Evalwazzjoni Potenzjal ta' Kontra l-Aging In Vitro Ta' Maclura Pomifera (Rafin.) Schneider 80 fil-mija Estratt tal-Metanol B'Analiżi Kwantitattiva HPTLC
Jun 12, 2023
ASTRATT
Għanijiet:Maclura pomifera (Rafin.) Schneider hija speċi mifruxa mad-dinja kollha, li hija wkoll ta' spiss ikkultivata għal skopijiet ornamentali. Studji preċedenti wrew li l-frott M. pomifera huma sinjuri f'isoflavonoids prenilati, juru attivitajiet bijoloġiċi notevoli, u għandhom benefiċċji probabbli, partikolarment, meta applikati topikament. Meta wieħed iqis li l-komposti fenoliċi huma sorsi essenzjali fl-iżvilupp ta 'prodotti kosmetiċi kontra t-tixjiħ, dan l-istudju investiga l-potenzjal kontra t-tixjiħ ta' M. pomifera 80 fil-mija estratt metanoliku (MPM) billi jevalwa l-attività li jinibixxi l-antiossidanti u l-enzimi li jiddegradaw il-matriċi extraċellulari.
Glycoside ta 'cistanche jista' wkoll iżid l-attività ta 'SOD fit-tessuti tal-qalb u tal-fwied, u jnaqqas b'mod sinifikanti l-kontenut ta' lipofuscin u MDA f'kull tessut, li jneħħi b'mod effettiv diversi radikali reattivi tal-ossiġnu (OH-, H₂O₂, eċċ.) u jipproteġi kontra ħsara fid-DNA kkawżata. minn OH-radikali. Cistanche phenylethanoid glycosides għandhom kapaċità qawwija ta 'scavenging ta' radikali ħielsa, kapaċità ta 'tnaqqis ogħla minn vitamina C, itejbu l-attività ta' SOD fis-sospensjoni ta 'l-isperma, inaqqsu l-kontenut ta' MDA, u għandhom ċertu effett protettiv fuq il-funzjoni tal-membrana ta 'l-isperma. Cistanche polysaccharides jistgħu jtejbu l-attività ta 'SOD u GSH-Px fl-eritroċiti u tessuti tal-pulmun ta' ġrieden senescent sperimentali kkawżati minn D-galactose, kif ukoll inaqqsu l-kontenut ta 'MDA u kollaġen fil-pulmun u fil-plażma, u jżidu l-kontenut ta' elastin, għandhom effett tajjeb għat-tħaffir fuq DPPH, itawwal iż-żmien ta 'ipoksja fil-ġrieden senescent, itejjeb l-attività ta' SOD fis-serum, u jdewwem id-deġenerazzjoni fiżjoloġika tal-pulmun fi ġrieden senescent b'mod sperimentali B'deġenerazzjoni morfoloġika ċellulari, esperimenti wrew li Cistanche għandu l-abbiltà antiossidant tajba u għandu l-potenzjal li jkun mediċina biex jipprevjeni u jikkura mard tal-ġilda li qed tixjieħ. Fl-istess ħin, echinacoside f'Cistanche għandu kapaċità sinifikanti li jneħħi r-radikali ħielsa DPPH u għandu l-abbiltà li jneħħi speċijiet ta 'ossiġnu reattiv u jipprevjeni d-degradazzjoni tal-kollaġen indotta minn radikali ħielsa, u għandu wkoll effett tajjeb ta' tiswija fuq il-ħsara ta 'anjoni radikali ħielsa tat-timina.

Ikklikkja fuq is-Suppliment Cistanche Tubulosa
【Għal aktar informazzjoni:george.deng@wecistanche.com / WhatApp:86 13632399501】
Materjali u metodi:Għal dan l-istudju, ġie evalwat il-potenzjal inibitorju ta '80 fil-mija MPM kontra enzimi differenti assoċjati mal-proċess tat-tixjiħ. Minħabba r-rwol inekwivoku tal-istress ossidattiv fit-tixjiħ, ġew impjegati wkoll testijiet antiossidanti in vitro. Barra minn hekk, osajin ġie ddeterminat bħala l-isoflavonoid bijoattiv ewlieni tal-kampjun permezz ta 'analiżi ta' kromatografija ta 'saff irqiq ta' prestazzjoni għolja.
Riżultati:Ir-riżultati tal-assaġġi antiossidanti mekkanikament differenti wrew il-potenzjal antiossidant sinifikanti tal-estratt. Il-potenzjal ta 'inibizzjoni tal-MPM kontra l-enzimi hyaluronidase, collagenase, u elastase, li huma marbuta direttament mal-aċċelerazzjoni tal-proċess tat-tixjiħ, ġie investigat u r-riżultati wrew li l-MPM inibixxa l-enzimi ta' hawn fuq b'mod espliċitu. MPM kellu kontenut uniku fenoliku u flavonoid; 113.92 ± 2.26 mg aċidu galliku ekwivalenti/g u 66.41 ± 0.74 mg QE/g, rispettivament. Meta tqiesu l-analiżi tal-kapaċità antiossidanti totali, huwa possibbli li jissuġġerixxi li l-MPM huwa aġent promettenti kontra t-tixjiħ.
Konklużjoni:Bħala riżultat, dan l-istudju jiżvela li estratti ta 'frott ta' M. pomifera għandhom potenzjal sinifikanti kontra t-tixjiħ u jistgħu jintużaw għal dan il-għan.
Kliem ewlieni:Maclura pomifera, anti-aging, antiossidanti, HPTLC, osajin
INTRODUZZJONI
Bl-istess mod, l-organi kollha, inkluża l-ġilda tal-bniedem jgħaddu minn diversi bidliet fiżjoloġiċi ma’ l-età avvanzata. ) radjazzjoni, tossini kimiċi, u tipjip.1,2 Id-degradazzjoni tal-istruttura vaskulari u glandulari, it-telf tat-tessut fibruż, u t-tnaqqis fir-riġenerazzjoni taċ-ċelluli huma fatturi fundamentali tat-tixjiħ,3 li jwasslu għal żieda fid-deġenerazzjoni tat-tessuti, it-tikmix, u t-tnaqqis tal-matriċi extraċellulari (ECM). ).4
Bħala l-akbar organu, il-ġilda għandha diversi rwoli bħall-protezzjoni, ir-regolazzjoni tat-temperatura tal-ġisem, u l-iskoperta tas-sensi.5 Il-ġilda tikkonsisti mill-epidermide, id-dermis u t-tessut taħt il-ġilda u hija l-ewwel barriera bejn il-ġisem tal-bniedem u l-parti ta 'barra. ambjent.6,7 L-ECM hija l-akbar unità tad-dermis u tappoġġja t-tkabbir u l-elastiċità billi tippreżenta scaffold strutturali.8 Collagen, elastin, u fibronectin, li huma ffurmati minn fibroblasti dermali, jikkostitwixxu ECM u huma mdewba ma proteoglycans.5 Collagen huwa proteina bażika li tinkludi madwar 25-35 fil-mija tal-kontenut kollu ta’ proteina fil-ġisem u tinsab fl-ispazju extraċellulari ta’ diversi tipi ta’ tessuti konnettivi tal-annimali.3 Waħda mill-kawżi ewlenin tat-tixjiħ tal-ġilda u l-formazzjoni tat-tikmix hija l-alterazzjoni tal-kollaġen struttura.1 Elastin hija proteina, li tagħti elastiċità fiżjoloġika unika lill-ġilda u hija preżenti f'diversi tessuti konnettivi.6 L-idratazzjoni tal-ġilda, u ż-żamma tal-ġilda lixxa, niedja u lubrikata huma fatturi importanti li jipprevjenu t-tixjiħ tal-ġilda, u maġġuri glycosaminoglycan (GAG), aċidu hyaluronic, għandu rwol vitali f'dawn l-attivitajiet.8 Dawn il-kostitwenti pivotali huma degradati minn enzimi hyaluronidase, collagenase, u elastase, u għalhekk, iwasslu għal aċċelerazzjoni tat-tixjiħ tal-ġilda. Barra minn hekk, l-espożizzjoni għal mikro-organiżmi, tniġġis, radjazzjoni jonizzanti, kimiċi, u tossini twassal għall-formazzjoni ta 'speċi ta' ossiġnu reattiv (ROS) u huwa konsegwenzi ta 'ħsara jaċċelleraw it-tixjiħ tal-ġilda.9 ROS jista' jibda mogħdijiet molekulari kumplessi u bħala riżultat, collagenase, elastase , u l-attività tal-hyaluronidase tista 'tiżdied, li twassal għal tkissir tal-ECM li jista' jinduna u modifiki tan-nisġa tal-ġilda.10 Għar-raġunijiet imsemmija, aġenti naturali ġodda, li jnaqqsu l-formazzjoni ta 'ROS u jinibixxu proteases degradanti tal-ECM, jistgħu jdewmu l-proċess tat-tixjiħ tal-ġilda.11
Maclura pomifera (Rafin.) Schneider jappartjeni għal Moraceae jew il-familja ċawsli u hija magħrufa wkoll bħala s-siġra tal-larinġ osage, ikkultivata kważi madwar id-dinja.12 M. pomifera għandha diversi attivitajiet bijoloġiċi bħal antibatteriċi, antifungali, antivirali, ċitotossiċi, antitumorali, estroġeniċi, u antimalarial13 minħabba l-isoflavoni prenilati tiegħu, jiġifieri osajin u pomiferin, li huma meqjusa bħala metaboliti ewlenin tal-frott.14 Fil-produzzjoni kożmetika kontra t-tixjiħ, il-komposti fenoliċi huma sorsi naturali sinifikanti. Għalhekk, hemm interess dejjem jikber fl-istudju ta 'pjanti sinjuri f'kompost fenoliku bħal M. pomifera għal attivitajiet bħal dawn. Studji preċedenti sabu li l-isoflavoni ta 'Maclura iżidu l-livelli ta' espressjoni ta 'collagen, elastin, u fibrillin komparabbli jew superjuri għal konċentrazzjonijiet ekwivalenti ta' retinol. Għalhekk, jista' jiġi preżunt li Maclura isoflavones huma stimulanti potenti tal-proteini ECM.15 Meta wieħed iqis din id-dejta, dan l-istudju għandu l-għan li jinvestiga l-potenzjal kontra t-tixjiħ ta 'M. pomifera 80 fil-mija estratt metanoliku (MPM) billi jesplora l-potenzjal tiegħu għall-bijoattività antiossidanti u jinibixxi. Enżimi degradanti tal-ECM. Barra minn hekk, analiżi kwantitattiva tal-komponent bijoattiv ewlieni tal-estratt, osajin tkejjel permezz ta 'kromatografija ta' saff irqiq ta 'prestazzjoni għolja (HPTLC), u twettqu kontenut fenoliku totali u analiżi tal-kontenut totali ta' flavonoid għal fehim aktar preċiż tal-profil fenoliku. Ir-riżultati juru li M. pomifera jista 'jkun sors prezzjuż ta' prodotti kontra t-tixjiħ.
MATERJALI U METODI
Kimiċi
Sigma Chemical Co. (St. Louis, MO, USA) ipprovdiet l-enzimi, il-kimiċi, u r-referenzi kollha użati fit-testijiet. Il-kwalità tas-sustanzi kimiċi kollha kienet ta 'grad analitiku.

Materjal tal-pjanti
Il-frott ta 'M. pomifera inġabar minn Uşak, it-Türkiye, f'Mejju 2020. Dr Hilal Bardakcı wettaq il-proċedura ta' identifikazzjoni botanika tal-kampjuni tal-pjanti. Kampjun ta 'vawċer tal-pjanta ġie depożitat fl-Università ta' Acıbadem, Herbarium tal-Fakultà tal-Farmaċija (ACUPH 00002).
Preparazzjoni ta' estratti
Il-frott kien separat f'biċċiet żgħar u mgħoddi minn blender. Il-frott (6.45 kg) ġew maċerati b'3125 mL ta '80 fil-mija metanol (MeOH) bl-użu ta' apparat li tħawwad għal tlett ijiem f'temperatura tal-kamra f'post mudlam. Il-maċerat ġie ffiltrat u din il-proċedura ġiet ripetuta darbtejn. Il-filtrati miksuba nġabru flimkien u, imbagħad, il-metanol ġie evaporat f'evaporatur li jdur. L-estratt metanoliku mhux raffinat kien lajofilizzat (ir-rendiment kien 204.37 g, 3.16 fil-mija) u maħżun fi grad -20 (MPM).
Proċedura ta' kwantifikazzjoni tal-komposti bijoattivi ewlenin mill-HPTLC
Il-kimiċi u r-reaġenti kollha użati kienu ta' grad analitiku. Il-kloroform (CHCl3) u l-aċetat etiliku (EtOAc) inxtraw minn Sigma-Aldrich. Standard disponibbli kummerċjalment ta' osajin inxtara mingħand Sigma-Aldrich (SMB {{10}}0092). L-analiżi HPTLC twettqu fuq pjanċi tal-ġel tas-silika HPTLC 60 F254 tal-ħġieġ ta '20 cm × 10 cm (Merck, Darmstadt, il-Ġermanja). Il-kontenut ta' Osajin f'MPM kien determinat minn sistema analitika CAMAG HPTLC. Il-fażi mobbli użata fl-istudju attwali kienet deskritta qabel minn Bozkurt et al.16 matul l-iżolament ta 'prinċipji attivi ta' M. pomifera. 10 mg/mL estratt MeOH intuża bħala s-soluzzjoni tat-test tal-analiżi. Soluzzjoni stokk standard (0.5 mg/ mL) ta 'osajin ġiet ippreparata bl-użu ta' 2 mL ta 'aċetun. Soluzzjoni ta' ħidma b'konċentrazzjoni ta' 50 µg/mL ta' kompost standard ġiet ippreparata permezz ta' dilwizzjoni bl-aċetun mis-soluzzjoni stokk. Kull kampjun ġie ffiltrat minn filtru ta' siringa ta' 0.45 µm. 10 μL tal-estratt flimkien ma 'mill-inqas ħames konċentrazzjonijiet differenti tas-soluzzjoni standard (3.3-4.7 μL) ġew applikati fil-forma ta' faxex ta 'tul ta' 8 mm fuq pjanċi HPTLC tal-ħġieġ tal-ġel tas-silika 60 F254 b'CAMAG Automatic TLC Sampler IV. L-iżviluppi saru f'CAMAG Automatic Developing Chamber-2 (ADC- 2) u l-fażi mobbli kienet CHCl3: EtOAc [8:2 (v/v)]. Il-kamra kienet saturata għal 10 min u l-pjanċa kienet prekundizzjonata għal 5 min qabel l-iżvilupp. L-umdità kienet ikkontrollata minn ADC-2 bl-użu ta 'MgCl2 (33 fil-mija RH) għal 10 min. L-evalwazzjoni densitometrika twettqet bl-użu ta 'CAMAG TLC Scanner IV fil-modalità fluworexxenza. Id-dimensjoni tal-qasma nżammet f'5 × 0.2 mm, mikro, u l-veloċità tal-iskannjar ġiet issettjata għal 20 mm/s. Kontenuti standard inkisbu billi tqabbel iż-żona taħt il-kurvi karatteristiċi operattivi tar-riċevitur (AUCs) mal-kurva tal-kalibrazzjoni tal-istandards f'280 nm. Il-preżenza ta 'standards fl-estratt kienet żgurata bit-tqabbil taż-żewġ fatturi ta' ritenzjoni (Rf) u spettri UV li jkopru ta 'kull estratt u standard. Il-kwantità ta 'osajin ġiet iddeterminata billi tqabbel l-intensità tad-dawl rifless b'mod diffuż mill-estratt u l-frazzjonijiet mal-kompost standard.
Il-kontenut ta 'osajin fl-estratt tal-pjanti mhux raffinat kien imkejjel bl-użu ta' densitometrija HPTLC. Il-valur Rf tal-istandard osajin instab li kien 0.556. L-okkorrenza ta 'osajin fil-kampjuni tat-test ġiet ivverifikata permezz ta' tqabbil tal-valuri Rf tagħhom u li jikkoinċidu l-ispettri UV tagħhom (Figura 1). Il-kwantifikazzjoni ngħatat billi tqabbel l-AUCs tal-kampjuni mal-kurva tal-kalibrazzjoni miksuba bl-użu tal-osajin kompost standard. Il-funzjoni tal-kalibrazzjoni kienet y=2.268*10-8x. Il-koeffiċjent ta' korrelazzjoni (R) u l-koeffiċjent tal-varjazzjoni tal-funzjoni tal-kalibrazzjoni kienu 0.998 fil-mija u 1.06 fil-mija, rispettivament. L-analiżi HPTLC wriet li l-MPM fih 0.22 fil-mija (w/w) osajin. Ir-riżultati tal-istudju HPTLC huma mogħtija fit-Tabella 1.
Assaġġ tal-profil fenoliku
Assaġġ tal-kontenut fenoliku totali
L-assaġġ sar biex jevalwa l-kontenut fenoliku totali tal-kampjuni bil-metodu Folin-Ciocalteu, kif użat qabel minn Kurt-Celep et al. 17 20 μL ta 'soluzzjonijiet ta' kampjuni dilwiti friski tħalltu ma '75 μL Na2 CO3 (20 fil-mija). ), u 100 μL FCR (reaġent Folin-Ciocalteu) dilwit b'H2 O (1:9). Wara l-inkubazzjoni għal 30 minuta f'45 grad, l-assorbiment tat-taħlitiet inqrat b'mod spettrofotometriku f'765 nm. Ir-riżultati ġew espressi bħala mg ekwivalenti ta 'aċidu galliku (GAE) għal kull g ta' estratt.
Assaġġ tal-kontenut totali ta' flavonojdi
Il-kejl tal-kontenut totali ta 'flavonoid tal-frazzjonijiet sar bħala metodu rrappurtat qabel minn Bardakci et al.18 B'mod konċiż, 1 M CH3 COONa ppreparat frisk u 10 fil-mija AlCl3 tħalltu mal-kampjuni. Imbagħad, 30 min ta 'inkubazzjoni tat-taħlitiet saru f'temperatura tal-kamra u fid-dlam. Wara l-proċess ta 'inkubazzjoni, l-assorbanza ġiet ikkalkulata f'415 nm. Ir-riżultati ġew affermati bħala mg ekwivalenti ta' quercetin (QE) f'1 g ta' kampjun.
Determinazzjoni ta' attività antiossidanti in vitro
2,2-Diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH) test ta' l-attività ta' tneħħija radikali
Biex tiddetermina l-attività ta 'scavenging radikali ta' DPPH, saret taħlita ta 'soluzzjonijiet ta' kampjuni dilwiti friski (diversi konċentrazzjonijiet ippreparati minn soluzzjoni ta 'ħażna ta' 1 mg/mL) u soluzzjoni metanolika DPPH (100 mM). Wara l-intervall ta 'inkubazzjoni f'temperatura tal-kamra għal 45 min, l-assorbiment inqrat f'517 nm. Butylated hydroxytoluene (BHT) intuża bħala kompost ta 'referenza biex tinkiseb kurva ta' kalibrazzjoni. Il-valuri IC50 tar-riżultati ġew iddikjarati bħala µg/mL.19

Test tal-qawwa antiossidant li jnaqqas il-ferrik (FRAP).
Biex tikseb reaġent FRAP, 25 mL ta' buffer aċetat 300 mM (pH 3.6), 2.5 mL TPTZ [2,4,6-tris (2-piridil)-s-triazine] , u 2.5 mL ta 'FeCl3 .6H2 O (20 mM) tħalltu. Wara dan, 10 mL tal-kampjun ġew miżjuda ma '260 mL ta' reaġent FRAP u dilwit għal 300 mL b'ilma distillat fi 96 well-plate. Wara l-inkubazzjoni għal 30 min f'37 grad, il-kejl tal-assorbiment sar f'593 nm. BHT intuża bħala kompost ta' referenza. Soluzzjoni ta’ klorur tal-ħadid (0.252 mM) intużat biex tinkiseb kurva standard u r-riżultati ngħataw bħala mM FeSO4 f’1 g estratt niexef.20
Test tal-kapaċità antiossidant li jnaqqas il-cupric (CUPRAC).
It-test CUPRAC kien stmat skond il-metodu deskritt qabel minn Barak et al.21 Volumi ugwali ta '10 mM CuSO4, neocupraine, u buffer ta' l-aċetat ta 'l-ammonju (85 mL) tħalltu fi pjanċa ta' 96-bir. Wara dan, 51 mL ta 'ilma distillat u 43 mL ta' soluzzjonijiet tal-kampjun ġew miżjuda mat-taħlita, rispettivament. Wara l-inkubazzjoni għal 20 min, l-assorbiment inqrat f'450 nm. Ir-riżultati ġew iddikjarati bħala mg aċidu askorbiku ekwivalenti f'1 g estratt niexef.
Determinazzjoni tat-test tal-kapaċità antiossidant totali (TOAC).
It-test tal-kapaċità antiossidant totali ġie kkalkulat skont il-metodu tal-fosfomolibdenu spjegat qabel minn Barak et al.22 L-ewwel, biex tinkiseb soluzzjoni TOAC; 28 mM fosfat tas-sodju monobażiku, 4 mM molibdat ta 'l-ammonju u 600 mM H2 SO4 tħalltu. Imbagħad, 300 µL ta 'soluzzjoni TOAC tħalltu ma' 30 µL ta 'soluzzjonijiet ta' kampjuni fi pjanċa b'saħħitha 96. Wara l-perjodu ta 'inkubazzjoni f'95 grad għal 90 min, l-assorbiment inqrat f'695 nm. L-aċidu askorbiku ntuża biex tinkiseb kurva standard u r-riżultati ġew ikkalkulati bħala ekwivalenti ta' mg Trolox f'1 g estratt niexef.
Attività inibitorja fuq enzimi relatati mat-tixjiħ tal-ġilda
Attività kontra l-collagenase
Biex titkejjel l-attività anti-collagenase ta 'MPM, ġiet ippreparata 50 mM tricine buffer soluzzjoni (pH: 7.5) (400 mM NaCl u 10 mM CaCl2 ). Clostridium histolyticum (ChC - EC. 3.4.23.3) intuża bħala s-sors ta 'collagenase, li ġie maħlul fis-soluzzjoni buffer ta' tricine 50 mM biex tinkiseb konċentrazzjoni inizjali ta '0.8 U/mL. 2 mM ta' N-[3-(2-furyl) acryloyl]-Leu-Gly-Pro-Ala (FALGPA) maħlul f'tricine buffer intuża bħala sottostrat. L-estratti ġew inkubati b'enzima collagenase f'soluzzjoni buffer għal 15-il minuta qabel ma żżid is-sottostrat biex tibda r-reazzjoni. It-taħlita ta' reazzjoni finali kienet tinkludi volum totali ta' 150 µL; buffer tat-tricine, 0.8 mM FALGPA, 0.1 unitajiet ta 'ChC, u 25 μL MPM. Intuża l-ilma għar-riżultati vojta. Wara ż-żieda tas-sottostrat, il-kejl tal-assorbiment sar immedjatament. Kontrolli pożittivi mwettqa epigallocatechin gallate (EGCG).23
Attività kontra l-elastasi
Evalwazzjoni ta 'MPM għall-attività anti-elastase twettqet bl-użu ta' soluzzjoni buffer 0.2 mM Tris-HCl (pH: 8.0). Soluzzjoni stokk ta 'elastasi (PE, EC 3.4.21.36) miksuba mill-frixa tal-ħnieżer ġiet ippreparata b'ilma distillat f'konċentrazzjoni ta' 3.33 mg/mL. N-Succinyl-Ala-Ala-p-nitroanilide (AAAPVN) biex jintuża bħala sottostrat ġie maħlul f'soluzzjoni buffer (1.6 mM). L-estratt MPM ġie inkubat b'1 µg/mL ta' PE għal 15-il minuta fi 37 grad qabel iż-żieda tas-sottostrat. Fl-aħħar ta '15-il minuta ta' qabel l-inkubazzjoni, 0.8 mM AAAPVN sottostrat ġie miżjud mat-taħlita ta 'enżimi li kien fiha 1 mg/mL estratt tal-pjanti, u l-inkubazzjoni reġgħet saret għal 15-il minuta f'37 grad. Waqt li qed tuża 0.25 mg/mL EGCG bħala kontroll pożittiv, dan il-kampjun tat-test fih l-istess volum ta 'EGCG minflok MPM, u s-setup tat-test ġie ripetut. Wara l-perjodi ta’ inkubazzjoni, ittieħdu kejl f’4 punti ta’ ħin differenti għal 5 sa 30 minuta permezz ta’ Thermo Scientific Multiskan SkyHigh Microplate Spectrophotometer f’eċitazzjoni ta’ 365 nm u emissjoni ta’ 410 nm.24, 25

Attività kontra l-hyaluronidase
L-attività kontra l-hyaluronidase twettqet billi ġie mmodifikat il-metodu deskritt minn Kolayli et al.26 u Lee et al.3 L-ewwelnett, il-hyaluronidase mixtrija kummerċjalment (EC 3.2.1.35, Sigma-Aldrich) ġiet maħlula f'0. 02 M phosphate buffer (pH: 3.5) li fih NaCl u albumina tas-serum bovin. Imbagħad, l-aċidu hyaluronic, sottostrat xieraq tal-enzima, ġie ppreparat f'aċetat buffer (0.1 M, pH: 3.5) u lest għall-użu. It-taħlita tal-assaġġ li tikkonsisti minn 20 µL ta 'MPM f'konċentrazzjoni ta' 1 mg/ mL, 10 µL ta 'hyaluronidase, u 60 µL ta' buffer aċetat 0.1 M ġiet inkubata minn qabel għal 20 min f'37 grad. Wara l-ħin ta 'inkubazzjoni, 10 µL ta' aċidu hyaluronic ġew miżjuda mat-taħlita u inkubati mill-ġdid f'37 grad għal 20 min. Fl-aħħar tal-ħin totali ta 'inkubazzjoni, saru kejl f'punti ta' ħin differenti permezz ta 'Thermo Scientific Multiskan SkyHigh Microplate Spectrophotometer f'600 nm. Il-grupp vojt ma kienx fih enzimi fis-setup sperimentali, filwaqt li l-grupp ta 'kontroll ma kienx fih l-estratt. Il-perċentwali tal-attività kontra l-hyaluronidase ġie kkalkulat bl-użu tal-ekwazzjoni li ġejja:
Attivitajiet kontra t-tixjiħ ( fil-mija )= [(Abs tal-kontroll - Abs tal-kampjun)/ Abs tal-kontroll] × 100
Analiżi statistika
Esperimenti ta 'attività anti-elastase, anti-collagenase, u anti-hyaluronidase inklużi f'dan l-istudju ġew ripetuti tliet darbiet b'mod indipendenti. Id-differenza statistika ġiet analizzata bl-użu tat-test t tas-softwer GraphPad Prism 8 (p Inqas minn jew ugwali għal 0.05).
RIŻULTATI U DISKUSSJONI
Determinazzjoni tal-potenzjal kontra t-tixjiħ
Elastin, collagen, u aċidu hyaluronic huma kontenuti magħrufa ta 'ECM, li għandhom rwoli ċentrali fid-dehra żgħira tal-ġilda. Elastin hija proteina vitali għaż-żamma tal-proprjetajiet elastiċi tal-ġilda, konsegwentement, tnaqqis ta 'elastin fl-ECM iwassal għal aċċelerazzjoni fil-proċess ta' tixjiħ.27 Il-letteratura preċedenti tindika r-rabta diretta bejn it-tikmix u t-tixjiħ tal-ġilda b'ammonti mnaqqsa ta 'elastin.28 L-aċidu hyaluronic huwa molekula GAG idrofobika, li hija depolimerizzata permezz ta 'hyaluronidase. L-aċidu hyaluronic huwa kruċjali biex iżżomm l-intoppi tal-ġilda u l-umdità stabbli; għalhekk, intwera li tkissir eċċessiv iwassal għat-tnixxif u t-tikmix tal-ġilda.29 Permezz tal-proċess tat-tixjiħ maż-żmien, livelli mnaqqsa ta 'kollaġen jikkawżaw traqqiq fuq id-dermis, li huwa meqjus bħala indikazzjoni distintiva taħt eżami mikroskopiku.3{{23 }} Kien indikat b'mod preċiż li d-dewmien tat-tqassim tal-kollaġen permezz ta 'inibituri tal-collagenase konsegwentement jintervalli t-tikmix u t-tixjiħ tal-istruttura tal-ġilda.5 Meta wieħed iqis din l-informazzjoni, sustanzi li jinibixxu elastase, collagenase, u hyaluronidase għandhom potenzjal notevoli għal prodotti kontra t-tixjiħ. Studji preċedenti wrew li diversi isoflavonoids juru bijoattività inibitorja sinifikanti kontra l-enzimi msemmija hawn fuq. Addotey et al.31 wrew li erba 'isoflavonoids differenti inibixxu hyaluronidase sa 61.2 fil-mija. Kim et al.32 wrew li isoflavonoid iżolat minn Glycyrrhiza uralensis Fisch., licoricidine, għandu attività inibitorja ta 'elastasi sinifikanti. Il-valur IC50 tal-licorice ġie kkalkulat bħala 61.2 ± 4.2 µM filwaqt li l-aċidu oleanoliku ġie kkalkulat bħala 131.4 ± 11.4 bħala kompost ta 'referenza. Ir-riżultati indikaw li l-isoflavonoids jistgħu jinibixxu l-enzimi elastase. Konsistenti ma 'l-istudju msemmi hawn fuq, Kim et al.33 studjaw disa' isoflavonoids prenilati differenti, strutturi relatati ħafna ma 'osajin, iżolati mill-għeruq ta' Flemingia philippinensis Merr. & Rolfe. Ir-riċerkaturi rrappurtaw li ħamsa mill-isoflavoni prenilati kellhom attività ta 'inibizzjoni qawwija kontra l-elastasi tan-newtrofili, valuri IC50 diversifikati bejn 1.9-12.0 µM, filwaqt li l-valur IC50 tal-aċidu oleanoliku kien 28.4 µM. Fi studju ieħor, Ergene Öz et al. 34 investigat attività inibitorja in vitro ta 'ħames isoflavonoids iżolati mill-għeruq ta' Ononis spinoza L. kontra hyaluronidase, collagenase, u elastase. L-attività inibitorja tal-hyaluronidase tal-isoflavoni kienet irrappurtata li kienet bejn 22.08-45.58 fil-mija, filwaqt li, fl-istess konċentrazzjoni, l-aċidu tanniku wera 88.32 fil-mija inibizzjoni. Ir-riżultati tal-inibizzjoni tal-collagenase ġew ikkalkulati bejn 20.41- 28.49 fil-mija u l-inibizzjoni tal-elastasi kienet imkejla bħala 20.47-46.88 fil-mija. EGCG intuża bħala referenza għaż-żewġ analiżi u l-attivitajiet ta 'inibizzjoni fl-istess konċentrazzjoni ġew imkejla bħala 41.18 fil-mija u 84.64 fil-mija, rispettivament. Studju ieħor investiga trattamenti topiċi ta 'pomiferin iżolati direttament minn M. pomifera. 15 Pomiferin huwa isoflavonoid prenilat, li jista 'jinstab fil-frott M. pomifera u l-istruttura molekulari tiegħu tixbaħ ħafna lil dik ta' osajin. L-investigaturi rrappurtaw li pomiferin wera attività qawwija ta 'stimulazzjoni tal-proteina ECM billi żied il-kollaġen u l-elastin li huwa superjuri jew ekwivalenti għall-kompost ta' referenza, retinol. L-istudji kollha msemmija wrew li l-isoflavoni huma inibituri moderati għal potenti ta 'dawn l-enzimi u għandhom potenzjal sinifikanti bħala materjali naturali kontra t-tixjiħ.

F'dan l-istudju, l-attivitajiet inibitorji in vitro ta' hyaluronidase, collagenase, u elastase ta' MPM ġew investigati għad-determinazzjoni tal-potenzjal kontra t-tixjiħ. Twettaq analiżi komparattiva għall-assaġġ ta' inibizzjoni ta' collagenase f'punti ta' żewġ ħinijiet, eż. 20 u 40 min, kemm għall-MPM kif ukoll għall-kompost ta' referenza, EGCG. Ir-riżultati wrew li l-attività ta 'inibizzjoni tal-collagenase żdiedet maż-żmien. 1 mg/mL MPM wera 84.55 ± 1.99 fil-mija ta 'inibizzjoni, filwaqt li 25{{40}} µg/mL EGCG wera 84.66 ± 1.83 fil-mija wara 20 min ta' inkubazzjoni. Il-bijoattività inibitorja ġiet amplifikata matul iż-żmien, wara 40 min MPM u EGCG inibixxu collagenase 94.68 ± 2.42 fil-mija u 94.98 ± 2.81 fil-mija, rispettivament. B'mod konsistenti mal-letteratura, MPM wera attività ta 'inibizzjoni sinifikanti kontra elastase. Ir-riżultati tkejlu għal punti ta 'erba' ħin (5, 10, 20, u 30 min) u wrew inkrement matul iż-żmien (Figura 2). EGCG (250 µg/mL) intuża bħala referenza u l-attività ta' inibizzjoni żdiedet f'kull ħin (44.07 ± 0.00 fil-mija, 52.19 ± 0.00 fil-mija, 64.69 ± 0.{{41} }} fil-mija , u 86.21 ± 0.00 fil-mija , rispettivament). Sadanittant MPM f'konċentrazzjoni ta '1 mg/mL wera attività ta' titjib u inibizzjoni ogħla, li żdiedet minn 34.70 ± 0.57 fil-mija għal 97.40 ± 1.04 fil-mija minn 5 min għal 30 min. Bl-istess mod, 1 mg/mL MPM inibixxi l-enzima hyaluronidase b'mod sinifikanti wara 40 min inkubazzjoni. 83.91 ± 2.36 fil-mija inibizzjoni kienet imkejla wara 40 min, wara dak 80 min ta 'inkubazzjoni, ir-rata ta' inibizzjoni amplifikata għal 97.19 ± 0.45 fil-mija. Meta tqiesu assaġġi sħaħ ta 'inibizzjoni ta' l-enżimi, ir-riżultati wrew b'mod notevoli li l-MPM jista 'jkun aġent naturali ta' kontra t-tixjiħ siewi u jista 'jintuża fil-kontenuti ta' diversi prodotti kontra t-tixjiħ; għalhekk, M. pomifera jista' jikseb importanza ekonomika żejda.

Determinazzjoni tal-potenzjal antiossidant
Bosta fatturi eżoġeni u endoġeni jwasslu għat-tixjiħ tal-ġilda permezz ta 'diversi mekkaniżmi. Il-maġġoranza ta 'dawn il-fatturi huma direttament jew indirettament affettwati mill-formazzjoni ta' ROS fl-ECM tal-ġilda.35 Peress li l-ġilda tkopri l-parti ta 'barra tal-ġisem tagħna, tiltaqa' ma 'ammonti sinifikanti ta' irradjazzjoni UV fil-ħajja ta 'kuljum. Għalhekk, il-maġġoranza tal-problemi tal-ġilda bħal ħruq mix-xemx, iperpigmentazzjoni, u karċinoġenesi tal-ġilda joriġinaw jew huma relatati mal-effetti diretti tar-radjazzjoni UV. Bl-istess mod, il-foto-tixjiħ huwa konsegwenza addizzjonali tal-proprjetajiet perikolużi tiegħu.36 Barra minn hekk, id-dawl UV jiġġenera formazzjoni ta’ ROS u, konsegwentement, stress ossidattiv fit-tessut tal-ġilda, li huwa wieħed mill-aktar mekkaniżmi importanti li jwasslu għal foto-aging.37 Ġie ipotetizzat li peress li kien eċċessiv Il-formazzjoni ta 'ROS tikkawża tixjiħ prematur tal-ġilda, aġenti b'kapaċità antiossidativa sinifikanti jistgħu jkunu għodda siewja kontra l-effetti perikolużi tar-radjazzjoni UV. Għaldaqstant, studji kliniċi juru li l-użu topiku antiossidant għandu effett protettiv fuq il-ġilda.38
Wara l-interkonnessjoni bejn l-użu topiku antiossidant u l-posponiment tat-tixjiħ tal-ġilda, li huwa stabbilit sew fil-letteratura preċedenti, l-eżaminazzjoni tal-potenzjal antiossidant in vitro tal-MPM jipprovdi informazzjoni siewja għax huwa potenzjal kontra t-tixjiħ meta applikat topikament. Letteratura preċedenti wriet li estratti b'numru għoli ta 'isoflavonoids jistgħu jkunu antiossidanti ta' valur. Fi studju preċedenti, estratt rikk fl-isoflavonojdi ta 'estratt ta' F. macrophylla naqqas il-ħsara tal-ġilda kkaġunata mill-UVB billi neħħi ROS.39 Santos u Silva4{{10}} indikaw li l-isoflavonojdi prenilati għandhom potenzjal antiossidant importanti minħabba tagħhom moety flavonoid u effett addittiv ta 'prenyl sidechain. Il-potenzjal antiossidant ta 'estratti u isoflavonoids ta' M. pomifera ġie evalwat fi studju preċedenti. Ir-riżultati wrew li l-estratt idroalkoħoliku u l-osajin pur wrew attività sinifikanti fuq analiżijiet DPPH, FRAP, u TOAC, anke jekk il-frazzjonijiet tal-pomiferin u l-aċetat etiliku wrew attività ogħla. imwettaq għad-determinazzjoni komprensiva tal-potenzjal antiossidant in vitro tal-MPM (Tabella 2). MPM wera attività sinifikanti ta' tneħħija radikali DPPH, fejn il-valur IC50 kien imkejjel fl-1998.86 ± {{20}}.02. Assays FRAP u TOAC irriżultaw ukoll f'attività notevoli li tnaqqas il-metall, 0.191 ± 0.01 mM FeSO4 /DE u 114.43 ± 0.02 AAE/g DE, rispettivament. Dawn is-sejbiet kienu konsistenti mal-istudju preċedenti ppubblikat minn Orhan et al.41 L-assaġġ CUPRAC sar fuq estratti tal-frott M. pomifera għall-ewwel darba sa l-għarfien tagħna. B'mod korrispondenti, MPM wera attività notevoli li tnaqqas ir-ram fl-assaġġ CUPRAC, fejn ir-riżultati tkejlu bħala 73.928 ± 0.01 AAE/g DE. Meta tqiesu l-analiżi tal-kapaċità antiossidanti totali, huwa possibbli li jissuġġerixxi li l-MPM huwa aġent promettenti kontra t-tixjiħ.
Profil fenoliku u analiżi HPTLC
Isoflavonoids huma sustanzi fenoliċi, li huma magħrufa bħala kostitwenti tal-pjanti responsabbli għal diversi attivitajiet bijoloġiċi notevoli bħal antiossidanti, kontra l-kanċer, u kontra problemi ġinekoloġiċi.42 Studji preċedenti wrew li l-isoflavonoids prenilati huma komposti fenoliċi ewlenin fil-frott M. pomifera.43 Bosta studji identifikati osajin. u pomiferin bħala l-ingredjenti ewlenin tal-frott ta 'M. pomifera, li huma primarjament responsabbli għal dan huwa attivitajiet bijoloġiċi.12 Osajin u pomiferin huma isoflavonoids prenylated simili ħafna li jvarjaw biss ma' grupp wieħed hydroxyl.44 Rapporti preċedenti wrew riżultati konflittwali għall-kontenut ta 'osajin u pomiferin. tal-frott M. pomifera. Kartal et al.45 żviluppaw metodu LC-MS għad-determinazzjoni ta 'osajin u pomiferin f'M. pomifera, li nġabru mill-provinċja ta' Ankara tat-Türkiye. Ir-riżultati wrew li l-kontenut ta 'pomiferin kien kemmxejn ogħla mill-kontenut ta' osajin f'partijiet differenti tal-kampjuni tal-frott. Fi studju ieħor, inġabru kampjuni tal-frott M. pomifera minn reġjuni differenti tal-Punent Nofsani u tan-Nofsinhar tal-Istati Uniti u l-kontenuti ta 'osajin u pomiferin ġew imkejla permezz ta' metodu ġdid ta 'analiżi HPLC. Ir-riżultati wrew li d-differenzi ġeografiċi jwasslu għal alterazzjonijiet sinifikanti ta 'ammonti ta' isoflavonoid fil-kampjuni.46 Tsao et al.47 iddeterminaw il-kontenut ta 'osajin u pomiferin tal-frott miġbur mill-Kanada u sabu li l-kontenut ta' pomiferin kien kemmxejn ogħla mill-kontenut ta 'osajin. B'kuntrast, Hwang et al.48 ġabru fil-qosor diversi studji li sabu ammonti ta 'osajin ogħla minn ammonti ta' pomiferin f'diversi estratti. Jista 'jingħad li l-kontenut ta' osajin u pomiferin tal-frott M. pomifera huma eċċezzjonalment varjabbli b'differenzi ġeografiċi u tekniki ta 'estrazzjoni minħabba l-istruttura kimika tagħhom deċiżament analoga. Għal dan l-istudju, l-ammont ta 'MPM tkejjel permezz ta' analiżi HPTLC, għall-ewwel darba għall-għarfien tagħna. Ir-riżultati tal-analiżi wrew li l-osajin huwa l-ingredjent predominanti tal-MPM li nġabar mill-provinċja ta 'Uşak, 0.22 fil-mija tal-kampjun kien jikkonsisti f'osajin (Tabella 1). Barra minn hekk, biex tinkiseb aktar valutazzjoni tal-profil fenoliku ta 'MPM, twettqu analiżi tal-kontenut fenoliku totali u flavonoid totali. Ir-riżultati wrew li l-MPM kellu kontenut notevoli ta 'fenoli u flavonojdi kif ġej; 113.92 ± 2.26 mg GAE/g u 66.41 ± 0.74 mg QE/g, rispettivament. Ir-riżultati tal-valutazzjoni tal-profil fenoliku wrew li l-MPM jista 'jkun kandidat prominenti bħala aġent naturali ġdid kontra t-tixjiħ.

KONKLUŻJONI
Anki jekk studji li jinvestigaw l-implimentazzjoni topika tal-frott M. pomifera huma relattivament ġodda, l-attenzjoni b'dan il-mod qed tiżdied b'rapporti inkoraġġanti. Għalhekk, dan l-istudju kellu l-għan li jiddeskrivi evalwazzjoni komprensiva tal-potenzjal anti-aging possibbli tal-estratt tal-frott M. pomifera. Analiżi HPTLC intużat għall-frott M. pomifera għad-determinazzjoni tal-kontenut ta 'isoflavonoid għall-ewwel darba sa l-għarfien tagħna, flimkien ma' studji in vitro għad-determinazzjoni tal-profil fenoliku totali. Ir-riżultati wrew li l-osajin huwa l-ingredjent ewlieni tal-kampjuni. Barra minn hekk, il-potenzjal antiossidant in vitro ta 'l-estratt ġie vvalutat b'erba' analiżi differenti u r-riżultati wrew potenzjal antiossidant sinifikanti ta 'MPM. Barra minn hekk, tkejjel l-attività inibitorja kontra l-enzimi, li huma relatati mal-proċess tat-tixjiħ, u deher li l-MPM kellu attività notevoli ta 'inibizzjoni tal-enzimi. Bħala konklużjoni, dan l-istudju jipprovdi informazzjoni, li tista 'twassal għall-produzzjoni ta' prodotti ġodda għall-kura tal-ġilda.
Etika
Approvazzjoni tal-Kumitat tal-Etika:L-approvazzjoni tal-kumitat tal-etika mhix meħtieġa għall-istudju.
Kunsens Informat:Mhux meħtieġ.
Reviżjoni mill-pari:Riveduta minn pari esternament.
Kontribuzzjonijiet ta' Awtorizza
Kunċett: THB, TBŞ., HB, Disinn: THB, İ.KC, EC, Ġbir jew Ipproċessar tad-Data: THB, İ.KC, HB, Analiżi jew Interpretazzjoni: THB, İ.KC, Tiftix tal-Letteratura: THB, TBŞ., Kitba: THB, EC
Kunflitt ta' Interess:L-ebda kunflitt ta' interess ma ġie ddikjarat mill-awturi.
Żvelar Finanzjarju:Dan l-istudju kien appoġġjat mill-Kummissjoni ta 'Proġetti Xjentifiċi tal-Università Acıbadem Mehmet Ali Aydınlar (nru: 2020/02/07).
REFERENZI
1. Hwang E, Park SY, Yin CS, Kim HT, Kim YM, Yi TH. Effetti kontra t-tixjiħ tat-taħlita ta 'Panax ginseng u Crataegus pinnatifida fil-fibroblasti tal-ġilda tal-bniedem u ġilda umana b'saħħitha. J Ġinseng Res. 2017;41:69-77.
2. Ganceviciene R, Liakou AI, Theodoridis A, Makrantonaki E, Zouboulis CC. Strateġiji kontra t-tixjiħ tal-ġilda. Dermatoendocrinol. 2012;4:308-319.
3. Lee H, Hong Y, Tran Q, Cho H, Kim M, Kim C, Kwon SH, Park S, Park J, Park J. Rwol ġdid għall-ginsenoside RG3 fl-antiaging permezz tal-funzjoni tal-mitokondrija fil-ġilda tal-bniedem irradjati bl-ultravjola fibroblasti. J Ġinseng Res. 2019;43:431-441.
4. Rouvrais C, Bacqueville D, Patrick B, Haure MJ, Duprat L, Coutanceau C, Castex-Rizzi N, Duplan H, Mengeaud V, Bessou-Touya S. Valutazzjoni ta 'proprjetajiet anti-aging ta' retinaldehyde, delta-tocopherol glucoside, u glycylglycine kombinazzjoni ta' oleamide. J Invest Dermatol. 2017;137(Suppl 2):S303.
5. Bravo K, Alzate F, Osorio E. Frott ta 'pjanti Andini selvaġġi u kkultivati magħżula bħala sorsi ta' komposti potenzjali b'attività anti-ossidanti u kontra t-tixjiħ. Ind Crops Prod. 2016;85:341-352.
6. Yepes A, Ochoa-Bautista D, Murillo-Arango W, Quintero-Saumeth J, Bravo K, Osorio E. Żerriegħa tal-frott tal-passjoni vjola (Passiflora edulis f. edulis Sims) bħala sors promettenti ta 'aġenti kontra t-tixjiħ tal-ġilda: enżimatiċi , studji komputazzjonali antiossidanti u f'ħafna livelli. Arab J Chem. 2021;14:102905.
7. Rittié L, Fisher GJ. Kaskati tas-sinjali indotti mid-dawl UV u tixjiħ tal-ġilda. Aging Res Rev. 2002;1:705-720.
8. Duque L, Bravo K, Osorio E. Approċċ olistiku kontra t-tixjiħ applikat f'pjanti mediċinali kkultivati magħżula: ħsieb ta 'fotoprotezzjoni tal-ġilda b'mekkaniżmi differenti. Ind Crops Prod. 2017;97:431-439.
9. Manjia NJ, Njayou NF, Joshi A, Upadhyay K, Shirsath K, Devkar VR, Moundipa FP. Il-potenzjal kontra t-tixjiħ tal-pjanti mediċinali fil-KamerunHarungana madagascariensis Lam. u Psorospermum aurantiacum Engl. jipprevjenu ħsara fil-ġilda indotta mid-dawl ultravjola B in vitro. Eur J Integr Med. 2019;29:100925.
10. Pujimulyani D, Suryani CL, Setyowati A, Handayani RAS, Arumwardana S, Widowati W, Maruf A. Cosmeceutical potentials of Curcuma mangga Val. estratt fil-fibroblasti BJ umani kontra MMP1, MMP3, u MMP13. Heliyon. 2020;6:e04921.
11. Stavropoulou MI, Stathopoulou K, Cheilari A, Benaki D, Gardikis K, Chinou I, Aligiannis N. Profiling metaboliku NMR ta 'kampjuni ta' propolis Griegi: evalwazzjoni komparattiva tal-kompożizzjonijiet fitokimiċi tagħhom u investigazzjoni tal-proprjetajiet anti-aging u antiossidanti tagħhom. J Pharm Biomed Anal. 2021;194:113814.
12. Filip S, Djarmati Z, Lisichkov K, Csanadi J, Jankov RM. Iżolament u karatterizzazzjoni ta' estratti ta' Maclura (Maclura pomifera) miksuba permezz ta' estrazzjoni ta' fluwidu superkritiku. Ind Crops Prod. 2015;76:995-1000.
13. Saloua F, Eddine NI, Hedi Z. Kompożizzjoni kimika u karatteristiċi tal-profil ta 'osage orange Maclura pomifera (Rafin.) Żerriegħa u żejt taż-żerriegħa Schneider. Ind Crops Prod. 2009;29:1-8.
14. Veselá D, Kubínová R, Muselík J, Zemlicka M, Suchý V. Attivitajiet antiossidanti u EROD ta' osajin u pomiferin. Fitoterapia. 2004;75:209-211.
15. Gruber JV, Holtz R, Sikkink SK, Tobin DJ. Eżami in vitro u ex vivo ta' trattamenti topiċi ta' pomiferin. Fitoterapia. 2014;94:164-171.
16. Bozkurt İ, Dilek E, Erol HS, Çakir A, Hamzaoğlu E, Koç M, Keleş ON, Halici MB. Investigazzjoni dwar l-effetti ta 'pomiferin minn Maclura pomifera fuq ulċera gastrika indotta minn indomethacin: studju sperimentali fil-firien. Med Chem Res. 2017;26:2048-2056.
17. Kurt-Celep İ, Celep E, Akyüz S, İnan Y, Barak TH, Akaydın G, Telci D, Yesilada E. Hypericum Olympic L. jirkupra ħsara lid-DNA u jipprevjeni l-attivazzjoni MMP-9 indotta mill-UVB fil-ġilda tal-bniedem fibroblasti. J Ethnopharmacol. 2020;246:112202.
18. Bardakci H, Cevik D, Barak TH, Gozet T, Kan Y, Kirmizibekmez H. Metaboliti sekondarji, karatterizzazzjoni fitokimika u attivitajiet antiossidanti ta 'estratti differenti ta' Sideritis congesta PH Davis et Hub.- Mor. Biochem Syst Ecol. 2020;92:104120.
19. Celep E, Seven M, Akyüz S, İnan Y, Yesilada E. Influwenza tal-metodu ta 'estrazzjoni fuq l-inibizzjoni tal-enżimi, il-profil fenoliku u l-kapaċità antiossidanti ta' Sideritis trojan Bornm. L-Afrika t'Isfel J Bot. 2019;121:360–365.
20. Bardakcı H, Barak TH, Özdemir K, Celep E. Effett tal-materjal tal-birra u addittivi varji fuq il-kompożizzjoni polifenolika u l-bijoattività antiossidanti ta 'Tilia platyphyllos Scop kummerċjali. infużjonijiet. J Res Pharm. 2020;24:133-141.
21. Barak TH, Celep E, İnan Y, Yesilada E. Influwenza tad-diġestjoni umana in vitro fuq il-bijodisponibilità tal-kontenut fenoliku u l-attività antiossidanti tal-estratti tal-frott Viburnum opulus L. (cranberry Ewropew). Ind Crops Prod. 2019;131:62-69.
22. Barak TH, Celep E, İnan Y, Yeşilada E. Simulazzjoni in vitro tad-diġestjoni umana tal-bijodisponibilità u l-attività antiossidanti tal-fenoliċi mill-estratti tal-frott Sambucus ebulus L.. Ikel Biosci. 2020;37:100711.
23. Ersoy E, Eroglu Ozkan E, Boga M, Yilmaz MA, Mat A. Potenzjal kontra t-tixjiħ u attività kontra t-tirosinażi ta 'tliet speċi Hypericum b'enfasi fuq il-kompożizzjoni fitokimika minn LC-MS/MS. Ind Crops Prod. 2019;141:111735.
24. Lee KK, Kim JH, Cho JJ, Choi JD. effetti inibitorji ta '150 estratt tal-pjanti fuq l-attività elastase, u l-effetti anti-infjammatorji tagħhom. Int J Cosmet Sci. 1999;21:71-82.
25. Itoh S, Yamaguchi M, Shigeyama K, Sakaguchi I. Il-potenzjal kontra t-tixjiħ ta 'estratti minn Chaenomeles sinensis. Kożmetiċi 2019;6:21.
26. Kolayli S, Can Z, Yildiz O, Sahin H, Karaoglu SA. Studju komparattiv ta 'l-anti hyaluronidase, antifreeze, antiossidanti, antimikrobiċi u proprjetajiet fiżikokimiċi ta' gradi unifloral differenti ta 'għasel tal-qastan (Castanea sativa Mill.). J Enzyme Inhib Med Chem. 2016;31(Suppl 3):96-104.
27. Korkmaz B, Horwitz MS, Jenne DE, Gauthier F. Neutrophil elastase, proteinase 3, u cathepsin G bħala miri terapewtiċi fil-mard tal-bniedem. Pharmacol Rev 2010;62:726-759.
28. Akazaki S, Nakagawa H, Kazama H, Osanai O, Kawai M, Takema Y, Imokawa G. Bidliet relatati mal-età fit-tikmix tal-ġilda evalwati b'analiżi morfometrika tridimensjonali ġdida. Br J Dermatol. 2002;147:689- 695.
29. Barla F, Higashijima H, Funai S, Sugimoto K, Harada N, Yamaji R, Fujita T, Nakano Y, Inui H. Effetti inibittivi ta 'alkyl gallates fuq hyaluronidase u collagenase. Biosci Biotechnol Biochem. 2019;73:2335-2337.
30. Chung JH, Kang S, Varani J, Lin J, Fisher GJ, Voorhees JJ. Tnaqqis tal-kinase regolata bis-sinjali extraċellulari u żieda fl-attivitajiet tal-MAP kinase attivati mill-istress f'ġilda umana anzjana in vivo. J Invest Dermatol. 2000;115:177-182.
31. Addotey JN, Lenger's I, Jose J, Gampe N, Béni S, Petereit F, Hensel A. Isoflavonoids b'effetti ta 'inibizzjoni fuq hyaluronidase -1 tal-bniedem u norneolignan clitorienolactone B mill-estratt tal-għeruq ta' Ononis spinosa L.. Fitoterapia. 2018;130:169-174.
32. Kim KJ, Xuan SH, Park SN. Licoricidin, isoflavonoid iżolat minn Glycyrrhiza uralensis Fisher, jipprevjeni fotoaging indott mill-UVA tal-fibroblasti tal-ġilda tal-bniedem. Int J Cosmet Sci. 2017;39:133-140.
33. Kim JY, Wang Y, Uddin Z, Song YH, Li ZP, Jenis J, Park KH. Isoflavoni inibitorji ta' newtrophil elastase kompetittivi mill-għeruq ta' Flemingia philippinensis. Bioorg Chem. 2018;78:249-257.
34. Ergene Öz B, Saltan İşcan G, Küpeli Akkol E, Süntar İ, Bahadır Acıkara Ö. Isoflavonoids bħala aġenti tal-fejqan tal-feriti minn Ononidis radix. J Ethnopharmacol. 2018;211:384-393.
35. Azevedo Martins TE, de Oliveira Pinto CAS, de Oliveira AC, Robles Velasco MV, Gorriti Guitiérrez AR, Cosquillo Rafael MF, Huamani Tarazona JP, Retuerto-Figueroa MG. Kontribuzzjoni ta 'antiossidanti topiċi biex tinżamm ġilda b'saħħitha-reviżjoni. Sci Pharm. 2020;88:27.
36. Krutmann J, Schroeder P. Rwol tal-mitokondrija fil-foto-tixjiħ tal-ġilda tal-bniedem: il-mudell difettuż tal-powerhouse. J Investig Dermatol Symp Proc. 2009;14:44-49.
37. Dong KK, Damaghi N, Picart SD, Markova NG, Obayashi K, Okano Y, Masaki H, Grether-Beck S, Krutmann J, Smiles KA, Yarosh DB. Il-ħsara tad-DNA indotta mill-UV tagħti bidu għar-rilaxx ta' MMP-1 fil-ġilda tal-bniedem. Exp Dermatol. 2008;17:1037-1044.
38. Oresajo C, Pillai S, Manco M, Yatskayer M, McDaniel D. Antiossidanti u l-ġilda: komprensjoni tal-formulazzjoni u l-effikaċja. Dermatol Ther. 2012;25:252-259.
39. Chiang HM, Chiu HH, Liao ST, Chen YT, Chang HC, Wen KC. Isoflavonoidrich fleming macrophylla estratt jnaqqas il-ħsara tal-ġilda kkaġunata mill-UVB billi jneħħi speċi ta 'ossiġnu reattiv u jinibixxi l-espressjoni MAP kinase u MMP. Evid Based Complement Alternat Med. 2013;2013:696879.
40. Santos CMM, Silva AMS. L-attività antiossidant tal-prenylflavonoids. Molekuli. 2020;25:696.
41. Orhan IE, Sezer Senol F, Demirci B, Dvorska M, Smejkal K, Zemlicka M. Potenzjal antiossidant ta’ xi derivattivi flavonojdi naturali u semi-sintetiċi u l-estratti minn Maclura pomifera (Rafin.) Schneider (osage orange) u l-essenzjali tiegħu kompożizzjoni taż-żejt. Tork J Biochem. 2016;41:403-411.
42. Křížová L, Dadáková K, Kašparovská J, Kašparovský T. Isoflavones. Molekuli. 2019;24:1076.
43. Su Z, Wang P, Yuan W, Grant G, Li S. Fenoliċi mill-frott ta 'Maclura pomifera. Nat Prod Commun. 2017;12:1743-1745.
44. Orazbekov Y, Ibrahim MA, Mombekov S, Srivedavyasasri R, Datkhayev U, Makhatov B, Chaurasiya ND, Tekwani BL, Ross SA. Iżolament u valutazzjoni bijoloġika ta 'flavonoids prenilati minn Maclura pomifera. Evid Based Complement Alternat Med. 2018;2018:1370368.
45. Kartal M, Abu-Asaker M, Dvorska M, Orhan I, Zemlicka M. Metodu LC-DAD-MS għall-analiżi ta 'pomiferin u osajin, isoflavones ewlenin f'Maclura pomifera (Rafin.) Schneider. Chromatography 2009;69:325-329.
46. Darji K, Miglis C, Wardlow A, Abourashed EA. Determinazzjoni HPLC tal-livelli ta' isoflavone f'osage orange mill-Punent Nofsani u n-Nofsinhar ta' l-Istati Uniti. J Agrikol Ikel Chem. 2013;61:6806-6811.
47. Tsao R, Yang R, Young JC. Isoflavoni antiossidanti f'osage oranġjo, Maclura pomifera (Raf.) Schneid. J Agrikol Ikel Chem. 2003;51:6445-6451.
48. Hwang HS, Winkler-Moser JK, Tisserat B, Harry‐O'kuru RE, Berhow MA, Liun SX. Attività antiossidanti ta 'estratt tal-larinġ osage fiż-żejt tas-sojja u żejt tal-ħut waqt il-ħażna. J Am Żejt Chem Soc. 2021;98:73-87.
【Għal aktar informazzjoni:george.deng@wecistanche.com / WhatApp:86 13632399501】






