Jabuticaba (Myrciaria Jaboticaba) Qaxxar Bħala Sors Sostenibbli Ta' Anthocyanins U Ellagitannin Mogħtija minn Vesicles Fosfolipidi Għat-Taffija ta' Stress Ossidattiv f'Keratinoċiti Umani Parti 2

Jekk jogħġbok ikkuntattjaoscar.xiao@wecistanche.comgħal aktar informazzjoni

2.3. Studji in Vitro b'Keratinoċiti

2.3.1.Bijokompatibilità tal-Veżiċi

L-istudju li sar biex jevalwa l-proprjetajiet fiżikokimiċi tat-transfersomes, speċjalment dawk arrikkit bil-polimeri, ikkonferma l-istabbiltà akbar tagħhom u d-daqs ideali biex jiġu applikati fuq il-ġilda. Kwalunkwe differenza importanti ġiet skoperta bħala funzjoni tal-konċentrazzjonijiet tal-polimeru (1 jew 2 mg/mL). Sabiex jiġi vvalutat dan, il-vesikoli modifikati bl-ogħla konċentrazzjoni ta 'polimeru (2 mg/mL) intużaw biex iwettqu l-istudji sussegwenti. Il-bijokompatibilità tagħhom ġiet evalwata bl-użu ta 'keratinoċiti u dik tal-estratt f'dispersjoni milwiema ġiet evalwata wkoll u użata bħala paragun. Il-keratinoċiti ġew magħżula peress li huma l-aktar ċelluli rappreżentattivi tal-epidermide u ntużat setup saff b'saff peress li fid-divrenzjar speċjali tagħhom jiffurmaw l-ostaklu ewlieni tal-ġilda, li jirregola l-idratazzjoni tal-ġilda u jipprevjeni sustanzi eżoġeni milli jippenetraw fi u permezz tagħha. Keratinocytes ġew ittrattati għal 48 siegħa bl-estratt fi tixrid jew inkorporati fi ħdan il-vesikoli f'erba 'dilwizzjonijiet differenti, u wara tkejlet il-vijabbiltà taċ-ċelluli (Figura 3). Il-vijabbiltà taċ-ċelloli inkubati bl-estratt fi tixrid kienet ~ 88 fil-mija (p<0.05 versus="" the="" viability="" measured="" using="" extract="" loaded="" vesicles),="" indicating="" that="" the="" extract="" is="" not="" toxic.="" the="" viability="" of="" cells="" treated="" with="" extract-loaded="" transfersomes="" and="" hyaluronan-transfersomes="" at="" higher="" dilutions="" was~100%="" (p="">0.05 fost dan il-grupp). It-trattament b'HEcellulose-transfersomes u hyaluronan-transfersomes tejbet aktar il-vijabbiltà taċ-ċelluli. Il-formulazzjonijiet kollha kienu bijokompatibbli ħafna irrispettivament mill-polimeru u d-dilwizzjoni użati. Tabilħaqq, il-vijabbiltà taċ-ċelluli kienet ugwali għal jew ogħla minn 100 fil-mija, anke turi effett proliferattiv assoċjat mat-tagħbija tal-vesikuli.

Jekk jogħġbok ikklikkja hawn biex tkun taf aktar

2.3.2. Effett Protettiv ta' l-Estratt, f'Dispersjoni jew Imgħabba f'Veżiċi, kontra Ħsara Indotta f'Keratinoċiti mill-Perossidu ta' l-Idroġenu

Il-keratinoċiti ġew enfasizzati bil-perossidu tal-idroġenu u mbagħad ittrattati bl-estratt jew f'dispersjoni jew mgħobbija f'transfersomes. Il-vijabbiltà taċ-ċelluli kienet imkejla f'4 sigħat u dan intuża biex jiġi evalwat l-effett protettiv tal-formulazzjonijiet kontra l-istress ossidattiv (Figura 4). Il-kampjuni ġew dilwiti mal-mezz taċ-ċelluli biex jilħqu żewġ konċentrazzjonijiet differenti (4 u 0.4 ug/mL). L-istress tal-perossidu tal-idroġenu kkawża mortalità għolja taċ-ċelluli u naqqas il-vijabbiltà sa ~ 50 fil-mija (p<0.05 versus="" the="" viability="" of="" cells="" treated="" with="" the="" extract="" in="" dispersion="" or="" loaded="" in="" vesicles)[35].="" hydrogen="" peroxide="" is="" considered="" one="" of="" the="" most="" dangerous="" oxidative="" molecules="" among="" the="" different="" reactive="" oxygen="" species,="" capable="" of="" promoting="" apoptosis="" and="" cell="" death.="" the="" treatment="" of="" stressed="" cells="" with="" the="" aqueous="" dispersion="" of="" the="" extract="" was="" capable="" of="" reducing="" the="" damaging="" effect="" of="" hydrogen="" peroxide="" as="" the="" viability="" increased="" up=""><0.05 versus="" the="" viability="" of="" cells="" treated="" with="" the="" extract="" loaded="" in="" hecelluose-transfersomes="" at="" a="" higher="" dilution="" and="" hyaluronan-transfersomes),="" although="" the="" complete="" restoration="" of="" normal="" conditions="" was="" not="" achieved="" (figure="" 4).="" treatment="" with="" the="" extract-loaded="" transfersomes="" protected="" the="" cell="" to="" the="" same="" extent="" as="" the="" extract="" in="" dispersion="" (~82%,p="">0.05 kontra l-vijabbiltà taċ-ċelloli ttrattati b'dispersjoni). It-trattament bl-aħjar riżultat kien l-estratt mgħobbi b'HEcellulose-transfersomes (f'dilwizzjoni ogħla) u hyaluronan-transfersomes, li kisbu vijabbiltà ta '~ 104 fil-mija (p<0.05 versus="" the="" values="" of="" other="" treatments).="" the="" restored="" normal="" conditions="" and="" even="" slightly="" promoted="" cell="" proliferation,="" probably="" due="" to="" the="" synergic="" effect="" of="" the="" extract="" and="" the="" polymer-immobilized="" vesicles.="" the="" vesicle="" behavior="" was="" not="" affected="" by="" the="" dilution="" levels="" of="" the="">

2.3.3. Effetti tal-fejqan tal-feriti in vitro

L-assaġġ ta 'scratch in vitro sar b'monosaff ta' keratinoċiti sabiex tiġi vverifikata l-abbiltà tal-estratt f'dispersjoni milwiema jew inkorporat f'vesikli biex jistimula l-proliferazzjoni u l-migrazzjoni taċ-ċelloli. Veżikoli vojta ma ġewx ittestjati peress li fi studju preċedenti ma nstab l-ebda titjib fil-fejqan tal-feriti meta ntużaw hyalurosomes vojta [37]. L-għeluq tal-ferita mwettqa ġie mmonitorjat għal 48 siegħa (Figura 5) u l-perċentwal tal-għeluq ġie kkalkulat billi tkejlu ż-żoni tal-leżjoni (Figura 6). L-għeluq tal-ferita ta 'ċelluli mhux ittrattati seħħ bil-mod ħafna—13 fil-mija f'24 siegħa, 28 fil-mija f'36 siegħa, u 40 fil-mija biss fi 48 siegħa. It-trattament bl-estratt f'dispersjoni ta 'l-ilma tejbet xi ftit il-proċess u ġab l-għeluq fi 48 siegħa sa 50 fil-mija. It-trattament bil-vesicles mgħobbija bl-estratt fi 48 siegħa kiseb għeluq ta '90 fil-mija meta uża transfersomes u HEcellulose-transfersomes u madwar 100 fil-mija għeluq meta tuża hyaluronan-transfersomes. Kif nistgħu naraw, l-għeluq tal-ferita kien kważi komplut, li jikkonferma l-proprjetajiet ta 'restawr tal-hyaluronan-transfersomes mgħobbija bl-estratt.

Ir-riżultati ġenerali tagħna kkonfermaw il-bijokompatibilità għolja ta 'hyaluronan-transfersomes, li kienu wkoll l-aktar effettivi biex jistimulaw il-proliferazzjoni u l-migrazzjoni taċ-ċelloli tal-ġilda u jikkontrobattu l-ħsara indotta fil-ġilda minn stress ossidattiv.

3. Materjali u Metodi 3.1. Materjali

Lipoid S75 (li jikkonsisti minn ~ 70 fil-mija ta 'phosphatidylcholine tas-sojja, 9 fil-mija phosphatidylethanolamine, u 3 fil-mija lyso-phosphatidylcholine) inxtara minn Lipoid GmbH (Ludwigshafen, Ġermanja). Sodium hyaluronate b'piż molekulari baxx (200-400 kDa) u polidispersità ta '1.4 Mw/Mn, inxtrat minn DSM Nutritional Products AG Branch Pentapharm (l-Isvizzera). Tween 80, glycerol, radikali DPPH (2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl), ferric chloride hexahydrate, gallic, chlorogenic, and ascorbic acids, catechin, melħ tat-tetrazolium, 3-(4,{ {15}}dimethylthiazol-2-vl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide(MTT), quercetin, Neosporin, Folin-Ciocalteu's phenol reagent,2,4,6-tris( 2-pyridyl)-S-triazine(TPTZ) u pvrocatechol vjola nxtraw minn Sigma-Aldrich (Milan, l-Italja). Hexacyanoferrate tal-potassju (ⅢI) inkiseb minn Merck (Darmstadt, il-Ġermanja). Aċetat tas-sodju anidru, pentaidrat tas-sulfat tar-ram u diidrat tal-klorur tar-ram inkisbu minn VWR Chemi-cals BDH⑧ (Frankfurt, il-Ġermanja). Cyanidin 3-O-glucoside (Akbar minn jew ugwali għal 95 fil-mija) u delphinidin 3-O-glucoside (Akbar minn jew ugwali għal 95 fil-mija) inxtraw minn Extrasynthese (Lyon, Franza). L-aċidu aċetiku glaċjali u l-aċidu fosforiku (85 fil-mija) ġew akkwistati minn JTBaker (Mallinckrodt Baker Inc., Utrecht, l-Olanda). Ir-reaġenti u l-plastiks kollha għall-kultura taċ-ċelluli nxtraw minn Life Technologies Europe (Monza, l-Italja).

3.2. Jabuticaba Pees: Estrazzjoni, Karatterizzazzjoni Kimika, u Attività Antiossidanti

Frott Jabuticaba (Myrciaria jabuticaba (Vell.)O.Berg)cv. Sabara nħasad fi stadju ta' maturazzjoni misjura fil-belt ta' Araucaria, Paranå, il-Brażil (koordinati ġeografiċi∶25 grad 2924.7" S49 grad 2637.8"W) f'Diċembru 2018. Frott ġie maħsul u sanitizzat (NaOCl f'100 mg/L/15 min), mlaħalħa, u mgħaffġa manwalment. Il-qxur ġew imnixxfa fi 35 grad għal 50 siegħa, mitħun biex jilħqu 42 malja Tyler, u estratti f'estrattur tas-solvent aċċellerat (ASE-350, Dionex, Sunnyvale, CA, USA), li juża pressjoni ta '100 bar (98.7). atm) f'żewġ ċikli ta 'estrazzjoni f'50 grad. Ilma aċidifikat bl-aċidu ċitriku (pH 2.10) intuża bħala s-solvent u l-estrazzjonijiet ġew ripetuti erba 'darbiet. Imbagħad, estratti ġew iffiltrati bl-użu ta 'karta kwalitattiva u mnixxfa bil-friża taħt vakwu għal 120 siegħa. Wara dan, ir-rendiment tal-estrazzjoni, espress bħala perċentwal, ġie kkalkolat fir-rigward tal-materja prima użata fil-proċedura.

Cistanche jista 'jtejjeb l-immunità

Il-kontenut fenoliku totali (TPC, mg ta' aċidu galliku ekwivalenti għal kull 100 g, mg GAE/100 g)tanin kondensat totali (TCT, mg ta' catechin ekwivalenti għal kull 100 g, mg CE/100 g), flavonoids totali (TF, mg CE /100 g) u l-kontenut totali ta 'orto-difenoli (TOD, mg ta' aċidu chlorogenic ekwivalenti għal kull 100 g, mg CAE/100 g) ġew imkejla fi tliet kopji bl-użu ta 'spettrofotometrija UV-Vis skond il-proċeduri deskritti bis-sħiħ minn do Carmo et al. [20].

Anthocyanins (cyanidin {{0}}O-glucoside u delphinidin 3-O-glucoside) ġew kwantifikati permezz ta' kromatografija likwida ta' prestazzjoni għolja (HPLC) bl-użu ta' Agilent 110{{37} }(Agilent Technologies Inc., Espoo, Finlandja) apparat mgħammar b'detezzjoni ta' diode array (DAD). Is-separazzjoni saret bl-użu ta 'kolonna Gemini C18 (150 mm × 4.6 mm, 5 μm) b'eluzzjoni gradjent ta' acetonitrile aċidifikat b'aċidu formiku f'5 fil-mija. Il-kontenut totali ta' ellagitannin ġie ddeterminat wara l-idroliżi tal-aċidu, skont Mattila u Kumpulainen [38], u l-aċidu galliku ġie determinat bl-użu ta' kolonna Inertsil ODS-3 （150 mm ×4.0 mm , 3 μm）b'eluzzjoni gradjent ta 'acetonitrile f'50 mmol/L H3PO4 (pH 2.5). L-analiżi saru fi tliet kopji u r-riżultati ġew espressi bħala mg/100 g. Il-kromatografija likwida ta 'prestazzjoni ultra-għolja (UHPLC) flimkien ma' spettrometrija tal-massa b'riżoluzzjoni għolja (MS) ġiet applikata għall-karatterizzazzjoni ta 'ellagitannins u anthocyanins ewlenin. Spettrometru tal-massa Acquity UPLC-Xevo G2 QTOF (Waters, Milford, MA, USA) kien mgħammar b'kolonna Waters Acquity BEH C18 (1.7 μm, 2.1 mm × 150 mm) u s-separazzjoni saret bl-użu ta' gradjent ta' aċetonitrile f'ilma aċidifikat b'0.1 fil-mija aċidu formiku, skond Santos et al [39] Ir-rata tal-fluss kienet 0.55 mL / min, it-temperatura tal-forn tal-kolonna kienet 45 grad u l-volum ta 'injezzjoni kien 1.0 μL. Interface elettrospray (ESI) fin-negattiv u mod pożittiv intuża b'vultaġġi kapillari ta' -1 kV u biż-żieda ta' 0.5 kV, rispettivament. Argon intuża bħala l-gass tal-ħabta. L-analiżi tal-MS twettqu b'mudell ta' data taċ-ċentru ta' akkwist indipendenti mid-data (MSE) fi skan sħiħ m /z 50-1500 b'ħin ta 'skannjar ta' 0.2 s. Fil-funzjoni MSE, il-jonji prekursuri ta 'MS kienu frammentati bl-użu ta' enerġija ta 'ħabta għolja li żdiedet minn 25 għal 45 V.

L-attività anti-ossidanti tal-estratt ġiet analizzata fi tliet kopji bl-użu ta 'assaġġi differenti: attività ta' scavenging ta 'radikali ħielsa fir-rigward tar-radikali DPPH, qawwa antiossidant li jnaqqas ferriku (FRAP), kapaċità antiossidant li jnaqqas il-jone cupric (CUPRAC), qawwa li tnaqqas, u Cu2 flimkien mal-kapaċità kelanti. Ir-riżultati ġew espressi bħala mg GAE/100 g (qawwa li tnaqqas), mg ta’ aċidu askorbiku ekwivalenti għal kull 100 g, mg AAE/100 g (DPPH, FRAP, u CUPRAC), u mg ekwivalenti ta’ EDTA/100 g (kelazzjoni tal-metall), rispettivament . Il-metodi kollha użati ġew deskritti fil-fond qabel minn do Carmo et al. u Fidelis et al. [9,20].

3.3. Preparazzjoni tal-vesikuli

Transfersomes, transfersomes arrikkit hydroxyethylcellulose (HEcellulose-thansferomes), u transfersomes arrikkit hyaluronate tas-sodju (hyaluronan-transfersomes) ġew ippreparati billi tferrex fosfolipid (S75, 180 mg/mL), Tween 80 (20 mg/m), estratt (40 mg/mL) u polimeru (hydroxyethylcellulose jew sodium hyaluronate 1 u 2 mg/mL), meta jkun xieraq, fl-ilma u ħalli t-taħlitiet idrat għal ftit sigħat. Wara dan, id-dispersjonijiet ġew ivvibrati (4 ċikli 2 fuq 5 off amplitudni 15.0μ), stennija 5 min bejn kull ċiklu biex jippromwovu t-tkessiħ u jevitaw sħana żejda tal-kampjun. Sonicator Soniprep 150 ta 'prestazzjoni għolja (MSE Crowley, Londra, UK) intuża biex jissonika d-dispersjonijiet kollha sabiex tinkiseb sistema omoġenja b'daqs żgħir [15]. Din il-proċedura tevita t-telf tal-komponenti użati għall-preparazzjoni, li twassal għall-formazzjoni ta 'vesikoli performanti li kapaċi jinkorporaw ammonti għoljin tal-estratt.

3.4. Karatterizzazzjoni tal-Veżiċi

Id-dijametru medju u l-indiċi tal-polidispersità (kejl bla dimensjoni tal-wisa 'tad-distribuzzjoni tad-daqs) tal-vesikoli ġew imkejla permezz ta' spettroskopija ta 'korrelazzjoni tal-fotoni bl-użu ta' Zetasizer Ultra (Malvern Instrument, UK). L-istess tagħmir intuża biex ikejjel il-potenzjal zeta tal-vesicles billi titkejjel il-mobilità elettroforetika tal-partiċelli [40]. Il-kampjuni ġew dilwiti b'mod xieraq qabel il-kejl biex ikunu ottikament ċari u jiġi evitat it-tnaqqis ta 'dawl imxerred li jista' jiġi skopert. Biex jiġi evalwat l-ammont ta 'estratt attwalment inkorporat fil-vesikoli, id-dispersjonijiet ġew ippurifikati mill-estratt mhux inkorporat permezz tad-dijalisi. Dispersjonijiet tal-vesikuli (1 mL) ġew imdaħħla f'tubi tad-dijalisi tal-polikarbonat (Spectra/Pormembranes: 12-14 kDa MW cut-off, b'pori 3 nm; Spectrum Laboratories Inc., Rancho Dominguez, CA, USA) u mgħaddsa f'ilma distillat (2 L) f'25 grad għal 2 sigħat taħt tħawwad. L-ilma ġie aggornat wara siegħa, u b'hekk uża 4 L ta 'ilma biex solubilizza l-molekuli bijoattivi mhux inkorporati f'1 mL ta' dispersjoni tal-vesikuli (40 mg). L-ammont ta 'estratt fis-sospensjonijiet tal-vesiku qabel u wara d-dijalisi ġie kkwantifikat billi tkejjel l-attività antiossidant tagħhom bl-użu tal-assaġġ DPPH. L-effiċjenza tal-qbid tal-estratt ġewwa l-vesikuli ġiet ikkalkulata bħala proporzjon perċentwali bejn l-attività antiossidanti tal-kampjuni qabel u wara l-proċess ta 'purifikazzjoni [41-43].

3.5. Stabbiltà tal-Veżiċi fuq il-Ħażna

L-istabbiltà tal-vesikoli fid-dispersjoni ġiet evalwata billi ssorveljaw id-daqs medju tagħhom, l-indiċi tal-polidispersità, u t-tagħbija tal-wiċċ għal 90 jum filwaqt li żammew id-dispersjonijiet f'temperatura tal-kamra (25± 1 grad).

3.6.Kejl tal-Attività Antiossidanti tal-Kampjuni Bl-Użu tat-Test Kolorimetriku DPPH L-attività antiossidanti tal-estratt tal-qoxra ta 'jabuticaba mgħobbi f'vesikoli ġiet imkejla bħala funzjoni tal-kapaċità tagħha li tneħħi d-DPPH. Id-dispersjonijiet (10 μL) ġew dilwiti (1∶100) b'soluzzjoni metanolika ta 'DPPH (0.4 ug/mL). Il-kampjuni dilwiti ġew maħżuna f'temperatura tal-kamra u fid-dlam għal 30 min, imbagħad l-assorbiment tas-soluzzjonijiet tkejjel f'517 nm bl-użu ta 'spettrofotometru UV. L-attività antiossidanti tal-formulazzjonijiet ġiet ikkalkulata skont l-Ekwazzjoni (1): (1)Attività antiossidant fil-mija =[(ABSDPPH-ABSample)/ABSpPPH]×100

3.7.Bijokompatibilità u Effett Protettiv tal-Kampjuni kontra Stress Ossidattiv f'Keratinoċiti

Il-keratinoċiti umani immortalizzati (HaCaT) tkabbru bħala monosaffi f'37 grad, b'umdità ta' 10{0 fil-mija u 5 fil-mija CO2 bl-użu ta' glukożju għoli ta' Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM) supplimentat b'serum bovin fetali, peniċillina u streptomycin bħala mezz tat-tkabbir. Biex tiġi evalwata l-bijokompatibilità tal-formulazzjonijiet, iċ-ċelloli ġew miżrugħa fi 96-pjanċi tal-bir b'densità ta '7.5 × 10 ċelluli grad/bir. Wara 24 siegħa, iċ-ċelluli ġew ittrattati għal 48 siegħa b'estratt ta 'jabuticaba f'dispersjoni milwiema jew mgħobbija f'vesikoli dilwiti sew b'DMEM biex jilħqu konċentrazzjonijiet differenti tal-estratt (40, 4, 0.4, u 0.04 ug/mL). Fi tmiem l-inkubazzjoni, MTT [3(4,5-dimetil thiazolyl-2)-2, 5-diphenyltetrazolium bromide]（100 μL, 0.5 mg/mL konċentrazzjoni finali ） ġie miżjud ma 'kull bir, u, wara tliet sigħat, il-kristalli formazan iffurmati ġew maħlula b'dimethyl sulfoxide. L-assorbiment ta 'kull bir tkejjel f'570 nm bl-użu ta' microplate reader (Synergy 4 Reader, BioTek Instruments, AHSI SpA, Bernareggio, l-Italja). L-esperimenti kollha ġew ripetuti mill-inqas tliet darbiet, kull darba fi tliet kopji. Ir-riżultati huma murija bħala perċentwali tal-vijabbiltà taċ-ċelluli meta mqabbla ma 'ċelluli ta' kontroll mhux ittrattati (vijabbiltà ta '100 fil-mija).

L-effett protettiv in vitro tal-formulazzjonijiet kontra l-ħsara kkawżata minn stress ossidattiv ġie evalwat ukoll. Iċ-ċelloli ġew miżrugħa fi pjanċi ta' {{0}}bir b'densità ta' 7.5× 10 ċelluli/bir. Wara 24 siegħa ta' inkubazzjoni, iċ-ċelloli ġew enfasizzati bil-perossidu tal-idroġenu (30 fil-mija dilwit 1:40, 000 v/o b'PBS) u ttrattati bl-estratt f'dispersjoni milwiema jew mgħobbija f'vesikuli u dilwiti biex jilħqu żewġ konċentrazzjonijiet differenti. (4 u 0.4 ug/mL,). Ċelloli enfasizzati bil-perossidu idroġenu biss intużaw bħala kontroll negattiv, filwaqt li ċelloli mhux ittrattati ntużaw bħala kontroll pożittiv. Wara 4 sigħat ta 'inkubazzjoni, iċ-ċelloli ġew maħsula b'mezz frisk u l-vijabbiltà tagħhom ġiet iddeterminata mill-assaġġ MTT. Ir-riżultati huma rrappurtati bħala l-perċentwal ta 'ċelluli mhux ittrattati (vijabbiltà 100 fil-mija).

3.8. Proprjetajiet ta 'fejqan tal-feriti in vitro

L-abbiltà tal-estratt tal-qoxra ta 'jabuticaba mgħobbi f'vesikli biex jimmodifika l-leżjonijiet tal-ġilda u jippromwovi l-fejqan tagħhom ġiet evalwata billi tkejjel l-espansjoni taċ-ċelluli fuq leżjoni f'monosaff taċ-ċelluli. Iċ-ċelloli ġew ikkultivati ​​f'pjanċi b'6 bir sakemm intlaħaq monosaff komplut u omoġenju. Ġiet ġġenerata ferita lineari bl-użu ta 'ponta tal-pipetta tal-plastik sterili. Il-frammenti mferrxa taċ-ċelloli tneħħew permezz ta 'ħasil ġentili b'mezz frisk. Dispersjoni milwiema ta 'estratt jew vesicles mgħobbija bl-estratt ġew dilwiti b'mezz taċ-ċelluli sa 4 ug/mL ta' estratt u wżati biex jittrattaw il-monosaffi taċ-ċelluli feruti. Il-leżjonijiet taċ-ċelluli ġew osservati, u l-immaġini nqabdu f'24, 36, u 48 siegħa ta 'inkubazzjoni bl-użu ta' mikroskopju ottiku b'għan 10 ×. Ċelloli mhux ittrattati ntużaw bħala kontroll negattiv. Il-leżjonijiet taż-żona fl-immaġini maqbuda ġew imkejla permezz tas-softwer tal-immaġni J ta 'Java (http://rsb.info.nih.gov, aċċessat f'April-Ġunju 2021). L-għeluq tal-feriti ġie kkalkulat bl-użu tal-Ekwazzjoni (2):

fejn ao hija ż-żona midruba immedjatament wara l-grif, u a hija ż-żona feruta mkejla f'24, 36, u 48 siegħa [44].

3.9. Analiżi Statistika

Ir-riżultati huma espressi bħala l-medja ± devjazzjoni standard u s-sinifikat ġie ttestjat fil-livell ta' probabbiltà 0.05 (p). Għad-daqs, il-potenzjal zeta, il-viskożità, l-akkumulazzjoni tad-droga u ċ-ċitotossiċità, intużat analiżi one-way tal-varjanza (ANOVA) biex tissostanzja d-differenzi statistiċi bejn il-gruppi segwiti mit-test ta’ Tukey, filwaqt li t-test ta’ Student intuża għal tqabbil bejn żewġ kampjuni bl-użu ta’ XLStatistic għal Excel.

4. Konklużjonijiet

L-estratt tal-qoxra ta 'jabuticaba lajofilizzat ġie inkorporat fi transfersomes u transfersomes arrikkit polimeru (hydroxyethylcellulose u sodium hyaluronate) bil-għan li jistabbilizza l-estratt u jtejjeb l-effikaċja terapewtika tiegħu. Il-vesikoli miksuba kienu żgħar fid-daqs u mxerrda b'mod omoġenju. Iż-żieda taż-żewġ polimeri wasslet biss għall-formazzjoni ta 'vesikoli kemmxejn akbar mingħajr differenzi bejn il-konċentrazzjonijiet polimeriċi użati. Vesicles arrikkit bil-polimeru dehru li huma ideali għal amministrazzjoni topika u kienu kapaċi jinkorporaw l-estratt b'ħafna bijoattivi f'ammonti għoljin. B'mod partikolari, il-kombinazzjoni ta 'fosfolipid, Tween 80, u hyaluronate tas-sodju biex jinkisbu Hyaluronan-transfersomes, intgħażlet bħala l-aħjar formulazzjoni f'termini ta' stabbiltà u kapaċità li jinteraġixxu ma 'keratinoċiti, peress li dawn il-vesikuli biss setgħu jikkontrobattu b'mod effettiv il-ħsara. indott fiċ-ċelloli meta juża l-perossidu tal-idroġenu u biex jippromwovi l-fejqan tal-feriti fil-keratinoċiti umani. B'mod ġenerali, ir-riżultati tagħna ssuġġerew li l-hyaluronan-transfersomes jistgħu jirrappreżentaw sistema promettenti għat-trattament ta 'mard tal-ġilda jew feriti tal-ġilda konnessi ma' stress ossidattiv. Barra minn hekk, nuru għall-ewwel darba l-użu ta 'estratt tal-qoxra ta' jabuticaba f'sistema ta 'kunsinna dermatoloġika.

Kontribuzzjonijiet tal-Awtur:DG, MLM, MM: kunċettwali, analiżi formali, kurazzjoni tad-dejta, kitba, u reviżjoni; IC, MA, JH: analiżi u kitba formali. L-awturi kollha qraw u qablu mal-verżjoni ppubblikata tal-manuskritt.

Finanzjament:Din ir-riċerka ma rċeviet l-ebda finanzjament estern. Dikjarazzjoni tal-Bord ta' Reviżjoni Istituzzjonali: Mhux applikabbli. Dikjarazzjoni ta' Kunsens Informat: Mhux applikabbli.

Dikjarazzjoni tad-Disponibbiltà tad-Data:Id-dejta mhux ipproċessata hija disponibbli u tista' tintalab direttament lill-awturi.

Kunflitti ta' Interess:L-awturi ma jiddikjaraw l-ebda kunflitt ta' interess.

Disponibbiltà tal-Kampjun:Kampjuni tal-estratt tal-qoxra tal-jaboticaba huma disponibbli mill-awturi.

Dan l-artikolu huwa estratt minn Molecules 2021, 26, 6697. https://doi.org/10.3390/molecules26216697 https://www.mdpi.com/journal/molecules