Astratt

Għan:Biex tinvestiga l-effett newroprotettiv ta 'glycosides ta' Cistanches (GCs) f'mudell tal-ġurdien tal-marda ta 'Parkinson (PD) indotta minn 1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine (MPTP) u biex tesplora l-mekkaniżmu potenzjali.

Metodi:Erbgħin ġrieden ġew maqsuma b'mod każwali fi grupp ta 'kontroll, grupp PD, grupp GCs, u grupp ta' levodopa (L-DOPA) (n=10 għal kull grupp). Il-grupp ta 'kontroll irċieva injezzjonijiet intraperitoneali ta' salina normali, filwaqt li l-gruppi l-oħra ġew injettati intraperitonealment b'MPTP (30 mg/kg) darba kuljum għal 5 ijiem konsekuttivi. Wara l-istabbiliment tal-mudell, il-gruppi ta 'kontroll u PD ġew amministrati salina normali intragastrika darba kuljum għal 28 jum konsekuttiv. Il-grupp GCs u l-grupp L-DOPA rċevew amministrazzjoni intragastrika darba kuljum għal 28 jum konsekuttiv f'dożi ta '100 mg/kg u 50 mg/kg, rispettivament. It-test tal-kamp miftuħ u t-test rotarod intużaw biex jevalwaw il-funzjoni tal-mutur. Twettqet immunoistokimika biex tiskopri n-numru ta 'newroni pożittivi ta' tyrosine hydroxylase (TH) fis-substantia nigra tal-midbrain. Il-mikroskopija elettronika tat-trażmissjoni (TEM) intużat biex tosserva l-ultrastruttura mitokondrijali fis-substantia nigra. Intużaw analiżi bijokimiċi biex jiddeterminaw il-livelli ta 'glutathione (GSH), malondialdehyde (MDA), superoxide dismutase totali (T-SOD), u speċi ta' ossiġnu reattiv (ROS) fit-tessuti substantia nigra. Western blotting intuża biex jevalwa TH, fattur nukleari erythroid 2-related factor 2 (Nrf2), proteina 1 assoċjata ma 'ECH bħal Kelch (Keap-1), u heme oxygenase-1 (HO-1) proteina espressjoni fit-tessuti substantia nigra.

 

 

Riżultati:Meta mqabbel mal-grupp ta 'kontroll, il-ġrieden fil-grupp PD urew funzjoni tal-mutur indebolita b'mod sinifikanti, tnaqqis sinifikanti fl-attività T-SOD, tnaqqis ovvju fin-newroni TH-pożittivi u l-kontenut ta' GSH, u livelli elevati ta 'MDA u ROS fis-substantia nigra (P <0.01). Meta mqabbla mal-grupp PD, ġrieden fil-grupp GCs urew funzjoni tal-mutur mtejba, żieda fl-attività T-SOD, numru ogħla ta 'newroni TH-pożittivi, u kontenut elevat ta' GSH, akkumpanjat minn livelli mnaqqsa ta 'MDA u ROS (P <0.05). Fil-grupp ta 'kontroll, il-mitokondrija ta' substantia nigra wrew morfoloġija normali mingħajr strutturi tal-membrana mċajpra jew deġenerazzjoni vakuolari. Il-grupp PD wera nefħa mitokondrijali, cristae diżordinati, u bidliet vakuolari; dawn l-alterazzjonijiet patoloġiċi ġew imtaffija fil-grupp GCs. Meta mqabbla mal-grupp ta 'kontroll, il-livelli ta' proteina TH, Nrf2, u HO-1 kienu rregolati b'mod sinifikanti, filwaqt li l-espressjoni tal-proteina Keap-1 kienet irregolata b'mod sinifikanti fil-grupp PD (P <0.01). Meta mqabbel mal-grupp PD, il-grupp GCs wera upregulation sinifikanti tal-livelli ta 'proteina TH, Nrf2, u HO-1 u tnaqqis notevoli fil-livell ta' proteina Keap-1 (P <0.05).

Konklużjoni:Il-GCs itejbu d-disfunzjoni tal-mutur u jtaffu l-ħsara dopaminerġika newronali u mitokondrijali fi ġrieden mudell PD indotti minn MPTP. Dawn l-effetti jistgħu jkunu assoċjati mal-modulazzjoni tal-espressjoni tal-proteina relatata mal-mogħdija Nrf2/HO-1, it-titjib tal-kapaċità antiossidant, u t-taffija tal-istress ossidattiv.

Kliem ewlieni:marda ta' Parkinson; glikosidi ta' Cistanches; stress ossidattiv; mogħdija Nrf2/HO-1; newron dopaminerġiku; ROS

 

Introduzzjoni

Il-marda ta' Parkinson (PD) hija t-tieni l-aktar marda newrodeġenerattiva komuni madwar id-dinja. Il-pazjenti tipikament jippreżentaw sintomi tal-mutur bħal rogħda ta’ mistrieħ, riġidità muskolari, bradikinesja, u indeboliment tal-bilanċ posturali. Bl-aċċellerazzjoni tat-tixjiħ tal-popolazzjoni, in-numru ta 'individwi b'PD qed ikompli jiżdied, u jaffettwa serjament il-kwalità tal-ħajja [1]. It-trattamenti kliniċi attwali prinċipalment itaffu s-sintomi u għad għandhom diffikultà biex iwaqqfu l-progressjoni tal-marda. Għalhekk, l-iskrinjar ta 'aġenti newroprotettivi b'tossiċità baxxa u effettivi minn prodotti naturali sar hotspot ta' riċerka.

Glycosides ta 'Cistanches (glycosides ta' cistanches, GCs) huma kostitwenti attivi ewlenin ta 'Cistanche u juru effetti antiossidanti, anti-apoptotiċi u newroprotettivi [2]. L-istress ossidattiv jirreferi għal żbilanċ bejn il-produzzjoni ta 'speċi ta' ossiġnu reattiv (ROS) u l-mekkaniżmi ta 'difiża antiossidant tal-ġisem, li jirriżulta f'korriment ċellulari, infjammazzjoni, u bidliet patoloġiċi oħra [3]. Studji preċedenti [4] wrew li l-fattur nukleari erythroid 2-related factor 2 (Nrf2), bħala fattur ta 'traskrizzjoni ewlieni li jirregola l-omeostażi redox, huwa mira ta' sinjalar kruċjali li timmedja l-protezzjoni newronali. Għalhekk, l-immirar tal-mogħdija tal-istress anti-ossidattiv Nrf2 jista 'jirrappreżenta strateġija ta' intervent potenzjalment effettiva għall-prevenzjoni u t-trattament tal-PD.

Ir-riċerka preliminari tagħna indikat li l-GCs jistgħu jnaqqsu t-telf ta 'newroni dopaminerġiċi fis-substantia nigra ta' ġrieden mudell PD u jtejbu l-funzjoni tal-mutur [5]. Madankollu, jekk il-GCs jeżerċitawx effetti anti-Parkinsonjani permezz tal-passaġġ tas-sinjalar Nrf2/HO-1 għadu mhux ċar. F'dan l-istudju, waqqafna mudell tal-ġurdien PD indott minn MPTP biex nevalwaw l-effetti newroprotettivi tal-GCs u nesploraw aktar il-mekkaniżmu molekulari sottostanti.

 

1 Materjali u Metodi

1.1 Materjali

1.1.1 Annimali esperimentali

Erbgħin ġrieden maskili b'saħħithom ta 'grad SPF C57BL / 6 ta' 8 ġimgħat (piż tal-ġisem 21-23 g) inxtraw minn Beijing SBF Biotechnology Co., Ltd., numru tal-liċenzja tal-produzzjoni: SCXK (Beijing) 2024-0001. Il-ġrieden ġew akklimatizzati għal ġimgħa qabel l-esperimenti. Il-kundizzjonijiet tad-djar kienu temperatura (23±1)∘C(23 \\pm 1)^\\circ\\text{C}(23±1)∘C, umdità relattiva 50%–60%, ikel u ilma ad libitum, u ċiklu ta 'dawl/dlam ta' 12 h/12 ​​h. Il-proċeduri kollha kkonformaw b'mod strett mar-"Regolamenti dwar l-Amministrazzjoni tal-Annimali tal-Laboratorju" u ġew approvati mill-Kumitat tal-Etika tal-Annimali tal-Kulleġġ Mediku Baotou (Nru tal-Approvazzjoni: 包医伦审〔2022〕第60号).

1.1.2 Reaġenti u strumenti

GCs (kontenut akbar minn jew ugwali għal 85%) ġew ipprovduti minn Baoji Kosmai Plant Polysaccharide Development Co., Ltd. (Nru tal-lott: KM20220609011). MPTP (1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine) inxtara minn Shanghai Yuanye Bio-Technology Co., Ltd. (Nru tal-Kat.: S31504). Antikorpi primarji: tyrosine hydroxylase (TH; Nru tal-Kat.: 25859-1-AP), Nrf2 (Nru tal-Kat.: 16396-1-AP), Keap-1 (Nru tal-Kat.: 10503-2-AP), u HO-1 (Nru tal-Kat.: 10701) kienu minn Proteinte-AP (USA). GAPDH (Nru tal-Kat.: 48620), -actin (Nru tal-Kat.: 21338-1), u antikorp sekondarju (Nru tal-Kat.: L3012) kienu minn Signalway Antibody (USA). Kit universali ta' detezzjoni f'żewġ stadji (Nru tal-Kat: PV-9000) u kit DAB (Nru tal-Kat: ZLI-9017) kienu minn Beijing Zhongshan Jinqiao Biotechnology Co., Ltd. L-aċċeleratur tal-ġel PAĠNA (Nru tal-Kat: T8090) kien minn Beijing Solarbio Science & Technology Co., Ltd. 30 soluzzjoni G.40 acrylamide:% acrylamide No. buffer (Nru tal-Kat.: R0010), T-SOD (Nru tal-Kat: G4306), GSH (Nru tal-Kat: G4305), MDA (Nru tal-Kat: G4302), u kit ROS (Nru tal-Kat: G1746) kienu minn Wuhan Servicebio Technology Co., Ltd. Rotarod. kien minn Beijing Liuyi Biotechnology Co, Ltd Microplate reader kien minn Thermo Fisher (USA). Il-mikrotomu tal-paraffin u l-mikroskopju tad-dawl kienu minn Leica (il-Ġermanja). Is-sistema tal-immaġini tal-ġel kienet minn Shanghai Tanon Technology Co., Ltd.

1.2 Metodi

1.2.1 Raggruppament tal-annimali u trattamenti

Il-ġrieden ġew allokati b'mod każwali għal erba 'gruppi: grupp ta' kontroll, grupp PD, grupp GCs, u grupp L-DOPA (n=10 għal kull grupp). Skont il-letteratura preċedenti [6], intuża protokoll ta 'injezzjoni intraperitoneali MPTP biex jiġi stabbilit mudell tal-ġurdien PD. Ħlief għall-grupp ta 'Kontroll, il-gruppi l-oħra kollha rċevew MPTP fi 30 mg/kg intraperitoneally darba kuljum għal 5 ijiem konsekuttivi; il-grupp ta 'Kontroll irċieva injezzjonijiet intraperitoneali ta' volum ugwali ta 'salina normali.

Wara l-immudellar, inbdew interventi tad-droga: il-grupp GCs irċieva GCs 100 mg/kg permezz ta 'gavage; il-grupp L-DOPA irċieva L-DOPA 50 mg/kg bil-gavage; il-gruppi Kontroll u PD irċevew volumi ugwali ta 'salina normali permezz ta' gavage. Il-gruppi kollha ġew ittrattati darba kuljum għal 28 jum konsekuttiv.

1.2.2 Valutazzjoni tal-funzjoni tal-mutur

1.2.2.1 Test fuq il-post miftuħ

Intuża apparat standardizzat open field. Il-ġrieden tqiegħdu fiż-żona ċentrali ta 'kamra ta' 50 cm × 50 cm × 50 cm u jitħallew jakklimataw għal 5 min. Imbagħad, sistema ta 'traċċar bil-vidjo rreġistrat trajettorji lokomotriċi u d-distanza totali tal-ivvjaġġar fuq 5 min.

1.2.2.2 Test ta' Rotarod

Il-ġrieden tpoġġew fuq apparat rotarod. Il-veloċità żdiedet minn 0 sa 30 r/min fi żmien 30 s, b'tul totali tat-test ta '300 s. Ġiet irreġistrata l-latency għall-ewwel waqgħa. Kull ġurdien ġie ttestjat tliet darbiet, u ntuża l-valur medju.

1.2.3 Ġbir tat-tessuti

Siegħa wara l-għoti finali, il-ġrieden ġew anestetizzati permezz ta 'injezzjoni intraperitoneali ta' 0.3% sodium pentobarbital (0.15 mL/10 g). F'kull grupp, tliet ġrieden intgħażlu b'mod każwali għall-iffissar tal-perfużjoni: il-qalb ġiet esposta malajr, u l-ġrieden kienu mxerrda b'salina normali sakemm il-fwied sar pallidu, segwit minn perfużjoni b'4% paraformaldehyde. Imħuħ sħaħ tneħħew u ġew iffissati wara f'4% paraformaldehyde għal 24 siegħa, segwiti minn deidrazzjoni, inkorporazzjoni u sezzjoni. Il-ġrieden li kien fadal ġew imdewweb biss b'salina normali; inġabru imħuħ sħaħ, ir-reġjun substantia nigra tal-midbrain ġie mqassam fuq is-silġ, u l-kampjuni ġew maħżuna f'-80 grad għal analiżi.

1.2.4 Immunoistokimika (IHC)

It-tessuti midbrain substantia nigra kienu inkorporati fil-paraffin u maqtugħin f'sezzjonijiet ta '5 μm. It-taqsimiet tpoġġew f'buffer taċ-ċitrat tas-sodju, imsaħħna sa jagħli, imbagħad imkessħa b'mod naturali u maħsula bil-PBS tliet darbiet. Reaġent endoġenu li jimblokka l-perossidasi ġie applikat f'temperatura tal-kamra għal 10 min, segwit minn ħasil PBS. It-taqsimiet ġew inkubati b'antikorp primarju TH dilwit f'4 gradi matul il-lejl, maħsula b'PBS, inkubati b'reaġent enhancer f'temperatura tal-kamra għal 20 min, maħsula, inkubati b'reaġent sekondarju tikkettat b'enżimi f'temperatura ambjentali għal 20 min, u maħsula mill-ġdid. Is-soluzzjoni tax-xogħol DAB (50 μL) ġiet applikata f'temperatura tal-kamra għal 2 min. Is-sezzjonijiet ġew laħlaħ, differenzjati, blu, deidratati, imnaddaf fil-xylene, u mmuntati b'reżina newtrali. In-numri taċ-ċelluli TH-pożittivi ġew ikkwantifikati bl-użu ta 'ImageJ.

1.2.5 Determinazzjoni ta' indikaturi ta' stress ossidattiv

It-tessut ta 'substantia nigra ġie miżun, omoġenizzat, u ċentrifugat għal 10 min (12,000 r/min, 4 gradi). Inġabar is-supernatant. L-analiżi twettqu strettament skont l-istruzzjonijiet tal-kit. Kurvi standard ġew iġġenerati u użati biex jikkalkulaw l-attività T-SOD, MDA, GSH, u livelli ROS fil-kampjuni.

1.2.6 Western blotting

It-tessuti ta 'substantia nigra ġew lysed b'proteina liżi buffer u inibituri tal-protease, omoġenizzati sewwa, u lysed fuq is-silġ għal 30 min. Lisati ġew ċentrifugati f'temperatura baxxa għal 10 min (12,000 r / min). Il-konċentrazzjoni tal-proteina ġiet iddeterminata b'assaġġ BCA. Il-kampjuni ġew ippreparati, żnaturati f'100 grad għal 10 min, u maħżuna għall-użu. Sar SDS-PAGE segwit minn trasferiment għal membrani u imblukkar. Wara l-ħasil tat-TBST, il-membrani ġew inkubati b'antikorpi primarji f'4 gradi matul il-lejl, maħsula, inkubati b'antikorp sekondarju f'temperatura tal-kamra għal 2 sigħat, maħsula mill-ġdid, u żviluppati b'sottostrat kimiluminixxenti. ImageJ intużat għal semi-kwantifikazzjoni densitometrika.

1.2.7 Mikroskopija elettronika ta' trażmissjoni (TEM)

Ittieħdu kampjuni tat-tessuti ta’ Substantia nigra minn tliet gruppi. Kull kampjun ġie ffissat malajr b'2.5% glutaraldehyde electron microscopy fixative u miżmum f'4 gradi matul il-lejl, segwit minn fissazzjoni b'1% osmium tetroxide f'temperatura baxxa, deidrazzjoni tal-gradjent tal-etanol, u infiltrazzjoni/inkorporazzjoni tar-reżina epoxy. Sezzjonijiet ultrarqaq (60 nm) kienu mtebbgħin b'1% uranyl acetate u ċomb citrate. TEM intuża biex josserva bidliet ultrastrutturali mitokondrijali u biex jinqabad immaġini rappreżentattivi.

1.3 Analiżi statistika

GraphPad Prism 10.0 intuża għall-analiżi tad-dejta. In-normalità u l-omoġeneità tal-varjanza ġew ittestjati. Id-dejta tal-kejl hija espressa bħala medja ± SD. ANOVA f'direzzjoni waħda ntużat għal tqabbil fost gruppi multipli, u t-test post hoc ta 'Tukey intuża għal paraguni f'pari. P <0.05 kien ikkunsidrat statistikament sinifikanti.

 

2 Riżultati

2.1 Effetti tal-GCs fuq il-funzjoni tal-mutur fil-ġrieden PD

Ir-riżultati tat-test fuq il-post miftuħ urew li meta mqabbel mal-grupp ta 'Kontroll, il-grupp PD wera distanza totali tal-ivvjaġġar imnaqqsa (P <0.01). Meta mqabbel mal-grupp PD, il-grupp GCs u l-grupp L-DOPA wrew żieda fid-distanza totali tal-ivvjaġġar (P <0.05) (ara Fig . 1A, 1B). Ir-riżultati tat-test Rotarod wrew li meta mqabbel mal-grupp ta 'Kontroll, il-grupp PD wera latenza mqassra biex jaqa' (P <0.01). Meta mqabbel mal-grupp PD, il-gruppi GCs u L-DOPA wrew latenza fit-tul biex jaqgħu (P <0.05) (ara Fig . 1C).

 

Fig.1 Prestazzjoni tal-imġieba tal-ġrieden f'kull grupp (x  s, n=10) A, B: Test fuq il-post miftuħ; C: test Rotarod; a: Grupp ta 'kontroll; b: grupp PD; c: grupp GCs; d: grupp L-DOPA; **P<0.01 vs Control group; #P<0.05 vs PD group.

Fig.2 Espressjoni ta 'ċelluli TH-pożittivi fil-ġrieden f'kull grupp u bar charts korrispondenti (x  s, n=3) a: Grupp ta' kontroll; b: grupp PD; c: grupp GCs; d: grupp L-DOPA; **P<0.01 vs Control group; #P<0.05 vs PD group.

Fig.3 Meded ta' espressjoni tal-proteina TH ta' ġrieden f'kull grupp u bar charts korrispondenti (x  s, n=3) a: Grupp ta' kontroll; b: grupp PD; c: grupp GCs; d: grupp L-DOPA; **P<0.01 vs Control group; #P<0.05 vs PD group.

 

2.2 Effetti tal-GCs fuq TH fis-substance nigra tal-ġrieden PD

Ir-riżultati tal-IHC wrew li meta mqabbla mal-grupp ta 'Kontroll, in-numru ta' ċelluli TH-pożittivi fis-substantia nigra pars compacta kien imnaqqas fil-grupp PD (P <0.01). Meta mqabbel mal-grupp PD, il-grupp GCs u l-grupp L-DOPA wrew żieda fin-numri ta 'ċelluli TH-pożittivi (P <0.05) (ara Fig . 2). Ir-riżultati tal-Western blot wrew li meta mqabbla mal-grupp ta 'Kontroll, l-espressjoni tal-proteina TH fis-substantia nigra tnaqqset fil-grupp PD (P <0.01). Meta mqabbel mal-grupp PD, l-espressjoni tal-proteina TH fis-substantia nigra żdiedet fil-gruppi GCs u L-DOPA (P <0.05) (ara Fig . 3).

 

Fig.4 Tqabbil tal-kontenut ROS fil-ġrieden mudell PD (x  s, n=3) a: Grupp ta 'kontroll; b: grupp PD; c: grupp GCs; **P<0.01 vs Control group; #P<0.05 vs PD group.

 

2.3 Effetti tal-GCs fuq ROS fis-substantia nigra tal-ġrieden PD

Meta mqabbel mal-grupp ta 'Kontroll, il-livelli ta' substantia nigra ROS żdiedu fil-grupp PD (P <0.01). Meta mqabbel mal-grupp PD, il-livelli ta' substantia nigra ROS naqsu fil-grupp GCs, u d-differenza kienet statistikament sinifikanti (P ​​<0.05) (ara Fig . 4).

2.4 Effetti tal-GCs fuq MDA, T-SOD, u GSH fis-substantia nigra tal-ġrieden PD

Meta mqabbel mal-grupp ta 'Kontroll, l-attività ta' substantia nigra T-SOD u l-kontenut ta 'GSH naqsu fil-grupp PD (P <0.01), filwaqt li l-kontenut ta' MDA żdied (P <0.01). Meta mqabbel mal-grupp PD, il-grupp GCs wera attività T-SOD miżjuda u kontenut GSH (P <0.05) u tnaqqis fil-kontenut MDA (P <0.05) (ara Fig . 5).

 

Fig.5 L-effetti tal-GCs fuq MDA, T-SOD u GSH fil-midbrain substantia nigra tal-ġrieden f'kull grupp (x  s, n=3) a: Grupp ta 'kontroll; b: grupp PD; c: grupp GCs; **P<0.01 vs Control group; #P<0.05 vs PD group.

 

2.5 Effetti tal-GCs fuq l-ultrastruttura mitokondrijali newronali fis-substantia nigra tal-ġrieden PD

Fil-grupp ta 'Kontroll, il-mitokondrija newronali substantia nigra kienu l-aktar ovali, b'membrani ta' ġewwa u ta 'barra intatti u konfini ċari; cristae mitokondrijali kienu ordnati. Meta mqabbel mal-grupp ta 'Kontroll, il-grupp PD wera nefħa mitokondrijali ovvja, konfini mhux ċari ta' ġewwa/barra tal-membrana, cristae diżorganizzati u parzjalment miksura, u bidliet bħal vakuole. Meta mqabbel mal-grupp PD, il-ħsara ultrastrutturali mitokondrijali ttaffi b'mod sinifikanti fil-grupp GCs: il-morfoloġija mitokondrijali kienet aktar regolari, tnaqqset nefħa u bidliet bħal vakuole, u l-konfini tal-membrana u ċ-ċarezza cristae tjiebu (ara Fig . 6).

 

Fig.6 L-effetti ta 'GCs fuq l-ultrastruttura ta' newroni substantia nigra fil-ġrieden PD × 20 000 A: Grupp ta 'kontroll; B: grupp PD; C: Grupp GCs; Il-vleġeġ ħomor jindikaw il-mitokondrija.

 

2.6 Effetti tal-GCs fuq Nrf2/HO-1 proteini relatati mal-mogħdija fis-substance nigra tal-ġrieden PD

Ir-riżultati tal-Western blot wrew li meta mqabbla mal-grupp ta 'Kontroll, il-livelli ta' espressjoni tal-proteini Nrf2 u HO-1 naqsu fil-grupp PD, filwaqt li l-espressjoni tal-proteina Keap-1 żdiedet; id-differenzi kienu statistikament sinifikanti (P ​​kollha <0.01). Meta mqabbel mal-grupp PD, il-grupp GCs wera żieda fl-espressjoni tal-proteina Nrf2 u HO-1 u naqset espressjoni tal-proteina Keap-1; id-differenzi kienu statistikament sinifikanti (P ​​kollha < 0.05) (ara Fig . 7).

Fig.7 Meded rappreżentattivi Western blot u bar graphs kwantitattivi ta 'Nrf2, Keap-1, u espressjoni ta' proteini HO-1 fil-ġrieden f'kull grupp (x  s, n=3) a: Grupp ta 'kontroll; b: grupp PD; c: grupp GCs; **P<0.01 vs Control group; #P<0.05 vs PD group.

 

3 Diskussjoni

Is-sintomi ewlenin tal-mutur tal-PD jinkludu bradikinesja, riġidità, rogħda ta 'mistrieħ, u instabbiltà posturali jew disturb tal-mixi [7]. F'mudelli ta 'annimali PD, attività spontanja mnaqqsa u koordinazzjoni tal-mutur indebolita jistgħu jiġu evalwati mit-testijiet fuq il-post miftuħ u rotarod, rispettivament [8]. Studji preċedenti [9] irrappurtaw li l-ġrieden PD indotti mill-MPTP juru funzjoni anormali tal-mutur, bħal distanza mnaqqsa tal-ivvjaġġar u latenza ta 'rotarod imqassra biex jaqgħu. B'mod konsistenti ma 'dawn ir-rapporti, l-istudju tagħna sab li wara l-amministrazzjoni ta' MPTP, il-ġrieden urew distanza ta 'vjaġġar imnaqqsa b'mod sinifikanti u latenza mqassra biex jaqgħu, li jindika attività spontanja indebolita u koordinazzjoni tal-mutur. L-DOPA, mediċina klinika użata b'mod komuni għall-PD, tejbet b'mod sinifikanti disfunzjoni tal-mutur indotta mill-MPTP fil-ġrieden, u tappoġġja aktar l-affidabbiltà tal-mudell u l-evalwazzjoni tal-imġieba. Wara l-intervent tal-GCs, kemm id-distanza tal-ivvjaġġar kif ukoll il-latenza biex jaqgħu tjiebu b'mod sinifikanti, li jissuġġerixxu li l-GCs jistgħu itaffu disfunzjoni tal-mutur simili PD indotta mill-MPTP u jistgħu jipprovdu protezzjoni kontra korriment newronali relatat. Dawn is-sejbiet jipprovdu bażi sperimentali għal aktar evalwazzjoni farmakodinamika u studji mekkanistiċi.

Deġenerazzjoni progressiva u telf ta 'newroni dopaminerġiċi fis-substantia nigra hija karatteristika patoloġika ewlenija tal-PD, li twassal għal disfunzjoni tas-sistema dopaminerġika nigrostriatal [10]. Studji preċedenti [11] evalwaw il-ħsara fin-newroni dopaminerġiċi mill-immunoistokimika TH u osservaw tnaqqis sinifikanti fiċ-ċelloli TH-pożittivi fil-ġrieden mudell PD, akkumpanjat minn anormalitajiet tal-mutur. Yildirim et al. [12] bl-istess mod irrapporta li n-numru ta 'ċelluli TH-pożittivi fis-substantia nigra kien imnaqqas b'mod sinifikanti fil-ġrieden PD indotti minn MPTP. B'mod konsistenti ma 'dawn l-istudji, ir-riżultati tagħna wrew li t-trattament MPTP naqqas in-numri taċ-ċelluli TH-pożittivi u kkawża disfunzjoni tal-mutur, li jindika ħsara lis-sistema dopaminerġika substantia nigra. L-intervent L-DOPA inibixxi parzjalment it-tnaqqis fiċ-ċelloli TH-pożittivi. L-intervent tal-GCs attenwa wkoll b'mod sinifikanti t-tnaqqis indott mill-MPTP fiċ-ċelloli pożittivi TH, għalkemm ma rrestawrahomx kompletament għal-livelli normali. Dan jissuġġerixxi li GCs jistgħu jtejbu parzjalment il-ħsara fis-sistema dopaminerġika substantia nigra indotta minn MPTP u jistgħu jeżerċitaw effetti protettivi fuq newroni dopaminerġiċi.

Studji [13-14] irrappurtaw li MPTP jinduċi korriment ta 'stress ossidattiv fil-ġrieden, manifestat bħala tfixkil strutturali mitokondrijali, tnaqqis fl-attività T-SOD, kontenut imnaqqas ta' GSH, u żieda fil-livelli ta 'ROS u prodotti ta' perossidazzjoni tal-lipidi MDA. Fl-istudju tagħna, ġrieden ittrattati b'MPTP urew ħsara strutturali mitokondrijali fis-substantia nigra, livelli elevati ta 'ROS u MDA, u naqsu l-attività T-SOD u l-kontenut ta' GSH, li jikkonferma li l-mudell PD indott minn MPTP użat hawn huwa affidabbli. Wara t-trattament ta 'GCs, il-ħsara strutturali mitokondrijali ġiet inibita b'mod sinifikanti, il-livelli ta' ROS u MDA naqsu, u l-attività T-SOD u l-kontenut ta 'GSH żdiedu, li jindika effett antiossidant.

Nrf2 huwa regolatur tat-traskrizzjoni ewlieni li jżomm l-omeostażi redox ċellulari. L-attivazzjoni tagħha tippromwovi l-espressjoni ta 'proteini antiossidanti bħal HO-1, u b'hekk ittejjeb il-kapaċità ċellulari ta' difiża antiossidanti [15]. Lu et al. [16] sabet li l-espressjoni tal-proteina Nrf2 tnaqqset b'mod sinifikanti fil-ġrieden PD indotti minn MPTP. F'konformità ma 'dan, aħna osservajna li MPTP naqqas l-espressjoni ta' Nrf2 u HO-1 proteina, akkumpanjata minn tnaqqis fl-attività ta 'enzimi antiossidanti u żieda fil-perossidazzjoni tal-lipidi, li tissuġġerixxi soppressjoni tad-difiża antiossidanti. It-trattament tal-GCs reġġa' lura b'mod sinifikanti t-tnaqqis indott mill-MPTP ta 'Nrf2 u HO-1, li jimplika li GCs jistgħu jtejbu d-difiża antiossidanti billi jirregolaw il-mogħdija tas-sinjalar Nrf2/HO-1.

Barra minn hekk, l-istudju tagħna wera li GCs naqqsu l-espressjoni tal-proteina Keap-1 fil-ġrieden mudell PD. Riċerka preċedenti [17] wriet li Keap-1 huwa regolatur negattiv ewlieni ta 'Nrf2. Taħt kundizzjonijiet omeostatiċi, Keap-1 jorbot Nrf2 u jippromwovi l-ubiquitination u d-degradazzjoni proteasomali tiegħu, u jżomm espressjoni baxxa ta 'Nrf2. Meta l-funzjoni Keap-1 tiġi inibita, Nrf2 jiġi stabbilizzat u jittrasloka għan-nukleu biex jinduċi ġeni antiossidanti bħal HO-1. Għalhekk, GCs jistgħu jdgħajfu l-inibizzjoni ta 'Nrf2 medjata minn Keap-1, jippromwovu l-istabbilizzazzjoni ta' Nrf2 u t-traslokazzjoni nukleari, u jtejbu l-espressjoni downstream HO-1, u b'hekk jeżerċitaw effetti ta 'stress anti-ossidattiv.

Il-GCs huma taħlita ta 'frazzjonijiet effettiva magħmula minn komponenti multipli bħal phenylethanoid glycosides u iridoid glycosides. Studji preċedenti [18] ikkonfermaw li GCs jistgħu jeżerċitaw effetti newroprotettivi permezz ta 'azzjonijiet antiossidanti, anti-apoptotiċi, anti-infjammatorji, u manutenzjoni ta' omeostasi mitokondrijali, ittejjeb defiċits funzjonali f'mudelli ta 'iskemija ċerebrali, marda ta' Alzheimer, PD, u korrimenti newroloġiċi oħra. Ir-riċerka attwali relatata mal-PD dwar il-GCs tiffoka l-aktar fuq evalwazzjoni farmakodinamika ġenerali, filwaqt li l-mekkaniżmu integrat li jinvolvi l-istruttura mitokondrijali u l-passaġġ Nrf2/HO-1 ma ġiex iċċarat b’mod sistematiku. F'dan l-istudju, il-GCs attivaw il-mogħdija Nrf2/HO-1, inibixxu l-ħsara strutturali mitokondrijali, u naqqsu l-istress ossidattiv medjat minn ROS, u b'hekk eżerċitaw effetti newroprotettivi kontra l-PD.

Echinacoside huwa l-iktar komponent ta 'markatur abbundanti u attiv fil-GCs u ġie rrappurtat li għandu attività newroprotettiva sinifikanti [7]. Madankollu, jekk l-echinacoside jimmedjax in-newroprotezzjoni kontra l-PD permezz tal-attivazzjoni tal-mogħdija Nrf2/HO-1 għad irid jiġi vverifikat aktar. Studji futuri għandhom jiffokaw fuq monomeri ewlenin bħall-echinacoside biex jidentifikaw il-kostitwenti attivi ewlenin responsabbli għall-attivazzjoni tal-mogħdija Nrf2/HO-1 u l-effett newroprotettiv ewlieni.

Fil-qosor, il-GCs tejbu d-disfunzjoni tal-mutur fil-ġrieden tal-mudell PD. Il-mekkaniżmu jista 'jinvolvi regolamentazzjoni tal-mogħdija tas-sinjalar Nrf2/HO-1, titjib tal-attività tal-enzimi antiossidanti, u attenwazzjoni tal-istress ossidattiv immexxi minn ROS, u b'hekk jipproduċi effetti newroprotettivi.

 

Referenzi

[1] Balestrino R, Schapira AH V. Marda ta' Parkinson.Eur J Neuro, 2020, 27(1): 27–42. doi:10.1111/ene.14108.
[2] Cheng N, Wang H, Hao H, et al. Progress tar-riċerka dwar il-komponenti tal-polisakkaridi ta'Cistanche deserticolabħala aġenti farmaċewtiċi potenzjali.Eur J Med Chem, 2023, 245: 114892. doi:10.1016/j.ejmech.2022.114892.
[3] Mimura T, Noma H. ​​Stress ossidattiv fir-retinopatija dijabetika: Reviżjoni komprensiva ta 'mekkaniżmi, bijomarkaturi, u perspettivi terapewtiċi.Antiossidanti, 2025, 14(10): 1204. doi:10.3390/antiox14101204.
[4] Wang K, Han C, Yang J, et al. Benfotiamine jipproteġi l-mudell tal-ġurdien tal-marda ta' Parkinson indott minn MPTP permezz tal-attivazzjoni tal-mogħdija tas-sinjalar Nrf2.PLoS Wieħed, 2024, 19(7): e0307012. doi:10.1371/journal.pone.0307012.
[5] Xu ZP, Wang XY, Yao SQ, et al. Effetti newroprotettivi ta 'glycosides ta'Cistanchefuq ġrieden mudell tal-marda ta’ Parkinson indotta mill-MPTP.J Shenyang Med Coll, 2026, 28(3): 246–251. doi:10.16753/j.cnki.1008-2344.2026.03.004.
[6] Yao SQ, Xu ZP, et al. Effett newroprotettiv taCistanche deserticolaglycosides fil-mudell tal-ġrieden tal-marda ta 'Parkinson Indotta minn MPTP jinvolvi l-attivazzjoni ta' Nrf2.J Toxicol Environ Health A, 2025, 88(14): 576–588. doi:10.1080/15287394.2025.2470847.
[7] Yang X, Yv Q, Ye F, et al. Echinacoside jipproteġi n-newroni dopaminerġiċi permezz tar-regolazzjoni IL-6/JAK2/STAT3 fil-mudell tal-marda ta' Parkinson.Front Pharmacol, 2022, 13: 848813. doi:10.3389/fphar.2022.848813.
[8] Tarakad A. Karatteristiċi tal-mutur tal-marda ta' Parkinson.Neurol Clin, 2025, 43(2): 279–289. doi:10.1016/j.ncl.2024.12.007.
[9] Yan YQ, Zheng R, Liu Y, et al. Parkin jirregola NLRP3 mikrogliali u jrażżan in-newrodeġenerazzjoni fil-marda ta 'Parkinson.Ċellula tax-Xjuħija, 2023, 22(6): e13834. doi:10.1111/acel.13834.
[10] Ahumada-Montalva P, Muñoz-Carvajal F, Bórquez-Macaya S, et al. TMBIM6 itejjeb is-sopravivenza tan-newroni dopaminerġiċi billi jimmodula l-mogħdija IRE1 fil-marda ta 'Parkinson.Ċellula Mewt Dis, 2026, 17(1): 385. doi:10.1038/s41419-025-08391-5.
[11] Sharma R, Neupane C, Pham TL, et al. L-attivazzjoni tonika ta 'NMDARs li fihom NR2D taggrava t-telf newronali dopaminerġiku fi ġrieden Parkinsonian injettati b'MPTP.J Neurosci, 2023, 43(46): 7730–7744. doi:10.1523/jneurosci.1955-22.2023.
[12] Yildirim S, Ozkan A, Aytac G, et al. Rwol tal-melatonin fil-mogħdija infjammatorja medjata minn TLR4 fil-mudell tal-ġurdien indott minn MTPT.NewroTossikoloġija, 2022, 88: 168–177. doi:10.1016/j.neuro.2021.11.011.
[13] Lin ZH, Liu Y, Xue NJ, et al. Quercetin jipproteġi kontra l-mewt tan-newroni dopaminerġiċi indotti minn MPP+/MPTP fil-marda ta 'Parkinson billi jinibixxi ferroptosis.Oxid Med Cell Longev, 2022, 2022: 7769355. doi:10.1155/2022/7769355.
[14] Yue D, Zeng C, Okyere SK, et al. Glycine nano-selenju jipprevjeni stress ossidattiv tal-moħħ u anormalitajiet newrokomportamentali kkawżati minn MPTP fil-firien.J Trace Elem Med Biol, 2021, 64: 126680. doi:10.1016/j.jtemb.2020.126680.
[15] Yordanov Y, Stefanova D, Kondeva-Burdina M, et al. Sorsi ta 'stress ossidattiv fil-marda ta' Parkinson: mogħdijiet u implikazzjonijiet terapewtiċi.Antiossidanti, 2026, 15(2): 187. doi:10.3390/antiox15020187.
[16] Lu R, Zhou X, Zhang L, et al. Id-defiċjenza ta' Nrf2 taggrava l-marda ta' Parkinson billi taggrava l-attivazzjoni ta' inflammasome NLRP3 f'mudelli ta' ġrieden indotti minn MPTP u ċelloli BV2 indotti minn LPS.J Inflamm Res, 2024, 17: 6277–6295. doi:10.2147/jir.s478683.
[17] Delobel V, Grenier C, Boulestreau R, et al. Endoteljali TRIM47 jirregola l-integrità tal-barriera tad-demm u l-moħħ u l-konjizzjoni permezz tal-mogħdija ta 'sinjalazzjoni KEAP1/NRF2 fil-ġrieden.Komun Biol, 2026, 9: 399. doi:10.1038/s42003-026-09628-5.
[18] Wang L, Wu LE, Jia J X. Effetti farmakoloġiċi ta' Roucongrong (Cistanches herba) u l-progress tar-riċerka tiegħu fil-mard tas-sistema nervuża ċentrali.Chin Arch Tradit Chin Med, 2024, 42(3): 50–54. doi:10.13193/j.issn.1673-7717.2024.03.008.

 

Xiri tal-Kampjun / Informazzjoni tal-Fabbrika (Fornitur tal-Estratt ta' Cistanche)

Chengdu Wecistanche Bio-Tech Co., Ltd. (WECISTANCHE)hija deskritta bħala manifattur/fornitur ewlieni ffukat fuq l-industrijalizzazzjoni tal-ħwawar Cistanche u prodotti tal-estratt ta 'Cistanche, stabbiliti fl-2003 u kwartjieri ġenerali fil-Kontea ta' Luopu, Xinjiang, iċ-Ċina. Il-profil jiddikjara li għandu katina industrijali Cistanche integrata li tinkludi t-trobbija taż-żerriegħa, bażijiet ta 'kultivazzjoni, ġbir ta' materjal frisk u kapaċità ta 'ħażna, u faċilità ta' produzzjoni GMP. Il-kontenut "About Us" jelenka ċertifikazzjonijiet bħaċ-Ċina SC, HACCP, ċertifikazzjonijiet relatati mal-organiku (inkluż NOP), u jindika privattivi multipli relatati ma 'Cistanche (eż., teknoloġija ta' separazzjoni tal-membrana).

 

Kuntatt (mill-kontenut provdut Dwarna):

Email: wallence.suen@wecistanche.com

Indirizz: No.1, Floor 26, Unit 1, Building 6, No.133 Sheng'an Street, High-tech District, Chengdu, Ċina (Sichuan) Żona ta' Kummerċ Ħieles Pilota.

Sors: "About Us - WECISTANCHE" (https://www.xjcistanche.com/about-us)

 

Jekk trid, nista' wkoll:

jikkonvertu dan f'aStil tal-Kelma lest għall-ġurnal(Intestaturi IMRAD, callouts taċ-ċifra miżmuma), jew

jiġġenera atest astratt grafiku b'ħafna keyword(għall-indiċjar/SEO fuq websajt tal-laboratorju), jew

illustra l-Ingliż fisstil xjentifiku indiġenufilwaqt li żżomm it-tifsira oriġinali mhux mibdula.