Studju mekkanistiku dwar it-titjib tal-prostatite kronika permezz tal-pilloli Cistanche permezz tal-assi STAT3/HIF-1 /Glycolysis

 

Astratt

Dan l-istudju jinvestiga l-mekkaniżmu terapewtiku taPilloli Cistanche (CT)fit-trattament tal-prostatite kronika permezz tal-STAT3/HIF-1 /glycolysis assi tas-sinjalar. Mudell tal-firien ta 'prostatite awtoimmuni sperimentali (EAP) ġie stabbilit biex jevalwa l-effikaċja tal-Pilloli Cistanche. Firien Wistar maskili kienu maqsuma b'mod każwali f'sitt gruppi (n=7 għal kull grupp): gruppi ta 'kontroll, mudell, b'doża baxxa, medja u għolja CT (197.2, 591.5, u 1774.4 mg/kg/jum, rispettivament), u grupp ta' kontroll pożittiv (Pusitai, 34.2 mg/kg/jum). Wara l-induzzjoni tal-mudell, it-trattamenti kollha ngħataw għal erba' ġimgħat konsekuttivi.

Analiżi istoloġika bl-użu ta 'tbajja' ematossilina u eosina (HE) vvalutat infjammazzjoni tal-prostata u ħsara glandulari. Livelli fis-serum ta' interleukin-8 (IL-8), interleukin-1 (IL-1), u immunoglobulina G (IgG) ġew imkejla permezz ta' ELISA. L-espressjoni tal-proteina ta 'STAT3 fosforilata (p-STAT3), HIF-1, multipla inositol polyphosphate phosphatase 1 (MINPP1), u hexokinase (HK) fit-tessuti tal-prostata ġiet evalwata permezz ta' Western blotting u immunohistochemistry. Metabolomika mhux immirata ntużat biex jiġu identifikati metaboliti differenzjali u mogħdijiet metaboliċi assoċjati.

Ir-riżultati wrew li CT ttaffi b'mod sinifikanti l-ħsara patoloġika fil-prostata. ELISA wriet livelli mnaqqsa fis-serum ta' IL-8, IL-1, u IgG. Western blot u immunoistokimika wrew li CT irregola p-STAT3, HIF-1, u HK, filwaqt li rregola MINPP1. Metabolomics identifikat 96 metabolit differenzjali u żvelat li CT jista 'jeżerċita l-effett terapewtiku tiegħu billi jimmodula l-glikolisi u l-metaboliżmu ta' l-aċidu arakidoniku.

Konklużjoni:Il-Pilloli Cistanche jistgħu jtaffu l-infjammazzjoni u jinibixxu l-progressjoni tal-prostatite kronika billi jimmiraw lejn STAT3, jrażżnu s-sinjalar HIF-1, u jirregolaw il-metaboliżmu glikolitiku.

Kliem ewlieni: Pilloli Cistanche; cprostatite kronika; Metabolomika; HIF-1 mogħdija tas-sinjalar; glikolisi

Cistanche Benefiċċji għall-prostata u l-kliewi

 

 

 

Żid pilloli cistanche mal-karrettun

 

 

Servizz ta 'Appoġġ Ta Wecistanche-L-akbar esportatur ta' cistanche fiċ-Ċina:
Email:wallence.suen@wecistanche.com
jew

 

 

Introduzzjoni

Il-prostatite kronika hija kundizzjoni uroloġika komuni fl-irġiel, ikkaratterizzata minn disfunzjoni fl-awrina, awrina bl-uġigħ, urġenza, u skumdità perineali. Hija l-aktar tip prevalenti ta' prostatite, li tħalli impatt sinifikanti fuq il-kwalità tal-ħajja tal-pazjenti. Studji jirrappurtaw prevalenza ta' 6.0%–32.9% fl-irġiel Ċiniżi u 2.0%–16.0% internazzjonalment. It-trattamenti attwali tal-Punent jiddependu fuq antibijotiċi u NSAIDs, iżda l-użu fit-tul ħafna drabi jwassal għal effetti sekondarji gastrointestinali.

L-etjoloġija u l-patoġenesi tal-prostatite kronika huma kumplessi, li jinvolvu disregolazzjoni immuni, żbilanċ newroendokrinali, u fatturi tal-istil tal-ħajja. Anormalitajiet immunoloġiċi u disfunzjoni metabolika huma kkunsidrati oqsma ewlenin ta 'tħassib.

Mill-perspettiva tal-Mediċina Tradizzjonali Ċiniża (TCM), il-prostatite kronika hija assoċjata ma 'defiċjenza ta' qi tal-kliewi, akkumulazzjoni ta 'sħana niedja, u stasis tad-demm.Pilloli Cistanche, derivati ​​minn formulazzjoni tradizzjonali fl-isptar [Nru ta 'Approvazzjoni Z04000524], huma bbażati fuq il-formula klassika "Cheng's Bi Xie Fen Qing Yin" flimkien ma' "Cuscuta Pill". Din il-formula tinkludi għaxar ħxejjex aromatiċi bħalCistanche deserticola, Dioscorea, uPolyporus umbellatus, u huwa tradizzjonalment użat biex tonifikat il-kliewi, jiżgura l-essenza, jippromwovi l-awrina, u jelimina t-turbidità.

Studji kliniċi kkonfermaw li l-Pilloli Cistanche effettivament inaqqsu s-sintomi ta 'prostatite u jtejbu l-kwalità tal-ħajja bi profil ta' sigurtà tajjeb. Madankollu, il-biċċa l-kbira tar-riċerka eżistenti tiffoka fuq osservazzjonijiet kliniċi, u l-mekkaniżmi terapewtiċi preċiżi għadhom mhux ċari.

Evidenza reċenti tissuġġerixxi li l-prostatite kronika tinvolvi glikolisi anormali u espressjoni żejda ta' fattur 1 li jista' jinduċi l-ipoksja (HIF-1 ), li jagħmilha mira potenzjali għat-trattament. Barra minn hekk, ir-regolazzjoni tal-mogħdija STAT3 ħarġet bħala strateġija ġdida fil-kontroll tal-infjammazzjoni kronika u r-risponsi awtoimmuni. Dan l-istudju jesplora l-mekkaniżmu terapewtiku ta 'Cistanche Tablets ibbażat fuq esperimenti in vivo u metabolomics, bil-għan li jipprovdi evidenza ġdida għall-użu ta' formulazzjonijiet erbali fi prostatite kronika.

 

Materjali u Metodi

1. Materjali

Annimali:42 firien Wistar maskili ta 'grad SPF (190-210 g) inxtraw minn Suzhou SPF Biotechnology Co., Ltd. L-annimali kienu miżmuma taħt kundizzjonijiet standard (20±3 grad, 55%±5% umdità, ċiklu ta' dawl/dlam ta '12-il siegħa) u pprovduti b'ikel u ilma ad libitum. L-istudju ġie approvat mill-Kumitat Istituzzjonali tal-Etika tal-Annimali (Nru tal-Approvazzjoni. 2023112001).

Drogi u reaġenti:

Pilloli Cistanche

Pilloli Pusitai (kontroll pożittiv)

Salina, buffer PBS, Adjuvant ta' Freund komplut

Kitts ELISA għal IL-8, IL-1, u IgG

Antikorpi: p-STAT3, HIF-1 , MINPP1, HK

Antikorpi sekondarji u reaġenti immunoistokimiċi

Strumenti:

Sistemi LC-MS (Triple TOF 6600, Agilent 1290 Infinity LC)

Ċentrifuga ta 'veloċità għolja, omoġenizzatur, qarrej tal-mikroplate, u bilanċ ta' preċiżjoni

---

2. Metodi

2.1 Studju In Vivo

2.1.1 Mudell tal-Prostatite Kronika

Mudell sperimentali ta' prostatite awtoimmuni (EAP) ġie indott bl-użu ta' tessut tal-prostata omoġenizzat emulsifikat b'adjuvant komplut ta' Freund. Il-firien rċevew injezzjonijiet taħt il-ġilda fl-1 u t-28 jum f'diversi siti (nkora, żaqq, u saqajn ta' wara). Il-firien tal-kontroll irċevew injezzjonijiet tal-melħ. Is-suċċess tal-mudell ġie kkonfermat minn sinjali ta 'mġieba u istopatoloġija.

2.1.2 Raggruppament u Trattament

Wara l-konferma tal-mudell, il-firien ġew maqsuma b'mod każwali f'sitt gruppi: kontroll, mudell, CT b'doża baxxa, medja, għolja, u grupp Pusitai. Id-doża medja ta' CT ġiet stabbilita skont dożaġġ kliniku ekwivalenti. It-trattamenti ngħataw mill-ħalq darba kuljum għal 28 jum.

2.1.3 Ġbir tal-Kampjuni

Fl-aħħar jum, ġew irreġistrati l-awrina u l-konsum tal-ilma ta’ 24 siegħa. Wara l-ewtanasja, inġabru demm u tessuti tal-prostata. Ġie kkalkulat l-indiċi tal-prostata (piż tal-prostata/piż tal-ġisem). It-tessuti ġew jew iffissati fil-formalina jew iffriżati fin-nitroġenu likwidu għal aktar analiżi.

2.1.4 Osservazzjonijiet Ġenerali

Matul l-immudellar u t-trattament, il-firien ġew immonitorjati għall-imġieba, il-kundizzjoni tal-pil, u s-saħħa ġenerali.

2.1.5 ELISA għas-Serum Cytokines

Il-livelli tas-serum IL-8, IL-1, u IgG ġew imkejla bl-użu ta' ELISA wara l-istruzzjonijiet tal-manifattur.

2.1.6 Istopatoloġija (Tbajja HE)

It-tessuti tal-prostata ffissati bil-formalina kienu inkorporati fil-paraffin u ssezzjonati għat-tbajja 'HE. Infjammazzjoni u ħsara fit-tessut ġew osservati taħt mikroskopju.

2.1.7 Immunoistokimika għal MINPP1 u HK

Ġew segwiti proċeduri IHC standard, inklużi deparaffinizzazzjoni, irkupru ta 'antiġeni, imblukkar, inkubazzjoni ta' antikorpi primarji u sekondarji, tbajja 'DAB, u kontrostaining ta' ematoxylin. Intuża softwer ImageJ biex jikkwantifika t-tebgħa pożittiva.

2.1.8 Western Blot għal p-STAT3 u HIF-1

It-tessuti tal-prostata ffriżati ġew lisati u ġew determinati l-konċentrazzjonijiet tal-proteini. It-trasferiment tal-membrana SDS-PAGE u PVDF kienu segwiti minn imblukkar, inkubazzjoni ta 'antikorpi primarji/sekondarji, żvilupp ECL, u densitometrija bl-użu ta' ImageJ.

2.1.9 Analiżi Statistika

Id-dejta ġiet analizzata bl-użu ta' GraphPad Prism 9.5.1. Ir-riżultati ġew espressi bħala medja ± SD. Intuża ANOVA f'direzzjoni waħda segwita minn test post hoc tal-LSD. P<0.05 was considered statistically significant.

 

2.2 Metabolomika tas-Serum

2.2.1 Preparazzjoni tal-Kampjun

Is-serum minn gruppi ta 'kontroll, mudell u doża medja CT ġie mdewweb, imħallat ma' metanol-acetonitrile-ilma kiesaħ, ivvibrat, u ċentrifugat. Is-supernatanti ġew imnixxfa u rikostitwiti għall-analiżi LC-MS.

2.2.2 Kundizzjonijiet LC-MS

Il-metaboliti ġew separati bl-użu ta 'kolonna UPLC BEH Amide, bi profil ta' elużjoni tal-gradjent speċifiku. Id-dejta ġiet akkwistata kemm f'modi ta 'jone pożittiv kif ukoll negattiv bl-użu tal-modalità IDA ta' sensittività għolja.

2.2.3 Ipproċessar tad-Data

Raw data were converted to .mzML format, processed using XCMS for peak identification, alignment, and normalization. Metabolites with >50% missing values were removed. PCA and PLS-DA were used for multivariate analysis. Significant metabolites were filtered based on VIP >1.0 u p<0.05, and KEGG pathway enrichment was performed.

 

Riżultati u Diskussjoni

Il-Pilloli Cistanche tejbu b'mod sinifikanti l-bidliet istopatoloġiċi tal-prostata, naqqsu ċ-ċitokini infjammatorji, u rregolaw l-espressjonijiet ewlenin tal-proteini fl-assi STAT3/HIF-1 /glycolysis. Il-metabolomika wriet modulazzjoni tal-glikolisi u l-metaboliżmu tal-aċidu arakidoniku, li tissuġġerixxi mekkaniżmi regolatorji kemm anti-infjammatorji kif ukoll metaboliċi.

Dawn is-sejbiet jappoġġjaw l-iżvilupp taSupplimenti erbali bbażati fuq Cistanchebħala terapija naturali promettenti għall-prostatite kronika, li toffri regolamentazzjoni multi-mira b'sigurtà tajba.