Konsum orali ta 'peptidi tal-kollaġen tal-għadam tat-tiġieġ kontra t-tixjiħ tal-ġilda fil-ġrieden billi tirregola d-degradazzjoni u s-sintesi tal-kollaġen, jinibixxi l-infjammazzjoni u jattiva l-liżosomi

Jekk jogħġbok ikkuntattjaoscar.xiao@wecistanche.comgħal aktar informazzjoni

Astratt:L-effett tad-dieta fuq it-tixjiħ tal-ġilda sar suġġett ta 'riċerka interessanti. Studji preċedenti ffukaw l-aktar fuq l-effetti ta 'benefiċċju ta' peptidi tal-kollaġen derivati ​​minn organiżmi tal-baħar fuq il-ġilda li qed tixjieħ meta mogħtija mill-ħalq, filwaqt li l-effetti ta 'benefiċċju ta' peptidi tal-kollaġen derivati ​​mit-tjur fuq il-ġilda li qed tixjieħ ġew rarament irrappurtati. F'dan l-istudju, il-peptidi tal-kollaġen ġew ippreparati mill-għadam tat-tiġieġ permezz ta 'idroliżi enżimatika, u ġew investigati l-effett u l-mekkaniżmu ta' azzjoni ta 'peptidi tal-kollaġen amministrati oralment fuq it-taffija tat-tixjiħ tal-ġilda indott minn UV flimkien ma' D-galactose. Ir-riżultati wrew li l-kollaġen tal-għadam tat-tiġieġ kellu karatteristiċi tipiċi tal-collagen, u l-peptidi(CPs) tal-kollaġen tal-għadam tat-tiġieġ kienu prinċipalment peptidi molekulari żgħar b'piż molekulari ta '<3000 da.="" in="" vivo="" experiments="" showed="" that="" cps="" had="" a="" significant="" relieving="" effect="" on="" aging="" skin,="" indicated="" by="" the="" changes="" in="" the="" compostion="" and="" structure="" of="" the="" aging="" skin,="" improvement="" of="" skin="" antioxidant="" level,="" and="" inhibition="" of="" inflammation;="" the="" relieving="" effect="" was="" positively="" correlated="" with="" the="" dose="" of="" cps.="" further="" investigation="" showed="" that="" cps="" first="" reduce="" the="" level="" of="" skin="" oxidation,inhibit="" the="" expression="" of="" the="" key="" transcription="" factor="" ap-1(c-jun="" and="" c-fos),="" then="" activate="" the="" tgf-β/smad="" signaling="" pathway="" to="" promote="" collagen="" synthesis,="" inhibit="" the="" expression="" of="" mmp-1/3="" to="" inhibit="" collagen="" degradation,and="" inhibit="" skin="" inflammation="" to="" alleviate="" skin="" aging="" in="" mice.="" moreover,="" the="" skin="" transcriptome="" found="" that="" lysosomes="" activated="" after="" oral="" administration="" of="" cps="" may="" be="" an="" important="" pathway="" for="" cps="" in="" anti-skin="" aging,="" and="" is="" worthy="" of="" further="" research.="" these="" results="" suggested="" that="" cps="" might="" be="" used="" as="" a="" functional="" anti-aging="" nutritional="">

Jekk jogħġbok ikklikkja hawn biex tkun taf aktar

Kliem ewlieni:peptidi tal-kollaġen; kontra t-tixjiħ; transcriptome tal-ġilda;sinteżi tal-kollaġen;liżosomi

1. Introduzzjoni

L-era tas-saħħa, issegwi b'mod preċiż dieta sana, tiddetermina r-rwol tan-nutrizzjoni fit-tixjiħ tal-ġilda, u tiddeċiedi x'għandek tiekol biex iżżomm ġilda żagħżugħa u b'saħħitha huma problemi diffiċli. Il-ġilda hija l-akbar organu tal-ġisem, magħmul mill-epidermide, id-dermis u s-saff taħt il-ġilda. Jaġixxi bħala ostaklu biex jipproteġi l-ġisem minn fatturi esterni u għandu wkoll rwol fis-saħħa u s-sbuħija[1. It-tixjiħ tal-ġilda huwa proċess kumpless, li huwa maqsum f'tixjiħ kronoloġiku u tixjiħ tar-ritratti u huwa affettwat minn fatturi kemm interni kif ukoll esterni.cistanche zokkIl-karatteristiċi ewlenin jinkludu l-akkumulazzjoni ta 'ħsara makromolekulari fiċ-ċellula, it-tnaqqis tal-funzjoni taċ-ċelluli staminali (il-promozzjoni tat-tiġdid tat-tessut), u t-telf gradwali tal-integrità fiżika tal-ġilda [2]. Il-mekkaniżmi molekulari ewlenin li jikkawżaw tixjiħ tal-ġilda jinkludu prinċipalment stress ossidattiv, tqassir tat-telomeri, ħsara fid-DNA, mutazzjoni ġenetika, regolamentazzjoni tal-mikro-RNA, akkumulazzjoni avvanzata tal-prodott finali ta 'glycation, u tixjiħ tal-infjammazzjoni 3]. It-tixjiħ tar-ritratti huwa iperplażja epidermali tal-ġilda, tnixxif u degradazzjoni tal-matriċi extraċellulari indotta mir-radjazzjoni ultravjola. Il-kawża ewlenija tat-tixjiħ tar-ritratti hija speċi ta' ossiġnu reattiv (ROS) iġġenerat minn radjazzjoni ultravjola li jimmedjaw l-espressjoni ta 'matrix metalloproteinases (MMPs) u pro-collagen tat-tip I permezz ta' mogħdijiet tas-sinjali bħas-sinjalar tal-proteina kinase attivata mill-mitoġenu (MAPK) mogħdija, u b'hekk twassal għad-degradazzjoni tal-matriċi extraċellulari (ECM) fil-ġilda u l-apoptożi tal-fibroblasti [4]. F'dawn l-aħħar snin, iż-żamma tas-saħħa tal-ġilda u d-dewmien tat-tixjiħ saret popolari, u s-sejba ta 'ingredjenti naturali bħal peptidi bijoattivi u polifenoli b'funzjonijiet antiossidanti u kontra t-tixjiħ saret hotspot ta' riċerka [5].

Cistanche jista 'anti-aging

Madankollu, il-collagen għandu piż molekulari kbir u huwa diffiċli li jiġi assorbit u utilizzat direttament, filwaqt li l-peptidi tal-kollaġen molekulari żgħar wara l-idroliżi tal-kollaġen għandhom attività bijoloġika aktar b'saħħitha u rata ta 'assorbiment għolja [6]. Sadanittant, l-applikazzjoni wiesgħa ta 'kollaġen fl-ikel, mediċina, inġinerija tat-tessuti, kożmetiċi, u oqsma oħra għamlet peptidi tal-kollaġen b'piż molekulari aktar baxx, effiċjenza ogħla ta' assorbiment, u attività bijoloġika aktar b'saħħitha favorita ġdida fl-ikel funzjonali u r-riċerka medika [{{1 }}]. Il-peptidi tal-kollaġen huma żgħar, li fihom 2-20 residwi ta' aċidu amminiku miksuba wara l-idroliżi tal-kollaġen. Jintużaw bħala suppliment tad-dieta għat-trattament tat-tixjiħ tal-ġilda minħabba l-funzjonijiet potenzjali anti-infjammatorji u antiossidanti tagħhom u r-regolamentazzjoni immuni u l-effetti ta 'antiossidazzjoni u proliferazzjoni fuq fibroblasti tal-ġilda [10].

Wara l-amministrazzjoni orali, il-peptidi tal-kollaġen huma assorbiti fil-forma ta 'peptidi żgħar u ttrasportati malajr lejn id-demm, u eventwalment, lejn il-kidnevs, il-ġilda, il-ġogi, u tessuti oħra biex jinħażnu u jintużaw. Wara 14-il jum, il-livelli ta' radjuattività baqgħu għoljin fil-ġilda tal-ġrieden li kienu ġew gavaged b'peptidi tal-collagen ittikkettati C14-.cistanche tubulosa benefiċċji u effetti sekondarjiIl-peptidi tal-kollaġen jistgħu jiġu assorbiti u utilizzati kważi kompletament mill-ġisem, filwaqt li r-rata ta' assorbiment u utilizzazzjoni tal-kollaġen hija biss 50-60 fil-mija [6,11-13]. F'dawn l-aħħar snin, l-idrolisati tal-kollaġen minn ġilda tal-ħut, skala tal-ħut, għadam tal-baqra, ġilda tal-baqra u ġilda tal-majjal ġew irrappurtati b'mod wiesa 'li għandhom effetti ta' benefiċċju fuq it-taffija tat-tixjiħ tal-ġilda u rċevew attenzjoni konsiderevoli mir-riċerkaturi. Pereżempju, peptidi tal-kollaġen iżolati mill-ġilda tal-karpjun tal-fidda jippromwovu s-sinteżi pro-collagen u jinibixxu l-espressjoni tal-proteini AP-1, MMP-1, u MMP-3 billi jattivaw il-mogħdija TGF-/Smad biex tevita d-degradazzjoni tal-kollaġen u tissewwa ċelluli tal-ġilda fotoaged [14]. Amministrazzjoni orali ta 'peptidi tal-collagen bovini tista' ttejjeb ir-rilassament tal-ġilda, iżid il-kontenut tal-kollaġen u l-attività tal-enzimi antiossidanti, isewwi l-fibra tal-kollaġen, u jinnormalizza l-proporzjon tal-kollaġen tal-ġilda fil-ġrieden li qed jixjieħu [15]. Madankollu, peptidi tal-kollaġen minn sorsi differenti għandhom effetti differenti. L-ammont u l-istruttura ta 'peptidi attivi ħafna fid-demm wara l-amministrazzjoni orali ta' peptidi tal-kollaġen jiddependu fuq is-sors tal-kollaġen [10]. L-effett protettiv tal-peptide tal-kollaġen estratt mill-ġilda tat-tiġieġ kontra l-korriment tal-fibroblasti indotti mill-UVA kien superjuri għal dak tal-peptide tal-kollaġen estratt mill-ġilda tal-majjal, baqra jew tilapia, u l-effett tiegħu kien ekwivalenti għal tripeptide derivat mill-kollaġen (Gly-Pro -Hyp)[16].

It-twemmin reliġjuż u t-tħassib dwar il-mard (bħall-marda tal-baqra tal-ġenn) wasslu lin-nies biex gradwalment jaqilbu d-direzzjoni tal-iżvilupp tal-kollaġen u l-prodotti tiegħu minn mammiferi terrestri għal tjur u organiżmi tal-baħar|17I.Bħala l-prodott sekondarju ewlieni tal-ipproċessar tat-tjur, tiġieġ l-għadam huwa sors promettenti ta 'prodotti tal-kollaġen. Mhux biss inaqqas il-ħela ta 'riżorsi u t-tniġġis ambjentali iżda jippermetti wkoll l-użu effiċjenti ta' prodotti sekondarji. Għalhekk, f'dan l-istudju, użajna peptidi tal-kollaġen tal-għadam tat-tiġieġ bħala materja prima, b'ġrieden nude trattati b'D-galactose u UV biex jinduċu tixjiħ tal-ġilda, bħala l-mudell biex jevalwaw l-effett tal-amministrazzjoni orali tal-peptide tal-kollaġen fuq it-taffija tat-tixjiħ tal-ġilda f' ġrieden u jiddeterminaw il-mekkaniżmu rilevanti.

2. Materjali u Metodi

2.1.Materjali, Kimiċi, u Annimali

L-irziezet tat-tiġieġ ta 'l-Università Agrikola ta' Yunnan (Kunming, iċ-Ċina) ipprovdew it-tiġieġ minfuqa, li ġew separati, imnixxfa u mgħaffġa biex jiksbu l-ikla ta 'l-għadam tat-tiġieġ. Su-peroxide dismutase (SOD), catalase (CAT), u glutathione peroxidase(GSH-PX) kits inxtraw minn Soleibao Biotechnology Co., Ltd. (Beijing, China). Hydroxyproline (HYP), interleukin-1 (IL-1x), matrix metalloproteinase-1/3 (MMP{-1/3), tip I pro-collagen, u aċidu hyaluronic Il-kits ta' l-immunoassaġġ (ELISA) marbuta ma' l-enżimi (HA) inxtraw minn Nanjing Jiancheng Bioengineering Institute (Nanjing, iċ-Ċina). Ġrieden nisa bla pil BALB/C b'saħħithom (18±2g, sitt ġimgħat) inxtraw minn Nanijing Junke Bioengineering Corporation, Ltd.(Nanjing, iċ-Ċina) bin-numru tal-permess: SCXK(SU)2016-0010.estratt ta' cistanche tubulosaPepsin u papain inxtraw minn Aladdin Biochemical Technology Co., Ltd. (Shanghai, iċ-Ċina), u kimiċi oħra kienu ta 'grad analitiku. Il-ġrieden kollha ġew immaniġġjati skont ir-Regolamenti tal-Kura tal-Annimali tal-Laboratorju tal-Provinċja ta' Yunnan u approvati mill-Kumitat għall-Kura u l-Użu tal-Annimali tal-Università Agrikola ta' Yunnan (ID tal-approvazzjoni: YAUACUC01).

2.2. Preparazzjoni Collgen u Kompożizzjoni ta 'Amino Acid

L-estrazzjoni u l-kompożizzjoni tal-aċidu amminiku tal-kollaġen tal-għadam tat-tiġieġ segwew il-metodu deskritt minn Liuet al. [18]b'modifiki żgħar. It-trab tal-għadam tat-tiġieġ ġie mħawwad u mxarrba f'0.05 M NaOH, 10 fil-mija n-hexane, u 0.25 M soluzzjoni EDTA (pH7.5 ) fi proporzjon ta' 1/10 (m/o). F'kull pass, il-kampjun ġie ttrattat għal 36 siegħa, u s-soluzzjoni tat-tixrib ġiet mibdula kull 6 sigħat biex jintefħu t-trab tal-għadam, neħħi proteini mhux kollaġen, xaħam, u minerali mit-trab tal-għadam. Il-kampjun inħasel b'ilma pur għan-newtralità wara kull pass. L-ikla tal-għadam tat-tiġieġ ittrattat minn qabel tħallat b'aċidu aċetiku glaċjali 0.5 M li kien fih 0.1 fil-mija (w/v)pepsin fi proporzjon solidu għal likwidu ta' 1:10 (w/v) u kontinwament imħawwad u estratt f'4 gradi għal 48 h. Imbagħad ġie ffiltrat, u l-filtrat ġie ċentrifugat fi 15,000xg għal 15min at4 grad. Il-pH tas-supernatant ġie aġġustat għal 7.5-7.8 b'soluzzjoni ta' NaOH, u NaCl ġie miżjud ma' konċentrazzjoni finali ta' 1.5 M. Wara li t-taħlita nżammet mhux disturbata għal 12-il siegħa f'4 gradi għat-tmelliħ, il-kollaġen il-preċipitat ġie ċentrifugat f'15,000×g għal 15-il minuta f'4 grad, imbagħad maħlul b'0.5 M aċidu aċetiku, iddiżalizzat f'ilma pur, imnixxef bil-friża, u l-prodott lest kien kollaġen tal-għadam tat-tiġieġ.

Il-kompożizzjoni tal-aċidu amminiku tal-kollaġen tal-għadam tat-tiġieġ ġiet iddeterminata mill-analizzatur awtomatiku tal-aċidu amminiku Sykam S433D (Munich, il-Ġermanja). Ċertu ammont ta 'kampjun ta' kollaġen li għandu jiġi ttestjat ittieħed f'tubu issiġillat, miżjud ma '10 mL6 M HCl, u idrolvzed f'110C għal 24 siegħa. L-idrolizzat kien ikkonċentrat b'nfiħ tan-nitroġenu u maħlul mill-ġdid f'20 mL buffer ta 'aċidu ċitriku. Wara mikrofiltrazzjoni b'membrana mikroporuża ta '0.22 um, ittieħdet 20 μL idrolizzat għall-analiżi tal-ispettru tal-aċidu amminiku. Il-kontenut ta' aċidu amminiku fil-kampjun kien espress f'perċentwali.

2.3. Preparazzjoni u Distribuzzjoni tal-Piż Molekulari ta' Collagen Peptides(CPs)

Skont ir-riżultati tal-proċess ta 'ottimizzazzjoni preċedenti tagħna, is-CPs ġew ippreparati bl-użu ta' papain f'proporzjon ta 'enzima għal substrat ta' 1:4 0 (proporzjon tal-massa). Wara li aġġusta l-pH għal 7 u l-idroliżi enżimatika fi 63 grad għal 5 sigħat, l-enzima ġiet inattivata f'banju ta 'ilma jagħli għal 15-il minuta. L-idrolizzat ta 'l-enzima ġie dessalat u lajofilizzat, maħlul mill-ġdid f'soluzzjoni ta' 0.1 fil-mija ta 'aċidu formiku, u ċentrifugat biex jinkiseb is-supernatant. AQ Exactive HF Orbitrap High-Resolution Mass Spectrometer-QE-HF(Thermo Fisher, Waltham, MA, USA), mgħammra b'jonizzazzjoni elettrospray (ESI, intużat biex janalizza l-idrolizzat tal-kollaġen fil-mod ta 'skannjar sħiħ ta' 350-1800 m) /z, u r-riżultati ġew irkuprati u analizzati bl-użu tas-softwer Proteome Discoverer 2.1.

2.4.Test tal-Annimali

Ġrieden nisa bla pil BALB/C (n{{0}}) inżammu f'kamra taħt kundizzjonijiet ikkontrollati ta' temperatura (24±1 grad), umdità (6{0 ±5 fil-mija), u Ċiklu ta' 12-il siegħa jum-lejl għal ġimgħa. Huma ngħataw aċċess ad libitum għall-ikel u l-ilma. Wara ġimgħa ta 'adattament, il-ġrieden ġew maqsuma b'mod każwali fil-ħames gruppi li ġejjin (n=11 għal kull grupp):(i). Grupp normali (N): UV mhux espost; amministrazzjoni orali ta' 0.4 mL salina kuljum. (ii). Grupp mudell (M):UVespost flimkien ma 'D-galactose (0.2 mL); amministrazzjoni orali ta' 0.4 mL salina kuljum.

(i). Grupp ta' peptidi tal-kollaġen ta' doża baxxa (LCPs): UV espost flimkien ma' D-galactose (0.2 mL); orali

għoti ta' 0.4 mL CPs(doża: 200mg:kg-1 piż tal-ġisem) kuljum.

(iv). Grupp ta 'peptidi tal-kollaġen ta' doża medja (MCPs): UV espost flimkien ma 'D-galactose; orali

għoti ta' 0.4 mL CPs (doża: 500 mg·kg-1 piż tal-ġisem) kuljum.

(v). Grupp ta 'peptidi tal-kollaġen ta' doża għolja (HCPs): UVesposed flimkien ma 'D-galactose; amministrazzjoni orali

trazzjoni ta' 0.4 mL CPs (doża: 1000 mg kg-1 piż tal-ġisem) kuljum.

It-trattament tad-D-galactose sar permezz ta' injezzjoni taħt il-ġilda ta' 0.2 mL ta' 10 fil-mija ta' soluzzjoni ta' D-galactose fuq wara tal-għonq tal-ġurdien (doża: 1.0g/ kg-1piż tal-ġisem) kuljum. L-UVirradiation saret b'40 W UVA-340 LAMIP (O-panel, Cleveland, USA, wavelength tal-quċċata: 340 nm), id-distanza bejn il-lampa u d-dahar tal-ġrieden kienet 30 ċm (230 m J/cm -), u l-irradjazzjoni damet għal 30 min kuljum għal seba 'ġimgħat (49 jum). L-intensità tar-radjazzjoni kienet imkejla b'radjumetru UVA365-(Xinbao Keyi Electronic Technology Co., Ltd., Xi'an, China). Siegħa wara D-galactose u trattament UV, il-ġrieden ingħataw 0.4 mL ta 'CPs oralment kuljum. Wara l-aħħar irradjazzjoni, il-ġrieden ġew anestetizzati, jintiżnu, u t-tessuti ttieħdu kampjuni għal analiżi sussegwenti.

2.5. Umdità tal-ġilda, Indiċi vixxerali, u Żieda fil-Piż tal-Ġisem

L-umdità tal-ġilda ġiet iddeterminata mill-ISO 1442, u l-indiċi vixxerali ġie kkalkulat bl-użu tal-ekwazzjoni li ġejja: indiċi vixxerali (g/kg)= piż vixxerali/piż tal-ġisem.

2.6. Oxidatioe Stress, HA, u HYP Kontenut tal-ġilda

Kampjuni tal-ġilda ġew omoġenizzati b'disa 'darbiet l-ammont ta' salina normali (w/w) f'banju tas-silġ b'omoġenizzatur tat-tessuti (TGrinder OSE-Y30, Tiangen Biochemical Technology Co., Ltd., Beijing, China), u mbagħad ċentrifugati f'2000 ×g u 4 gradi għal 10 min. L-attivitajiet ta 'superoxide dismutase (SOD), catalase (CAT), u glutathione peroxidase (GSH-PX), u l-kontenut ta' aċidu hyaluronic (HA) u hydroxyproline (HYP) fis-supernatant miġbur ġew determinati skond il-metodu deskritt fil- istruzzjonijiet li jikkorrispondu mal-kits rispettivi.

2.7.Istoloġika tal-ġilda

Kampjuni tal-ġilda tal-ġurdien ġew iffissati f'soluzzjoni ta 'paraformaldehyde ta' 4 fil-mija għal 24 siegħa, deidratati, inkorporati fil-paraffin, u mqattgħin. Is-sezzjonijiet tal-ġilda ġew imtebba 'b'ematossilina u eosina (HE) u osservati b'mikroskopju ta' fluworexxenza 'l quddiem ECLIPSE CI-E (Nikon, Ġappun). Il-ħxuna tal-epidermide u d-dermis tal-ġilda ġiet evalwata bl-użu tas-softwer Halcon 13.0.1.1 (MVTec, Munich, il-Ġermanja).

2.8. Sekwenzar tat-Traskriptome tal-Ġilda

2.8.1. Estrazzjoni tal-RNA, Kostruzzjoni tal-Librerija, u Sekwenzar tat-Traskriptome....

L-RNA totali ġie estratt mill-ġilda tal-ġrieden bl-użu tal-RNeasy Mini Kit (Tiangen Bio-chemical Technology Co., Ltd., Beijing, iċ-Ċina) skont l-istruzzjonijiet tal-manifattur. Il-purità u l-konċentrazzjoni tal-RNA ġew iċċekkjati bl-użu tal-kaiaoK5500Spectrophoto-meter(Kaiao, Beijing, China); L-integrità tal-RNA ġiet evalwata bl-użu tal-RNA Nano 6000 Assay Kit u s-sistema Bioanalyzer 2100 (Agilent Technologies, Santa Clara, CA, USA).L-analiżi tas-sekwenza tat-traskrizzjoni ta 'kull kampjun saret minn Biolinker Technology Company Limited (Kunming, iċ-Ċina). Fil-qosor, ir-raggruppament tal-kampjuni kodifikati bl-indiċi twettqet fuq sistema ta 'ġenerazzjoni ta' clusters cBot bl-użu ta' HiSeq PE Cluster Kit v4-cBot-HS(llu-mina)skond l-istruzzjonijiet tal-manifattur. Wara l-ġenerazzjoni tal-cluster, il-libreriji ġew sekwenzati fuq pjattaforma Ilumina, u ġew iġġenerati 150 bp paired-end reads.

2.8.2. Analiżi tal-Bijoinformatika tad-Dejta tas-Sekwenzar tal-RNA

Gene Ontology(GO) u Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes (KEGG) en-richment analiżi tal-ġeni espressi b'mod differenzjali (DEGs) twettqet bl-użu tal-pakkett tal-analizzatur tal-cluster tal-lingwa R. Meta l-valur p kien inqas minn 0.05, l-oġġetti u l-mogħdijiet arrikkit minn GO u KEGG tqiesu li huma sinifikanti.

2.8.3. Reazzjoni Katina Reverse Transcriptase-Polymerase (qRT-PCR)

QRT-PCR sar kif deskritt qabel [19].

2.9. Wester Blot

Skont il-metodu deskritt minn Park et al. [20], saret analiżi Western blot (WB) biex tikkwantifika l-espressjoni ta 'proteini relatati mat-tixjiħ tal-ġilda fil-ġrieden. Il-konċentrazzjoni tal-proteina tal-lisat tal-ġilda f'kull grupp ta 'trattament ġiet ikkwantifikata bl-użu tal-kit BCA, separat b'SDS-PAGE (10 fil-mija acrylamide gel), trasferita għal membrana PVDF, imblukkata b'5 fil-mija ħalib xkumat, u inkubata b'ammont xieraq ta' primarju antikorpi (TGF-b1, c-Fos, c-Jun, Samd2/3, u -actin) f'4 gradi matul il-lejl. Wara l-ħasil bit-TBST, il-kampjuni tħalltu ma 'antikorpi sekondarji u inkubati f'temperatura tal-kamra għal siegħa.reviżjonijiet cistanche tubulosaIl-ChemiDoc XRS plus chemiluminescence gel imager (BioRAD, Hercules, CA, USA) intuża biex jinstabu proteini speċifiċi. Intuża softwer Image] biex jikkwantifika l-espressjoni tal-proteina fil-mira f'kull grupp ta 'trattament, u r-riżultati kienu rappreżentati mill-valuri tad-densità normalizzati għal proteina -actin.

2.10.ELISA

Il-livelli ta' espressjoni ta' MMP-1, MMP-3, pro-collagen tat-Tip I, u IL-1& fil-fluwidu tal-liżi tal-ġilda ġew determinati permezz ta' immunoassay marbut ma' enżimi. L-assaġġ sar skont l-istruzzjonijiet ipprovduti mal-kit.

2.11.Analiżi Statistiċi

Ir-riżultati kollha ġew analizzati bl-użu tas-softwer SPSS 21 (IBM Inc., Armonk, NY, USA) permezz ta' analiżi one-way tal-varjanza (ANOVA) u t-test tal-firxa multipla ta' Duncan, bil-livell ta' sinifikat stabbilit għal p<0.05. originpro="" 2017(originlab,="" northampton,="" ma,="" usa)was="" used="" to="" plot="" the="" data.="" all="" data="" were="" expressed="" as="" the="" mean="" ±="" standard="" deviation="">

3. Riżultati u Diskussjoni

3.1.Kompożizzjoni ta 'Amino Acid tal-Kallaġen

Il-kompożizzjoni tal-aċidu amminiku tal-kollaġen tal-għadam tat-tiġieġ tidher fit-Tabella 1.Gly kien l-aċidu amminiku ewlieni fil-kampjuni, li jammonta għal kważi terz (27.86 fil-mija) tal-aċidi amminiċi totali, u Hyp kien il- aċidu amminiku speċjali fil-kollaġen, li jammonta għal 9.83 fil-mija .Il-karatteristiċi ewlenin tal-molekuli tal-kollaġen kienu s-sekwenzi Gly-XY ripetuti u l-istruttura unika triple-helical komposta minn tliet ktajjen. Gly ammontaw għal madwar terz tal-aċidi amminiċi totali, X u Y kienu spiss proline u hydroxyproline, jew jistgħu jkunu xi residwu [21]. Il-kompożizzjoni tal-aċidu amminiku tal-kampjun kienet simili għal dik tal-kollaġen tal-għadam tat-tiġieġ irrappurtat fi studji preċedenti u kellha l-karatteristiċi tipiċi tal-collagen [22].

3.2. Distribuzzjoni tal-Piż Molekulari tas-CPs

Molecular weight distribution reflects the degree of collagen hydrolysis. The molecular weight of the CPs was mainly below 3000 Da (Figure 1), accounting for about 87.61%of all collagen hydrolysates, indicating that almost all of the CPs were small peptides. Many studies claim that collagen peptides with a lower molecular weight have better biological activity [23]. For example, Song et al. [24]. reported that lower molecular weight (200-1000 Da, 65%)silver carp skin collagen peptides repaired UV-induced aging skin in mice more effectively than similar peptides with a higher molecular weight(>1000 Da, 72 fil-mija). Madankollu, il-kumpanija Ġermaniża Gelita wriet permezz ta 'diversi studji kliniċi li l-effett tal-peptidi tal-kollaġen huwa ddeterminat prinċipalment mill-grad ta' tqabbil tiegħu mal-proprjetajiet tal-peptidi tal-kollaġen wara d-degradazzjoni tal-kollaġen uman, aktar milli l-piż molekulari tal-peptidi tal-kollaġen. Sabu li l-prodott VERISOL③ b'piż molekulari medju ta '2000 Da għandu l-aktar effett stimulanti fuq fibroblasts tal-ġilda, filwaqt li l-prodott FortigelTM b'piż molekulari medju ta' 3000 Da għandu effett speċjali fuq it-tiswija tal-qarquċa [25-27].

3.3. Effett ta 'CPs orali fuq it-taffija tat-tixjiħ tal-ġilda

3.3.1.Piż tal-Ġisem u Indiċi tal-Organi

L-indiċi tal-piż tal-ġisem u l-indiċi tal-organi huma importanti u jirriflettu l-istat tas-saħħa tal-ġrieden. Il-piż tal-ġrieden f'kull grupp żdied b'mod normali matul il-perjodu tat-test (Tabella 2). Iż-żieda fil-piż medju tal-grupp M kien inqas minn dak tal-grupp N, u dak tal-gruppi ta 'trattament CP kien ogħla minn dak tal-grupp M, li jissuġġerixxi li CPs ma kellhom l-ebda effetti sekondarji fuq il-ġrieden. F'rapporti preċedenti, id-doża ta 'ġrieden ittrattati bil-collagen peptide kienet l-aktar bejn 100-1000 mg/kg.bw·d, u d-doża sigura ta' peptidi tal-collagen tilapia laħqet 4.07 g/kg.bw·d [{{6} }]. Bl-istess mod, it-tkabbir ta 'ġrieden ta' età tal-ġilda wara gavage b'peptidi tal-kollaġen fuq skala tilapia (doża: 500 u 1000 mg / kg · bw · d) kien ukoll simili għar-riżultati tagħna [29]. Il-milsa għandha rwol importanti fl-immunità umorali u ċellulari, għalhekk, l-indiċi tal-milsa spiss jintuża biex jevalwa l-funzjoni tas-sistema immuni.cistanche UKThe liver index was used to evaluate the toxicity of the tested sample. In these tests, the liver and spleen indices in the M group were lower than those in the N group, and both recovered after treatment with CPs, but there was no significant difference across the treatment groups (p >0.05). Ir-riżultati kienu simili għal dawk ta 'studji preċedenti [30], li jindikaw li CPs huma sikuri u jistgħu jtejbu xi ftit l-immunità tal-ġrieden.

3.3.2.Kompożizzjoni tal-ġilda

It-trattament UV u D-galactose (grupp M) naqqas b'mod sinifikanti l-kontenut ta 'umdità, HA, u Hyp fil-ġilda, meta mqabbel ma' dawk tal-grupp N, bi 13.36 fil-mija, 24.08 fil-mija, u 15.83 fil-mija, rispettivament (p<0.05)(table 2).="" the="" contents="" of="" moisture,="" ha,="" and="" hyp="" in="" the="" skin="" were="" significantly="" higher="" in="" mice="" after="" the="" oral="" administration="" of="" cps="" compared="" to="" the="" contents="" of="" those="" in="" the="" mice="" of="" the="" m="" group=""><0.05). among="" the="" dose="" groups,="" the="" contents="" of="" the="" three="" skin="" components="" were="" significantly="" different="" between="" the="" lcp="" and="" hcp="" groups="" and="" were="" dependent="" on="" the="" dose="" of="" intake="" of="" cps.="" the="" hcp="" group="" had="" even="" higher="" contents="" than="" the="" n="" group,="" and="" ha="" and="" hyp="" were="" significantly="" different="" between="" the="" two="" groups="" (p=""><>

Tibdil fil-kontenut ta’ umdità tal-ġilda jikkawża t-tikmix u t-tnaqqis fil-ġilda u huma affettwati minn komponenti tal-matriċi bħal kollaġen tal-ġilda u HA[31]. Hydroxyproline huwa aċidu amminiku stabbli, rikk u speċjali fil-kollaġen, u l-kontenut tiegħu jista 'jirrifletti indirettament il-kontenut tal-kollaġen fil-ġilda, kif ukoll ix-xjuħija tal-ġilda. Barra minn hekk, HA, li hija espressa ħafna fl-ECM tal-ġilda, għandha rwol importanti. fil-kontroll tal-bilanċ tal-ilma tal-ġilda, pressjoni osmotika, żamma tal-umdità, u elastiċità bħala sistema ta 'ħażna tal-ilma u komponent strutturali tal-ġilda [32]. F'dan l-istudju, il-kontenut ta 'umdità, HYP u HA fil-ġilda żdied b'mod sinifikanti wara t-teħid ta' CP, li jista 'jkun relatat mal-promozzjoni tas-sinteżi tal-kollaġen u HA minn CPs. Barra minn hekk, iż-żieda fl-HYP u l-HA żiedet il-kontenut ta 'umdità.

3.3.3. Bidliet Istoloġiċi fil-ġilda

Il-bidliet istoloġiċi tal-ġilda ta 'wara tal-ġrieden wara seba' ġimgħat ta 'trattament kontinwu huma murija fil-Figura 2.Il-ġilda li qed tixjieħ tal-grupp M wriet il-karatteristiċi ta' wiċċ mhux maħdum, epidermide mħaxxna, dermis mraqqqa, u ċelloli skars, meta mqabbla mal-ġilda ta ' il-grupp N. Madankollu, il-kundizzjoni tal-ġilda li qed tixjieħ fil-ġrieden tjiebet wara l-amministrazzjoni orali ta 'CPs, u żammet struttura lixxa, ordnata u kompluta simili għal dik fil-ġrieden tal-grupp N. Għalhekk, id-dermis tal-ġilda kienet irqaq b'mod sinifikanti, u l-epidermide kienet eħxen b'mod sinifikanti fil-grupp M milli fil-grupp N (p<0.05). the="" change="" in="" skin="" dermis="" and="" epidermal="" thickness="" was="" significantly="" better="" after="" treatment="" with=""><0.05), and="" the="" effect="" was="" more="" obvious="" with="" the="" increase="" in="" the="" dose="" of="" cps="" (figure="" 2).the="" effect="" of="" oral="" cps="" on="" the="" histological="" structure="" of="" aging="" skin="" was="" similar="" to="" that="" reported="" previously="" [4,28,31].="" the="" increase="" in="" the="" thickness="" of="" the="" epidermis="" might="" be="" an="" adaptive="" change="" to="" protect="" the="" skin="" from="" external="" stimuli,loss="" of="" skin="" moisture,="" and="" uv="" damage,="" possibly="" due="" to="" the="" increase="" in="" uv-activated="" epidermal="" growth="" factor="" receptor="" (egfr)="" that="" induces="" keratinocyte="" proliferation="" and="" epidermal="" hyperplasia[4].="" however,="" the="" mechanism="" by="" which="" oral="" cps="" alleviate="" the="" increase="" in="" epidermal="" thickness="" remains="" unclear.="" the="" dermis="" imparts="" elasticity="" and="" strength="" to="" the="" skin,="" and="" the="" degradation="" of="" ecm="" and="" the="" reduction="" in="" the="" ability="" to="" repair="" fibroblasts="" are="" the="" main="" causes="" of="" dermal="" thinning="" in="" aging="" skin.="" dermal="" thickness="" increased="" after="" the="" treatment="" with="" cps,="" which="" might="" be="" due="" to="" the="" removal="" of="" ros="" from="" the="" skin="" and="" inhibition="" of="" the="" increase="" of="" mmps="" by="" cps.="" this,="" in="" turn,="" inhibited="" the="" degradation="" of="" skin="" collagen="" and="" elastin="" (figure="" 3),="" the="" entry="" of="" cps="" in="" the="" skin,="" and="" their="" participation="" in="" the="" synthesis="" of="" collagen="" and="" ha="" [6],="" which="" was="" confirmed="" by="" the="" increase="" in="" the="" content="" of="" hyp="" and="" ha="" in="" the="" skin="" (table="">

3.3.4. Antiossidant tal-ġilda u Livelli Infjammatorji

Id-determinazzjoni tal-attività tal-enzimi antiossidanti hija l-aktar metodu użat komunement biex jiġi evalwat il-livell antiossidant fil-ġisem [28]. Kif muri fil-Figura 3, l-attivitajiet tal-kontenut CAT, SOD, GSH-Px, u MDA fil-grupp M kienu sinifikament aktar baxxi minn dawk fil-grupp N (p<0.05). administering="" cps="" effectively="" inhibited="" the="" decrease="" of="" cat,="" sod,="" gsh-pxactivities,and="" the="" mda="" content="" in="" the="" skin="" of="" mice,="" compared="" to="" those="" in="" the="" mice="" skin="" of="" the="" m="" group,="" and="" was="" positively="" correlated="" with="" the="" dose="" of="" cps;="" there="" were="" significant="" differences="" among="" the="" different="" dose="" groups=""><0.05). when="" ros,="" accumulated="" by="" skin="" oxidative="" stress,="" exceed="" the="" antioxidant="" defense="" ability="" of="" the="" body,="" they="" destroy="" the="" ecm,="" which="" is="" the="" key="" cause="" of="" skin="" aging.="" ros="" can="" cause="" the="" oxidation="" of="" lipids="" and="" proteins="" in="" the="" skin,="" resulting="" in="" fibroblast="" degeneration="" and="" changes="" in="" the="" skin.="" ros="" activate="" the="" mapk="" signaling="" pathway="" and="" the="" ap-1="" protein="" to="" upregulate="" the="" expression="" of="" mmps="" and="" promote="" the="" degradation="" of="" matrixcollagen="" [21].="" although="" the="" antioxidant="" enzymes="" and="" antioxidants="" in="" the="" body="" can="" remove="" ros="" to="" protect="" the="" skin="" from="" damage,="" when="" the="" content="" of="" rosexceeds="" the="" defense="" (antioxidant)="" ability="" of="" the="" body="" or="" the="" body's="" defense="" ability="" declines,="" it="" causes="" oxidative="" stress="" and="" skin="">

Barra minn hekk, ir-rispons infjammatorju ċellulari kkawżat minn ROS jikkontribwixxi wkoll għat-tixjiħ tal-ġilda.Wara t-trattament UV u D-galactose (Mgroup), il-kontenut ta 'IL-lo fil-ġilda tal-ġrieden żdied b'mod sinifikanti meta mqabbel ma' dak fil-grupp N (Figura 3D ), li jindika li l-ġilda wriet rispons infjammatorju sinifikanti (p<0.05). the="" cps="" significantly="" reduced="" the="" content="" of="" il-1α="" in="" the="" skin="" in="" a="" dose-dependent="" manner,="" compared="" to="" that="" in="" the="" skin="" of="" mice="" in="" the="" m="" group.="" there="" was="" a="" significant="" difference="" between="" hcps="" and="" lcps=""><0.05),indicating that="" cps="" alleviated="" skin="" inflammation.="" the'o,="" produced="" by="" ultraviolet="" irradiation="" stimulated="" the="" expression="" of="" mmp-1="" in="" dermal="" fibroblasts="" through="" the="" secretion="" of="" il-1α="" and="" il-6,="" thereby="" disrupting="" the="" ecm="" [33].="" therefore,="" this="" study="" suggested="" that="" cps="" significantly="" increased="" the="" activity="" of="" skin="" antioxidant="" enzymes="" and="" inhibited="" inflammatory="" responses,="" which="" might="" be="" important="" in="" delaying="" skin="" aging="" in="">

3.4. Mekkaniżmu ta 'Azzjoni ta' CPs Dietetiċi fit-Taffija tat-Tixjiħ tal-Ġilda

3.4.1.Analiżi u Validazzjoni tad-Dejta RNA-Seq

Analysis techniques, such as PCA, HCA, gene GOenrichment, and KEGG pathway enrichment were used to analyze the transcriptome data. Based on the PCA analysis (Figure 4A) and hierarchical clustering analysis (heat map)of 4303 differential genes with average channel strength greater than 100, the relative expression levels of total DEGs between the two treatment groups are shown to provide an overview of the changes in gene expression(Figure 4B). The M group and the HCP group were significantly separated, and the expression patterns of most DEGs in the M and HCP groups were opposite, indicating that there were significant differences between the mouse skin after HCP treatment and the M group (Figure 4A,B). Pairwise comparisons showed that after feeding HCPs,4303 genes were significantly expressed in the mice skin, including 1790 upregulated genes and 2513 downregulated genes(Foldchange>2,p<0.05)(figure 4c).among="" the="" sixgenes="" associated="" with="" skin="" aging="" quantified="" by="" qrt-pcr,="" five="" genes="" (including="" fos,="" jun,="" cxcll,and="" egr1)were="" downregulated,="" and="" one="" gene="" was="" upregulated="" (figure="" 4d),="" which="" was="" consistent="" with="" the="" overall="" trend="" of="" transcriptomic="" data.="" the="" rna="" expression="" levels="" of="" fos,="" jun,="" and="" cxcll="" were="" significantly="" upregulated="" in="" damaged="" skin="" compared="" to="" that="" in="" intact="" skin="" [34],="" and="" inhibition="" of="" egr1="" expression="" alleviated="" skin="" inflammation="" [35].="" these="" results="" reflected="" the="" reliability="" of="" transcriptome="" sequencing="" data,="" and="" oral="" cps="" effectively="" alleviated="" skin="">

L-analiżi GOenrichment u l-analiżi tal-arrikkiment tad-database KEGG ipprovdew appoġġ għal aktar investigazzjoni tal-funzjonijiet bijoloġiċi tad-DEGs. L-analiżi tal-GO wriet li d-DEGs ġew arrikkit b'mod sinifikanti fi proċessi bijoloġiċi bħar-replikazzjoni tad-DNA, ir-regolazzjoni tal-emopoiesi, ir-regolazzjoni tal-attività tal-hydrolase, u l-produzzjoni taċ-ċitokini; f'komponenti taċ-ċelluli, li kienu jinkludu vakuole litiċi u liżosomi, li fihom il-kollaġen u ġeni oħra relatati ġew arrikkit b'mod sinifikanti; f'termini ta 'funzjoni molekulari, riċettur-ligand attiv-ity, attività cytokine, u ġeni oħra relatati kienu arrikkit b'mod sinifikanti (Figura 5). L-analiżi tal-arrikkiment KEGG tal-ewwel 20 mogħdija tas-sinjali mibdula b'mod sinifikanti minn DEGs tidher fil-Figura 5. Interazzjoni ċitokine-riċettur, liżosoma, interazzjoni newroattiva ligand-riċettur, ċiklu taċ-ċelluli, lupus erythematosus sistemiku, u mogħdija TGF (p<05) were="" closely="" related="" to="" aging,="" especially="" cytokine-receptor="" interactions,="" lysosomes,="" and="" tgf-βsignaling.="" an="" important="" feature="" of="" cellular="" senescence="" is="" the="" accumulation="" of="" damaged="" or-ganelles="" and="" protein="" aggregates.="" lysosomes="" play="" an="" important="" role="" in="" degrading="" damaged="" organelles="" and="" protein="" aggregates="" in="" senescent="" cells="" [36].="" cytokine-receptor="" interaction="" is="" the="" main="" pathway="" of="" enrichment="" in="" the="" skin="" after="" being="" affected="" by="" various="" factors="" such="" as="" inflammation="" [37],="" sulfur="" mustard="" exposure="" [38],="" and="" terahertz="" pulse="" [39].="" cytokines,="" as="" small="" molecular="" proteins="" synthesized="" and="" secreted="" by="" various="" tissue="" cells,="" maintain="" skin="" homeostasis="" by="" controlling="" the="" balance="" between="" keratinocyte="" proliferation,="" diferentiation,="" and="" apoptosis="" through="" complex="" interactions="" with="" growth="" factors[40].="" the="" tgf-β="" signaling="" pathway="" is="" also="" important="" for="" regulating="" skin="" aging[14].="" gene="" functional="" enrichment="" anal-ysis="" showed="" that="" tgf-β="" was="" highly="" expressed="" during="" cytokine-receptor="" interaction="" and="" in="" the="" tgf-β="" signaling="" pathway.="" tgf-β="" is="" a="" major="" pro-fibrotic="" cytokine="" that="" regulates="" cell="" differentiation="" and="" proliferation="" while="" inducing="" extracellular="" matrix="" protein="" synthesis="" [41].="" therefore,="" we="" verified="" the="" tgf-β="" signaling="" pathway="" and="" some="">

3.4.2. Verifika tal-Mekkaniżmu ta' Azzjoni tas-CPs fit-Taffija tat-Tixjiħ tal-Ġilda

Biex tivverifika r-rwol tal-passaġġ tas-sinjalar TGF u l-interazzjoni ċitokine-riċettur fit-taffija tat-tixjiħ tal-ġilda minn CPs orali, saret analiżi WB biex tivverifika t-TGF- u l-fattur ta 'traskrizzjoni Smad2/3 fil-mogħdija ta' sinjalazzjoni TGF, kif ukoll iċ-ċavetta fattur ta' traskrizzjoni AP-1 (c-Fos u c-Jun) li jirregola ċ-ċitokini. Il-kontenuti ta' MMP-1, MMP-3, Tip I pro-collagen, u IL-1 ġew determinati mill-ELISA. Ir-riżultati tal-analiżi WB wrew li l-espressjoni ta 'TGF- , Smad2, u Smad3 fil-grupp M kienet sinifikament aktar baxxa minn dik fil-grupp N(p<0.05). the="" expression="" levels="" of="" tgf-β="" and="" smad3="" were="" significantly="" higher="" in="" mice="" after="" the="" oral="" administration="" of="" cps="" compared="" to="" their="" levels="" in="" group="" m="" mice;="" additionally,="" smad2="" also="" increased=""><0.05), except="" for="" in="" the="" lcps="" in="" a="" dose-dependent="" manner(figure="" 6).="" on="" the="" contrary,="" the="" expression="" of="" c-fos="" and="" c-jun="" in="" the="" mgroup="" was="" significantly="" higher="" than="" that="" in="" the="" n="" group.="" the="" expression="" of="" c-fos="" and="" c-jun="" in="" the="" cp="" group="" was="" significantly="" lower="" than="" that="" in="" the="" m="" group,="" except="" for="" the="" expression="" of="" c-jun="" in="" the="" lcp="" group=""><0.05), and="" the="" change="" was="" dose-dependent.="" these="" results="" indicated="" that="" the="" tgf-β="" signaling="" pathway="" was="" activated="" and="" ap-1="" was="" inhibited="" after="" feeding="">

Il-proteina AP-1 hija kumpless dimeriku ta' proteini tal-familja Jun u Fos u hija regolatur importanti tal-infjammazzjoni tal-ġilda u l-espressjoni taċ-ċitokini. Ġeneralment, il-kumpless magħmul minn c-Jun u c-Fos juri l-ogħla attività traskrizzjoni fil-ġilda [41,A42]. ROS prodott fiċ-ċelloli tal-ġilda li qed jixjieħu l-ewwel jattiva l-proteina AP-1 u mbagħad jirregola ċitokini downstream (bħal IL-1 ), MMPs, u l-mogħdija ta’ sinjalazzjoni ta’ TGF permezz tat-traskrizzjoni u t-traduzzjoni, u b’hekk tiffaċilita t-tixjiħ tal-ġilda[43 ,44]. Ir-reazzjoni ta 'sinjalazzjoni TGF-/Smad hija mogħdija klassika ta' sinteżi tal-kollaġen, u l-fattur ta 'traskrizzjoni Smad huwa fil-qalba ta' din il-mogħdija tat-trasduzzjoni tas-sinjal. TGF- iqanqal il-fosforilazzjoni u l-attivazzjoni ta 'downstream Smad2 u Smad3 billi jorbot mar-riċettur, u b'hekk iżid is-sintesi ta' COLI [14].

Barra minn hekk, ir-riżultati tal-ELISA wrew li l-kontenut ta' MP-1,MMP-3, u IL-1a fil-ġilda tal-grupp M kien ogħla b'mod sinifikanti minn dak fil-grupp N, u il-kontenut ta' Typel pro-collagen kien ferm aktar baxx (p<0.05). however,="" the="" contents="" of="" mmp-1,mmp-3,and="" il-1α(figure="" 3d)in="" the="" skin="" after="" oral="" administration="" of="" cps="" were="" significantly="" lower="" than="" those="" in="" the="" m="" group=""><0.05); type="" i="" pro-collagen="" increased="" significantly,="" and="" all="" the="" changes="" were="" dose-dependent="" with="" cps="" (figure="" 7).="" mps="" are="" involved="" in="" the="" decomposition="" of="" skin="" collagen,="" il-1o="" shows="" the="" level="" of="" inflammation="" of="" the="" skin,="" and="" type="" i="" pro-collagen="" reflects="" the="" synthesis="" of="" skin="" collagen.="" accumulating="" evidence="" suggests="" that="" the="" role="" of="" the="" jun/ap-1="" protein="" pathway="" has="" also="" been="" proposed="" to="" regulate="" skin="" inflammation="" [40].="" the="" elisa="" results="" showed="" that="" the="" combined="" treatment="" of="" uv="" and="" d-galactose="" caused="" skin="" collagen="" degradation,="" decreased="" collagen="" synthesis,="" and="" caused="" skin="" inflammation,="" leading="" to="" skin="" aging.="" however,="" these="" changes="" were="" reversed="" after="" the="" oral="" administration="" of="">

Minbarra l-mogħdijiet ta 'hawn fuq, f'dan l-istudju, il-ġeni regolati 'l fuq wara t-trattament CP ġew arrikkit b'mod sinifikanti fil-mogħdija tal-lysosome, li jindika li t-trattament CP attivat il-lysosome fil-ġilda (Figura 5). Studji preċedenti jindikaw li l-liżosomi attivati ​​jikklerjaw l-aggregati u jgħollu l-attivazzjoni taċ-ċelloli staminali newrali senexxenti matul ix-xjuħija [45]. B'żieda ma 'dawn, il-funzjoni ta' żieda ta 'lysosome tista' tnaqqas il-konċentrazzjoni ta 'ROS intraċellulari biex tevita r-rqad taċ-ċelluli. Bl-istess mod, kwalunkwe tnaqqis fil-funzjoni liżosomali jista’ jtejjeb il-konċentrazzjoni intraċellulari ta’ ROS li fl-aħħar mill-aħħar jippromwovi r-rqad taċ-ċelluli [46] Għalkemm ma vverifikaniex b’mod sistematiku f’dan id-dokument, dawn ir-riżultati u rapporti preċedenti jimplikaw li l-attivazzjoni tal-funzjoni liżosomali tista’ tkun il-mod ewlieni għal CPs biex itaffu t-tixjiħ tal-ġilda, u se nkomplu nimmiraw li tivverifikaha.

Għalhekk, dan l-istudju wera li CPs tad-dieta jistgħu itaffu t-tixjiħ tal-ġilda indott mill-UV u D-galactose b'mod dipendenti fuq id-doża. Is-CPs itaffu t-tixjiħ tal-ġilda billi jbaxxu l-livell ta’ ossidazzjoni tal-ġilda, jinibixxu l-espressjoni ta’ fatturi ewlenin ta’ traskrizzjoni AP-1(c-Jun u c-Fos), jattivaw il-mogħdija ta’ sinjalazzjoni TGF-/Smad biex jippromwovu s-sinteżi tal-kollaġen, jinibixxu l-espressjoni ta’ MMP-1 u MMP{-3 (li jinibixxu d-degradazzjoni tal-kollaġen), u jinibixxu l-infjammazzjoni tal-ġilda biex itaffu t-tixjiħ tal-ġilda (Figura 8). Barra minn hekk, is-sejbiet tagħna fl-istudju attwali jissuġġerixxu wkoll li l-liżosoma attivat jista 'jkun mogħdija importanti għas-CPs biex jirregolaw it-tixjiħ tal-ġilda, li jistħoqqilha attenzjoni speċjali.

4. Konklużjonijiet

Fil-qosor, dan l-istudju kkonferma li s-supplimentazzjoni tad-dieta tal-peptidi tal-collagen tal-għadam tat-tiġieġ tista 'ttaffi b'mod sinifikanti t-tixjiħ tal-ġilda indott mir-radjazzjoni ultravjola u D-galactose permezz ta' mogħdijiet multipli, li jinkludu l-promozzjoni tas-sinteżi pro-collagen, l-inibizzjoni tad-degradazzjoni tal-kollaġen, it-titjib tal-livell antiossidant tal-ġilda, u jinibixxi l-infjammazzjoni; it-taffija kienet dipendenti mid-doża b'CPs. Investigazzjoni dettaljata wriet li CPs l-ewwel inaqqsu l-livell ta 'ossidazzjoni tal-ġilda, jinibixxu l-espressjoni tal-fattur ewlieni ta' traskrizzjoni AP-1(c-Jun u c-Fos), u mbagħad jattivaw il-mogħdija tas-sinjalar TGF-/Smad biex jippromwovu sintesi tal-kollaġen, jinibixxi l-espressjoni ta 'MMP-1 u MMP-3 biex jinibixxi d-degradazzjoni tal-kollaġen, u jinibixxi l-infjammazzjoni tal-ġilda biex ittaffi t-tixjiħ tal-ġilda fil-ġrieden. Barra minn hekk, l-attivazzjoni tal-liżosomi tista 'wkoll tkun il-mogħdija ewlenija għas-CPs biex itaffu t-tixjiħ tal-ġilda, li hija denja ta' riċerka u verifika ta 'segwitu. Dawn ir-riżultati jipprovdu bażi teoretika għall-implimentazzjoni ta 'peptidi tal-kollaġen biex itaffu t-tixjiħ tal-ġilda u jwessgħu l-ambitu għall-utilizzazzjoni komprensiva ta' prodotti sekondarji tal-annimali f'ikel funzjonali.

Dan l-artikolu huwa estratt minn Nutrients 2022, 14, 1622. https://doi.org/10.3390/nu14081622 https://www.mdpi.com/journal/nutrients