Profili fitokimiċi U Mekkaniżmi ta' Nefropatija Kontra d-Dijabetika Ta' Estratt milwiema ta' *Cistanche Tubulosa* Ibbażat fuq Analiżi ta' Relazzjoni ta' Effett Spettrali

Profili fitokimiċi u Mekkaniżmi ta' Nefropatija Kontra d-Dijabetika ta'Cistanche tubulosaEstratt Aqueous Ibbażat fuq Analiżi tar-Relazzjoni Spettrali-Effett

Astratt

Għadd ta' kliem: 236 In-nefropatija dijabetika (DN) tirrappreżenta waħda mill-aktar kumplikazzjonijiet mikrovaskulari severi tad-dijabete mellitus u hija kawża primarja ta' mard renali fl-aħħar stadju madwar id-dinja. Materjali veġetali naturali mill-mediċina tradizzjonali Ċiniża (TCM) jipprovdu kandidati terapewtiċi multi-mira biex inaqqsu l-fibrożi renali u jtaffu l-ħsara fil-kliewi.Cistanche tubulosa, herb toniku klassiku "ġinseng tad-deżert" irreġistrat fiShennong Bencao Jing, juri proprjetajiet farmakoloġiċi renoprotective dokumentati. Din ir-reviżjoni tisintetizza evidenza sperimentali in-vitro preklinika li adottat strateġija ta’ relazzjoni ta’ effett spettrali biex tgħarbel kostitwenti bijoattivi minnCistanche tubulosaestratt milwiema. UPLC-Orbitrap-MS/MS ġie applikat biex jikkaratterizza profili kimiċi kumplessi ta 'frazzjonijiet elużi b'mod sekwenzjali. Mudell ta 'ħsara taċ-ċelluli HK-2 epiteljali tubulari tal-kliewi tal-bniedem indotta minn kundizzjoni ta' glukożju għoli ta 'xaħam intuża biex tiġi vvalutata l-attività ċitoprotettiva. Rigressjoni parzjali tal-inqas kwadri u analiżi tal-korrelazzjoni tal-griż identifikaw komposti bijoattivi kandidati. Analiżi ċellulari sussegwenti ivvalidaw li l-aċidu 8-epideoxyloganic u l-aċidu ġeniposidiku jistgħu itaffu l-ħsara taċ-ċelluli HK-2, jirregolaw l-attività tal-enzimi antiossidanti, jrażżnu l-medjaturi pro-infjammatorji, u jimmodulaw it-transizzjoni epiteljali-mesenkimali (EMT) billi jinibixxu l-kaskata tas-sinjalar PI3K-Akt. Dan id-dokument jiġbor fil-qosor il-karatteristiċi fitokimiċi, l-osservazzjonijiet farmakoloġiċi in-vitro u l-mekkaniżmi molekulari, jiddiskuti l-limitazzjonijiet tar-riċerka attwali, u joffri perspettivi għal aktar studju ta’Cistanche tubulosakontra n-nefropatija dijabetika.

Kliem ewlieni: Cistanche tubulosa; estratt milwiema; relazzjoni spettrali-effett; UPLC-Orbitrap-MS/MS; nefropatija dijabetika; Ċelloli HK-2; mogħdija PI3K-Akt; fibrożi renali

1. Introduzzjoni

Il-prevalenza globali tad-dijabete mellitus qed tkompli tiżdied minħabba bidliet fix-xejriet tad-dieta, ir-rati tal-obeżità u t-tixjiħ tal-popolazzjoni; projezzjonijiet epidemjoloġiċi jissuġġerixxu aktar minn 360 miljun pazjent dijabetiku madwar id-dinja sas-sena 2030 [1]. Madwar 20 %-35 % tan-nies li jgħixu bid-dijabete tat-tip 2 eventwalment jiżviluppaw in-nefropatija dijabetika, li tgħolli sostanzjalment ir-riskji ta’ morbidità u mortalità [2-3]. Fibrożi interstizjali renali progressiva mmexxija minn stress ossidattiv, infjammazzjoni sostnuta u transizzjoni epiteljali-mesenkimali tubulari tikkostitwixxi l-karatteristika patoloġika ċentrali tad-DN. L-interventi kliniċi attwali ma jistgħux ireġġgħu lura kompletament il-fibrożi renali avvanzata, għalhekk aġenti terapewtiċi ġodda b'ħafna komponenti derivati ​​minn riżorsi naturali tal-pjanti jattiraw interess ta' riċerka li qed jikber [4-5].

Cistanche tubulosa(familja Orobanchaceae) hija ħaxixa tonika magħrufa sew fil-prattika tat-TCM. Ir-rekords storiċi tal-materjal-medika jindikaw l-indikazzjonijiet terapewtiċi tagħha jinkludu defiċjenza tal-kliewi-yang, eżawriment tad-demm tal-essenza, lumbago, dgħjufija tal-għadam u l-għeruq, kif ukoll stitikezza intestinali niexfa [6-7]. Investigazzjonijiet fitokimiċi moderni juru danCistanche tubulosafih phenylethanoid glycosides, iridoid glycosides, lignans, betaine, aċidi amminiċi u saccharides, li jagħtu bijoattivitajiet antiossidanti, kontra t-tixjiħ, riproduttivi-protettivi u nefroprotettivi [8-9]. Investigazzjonijiet farmakoloġiċi preċedenti ta 'din il-ħaxix iffokaw prinċipalment fuq frazzjonijiet ta' phenylethanoid-glycoside; ingħatat inqas attenzjoni lill-komponenti li jinħallu fl-ilma miksuba minn decoction milwiema, li jikkorrispondu għal forom kliniċi ta’ preparazzjoni tradizzjonali tad-decoction [10].

Ir-relazzjoni spettrali-effett tirrappreżenta strateġija ta' riċerka adottata b'mod wiesa' għal studji ta' estratti kumplessi tat-TCM. Dan il-fluss tax-xogħol analitiku jgħaqqad il-marki tas-swaba' kimiċi tal-ispettrometrija tal-massa b'riżoluzzjoni għolja ma' data tat-test tal-bijoattività, bl-użu ta' algoritmi kimometriċi biex jikkorrelataw l-intensitajiet tal-ogħla livelli kromatografiċi ma' qari farmakoloġiċi, sabiex jinstabu sustanzi effettivi kandidati minn taħlitiet ta' ħxejjex b'ħafna komponenti [11]. Il-kombinazzjoni tal-akkwist tal-marki tas-swaba' UPLC-Orbitrap-MS/MS, l-evalwazzjoni tal-mudell taċ-ċelluli ta' ħsara HK-2 b'livell għoli ta' glukożju-għoli ta' xaħam u mudellar statistiku multivarjat jippermetti lir-riċerkaturi jeżaminaw ingredjenti potenzjali kontra d-DN minn kumplessi.Cistanche tubulosaestratt milwiema, u jivvalidaw aktar il-mekkaniżmi ċitoprotettivi tagħhom fil-livell molekulari [12].

Din ir-reviżjoni torganizza mill-ġdid riżultati sperimentali in-vitro prekliniċi ppubblikati mil-letteratura eżistenti [12], u tespandi l-isfond kuntestwali dwar il-patoġenesi tad-DN uCistanche tubulosafitoloġija. L-għanijiet ewlenin huma: (1) li jiġbru fil-qosor ir-riżultati tal-profili tal-komponenti kimiċi għal frazzjonijiet elużi sekwenzjali ta'Cistanche tubulosaestratt ta' l-ilma; (2) li tintroduċi fluss tax-xogħol tal-iskrinjar tar-relazzjoni tal-effetti spettrali għal kostitwenti bijoattivi anti-DN; (3) biex tinterpreta mekkaniżmi ċellulari-molekulari tal-komposti taċ-ċomb 8-epideoxyloganic acid u geniposidic acid kontra l-ħsara taċ-ċelluli tubulari tal-kliewi; (4) biex jindika l-limitazzjonijiet attwali tal-istudju u jipprovdi prospetti għal riċerka ta' segwitu.

2. Ħarsa ġenerali lejn il-materjali u l-fluss tax-xogħol sperimentali (sintetizzati minn rapporti prekliniċi ppubblikati)

Nota: Id-dejta sperimentali mhux ipproċessata kollha hija rkuprata minn letteratura pubblikata disponibbli għall-pubbliku [12]; dan l-artikolu ma jirriproduċi l-ebda graffs oriġinali tal-istrumenti jew ritratti ġġenerati fil-laboratorju. Il-qarrejja jistgħu jikkonsultaw is-sors ikkwotat għal rekords sħaħ tal-esperimenti primarji.

2.1 Materjal veġetali u preparazzjoni ta 'frazzjonijiet ta' estratt milwiema

Materjal tal-pjanti:Cistanche tubulosazkuk imlaħħam inħasdu minn popolazzjonijiet ikkultivati ​​artifiċjalment f'Hotan, ir-reġjun ta' Xinjiang, awtentikament awtentikati minn speċjalisti fil-farmakoloġija tal-pjanti [12]. Flieli veġetali mhux raffinati ġew decocted b'ilma distillat taħt kundizzjonijiet ta 'ilma jagħli ripetutament. Il-filtrati milwiema magħquda ġew ikkonċentrati fil-vakwu f'pejst ta' estratt akweju mhux raffinat niexef. Il-kromatografija tal-kolonna tar-reżina makroporuża AB-8 ġiet applikata għall-elużjoni tal-gradjent: b'mod sekwenzjali bl-użu ta' ilma pur, 20 %, 40 %, 60 %, 80 %, 95 % soluzzjoni ta' etanol. Sitt frazzjonijiet separati ta' eluat (immarkati A-F) inġabru, ikkonċentrati u mnixxfa f'kampjuni ta' trab rispettivament [12]. Kull trab tal-frazzjoni ġie maħlul mill-ġdid b'solvent imħallat metanol-ilma għall-preparazzjoni sussegwenti tal-kampjun UPLC-Orbitrap-MS/MS.

2.2 Strumenti, reaġenti u riżorsi taċ-ċelluli

Pjattaforma analitika: Vanquish UHPLC flimkien ma' spettrometru tal-massa b'riżoluzzjoni għolja Orbitrap Exploris 120 (Thermo Fisher Scientific). Separazzjoni kromatografika utilizzata kolonna analitika Waters ACQUITY UPLC BEH C₁₈ (2.1 mm × 100 mm, 1.7 μm). Tagħmir ewlieni ieħor tal-laboratorju kien jinkludi qarrej tal-mikroplate MultiskanGO, inkubatur taċ-ċelluli, ċentrifuga ta’ veloċità għolja b’temperatura baxxa, mikroskopju ottiku invertit [12].

Linja taċ-ċelluli epiteljali tubulari tal-kliewi tal-bniedem HK-2 inxtrat biex jiġi stabbilit mudell ta 'korriment tal-kliewi in-vitro, esperimenti użaw passaġġi taċ-ċelluli taħt it-30 ġenerazzjoni. Komposti standard ta' referenza: 8-epideoxyloganic acid, geniposidic acid, pinoresinol, syringin, betaine (purità akbar minn jew ugwali għal 98 %). Kitts ta' analiżi bijoloġika kien fihom reaġenti ta' analiżi MTT, kits ta' detezzjoni bijokimika SOD, GSH-Px; Kitts ELISA mmirati lejn IL-1 , TNF‑ , TGF‑ ; Antikorpi primarji Western-blot inklużi ‑SMA, Collagen Ⅰ, E‑cadherin, PI3K, p‑PI3K, Akt, p‑Akt [12].

2.3 Fluss tax-xogħol sperimentali

1. Akkwist ta' marki tas-swaba' kimiċi: UPLC-Orbitrap-MS/MS operat kemm taħt il-modi ta' jonizzazzjoni tal-elettrospray tal-jone pożittiv kif ukoll tal-jone negattiv. Programm ta' elużjoni tal-gradjent bl-użu ta' sistema ta' fażi mobbli ta' aċidu formiku-acetonitrile / ilma ta' aċidu formiku. It-tqabbil ta' spettri ta' frammenti MS/MS ma' standards ta' referenza u databases spettrali tal-massa ppubblikati ntużaw biex jikkaratterizzaw kostitwenti fitokimiċi f'sitt frazzjonijiet ta' elużjoni [12]. 2.Kostruzzjoni ta' mudell ta' ħsara in vitro: Iċ-ċelloli HK-2 ġew esposti għal glukożju għoli kkombinat (30 mmol·L⁻¹ glukożju) flimkien ma' palmitat biex jissimulaw il-fenotip ta' ħsara renali-tubulari b'livell għoli ta' glukożju b'ħafna xaħam rilevanti għan-nefropatija dijabetika. Testijiet tas-serje tal-gradjent tal-konċentrazzjoni ddeterminaw l-aħjar kundizzjonijiet tal-immudellar: palmitat 700 μmol·L⁻¹ ko-inkubat għal 24 siegħa pproduċa tnaqqis stabbli tal-vijabbiltà taċ-ċelluli [12]. 3.Screening tal-attività tal-frazzjonijiet: Konċentrazzjonijiet differenti ta 'sitt frazzjonijiet ta' elużjoni (A-F) ġew amministrati fuq ċelluli HK-2 danneġġjati. Assaġġ MTT kejjel ir-rata tal-vijabbiltà tal-proliferazzjoni taċ-ċelluli biex jevalwa l-qawwa ċitoprotettiva ta' kull frazzjoni [12]. 4.Analiżi kimometrika b'effett spettrali: Peak‑area data of chromatographic signals from each fraction and corresponding HK‑2 cell‑viability bio‑activity data were imported into SIMCA 14.1 and SPSSPRO platforms. Partial‑least‑squares regression calculated VIP values and regression coefficients; grey‑correlation‑analysis output correlation‑degree index. Compounds satisfying VIP > 1 and grey‑correlation‑index >0.7 ġew magħżula bħala komponenti bijoattivi kandidati kontra d-DN [12]. 5.Esperimenti ta' validazzjoni b'kompost wieħed: Il-komposti puri kandidati identifikati mill-immudellar tal-effett spettrali ġew applikati individwalment fuq ċelluli HK-2 b'dannu ta' glukożju għoli ta' xaħam. Assaġġ MTT ivverifikat il-qawwa protettiva taċ-ċelluli. Kitts bijokimiċi skoprew indikaturi antiossidanti SOD, GSH-Px; Livelli ta' fattur pro-infjammatorju kwantifikati mill-ELISA (IL-1, TNF-, TGF- ). Assaġġ Western-blot skopra proteina markatur relatata mal-EMT kif ukoll abbundanza ta' espressjoni ta' proteina relatata mal-mogħdija PI3K-Akt [12].

2.4 Ipproċessar statistiku

Id-dejta tal-kejl tal-esperiment taċ-ċelluli kienet espressa bħala medja ± devjazzjoni standard. Il-paraguni ta' gruppi multipli adottaw ANOVA f'direzzjoni waħda segwita minn ttestjar post-hoc; P< 0.05 was considered statistically significant difference. Chemometric spectral‑effect‑modelling relied on SIMCA and online‑platform grey‑correlation‑analysis modules [12].

3. Sinteżi ta 'sejbiet sperimentali minn letteratura ppubblikata

3.1 Karatterizzazzjoni fitokimika ta' frazzjonijiet ta' elużjoni sekwenzjali

Permezz tat-tqabbil tal-ħin ta' ritenzjoni, il-massa tal-jone prekursur u l-informazzjoni dwar il-frammenti MS/MS ma' standards ta' referenza u databases spettrali ppubblikati, total ta' 72 kostitwent fitokimiċi kondiviżi ġew identifikati b'mod tentattiv f'sitt.Cistanche tubulosafrazzjonijiet ta' elużjoni ta' estratt milwiema [12]. Il-kategoriji tal-komposti misjuba koprew glikożidi iridojdi, glikożidi feniletanojdi, lignans, betaine, amino-aċidi, aċidi-fenoliċi, derivattivi-sakkaridi u metaboliti sekondarji oħra. Id-distribuzzjoni tal-komponenti wriet differenzi ovvji li jiddependu mill-frazzjonijiet: il-frazzjoni tal-eluzzjoni tal-ilma (A) u l-frazzjonijiet tal-etanol b'konċentrazzjoni baxxa (B, C) kienu aktar sinjuri f'molekuli li jinħallu fl-ilma polari ħafna inklużi l-betaine, diversi glikożidi iridojdi; frazzjonijiet ta' saħħa ogħla bl-etanol akkumulaw lignans ta' polarità aktar baxxa u sustanzi phenylethanoid-glycoside [12].

3.2 Skrinjar ta' attività ċitoprotettiva ta' frazzjonijiet ta' elużjoni fuq ċelluli HK-2 danneġġjati

Trattament ta’ glukożju għoli ta’ xaħam naqqas b’mod sinifikanti r-rata ta’ sopravivenza taċ-ċelluli epiteljali tubulari tal-kliewi HK-2, u rriproduċa b’suċċess il-fenotip tal-ħsara taċ-ċelluli tal-kliewi in-vitro tan-nefropatija dijabetika fi stadju bikri [12]. Fost sitt frazzjonijiet elużi bil-gradjent, il-frazzjoni A (eluat tal-ilma), il-frazzjoni B (20 %-eluat tal-etanol), il-frazzjoni C (40 % tal-eluat tal-etanol) jistgħu jgħollu b'mod notevoli l-vijabbiltà taċ-ċelluli HK-2 bil-ħsara, filwaqt li l-frazzjonijiet D-F wrew effetti protettivi limitati ħafna bħala konċentrazzjoni ottimali. 50} immudellar tad-dejta dwar ir-relazzjoni tal-effetti spettrali [12].

3.3 Riżultati ta' screening kimometriku tar-relazzjoni spettrali-effett

Partial‑least‑squares regression and grey‑correlation‑analysis jointly screened eight candidate compounds which simultaneously satisfied VIP > 1 and grey‑correlation‑degree >0.7: 8-epideoxyloganic acid, geniposidic acid, pinoresinol, betaine, syringin, tubuloside A, acteoside, cistanoside E [12]. Dawn il-kostitwenti kienu meqjusa bħala kontributuri ewlenin għall-attività ċitoprotettiva anti-DN ta'Cistanche tubulosafrazzjonijiet ta' estratt milwiema. Erba' sustanzi puri rappreżentattivi (8-epideoxyloganic acid, geniposidic acid, pinoresinol, syringin) intgħażlu għal aktar analiżi ta' validazzjoni ċellulari b'kompost wieħed [12].

3.4 Validazzjoni ċitoprotettiva b'kompost wieħed

Ir-riżultati MTT indikaw liAċidu 8-epideoxyloganic u aċidu ġeniposidikueżerċitaw effetti protettivi prominenti u rrestawraw il-vijabbiltà taċ-ċelluli HK-2 bil-ħsara b'livell għoli ta' glukożju b'ħafna xaħam, filwaqt li pinoresinol u syringin urew attività relattivament dgħajfa taħt konċentrazzjonijiet tat-test [12]. Għalhekk dawn iż-żewġ molekuli iridojdi-glikosidi saru komposti ewlenin ewlenin għall-esplorazzjoni mekkanistika downstream.

Sejbien antiossidant-bijokimiku: meta mqabbel ma 'grupp ta' mudell ta 'korriment, it-trattament bl-użu ta' aċidu 8-epideoxyloganic jew aċidu ġeniposiku żied b'mod sinifikanti l-livell ta 'attività ta' l-enzimi antiossidanti SOD u GSH-Px, mitigat il-piż ta 'stress ossidattiv intraċellulari indott minn stimulazzjoni ta' glukożju għoli ta 'xaħam [12].

Kejl ELISA tal-fattur infjammatorju: iż-żewġ komposti jistgħu jirregolaw b'mod sinifikanti l-livell ta 'sekrezzjoni ta' medjaturi pro-infjammatorji IL-1, TNF- u TGF- rilaxxati minn ċelluli tubulari renali bil-ħsara, li jrażżnu r-rispons infjammatorju lokali marbut mal-progressjoni tal-fibrożi renali [12].

Analiżi tal-espressjoni tal-proteini Western-blot: L-istimulazzjoni b'livell għoli ta' glukożju b'ħafna xaħam ikkawżat fenomenu tipiku ta' transizzjoni epiteljali-mesenkimali (EMT) fiċ-ċelloli HK-2: espressjoni għolja ta' markatur profibrotiku-proteina -SMA u Collagen Ⅰ, sadanittant l-abbundanza ta' markatur tal-junction aderenti naqset b'mod sinifikanti fl-abbundanza ta' proteina E. Wara l-intervent kompost, l-espressjoni ta '-SMA u Collagen Ⅰ ġiet regolata 'l isfel, l-espressjoni ta' E-cadherin ġiet irkuprata. Barra minn hekk, il-livell ta' fosforilazzjoni tal-proteini ewlenin tal-mogħdija tas-sinjalar PI3K-Akt (p-PI3K/PI3K, proporzjon p-Akt/Akt) naqas b'mod evidenti [12]. Dawn l-osservazzjonijiet wrew li l-aċidu 8-epideoxyloganic u l-aċidu ġeniposiku jistgħu jrażżnu l-attivazzjoni anormali tal-kaskata tas-sinjalar PI3K-Akt. Billi jinibixxu l-attivazzjoni żejda ta' PI3K-Akt, iż-żewġ kostitwenti iridojdi-glikosidi soppressi l-ħsara mill-istress ossidattiv, ir-rispons infjammatorju u l-proċess EMT taċ-ċelluli tubulari, sabiex itaffu l-ħsara taċ-ċelluli renali-tubulari assoċjata mal-patoloġija tan-nefropatija dijabetika [12].

4. Diskussjoni

Il-patoġenesi tan-nefropatija dijabetika tirrappreżenta proċess patoloġiku interattiv b'ħafna fatturi: l-ipergliċemija-lipotossiċità tipprovoka t-tifqigħ ta' stress ossidattiv, tistimula rilaxx robust ta' ċitokini pro-infjammatorji, tmexxi tranżizzjoni epiteljali-mesenkimali-tubulari renali, u fl-aħħar mill-aħħar timxi għal fibrożi interstizjali renali irreversibbli [13-14]. L-assi tas-sinjalar PI3K-Akt jokkupa pożizzjoni regolatorja ċentrali f'din il-katina patoloġika; L-attivazzjoni eċċessiva sostnuta ta' PI3K-Akt se tippromwovi l-progressjoni EMT taċ-ċelluli epiteljali tubulari tal-kliewi, taċċellera d-depożizzjoni tal-matriċi extraċellulari u l-iżvilupp tal-leżjoni fibrotika [15-16]. Għalhekk l-aġenti farmakoloġiċi li jimmiraw il-mogħdija PI3K-Akt għandhom valur promettenti għar-riċerka dwar l-intervent tad-DN.

Cistanche tubulosadecoction milwiema tikkorrispondi mal-mod ta' amministrazzjoni klinika tradizzjonali fil-prattika tat-TCM, li fiha ingredjenti attivi abbundanti solubbli fl-ilma. Investigazzjonijiet farmakoloġiċi preċedenti taw attenzjoni fil-biċċa l-kbira għall-frazzjonijiet lipofiliċi tal-feniletanojdi-glikosidi miksuba bl-estrazzjoni tal-alkoħol; il-funzjonijiet-bijoloġiċi ta' l-iridoid-glycosides arrikkit bl-estratt ta' l-ilma u l-betaine jistħoqqilhom attenzjoni aktar profonda [17-18]. L-istrateġija analitika tar-relazzjoni tal-effett spettrali effettivament iddejjaq is-sustanzi bijoattivi kandidati minn estratti veġetali kumplessi b'ħafna komponenti mingħajr purifikazzjoni ta' iżolament ripetuta tedjanti ta' kull kompost wieħed, li toffri soluzzjoni effiċjenti għar-riċerka farmakoloġika moderna ta' preparazzjonijiet b'ħafna komponenti TCM [19-20].

Skont ir-riżultati sperimentali in-vitro prekliniċi mqassra, 8-epideoxyloganic acid u geniposidic acid (kostitwenti tat-tip iridoid-glycoside separati minnCistanche tubulosafrazzjonijiet solubbli fl-ilma) jistgħu jipproteġu ċelluli epiteljali tubulari-kliewi HK-2 minn ħsara medjata minn glukożju għoli ħafna xaħam. Il-mekkaniżmu ċitoprotettiv tagħhom jinkludi tliet dimensjonijiet interkonnessi: it-titjib tal-kapaċità tad-difiża taċ-ċelluli antiossidanti, it-trażżin tat-tnixxija eċċessiva tal-fattur pro-infjammatorju, u s-soppressjoni tal-progress tat-transizzjoni epiteljali-mesenkimali mmexxija minn PI3K-Akt, li b'mod konġunt itaffu l-bidliet patoloġiċi fil-livell taċ-ċelluli li jimitaw id-dijabete ta' stadju bikri [-nephropathy]. Dan jipprovdi evidenza preklinika ġdida fil-livell molekulari li tispjega l-qawwa nefroprotettiva ta'Cistanche tubulosaestratt milwiema. Sadanittant, l-immudellar tal-effett spettrali indika wkoll li l-betaine, il-pinoresinol tat-tip lignan, kif ukoll diversi glikożidi feniletanojdi dokumentati tajjeb jistgħu jikkontribwixxu wkoll għall-bijoattività kontra d-DN; effetti kombinati sinerġistiċi b'ħafna komponenti m'għandhomx jiġu injorati f'sistemi ta' estratti ta' ħxejjex kumplessi [12].

Dan il-korp ta 'riċerka eżistenti għadu jġorr limitazzjonijiet notevoli: L-ewwel, l-osservazzjonijiet mekkanistiċi kollha huma derivati ​​minn esperimenti in-vitro ta' mudell ta 'ċelluli HK-2, nieqsa mill-validazzjoni in vivo ta' mudell ta 'annimali. Is-sistema tal-kultura taċ-ċelluli ma tistax tirrikapitola bis-sħiħ il-kumplessità integrata tal-patoloġija tan-nefropatija dijabetika tal-organiżmu kollu inklużi leżjonijiet glomerulari, crosstalk interċellulari renali u bidliet fl-omeostażi metabolika in-vivo. It-tieni, l-investigazzjoni preżenti ffukat prinċipalment fuq żewġ komposti iridojdi-glycoside taċ-ċomb; interazzjoni sinerġistika bejn ingredjenti attivi multipli fi ħdan estratt akweju mhux raffinat teħtieġ esplorazzjoni ulterjuri. It-tielet, teżisti assenza ta' riċerka dwar l-imġiba farmakokinetika ta' 8-epideoxyloganic acid u geniposidic acid: is-sitwazzjoni tal-bijodisponibilità, id-distribuzzjoni tat-tessuti u t-trasformazzjoni metabolika wara l-amministrazzjoni in vivo għadhom mhux magħrufa. Ir-raba', s'issa m'hi disponibbli l-ebda evidenza ta' prova klinika umana, u l-fattibilità tat-trasformazzjoni klinika teħtieġ valutazzjoni ulterjuri.

Għal direzzjonijiet ta’ riċerka ta’ segwitu: mudelli ta’ annimali ta’ nefropatija dijabetika in-vivo (mudelli ta’ firien/ġurdien dijabetiċi indotti minn STZ) jistgħu jiġu adottati biex tiġi vverifikata l-effikaċja renoprotettiva in-vivo ta’ aċidu 8-epideossiloganic u aċidu ġeniposiku, osserva patoloġija tat-tessut renali, livell ta’ proteina-awrina u varjazzjoni bijokimika tas-serum. Gruppi ta’ intervent kombinat b’ħafna komponenti għandhom jiġu rranġati biex jistħarrġu l-effetti sinerġistiċi potenzjali ta’ kategoriji differenti ta’Cistanche tubulosakostitwenti. Wettaq studji farmakokinetiċi biex tiċċara l-assorbiment, id-distribuzzjoni, il-karatteristiċi tal-metaboliżmu tal-komposti taċ-ċomb. Fi stadju aktar tard, valutazzjoni tas-sigurtà preklinika u riċerka klinika mfassla tajjeb huma meħtieġa qabel ma dawn is-sejbiet tar-riċerka bażika jiġu tradotti f'referenza terapewtika prattika.

Minn perspettiva usa' tat-teorija tat-TCM,Cistanche tubulosafunzjonijiet biex tonifika l-yang tal-kliewi u timla l-essenza tad-demm. Studji farmakoloġiċi moderni wrew l-effetti protettivi tagħha fuq is-sistema riproduttiva, il-metaboliżmu tal-għadam u l-ħsara fil-kliewi. Tipi differenti ta' kostitwenti kimiċi jistgħu jikkorrispondu għal diversi manifestazzjonijiet farmakoloġiċi ta' din il-ħaxixa TCM. Il-fluss tax-xogħol analitiku ta' relazzjoni ta' effett spettrali kombinat multi-omics se jservi bħala għodda b'saħħitha għad-deċifrar ta' karatteristiċi farmakoloġiċi b'multi-mira ta' ħxejjex-toniċi klassiċi fir-riċerka-modernizzazzjoni tat-TCM fil-ġejjieni.

5. Konklużjoni

1. Il-profiling fitokimiku bbażat fuq UPLC-Orbitrap-MS/MS jiskopri 72 kostitwent kondiviżi fost frazzjonijiet elużi sekwenzjali ta'Cistanche tubulosaestratt milwiema, li jkopri glikożidi iridojdi, glikożidi feniletanojdi, lignans u komponenti oħra li jinħallu fl-ilma. Il-frazzjonijiet ta' elużjoni ta' l-ilma u ta' etanol ta' qawwa baxxa juru attività ċitoprotettiva prominenti għal ċelluli epiteljali tubulari renali HK-2 b'livell għoli ta' glukożju b'ħafna xaħam imweġġa'. 2. Il-mudellar kimometriku ta' relazzjoni ta' effett spettrali jidentifika tmien komposti kandidati anti-DN-attivi. Fosthom, żewġ iridojdi-glikożidi: aċidu 8-epideossiloganic u aċidu ġeniposiku juru effetti protettivi qawwija għal ċelluli HK-2 bil-ħsara f'assaġġi ta' validazzjoni ta' kompost wieħed. 3. 8-aċidu epideossiloganiku u aċidu ġeniposiku jistgħu jgħollu SOD, GSH-Px attività enżima, antiossidant-anti-infjammatorja T-NF-TG1, soppressor tal-pro-infjammazzjoni NF-TG1. jirrilaxxa, jimmodula markaturi tal-proteini relatati mal-EMT, u jeżerċita effetti ċitoprotettivi parzjalment billi jinibixxi l-passaġġ tas-sinjalar PI3K-Akt attivat żżejjed. 4. L-evidenza attwali hija limitata għal esperimenti fil-livell taċ-ċelluli in vitro. Aktar verifika in vivo tal-mudell tal-annimali, analiżi tal-karatteristiċi farmakokinetiċi u valutazzjoni tas-sikurezza huma meħtieġa biex tavvanza r-riċerka translazzjonali ta’ dawn is-sustanzi bijoattivi li joriġinaw minnCistanche tubulosa.

Rikonoxximenti

Din ir-reviżjoni narrattiva tissintetizza riżorsi sperimentali prekliniċi ppubblikati pubblikament. Il-gratitudni tmur lit-tim tar-riċerka oriġinali talli temm ix-xogħol tal-estrazzjoni tal-pjanti, l-ispettrometrija tal-massa u l-laboratorju molekulari ċellulari.

Referenzi

[1] Carracher A M, Marathe P H, Close K L. Federazzjoni internazzjonali tad-dijabete 2017[J]. Ġurnal tad-Dijabete, 2018, 10(5): 353-356.

[2] Fakhruddin S, Alanazi W, Jackson K E. Speċi ta' ossiġnu reattiv indotti mid-dijabete: Mekkaniżmu tal-ġenerazzjoni tagħhom u r-rwol fil-ħsara renali[J]. Ġurnal tar-Riċerka dwar id-Dijabete, 2017, 2017: 8379327.

[3] Lavoz C, Rayego‑Mateos S, Orejudo M, et al. Jista' IL-17A jkun mira terapewtika ġdida fin-nefropatija dijabetika?[J]. Ġurnal tal-Mediċina Klinika, 2020, 9(1): 272.

[4] Tu P F, Jiang Y. Aġġorna r-riċerka tal-letteratura klassika dwar Cistanches Herba[J]. China Journal of Chinese Materia Medica, 2022, 47(20): 5670-5679.

[5] Xiang X J, Zhang P P, Ye Q Q, et al. Studju dwar l-effett ta 'Xiaoyu Xiezhuo Decoction fil-prevenzjoni u t-trattament tal-fibrożi renali fil-ġrieden ta' nefropatija dijabetika[J]. Chinese Journal of Modern Applied Pharmacy, 2022, 39(4): 442-449.

[6] Fu Z, Liu Y. Avvanzi farmakoloġiċi tal-ġeneruCistanche: Reviżjoni[J]. Riċerka dwar il-Fitoterapija, 2021, 35(8): 4234‑4252.

[7] Jiang Y, Wang Y‑F. Użi tradizzjonali, fitokimika u farmakoloġija ta 'Cistanche tubulosa[J]. Ġurnal tal-Ethnopharmacology, 2020, 259: 112968.

[8] Ran Z, Ju B‑W, Cao L, et al. L-analiżi tal-mikrobijoma-metabolomika tiżvela l-effett potenzjali tal-verbascoside biex itaffi l-indeboliment konjittiv fil-ġrieden db/db[J]. Food & Function, 2023, 14(8): 3488-3508.

[9] Zhi Y‑J, Zhen Y‑Q, Tian W, et al. Progress tar-riċerka dwar kostitwenti kimiċi u effetti farmakoloġiċi ta'Cistanche deserticolau analiżi ta' tbassir ta' markaturi ta' kwalità(Q‑Marker)[J]. Drogi Tradizzjonali u Veġetali Ċiniżi, 2021, 52(9): 2758-2767.

[10] Liu T‑H, Ma C, Wang B‑C, et al. Komponenti effettivi u mekkaniżmu ta 'estratt milwiema Cistanches Herba kontra nefropatija dijabetika bbażata fuq ir-relazzjoni spettrali-effett[J]. Chinese Journal of Modern Applied Pharmacy, 2024, 41(10): 1313-1323.

[11] Zhang Y, Li H‑Y. Strateġija ta' riċerka ta' relazzjoni ta' effett spettrali għal estratti kumplessi ta' mediċina tradizzjonali Ċiniża[J]. Chinese Pharmaceutical Journal, 2022, 57(12): 969-975.

[12] Liu T H, Ma C, Wang B C, et al. Komponenti effettivi u mekkaniżmu ta 'estratt milwiema Cistanches Herba kontra nefropatija dijabetika bbażata fuq ir-relazzjoni spettrali-effett[J]. Chin J Mod Appl Pharm, 2024, 41(10): 1313‑1323.

[13] Xu Z, Xiang X, Su S L, et al. Analiżi multi-omika turi l-patoġenesi tal-mard tal-kliewi dijabetiċi tal-ġrieden db/db u l-mekkaniżmi ta’ trattament ta’ kombinazzjoni ta’ komposti multi-bijoattivi minn Salvia miltiorrhiza[J]. Frontiers in Pharmacology, 2022, 13: 987668. [14] Zhou R, Liao J, Cai D, et al. Nupr1 jimmedja l-fibrożi renali permezz tal-attivazzjoni tal-fibroblast u l-promozzjoni tat-transizzjoni epiteljali-mesenkimali [J]. FASEB Journal, 2021, 35(3): e21381.

[15] Dian M‑J, Li J, Zhang X‑L, et al. MST4 jirregola b'mod negattiv l-EMT, l-invażjoni u l-metastasi taċ-ċelloli HCC billi jinattiva l-assi PI3K/AKT/Snail1[J]. Ġurnal tal-Kanċer, 2021, 12(15): 4463-4477.

[16] Zhang B‑B, Zeng M‑N, Li B‑K, et al. L-arbutin jattenwa l-ħsara akuta fil-kliewi kkawżata mill-LPS billi jinibixxi l-infjammazzjoni u l-apoptożi permezz tal-mogħdija PI3K-Akt/Nrf2[J]. Phytomedicine, 2021, 82: 153466.

[17] Wu Y‑Y, Zhang X‑H. Iridoid glycosides mill-ġeneruCistanche: Fitokimika u bijo-attivitajiet[J]. Riċerka dwar il-Prodotti Naturali, 2023, 37(14): 2311-2326.

[18] Cao L, Ju B‑W, Ran Z, et al. Effetti protettivi ta 'phenylethanol glycosides ta' herba cistanche fuq ġrieden b'mard tal-fwied kolestatiku[J]. Ġurnal Ċiniż tal-Farmakoviġilanza, 2023, 20(3): 286-291.

[19] Wang L, Chen J‑B. Progress tal-applikazzjoni tal-korrelazzjoni tal-effett tal-ispettru fl-iskrinjar ta' sustanzi bijoattivi tal-mediċina tradizzjonali Ċiniża[J]. China Journal of Chinese Materia Medica, 2023, 48(7): 1801-1808.

[20] Li M‑X, Huang S‑Q. Skrinjar assistit mill-kimometriku ta' kostitwenti bijoattivi minn preparazzjonijiet veġetali: Mini-reviżjoni[J]. Ġurnal tax-Xjenza tas-Separazzjoni, 2024, 47(6): 2300897.