L-identifikazzjoni ta' Rwol Ta' Estratti ta' Inbid Aħmar u Abjad fil-Kontrazzjoni tat-Tixjiħ tal-Ġilda: Effetti Ta' Antiossidanti fuq l-Imġieba tal-Fibroblast

Jekk jogħġbok ikkuntattjaoscar.xiao@wecistanche.comgħal aktar informazzjoni

Astratt:Il-fibroblasti tal-ġilda huma l-attur ewlieni fis-sekrezzjoni ta 'ħafna proteini, inkluż il-collagen, li jippreservaw il-funzjoni tal-ġilda. Ir-radikali ħielsa huma involuti fit-tixjiħ tal-ġilda u l-ħsara li tinvolvi komponenti ċellulari differenti. L-iżbilanċ bejn l-ammont ta 'speċi ta' ossiġnu reattiv (ROS) u enzimi antiossidanti naturali jaffettwa b'mod negattiv l-omeostażi tal-ġilda. Komposti naturali reċentement ħarġu bħala għodda potenzjali kontra t-tixjiħ fir-riġenerazzjoni tat-tessuti. Fil-karta preżenti, aħna evalwaw l-attività antiossidanti ta 'nbejjed bojod u ħomor, meta wieħed iqis l-użu probabbli tagħhom, bħala materja prima, għall-formulazzjoni ta' prodotti kożmetiċi bi proprjetajiet kontra t-tixjiħ. Studjajna metodu li jippermetti t-tneħħija tal-frazzjoni alkoħolika tal-inbejjed u ddeterminajna l-kompożizzjoni tagħhom permezz ta 'analiżi LC-MS. Imbagħad ittestjajna l-effetti ċitotossiċi possibbli tal-inbejjed ħomor u bojod fuq fibroblasti minn 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium (MTT ), u l-attività antiossidanti tagħhom mit-test tal-attività tal-catalase f'kundizzjonijiet ta 'stress. Fl-aħħarnett, aħna evalwajna l-potenzjal tagħhom kontra t-tixjiħ permezz tal-assaġġ kolorimetriku -galactosidase. Ir-riżultati tagħna wrew li l-estratti tal-inbid juru attività antiossidant u anti-aging notevoli, speċjalment fuq ċelluli esposti għal avveniment stressanti mmarkat. Dawn il-proprjetajiet jistgħu jissuġġerixxu li huma applikazzjoni possibbli bħala prodotti kożmetiċi għar-riġenerazzjoni tal-ġilda.

Kliem ewlieni:proliferazzjoni taċ-ċelluli; antiossidanti; senescence taċ-ċelluli; molekuli bijoattivi; tixjiħ tal-ġilda; stress ossidattiv

Jekk jogħġbok ikklikkja hawn biex tkun taf aktar

1. Introduzzjoni

Il-ġilda hija l-aktar organu estensiv tal-ġisem u għandha multipliċità ta 'funzjonijiet, li tipproteġi t-tessuti sottostanti minn insulti kimiċi u mekkaniċi, radjazzjoni UV, radikali ħielsa u infezzjonijiet. Għandu rwol fit-termoregolazzjoni, għandu funzjonijiet endokrinali u bijokimiċi, u huwa l-organu ta' applikazzjoni u/jew assorbiment ta' ksenobijotiċi (drogi, veleni, kożmetiċi)[1-3]. Fid-dermis, il-fibri tal-elastin u l-fibri tal-kollaġen jiżguraw l-elastiċità t-tajba tal-ġilda. L-età, l-ormoni, u l-effetti ta 'ħsara tar-radjazzjoni ultravjola jistgħu jnaqqsu l-ħxuna u l-elastiċità tad-dermis, li jirriżultaw fi tikmix u telf ta' ton tal-ġilda[4,5]. Huwa diġà magħruf li t-tixjiħ tal-ġilda jikkomprometti l-funzjoni tal-barriera tal-ġilda, li jirriżulta f'dehra niexfa u suxxettibilità għall-aggressuri ambjentali [6]. L-ispeċi reattivi tal-ossiġnu (ROS), li jirriżultaw mit-telf tal-elettroni waqt il-metaboliżmu aerobiku jew wara espożizzjoni għal fatturi ambjentali, huma speċi instabbli li kapaċi jagħmlu ħsara lill-bijomolekuli differenti [7,8]. Biex jikkumbattu l-effett tagħhom, id-difiżi antiossidanti naturali fil-ġisem huma kapaċi jżommu ROS f'livelli fiżjoloġikament aċċettabbli. Jidher, fil-fatt, li ROS, jekk preżenti f'ammonti kkontrollati, għandu wkoll azzjoni fiżjoloġika, li jiffunzjona bħala molekuli ta 'sinjal bejn iċ-ċelloli [9,10].cistanche genghis khanDan l-iżbilanċ bejn ROS u enzimi antiossidanti, bħal catalase, glutathione reductase, u superoxide dismutase, jikkawża ħsara lill-proteini, lipidi, u DNA [11], u b'hekk jinterferixxi b'mod negattiv mal-mogħdijiet ta 'sinjalazzjoni intraċellulari ta' keratinoċiti u fibroblasti u jbiddel l-espressjoni ta 'MMP. (matrix metalloproteinases), procollagen, u cytokines pro-infjammatorji [12,13]. Komposti fenoliċi bħal resveratrol, hydroxytyrosol, u epigallocatechin-3-gallate, preżenti fil-ħxejjex, frott, u derivattivi, huma l-molekuli ta 'difiża ewlenin kontra fungi, batterji, u viruses [14]. L-effetti ta' benefiċċju tal-polifenoli——preżenti b'mod wiesa' fl-inbid—ġibdu attenzjoni konsiderevoli fl-industrija farmaċewtika u kożmetika f'dawn l-aħħar snin[15,16]. Il-konsum tal-polifenol jista' jkollu effetti protettivi f'mard akut u kroniku, u fir-regolamentazzjoni tal-metaboliżmu u l-proliferazzjoni taċ-ċelluli [17]. L-iżvilupp ta 'proċedura unika effiċjenti għall-estrazzjoni u l-karatterizzazzjoni ta' komposti fenoliċi għandu ħafna limitazzjonijiet, prinċipalment minħabba d-diversità strutturali ta 'komposti fenoliċi u l-interazzjoni tagħhom ma' komponenti ċellulari oħra[18,19]. Tekniki moderni ta 'estrazzjoni aħdar u spettrometrija tal-massa b'riżoluzzjoni għolja (LC-ESI-LTQ-Orbitrap-MS) jirrappreżentaw approċċi promettenti għall-ġestjoni ta' dawn il-molekuli bijoattivi [20]. Għalhekk, studjajna metodu irħis, flessibbli, robust u effiċjenti li jippermetti t-tneħħija tal-frazzjoni alkoħolika tal-inbejjed, li jistgħu jintużaw bħala prodotti kożmetiċi. L-effetti numerużi fuq is-saħħa marbuta mal-konsum tal-inbid ilhom magħrufa għal żmien twil, u b’mod partikolari, il-kontenut għoli ta’ komposti polifenoliċi antiossidanti jagħmilha utli fit-trattament ta’ mard bi stress ossidattiv għoli[21,22]Applikazzjoni topika ta’ antiossidanti jista 'jappoġġa s-sistema antiossidanti tal-ġilda kontra l-istress ossidattiv u jista' jipproteġiha mit-tixjiħ tar-ritratti fit-tul [23,24]. F'dan il-kuntest, fid-dokument preżenti, immirajna li nevalwaw l-effetti antiossidanti ta 'estratti ta' inbid aħmar u abjad f'ċelloli esposti għal avveniment stressanti qawwi, sabiex nikkontrobattu s-senescence taċ-ċelluli, li tissuġġerixxi l-inklużjoni possibbli tagħhom f'formulazzjonijiet topiċi differenti b'anti-aging. proprjetajiet, għat-trattament ta 'ġilda matura u bil-ħsara.

Cistanche jista 'anti-aging

2. Materjali u Metodi

L-inbejjed ħomor u bojod użati f’dan l-istudju kienu l-Buio, b’Denominazzjoni ta’ Oriġini Kontrollata, miksuba mill-għeneb Carignano del Sulcis, prodott minn Cantina Mesa, Sardegna, u Giunco, prodott mill-istess Cantina Mesa, miksub mill-għeneb Vermentino.

Għal esperimenti in vitro, in-line fibroblasts tal-ġilda umana (HFF1) (ATCC, Manassas, VA, USA) fil-passaġġ 5 ġew użati. Iċ-ċelloli tkabbru fil-preżenza ta' mezz ta' tkabbir bażali, magħmul minn Dulbecco's modified Eagle's medium (DMEM) (Life Technologies Grand Island, NY, USA) supplimentat b'10 fil-mija serum tal-fetu bovin (FBS) (Life Technologies). , Grand Island, NY, USA), 200 mM L-glutamina (Euroclone, Milano, Italja), u 200 U/mL penicillin—0.1 mg/mL streptomycin (Euroclone, Milano, Italja). Iċ-ċelloli tkabbru f'inkubaturi termostatiċi f'37 grad u 5 fil-mija (v/v)CO2. 2.1.Preparazzjoni ta 'Estratti ta' Inbid: Spray Dryer

Matul il-passi inizjali tar-riċerka, studjajna metodu biex titneħħa l-frazzjoni alkoħolika tal-inbejjed, tossika għaċ-ċelloli. Għall-proċedura tat-tnixxif intuża mini Spray Dryer B{{0}}(BUCHIItalia srl, Cornaredo, l-Italja). Inizjalment, alikwot ta '100 mL ta' nbejjed kien imnixxef b'temperaturi ta 'dħul u ħruġ (nitroġenu), rispettivament, ta' 25 u 70 grad; ir-rata tal-fluss kienet issettjata għal 15 fil-mija. Sussegwentement, porzjon ta '100mL ta' l-inbid ġie miżjud ma '0.2g ta' xanthan gum u volum minimu ta 'ilma meħtieġ għas-solubilizzazzjoni tal-gomma. It-temperaturi tad-dħul u tal-ħruġ (nitroġenu) kienu 135 u 70 grad , rispettivament; ir-rata tal-fluss tal-għalf kienet issettjata għal 12 fil-mija.

2.2.Preparazzjoni tal-Estratti tal-Inbid: Rotavapor

Evaporajna 500g eżatt u miżun inbejjed ħomor u bojod minn Buchi Rotavapor卵R-10 (BUCHI Italia srl, Cornaredo, Italja)f'garafina ta' 500mL, b'temperatura ta' 55 grad, veloċità ta' rotazzjoni tal-garafina ugwali għal 5, u kundizzjonijiet ta' vakwu ugwali għal 60 mmHg. Inizjalment, iż-żewġ kampjuni tal-inbid inġiebu kompletament niexfa. Imbagħad, aħna suġġettihom għal evaporazzjoni kkontrollata, b'ħin definit ta '20 min, biex tneħħi l-frazzjoni alkoħolika.

2.3.Analiżi HPLC

L-analiżi tal-kromatografija likwida-spettrometrija tal-massa (LC-MS) twettqet skont D'Urso et al. （2020） 【25】 b'modifiki żgħar. Fil-qosor, 5 μL ta' nbejjed ħomor u bojod qabel u wara l-evaporazzjoni rotavapor fil-konċentrazzjoni finali ta' 1 mg/mL (f'Ho) ġew injettati f'sistema ta' kromatografija likwida kkostitwita minn Accela 6 kwaternarju00 pompa u autosampler Accela, imqabbda ma’ spettrometru tal-massa ibridu lineari Trap-Orbitrap (LTQ-Orbitrap XL, Thermo Fisher Scientific, Bremen, il-Ġermanja) b’jonizzazzjoni elettrospray (ESI). Is-separazzjoni kromatografika saret fuq kolonna C18 Moon (100 × 2.0 mm, daqs tal-partiċella 5um; Phenomenex), bl-użu ta '0.1 fil-mija aċidu formiku (solvent A) u 0.1 fil-mija aċidu formiku (solvent B) H2O u CHSCN bħala fażijiet ta' eluwent. Il-gradjent binarju li ġej ġie applikat f'200 μL/min∶ 0-35 min, 5 sa 95 fil-mija （B） u 35-40 min, 95 fil-mija iżokratiku （B Parametri tas-sors ESI kienu kif ġej: Vultaġġ kapillari {{ 25}} V; vultaġġ tal-lenti tat-tubu-176.47; temperatura kapillari 280 grad; Ghat u Fluss tal-Gass Awżiljarju (N2),15 u 5; Gass tal-knes 0; Vultaġġ tal-isprej 5. L-ispettri tal-MS ġew akkwistati b'akkwist ta' firxa sħiħa li jkopri m/z180-1400. Għal studji ta 'frammentazzjoni, sar esperiment ta' skannjar li jiddependi mid-dejta, li ntgħażel joni prekursuri li jikkorrispondu għall-qċaċet l-aktar intensivi fl-analiżi LC-MS. Il-verżjoni 2.1 tas-softwer Xcalibur intużat għall-kontroll tal-istrumenti, l-akkwist tad-dejta u l-analiżi tad-dejta.

2.4.Assaġġ tal-Vijabilità MTT

Biex jiġi evalwat l-effett ċitotossiku possibbli tagħhom, l-estratti tal-inbid aħmar u abjad ġew ittestjati fuq HFFl f'konċentrazzjonijiet differenti (100,200,300,400, u 500mg/mL) minn 24 sa 72 siegħa totali, bl-użu tat-test kolorimetriku ta' 3- (4,5-dimethylthiazol-2-il)-2.5-diphenyltetrazolium (MTT) (Sigma-Aldrich, Saint Louis, MO, USA). Iċ-ċelloli vitali setgħu jnaqqsu dan il-kom-pound, li jipproduċu formazan li jista 'jiġi kkwantifikat bi spettrofotometru f'570 nm. L-HFF1 inżergħu f'konċentrazzjoni ta' 5000 ċellula/bir fi 96-pjanċi tal-bir. Ċelloli użati bħala kontroll mhux ittrattat tkabbru fl-uniku mezz bażiku tat-tkabbir. Fl-aħħar tal-perjodu ta 'inkubazzjoni, il-mezz li kien fih l-estratti tneħħa, u 10 μL ta' MTTT fil-konċentrazzjoni finali ta '0.65 mg/mL ġew miżjuda ma' kull bir u inkubati għal 2h.estensjoni tal-ħajja ta' cistancheWara l-inkubazzjoni, il-formazan ġie maħlul f'DMSO u l-assorbenza ġiet skoperta permezz ta 'qari spettrofotometriku f'570 nm (Akribis Scientific, Common Farm, Frog Ln, Knutsford WA16 OJG, Gran Brittanja). Il-vijabbiltà taċ-ċelloli kkultivati ​​fil-preżenza tad-diversi estratti ġiet ikkalkulata bħala perċentwali tal-vijabbiltà taċ-ċelluli meta mqabbla mal-kontroll mhux ittrattat: (ċelluli trattati OD570) × 100 / (kontroll OD570).

(1)

2.5.Attività Antiossidanti

L-attività antiossidanti ta 'estratti ta' l-inbid ġiet evalwata billi tiġi ttestjata l-attività tal-catalase, enzima li kapaċi tiddegrada l-perossidu ta 'l-idroġenu fl-ilma u l-ossiġnu. L-assaġġ kolorimetriku użat (Catalase Assay Kit) (Sigma-Aldrich, Saint Louis, MO, USA) jippermetti evalwazzjoni ta 'l-attività ta' din l-enzima f'ċelloli ttrattati permezz ta 'qari spettrofotometriku. Iċ-ċelloli ġew indotti għal senescence b'trattament ta' siegħa b'100 μM perossidu tal-idroġenu (H2O2) u sussegwentement ikkultivati ​​fil-preżenza tal-estratti f'diversi konċentrazzjonijiet (10, 200 300, 400, u 500 mg/mL) għal 24,48 , u 72 h. Iċ-ċelloli użati bħala kontroll pożittiv ta 'stress ossidattiv tkabbru fil-mezz ta' tkabbir bażali wara espożizzjoni għal H2. Iċ-ċelloli użati bħala kontroll tkabbru fil-mezz tat-tkabbir bażali waħdu, mingħajr espożizzjoni minn qabel għal H2O2. Fl-aħħar tal-ħin ta 'inkubazzjoni, il-kampjuni, kemm ittrattati kif ukoll kontrolli, ġew inkubati bir-reaġenti preżenti fil-kit f'temperatura tal-kamra għal 15-il minuta biex jevalwaw l-iżvilupp tal-kulur, u l-assorbiment ta' kull wieħed tkejjel b'qari spettrofotometriku f'520. nm (Akribis Xjentifiku, Razzett Komuni, Frog Ln, Knutsford WA16 OJG, il-Gran Brittanja). L-attività tal-catalase ġiet ikkalkulata fuq in-numru ta 'mikromoles preżenti f'kull kampjun u mqabbla mal-attività tal-kontroll mhux ittrattat.

2.6. -Assaġġ ta' Senescence Galactosidase

L-assaġġ kolorimetriku -galactosidase (Cell Signaling, MA, USA) intuża biex jidentifika ċelluli senescent fil-kultura. HFF1 tkabbar fi 24-pjanċi tal-bir, fil-preżenza ta 'estratti ta' inbid abjad u aħmar, f'konċentrazzjoni ta '500 mg/mL, għal total ta' 72 siegħa. Iċ-ċelloli kienu preċedentement indotti għal senescence b'trattament ta 'siegħa b'100 uM perossidu ta' l-idroġenu (H-O2)Fi tmiem il-ħin ta 'inkubazzjoni, il-medju li kien fih il-perossidi tneħħa, u l-mezz frisk li kien fih konċentrati kkundizzjonati ġie miżjud maċ-ċelloli. Ċelloli użati bħala kontroll mhux ittrattat ġew ikkultivati ​​fil-preżenza tal-mezz tat-tkabbir waħdu, mingħajr espożizzjoni minn qabel għal H2O2. Minflok, ċelloli ttrattati minn qabel bil-perossidi ntużaw bħala kontroll pożittiv tas-senescence, ikkultivati ​​fil-mezz ta 'tkabbir normali. Wara 72 siegħa ta 'trattament bl-estratti, iċ-ċelloli kollha ġew iffissati u inkubati biż-żebgħa għall-osservazzjoni taħt il-mikroskopju tad-dawl. 2.7.Analiżi Statistika

L-analiżi statistika saret bl-użu ta' Pakkett ta' l-Istatistika għall-verżjoni 13 tas-Software tax-Xjenzi Soċjali (SPSSInc, Chicago, IL, USA).cistanche nzL-esperimenti saru 2 darbiet bi 3 repliki tekniċi għal kull trattament. Id-distribuzzjonijiet ta’ kull varjanza tal-grupp ġew evalwati bis-somma tal-grad Kruskal-Wallis u t-test tal-rank iffirmat ta’ Wilcoxon, billi wieħed jassumi valur p<0.05 as="" statistically="">

3. Riżultati

3.1. L-Estrazzjoni tal-Inbid minn Rotavapor Ittejjeb il-Kwalità tal-Estrazzjoni billi żżomm il-Profili Fenoliċi tal-Inbejjed

L-ewwel tentattiv biex jinkiseb l-estratt ta 'l-inbid sar permezz ta' spray dryer, li kienet teknika veloċi u sempliċi adattata biex titneħħa l-frazzjoni alkoħolika mill-inbejjed. Xorta waħda, l-estratt miksub ma kienx adattat għall-ambitu tagħna, għalhekk, evaporazzjoni sempliċi u orħos taħt vakwu tqieset biex jinkiseb il-kampjun għall-analiżi bijoloġika u kimika. Nibdew minn 500 g ta 'inbid u jaħdmu f'55 grad, wara 20 min, 262g ta' estratt ġew irkuprati.

Sabiex tinstab kwalunkwe deterjorazzjoni tal-polifenoli li jinsabu fl-inbid matul il-pass tal-evaporazzjoni, il-kampjuni qabel u wara t-trattament ġew soġġetti għal analiżi tal-kromatografija likwida. Il-Figuri 1 u 2 juru l-profili LC-ESI-LTQ-Orbitrap MS ta 'nbejjed ħomor u bojod qabel u wara l-evaporazzjoni. L-akkwist tad-dejta sar fil-mod ta 'jonizzazzjoni negattiva; kien magħruf li l-mod ta 'jonizzazzjoni negattiva kien aktar selettiv u jippermetti li tinkiseb sensittività akbar għal komposti fenoliċi. Ġew identifikati 33 kompost fenoliku fil-kampjuni tal-inbid aħmar, u 26 kompost fil-kampjuni tal-inbid abjad (Tabelli 1 u 2). Il-marki tas-swaba 'wriet il-preżenza ta' aċidi fenoliċi, catechins, u proanthocyanidins, stilbenes, u flavonoid glycosides relatati fil-kampjuni. Il-profili tal-inbid aħmar qabel u wara l-evaporazzjoni wrew differenzi kwantitattivi żgħar (Figura 1). Kif mistenni, il-kromatogrammi tal-inbid aħmar kienu aktar iffullar meta mqabbla ma 'dawk tal-inbid abjad, li jfisser li l-inbid aħmar kien fih aktar komposti tal-polifenoli minn wieħed abjad. (Figura 2). Mil-lat kwalitattiv, il-kampjuni mhux ipproċessati u l-estratt tal-inbid korrispondenti kienu ekwivalenti.

3.2. L-Estratti tal-Inbid Itejbu l-Vijabilità taċ-Ċelloli u r-Reazzjoni Antiossidanti

L-assaġġ MIT wera n-nuqqas ta 'tossiċità ta' l-estratti ta 'l-inbid għall-konċentrazzjonijiet ittestjati kollha (Figura 3) u l-ħin ta' espożizzjoni, u żamm il-vijabbiltà taċ-ċelluli meta mqabbla ma 'ċelloli ta' kontroll mhux ittrattati. Għal konċentrazzjonijiet ogħla biss (400 u 500 mg/mL ta’ estratti ta’ inbid abjad u 500 mg/mL ta’ inbid aħmar), iċ-ċelloli wrew vijabbiltà taċ-ċelluli mnaqqsa b’mod sinifikanti wara 24 siegħa (pannell A) u 48 siegħa (pannell B), meta mqabbla ma’ tikkontrolla ċelluli mhux ittrattati. Iċ-ċelloli ttrattati bid-diversi estratti wrew ukoll attività antiossidant aħjar, li jistimulaw l-attività tal-catalase fid-degradazzjoni ta 'H-O2 fl-ossiġnu u l-ilma, jipproteġu ċ-ċelloli minn ħsarat indotti mill-istress ossidattiv (Figura 4). It-titjib tal-attività antiossidanti fiċ-ċelloli ttrattati, meta mqabbel mal-kontrolli, kien diġà viżibbli wara 24 siegħa ta 'trattament, speċjalment għal konċentrazzjonijiet ogħla (500 mg/mL) (Figura 4A), laħaq quċċata fi 48 siegħa, statistikament sinifikanti għal konċentrazzjonijiet ogħla ( Figura 4B) u mbagħad stabbilizzat wara 72h (Figura 4C).

3.3. L-Estratti tal-Inbid jikkontrobattu x-Xjuħija Ċellulari, Minkejja Espożizzjoni għal Avveniment Stressanti Qawwija

Il-Figura 5 turi l-attività ta' -galactosidase taħt diversi kundizzjonijiet ta' tkabbir. Ċelloli kkultivati ​​fil-preżenza taż-żewġ estratti (abjad u ħomor f'500 mg/mL) wrew tnaqqis ċar fin-numru ta 'ċelluli pożittivi blu, u, għalhekk, senescent, meta mqabbla ma' ċelluli ta 'kontroll mhux ittrattati kkultivati ​​fil-preżenza tal-uniku. medju tat-tkabbir (Ctrl) u għal ċelloli esposti għal H2O2 mingħajr estratti (Ctrl H2O2).

4. Diskussjoni

Il-polifenoli huma l-aktar molekuli bijoattivi abbundanti fl-inbid, li reċentement iffokaw ukoll ta' interess fil-qasam tal-applikazzjonijiet kożmetiċi [26]. Il-polifenoli huma grupp ta' komposti li jinsabu ħafna fil-pjanti, differenti ħafna mil-lat strutturali iżda responsabbli għall-proprjetajiet organolettiċi u nutrittivi tal-ikel u l-pjanti [14]. Għandhom ukoll effett pożittiv, jipproteġu kontra l-kanċer, mard kardjovaskulari, dijabete, osteoporożi, u mard newrodeġenerattiv [27-29]. Awturi oħra qabel iddeskrivew il-proprjetajiet tagħhom biex jikkontrobattu l-istress ossidattiv u l-infjammazzjoni [30]. B'mod partikolari, l-effett preventiv magħruf tal-aterosklerożi jiddependi fuq l-attività antiossidant tal-kolesterol LDL, li l-ossidazzjoni tiegħu twassal għall-qbid minn ċelluli bojod tad-demm segwit mill-formazzjoni ta 'plakka ateromatoża [31,32]. F'dan il-kuntest, l-inbid reċentement ħareġ bħala wieħed mill-aħjar modi biex jipprevjeni l-infezzjoni intestinali, li juri attività antivirali u anti-batterika kontra mikro-organiżmi Gram-pożittivi u Gram-negattivi, bħal salmonellożi, shigellosis, colibacillosis, staphylococci, u streptococci [334] .

Resveratrol huwa meqjus bħala wieħed mill-aktar antiossidanti effettivi preżenti fl-inbid, jipproteġi l-ġilda mir-radikali ħielsa u jdewwem il-proċess tat-tixjiħ bl-inibizzjoni tal-attivazzjoni tat-tyrosinase [35]. Barra minn hekk, jinfluwenza l-produzzjoni ta 'glycosaminoglycans, li jiffaċilitaw u jirregolaw it-tqassim mill-ġdid tal-ilma fid-dermis, jirrestawraw il-bilanċ tiegħu u jwasslu għal idratazzjoni dejjiema [36]. Barra minn hekk, resveratrol jimmodula ċ-ċikli taċ-ċelluli, l-apoptożi, u s-senescence, li juri effetti protettivi kontra l-ħsara ossidattiva tad-DNA[37]. L-aċidu galliku u d-derivattivi kollha tiegħu huma kkunsidrati bħala l-aċidi fenoliċi l-aktar importanti, b'attività għolja ta 'scavenging radikali ħielsa, kapaċi tinterferixxi mal-mogħdijiet tas-sinjalar taċ-ċelluli u l-apoptosi taċ-ċelloli tal-kanċer [38]. Flavonoids u anthocyanins jeżerċitaw attività antiossidant sinifikanti.daqs tal-pene cistancheHuwa magħruf sew għall-kapaċità mmarkata tiegħu li jnaqqas il-proliferazzjoni taċ-ċelluli tal-kanċer u li jipproteġi minn mard kardjovaskulari, obeżità u dijabete [39,40]. Barra minn hekk, huma wkoll involuti fil-modulazzjoni tal-funzjonijiet newronali u l-prevenzjoni ta 'mard relatat mal-età [41]. Proċedura ta' estrazzjoni effiċjenti hija ta' importanza kritika sabiex tinżamm l-istabbiltà tal-komposti fenoliċi[42]. F'dan il-kuntest, fid-dokument preżenti, aħna evalwajna l-komponenti ta 'żewġ tipi ta' estratti tal-inbid miksuba taħt evaporazzjoni bil-vakwu biex nipproduċu konċentrat mingħajr alkoħol. Biex tkun ċert li l-proċess ta 'evaporazzjoni ma affettwax il-kwalità u l-kwantità tal-inbid, il-profili kimiċi tal-kampjuni tal-inbid aħmar u abjad ġew analizzati u mqabbla ma' dawk wara l-evaporazzjoni. L-analiżi tal-marki tas-swaba 'tal-kampjuni wriet il-preżenza ta' ammonti kbar ta 'aċidi fenoliċi, catechins, u proanthocyanidins, stilbenes, u glikosidi flavonoid relatati (Figuri 1 u 2), utli bħala materja prima għall-preparazzjoni kosmetika topika [43]. L-effett terapewtiku potenzjali tagħhom f'ħafna disturbi tal-ġilda, inklużi feriti infettati u irradjazzjoni UV, huwa probabbilment relatat mal-azzjoni sinerġistika ta 'dawn il-molekuli bijoattivi [4]. Dawn il-komposti jistgħu jinibixxu enzimi li jiġġeneraw ROS bħal xanthine oxidase u nicotinamide adenine dinucleotide phosphate(NADPH)oxidase[45,46].

L-istress ossidattiv huwa kkawżat minn eċċess ta 'speċi ta' ossiġnu reattiv. ROS, derivat mit-telf ta 'elettroni waqt il-metaboliżmu aerobiku jew wara espożizzjoni għal fatturi ambjentali, huma speċi instabbli li kapaċi jinduċu bidliet fl-istruttura u l-funzjoni tal-bijomolekuli [47,48] Difiżi antiossidanti naturali huma involuti fiż-żamma tar-ROS f'livelli fiżjoloġikament adattati[49,50]. Kwalunkwe tibdil f’dan il-proċess jista’ jaffettwa b’mod negattiv it-tixjiħ tal-ġilda[51,52]. F'dan il-kuntest, ħafna estratti naturali huma magħrufa sew għall-effetti ta' benefiċċju tagħhom fl-istimulazzjoni tal-fejqan tal-feriti u r-risponsi antiossidanti fil-ġilda bil-ħsara wara espożizzjoni għal stress ambjentali [53-56]. Issa huwa magħruf li t-tixjiħ tal-ġilda jwassal għall-indeboliment tal-funzjoni tal-barriera, li jirriżulta f'dehra niexfa u suxxettibilità għall-aggressuri ambjentali, għalhekk, jirrappreżenta riskju ogħla għal disturbi tal-ġilda [57,58]. Barra minn hekk, il-fejqan tal-feriti huwa proċess kumpless u dinamiku ta 'tiswija, restawr tal-integrità tal-ġilda, u omeostasi tat-tessuti [59]. L-applikazzjoni topika ta 'molekuli antiossidanti attivi tista' tappoġġja s-sistema antiossidant tal-ġilda kontra l-istress ossidattiv, u b'hekk tipproteġiha mit-tixjiħ tar-ritratti fit-tul [24,60]. Huwa magħruf sew li molekuli bijoattivi, li jaġixxu bħala antiossidanti, huma kapaċi jikkontrobattu s-senescence taċ-ċelluli u l-proċessi tat-tixjiħ. Is-senescence taċ-ċelluli hija fażi stabbli ta' arrest tat-tkabbir taċ-ċelluli li tidher mis-sekrezzjoni ta' fatturi sekretorji assoċjati mal-fenotipi tas-senescence (SASP)[61]. SASP jista 'jimmodula ċelloli ġirien, li jwassal għall-attivazzjoni ta' kaskati ta 'sinjalazzjoni involuti fi proċessi patoloġiċi differenti [62]. Iċ-ċelloli senescent huma assoċjati ma 'tqassir tat-telomeri u milieu pro-infjammatorju stabbli, li jippromwovu t-transdifferenzjazzjoni taċ-ċelluli [63]. F'dan il-kuntest, reċentement urejna li Myrtus Communis L. turi proprjetajiet antiossidanti u riġenerattivi importanti billi jimmodula l-pluripotenza taċ-ċelloli staminali u r-rispons infjammatorju[64]. Estratti minn dan l-impjant, rikki fil-polifenoli, huma kapaċi jipproteġu ċ-ċelloli minn stress ossidattiv, jinduċu l-espressjoni ta 'telomerase reverse transcriptase (TERT) u jikkontrobattu s-senescence prematura [65].

Awturi oħra qabel urew li interventi terapewtiċi lejn ċelluli senescent jistgħu jirrestawraw is-saħħa billi jikkontrobattu l-infjammazzjoni kronika u jinduċu t-tiswija tal-feriti[66]. Madankollu, awturi oħra żvelaw ukoll li quercetin, flavonoids, u aċidu galliku jistgħu jipprevjenu korrimenti kkawżati permezz tal-attività diretta ta 'scavenging radikali ħielsa, li jappoġġjaw sistemi ta' ditossifikazzjoni taċ-ċelluli, bħal superoxide dismutase, catalase, u glutathione peroxidase [67]. Catalase hija waħda mill-aktar enzimi importanti involuti fid-ditossifikazzjoni tal-ROS, li d-disregolazzjoni tagħha twassal għal ħafna mard deġenerattiv assoċjat mal-età[68,69].cistanche trabHuwa magħruf sew li defiċjenza ta 'catalase hija relatata ma' ħsara renali dijabetika aċċellerata permezz ta 'disfunzjoni peroxisomal [70], u b'hekk tinfluwenza l-proċessi bijoloġiċi, inklużi l-proliferazzjoni taċ-ċelluli, id-divrenzjar, il-migrazzjoni u l-apoptożi [71]. Fid-dokument preżenti, nuru li l-estratti ta 'l-inbid aħmar u abjad, f'konċentrazzjonijiet differenti, huma kapaċi jikkontrobattu s-senescence taċ-ċelluli indotta minn stress ossidattiv, jimmodulaw l-attività ta' catalase, l-enzima prinċipali involuta fir-regolazzjoni ta 'stress ossidattiv (Figura 4) u -galactosidase (Figura 5). Ir-riżultati tagħna juru li l-estratti ta 'l-inbid huma kapaċi jikkontrobattu l-akkumulazzjoni ta' ROS, iżidu l-attività tal-catalase wara trattament H-O2, u b'hekk jipprevjenu mard kroniku tal-ġilda u jnaqqsu n-numru ta 'ċelluli senescent. Meħuda flimkien, is-sejbiet tagħna jissuġġerixxu li dawn l-estratti tal-inbid, miksuba taħt evaporazzjoni bil-vakwu, jistgħu għalhekk jirrappreżentaw materja prima interessanti għall-formulazzjoni ta 'prodotti kożmetiċi ġodda biex jikkontrobattu t-tixjiħ tal-ġilda. Aktar studji in vitro u in vivo wkoll fuq komposti singoli jistgħu jkunu ta’ għajnuna biex dawn ir-riżultati jiġu tradotti f’applikazzjonijiet futuri għar-riġenerazzjoni tat-tessuti.

5. Konklużjonijiet

It-tixjiħ tal-ġilda huwa proċess dinamiku u multifatturi indott mill-espożizzjoni UV u l-formazzjoni relatata ta 'speċi ta' ossiġnu reattiv. L-uniċi difiżi magħrufa kontra t-tixjiħ tar-ritratti huma l-filtri tax-xemx u l-antiossidanti, speċjalment flimkien, biex inaqqsu u jinnewtralizzaw il-produzzjoni ta 'radikali ħielsa. Fid-dokument preżenti, iffukajna l-attenzjoni fuq il-potenzjal antiossidant ta 'estratti ta' l-inbid, li l-flavonoids tagħhom huma kapaċi jikkontrobattu t-tixjiħ, speċjalment meta applikati għal ċelloli esposti għal avveniment stressanti mmarkat. Grazzi għal proċedura ta 'estrazzjoni ġdida, neħħejna l-frazzjoni alkoħolika mingħajr ma bdilna kwalitattivament il-komponenti antiossidanti tal-flavonojdi. Mil-lat ekonomiku, huwa ċar li l-inbid jiswa aktar minn diversi prodotti sekondarji. Huwa magħruf sew li l-industrija tal-kosmetiċi tuża wkoll diversi materja prima li tiswa aktar mill-inbid. L-estratti tal-inbid aħmar u abjad jistgħu għalhekk jirrappreżentaw materja prima interessanti għall-formulazzjoni ta 'prodotti kożmetiċi ġodda biex jikkontrobattu t-tixjiħ tal-ġilda u jtejjeb ir-riġenerazzjoni tat-tessuti.

Dan l-artikolu huwa estratt minn Antioxidants 2021, 10, 227. https://doi.org/10.3390/antiox10020227 https://www.mdpi.com/journal/antioxidants