Memorja Mtejba ta' Rikonoxximent ta' Oġġetti Bl-użu ta' Stimulazzjoni Manjetika Transkranjali Ripetittiva ta' Post-kodifikazzjoni Parti 1

astratt

Sfond: L-istimulazzjoni tal-moħħ hija magħrufa li taffettwa mogħdijiet kanoniċi u proteini involuti fil-memorja. Madankollu, hemm riżultati konfliġġenti dwar il-kapaċità tal-istimulazzjoni tal-moħħ biex ittejjeb il-memorja, li tista 'tkun dovuta għal varjazzjonijiet fil-ħin tal-istimulazzjoni.

Hemm rabta mill-qrib bejn l-istimulazzjoni tal-moħħ u l-memorja. L-istimulazzjoni tal-moħħ tista 'tippromwovi l-attività tan-newroni tal-moħħ, u b'hekk ittejjeb il-memorja u l-kapaċità konjittiva.

L-ewwel, l-istimulazzjoni tal-moħħ tista 'tippromwovi l-konnessjoni bejn in-newroni. Billi tistimula l-moħħ, il-komunikazzjoni u l-konnessjoni bejn in-newroni se jsiru aktar frekwenti u effiċjenti. Dawn il-konnessjonijiet se jsiru aktar stabbli u reali, u jagħmlu l-moħħ aktar flessibbli, kreattiv u maħsub. Dawn il-vantaġġi jagħtuk vantaġġ fit-tagħlim u l-ħajja.

It-tieni, l-istimulazzjoni tal-moħħ tista 'ġġib memorja aktar b'saħħitha. L-istimulazzjoni frekwenti tal-moħħ tista 'ttejjeb il-vitalità u s-saħħa tal-moħħ, u b'hekk ittejjeb il-memorja. Hemm relazzjoni vitali bejn is-saħħa tal-moħħ u l-memorja u l-attivitajiet konjittivi. L-istimulazzjoni tal-moħħ tgħin lill-moħħ jirkupra, jikber u jissewwa. B'dan il-mod, ikun aktar faċli għalina li nitgħallmu l-għarfien jew niksbu informazzjoni sinifikanti mill-ħajja, u nkunu nistgħu nżommuhom aħjar maħżuna u mfakkar fil-moħħ.

Barra minn hekk, l-istimulazzjoni tal-moħħ tista 'wkoll tippromwovi t-tagħlim u l-applikazzjoni ta' informazzjoni ġdida. Fil-ħajja, kontinwament niltaqgħu ma’ diversi problemi li ma nafux kif niffaċċjaw. Billi nistimulaw il-moħħ ta 'spiss, nistgħu nifhmu din l-informazzjoni kumplessa aktar malajr u b'mod aktar preċiż, naddattawha gradwalment, insibu modi kif nipproċessawha, u nkampaw magħha aħjar, u tagħmilna hander meta nittrattaw l-affarijiet.

Fil-qosor, permezz tal-istimulazzjoni tal-moħħ, nistgħu nkunu aktar flessibbli, kreattivi u maħsubin. Se niffaċċjaw ukoll il-problemi u l-isfidi fil-ħajja b’aktar kunfidenza. L-istimulazzjoni tal-moħħ hija mod tajjeb biex intejbu l-kapaċità konjittiva tagħna, insaħħu t-tagħlim, u ntejbu l-memorja. Ejja nżommu mal-pjan tagħna ta 'eżerċizzju tal-moħħ, inżommu attitudni pożittiva, inkunu pożittivi, insegwu żvilupp personali aħjar, u nirrealizzaw l-ideali tagħna. Wieħed jista 'jara li għandna bżonn intejbu l-memorja, u Cistanche jista' jtejjeb il-memorja b'mod sinifikanti minħabba li Cistanche jista 'wkoll jirregola l-bilanċ ta' newrotrasmettituri, bħal żieda fil-livelli ta 'acetylcholine u fatturi ta' tkabbir, li huma importanti ħafna għall-memorja u t-tagħlim. Barra minn hekk, Cistanche jista 'wkoll itejjeb il-fluss tad-demm u jippromwovi l-kunsinna ta' ossiġnu, li jista 'jiżgura li l-moħħ jikseb biżżejjed nutrizzjoni u enerġija, u b'hekk itejjeb il-vitalità u r-reżistenza tal-moħħ.

Ikklikkja Kun af biex ittejjeb il-memorja tax-xogħol

Ipoteżi: Aħna ipoteżijna li stimulazzjoni manjetika transkranjali ripetittiva (rTMS) mogħtija wara l-kompitu ta 'tagħlim u fil-perjodu qabel l-irkupru tista' tgħin biex ittejjeb il-memorja. li l-ġrieden jistgħu jingħataw stimulazzjoni konsistenti għaż-żona ta’ quddiem waqt li jiċċaqilqu liberament.

Il-ġrieden imbagħad għaddew mill-fażi tat-teħid tal-kampjuni tat-test tar-rikonoxximent tal-oġġett u ngħataw trattament þ3, þ24, þ48 siegħa wara t-test. It-trattament kien jikkonsisti fi 10 min 10 Hz stimulazzjoni rTMS (TMS, n ¼ 10), trattament finta (SHAM, n ¼ 11), jew grupp ta 'kontroll li ma għamilx it-test tal-imġieba jew ma rċievax rTMS (KONTROLL n ¼ 11).

Fi þ72 il-ġrieden ġew ittestjati għall-esplorazzjoni tagħhom tal-oġġett ġdid vs familjari.

Aħna wkoll nuru li l-promozzjoni ta 'GluR2 sinaptiku u ż-żamma ta' konnessjonijiet sinaptiċi fil-kortiċi perirhinal u CA1 hippocampal huma importanti għal dan l-effett.

Barra minn hekk, sibna evidenza li dawn il-bidliet kienu marbuta mal-mogħdijiet CAMKII u CREB fin-newroni tal-hippocampal.

Konklużjoni: Billi torbot l-effetti bijoloġiċi magħrufa ta 'rTMS mal-mogħdijiet tal-memorja nipprovdu evidenza li rTMS huwa effettiv biex itejjeb il-memorja meta jingħata matul il-fażijiet ta' konsolidazzjoni u manutenzjoni.

1. Introduzzjoni

L-istimulazzjoni tal-moħħ mhux invażiva hija magħrufa li taffettwa mogħdijiet kanoniċi u proteini involuti fil-memorja. Madankollu, studji kurrenti li eżaminaw l-effetti tal-istimulazzjoni tal-moħħ, speċifikament stimulazzjoni manjetika transkranjali ripetittiva (rTMS), fuq il-memorja kellhom riżultati konfliġġenti [1].

Raġuni għal dan tista' tkun milli timmira l-istimulazzjoni f'ħinijiet differenti waqt il-formazzjoni u l-irkupru tal-memorja [1]. L-evidenza tissuġġerixxi li l-immirar ta' rTMSat il-fażijiet ta' wara l-kodifikazzjoni jew ta' konsolidazzjoni jista' jkun ta' benefiċċju għall-iżvilupp ta' memorji stabbli fit-tul [2]e4].

Il-konsolidazzjoni hija l-fażi li tbiddel memorja għal żmien qasir f'memorja fit-tul (LTM). Il-proċess huwa dipendenti fuq sinteżi ta 'proteina speċifika għall-ħin, li tittrasforma l-informazzjoni l-ġdida f'modifiki sinaptiċi stabbli b'densitajiet ta' riċetturi postsinaptiċi miżjuda [5,6].

L-importanza ta 'din is-sinteżi ta' proteina speċifika għal żmien u reġjun intweriet fi studji li jimblukkaw is-sintesi tal-proteini denovo. Pereżempju, studju wieħed li mblokka s-sinteżi tal-proteini fl-ippokampus 3-h, iżda mhux 6-h wara l-avveniment tat-tagħlim, imfixkel LTM iżda mhux memorja għal żmien qasir fil-firien[7].

Minn dawn il-proteini, ġew identifikati diversi mogħdijiet ta' sinjalar importanti li huma regolati u importanti f'dan il-proċess.

Jeżistu mogħdijiet multipli ta 'sinjalazzjoni fis-sinapsi li jindikaw l-innervazzjoni tar-riċettur u l-istabbiltà tas-sinsla meħtieġa għal LTM. Dawn huma attivati ​​permezz ta 'avveniment ta' stimolu ta 'potenzament fit-tul (LTP) u ħafna drabi huma msaħħa b'fatturi newrotrofiċi bħal fattur newrotrofiku derivat mill-moħħ (BDNF) [8].

Il-BDNF huwa ta' importanza partikolari fil-ħolqien ta' memorji fit-tul, peress li jimblokka s-sintesi ta' BDNF f'punti ta' żmien speċifiċi, it-tagħlim li ġej jimblokka l-konsolidazzjoni tiegħu [5].

BDNF jeħel mar-riċetturi tat-tyrosine kinase (TrkB) u jista 'jibda mogħdijiet ta' sinjalazzjoni multipli bħal proteina kinase attivata minn mitoġenu/kinase regolata minn sinjal extraċellulari (ERK) jew mogħdijiet Cg fosfolipasi. Dawn il-mogħdijiet ta 'sinjalazzjoni jikkonverġu fuq l-attivazzjoni tal-fattur ta' regolazzjoni tat-traskrizzjoni cyclicAMP-responsive element-binding protein (CREB).

Proteini attivati ​​mill-kalċju bħal proteina kinase II dipendenti fuq il-kalċju/kalmodulin (CAMKII) għandhom ukoll rwol fir-regolamentazzjoni tal-ġeni attivata minn CREB[9e11] u jistgħu wkoll jimmedjaw direttament l-espressjoni sinaptika tar-riċetturi AMPA glutamaterġiċi u jistabbilizzaw l-armar sinaptiku [12e15] .

Flimkien, dawn il-mogħdijiet ta' sinjalazzjoni jirriżultaw f'espressjoni u traslokazzjoni tar-riċettur ta' shiftin li jimmedjaw iż-żieda fl-attivazzjoni fis-sinapsi, u b'hekk iservu biex jistabbilizzaw is-sinapsi u jikkontribwixxu għaż-żamma ta' LTP fit-tul [16].Importanti, studji preċedenti wrew li huwa possibbli li tittejjeb il-konsolidazzjoni tal-memorja. permezz ta' riattivazzjoni perjodika ta' dawn il-mogħdijiet ta' konsolidazzjoni f'ambjenti sperimentali [17].

Studji preċedenti wrew il-kapaċità ta 'rTMS li jinfluwenzaw direttament dawn il-mogħdijiet speċifiċi fil-moħħ. Studji in vivo wrew li rTMS iżid il-livelli ta 'BDNF fil-moħħ [18e20]. B'mod aktar dirett, in vitro rTMS jirriżulta f'żieda ta 'Ca2þ fin-newroni, molekula ta' sinjalazzjoni predominanti fil-mogħdija CAMKII [18].In vitro ntwera wkoll fosforilazzjoni ta 'CAMKII u CREB miżjuda wara rTMS [20,21].

rTMS jinfluwenza wkoll direttament l-espressjoni tar-riċettur sinaptiku, iżid id-densità tar-riċettur AMPA [22e24], u jirregola s-subunitajiet tar-riċettur AMPA Glutamate Receptor 1 (GluR1) u Glutamate Receptor 2 (GluR2) [25,26].

Għalhekk, asrTMS jattiva dawn il-mogħdijiet ikun l-aktar effettiv fit-titjib tal-memorja matul il-fażi ta 'konsolidazzjoni. Dan l-istudju eżamina l-użu ta' rTMS għat-titjib tal-memorja billi jimmira l-istimulazzjoni tal-fażijiet ta 'konsolidazzjoni u manutenzjoni tal-memorja.

Aħna ipoteżijna li rTMS amministrat wara kompitu ta 'tagħlim, u fil-perjodu qabel l-irkupru, jista' jtejjeb il-prestazzjoni tal-memorja. Dan ikun ir-riżultat ta 'riattivazzjoni perjodika ta' mogħdijiet li huma involuti fil-memorja, li huma wkoll influwenzati minn rTMS.

Bl-użu ta' mudell ta' annimal ta' LTM episodiku speċifiku, urejna li l-rTMS tejbet il-memorja tal-oġġett meta ngħatat fi żmien 72-h bejn il-kodifikazzjoni u l-irkuprar, filwaqt li l-ġrieden li ngħataw it-trattament SHAM ma żammewx il-memorja.

Dan l-effett kien appoġġjat minn bidliet tosynaptic konnessjonijiet fil-kortiċi perirhinal u CA1, attivazzjoni elevata ta 'CREB u CAMKII, u bidla dinamika fis-subunitajiet tar-riċetturi AMPA fis-sinapsi.

2. Materjal u metodi

2.1. Annimali

Aħna użajna n ¼ 33 ġrieden maskili B6129SF2/J ta' 2e4 xhur għal dan l-istudju. Il-ġrieden kollha għexu taħt ċiklu ta' 12-siegħa dawl/12-siegħa skur b'aċċess ħieles għal għalf niexef u ilma. Il-kura u l-proċeduri kollha tal-annimali kienu konformi mal-Att dwar il-Benessri tal-Annimali u kienu minn linji gwida istituzzjonali u approvati mill-Kumitat VA Palo Alto dwar ir-Riċerka tal-Annimali.

2.2. Kirurġija ta 'appoġġ tal-coil

Kull wieħed mill-ġrieden għadda minn kirurġija biex iwaħħal appoġġ coil li jippermetti stimulazzjoni rTMS konsistenti tal-annimali imqajjmin. Dettalji dwar il-proċedura kirurġika jistgħu jinstabu f'Poh et al., 2018[27].

Fil-qosor, l-annimali ġew anestetizzati bi 3% isoflurane u miżmuma fi 2e3% b'kon imnieħer. Wara t-tqaxxir u t-tindif tas-sit għall-isterilità, saret inċiżjoni sagittali ta 'madwar 10 mm fit-tul b'xafra tal-iskalpell.

Il-perijosteum ġie mqaxxar bil-mod, u appoġġ ta 'coil premade kien imwaħħal mal-bregmawith cyanoacrylate u rinfurzat bis-siment dentali. Il-ferita mbagħad ġiet suturata madwar l-appoġġ tal-coil.

2.3. Imġieba u proċeduri ta' stimulazzjoni

Għal ħarsa ġenerali lejn l-imġieba u l-proċeduri ta 'stimulazzjoni ara Fig. 1a. Wara ħamest ijiem ta 'rkupru mill-kirurġija ta' appoġġ tal-coil, themice kienu abituati għal gaġġa ta 'stimulazzjoni separata u proċeduri ta' coil għal tlett ijiem.

Fl-aħħar jum tal-abitazzjoni tal-coil, il-ġrieden għaddew mit-Test tal-Qasam Miftuħ (OFT) għal 10-min, li serva wkoll bħala d-drawwa għat-Test tar-Rikonoxximent tal-Oġġetti (ORT). Il-jum ta' wara l-ġrieden ġew esposti għall-fażi ta' Teħid ta' Kampjuni ORT b'żewġ oġġetti mill-istess għal 10 minuti. L-oġġetti kienu ta' daqs simili iżda b'kuluri u forom differenti. Dawn l-oġġetti tpoġġew fil-kantunieri opposti ta 'arena ta' ttestjar kwadru.

Tliet sigħat wara, il-ħmieġ ġew maqsuma b'mod każwali f'żewġ gruppi ta 'trattament, TMS li rċevew stimulazzjoni attiva ta' 10-min ta '10 Hz rTMS, u SHAM, li ġew ittrattati l-istess ħlief bil-coil mitfi waqt l-istimulazzjoni.

Kemm il-ġrieden TMS kif ukoll SHAM ġew ittrattati mill-ġdid24- u 48-h wara l-familjarizzazzjoni. Fl-aħħar jum (72-h wara l-familjarizzazzjoni) il-ġrieden ġew esposti fażi tat-Test ORT għal 10-min b'oġġett wieħed familjari u oġġett ġdid wieħed.

Biex jiddetermina jekk l-esplorazzjoni ta 'l-oġġett ġdid kienet akbar mill-oġġett familjari aħna kkalkulat l-indiċi ta' diskriminazzjoni (((esplorazzjoni ta 'oġġett ġdid)-(esplorazzjoni ta' oġġett familjari))/((esplorazzjoni ta 'oġġett ġdid) + (esplorazzjoni ta' oġġett familjari))). Aħna għażilna 72-h, peress li kemm studji preċedenti [28] kif ukoll data pilota (mhux murija) wrew li taħt kundizzjonijiet normali ġrieden ma jżommux il-memorja ORT f'dan il-ħin.

Kemm it-tipi ta' oġġett kif ukoll il-post tal-oġġett ġdid kienu bilanċjati fost il-gruppi. Għas-sessjoni tad-drawwa, it-teħid tal-kampjuni u s-sonda, il-ġrieden dejjem ingħataw 30 minuta biex jakklimataw mal-kamra tal-esperimenti qabel il-provi, u, l-oġġetti u l-arena tnaddfu b'70% etanol wara kull ġurdien.

Biex ninvestigaw l-effetti tal-kompitu tal-imġieba biss inkludejna grupp li ġew ittrattati l-istess bħall-ġrieden SHAM ħlief li ma għamlux l-ORT.

Minflok, kienu esposti għal sessjoni ta’ teħid ta’ kampjuni u sonda iżda mingħajr ebda oġġett. Ġurdien wieħed fil-grupp TMS ma laħaqx il-limitu meħtieġ ta' esplorazzjoni totali ta' 20-s taż-żewġ oġġetti fis-sessjoni ta' teħid ta' kampjuni u għalhekk ġie eskluż mill-istudju. Dan il-ġurdien ġie eskluż mill-analiżi bijokimika sussegwenti.

Il-ġrieden l-oħra kollha laħqu kriterji kemm fis-sessjoni tat-teħid tal-kampjuni kif ukoll tas-sonda. Eskluż il-ġurdien wieħed, in-numri finali fil-gruppi esperimentali kienu TMS n ¼ 10, SHAM n ¼ 11, u CONTROLn ¼ 11.

2.4. Punent blot

Tliet sigħat wara s-sessjoni tas-sonda, il-ġrieden ġew sagrifikati b'doża eċċessiva ta' ketamina, u t-tessuti tal-hippocampus u tal-frontcortex ġew dissezzjonati malajr fuq silġ niexef u maħżuna f'80 C.

Dawn il-kampjuni ġew omoġenizzati b'300 mL ice-coldSyn-Per Synaptic Protein Extraction Reagent (Thermo Xjentifiku) b'1x Protease Inhibitor Cocktail (Roche) u 1x PhosphataseInhibitor Cocktail (Roche) pilloli (kull 10 ml), għal 5 s.

Omoġenati ġew ċentrifugati f'1200 g għal 10 minuti biex jitneħħew debris taċ-ċelluli. Is-supernatant ittieħed, u porzjon tas-supernatant ġie alikwotat għall-analiżi tal-Omoġenat Sħiħ. Il-kumplament ġie ċentrifugat fi 15,000 g għal 20-min f'4 C.

Il-gerbub, li fihom sinaptosomi, ġew sospiżi mill-ġdid bil-mod f'Syn-Per f'1.5 ml/g ta' tessut, biex jinħoloq l-Omoġenat Sinaptiku. Nanoddrop intuża biex tikkwantifika l-konċentrazzjoni tal-proteina fil-kampjun.

L-Omoġenat Sħiħ u Omoġenat Sinaptiku ġew maħżuna f'80 C sal-analiżi. Kemm l-omoġenati Sħiħ kif ukoll Sinaptiċi ġew dilwiti għal 4 mg/ml PBS kiesaħ fis-silġ u mħallta ma '1:4 Protein Loading Buffer (LiCor) u 1:4000 mercaptoethanol. Imbagħad ġew imsaħħna f'95 C għal 5-minand mgħobbija f'Mini PROTEAN TGX Gels (Bio-Rad).

Wara s-separazzjoni bl-użu ta 'elettroforeżi f'100 V, il-proteini ġew trasferiti għal membrana ta' nitrocellulose blotting (GE Healthcare Lifesciences). Il-membrani ġew maħsula f'SuperSignal WesternBlot Enhancer Antigen Pretreatment Solution (Thermo Scientific) u mbagħad imblukkati bi Blocking Buffer (Rockland) u 1% serum tal-mogħoż għal 1-h.

Wara l-imblukkar, il-membrana ġiet inkubata b'antikorpi primarji dilwiti f'SuperSignal Western BlotEnhancer Primary Antibody Diluent (Thermo Scientific) matul il-lejl f'temperatura tal-kamra.

L-antikorpi primarji użati kienu ERK monoklonali tal-ġurdien 1/2 (1:1000, Santa Cruz Biotechnology), fosfo-p44/42 MAPK monoklonali tal-fenek (pERK 1:1000, Cell SignalingTechnologies), CREB monoklonali tal-ġrieden (1:500, Cell SignalingTechnologies), monoklonali tal-fenek phospho-CREB (S133) (pCREB1:500, Teknoloġiji tas-Sinjali taċ-Ċelluli), fenek monoklonali CAMKIIalpha (1:1000, Teknoloġiji tas-Sinjali taċ-Ċelloli), ġurdien monoclonalphospho-CAMKII (Thr286) (pCAMKII 1:1000, Invitrogen), ġrieden monoklonali GluR1 (1: 750, Santa Cruz Biotechnology), fenek monoklonali fosfo-GluA1 (S845) (pGluR1(845) 1:750, Cell Signaling Technologies), fenek monoklonali fosfo-GluA1 (S831) (pGluR1(831) 1:750, Teknoloġiji tas-Sinjali taċ-Ċelluli tal-ġrieden monoklonali GluR2 (1:750, Invitrogen), fenek poliklonali fosfo-GluR2 (S880) (pGluR2 1:500, Invitrogen), ġrieden monoklonali TrkB (1:500, BD Transduction Laboratories) jew fenek poliklonali fosfo-TrkB( Tyr816) (pTrkB 1:500, EMD Millipore).

Cofilin(1:2000, Sigma) poliklonali tal-fenek intuża għall-kontroll standard tat-tagħbija. Wara t-tlaħliħ f'TBS-Tween, il-membrana ġiet inkubata għal siegħa f'temperatura tal-kamra f'mogħoż anti-fenek 800 u mogħoż anti-ġurdien 680 (1:3000, LiCor).

L-immunoblot ingħata immaġni bl-użu ta 'sistema ta' immaġini Odyssey Clx Infrared (LiCor) u saret analiżi tad-dejta tal-intensità tal-banda bl-użu ta 'Image Studio (LiCor).

2.5. Immunoistokimika

Tliet sigħat wara s-sessjoni tas-sonda, ġrieden sagrifikati b'doża eċċessiva ta' ketamina ġew imbagħad imxerrda b'mod transkardjali b'50 ml ta' PBS 1 M kiesaħ.
Imħuħ ġew imwaħħla immedjatament f'soluzzjoni ta '4% paraformaldehyde f'4 C u trasferiti għal 30% sukrożju f'PBS għal mill-inqas 48-siegħa qabel ma cryosectioning f'sezzjonijiet ta' 30 mm. Is-sezzjonijiet li jżommu f'wiċċ l-ilma ġew imblukkati u permeabilizzati b'10% serum mogħoż f'0.1% Triton f'1 M PBS imbagħad inkubati għal 48-hbil-fenek poliklonali PSD95 (1:300, Thermo Scientific) u ġurdien monoklonali SV2A (1:300, Bijoteknoloġija ta’ Santa Cruz).

Dawn it-taqsimiet imbagħad ġew inkubati għal 1- siegħa bl-antikorpi sekondarji Alexa Fluor mogħoż anti-fenek 568 (1:500, Invitrogen) u Alexa Fluorgoat anti-mause 488 (1:500, Invitrogen. Il-flieli mbagħad ġew maħsula b'żebgħa nukleari DAPI (1:1000, Sigma), immuntati ontoslides, u mgħottija bi Fluoromount (Thermo Scientific).

It-tbajja’ ġiet ikkwantifikata fil-kortiċi frontali (FC), l-ippokampus dorsali CA1, il-kortiċi entorrinali (EC), u l-kortiċi perirhinali (PC).

Immaġini Zstacked ittieħdu b'Mikroskopju Fluworexxenti BZ-X700 (Keyence) b'ingrandiment ta '40x biex jiġi identifikat punt sinaptiku tul il-porzjon kollu. Total PDS95 puncta, SV2A puncta, andcolocalized (definiti bħala żewġ puncta ħdejn xulxin jew li jikkoinċidu) ġew magħduda minn mill-inqas erba 'immaġini għal kull żona, u l-medja tar-riżultati meħuda għal kull ġurdien. Il-kwantifikazzjoni ta' %colokalizzat tlestiet billi ngħaddu (SV2A u PSD95 li jikkoinċidu)/(SV2A totali u PSD95) puncta.

2.6. Statistika

Id-dejta kollha ssodisfat is-suppożizzjonijiet ta' normalità kif evalwat billi teżamina l-axwenzi, il-kurtożi, u l-valur Shapiro Wilk tar-residwi kkalkulati u ma kien hemm l-ebda ksur tal-omoġeneità tal-varjanza kif evalwat bl-użu tal-istatistika ta 'Levene.

Għat-testijiet tal-imġieba, it-testijiet t tal-istudenti ntużaw biex iqabblu SHAM ma 'TMS, għall-esplorazzjoni ta' oġġetti ġodda u familjari fi ħdan gruppi intużat ANOVA b'żewġ direzzjonijiet RepeatedMeasures.

Id-dejta tal-immunoistokimika u tal-Western blot ġew ittestjati għas-sinifikat bl-użu ta' One-WayANOVA. Għall-paraguni kollha post-hoc, intuża aġġustament Tukey b'sinifikat f'p < 0.05.

Jekk l-omoġeneità tal-varjanza kienet miksura, is-sinifikat kien determinat bil-WelchTest u sussegwenti post-hoc ikkoreġut bil-Logħob-Howell, dawn il-każijiet huma nnutati fir-riżultati. L-istatistika kollha twettqet bl-użu ta 'SPSS (verżjoni 22, IBM), u l-grafiċi ġew prodotti bl-użu ta' GraphPad (verżjoni 7, Prism).

For more information:1950477648nn@gmail.com