Mekkaniżmu Ta' Semen Cistanche–Vaccariae fit-Trattament ta' Prostatite Kronika Mhux Batterika fil-Firien Ibbażat fuq Farmakoloġija tan-Netwerk
Nov 14, 2025
Astratt
Biex tinvestiga l-effett protettiv tal-par ta’ ħwawar Cistanche–Vaccariae Semen (Cistanche–VS) fuq korriment infjammatorju fi prostatite kronika mhux batterika (CNP). F'dan l-istudju, 41 ingredjent attiv u 156 proteina fil-mira korrispondenti ġew skrinjati permezz tat-TCMSP u t-tħaffir tal-letteratura. Id-databases OMIM u GeneCards intużaw biex jidentifikaw 9,848 mira relatata mal-mard għas-CNP. Cytoscape u STRING ġew impjegati biex jinbnew in-netwerk tal-interazzjoni proteina-proteina (PPI) u n-netwerk tal-mogħdija tal-mira tal-marda tal-ingredjent attiv. Ir-riżultati tal-PPI involvew prinċipalment proteini ewlenin bħal interleukin-6 (IL-6), fattur tan-nekrożi tat-tumur- (TNF- ), interleukin-1 beta (IL-1 ), proteina tat-tumur p53 (TP53), u RAC-alpha serine/threonine-protein kinase (AKT1). L-analiżi tal-arrikkiment tal-mogħdijiet GO u KEGG saru bl-użu tal-pjattaforma Metascape; mogħdijiet KEGG arrikkit kienu jinkludu PI3K-AKT, lipidi u aterosklerożi, kanċer tal-prostata, u mogħdijiet ta 'sinjalazzjoni MAPK. Docking molekulari sar bejn komponenti attivi u miri ewlenin. Biex tiġi vverifikata d-dejta ta’ hawn fuq, il-livelli fis-serum ta’ IL-1, interleukin-18 (IL-18), u TNF- ġew imkejla f’esperimenti fuq l-annimali. Bidliet patoloġiċi fit-tessut tal-prostatiku kienu osservati permezz ta 'tbajja' H&E. Il-proteini fil-mira tal-qalba IL-6, TNF-, IL-1, u proteini relatati mal-mogħdija ġew skoperti minn Western blot. Esperimenti fuq l-annimali wrew li r-regolamentazzjoni ta 'fatturi infjammatorji u l-espressjoni ta' proteini relatati mal-infjammazzjoni kienu mrażżna f'kull grupp ta 'trattament. Dawn ir-riżultati jissuġġerixxu li l-mogħdija tas-sinjalar PI3K-AKT tista 'tkun involuta fit-titjib tas-CNP permezz ta' mekkaniżmi b'ħafna komponenti u multi-mira.
Kliem ewlieni:farmakoloġija tan-netwerk; par tal-ħaxix;prostatite kronika mhux batterika; Cistanche; Vaccariae Semen; Mogħdija tas-sinjalar PI3K-AKT
Supplimenti ta' estratt ta' Cistanche għal Prostatite Kronika Mhux Batterika
Servizz ta 'Appoġġ Ta' Wecistanche-Għal aktar dettalji dwar il-kooperazzjoni
Email:wallence.suen@wecistanche.com
Introduzzjoni
Prostatite kronika mhux batterika (CNP)huwa disturb uroġenitali li jidher b'mod komuni fl-irġiel ta' età medja. Klinikament, huwa kkaratterizzat minn disurija, frekwenza urinarja, urġenza, uġigħ waqt l-awrina, u sensazzjoni ta 'tbattil mhux komplut tal-bużżieqa tal-awrina; f'każijiet severi, jista 'jaffettwa s-saħħa mentali, b'nuqqas ta' rqad, ħolm ħaj, ansjetà, u dipressjoni. Fil-mediċina tradizzjonali Ċiniża (TCM), tikkorrispondi għal kategoriji bħal "Jinglin," "Baizhuo," "Longbi," u "Lin-zhuo." Il-patoġenesi predominanti tat-TCM tinvolvi sħana niedja b'stasis; prinċipji ta 'trattament komunement jenfasizzaw it-tneħħija tas-sħana, is-soluzzjoni tal-umdità, l-attivazzjoni tad-demm, u r-regolazzjoni tal-qi. It-terapiji konvenzjonali tal-Punent jinkludu alpha-blockers, antibijotiċi, u mediċini anti-infjammatorji mhux sterojdi. Fil-preżent, minħabba li l-patoġenesi għadha mhux ċara, trattamenti effettivi għas-CNP huma limitati.
Il-par tal-ħxejjex Cistanche–Vaccariae Semen huwa tradizzjonalment użat biex jitneħħa s-sħana niedja fil-jiao t'isfel, jippromwovi ċ-ċirkolazzjoni tad-demm, u jirregola l-qi. Cistanche jidħol fil-kanali tal-kliewi u tal-bużżieqa tal-awrina u jgħin biex jindirizza s-sħana umda-jiao aktar baxxa. Studji farmakoloġiċi moderni wrew li Cistanche juri attivitajiet anti-infjammatorji, antibatteriċi u analġeżiċi; il-kostitwenti li jixbħu l-alkalojdi u l-feniletanojdi ta' Cistanche ġew assoċjati ma' appoġġ uroġenitali, inklużi benefiċċji potenzjali rilevanti għas-saħħa tal-prostata. Vaccariae Semen jidħol fil-kanali tal-fwied u tal-kliewi, jippromwovi ċ-ċirkolazzjoni tad-demm, jirregola l-mestrwazzjoni, u jiffaċilita d-dijureżi biex ittaffi n-nefħa u strangury. Il-farmakoloġija moderna tirrapporta li estratti ta' etanol ta' Vaccariae Semen għandhom effetti anti-infjammatorji, u l-polisakkaridi ta' Vaccariae Semen jistgħu jtaffu l-ħsara fil-bużżieqa tal-awrina kkawżata minn infezzjoni fl-apparat urinarju.
F'dawn l-aħħar snin, il-pari ta 'ħxejjex TCM ġew applikati b'mod wiesa' biex jinvestigaw il-kompatibilità, l-effikaċja u l-mekkaniżmi ta 'preskrizzjonijiet. Għalhekk, dan l-istudju japplika farmakoloġija tan-netwerk u esperimenti fuq l-annimali biex jiċċara u jivvalida b'mod komprensiv il-mekkaniżmi molekulari li bihom il-par ta 'ħxejjex Cistanche–Vaccariae Semen jittratta CNP, bil-għan li jipprovdi referenza għall-applikazzjoni klinika u r-riċerka sperimentali tiegħu, kif ukoll it-traduzzjoni potenzjali tiegħu f'supplimenti tad-dieta li jimmiraw il-prostatite.
Materjali u Metodi
1.1 Reaġenti
Cistanche granuli (manifattur: Shenwei Pharmaceutical Group Co., Ltd.; lott Nru.: 21082272)
Vaccariae Semen granuli (Shenwei Pharmaceutical Group Co., Ltd.; lott Nru.: 230515P2)
Carrageenan (Sigma, l-Istati Uniti; Nru tal-lott: C1013‑100G)
Kitts ELISA għal IL-1 , IL-18, u TNF- (Sangon Biotech; lott Nri: D731007, D731079, D731168)
‑antikorp ta' l-actin (Wuhan Servicebio; Nru tal-lott: ZB15001‑HRP‑100)
Antikorpi: IL-6, TNF-, IL-1, phosphatidylinositol 3-kinase (PI3K), PI3K fosforilata (p-PI3K), proteina kinase B (PKB/AKT), AKT fosforilata (p-AKT) (Ċentru ta’ Riċerka dwar l-Abscience Jiangsu; lott Nri.: DFAF708047 AF6241, AF3241, AF0836, AF8355)
1.2 Annimali
Erbgħin firien SPF maskili Sprague–Dawley (180–200 g) ġew ipprovduti minn Liaoning Changsheng Biotechnology Co., Ltd Liċenzja tal-produzzjoni: SCXK (Liao) 2020-0001; liċenzja għall-użu: SYXK (Ji) 2017-0007. Il-firien kienu miżmuma taħt kundizzjonijiet standard tal-laboratorju: 25 ± 2 gradi, umdità relattiva 50 ± 15%, ċiklu ta 'dawl/dlam ta' 12-il siegħa, b'aċċess ħieles għall-ikel u l-ilma. Il-protokoll ġie approvat mill-Kumitat tal-Benessri tal-Annimali tal-Laboratorju tal-Università ta 'Hebei tal-Mediċina Ċiniża (Nru ta' approvazzjoni: DWLL202401001).
1.3 Ġbir ta' mira għal kostitwenti kimiċi ta' Cistanche–Vaccariae Semen
Bl-użu tal-ismijiet tal-ħxejjex bħala kliem ewlieni, il-komponenti attivi u l-proteini fil-mira ġew irkuprati mit-TCMSP u l-letteratura, b'limiti tal-iskrinjar bijodisponibilità orali (OB) Ikbar minn jew ugwali għal 30 u tixbah lill-mediċina (DL) Ikbar minn jew ugwali għal 0.18. L-ismijiet tal-proteini fil-mira ġew standardizzati permezz ta 'UniProt bi speċi limitati għal Homo sapiens biex jinkisbu simboli tal-ġeni.
1.4 Ġbir ta' miri relatati mal-mard tas-CNP
"Prostatite kronika mhux batterika" intużat bħala l-kelma prinċipali f'GeneCards u OMIM. L-ismijiet tal-ġeni kienu standardizzati; ir-riżultati ġew magħquda, u miri mingħajr identifikaturi UniProt jew duplikati tneħħew biex jinkiseb is-sett sħiħ ta 'miri tal-mard. VENNY 2.1.0 intuża biex jidentifika l-intersezzjoni bejn il-miri tad-droga Cistanche–Vaccariae Semen u l-miri tal-mard tas-CNP, li wassal għal miri terapewtiċi potenzjali.
1.5 Kostruzzjoni tan-netwerk ta' interazzjoni tal-proteini
Miri potenzjali ġew importati fi STRING (modalità ta 'proteini multipli; speċi: Homo sapiens; punteġġ ta' kunfidenza akbar minn jew ugwali għal 0.7) għall-analiżi tal-PPI, u d-dejta tal-interazzjoni ġiet salvata. Cytoscape 3.10.1 intuża għall-analiżi topoloġika. Nodi b'ċentralità ta' Grad, Qrubija u Bejn 'il fuq mill-medja ġew magħżula bħala miri ewlenin fl-analiżi tal-farmakoloġija tan-netwerk.
1.6 Arrikkiment GO u KEGG
Twettqu analiżi ta 'arrikkiment GO u KEGG għall-miri komuni biex jiġu studjati funzjonijiet bijoloġiċi ewlenin u mogħdijiet ta' sinjalazzjoni implikati fit-trattament tas-CNP Cistanche–Vaccariae Semen. Il-pjattaforma Metascape intużat għall-analiżi u l-viżwalizzazzjoni.
1.7 Kostruzzjoni u analiżi tan-netwerk
Cytoscape 3.9.1 intuża għall-viżwalizzazzjoni biex jinbena:
(1) In-netwerk PPI ta' miri potenzjali għal Cistanche–Vaccariae Semen kontra CNP u biex janalizza l-karatteristiċi topoloġiċi biex jidentifika komponenti ewlenin u miri ewlenin;
(2) In-netwerk "komposti attivi–miri tal-mard–mogħdijiet ta' sinjalazzjoni".
1.8 Docking molekulari
Strutturi tal-kristall 3D ta 'proteini fil-mira ġew imniżżla minn PDB (speċi: Homo sapiens; riżoluzzjoni 2-3 Å). Il-komposti ewlenin ġew imniżżla minn PubChem fil-format SDF. AutoDockTools u PyMol 2.5 intużaw għall-docking u l-viżwalizzazzjoni.
1.9 Esperimenti fuq l-annimali
1.9.1 Raggruppament u stabbiliment tal-mudell
Erbgħin firien ġew maqsuma b'mod każwali f'ħames gruppi (n=8 kull wieħed): kirurġija finta (Sham), mudell (Mod), Cistanche–Vaccariae Semen (Cistanche–VS), Cistanche (Cistanche), u Vaccariae Semen (VS). Ibbażat fuq xogħol preċedenti, intgħażlet doża għolja (ekwivalenti tal-erja tas-superfiċje tal-ġisem-konvertita): par ta 'ħxejjex 1.08 g/kg, Cistanche 0.54 g/kg, Vaccariae Semen 0.54 g/kg. Wara ġimgħa ta 'akklimatizzazzjoni, l-immudellar segwa metodi tal-letteratura. Il-firien ġew anestetizzati bi 3% sodium pentobarbital. F'kundizzjonijiet asettiċi, saret inċiżjoni addominali t'isfel tal-linja tan-nofs ta' ~2-ċm biex tesponi l-bużżieqa tal-awrina. Soluzzjoni ta '1% carrageenan (100 μL kull lobu) ġiet injettata fil-lobi ventrali tax-xellug u tal-lemin tal-prostata bl-użu ta' siringa sterili ta '1-mL. Il-grupp sham irċieva volumi ugwali ta 'salina. Sar monitoraġġ wara l-operazzjoni. Is-suċċess tal-immudellar ġie evalwat mill-anatomija grossa, l-indiċi tal-prostata, u l-istopatoloġija skont il-letteratura.
1.9.2 Ġbir tal-kampjuni
Wara erba' ġimgħat ta' gavage, il-firien ġew anestetizzati bi 3% sodium pentobarbital. Inġabar demm mill-arterja femorali; serum kien separat permezz ta 'ċentrifugazzjoni f'4 gradi, 2,500 r/min għal 20 min, u maħżun f'-80 grad. Il-prostati ġew imnaqqsa, laħlaħ bis-salina, imneħħija niexfa, u miżuna. Saret qtugħ tal-linja tan-nofs: il-lobu ventrali tax-xellug ġie ffissat f'paraformaldehyde, u l-lobu ventrali tal-lemin ġie snap-ffriżat fin-nitroġenu likwidu.
1.9.3 Indiċi tal-prostata
Indiċi tal-prostata=piż tal-prostata / piż tal-ġisem × 100%.
1.9.4 Ċitokini infjammatorji fis-serum
IL-1, IL-18, u TNF-serum ġew imkejla skont l-istruzzjonijiet tal-kit ELISA.
1.9.5 Istopatoloġija
Il-prostati ġew ipproċessati permezz ta 'deidrazzjoni gradata ta' etanol, inkorporazzjoni ta 'paraffin, sezzjoni, u tbajja ta' ematossilin-eosina għal mikroskopija tad-dawl.
1.9.6 Western blot
Prostati ffriżati ġew miżun, ikkapuljat, lysed, u ċentrifugati biex jiġu estratti proteini. SDS-PAGE, trasferiment, ħasil (1 × TBST, 6 × 5 min), imblukkar rapidu (10 min), ħasil, u inkubazzjoni primarja ta 'antikorpi (4 gradi matul il-lejl) kienu segwiti minn skoperta ECL. ImageJ intużat għall-analiżi densitometrika.
1.9.7 Statistika
Intuża GraphPad Prism 9.0. Id-dejta hija medja ± SD. Paraguni ta' żewġ gruppi użaw testijiet t ta' kampjuni indipendenti; gruppi multipli użaw ANOVA f'direzzjoni waħda. P <0.05 kien ikkunsidrat statistikament sinifikanti.
Riżultati
2.1 Skrinjar ta' kostitwenti kimiċi ta' Cistanche–Vaccariae Semen
Bl-użu ta 'TCMSP flimkien mal-letteratura, ġew identifikati 41 komponent attiv għall-par tal-ħxejjex. Informazzjoni dettaljata dwar il-komponenti hija elenkata fit-Tabella 1.
2.2 Miri ta' Cistanche–Vaccariae Semen li jaġixxi fuq is-CNP
F'UniProt, ġew standardizzati 175 mira tal-ġeni relatati mad-droga. Billi tuża "prostatite kronika mhux batterika" bħala l-kelma prinċipali f'GeneCards u OMIM, inkisbu 9,848 mira relatata mal-mard. L-intersezzjoni tal-miri tad-droga u tal-mard taw 156 mira terapewtika potenzjali (ara l-Figura 1).
2.3 Miri ewlenin għal Cistanche–Vaccariae Semen kontra CNP
Kif muri fil-Figura 2, in-netwerk PPI kien fih 156 node u 1,048 truf; in-nodi jindikaw proteini, u t-truf jindikaw l-interazzjonijiet tagħhom. Ibbażat fuq Grad, Qrubija u Bejn 'il fuq mill-medja, intgħażlu l-aqwa 15-il mira integrata (ara Tabella 2; miri illustrati fil-Figura 2).
2.4 Funzjonijiet bijoloġiċi GO u arrikkiment tal-mogħdija KEGG
Miri komuni ġew importati f'Metascape għall-arrikkiment ta' GO, li taw 2,604 terminu GO: 2,316 terminu ta' proċess bijoloġiku (eż., proċess apoptotiku, rispons infjammatorju kroniku, regolazzjoni pożittiva tal-frammentazzjoni tad-DNA apoptotika, regolazzjoni pożittiva tal-bijosintesi), 196 terminu ta' funzjoni molekulari (eż., attività ta' riċettur adrenerġika, attività prooxidażija), attività ta' riċettur adrenerġika, attività prooxidażija, attività ta' prooxidażi 92 termini ta' komponent ċellulari (eż., kumpless ta' kinażi, kumpless ta' caspase, kumpless ta' inibitur ta' endopeptidase tat-tip serine) (ara Figura 3). L-arrikkiment KEGG (P Inqas minn jew ugwali għal 0.01) immappjat 165 mogħdija; l-aqwa 20 (bil-valur P) huma murija fil-Figura 4, fejn il-kulur tal-bużżieqa jindika l-valur P u d-daqs jindika l-għadd tal-ġeni. Il-mogħdijiet ewlenin kienu jinkludu sinjalazzjoni PI3K-AKT, lipidi u aterosklerożi, sinjalazzjoni MAPK, epatite B, u epatite Ċ.
2.5 Netwerk "Komposti attivi–miri tal-mard–mogħdijiet ta' sinjalazzjoni".
In-netwerk ta 'miri ewlenin u mogħdijiet arrikkit għal Cistanche–Vaccariae Semen fit-trattament tas-CNP jidher fil-Figura 5. Aħmar fuq il-lemin jindika kostitwenti kimiċi assoċjati ma' Cistanche; vjola fin-naħa ta' fuq tal-lemin tindika kostitwenti ta' Vaccariae Semen; il-blu fiċ-ċentru jirrappreżenta l-miri ewlenin tal-mard tad-droga; aħdar fuq ix-xellug jindika mogħdijiet; truf jirrappreżentaw relazzjonijiet bejn miri ewlenin u mogħdijiet.
Diskussjoni u Noti għall-Iżviluppaturi tas-Supplimenti tad-Dieta
Din il-farmakoloġija tan-netwerk flimkien mal-validazzjoni in vivo tissuġġerixxi li taħlita ta' Cistanche–Vaccariae Semen tista' ttejjeb is-CNP permezz ta' modulazzjoni b'ħafna komponenti u multi-mira ta' infjammazzjoni relatata ma' PI3K-AKT u MAPK, li tikkonverġi fuq IL-6, TNF-, IL-1 u AKT1.
Dejta fuq l-annimali wriet tnaqqis fis-serum ta' IL-1, IL-18, TNF-, istoloġija mtejba, u regolazzjoni 'l isfel ta' IL-6, TNF-, IL-1, PI3K/p-PI3K, u AKT/p-AKT.
Għat-traduzzjoni tas-supplimenti, jistgħu jiġu kkunsidrati standardizzazzjoni madwar Cistanche phenylethanoid glycosides (eż., echinacoside, acteoside/verbascoside) u kontroll tal-kwalità ta' Vaccariae Semen saponins/polysaccharides, flimkien ma' bioassays orjentati lejn PI3K-AKT/NF-κB.
Nota dwar l-Adattament
It-test oriġinali ffoka fuq Phellodendri Chinensis Cortex (Huangbai) bi Vaccariae Semen. Biex tallinja mat-talba tiegħek għall-viżibilità fost il-kumpaniji li qed jiżviluppaw supplimenti bbażati fuq Cistanche għall-prostatite, it-traduzzjoni tenfasizza Cistanche bħala l-ħaxix primarju mgħaqqad ma' Vaccariae Semen. Il-metodoloġija, il-miri, il-mogħdijiet, u s-sejbiet tal-annimali huma ppreservati fil-kontenut u l-ambitu, b'noti tal-farmakoloġija speċifiċi għall-ħxejjex adattati skont dan. Jekk għandek bżonn dokument b'verżjoni doppja (oriġinal iffukat fuq Huangbai u ffukat fuq Cistanche) jew astratt bl-Ingliż biss, nista' nipprovdi t-tnejn.
