Kif tistudja d-diversità ġenetika ta 'Herba Cistanches?
Mar 14, 2022
Studju dwar id-diversità ġenetika ta' Herba Cistanches minn RAPD
Kuntatt:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791
Cui Guanghong, Chen Min, Huang Luqi*, Xiao Suping, Li Da
(Istitut tal-Materia Medica Ċiniża, Akkademja taċ-Ċina tal-Mediċina Ċiniża, Beijing 100700)
Astratt
Għan:Biex tistudja l-popolazzjonidiversità ġenetikataCistanche deserticolauCistanche tubulosa.
Metodi:Żewġ popolazzjonijiet selvaġġi taCistanche deserticolau erba’ popolazzjonijiet selvaġġi ta’Cistanche tubulosaġew analizzati minn RAPD, u l-diversità ġenetikatal-popolazzjonijiet ġiet analizzata bil-verżjoni tas-softwer 1.31 ta 'POGENE.
Riżultati:Il-persentaġġ medju ta' loci polimorfiċi ta'Cistanche deserticolakien 47.37 fil-mija, il-loċi polimorfiċi taż-żewġ popolazzjonijiet kienu 39.47 fil-mija u 35.53 fil-mija, u d-diversità tal-ġeni Nei medja kienet 0.135 8. Shannon's kien aktar. L-indiċi tal-informazzjoni dwar l-istatus huwa 0.207 2, u l-koeffiċjent tad-divrenzjar tal-ġeni Gst {{1{{20}}}}.254 6. Il-perċentwal medju ta 'loċi polimorfiċi f'Cistanche kien 27.59 fil-mija, u l-persentaġġ ta' loci polimorfiċi f'kull popolazzjoni varja minn 19.54 fil-mija għal 25.29 fil-mija, li minnhom il-popolazzjoni Andier kellha l-ogħla 25.29 fil-mija, u d-diversità tal-ġeni medja ta 'Nei kienet 0. { {21}}, l-indiċi ta' informazzjoni dwar il-polimorfiżmu ta' Shannon huwa 0.1258, koeffiċjent ta' differenzjazzjoni tal-ġeni Gst =0.175 5.
Konklużjoni:Cistanche deserticolauCistanche tubulosagħandhom ċertu differenzjazzjoni fost il-popolazzjonijiet. Il-diversità ġenetikatad-Deżert Cistanche huwa ogħla b'mod sinifikanti minn dak ta 'Cistanche tubulosa u ddifferenzjat f'żewġ ekotipi.
Kliem ewlieni: Cistanche deserticola; Cistanche tubulosa; RAPD; diversità ġenetika
[Numru ta' Klassifikazzjoni tal-Librerija Ċiniża] S 567 [Kodiċi ta' Identifikazzjoni tad-Dokument] A [Numru ta' l-Artikolu] 1001-5302 (2004) 08-0727-04
Cistanche hija pjanta parassitika li tappartjeni għall-ġeneru Cistanche fil-familja Lidanaceae, magħrufa wkoll bħala Dayun, li hija materjal mediċinali Ċiniż prezzjuż. Il-pjanti sors ewlieni ta 'Cistanche deserticola f'pajjiżi humaCistanche deserticolaYCMa u C.tubulosa (Schenk) R.Wight[1]. Il-pjanti ospitanti tal-Cistanche deserticola huma Haloxylon ammodendron u Haloxylon ammodendron, li huma prinċipalment imqassma fil-Alashan League fil-Mongolja ta 'ġewwa, it-Tramuntana ta' Xinjiang, Qinghai, Gansu, u postijiet oħra. Id-distribuzzjoni ta' Cistanche deserticola hija l-istess bħal dik tal-pjanti ospitanti. F'pajjiżi, Cistanche cistanche huwa mqassam biss f'kontej madwar id-Deżert Taklimakan fin-Nofsinhar tal-Muntanji Tianshan f'Xinjiang, u d-distribuzzjoni tagħha mhix kompletament sinkronizzata mal-ospitant Tamarix. Reġjuni oħra bħat-tramuntana ta 'Xinjiang, Gansu, Qinghai, Ningxia, Inner Mongolia, Shaanxi, u postijiet oħra ta' Tamarix Plants mhumiex parassiti Cistanche Tubula[2]. Minħabba ż-żieda mgħaġġla fid-domanda għal Cistanche f'dawn l-aħħar snin, li rriżultat fl-estinzjoni tar-riżorsi tagħha, ir-riżorsi selvaġġi ta 'cistanche naqsu għal ftit żoni ewlenin ta' produzzjoni biss. It-tnejn ġew elenkati bħala speċi ta' pjanti protetti fil-periklu f'pajjiżi [3], fosthomCistanche deserticolaġie inkluż fl-Appendiċi II tas-CITES [4].
Wara bosta snin ta 'riċerka, ir-riċerka dwar it-trobbija artifiċjali ta' Cistanche kienet ta 'suċċess, u tinsab fl-istadju ta' promozzjoni u tħawwil fuq skala kbira. Madankollu, kif jiġi evitat it-tnaqqis tal-ispeċi ta 'Cistanche waqt il-produzzjoni industrijali, kif tiġi restawrata l-popolazzjoni selvaġġa limitata kemm jista' jkun malajr, u tippreserva r-riżorsi prezzjużi tal-ġerplażma selvaġġa, huma ċ-ċwievet biex jinkiseb l-użu sostenibbli tagħha. Fir-rigward tal-wirt protett ta' Cistanche [Data Riċevuta], 2004-03-11 [Proġett tal-Fond] Proġett tal-Ħarsien Soċjali tal-Ministeru tax-Xjenza u t-Teknoloġija (2001.109); Proġett "L-Għaxar Pjan ta' Ħames Snin" tal-Ministeru tax-Xjenza u t-Teknoloġija (2001BA701A09a) [Awtur korrispondenti] * Huang Luqi, Tel:( 010) 64014411-2955, E-mail: huangluqi @263.net L-istudju tat-trażmissjoni għadu għadu vojta. Dan l-istudju juża t-teknoloġija RAPD biex jistudja 2 popolazzjonijiet selvaġġi taCistanche deserticolau 4 popolazzjonijiet selvaġġi taCistanche tubulosa, u tanalizza kemm Id-differenza fidiversità ġenetikahuwa mistenni li jipprovdi bażi ġenetika sperimentali importanti għall-protezzjoni ta 'Cistanche, mediċina prezzjuża Ċiniża.

1. Materjal u metodi
1.1 Materjali
Cistanche deserticolainġabret mill-Kontea ta 'Jimsar f'Xinjiang u ż-żona ta' Jilantai tal-Ancient Alxa League fil-Mongolja ta 'Intern. Popolazzjonijiet Cistanche inġabru mill-Kontea ta 'Minfeng u l-Kontea ta' Yutian, Xinjiang. Il-Kontea ta 'Minfeng bħalissa hija ż-żona bl-akbar rendiment ta' Cistanche cistanche, bl-ogħla densità u komunitajiet relattivament kompluti ta 'foresti naturali. Il-punti tat-teħid tal-kampjuni Andil, Sawuzek, Yatongguz, u Daheyan tal-Kontea ta' Yutian huma l-oqsma ewlenin tal-produzzjoni, li jinsabu fix-Xmara Andir, ix-Xmara Yeyike, ix-Xmara Yatongguzi, u Kelaniya Fil-parti t'isfel tax-xmara, id-distanza bejn il-popolazzjonijiet hija aktar minn 50 km. Kull popolazzjoni ħadet kampjuni b'mod każwali ta' 19-30 individwi. Il-kampjuni ġew imnixxfa malajr f'ġel tas-silika u użati għall-estrazzjoni tad-DNA (Tabella 1).
Tabella 1 Popolazzjonijiet ta' kampjunar u żoni ta' produzzjoni ta' Cistanche deserticola u Cistanche tubulosa

1.2 Estrazzjoni tad-DNA
Il-metodu ta 'estrazzjoni tad-DNA totali juża melħ għoli, metodu ta' pH baxx [5]. Il-kampjun tad-DNA kien soġġett għal spettrofotometru biex jikxef il-konċentrazzjoni tal-mudell tad-DNA, imbagħad 1 fil-mija elettroforesi tal-ġel agarose, tbajja EB, osservazzjoni u fotografija taħt dawl ultravjola, DNA elettroforesi b'meded ċari, u inqas tailing intużaw għall-analiżi RAPD.
1.3 Screening ta' primers RAPD
Peress li l-esperiment sab li l-istess primer għandu effett mhux sodisfaċenti fuq l-amplifikazzjoni simultanja tat-tnejnCistanche deserticolau Cistanche tubulosa, il-primers ġew skrinjati b'mod indipendenti. Intużaw 150 primers każwali (10 bp), sistema ta 'reazzjoni ta' 25 μL ta 'Shanghai Shenggong Biotechnology Co., Ltd. għall-amplifikazzjoni u l-iskrinjar; kull primer uża 2 mudelli tal-popolazzjoni u ilma distillat doppju sterilizzat bħala kontroll vojt, u kiseb 10 primers għall-amplifikazzjoni ta 'Cistanche deserticola b'meded ċari, polimorfiżmu qawwi, u ripetibbiltà tajba: S490, S1 101, S{{ 8}}, S1 137, S1 165, S1 218, S1 222, S{2 015, S2 112, S{{15 }}; 10 primers taCistanche tubulosa: S1 141, S1 146, S1 183, S1 208, S1 500, S2 032, S2 042, S2 052, S2 059, S2 155.
1.4 Amplifikazzjoni tal-PCR u skoperta tal-prodott
Il-primers magħżula ntużaw biex jamplifikaw il-mudell tad-DNA taCistanche deserticolauCistanche tubulosamill-PCR. Id-DNA ġenomika ġie dilwit għal 50 ng·μL -1 skont il-konċentrazzjoni mkejla bħala mudell. Il-volum totali ta' reazzjoni huwa 25 μL, li minnhom 10 × PCR Buffer 2.5 μL, Mg2 flimkien ma' 1.5 μL, Taq (5 U·μL -1) 0.2 μL, Taħlita dNTP (kull 2.5 mM) 1 μL, 5 μM Primer 1 μL, DNA template 1 μL, ilma distillat doppju sterilizzat 18.8 μL, is-soluzzjoni ta 'amplifikazzjoni PCR ta' hawn fuq hija l-prodott ta 'Shanghai Sangon. L-amplifikazzjoni saret fuq termoċiklatur PTC-100. Il-programm ta 'amplifikazzjoni kien 94 grad pre-denaturazzjoni għal 5 min u mbagħad 40 ċiklu. Kull ċiklu kien jinkludi 94 grad 45 s, 34 grad 1 min, 72 grad 1 min 30 s, u fl-aħħar Estendi fi 72 grad għal 5 min. Il-prodotti amplifikati ġew elettroforizzati fuq ġel agarose ta '2.0 fil-mija (li fih EB) f'1 × TAE buffer u osservati u fotografati taħt is-sistema ta' immaġini tal-ġel SYNGENE.
1.5 Statistika u analiżi tad-data
Fl-ispettru tal-elettroforeżi, il-pożizzjoni korrispondenti tal-prodott ta 'reazzjoni fuq il-ġel hija mqabbla skond l-istandard tal-piż molekulari, u l-piż molekulari tal-prodott amplifikat huwa stmat. Il-faxxa bil-faxxa hija rreġistrata bħala 1, u l-faxxa mingħajr faxxa hija rreġistrata bħala 0, li tifforma grafika matriċi 0/1 u ddaħħal fil-kompjuter, bl-użu ta 'POPGENE32 biex tikkalkula Il-perċentwal ta' siti polimorfiċi (PPL) ta 'kull popolazzjoni, indiċi tad-diversità tal-ġeni ta' Nei (H), indiċi ta 'informazzjoni tal-polimorfiżmu ta' Shannon (I), koeffiċjent ta 'divrenzjar tal-ġeni (Gst), diversità tal-ġeni (Ht),Diversità ġenetika(Hs), Nei's (1978) l-identità ġenetika (I) u d-distanza ġenetika (D) fi ħdan popolazzjoni, u l-analiżi cluster saret bl-użu tal-metodu UPGMA.

2. Riżultati u analiżi
2.1 Id-diversità ġenetika ta' Cistanche
Il-kampjuni kollha kisbu meded b'piż molekulari li jvarja minn 200 sa 2 200 bp (Figura 1, 2). Total ta’ 76 loci ġew skoperti f’60 kampjun minn 2 popolazzjonijiet ta’Cistanche deserticola, 36 minnhom kienu loci polimorfiċi, li jammontaw għal 47.37 fil-mija , H=0.135 8, I=0.207 2. Fosthom, il-PPL ta 'Jimsar huwa 39.47 fil-mija, u dak ta' Gilanty huwa 35.53 fil-mija. H hija 0. 0 95 3 u 0.1 070 rispettivament, u jien 0.15 12 u 0.163 7 rispettivament. Total ta' 87 loci ġew skoperti f'{20}} individwi minn 4 popolazzjonijiet ta' Cistanche, li 24 minnhom kienu loci polimorfiċi, li jammontaw għal 27.59 fil-mija, H=0.084 8, I=0.1278. L-ogħla PPL kien Andil b'25.29 fil-mija, filwaqt li l-PPL kien aktar baxx f'Savuzek u Yatungusi (it-tnejn f'19.54 fil-mija). H hija 0.062 1 -0.080 0, jien 0.095 0 -0.116. Id-daqs ta 'H u I huwa konsistenti mat-tendenza tad-daqs tal-PPL ta' kull popolazzjoni, u l-koeffiċjenti huma l-akbar f'Andier, segwiti minn Dayan. Fil-każ ta' l-istess PPL, H=0 ta' Savuzek.{{40}} Is-somma I=0.097 0 hija kemxejn ogħla minn 0.{{44 }} u 0.095 0 ta’ Yatunguska (Tabella 2).

Figura 1 Meded RAPD amplifikati ta 'xi kampjuni ta' deżertCistanche deserticola, primer S490 1-10. Kampjuni ta' garanzija; 11-20. Jimpster kampjuni M-DNA Marker (200 - 2 000 bp)

Figura 2 Meded RAPD amplifikati ta' xi kampjuni ta' Cistanche Tubulosa, primer S2 042 1-20. Xinjiang Andier kampjun M-DNA Marker (200 - 2 000 bp)
Tabella 2 Ildiversità ġenetikataCistanche deserticolauCistanche tubulosapopolazzjonijiet

2.2 Analiżi tal-varjazzjoni ġenetika ta 'Cistanche
Skond il-livell tadiversità ġenetikafil-popolazzjonijiet (Hs), id-differenzazzjoni bejn il-popolazzjonijiet (Dst), u l-proporzjon tad-differenzi ġenetiċi bejn il-popolazzjonijiet fid-differenzi ġenetiċi totali (Gst), wieħed jista’ jara li d-diversità ġenetika totali ta’ Cistanche deserticola Ht=0.{{ 1}}, fejn Hs=0.101 2, Gst =0.254 6. Cistanche Ht=0.082 2, li minnhom Hs=0.067 8, Gst=0.175 5 (Tabella 3). Ir-riżultati ta 'hawn fuq jindikaw li hemm ċertu grad ta' varjazzjoni ġenetika fost il-popolazzjonijiet. Il-varjazzjoni bejn il-popolazzjonijiet tad-deżert ta 'Cistanche deserticola ammontaw għal 25.46 fil-mija tal-varjazzjoni totali, u l-varjazzjoni tal-popolazzjonijiet ta' Cistanche tubulosa ammontaw għal 17.55 fil-mija tal-varjazzjoni totali.
Tabella 3 Analiżi tal-varjazzjoni ġenetika ta'Cistanche deserticolauCistanche tubulosa.

2.3 Distanza ġenetika u analiżi tar-raggruppamenti fost popolazzjonijiet ta' Cistanche deserticola
Id-distanza ġenetika taż-żewġ popolazzjonijiet ta 'Cistanche deserticolahija {{0}}.080 0, u l-identità ġenetika hija 0.9231. Id-distanza ġenetika tal-erba' popolazzjonijiet ta' Cistanche kienet 0.012 0-0.031 5, u l-identità ġenetika kienet 0.9690-0.988 1 (Tabella 4) . Ir-raggruppament ta' individwi Cistanche deserticola u cistanche tubulosa juri li ċ-Cistanche deserticola jista' jinġabar f'żewġ gruppi distinti skont il-popolazzjoni, filwaqt li l-individwi differenti ta' cistanche tubulosa ma jistgħux jiġu miġbura skont il-popolazzjoni, li jindika wkoll li d-differenzjazzjoni ġenetika fost Cistanche deserticola popolazzjonijiet huwa relattivament għoli. Kbir, iżda d-differenzazzjoni ġenetika fost il-popolazzjonijiet ta 'Cistanche tubulosa hija żgħira.
Tabella 4 Identità ġenetika (ta' isfel fuq ix-xellug) u d-distanza ġenetika (fuq il-lemin) ta'cistanche tubulosa.

3. Diskussjoni
3.1 Id-diversità ġenetika ta' Cistanche
Il-livell tadiversità ġenetikatal-pjanti huwa inseparabbli mill-karatteristiċi bijoloġiċi, il-ħabitats, l-oriġini u l-evoluzzjoni tagħhom. Fosthom, is-sistema tat-tnissil, il-firxa tad-distribuzzjoni, il-forma tal-ħajja, u l-metodi tat-tixrid tal-polline u ż-żerriegħa għandhom l-akbar influwenza [6]. Skont ir-riżultati statistiċi tad-dejta tal-allozyme ta '499 speċi ta' pjanti f'165 ġeneri minn Ge Song et al. [7], il-polimorfiżmu ta 'Cistanche fil-livell tal-ispeċi għandu jkun madwar 50 fil-mija, u l-polimorfiżmu fil-livell tal-popolazzjoni għandu jkun madwar 40 fil-mija. Madwar 0.17. Il-livelli ta' polimorfiżmu miksuba f'dan l-esperiment huma kollha aktar baxxi minn dawn il-valuri medji. Fl-istess ħin, meta mqabbla mal-livelli ta 'loci polimorfiċi miksuba mill-metodi RAPD għal diversi pjanti komuni fil-periklu, bħal 32 fil-mija tal-ispeċi fil-periklu Silver Fir[18], 22.5 fil-mija tal-peony nanu, u 27.6 fil-mija tal-peony vjola [9] ] Wieħed jista’ jara li d-diversità ġenetika ta’Cistanche deserticola hija kemxejn inqas mil-livell medju, filwaqt li d-diversità ġenetika ta 'Cistanche tubulosa hija diġà estremament baxxa.
3.2 Raġunijiet għal diversità ġenetika baxxa ta' Cistanche
Cistanche hija pjanta parassitika speċifika, imqassma f'żoni deżerti dojoq fl-istess ħin. Għalhekk, l-istil tal-ħajja uniku u l-erja tal-għajxien relattivament dejqa jistgħu jkunu r-raġuni inerenti għaliex il-diversità ġenetikata 'Cistanche huwa ġeneralment aktar baxx minn dak ta' pjanti ordinarji.
Id-differenza fidiversità ġenetikabejn Cistanche deserticola u Cistanche tubulosa jistgħu jkunu relatati mad-differenza fil-firxa tad-distribuzzjoni tat-tnejn u jekk humiex sinkronizzati mad-distribuzzjoni ospitanti. Iż-żona tad-distribuzzjoni ta 'Cistanche tubulosa hija sinifikament iżgħar minn dik ta' Cistanche deserticola, u d-distribuzzjoni tagħha hija estremament mhux sinkronizzata mal-pjanta ospitanti. Studji wrew li hemm rikkezza ta 'diversità fost l-ispeċi Tamarix. Per eżempju, Zhang Juan et al. irrapporta li d-diversità ġenetika ta 'Tamarix sibiricus kienet għolja sa 98.7 fil-mija [10], filwaqt li d-diversità ġenetika ta' Cistanche hija estremament fqira, li tindika l-evoluzzjoni fit-tul. Cistanche tubulosa setgħet esperjenzat ostakoli serji fl-istorja, li rriżultaw fit-telf ta’ ammont kbir ta’diversità ġenetika.
Fl-istess ħin, skont l-investigazzjonijiet, instab li ħadd mill-Cistanche deserticolafi żmien 20 km mill-insedjamenti umani jistgħu jiġu mikxufa u bloomed normalment. Il-fosos kbar u żgħar tal-Cistanche ġew skavati, speċjalment fiż-żoni ewlenin li jipproduċu l-fjura tat-tubu Cistanche. Għalhekk, kien ikkawżat minn ammont kbir ta 'tħaffir. In-nuqqas ta' provenjenza u l-qerda tal-ħabitat jistgħu jkunu r-raġunijiet ewlenin magħmula mill-bniedem għall-baxxdiversità ġenetikata' Cistanche.
3.3 Differenzjazzjoni ġenetika ta 'Cistanche
Minħabba d-distanza ġeografika bejn Xinjiang u Inner Mongolia, l-iżolament ġeografiku kkawża d-divrenzjar u l-iżolament bejn il-Cistanche deserticolapopolazzjonijiet, u ż-żewġ popolazzjonijiet iffurmaw ekotipi ġenetikament differenti minħabba l-adattament tagħhom għall-kundizzjonijiet tal-ħabitat lokali. Minħabba l-firxa dejqa tad-distribuzzjoni tagħha u l-iskambji frekwenti tal-ġeni fost il-popolazzjonijiet, id-differenzazzjoni ġenetika fost il-popolazzjonijiet hija inqas minn dik ta 'Cistanche deserticola.
3.4 Rakkomandazzjonijiet għall-protezzjoni ta' Cistanche
Diversità ġenetikahija l-prerekwiżit għas-sopravivenza fit-tul tal-ispeċi biex tiġi evitata l-estinzjoni. It-tnaqqis tadiversità ġenetikase jnaqqas il-kapaċità tal-popolazzjonijiet li jadattaw għal bidliet ambjentali kemm fuq medda qasira ta' żmien kif ukoll fuq medda twila ta' żmien [11]. Għalhekk, il-protezzjoni tad-diversità ġenetika ta 'Cistanche hija importanti ħafna għall-protezzjoni ta' din il-mediċina Ċiniża rari u prezzjuża. Peress li Cistanche hija speċi b'tip ekoloġiku speċjali, għandha tkun protetta prinċipalment in situ, u l-bażi ta 'protezzjoni naturali ta' Cistanche għandha tiġi stabbilita skont id-diversità ġenetika tagħha. Per eżempju, għalCistanche tubulosa, Minħabba li d-diversità ġenetika ġejja prinċipalment minn ġewwa l-popolazzjoni, popolazzjonijiet b'diversità ġenetika kbira se jkunu l-oġġetti ta 'protezzjoni ta' prijorità [12], bħal Angier ta 'Minfeng u Daheyan ta' Yutian jista 'jkun Huwa elenkat bħala bażi ta' protezzjoni naturali għal Cistanche. Fir-rigward tal-Cistanche deserticola, il-popolazzjonijiet tal-Inner Mongolia u Xinjiang għaddew minn bidliet sinifikanti, għalhekk ir-riċerka sperimentali għandha tissaħħaħ aktar biex tiddetermina l-popolazzjonijiet li huma prijoritizzati għall-protezzjoni. Fl-istess ħin, twettaq riċerka bażika dwar il-bijoloġija riproduttiva u l-ekoloġija tal-pollinazzjoni ta 'Cistanche biex tipprovdi informazzjoni għall-protezzjoni ulterjuri tagħha.

Referenzi
[1] He Yanping, Yin Zhezhu, Tu Pengfei, et al. Identifikazzjoni ta'Cistancheu investigazzjoni ta' materjali mediċinali kummerċjali. Materjali Mediċinali Ċiniżi, 1997, 20(3):117.
[2] Liu Mingting. Riċerka komprensiva u applikazzjoni ġenerali tal-pjanti Tamarix. Lanzhou: Lanzhou University Press, 1995.
[3] Fu Guoli. Ktieb l-Aħmar tal-Pjanti Ċiniżi. Beijing: Science Press, 1992.
[4] L-Uffiċċju tal-Ġestjoni tal-Importazzjoni u l-Esportazzjoni ta' Speċijiet fil-Periklu tar-Repubblika Popolari taċ-Ċina, il-Kumitat Xjentifiku tal-Ispeċijiet fil-Periklu tar-Repubblika Popolari taċ-Ċina. Konvenzjoni dwar il-Kummerċ Internazzjonali fi Speċi ta' Fawna u Pjanti Selvaġġi fil-Periklu (CITES), Appendiċi II. 2003.41.
[5] Zou Yuping, Wang Xiaoquan, Lei Yiding, et al. Estrazzjoni u identifikazzjoni tad-DNA totali ta 'diversi pjanti fil-periklu u l-qraba tagħhom. Acta Botany, 1994, 36:528.
[6] Wang Hongxin, Hu Zhiang. Sistema ta 'tgħammir tal-pjanti, struttura ġenetika, u protezzjoni ta'diversità ġenetika. Biodiversity, 1996, 4(2): 92.
[7] Chen Jiakuan, Yang Ji. Bijoloġija Evoluttiva tal-Pjanti. Wuhan: Wuhan University Press, 1994.
[8] Wang Xiaoquan, Zou Yuping, Zhang Daming, et al. Analiżi RAPD tad-diversità ġenetika taż-żnuber tal-fidda. Chinese Science (C), 1997, 40(2): 145.
[9] Pei Yanlong, Zou Yuping, Yin Zhen, et al. Rapport preliminari dwar l-analiżi RAPD ta 'peony nanu u peony vjola. Chinese Journal of Plant Taxonomy, 1995, 33(4): 350.
[10] Zhang Juan, Yin Linke, Zhang Daoyuan. Studju Preliminari dwarDiversità Ġenetikatal-Popolazzjonijiet Naturali ta 'Tamarix lanceolate. Yunnan Botanical Research, 2003, 25(5):557.
[11] Ellstrand NC, Elam D R. Konsegwenzi tal-ġenetika tal-popolazzjoni tad-daqs żgħir tal-popolazzjoni: Implikazzjonijiet għall-konservazzjoni tal-pjanti. Reviżjoni Annwali Ekoloġija u Sistematika, 1993, 34:217.
[12] Liu Zhanlin, Zhao Guifang. Il-prinċipju tal-ġenetika tal-popolazzjoni u l-applikazzjoni tiegħu fil-protezzjoni ta 'pjanti rari u fil-periklu. Biodiversità, 1999, 7(4): 340.
Minn: China Journal of Chinese Materia Medica; Vol. 29, Ħarġa 8 ta’ Awwissu 2004







