" not="" show="" significant="" differences.="" the="" data="" (mean="" ±="" sd)="" are="" included="" in="" figure="">

4. Diskussjoni

Dan l-istudju jirrapporta l-effetti ta 'benefiċċju ta' l-estratt metanoliku ta 'l-ispinaċi (SME) fis-saffi tar-retina tal-firien dijabetiċi relatati mal-prodotti finali (AGEs) ta' glycation anti-avvanzat, antiossidanti u proprjetajiet anti-infjammatorji. SME intwera li jnaqqas il-glikazzjoni tal-proteini, inaqqas l-emoglobina glikosilata, il-fructosamine, u l-aldose reductase f'zebrafish b'dijabete indotta, li jissuġġerixxi attività kontra l-glikazzjoni [11]. L-esperimenti in vitro tagħna bl-użu ta 'albumin tas-serum bovin (BSA) wrew li SME naqqas il-formazzjoni ta' gruppi AGEs, fructosamine, u carbonyl, u t-tnaqqis ta 'gruppi thiol imnaqqsa f'BSA, inkubati jew bi zokkor li jnaqqas jew b'methylglyoxal (MGO). Dawn ir-riżultati jissuġġerixxu li SME jista 'jinibixxi glycation tal-proteini b'mekkaniżmu antiossidant, li jista' wkoll jinterferixxi mal-formazzjoni ta 'MGO. L-MGO intwera li jikkawża l-ġenerazzjoni ta 'carboxymethyl-lysine (CML) fuq proteini in vitro [43]. Intwerew livelli akbar ta 'CML, li huwa medjatur fil-kumplikazzjonijiet dijabetiċi [44,45].

Għalhekk, ix-xogħol preżenti evalwat jekk it-trattament SME jipprevjenix l-akkumulazzjoni ta 'CML fir-retina ta' firien dijabetiċi indotti minn streptozotocin (STZ), assoċjati ma 'risponsi ossidattivi u pro-infjammatorji attivati ​​mill-attivazzjoni possibbli tar-riċettur ta' AGEs (RAGE). Ir-riżultati wrew li t-trattament bl-SME naqas tbajja CML fis-saff taċ-ċelluli ganglion (GCL), saff nukleari ta 'ġewwa (INL), u saff nukleari ta' barra (ONL). Għalkemm l-SMEs ippreżentaw livelli ogħla ta 'CML f'INL u ONL minn aminoguanidine(AG) u mingħajr differenza fil-GCL, ir-riżultati jissuġġerixxu li t-trattament SME jista' jinibixxi l-produzzjoni ta 'din l-AGE fir-retina dijabetika. Barra minn hekk, ġie osservat li ż-żieda fis-CML fis-saffi tar-retina dijabetiċi kienet parallela maż-żieda fil-livelli ta 'tbajja' RAGE.

Ir-regolamentazzjoni 'l fuq tar-RAGE u l-akkumulazzjoni ta' AGE ġew assoċjati ma 'ħsara fir-retina. Waħda mill-konsegwenzi tal-interazzjoni CML-RAGE hija l-ġenerazzjoni ta 'speċi ta' ossiġnu reattiv (ROS), li, min-naħa tagħha, tinduċi espressjoni żejda ta 'ġeni pro-infjammatorji [46]. Fir-riżultati tagħna, retini dijabetiċi ttrattati bl-SME wrew tnaqqis fis-CML u RAGE magħquda (CML/RAGE), prinċipalment fis-saffi GCL u INL, li jissuġġerixxu li s-CML/RAGE mnaqqsa jistgħu jtaffu l-attivazzjoni downstream tal-mogħdijiet ta 'stress ossidattiv. u risponsi infjammatorji li ġew deskritti għall-attivazzjoni ta 'RAGE [46].

L-istress ossidattiv indott minn AGEs-RAGE huwa medjat billi jiġu attivati ​​l-enzimi NADPH oxidases, li huma produtturi ta 'anjoni superoxide u huma miżjuda fiċ-ċelloli dijabetiċi tar-retina [46,47]. In-NADPH oxidases, Nox1/Nox4, jikkontribwixxu għal żieda fl-ROS, infjammazzjoni, u neovaskularizzazzjoni tar-retina [48]. Barra minn hekk, is-superossidu iġġenerat jirreaġixxi ma 'ossidu nitriku (NO), u jipproduċi peroxynitrite, radikali ħieles ieħor li jipparteċipa fil-ħsara tar-retina dijabetika [49,50]. Livelli elevati ta 'NO fir-retini dijabetiċi huma medjati mill-attività miżjuda tan-nitric oxide synthase (iNOS), li tikkawża żieda fid-densità tal-kapillari aċellulari, u tħaxxin tar-retina, glijożi, u livelli elevati ta' nitrat/nitrit [51]. Hawnhekk, ir-riżultati juru li t-trattament SME naqas l-immunostaining Nox4 f'GCL, INL, u ONL meta mqabbel ma 'STZ. Barra minn hekk, meta mqabbla ma 'AG, SME ppreżentat tnaqqis aktar sinifikanti fit-tbajja' Nox4 fit-tliet saffi tar-retina.

Rigward il-livell tat-tbajja 'iNOS, kien hemm tnaqqis fit-tliet lavers tar-retina fil-grupp SME minn STZ. Meta t-tbajja' ta' iNOS f'AG tqabbel ma' STZ, ir-riżultati wrew tnaqqis aktar sinifikanti minn SME fis-saffi GCL, INL, u ONL, li juri li AG huwa inibitur qawwi ta' iNOS kif ġie rrappurtat fir-retinopatija dijabetika (DR) [ 29].

Rigward l-immunostaining għal 3-nitrotyrosine, SME naqqas dan il-markatur fit-tliet saffi kollha meta mqabbel ma' STZ. Min-naħa l-oħra, il-perossidazzjoni tal-lipidi u l-formazzjoni tal-AGEs huma marbuta mill-qrib fid-DR [13]. CML huwa wkoll prodott mill-ossidazzjoni ta 'aċidi grassi polyunsaturated (PUFAs)[52] misjuba fl-abbundanza fir-retina. Ir-reazzjonijiet ta 'ossidazzjoni ta' PUFAs iwasslu għall-formazzjoni ta 'speċi karbonil reattivi bħal malondialdehyde (MDA) li sussegwentement jirreaġixxu ma' residwi ta 'cysteine, histidine, u lysine ta' proteini, li jiġġeneraw adducts relattivament stabbli [53]. Ir-riżultati tagħna juru li CML tbajja fis-saffi ta ' plusir-retina dijabetika naqset bi trattament SME, li huwa konsistenti ma 'perossidazzjoni tal-lipidi mnaqqsa.

L-interazzjoni AGE-RAGE fir-retini dijabetiċi hija kundizzjoni li żżid il-produzzjoni ta 'fatturi infjammatorji li, min-naħa tagħhom, jipparteċipaw fid-deġenerazzjoni tar-retina. Din l-interazzjoni twassal għall-attivazzjoni ta 'NF-kB nukleari, li tinduċi espressjoni żejda ta' fatturi pro-infjammatorji, bħal iNOS u l-fattur tat-tkabbir endoteljali vaskulari (VEGF)54]. VEGF huwa attivatur mitoġeniku qawwi u l-orkestratur ċentrali tal-anġjoġenesi fid-DR. Nox4 jirregola wkoll l-espressjoni tal-VEGF taħt kundizzjonijiet ta 'stress ossidattiv u ipergliċemija [55]. Għalhekk, l-imblukkar tal-interazzjoni AGE-RAGE jista 'jkun importanti fl-attenwazzjoni tal-espressjoni ta' VEGF fil-patoġenesi ta 'DR.

Min-naħa l-oħra, proteina aċiduża fibrillari glial (GFAP) hija proteina preżenti fiċ-ċelluli glial tar-retina (ċelluli ganglion), astroċiti, ċelluli Müller u mikroglia, u ż-żieda tagħha tindika l-formazzjoni ta 'gliożi newrali fir-retina [56]. Għalhekk, it-traslokazzjoni nukleari ta 'NF-kB u l-espressjoni żejda ta' VEGF u GFAP huma fatturi pro-infjammatorji relatati mal-patoġenesi ta 'DR [13]. Dawn il-fatturi huma ġġenerati, min-naħa tagħhom, mill-formazzjoni ta 'AGEs u interazzjoni AGEs-RAGE [4557,58]. Hawnhekk, intwera li t-trattament SME naqas CML-RAGE magħquda fis-saffi ta 'retini dijabetiċi flimkien ma' tnaqqis fl-NF-kB nukleari, VEGF, u glijożi. Dawn ir-riżultati jissuġġerixxu li l-SMEs jistgħu jtaffu r-rispons infjammatorju billi jinibixxu l-interazzjoni CML-RAGE.

Ir-rispons infjammatorju ġie evalwat ukoll bit-tbajja tal-proteina B(S100B) li tgħaqqad il-kalċju S100. S100B hija proteina li żżid l-istress ossidattiv u tistimula r-rispons infjammatorju u n-newrodeġenerazzjoni fid-DR [58,59]. Ir-riżultati juru li t-tbajja 'S100B kienet imqassma fit-tliet saffi tar-retina f'STZ. Ġie rrappurtat li fl-INL, jinstabu ċelluli gliali Müller [58], li jistgħu jkunu relatati mas-suxxettibilità tal-gliożi. It-tbajja’ S100B f’INL naqset bi trattament SME meta mqabbel ma’ STZ u AG, li jissuġġerixxi li SME f’dan is-saff jinibixxi r-rispons infjammatorju .

Fil-firien normogliċemiċi, il-livelli S100B f'ONL kienu ogħla milli fil-gruppi STZ. Possibbilment, fil-firien normogliċemiċi, il-livelli S100B jistgħu jkunu qed jieħdu sehem fir-regolamentazzjoni ta 'mogħdija ta' sinjalazzjoni bbażata fuq guanylate cyclase marbuta mal-membrana f'fotoreċetturi [60]. Fi gruppi dijabetiċi, il-livelli mnaqqsa ta 'S100B jistgħu jipproduċu telf ta' fototrasduzzjoni fiċ-ċellula fotoreċettur, li tuża cGMP bħala t-tieni messaġġier biex tgħaqqad l-assorbiment tad-dawl ma 'bidliet fil-konduttività tal-kanali tal-katjoni fil-membrana tal-plażma [61. Għalhekk, l-SMEs jistgħu jnaqqsu l-livelli tal-proteina S100B bil-proprjetajiet antiossidattivi tagħhom [62]. Madankollu, huma meħtieġa aktar studji biex jikkaratterizzaw il-funzjoni u l-interazzjoni ta 'S100B fis-saffi tar-retina differenti.Fid-dijabete mellitus (DM), il-mewt taċ-ċelluli ġiet osservata f'diversi tipi ta 'ċelluli tar-retina, bħal ċelluli ganglion, ċelluli glial (ċelluli Müller u astroċiti), u mikroglia [63]. AGEs/RAGE jistgħu jinduċu apoptożi fiċ-ċelloli newronali tar-retina medjati minn stress ossidattiv miżjud jew attivazzjoni ta 'ċitokini pro-infjammatorji|64]. F'dan l-istudju, ir-riżultati juru li f'GCL, INL, u ONL, l-apoptożi kienet attenwata mill-SME.

5. Konklużjonijiet

Dan l-istudju wera li l-konsum tal-SME tejjeb il-profil patoloġiku indott mid-dijabete fis-saffi tar-retina tal-firien dijabetiċi indotti minn streptozotocin (STZ). Fl-istudju in vitro, SME wera attività antiossidanti billi jinibixxi intermedji tar-reazzjoni Maillard (fructosamine u di-carbonylic). komposti), jipprevjenu l-formazzjoni ta 'AGEs u t-tnaqqis ta' gruppi thiol imnaqqsa f'BSA. Fir-retina dijabetika, it-trattament SME attenwat il-formazzjoni ta 'CML, l-interazzjoni CML-RAGE, u l-attivazzjoni tar-risponsi pro-infjammatorji (VEGF, GFAP, S100B, u RAGE). Barra minn hekk, l-SME indotta tnaqqis fil-markaturi tal-istress ossidattiv (iNOS, Nox4, u NT) u apoptożi. Fl-aħħarnett, ir-riżultati juru li l-SMEs għandhom effett protettiv fuq id-deġenerazzjoni tar-retina ta 'STZ.

Dan l-artikolu huwa estratt minn Antioxidants 2021, 10, 717. https://doi.org/10.3390/antiox10050717 https://www.mdpi.com/journal/antioxidants