Kuntatt:jerry.he@wecistanche.com

Ana Merino‑Ribas1,2,3,4 · Ricardo Araujo4 · Ioana Bancu1,2 · Fredzzia Graterol1,2 · Andrea Vergara5 · Marc Noguera‑Julian5 · Roger Paredes5 · Jordi Bonal2 · Benedita Sampaio‑Maia4,6

Riċevuta: 23 ta' Ġunju 2021 / Aċċettata: 8 ta' Diċembru 2021

© L-Awtur(i) 2021

Cistanche jista 'jtejjeb il-funzjoni tal-kliewi

Astratt

Għan Ġie ppruvat li l-mikrobijoma tal-imsaren huwa mibdul f'pazjenti b'mard kronikukliewimard. Dan jikkontribwixxi għal infjammazzjoni kronika u jżid ir-riskju kardjovaskulari u l-mortalità, speċjalment f'dawk li jkunu għaddejjin mill-emodijalisi. Il-legaturi tal-fosfati jistgħu potenzjalment jinduċu bidliet fil-mikrobijoma tagħhom. Din il-prova kellha l-għan li tqabbel il-bidliet fil-mikrobijoma tal-musrana ta 'pazjenti bl-emodijalisi kkurati b'aċetat tal-kalċju ma' dawk ittrattati b'ossidrossidu sucroferric.

Metodi Tnax-il pazjent bl-emodijalisi tqassmu biex jirċievu aċetat tal-kalċju jew sucroferric oxyhydroxide għal 5 xhur. Kampjuni tad-demm (għall-analiżi bijokimika) u kampjuni tal-ippurgar (għall-analiżi tal-mikrobijoma) inġabru fil-linja bażi, 4, 12, u 20 ġimgħa wara l-bidu tat-trattament. Id-DNA tal-ħmieġ ġie estratt u nbniet librerija ta' sekwenzar tal-rRNA 16S li timmira r-reġjuni ipervarjabbli V3 u V4.

Riżultati Rigward il-varjabbli kliniċi u l-parametri tal-laboratorju, ma ġew osservati l-ebda differenzi statistikament sinifikanti bejn il-gruppi tal-aċetat tal-kalċju jew ta' sucroferric oxyhydroxide. Meta analizzajna kampjuni tal-ippurgar, sibna li l-pazjenti kollha kienu differenti (p=0.001) bejniethom u dawn id-differenzi nżammu tul l-20 ġimgħa ta 'trattament. L-analiżi tar-raggruppament fil-profili mikrobjali raggruppat il-kampjuni tal-istess pazjent indipendentement mit-trattament segwit u l-istadju tal-

trattament.

Konklużjoni Dawn ir-riżultati jissuġġerixxu li trattament ta' 5-xahar jew b'aċetat tal-kalċju jew b'ossidrossidu sucroferric ma mmodifikax id-diversità tal-linja bażi jew il-kompożizzjoni batterjali tal-linja bażi f'pazjenti bl-emodijalisi, ukoll dwar il-profili ta 'varjabbiltà għolja tal-mikrobijoma tal-musrana misjuba fost dawn il-pazjenti.

Kliem ewlieni mikrobijoma tal-imsaren · Mard kroniku tal-kliewi · Emodijalisi · Phosphate binders · Sucroferric oxyhydroxide ·

Aċetat tal-kalċju

Introduzzjoni

KronikakliewiIl-marda (CKD) hija problema tas-saħħa pubblika madwar id-dinja, bi prevalenza dejjem tikber, piż ekonomiku għoli, u morbożità u mortalità elevati [1].

F'pazjenti CKD, il-patoloġija kardjovaskulari għandha rwol importanti. Dawn il-pazjenti jippreżentaw riskju akbar li jiżviluppaw mard kardjovaskulari (CVD) u rata ta 'mortalità kardjovaskulari 30 darba ogħla mill-popolazzjoni ġenerali [2]. Minbarra l-fatturi ta’ riskju kardjovaskulari tradizzjonali li ħafna drabi huma aktar prevalenti f’pazjenti affettwati minn CKD milli fil-popolazzjoni ġenerali, l-interkonnessjoni bejn CKD u CVD tista’ tiġi spjegata bil-preżenza ta’ diżordnijiet fl-għadam u minerali, status ta’ idratazzjoni, u infamazzjoni. li l-pazjenti tagħna jiżviluppaw.

Taħt kundizzjonijiet normali, l-infammazzjoni hija rispons protettiv u fiżjoloġiku għal diversi stimuli ħżiena. Madankollu, f'diversi disturbi debilitanti, bħal CKD, l-infammazzjoni ssir ta 'ħsara u persistenti [3]. Huwa magħruf sew li CKD hija akkumpanjata minn status infammatorju persistenti [4, 5]. L-infammazzjoni x'aktarx hija l-konsegwenza ta' etjoloġija multifatturi u jinteraġixxi ma' diversi fatturi li joħorġu meta jakkumulaw it-tossini uremiċi u ġiet deskritta bħala tbassir tal-mortalità kardjovaskulari u totali [6]. Barra minn hekk, hemm evidenza dejjem tikber li tappoġġja l-preżenza ta 'disfunzjoni tal-barriera intestinali u alterazzjonijiet fil-kompożizzjoni tal-mikrobijota tal-musrana f'CKD, komunement imsejħa dysbiosis tal-musrana [7-9]. Dan l-istat diżbijotiku b'mod konkomitanti jiġġenera prodotti sekondarji tossiċi u jikkontribwixxi għall-istatus kroniku ta 'stress ossidattiv u infammazzjoni f'dawn il-pazjenti [10-12].

Diversi fatturi jikkontribwixxu għal dysbiosis mikrobjali fl-imsaren f'pazjenti b'CKD avvanzata. L-akkumulazzjoni ta 'urea fil-fluids tal-ġisem u d-difużjoni tagħha fil-passaġġ gastrointestinali jwasslu għall-espansjoni ta' batterji li jippossjedu l-urease. Ukoll, l-idroliżi tal-urea tiġġenera prodotti li jiddegradaw il-junction stretta epiteljali, u b'hekk tiffaċilita t-traslokazzjoni ta 'endotossini u frammenti mikrobiċi fiċ-ċirkolazzjoni sistemika [7, 8, 10, 13-15]. Rakkomandazzjonijiet tad-dieta f’CKD inkluż konsum ristrett ta’ potassju, fosfat, sodju, u proteini jirriżultaw f’konsum baxx ta’ karboidrati fermentabbli u dan jista’ jwassal għal espansjoni ta’ speċi proteolitiċi u ġenerazzjoni akbar ta’ tossini batteriċi [12, 13, 16]. Barra minn hekk, pazjenti b'CKD huma komunement assoċjati ma' kundizzjonijiet komorbożi oħra, bħad-dijabete, mard awtoimmuni, u pressjoni għolja. Dawn il-komorbiditajiet kollha jirriżultaw per se f'alterazzjonijiet tal-mikrobijota tal-musrana [17, 18].

Fattur importanti ħafna li jiffavorixxi dysbiosis huma d-drogi. Huwa magħruf sew li pazjenti b'CKD avvanzata huma normalment poli-medikati. Supplimentazzjoni tal-ħadid jew antibijotiċi, użati ta 'spiss fil-pazjenti tagħna, intwerew li jbiddlu l-mikrobijoma tal-musrana [19-21]. Madankollu, l-effetti fuq il-mikrobijoma tal-imsaren ta 'mediċini oħra użati ħafna f'pazjenti CKD għadhom mhux magħrufa.

Il-biċċa l-kbira tal-pazjenti bl-emodijalisi għandhom it-tendenza li jippreżentaw iperfosfatemija u jeħtieġu dożi għoljin ta’ tipi differenti ta’ sustanzi li jgħaqqdu l-fosfati biex jikkoreġu din il-kundizzjoni. Il-legaturi tal-fosfati jistgħu jiġu kklassifikati bħala sustanzi li jgħaqqdu l-fosfati tal-kalċju u mhux ibbażati fuq il-kalċju. Ġie deskritt li ż-żewġ gruppi ta 'aġenti li jorbtu l-fosfati jistgħu potenzjalment jipproduċu bidliet fil-kompożizzjoni tal-mikrobijoma [22-25].

Riċentement, ġew approvati aġenti ġodda li jgħaqqdu l-fosfati mhux ibbażati fuq il-kalċju għat-trattament tal-iperfosfatemja f'suġġetti tal-emodijalisi. Xi wħud minn dawn l-aġenti ġodda, bħal sucroferric oxyhydroxide (SFO) u ferric citrate, iżommu ħadid fil-kompożizzjonijiet tagħhom. Huwa maħsub li, minħabba r-rwol kritiku tal-ħadid fit-tkabbir tal-mikrobi u l-virulenza, it-tagħbija kbira tal-ħadid amministrata b'dawn il-mediċini, tista 'tbiddel il-kompożizzjoni tal-mikrobijoma tal-musrana [26, 27]. Madankollu, għad hemm ftit evidenza dwar l-effetti ta 'dawn il-legaturi tal-fosfat ġodda fuq il-mikrobijoma tal-musrana [25].

Minħabba l-importanza tal-mikrobijoma tal-imsaren mibdul f'pazjenti b'CKD u l-kontribut tiegħu għall-istat infamatorju tagħhom, u n-nuqqas ta 'informazzjoni dwar l-effetti fuq il-mikrobijoma tal-musrana ta' dawn il-mediċini li llum jintużaw ħafna, iddeċidejna li nissorveljaw u nqabblu l-bidliet fuq il-mikrobijoma tal-imsaren. ta’ pazjenti li qed jagħmlu l-emodijalisi li jieħdu SFO jew aċetat tal-kalċju (CA) li jgħaqqad il-fosfat ibbażat fuq il-kalċju.

materjali u metodi

Reklutaġġ

Tnax-il pazjent fuq l-emodijalisi fl-Isptar Universitari Germans Trias i Pujol ġew mistiedna biex jipparteċipaw fl-istudju tagħna b'segwitu ta' 5-xahar. Is-suġġetti kollha ġew reklutati mid-Dipartiment tal-Emodijalisi tal-Isptar Universitari Germans Trias i Pujol, f'Badalona, ​​Spanja. Il-pazjenti kollha kellhom aktar minn 18-il sena u kienu ilhom fuq l-emodijalisi għal mill-inqas sena (sessjonijiet ta’ 4 sigħat, 3 sessjonijiet fil-ġimgħa). Dan l-istudju ġie approvat mill-Kumitat tal-Etika tar-Riċerka Klinika tal-Isptar Universitari Germans Trias i Pujol (PI-16-169, NCT5551048) u kkonforma mal-prinċipji deskritti fid-Dikjarazzjoni ta' Ħelsinki. Il-parteċipanti kollha ġew reklutati volontarjament wara li rċevew informazzjoni dettaljata dwar il-protokoll tal-istudju. Il-kunsens infurmat bil-miktub inkiseb mill-pazjenti kollha.

Il-kriterji ta' esklużjoni kienu jinkludu l-inkapaċità li jingħata kunsens infurmat, storja ta' mard gastrointestinali, dħul fl-isptar, u teħid ta' antibijotiċi fl-aħħar 3 xhur.

Informazzjoni klinika u demografika rilevanti nġabret għal kull individwu fil-linja bażi. Karatteristiċi kliniċi miġbura kienu: sess, età, etjoloġija CKD, storja ta 'pressjoni tad-demm għolja, dijabete mellitus, dyslipi- demia, mard kardjovaskulari (mard vaskulari periferali, kardjomijopatija iskemika jew puplesija), u kanċer.

Ġbarna wkoll informazzjoni dwar l-aċċess vaskulari tagħhom, u t-trattament preċedenti tagħhom tal-fosfat li jgħaqqad fil-bidu tal-istudju (disgħa rċevew aċetat tal-kalċju, wieħed irċieva karbonat tal-kalċju, u tnejn ma ġewx ittrattati qabel għal iperfosfatemja).

Qsamna pazjenti f'żewġ gruppi, u biddilna t-trattament tagħhom għall-iperfosfatemja: 5 pazjenti tpoġġew fi grupp CA (4 komplew it-terapija CA u pazjent 1 qed jinbidel mit-terapija bil-karbonat tal-kalċju) u 7 inbidlu għal SFO (5 jinbidlu minn terapija CA u 2). jibda trattament li jgħaqqad il-fosfat).

Ġbir tal-kampjuni

Inġabru kampjuni tal-ħmieġ minn 12-il pazjent bl-emodijalisi li rċevew sustanzi li jgħaqqdu l-fosfat, 5 fil-grupp CA u 7 fil-grupp SFO. Aħna niġbru wkoll kampjuni tad-demm mill-kontrolli ta' rutina li saru fl-unità tal-emodijalisi tagħna. Il-kampjuni (kampjuni tad-demm u tal-ħmieġ) inġabru f'segwitu ta' 5-xahar: fil-linja bażi, 4, 12, u 20 ġimgħa wara l-bidu tat-trattament.

F'kampjuni tad-demm, analizzajna l-parametri li ġejjin: emoglobina, ferritin, indiċi ta 'saturazzjoni ta' transferrin, kalċju, fosfat, ormon tal-paratirojde, proteina C-reattiva, veloċità tas-sedimentazzjoni u albumina.

Estrazzjoni tad-DNA, kostruzzjoni ta' librerija, u sekwenzar....

Id-DNA tal-ħmieġ ġie estratt minn Powersoil DNA Isolation Kit MoBio, u nbniet librerija ta' sekwenzar 16S rRNA li timmira r-reġjuni ipervarjabbli V3 u V4.

Is-sekwenzjar sar fuq pjattaforma MiSeq (2 × 300). Il-kostruzzjoni tat-tabella OTU, l-assenjazzjoni tassonomika, u l-analiżi deskrittiva u statistika twettqu bl-użu tal-verżjoni R 3.4.2. u pakketti differenti (DADA 2, vega, ggplot, phyloseq) u d-database tal-rRNA Greengenes.

Dejta u analiżi statistika

Primer v7 (PRIMER-e, Auckland, New Zealand) intuża għall-kalkolu tal-indiċi tad-diversità, analiżi tal-perċentwali ta’ xebh (SIMPER), u analiżi multivarjata, prinċipalment analiżi ta’ similaritajiet (ANOSIM) analiżi one-way u analiżi multivarjata permutazzjonali tal-varjanza ( PER- MANOVA; bl-użu ta 'data trasformata ta' għerq kwadrat, similaritajiet Bray-Cur- tis u 4999 permutazzjonijiet ta 'residwi taħt mudell imnaqqas) użati biex jittestjaw is-sinifikat ta' Beta-diversità. Il-perċentwal ta 'dejta OTU għal kull kampjun intuża għal dawn l-analiżi, segwit minn dejta trasformata ta' għerq kwadrat, matriċi ta 'xebh ta' tipi ta 'dejta ta' xebh, bl-użu ta 'xebh ta' Bray-Curtis, iż-żieda ta 'valur finta, u l-ittestjar ta' 4999 permutazzjonijiet. STAMP intuża għall-analiżi ta' profili tassonomiċi fost gruppi ta' kampjuni u l-kalkolu tad-differenzi statistiċi [28].

Għat-trattament statistiku tad-dejta klinika, intuża s-software ta' analiżi statistika Statistical Package for Social Sciences (SPSS) 26.0 għal MAC OS. Il-varjabbli kategoriċi ġew deskritti permezz ta' frekwenzi relattivi (perċentwali) filwaqt li varjabbli kontinwi ġew deskritti bl-użu ta' medja ± devjazzjoni standard (SD). Meta approprjajna applikajna test ta' indipendenza ta' Chi-kwadru biex nanalizzaw ipoteżijiet rigward il-varjabbli kategoriċi u t-test ta' Student dwar varjabbli kontinwi. Livell ta' 0.05 kien ikkunsidrat sinifikanti.

Riżultati

Il-parametri kliniċi ewlenin ma kinux differenti bejn pazjenti assenjati għal gruppi CA jew SFO fil-linja bażi (Tabella 1). Osservajna li fil-grupp CA, kien hemm żieda fil-prevalenza, iżda mhux statistikament sinifikanti, fl-istorja ta 'pressjoni għolja arterjali, dislipidemija, mard vaskulari periferali, puplesija, kardjomijopatija iskemika milli fil-grupp SFO. Il-pazjenti assenjati għall-grupp SFO ppreżentaw inċidenza akbar ta 'kateter bħala aċċess vaskulari, iżda wkoll mhux statistikament sinifikanti.

Fil-linja bażi, l-ebda pazjent ma kien ikkurat b'SFO, xi wħud kienu kkurati b'CA fiż-żewġ gruppi ta' trattament, u 2 pazjenti fil-grupp SFO m'għandhom l-ebda kura li torbot il-fosfat. F'dan il-punt ta 'żmien, ma sibna l-ebda differenzi statistikament sinifikanti fir-rigward ta' parametri tal-laboratorju, bħal emoglobina, ferritin, indiċi ta 'saturazzjoni ta' transferrin, kalċju, fosfat, ormon paratirojde, proteina C-reattiva, veloċità ta 'sedimentazzjoni u albumina (Tabella 2). B'mod kollettiv, aħna osservati fil-grupp SFO fil-linja bażi ogħla transferrin saturazzjoni indiċi, u valuri aktar baxxi ta 'C-proteina reattiva mill-grupp CA, iżda dawk id-differenzi ma kinux statistikament signif- cant. Aħna nnutajna wkoll f'pazjenti assenjati għall-grupp CA, tendenza akbar għall-iperfosfatemja fil-linja bażi, iżda dan ukoll ma kienx statistikament sinifikanti.

Fit-Tabella 2, aħna nippreżentaw l-evoluzzjoni tal-parametri tal-laboratorju fuq il-punti ta 'żmien differenti. Aħna sibna li fil-grupp CA, il-kalċju 20-ġimgħa kien ogħla milli fil-grupp SFO b'sinjifikanza statistika (p=0.02). Il-veloċità tas-sedimentazzjoni żdiedet fil-grupp CA fit-12-il ġimgħa tat-trattament meta mqabbla mal-grupp SFO, bi

Tabella 1 Karatterizzazzjoni klinika ta' pazjenti li jkunu qed jagħmlu aċetat tal-kalċju (CA) jew sucroferric oxyhydroxide (SFO) bħala aġent li jgħaqqad il-fosfat

Il-valuri huma mezzi ± SD jew frekwenzi relattivi ( fil-mija ). Ma nstabu l-ebda differenzi statistikament bejn CA vs SFO

Tabella 2 Dejta klinika tal-laboratorju ta’ pazjenti li jkunu qed jieħdu calcium acetate (CA) jew sucroferric oxyhydroxide (SFO) bħala aġent li jgħaqqad il-fosfat

Il-valuri huma mezzi ± SD. *Valuri f'SFO huma differenti b'mod sinifikanti minn CA

sinjifcanza statistika (p {{0}}.04). Ukoll, albumina aktar baxxa statistikament sinifikanti kienet osservata fil-grupp SFO fi trattament ta' 20-ġimgħa meta nqabbluha mal-grupp CA (p < 0.01).="" il-livelli="" ta'="" ferritin="" fiż-żewġ="" gruppi="" fil-linja="" bażi="" u="" wara="" 20="" ġimgħa="" ta'="" kura="" kienu="" għoljin="" fiż-żewġ="" gruppi,="" u="" ż-żewġ="" gruppi="" jiksbu="" livelli="" normali="" ta'="" fosfat="" fl-20="" ġimgħa="" ta'="" kura,="" mingħajr="" differenzi="" statistikament="" sinifikanti.="" il-livelli="" ta'="" indiċi="" ta'="" saturazzjoni="" ta'="" transferrin,="" parathormone,="" proteina="" c-reattiva,="" veloċità="" ta'="" sedimentazzjoni,="" u="" albumina,="" f'20="" ġimgħa="" ta'="" kura="" kienu="" simili="" fiż-żewġ="">

Il-kampjuni tal-punti kollha tal-ħin (linja bażi, ġimgħa 4, ġimgħa 12, u ġimgħa 20) inġabru fi tmienja mit-tnax-il individwu totali, f'total ta' 38 kampjun ta' ippurgar u demm. Mis-sett inizjali ta’ 12-il pazjent, il-pazjent 7 (grupp SFO) waqa’ minħabba li ġie derivat fi sptar ieħor minħabba raġunijiet kliniċi u ma nistgħux nissorveljaw aktar il-varjabbli kollha rilevanti għall-istudju, il-pazjent 3 (grupp SFO) irċievakliewitrapjant qabel il-ġbir ta' 20-kampjuni ta' ġimgħa, il-pazjent 9 (grupp SFO) miet qabel il-ġbir ta' 12-kampjuni ta' ġimgħa, u stajna niksbu biss kampjuni ta' kwalità tajba għall-mikrobijoma tal-musrana mit-12 u l-ġimgħa 20. fuq il-pazjent 8 (grupp SFO).

Is-sett ta' 38 kampjun tal-ħmieġ wera aktar minn 2 miljun qari, imbagħad ikklassifikati bl-użu tad-database Greengenes. Instabu numru għoli ta 'ASVs (33,734) fost il-kampjuni ttestjati u kklassifikati bħala li jappartjenu għar-renju Batterji. Id-diversità Shannon ġiet imkejla f'kull kampjun u l-grupp ta '38 kampjun wera valuri għad-diversità Shannon li jvarjaw minn 6.2 sa 7.7.

Interessanti, sibna li l-pazjenti kollha kienu differenti ħafna bejniethom (p=0.001) meta tqabbel pazjent ma 'pazjent ieħor fil-linja bażi (Fig. 1A). Dawn id-differenzi fost il-pazjenti nżammu matul l-20 ġimgħa ta' kura; ma kien hemm l-ebda differenzi sinifikanti (p> 0.05) meta l-kampjuni kienu miġbura f'grupp ta' ġimgħa ta' trattament (linja bażi, 4, 12, jew 20 ġimgħa). Huwa importanti li wieħed jinnota li l-mikrobijoma tal-imsaren instab stabbli matul l-20 ġimgħa ta 'studju f'pazjenti li kienu fuq CA qabel l-istudju u żamm dak terapewtiku fi ħdan il-protokoll tal-istudju, u wkoll f'pazjenti li bidlu t-terapewtiċi li jorbtu l-fosfat (minn ebda trattament. , CA jew karbonat tal-kalċju għal CA jew SFO).

Meta qabbilna l-profili mikrobjali tal-pazjenti kkurati b'CA kontra SFO meta wieħed iqis il-punti kollha ta 'żmien, sibna differenzi statistiċi (Fig. 1B); u dawn id-differenzi kienu kkonfermati minn ANOSIM (p=0.002) u PERMANOVA (p=0.001). Din l-analiżi statistika saret indipendentement mid-differenzi osservati fil-linja bażi.

Il-komunitajiet batterjali ġew studjati u Bacteroidetes u Firmicutes kienu l-aktar phyla komuni misjuba fil-kampjuni tal-ħmieġ, segwiti minn Proteobacteria, Actinobac- teria, u Verrucomicrobia. Infittxu differenzi aktar speċifiċi ta' kompożizzjoni, qabbilna livelli tassonomiċi multipli fost dawn il-kampjuni. Meta tanalizza l-batterja

Fig. 1 Analiżi Koordinata Prinċipali (PCO) tal-profili tal-mikrobijoma għal pazjenti multipli. B Analiżi Koordinata Prinċipali (PCO) tal-profili tal-mikrobijoma għat-trattamenti tad-droga (aċetat tal-kalċju kontra ossidrossidu sucroferric)

kompożizzjoni fil-livell tal-ġeneru, Bacteroides kien l-aktar prevalenti fiż-żewġ gruppi ta 'pazjenti, indipendentement jekk kienu ttrattati jew b'CA jew SFO (Fig. 2). Il-profili tal-mikrobi kienu distinti ħafna fost il-pazjenti u, għal darb'oħra, l-analiżi tal-clustering raggruppat il-kampjuni tal-istess pazjent indipendentement mit-trattament segwit u l-istadju tat-trattament (linja bażi, 4, 12, jew 20 ġimgħa).

Meta nikkunsidraw il-punti kollha tal-ħin (il-pazjenti kollha u l-ġimgħat kollha), kien possibbli li jinstabu differenzi statistiċi (p <{0}}.05) għall-komunitajiet="" tal-mikrobi="" meta="" nqabblu="" l-kampjuni="" għal="" varjabbli="" multipli,="" inkluż="" is-sess,="" kardjomijopatija="" iskemika,="" l-użu="" ta="" 'kateter="" bħala="" aċċess="" vaskulari,="" jew="" età="" (il-pazjenti="" kienu="" organizzati="" fi="" tliet="" gruppi:="" taħt="" 45,="" medda="" 61-69,="" fuq="" 71).="" tali="" differenzi="" statistiċi="" ma="" setgħux="" jiġu="" osservati="" meta="" kull="" stadju="" tat-trattament="" (linja="" bażi,="" 4,="" 12,="" jew="" 20="" ġimgħa)="" kien="" ikkunsidrat="" separatament;="" għalhekk,="" ma="" ġew="" osservati="" l-ebda="" differenzi="" għall-varjabbli="" sess,="" età,="" kardjomijopatija="" iskemika,="" użu="" ta="" 'kateter,="" u="" trattamenti="" tad-droga="" (ca="" versus="">

Diskussjoni

Dan huwa l-ewwel studju li jqabbel il-bidliet fil-mikrobijoma tal-musrana ta 'pazjenti bl-emodijalisi li qed jieħdu CA kontra SFO. Fl-istudju tagħna, ma kien hemm l-ebda differenzi konsistenti fil-kompożizzjoni batterjali tal-mikrobijoma tal-musrana bejn dawn l-aġenti differenti li jorbtu l-fosfat. Għalkemm sibna profili ta' mikrobijoma differenti meta tqabblu ż-żewġ gruppi ta' trattament, dan il-profil differenti kien diġà preżenti fil-linja bażi, u trattament fit-tul ma mmodifikax din id-diversità fi kwalunkwe miż-żewġ gruppi. Għalhekk, l-ebda tibdil sinifikanti

Fig. 2 Analiżi tal-clustering u profili tal-mikrobijoma (fil-livell tal-ġeneru) għall-kampjuni kkunsidrati f'dan l-istudju

kienu osservati fuq punti ta’ żmien differenti (linja bażi, ġimgħa 4, ġimgħa 12, ġimgħa 20) f’suġġetti tal-emodijalisi mikrobijoma tal-musrana ttrattati b’CA kontra dawk ittrattati b’SFO.

Il-mikrobijoma tal-imsaren tal-pazjenti tagħna huwa skont rapporti preċedenti, iddominat minn Bacteroidetes u Firmicutes phyla, li huma Actinobacteria, Proteobacteria u Verrucomicrobia fit-tieni linja ta 'kolonizzazzjoni [29]. Kif diskuss qabel b'mod estensiv, il-pazjenti CKD għandhom bosta fatturi intrinsiċi li jippromwovu d-disbijożi tal-musrana minbarra t-terapiji farmakoloġiċi, jiġifieri t-tranżitu tal-kolon imnaqqas, kapaċità diġestiva mibdula, aċidożi metabolika, edema tal-ħajt intestinali, u wieħed mill-aktar importanti, l-intestini għolja. disponibbiltà ta’ tossini uremiċi. Meta mqabbel ma 'kontrolli b'saħħithom, pazjenti li jkunu qed jagħmlu l-emodijalisi jippreżentaw abbundanza akbar ta' Bacteroidetes [30], li tikkorrobora wkoll ir-riżultati tal-istudju tagħna.

Ftit hemm evidenza dwar l-effett tal-legaturi tal-fosfat fuq il-mikrobijoma tal-musrana [25]. Studji li jivvalutaw l-effetti ta 'legaturi tal-fosfat ibbażati fuq il-kalċju, inkluż CA, fuq il-mikrobijoma tal-musrana ta' pazjenti CKD, li janalizzaw kampjuni tal-ħmieġ, huma neqsin [31]. Trautvetter et al. [32], osserva żieda fl-aċidi grassi totali ta' katina qasira tal-ħmieġ u abbundanza relattiva ogħla tal-ġeneru Clostridium XVIII f'individwi b'saħħithom li jieħdu karbonat tal-kalċju. Navarro-Gonzalez et al. [22], analizza kampjuni tas-serum ta’ pazjenti bl-emodijalisi meħuda jew is-sevelamer li jgħaqqad il-fosfat mhux ibbażat fuq il-kalċju jew il-binder tal-fosfat ibbażat fuq il-kalċju CA u kkonkluda li t-trattament b’sevelamer kien assoċjat ma’ tnaqqis sinifikanti fil-proteina C-reattiva ta’ sensittività għolja, IL. -6, endotossina fis-serum, u konċentrazzjonijiet solubbli ta' CD14 tbassir indipendenti tal-mortalità f'pazjenti bl-emodijalisi.

SFO huwa binder tal-fosfat ibbażat fuq il-ħadid, u d-dejta ssuġġeriet li l-ħadid li jinsab fil-kompost jista 'jaqleb il-mikrobijota tal-musrana minħabba li xi batterji tal-musrana jużaw il-ħadid biex iżidu l-abbundanza relattiva [26, 33, 34]. Barra minn hekk, intwera li żieda fl-ammont ta 'ħadid li jilħaq il-kolon tista' tippromwovi virulenza ta 'xi batterji patoġeniċi u ambjent pro-infammatorju [20, 35]. Iżda minkejja din l-evidenza, l-istudju tagħna juri li t-trattament SFO f'pazjenti bl-emodijalisi ma jidhirx li jimmodifika l-mikrobijoma tal-musrana, u lanqas it-trattament CA.

Ling Lau et al. [27], qabbel mikrobijoma fekali u tossini uremiċi f'kampjuni tas-serum bejn firien CKD (li għaddew minn 5/6 nefrectomija) u firien normali, assenjati b'mod każwali għal dieta regolari jew dieta li jkun fiha 4 fil-mija ċifrat ferriku għal 6 ġimgħat. Huma osservaw li l-firien CKD kellhom abbundenzi relattivi aktar baxxi ta 'xi Firmicutes u Lactobacillus u diversità mikrobjali tal-musrana aktar baxxa meta mqabbla ma' firien normali, iżda ddeskrivew ukoll li t-trattament taċ-ċitrat ferriku fil-firien CKD żied id-diversità batterjali kważi għal-livelli osservati fil-firien ta 'kontroll u li dan it-trattament. ma żiedx it-tossini uremiċi. Fi studju riċenti, Wu et al. [36], qabbel pazjenti bl-emodijalisi mikrobijoma tal-musrana ttrattati jew b'karbonat tal-kalċju jew b'ċitrat ferriku. Huma osservaw diversità mikrobjali miżjuda b'mod sinifikanti fil-grupp ittrattat b'ċitrat ferriku, b'abbundanza akbar ta 'Bacteroidetes u abbundanza mnaqqsa ta' Firmicutes.

Sa fejn nafu aħna, hemm studju wieħed biss imwettaq fil-bnedmin dwar l-effett SFO fuq il-mikrobijoma tal-musrana. Iguchi et al. [37], qabbel bidliet ta' 3 xhur fil-mikrobijoma tal-imsaren u tossini uremiċi ta' pazjenti bl-emodijalisi kkurati jew b'SFO kontra l-ebda trattament għall-iperfosfatemija. Ma sabu wkoll l-ebda tibdil fil-mikrobijoma tal-imsaren f'pazjenti kkurati b'SFO matul iż-żmien. Għalhekk, l-istudju tagħna jikkonferma din l-istabbiltà fit-tul tal-mikrobijoma tal-musrana f'pazjenti bl-emodijalisi kkurati b'SFO għal 5 xhur.

Punt ieħor importanti li għandu jiġi diskuss huwa li fl-istudju tagħna, osservajna differenzi fil-mikrobijoma tal-musrana tal-pazjenti bl-emodijalisi meta mqabbla bl-età jew is-sess, iżda ma sibniex differenzi meta nqabbluhom skont il-grupp ta 'trattament (CA kontra SFO). Skont, xi alterazzjonijiet intwerew fil-mikrobijoma tal-imsaren bit-tixjiħ [38]. Pazjenti anzjani, speċjalment dawk b'punteġġi għolja ta' fraġilità, jippreżentaw proporzjonijiet relattivi ta' predominanti ta' Bacteroidetes, inqas diversità mikrobjali, u tnaqqis fil-Bifdobacteria, Bacteroides/Prevotella, Lactobacillus u Clostridium cluster IV, meta mqabbla ma' individwi żgħażagħ, li jippreżentaw aktar diversità mikrobjali. u proporzjonijiet ogħla ta 'Firmicutes, fost oħrajn [39, 40]. Hemm ukoll evidenza dejjem tikber li tappoġġja li hemm alterazzjonijiet fil-mikrobijoma tal-musrana jekk jitqabblu n-nisa u l-irġiel [41, 42]. Fl-istudju tagħna, ġew osservati xi differenzi fil-mikrobijoma tal-musrana skont is-sess u l-età, iżda d-differenzi misjuba fost kull pazjent kienu ħafna aktar evidenti.

Rigward is-sejbiet tal-laboratorju, kif mistenni, pazjenti kkurati bil-binder tal-fosfat ibbażat fuq il-kalċju CA ppreżentaw livelli ogħla ta 'kalċju minn dawk ittrattati b'SFO. Aħna osservajna, għalkemm mhux statistikament sinifikanti, livelli miżjuda ta 'parametri infjammatorji, bħall-veloċità tas-sedimentazzjoni, proteina C-reattiva, u ferritin fil-grupp CA meta mqabbla mal-grupp SFO; tali effett plejotropiku fuq l-infjammazzjoni li qed tonqos kien deskritt għal xi sustanzi li jgħaqqdu l-fosfat minbarra dawk li jgħaqqdu bbażati fuq il-kalċju [43].

Huwa essenzjali li wieħed jikkunsidra li l-istudju tagħna jippreżenta xi limitazzjonijiet. Min-naħa waħda, id-daqs tal-kampjun tal-pazjent huwa żgħir, għalhekk huwa diffiċli li wieħed jiġbed konklużjonijiet solidi, speċjalment dwar l-effetti tal-varjabbli kliniċi u bijokimiċi analizzati. Biex nivvalidaw ir-riżultati tagħna, huwa meħtieġ studju akbar, b'numru akbar ta 'pazjenti. Min-naħa l-oħra, il-pazjenti tagħna juru sfondi differenti, b'komorbiditajiet distintivi li jistgħu jinfluwenzaw il-mikrobijoma tal-musrana. Allura, l-istudju tagħna javża dwar il-varjabbiltà għolja ta 'profili misjuba fuq il-mikrobijoma tal-imsaren ta' pazjenti li jirċievu sustanzi li jgħaqqdu l-fosfat. Dawn id-differenzi jillimitaw kwalunkwe konklużjonijiet u differenzi addizzjonali misjuba fost il-pazjenti li qed jirċievu sustanzi li jgħaqqdu l-fosfati differenti.

Kif irrapurtajna, biex infittxu jekk varjabbli klinika speċifika tistax tinfluwenza dan il-profil tal-mikrobijoma differenzjat, analizzajna l-parametri kliniċi ewlenin fil-linja bażi tal-pazjenti tagħna u ma sibniex differenzi statistikament sinifikanti bejn iż-żewġ gruppi ta 'trattament. Il-pazjenti 5 u 6 kienu xi ftit barra mill-ordni u jista' jingħad li l-pazjent 5 irċieva vancomycin u tobramycin għal 3 ġimgħat, filwaqt li l-pazjent 6 ippreżenta dijarea kronika b'kulturi negattivi ripetutament u sindromu ta' ħela possibbli assoċjati.

Fl-istudju tagħna, ma osservajna l-ebda tibdil fil-mikro-bijoma tal-imsaren tal-pazjenti tal-emodijalisi tagħna wara 20 ġimgħa ta 'trattament, indipendentement mill-binder tal-fosfat. Għalissa, meta nagħżlu binder tal-fosfat, għandna niddependu fuq il-qawwa tagħhom fuq it-tnaqqis tal-fosfat tas-serum, il-piż tal-pilloli, l-assoċjazzjoni mal-progress tal-kalċifikazzjoni vaskulari, l-avvenimenti avversi, jew it-tolleranza gastrointestinali [44-47]; għalkemm l-influwenza ta 'dawn il-legaturi tal-fosfat fuq il-mikrobijoma tal-musrana kienet mistennija, u għadha possibbli, għalissa, m'hemm l-ebda evidenza li dan l-aspett għandu jinfluwenza l-approċċ tagħna meta nittratta l-iperfosfatemja.

Bħala konklużjoni, l-istudju tagħna osserva li 5-kura ta 'xahar jew b'CA jew SFO ma mmodifikax id-diversità tal-linja bażi u lanqas il-kompożizzjoni batterjali tal-linja bażi f'pazjenti bl-emodijalisi, iżda twissi dwar il-varjabbiltà għolja ta' profili misjuba fuq il-mikrobijoma tal-musrana ta 'pazjenti CKD.

Rikonoxximenti Mhux applikabbli.

Kontribuzzjonijiet tal-awtur IB, FG, u JB ikkonċepiw u kkontribwew għad-disinn tal-istudju; AMR, IB, u FG kkontribwew għall-inklużjoni tal-pazjent u l-ġestjoni klinika; AMR, IB, u FG. ikkontribwixxa għat-teħid ta 'kampjuni u l-ġbir tad-dejta, AV, MNJ., RP ikkontribwixxa għall-estrazzjoni tad-DNA tal-ippurgar u s-sekwenzjar ta' 16S rRNA; RA, AV, MNJ, RP, u BSM kkontribwew għall-kostruzzjoni tat-tabella OTU, l-assenjazzjoni tassonomika u d-dejta u l-analiżi statistika; AMR, RA, IB, FG, BSM kkontribwew għall-abbozzar tal-manuskritt u pprovdew reviżjonijiet kritiċi tal-manuskritt. L-awturi kellhom aċċess sħiħ għad-dejta, u l-awtur korrispondenti kellu r-responsabbiltà finali li jissottometti l-manuskritt għall-pubblikazzjoni.

Finanzjament Din ir-riċerka kienet iffinanzjata mill-fondi FEDER—Fundo Europeu de Desenvolvimento Reġjonali permezz tal-COMPETE 2020— Programm Operattiv għall-Kompetittività u l-Internazzjonalizzazzjoni (POCI), Portugall 2020, u minn fondi Portugiżi permezz ta’ FCT/ MCTES fil-qafas tal-proġett MicroMOB "POCI{ {2}} FEDER-029777 / PTDC/MEC-MCI/29777/2017".

Id-disponibbiltà tad-dejta Is-settijiet tad-dejta użati u/jew analizzati matul l-istudju attwali huma disponibbli mill-awtur korrispondenti fuq talba raġonevoli.

Disponibbiltà tal-kodiċi Mhux applikabbli.

Dikjarazzjonijiet

Kunflitt ta' interess AMR, RA, IB, FG, AV, MNJ, RP, JB, BSM m'għandhom l-ebda kunflitt ta' interess x'jiddikjaraw.

Approvazzjoni tal-etika Dan l-istudju ġie approvat mill-Kumitat tal-Etika tar-Riċerka Klinika tal-Isptar Universitari Germans Trias i Pujol (PI-16–169, NCT5551048) u kkonforma mal-prinċipji deskritti fid-Dikjarazzjoni ta' Ħelsinki.

Kunsens biex jipparteċipaw Il-parteċipanti kollha ġew reklutati volontarjament wara li rċevew informazzjoni dettaljata dwar il-protokoll tal-istudju. Inkiseb kunsens infurmat bil-miktub mill-pazjenti kollha.

Kunsens għall-pubblikazzjoni Mhux applikabbli.

Aċċess Miftuħ Dan l-artikolu huwa liċenzjat taħt Creative Commons Attribution 4.0 Liċenzja Internazzjonali, li tippermetti l-użu, il-qsim, l-adattament, id-distribuzzjoni u r-riproduzzjoni fi kwalunkwe mezz jew format, sakemm tagħti kreditu xieraq lill-awtur oriġinali( s) u s-sors, ipprovdi link għal-liċenzja Creative Commons, u indika jekk sarux bidliet. L-immaġini jew materjal ieħor ta’ parti terza f’dan l-artikolu huma inklużi fil-liċenzja Creative Commons tal-artikolu, sakemm ma jkunx indikat mod ieħor f’linja ta’ kreditu għall-materjal. Jekk il-materjal mhuwiex inkluż fil-liċenzja Creative Commons tal-artikolu u l-użu intiż tiegħek mhuwiex permess minn regolament statutorju jew jaqbeż l-użu permess, ikollok bżonn tikseb permess direttament mid-detentur tad-drittijiet tal-awtur. Biex tara kopja ta' din il-liċenzja, żur http://creativecommons.org/licenses/by/4.0/.