Studju Mekkanistiku Ta' Preskrizzjoni Veġetali Mongoljana Ibbażata fuq Cistanche fit-Trattament ta' Korriment Akut fil-Kliewi: Farmakoloġija tan-Netwerk, Docking Molekulari, U Approċċ ta' Validazzjoni In Vivo

2. Riżultati

2.1 Analiżi Farmakoloġija tan-Netwerk

2.1.1 Skrinjar ta' Komponenti Attivi u Miri ta' Preskrizzjoni Mongoljana bbażata fuq Cistanche u Kostruzzjoni ta' Netwerk ta' Komponent-Mira

Skont il-kriterji tal-iskrinjar, inġabru total ta’ 75 komponent attiv, inkluż 15 minnPiper longum, 8 minnĠewż tal-areka, 13 minnAlpinia officinarum, 32 minnKannella, 7 minnRummien, u 4 minnAmomum villosum. Fosthom,RummienuAlpinia officinarummaqsuma 3 komponenti, uAmomum villosumuAlpinia officinarumkomponent 1 kondiviż. Il-miri korrispondenti inkludew 97 għalPiper longum, 23 għalĠewż tal-areka, 188 għalAlpinia officinarum, 440 għalKannella, 181 għalRummien, u 78 għalAmomum villosum. Wara li tneħħew id-duplikati, inkisbu total ta' 682 mira unika. Dawn il-komponenti u l-miri ġew importati f'Cytoscape biex jiġġeneraw netwerk viżwali (Figura 1), fejn nodi akbar jindikaw grad ogħla ta 'ċentralità.

 

 

 

2.1.2 Ġbir ta' Miri AKI

Miri relatati mal-AKI inġabru mid-databases li ġejjin:

GeneCards: 11,304 mira

OMIM: 638 mira

TTD: 4 miri

DrugBank: 46 mira

PharmGKB: 91 mira

Wara li tneħħew id-duplikati, ġew identifikati total ta' 11,792 mira unika relatata mal-AKI. Inħoloq dijagramma Venn biex tara l-koinċidenza (Figura 2).

2.1.3 Skrinjar tal-Komponenti Ewlenin u l-Miri u l-Kostruzzjoni tan-Netwerk tal-PPI

Min-netwerk tal-komponent-mira fit-taqsima 2.1.1, ġew identifikati 7 komponenti attivi ewlenin tal-preskrizzjoni Mongoljana bbażata fuq Cistanche (ara Tabella 2). Dijagramma Venn wriet 613-il mira li jikkoinċidu bejn il-miri tal-preskrizzjoni u dawk relatati mal-AKI (Figura 3). Dawn iddaħħlu fid-database STRING biex jinbena netwerk PPI, li jidentifika 54 mira potenzjali u 6 miri ewlenin (Figura 4).

Preskrizzjoni Mongoljana bbażata fuq Cistanche għat-Titjib tas-Saħħa tal-Kliewi

Ikkuntattja issa

 

 

 

 

2.1.4 Analiżi ta' Arrikkiment GO u KEGG

L-analiżi tal-arrikkiment GO tat 3,943 annotazzjoni, inklużi 3,454 proċess bijoloġiku (BP), 194 komponenti ċellulari (CC), u 295 funzjoni molekulari (MF). L-ewwel 10 entrati minn –log10 (valur P) ġew viżwalizzati.

BP: Attività tal-fattur tat-traskrizzjoni li torbot id-DNA, regolazzjoni tal-ormoni sterojdi, divrenzjar taċ-ċelluli majelojdi

CC: kumpless tar-regolatur tat-traskrizzjoni, ċattra tal-membrana, vesikuli

MF: rabta tal-fattur tat-traskrizzjoni, rabta tal-fosfatażi, rabta taċ-ċitokini (Figura 5)

L-analiżi tal-mogħdija KEGG identifikat 212 mogħdija arrikkita, bl-aqwa 20 viżwalizzati. Dawn kienu jinkludu:

Mogħdija tas-sinjalar PI3K/Akt

IL-17 mogħdija tas-sinjalar

mogħdija tas-sinjalar tat-TNF

HIF-1 mogħdija tas-sinjalar (Figura 6)

Inbena netwerk tal-mogħdija tal-marda komposta-mira u l-mekkaniżmu multi-mogħdija tal-mediċina Mongoljana bbażata fuq Cistanche fit-trattament tal-AKI (Figura 7).

2.1.5 Riżultati ta' Docking Molekulari

Il-komponenti ewleninQuercetin, T-Muurolol, Aċidu Hexadecanoic, Alpha-Cariophyllene, Aċidu Linolejku, Cis-Cinnamaldehyde, uFenetil Aċetatkienu mgħaqqda mal-miri ewleninAKT1 (PDB: 1unq), TNF (PDB: 5uui), IL6 (PDB: 1alu), TP53 (PDB: 3d06), IL1B (PDB: 5r8q)EGFR (PDB: 8a27).

Enerġija li torbot taħt 0 kJ/mol tindika rabta potenzjali, filwaqt li < –7 kJ/mol tissuġġerixxi rabta qawwija. L-enerġiji kollha tad-docking kienu taħt –7 kJ/mol, li juru interazzjonijiet ta 'rbit qawwi. L-aqwa 6 interazzjonijiet ġew viżwalizzati (Figura 9):

IL1B–T-Muurolol

TP53–Cis-Cinnamaldehyde

TP53–Alpha-Cariophyllene

IL1B – Alpha-Cariophyllene

TNF-T-Muurolol

TP53-T-Muurolol

T-Muurolol u Alpha-Caryophyllene kellhom l-aktar interazzjonijiet b'saħħithom mal-miri, li jagħmluhom komponenti ewlenin probabbli fit-trattament ibbażat fuq Cistanche għal AKI.

2.2 Riżultati Sperimentali In Vivo

2.2.1 Kundizzjoni Ġenerali, Piż tal-Ġisem, u Indiċi tal-Kliewi tal-Ġrieden

Il-ġrieden fil-grupp mudell urew tnaqqis fil-konsum tal-ikel u l-ħruġ tal-awrina, letarġija, u żieda fir-rati respiratorji u tal-qalb. Dawn is-sintomi tjiebu fil-gruppi tat-trattament. Meta mqabbel mal-kontroll, il-ġrieden tal-grupp mudell kellhom piż tal-ġisem imnaqqas b'mod sinifikanti (P < 0.01, F=6.979), filwaqt li kemm il-gruppi b'doża baxxa kif ukoll b'doża għolja wrew rkupru sinifikanti tal-piż (P < 0.01, Figura 11). L-indiċi tal-kliewi kien elevat b'mod sinifikanti fil-grupp tal-mudell (P < 0.01, F=8.56) u naqas skond id-doża wara t-trattament (P < 0.05, Figura 12).

2.2.2 Effett tal-Preskrizzjoni Ibbażata fuq Cistanche fuq BUN, Scr, u UA

Il-ġrieden tal-grupp tal-mudell kellhom livelli elevati b'mod sinifikanti tan-nitroġenu tal-urea fid-demm (BUN), tal-kreatinina fis-serum (Scr), u tal-aċidu uriku (UA) meta mqabbla mal-kontroll (P < 0.01). Iż-żewġ gruppi ta' trattament naqqsu l-BUN (P < 0.01, F=12.46), u l-grupp ta’ doża għolja naqqas b’mod sinifikanti l-livelli ta’ Scr u UA (P < 0.01, F=12.8 u 13.77, rispettivament). UA kienet inqas b'mod sinifikanti fil-grupp ta' doża għolja milli fil-grupp ta' doża baxxa (P < 0.05, Figura 13).

2.2.3 Tibdil istopatoloġiku fit-tessut tal-kliewi (Tbajja HE)

It-tbajja’ HE wriet morfoloġija normali tal-kliewi fil-grupp ta’ kontroll. Il-grupp mudell esebixxa t-twaqqigħ taċ-ċelluli epiteljali tubulari, kkastjar, nefħa glomerulari u infiltrazzjoni infjammatorja. Iż-żewġ gruppi ta 'trattament urew ħsara patoloġika attenwata (Figura 14).

2.2.4 Effett fuq TNF- , IL-6, u IL-1

Dawn iċ-ċitokini infjammatorji huma miri ewlenin tat-trattament ibbażat fuq Cistanche. Il-livelli ta' TNF- , IL-6, u IL-1 kienu elevati b'mod sinifikanti fil-grupp tal-mudell (P < 0.01, Figura 15). Iż-żewġ gruppi ta 'trattament naqqsu b'mod sinifikanti dawn il-livelli, bil-grupp ta' doża għolja juri effetti aktar evidenti.

2.2.5 Effett fuq l-Espressjoni tal-Proteina tal-Pathway PI3K/Akt

Meta mqabbel mal-kontroll, il-livelli ta' espressjoni tal-proteini PI3K u p-Akt/Akt naqsu b'mod sinifikanti fil-grupp mudell (P < 0.05). It-trattament irrestawra b'mod sinifikanti dawn il-livelli b'mod dipendenti mid-doża (P < 0.01, Figura 16).

3. Diskussjoni

L-AKI għadha kwistjoni ewlenija tas-saħħa globali, b'aktar minn 2 miljun mewt kull sena. L-etjoloġija kumplessa tagħha, l-inċidenza għolja, u l-pronjosi ħażina jpoġġu piż kbir fuq il-pazjenti u s-sistemi tal-kura tas-saħħa. Bħalissa, m'hemm l-ebda mediċina effettiva disponibbli; trattament huwa fil-biċċa l-kbira ta 'appoġġ u għali.

Skont il-mediċina tradizzjonali Mongoljana, il-kliewi hija rregolata mill-Badaganprinċipju u jappartjeni għall-element "ilma", li jirregola l-fluwidi tal-ġisem. Eċċess ta ' Badagan iwassal għal umdità interna u disfunzjoni tal-kliewi. Il-Formula Mongoljana bbażata fuq Cistanche, kompost minnCistanche, Rummien, Kannella, Piper longum, Alpinia officinarum, uAmomum villosum, hija mfassla biex issaħħan il-kliewi u terġa 'ġġib il-bilanċ fost it-tliet għeruq (Badagan, Heyi, u Shira).

Kull ħaxixa tikkontribwixxi funzjonijiet speċifiċi:

Cistanche: tonifies yang tal-kliewi, ittejjeb iċ-ċirkolazzjoni tad-demm

Piper longum: ineħħi l-kesħa, isaħħaħ il-kostituzzjoni

Alpinia officinarum: issaħħan l-istonku, ittaffi l-uġigħ

Kannella: isaħħan il-yang tal-kliewi, isaħħaħ l-enerġija

Rummien: jaqta' l-għatx, itaffi l-uġigħ

Amomum villosum: astringes u jsaħħan il-milsa
Flimkien, ikeċċu l-kesħa tal-kliewi u jirrestawraw il-bilanċ, u b'hekk jittrattaw disturbi tal-kliewi.

Dan l-istudju użatfarmakoloġija tan-netwerkbiex tesplora b'mod sistematiku l-komposti attivi u l-mekkaniżmi tal-mediċina Mongoljana bbażata fuq Cistanche. Il-komponenti ewlenin identifikati-Quercetin, T-Muurolol, Aċidu Hexadecanoic, Alpha-Cariophyllene, Aċidu Linolejku, Cis-Cinnamaldehyde, uFenetil Aċetat-huma appoġġjati mil-letteratura:

Quercetininaqqas l-apoptożi u l-infjammazzjoni fl-AKI

T-Muurolol, minn żjut essenzjali, għandu proprjetajiet anti-infjammatorji

Aċidu Hexadecanoicjinibixxi l-proliferazzjoni taċ-ċelluli

Alpha-Cariophyllenegħandu effetti anti-infjammatorji, antimikrobiċi u kontra l-kanċer

Aċidu Linolejkujimmodula l-infjammazzjoni medjata mill-makrofagi

Cis-Cinnamaldehydejuri attività antiossidanti u antibatterika

Fenetil Aċetatjirregola s-sistema nervuża permezz tal-aromaterapija

L-analiżi tan-netwerk tal-PPI żvelat miri ewlenin:AKT1, TNF, IL6, TP53, IL1B, EGFR. Dawn huma involuti fl-infjammazzjoni, is-sopravivenza taċ-ċelluli, l-apoptożi, u r-regolamentazzjoni immuni.

L-arrikkiment GO u KEGG issuġġerixxa proċessi bijoloġiċi kumplessi u mogħdijiet ewlenin, speċjalmentPI3K/Akt, IL-17, TNF, uHIF-1. Il-mogħdija PI3K/Akt kienet l-aktar arrikkita u għandha rwol kritiku fil-metaboliżmu, it-tkabbir u l-infjammazzjoni. Il-modulazzjoni ta 'din il-mogħdija tista' ttaffi l-AKI billi tnaqqas l-apoptożi u l-infjammazzjoni.

L-irbit molekulari kkonferma rabta qawwija bejn il-komposti ewlenin u l-miri, li jappoġġja r-rilevanza tagħhom fit-trattament tal-AKI.

Esperimenti in vivovvalida s-sejbiet tal-farmakoloġija tan-netwerk:

Piż tal-ġisem u indiċi tal-kliewi mtejba

BUN, Scr, u UA mnaqqsa

Ħsara istopatoloġika mtaffija

Tnaqqis fil-livelli ta' TNF- , IL-6, IL-1

Espressjoni PI3K u p-Akt/Akt regolata 'l fuq

Mekkanikament,PI3Kjikkonverti PIP2 f'PIP3, li jattivaAkt, li jrażżan ir-rilaxx ta 'ċitokini infjammatorji. It-tnaqqis tal-infjammazzjoni jippromwovi t-tiswija epiteljali tubulari u jerġa 'jġib il-funzjoni renali.

 

Konklużjoni

Dan l-istudju juri liIl-mediċina Mongoljana bbażata fuq Cistanche tittratta l-AKIpermezz ta 'komposti attivi multipli, miri, u mogħdijiet-partikolarment permezz tal-Mogħdija tas-sinjalar PI3K/Akt, li jimmodula l-infjammazzjoni u jipproteġi l-funzjoni renali. Filwaqt li s-sejbiet tal-farmakoloġija tan-netwerk ġew validati f'mudelli ta 'annimali, futuristudji kliniċi in vitro u fuq skala kbirahuma meħtieġa biex jappoġġjaw l-użu kliniku u l-iżvilupp tal-mediċina tradizzjonali Mongoljana għall-AKI.