Metabolomics Magħquda Ma' BMP-2/Smad Signaling Pathway Analysis Jiċċaraw L-Effetti Tajjeb Ta' Flavonoids Totali Ta' Epimedii Folium—Suppliment Nutrizzjonali ta' l-għadam fuq l-Osteoporożi ta' wara l-menopawża

Astratt

L-osteoporożi ta 'wara l-menopawża (PMOP) hija attivata minn defiċjenza ta' estroġenu. Estroġenu insuffiċjenti jwassal għal assorbiment mill-ġdid tal-għadam li jaqbeż il-formazzjoni tal-għadam, u b'hekk jikkawża tnaqqis fil-massa tal-għadam. Studji kkonfermaw li l-flavonoids totali estratt minnEpimedii Folium(TFE) jista 'jtejjeb l-osteoporożi, filwaqt li nutrijent tal-għadam li jikkonsisti f'chondroitin sulfate (CS) flimkien ma' glucosamine hydrochloride (GLcN) jeżerċita effetti terapewtiċi fuq mard relatat mal-metaboliżmu tal-għadam. Peress li l-osteoporożi hija kkaratterizzata b'mod fundamentali minn disturbi metaboliċi, il-kombinazzjoni ta 'estratt TFE ma' suppliment nutrittiv tal-għadam (TG) tista 'teżerċita effetti regolatorji sinerġistiċi multi-mira, u b'hekk toffri approċċ ġdid għall-prevenzjoni u l-kontroll tal-PMOP.

Dan l-istudju esplora b'mod sistematiku l-effetti u l-mekkaniżmi ta 'titjib ta' TG fuq PMOP permezz ta 'esperimenti in vivo u in vitro flimkien mat-teknoloġija tal-metabolomika. In vivo, mudell ta 'far ovariectomized (OVX) ġie stabbilit permezz ta' ovariectomy bilaterali. L-effetti farmakodinamiċi ta 'TG fuq PMOP ġew ivverifikati abbażi ta' tbajja istopatoloġika tal-għadam, densità minerali tal-għadam u indikaturi fiżjoloġiċi. Barra minn hekk, it-teknoloġija tal-metabolomika ntużat biex tikkwantifika l-metaboliti tal-awrina biex tesplora bijomarkaturi PMOP potenzjali regolati minn TG u n-netwerks metaboliċi assoċjati. In vitro, iċ-ċelloli MC3T3-E1 ġew ittrattati b'TFE u TG biex jiġu skrinjati dożi sikuri. Sussegwentement, twettqet induzzjoni osteoġenika, u l-effetti u l-mekkaniżmi ta 'TG fuq id-divrenzjar osteoġeniku ġew studjati permezz ta' tbajja 'alkaline phosphatase (ALP), tbajja ta' Alizarin Red S (ARS) u analiżi Western blot.

Riżultati farmakodinamiċi wrew li TG naqqas il-ġenerazzjoni tal-osteoklasti u rrestawra b'mod sinifikanti d-densità minerali tal-għadam u l-livelli tal-indikaturi fiżjoloġiċi. Ir-riżultati tal-metabolomika indikaw li TG itaffu t-telf tal-għadam prinċipalment billi jintervjeni f'mogħdijiet metaboliċi multipli, inkluż il-metaboliżmu ta 'nikotinat u nikotinamide, metaboliżmu ta' histidine, metaboliżmu ta 'pirimidina, metaboliżmu ta' tryptophan, metaboliżmu ta 'alanine/aspartate/glutamate, metaboliżmu tal-purini, metaboliżmu tal-vitamina B6, u oħrajn. Esperimenti in vitro kkonfermaw li TG ippromwova l-proliferazzjoni tal-osteoblasti u d-divrenzjar osteoġeniku permezz tal-mogħdija tas-sinjalar tal-proteina morfoġenetika tal-għadam-2 (BMP-2)/Sma- u l-proteina relatata mal-Mad (Smad). Fil-qosor, TG jista 'jtejjeb b'mod effettiv il-PMOP permezz ta' effett sinerġistiku multi-mira. Dan l-istudju jipprovdi bażi sperimentali u appoġġ teoretiku għall-applikazzjoni klinika ta 'TG.

Kliem ewlieni:flavonoids totali taEpimedii Folium; Suppliment nutrittiv għall-għadam; osteoporożi wara l-menopawża; Metabolomika; BMP-2/mogħdija tas-sinjalar Smad

 

Suppliment Nutrittiv tal-għadam tal-Ħxejjex Ħwawar Ġdid

 

 

 

1. Introduzzjoni

L-osteoporożi (OP) hija marda metabolika tal-għadam sistemika kkaratterizzata minn tnaqqis fil-massa tal-għadam u densità minerali tal-għadam (BMD), qerda tal-mikroarkitettura tal-għadam, u fraġilità tal-għadam miżjuda. L-osteoporożi ta 'wara l-menopawża (PMOP) hija l-aktar tip komuni u hija assoċjata ma' sekrezzjoni mnaqqsa ta 'estroġenu. Tnaqqis tal-estroġenu jikkawża li r-riassorbiment tal-għadam jaqbeż il-formazzjoni tal-għadam, li jirriżulta f'omeostasi tal-għadam imfixkla [1].

Studju tal-prevalenza tal-osteoporożi taċ-Ċina li jinkludi 20,416 parteċipant sab li fost in-nies li għandhom 40 sena jew aktar, il-prevalenza tal-OP kienet 5.0% fl-irġiel u 20.6% fin-nisa [2]. Evalwazzjoni tal-prevalenza tal-OP fost l-adulti tal-Istati Uniti ta 'età akbar minn jew ugwali għal 50 sena sabet rati ta' prevalenza ta '16% fl-irġiel u 29.9% fin-nisa [3], li tindika prevalenza ogħla fin-nisa. Klinikament, mediċini użati għall-kura tal-PMOP jinkludu prinċipalment analogi tal-ormoni tal-paratirojde, bisfosfonati, estroġenu, calcitonin, u inibituri RANKL; madankollu, dawn il-mediċini jistgħu jikkawżaw effetti avversi bħal palpitazzjonijiet, osteonekrożi tax-xedaq, u mard kardjovaskulari, li jagħmluhom mhux adattati għal użu fit-tul [4]. Minħabba l-piż notevoli ta 'effetti sekondarji ta' mediċini konvenzjonali, l-identifikazzjoni ta 'għażliet ta' mediċina tradizzjonali Ċiniża (TCM) b'inqas reazzjonijiet avversi u adattabilità għal ġestjoni fit-tul saret urġenti. TCM ilha tintuża biex ittejjeb l-OP u rċeviet attenzjoni wiesgħa domestikament u internazzjonalment. Studji jikkonfermaw li ħxejjex multipli Ċiniżi bħalEpimedii FoliumuRhizoma Drynariaegħandhom effetti sinifikanti fit-titjib tal-OP [5].

Flavonoids totali ta 'Epimedii Folium(TFE) huma l-komponenti attivi ewlenin, inklużi icariin, epimedin A, u epimedin B. L-effetti anti-osteoporotiċi ta 'Epimedii Foliumġew irrappurtati f'ħafna studji; pereżempju, icariin itejjeb id-divrenzjar osteoġeniku taċ-ċelloli staminali mesenchymal tal-mudullun (BMSCs) [6]. L-estratt tat-TFE jista 'wkoll itejjeb it-telf tal-għadam billi jżid it-tessut xaħmi kannella u jnaqqas it-tessut xaħmi abjad fil-mudullun [7].

 

Suppliment Nutrizzjonali tal-għadam Magħmul minn Cistanche

 

Chondroitin sulfate (CS) huwa glycosaminoglycan sulfated u polysaccharide lineari magħmul minn unitajiet ta 'disaccharide ripetuti li fihom aċidu uroniku u N-acetylhexosamine [8]. Glucosamine hydrochloride (GLcN) huwa amino monosaccharide sintetizzat minn glukożju fit-tessuti umani; huwa prinċipalment preżenti fil-qarquċa u fit-tessut konnettiv sinovjali u huwa komponent importanti tal-qarquċa articular u matriċi extraċellulari. It-tnejn huma komunement użati bħala supplimenti tad-dieta. ZHENG HX et al. [9] irrapporta li CS jista 'jnaqqas iċ-ċitokini infjammatorji tas-serum u jinibixxi l-istress ossidattiv; jista 'wkoll inaqqas l-espressjoni tal-osteoklasti billi jirregola OPG/RANKL, jissuġġerixxi azzjonijiet anti-infjammatorji u antiossidanti u inibizzjoni tad-differenzazzjoni tal-osteoklasti. Fl-Istati Uniti, CS ħafna drabi hija kkombinata ma 'GLcN f'supplimenti tad-dieta u tintuża prinċipalment biex tnaqqas it-telf ta' komponenti tal-matriċi fl-osteoartrite [10]. Barra minn hekk, minħabba li CS jista 'jikkaġuna differenzjazzjoni taċ-ċelluli, intuża fil-kondroġenesi u kostruzzjonijiet osteoġeniċi [11-12].

Studji multipli jissuġġerixxu li l-estratt TFE, CS, u GLcN għandhom ċerti effetti terapewtiċi f'mard relatat mal-metaboliżmu tal-għadam. Madankollu, jekk suppliment ta' nutrijent ta' estratt-għadam magħqud (TG) TFE jipproduċix benefiċċji sinerġistiċi fit-titjib tal-OP u l-mekkaniżmi tiegħu għadhom mhux ċari.

 

Suppliment Nutrizzjonali tal-għadam Magħmul minn Cistanche
 

 

Shop Cistanche mad-dinja kollha

Servizz ta 'Appoġġ Ta' Wecistanche-Għal aktar dettalji dwar il-kooperazzjoni
Email:wallence.suen@wecistanche.com

 

 

2. Materjali u Metodi

2.1 Annimali

Erbgħin firien Sprague-Dawley femminili ta' 8 ġimgħat (180-220 g) inxtraw minn Changchun Yisi Experimental Animal Co., Ltd. (Liċenzja ta 'l-annimali Nru SCXK (Ji)-2020-0001). L-annimali kienu miżmuma f'laboratorju SPF f'23±223 \\pm 223±2 grad u 50% umdità, b'aċċess ħieles għall-ikel u l-ilma, taħt ċiklu ta '12-il siegħa dawl/12-il siegħa dlam. Esperimenti fuq l-annimali ġew riveduti u approvati mill-Kumitat Sperimentali għall-Benessri tal-Annimali u l-Etika tal-Università Agrikola ta 'Jilin (Nru ta' Aċċettazzjoni . 20240717001).

2.2 Drogi u Reaġenti

Korean Epimedii Foliumħwawar mhux raffinat inxtara minn Tonghua County Senyu Chinese Medicinal Materials Co., Ltd. (Provinċja ta 'Jilin). Icariin (Lott Nru T11A11B111118) inxtara minn Shanghai Yuanye Bio-Technology Co., Ltd. GLcN (Lott Nru. M-AT-1904020) inxtara minn Zhejiang Jinke Pharmaceutical Co., Ltd. CS (Lott Nru. HS1904270) inxtrat minn Jiae. sodju tal-peniċillina għall-injezzjoni, pilloli tal-valerat tal-estradiol, tribromoethanol, kits ELISA għal PINP u CTX-I, kits tal-analiżi tal-hydroxyproline, fosfru u kalċju, kit tat-tbajja 'ALP, -MEM medium, trypsin, penicillin-streptomycin, buffer tal-imblukkar, TBST, buffer ta' trasferiment rapidu tal-membrana, HRP PVDF anti-buffer, HRP PVDF IgG, antikorp anti-GAPDH, markatur tal-proteini mtebbgħin minn qabel, RIPA lysis buffer, kit ECL, kit ta’ preparazzjoni tal-ġel PAGE, buffer ta’ tagħbija ta’ proteini, CCK-8 kit, serum tal-fetu tal-bovini, Alizarin Red S, aċidu askorbiku, -glycerophosphate sodium, dexamethasone, PBS, u antikorpi primarji, CCK-82, SMA, BMP-22} u p-Smad1/5.(In-numri tal-lott u l-fornituri kollha huma kif elenkati fit-test oriġinali.)

2.3 Strumenti

Intuża qarrej tal-mikroplate (ThermoFisher, USA), mikroskopju maqlub (Motic Group), kabinett tal-bijosigurtà (ThermoFisher, USA), inkubatur CO2_22 (ThermoFisher, USA), u banju tal-metall tat-tisħin b'kanal doppju diġitali (Changchun Kelebo Biotechnology Co., Ltd.).

2.4 Estrazzjoni TFE

TFE ġie estratt bl-użu tal-metodu rrappurtat minn Zhang Dongxue et al. [13]. It-trab lajofilizzat miksub tkejjel bl-ispettrofotometrija UV-Vis f'270 nm. Bl-użu ta 'icariin bħala l-istandard, il-kontenut totali ta' flavonoid tal-estratt TFE ġie determinat li jkun 79.0%.

2.5 Disinn Sperimentali tal-Annimali

Il-firien ġew randomised f'ħames gruppi: normali (sham), mudell (OVX), estradiol valerate (EV), estratt TFE (T), u TG. Il-grupp sham għadda minn tneħħija ta 'ammont żgħir ta' xaħam addominali u tessut artab biss; il-gruppi l-oħra kollha għaddew minn ovariectomy bilaterali. Il-mediċini ġew ippreparati bħala sospensjonijiet f'0.5% sodium carboxymethyl cellulose u mogħtija permezz ta 'gavage orali. Gruppi Sham u OVX irċevew salina permezz ta 'gavage. Il-grupp T irċieva TFE f'490 mg·kg-1^{-1}-1. Il-grupp EV irċieva 0.1 mg·kg-1^{-1}-1. Il-grupp TG irċieva CS 124 mg·kg-1^{-1}-1, GLcN 155 mg·kg-1^{-1}-1, u TFE 490 mg·kg-1^{-1}-1. Dożi ġew konvertiti minn dożi rakkomandati mill-bniedem. Il-volum tal-gavage kien 2 mL·kg-1^{-1}-1·d-1^{-1}-1 għal 8 ġimgħat konsekuttivi. L-immudellar b'suċċess ġie kkonfermat meta l-livelli ta 'estradiol fis-serum (E2) fil-grupp OVX kienu aktar baxxi b'mod sinifikanti minn dawk fil-grupp sham. Minħabba li CS + GLcN waħdu wera biss tendenza ta 'titjib żgħir fil-BMD tal-firien, ma ġiex stabbilit grupp separat ta' nutrijent tal-għadam biss.

F'ġimgħat 3, 6, u 8, il-firien tqiegħdu f'gaġeġ metaboliċi b'ilma ħieles u 12-il siegħa sawm, u nġabru kampjuni tal-awrina ta '24 siegħa. L-awrina ġiet ċentrifugata f'4 gradi, 3,500 r·min-1^{-1}-1 għal 10 min; supernatanti ġew maħżuna f'-80 grad. Fl-aħħar tal-ġimgħa 8, l-annimali ġew ewtanizzati u nġabar id-demm, ċentrifugat f'4 gradi, 4,000 r·min-1^{-1}-1 għal 15-il minuta biex jinkiseb serum, imbagħad maħżun f'-80 grad.

2.6 Kejl ta' Indikaturi Fiżjoloġiċi

Fit-8 ġimgħa, inġabru l-awrina u d-demm aortiku addominali. Intużaw kits ELISA biex ikejlu l-markatur tal-formazzjoni tal-għadam fis-serum PINP u l-markatur tar-riassorbiment tal-għadam CTX-I. L-idrossiprolina tas-serum u l-awrina (Hyp) tkejlu b'idroliżi alkalina. Il-kalċju tal-awrina (U-Ca) tkejjel bil-metodu tal-mikroplate MTB, u l-fosfru tal-awrina (UP) bil-metodu tal-fosfomolibdat.

2.7 Densità Minerali tal-għadam u Mikro-CT

Wara 8 ġimgħat, il-wirk tax-xellug ġew maħsuda, imnaddfa, u skennjati bl-użu ta 'mikro-CT. Parametri trabekulari ġew analizzati kwantitattivament, inkluż separazzjoni trabekulari (Tb.Sp), ħxuna trabekulari (Tb.Th), numru trabekulari (Tb.N), frazzjoni tal-volum tal-għadam (BV/TV), u indiċi tal-mudell tal-istruttura (SMI).

2.8 Istopatoloġija tal-għadam

Il-wirk tal-lemin ġew iffissati f'4% paraformaldehyde, dekalċifikati, inkorporati fil-paraffin, sezzjoni, u mtebbgħin b'HE u TRAP. Osteoklasti pożittivi għal TRAP dehru aħmar skur.

2.9 Analiżi tal-Metabolomika

L-awrina (100 μL) ġiet dilwita 10 darbiet b'ilma distillat, 30 s vortexed, ċentrifugata f'4 gradi, 15,000 r·min-1^{-1}-1 għal 10 min, u s-supernatant intuża għall-analiżi. Volumi ugwali (100 μL) ta 'awrina minn kull far ġew miġbura biex jippreparaw kampjuni ta' kontroll tal-kwalità (QC).

Il-kromatografija saret bl-użu ta 'kolonna ACQUITY UPLC CSH C18 (2.1 mm × 150 mm, 1.7 μm) f'40 grad. Il-fażi mobbli A kienet aċetonitrile (0.1% aċidu formiku) u l-fażi mobbli B kienet ilma (0.1% aċidu formiku). Ir-rata tal-fluss kienet 0.20 mL·min-1^{-1}-1, volum ta 'injezzjoni 5 μL. Gradjent: 0-4 min, 95% B; 4-5 min, 95%-65% B; 5-13 min, 65%-25% B; 13-14 min, 25%-0% B; 14–18 min, 0%–95% B.

L-ispettrometrija tal-massa twettqet bl-użu ta 'strument Q Exactive Plus f'modi ta' joni pożittivi u negattivi b'vultaġġ ta 'sprej ± 3.2 kV, gass għant 2.0-8.0 psi, temperatura kapillari 350 grad, u firxa ta' skennjar m/z 100-1,000.

2.10 Statistika Multivarjata u Ipproċessar tad-Dejta

Id-dejta mhux ipproċessata LC-MS ġiet ipproċessata minn qabel u normalizzata bl-użu ta 'softwer Compound Discoverer. PCA mhux sorveljat intuża biex jevalwa d-differenzi fir-raggruppament u fil-grupp. OPLS-DA sorveljat intuża biex jinkisbu valuri VIP. Ġie applikat t-test għal data normalizzata. Metaboliti b'VIP > 1 u P < 0.05 tqiesu bħala bijomarkaturi potenzjali u ġew identifikati aktar.

2.11 Identifikazzjoni tal-Bijomarkatur u Analiżi tal-Pathway

Ħin ta 'ritenzjoni preċiż (Rt), m/z, u piż molekulari nkisbu minn kromatogrammi TIC. Il-formuli tal-kandidati u l-kompożizzjoni elementali kienu mbassra bl-użu tad-databases onlajn tal-Compound Discoverer (HMDB, KEGG). L-arrikkiment tal-mogħdija sar bl-użu ta' MetaboAnalyst.

2.12 Osteoblast Kultura u Differenzjar

L-osteoblasts tal-kalvari tal-ġurdien MC3T3-E1 ġew ikkultivati ​​f'inkubatur ta' 37 grad CO2_22​. Meta 80%-90% konfluwenti, iċ-ċelluli ġew miksija għal induzzjoni osteoġenika. Medja kompluta osteoġenika kienet tikkonsisti minn -MEM supplimentat b'10 mmol·L-1^{-1}-1 -glycerophosphate, 50 μmol·L-1^{-1}-1 aċidu askorbiku, u 100 nmol·L-1^{-1}-1 dexamethasone.

2.13 Assaġġ taċ-ċitotossiċità

Il-vijabbiltà taċ-ċelluli ġiet ivvalutata minn CCK-8. Iċ-ċelluli MC3T3-E1 (5 × 103^33 ċelluli/bir) ġew miżrugħa fi pjanċi ta '96 bir u inkubati matul il-lejl. Iċ-ċelloli mbagħad ġew ittrattati b'TFE (2-12 ug·mL-1^{-1}-1), CS (50-250 ug·mL-1^{-1}-1), jew GLcN (0.2-1.0 mmol·L-1^{-1}-1) għal 24 siegħa. L-assorbiment f'450 nm tkejjel biex tiġi kkalkulata l-vijabbiltà. Fuq il-bażi tar-riżultati, ġew magħżula dożi ottimali u kkombinati biex jittestjaw TG versus kontroll.

2.14 Tbajja ALP

Iċ-ċelloli MC3T3-E1 (1 × 104^44 ċelluli/bir) ġew miżrugħa fi pjanċi ta '12-il bir u maqsuma fi vojt (l-ebda induzzjoni), kontroll (induzzjoni osteoġenika), T (induzzjoni osteoġenika + TFE), u TG (induzzjoni osteoġenika + TG). Il-midja nbiddlu kull jum ieħor. Wara 7 ijiem, it-tbajja 'l-ALP saret skont l-istruzzjonijiet tal-kit.

2.15 Tbajja ARS

Bl-użu tal-istess grupp u trattament bħat-tbajja 'ALP, iċ-ċelloli ġew indotti għal 14-il jum. Iċ-ċelloli ġew iffissati b'4% paraformaldehyde, imtebbgħin b'0.1% Alizarin Red (pH 7.2) għal 30 min, maħsula, u osservati taħt mikroskopju.

2.16 Western Blot

Biex teżamina jekk TG jinfluwenzax id-divrenzjar osteoġeniku permezz tas-sinjalar BMP-2/Smad, ċelluli MC3T3-E1 (5 × 105^55 ċelluli/bir) ġew miżrugħa fi pjanċi ta '6-well bl-istess grupp bħal hawn fuq. Iċ-ċelloli ġew lysed b'RIPA flimkien ma' inibituri ta' protease u phosphatase. Wara l-kwantifikazzjoni tal-BCA, il-proteini ġew żnaturati, separati b'10% SDS-PAGE, trasferiti għal PVDF, imblukkati, inkubati b'antikorpi primarji (GAPDH, p-Smad1/5, Smad1, BMP-2, RUNX2, OSX, ALP), segwiti minn antikorp sekondarju HRP, żvilupp ECLJ, kwantifikazzjoni tal-Immaġini, u.

2.17 Analiżi Statistika

Id-dejta hija espressa bħala medja ± SD. SPSS intuża għall-analiżi statistika. Wara l-ittestjar tan-normalità, saret ANOVA one-way. Id-differenzi kienu kkunsidrati statistikament sinifikanti f'P <0.05.

 

Suppliment Nutrizzjonali tal-għadam Magħmul minn Cistanche
 

3. Riżultati

3.1 Indikaturi Bijokimiċi tas-Serum

Kif muri fit-Tabella 1, meta mqabbel mal-grupp sham, il-livelli ta 'E2 fil-grupp OVX naqsu b'mod sinifikanti, u jindikaw l-istabbiliment ta' mudell b'suċċess. PINP fis-serum fil-grupp OVX naqas b'mod sinifikanti, li jindika tnaqqis fil-formazzjoni tal-għadam fil-PMOP. Meta mqabbel ma 'OVX, PINP fil-gruppi T u TG żdied b'mod sinifikanti, li jindika li kemm T u TG żiedu l-markaturi tal-formazzjoni tal-għadam, b'irkupru aħjar f'TG. Meta mqabbel ma 'sham, CTX-I f'OVX żdied b'mod sinifikanti, li jindika assorbiment mill-ġdid tal-għadam imtejjeb wara ovariectomy. Meta mqabbel ma 'OVX, CTX-I f'T u TG naqas b'mod sinifikanti, bi tnaqqis aktar evidenti fit-TG. Hydroxyproline fis-serum (S-Hyp) żdied b'mod sinifikanti f'OVX kontra sham, li jindika żieda fid-degradazzjoni tal-kollaġen; meta mqabbel ma 'OVX, S-Hyp naqas f'T u TG, bi tnaqqis sinifikanti fit-TG, li jissuġġerixxi inibizzjoni aħjar tad-degradazzjoni tal-kollaġen.

3.2 Indikaturi Bijokimiċi tal-Awrina

Meta mqabbel ma 'sham, UP żdied b'mod sinifikanti fl-OVX; meta mqabbel ma 'OVX, UP naqas b'mod aktar notevoli f'TG. U-Ca żdied b'mod sinifikanti f'OVX kontra sham; meta mqabbel ma 'OVX, U-Ca naqas b'mod sinifikanti kemm f'T kif ukoll f'TG, bi tnaqqis akbar fit-TG. Urine Hyp (U-Hyp) żdied b'mod sinifikanti f'OVX kontra sham; meta mqabbel ma 'OVX, U-Hyp naqas b'mod sinifikanti f'kull grupp ta' trattament, bi tnaqqis akbar f'TG milli f'T (Tabella 2).

3.3 Istopatoloġija tal-għadam

It-tbajja 'HE wriet li l-kontinwità trabekulari kienet tajba f'sham, b'inqas adipoċiti fil-kavità tal-mudullun. Meta mqabbel ma 'sham, OVX wera kontinwità trabekulari ifqar u adipoċiti miżjuda b'mod notevoli. Meta mqabbel ma 'OVX, il-kontinwità trabekulari rkuprata f'T u TG u n-numri ta' adipoċiti naqsu; TG wera rkupru aktar ovvju (Figura 1A). It-tbajja’ ta’ TRAP wriet li n-numri ta’ osteoklasti żdiedu b’mod sinifikanti f’OVX kontra sham; meta mqabbla ma 'OVX, l-osteoklasti naqsu f'T u TG, bi tnaqqis sinifikanti f'TG (Figura 1B).

3.4 Densità Minerali tal-għadam u Parametri Mikro-CT

Mikro-CT wera tnaqqis sinifikanti fil-massa tal-għadam f'OVX meta mqabbel ma' sham. Meta mqabbel ma 'OVX, l-irkupru tal-massa tal-għadam f'TG kien aktar sinifikanti milli f'T, b'żieda ċara fid-densità trabekulari (Figura 1C). L-analiżi kwantitattiva wriet li BV/TV, Tb.Th, u Tb.N naqsu b'mod sinifikanti f'OVX kontra sham. Meta mqabbla ma 'OVX, dawn l-indiċi żdiedu b'mod sinifikanti wara TG (aħjar minn T). Tb.Sp u SMI żdiedu b'mod sinifikanti f'OVX kontra sham; meta mqabbel ma 'OVX, TG naqas dawn l-indiċi b'mod aktar sinifikanti minn T (Tabella 3).

3.5 PCA

Taħt il-modi tal-jone kemm pożittivi kif ukoll negattivi, PCA tal-profili tal-metaboliti tal-awrina fil-ġimgħat 3, 6 u 8 wera separazzjoni ċara fost gruppi sham, OVX u TG, li jindikaw profili metaboliċi distinti qabel/wara l-immudellar u qabel/wara t-trattament TG (ara l-materjal supplimentari referenzjat fil-kuntest tal-pubblikazzjoni oriġinali).

3.6 Skrinjar ta' Biomarker Potenzjal

OPLS-DA wera separazzjoni tal-gruppi aktar evidenti matul ġimgħat fiż-żewġ modi tal-joni. Plottijiet tal-vulkan u testijiet ta 'permutazzjoni ta' 200 appoġġjaw l-affidabilità tal-mudell (R2Y u Q2 qrib 1; interċettazzjoni Q2 < 0), li jissuġġerixxu l-ebda twaħħil żejjed.

3.7 Identifikazzjoni tal-Bijomarkatur u Analiżi tal-Pathway

Bl-użu ta 'VIP> 1 u P <0.05, ġew skrinjati bijomarkaturi potenzjali. Ibbażat fuq m/z, MS/MS, Rt, u piż molekulari, u li jirreferu fuq HMDB/KEGG, ġew identifikati 46 bijomarkatur potenzjali. L-arrikkiment KEGG indikat mogħdijiet prinċipalment involuti nikotinat u metaboliżmu nikotinamide, metaboliżmu histidine, metaboliżmu pyrimidine, metaboliżmu tryptophan, metaboliżmu D-amino acid, metaboliżmu alanine / aspartate / glutamate, metaboliżmu tal-purina, u metaboliżmu tal-vitamina B6 (Figura 2). Raggruppament ġerarkiku wera bidliet dinamiċi matul il-ġimgħat 3, 6, u 8 wara l-intervent tat-TG (ara l-materjal supplimentari referenzjat fil-kuntest tal-pubblikazzjoni oriġinali).

3.8 Assaġġ taċ-ċitotossiċità

Wara trattament ta '24 siegħa, 6 ug·mL-1^{-1}-1 TFE żied il-vijabbiltà taċ-ċelluli; dożi ogħla inibixxu l-vijabbiltà. GLcN f'0.4 mmol·L-1^{-1}-1 żdied b'mod sinifikanti l-vijabbiltà. CS f'150 ug·mL-1^{-1}-1 żied il-vijabbiltà (Tabella 4). Għalhekk, intgħażlu 6 ug·mL-1^{-1}-1 TFE, 0.4 mmol·L-1^{-1}-1 GLcN, u 150 ug·mL-1^{-1}-1 CS. Dożaġġ kombinat wera vijabbiltà ta 'kontroll ta' 1.00 ± 0.11 u vijabbiltà ta 'TG ta' 1.22 ± 0.03, li jindika li d-doża ta 'TG magħżula kienet sigura u mhux ċitotossika.

3.9 Effetti fuq id-Differenzjazzjoni Osteoġenika u l-Espressjoni tal-Proteini

ALP huwa markatur bikri tad-divrenzjar osteoġeniku. Taħt induzzjoni osteoġenika, TG wera tbajja ALP aktar skura minn T, li tindika promozzjoni aħjar tal-espressjoni ALP (Figura 3A). It-tbajja 'l-ARS wera li kemm T u TG ippromwovew il-formazzjoni ta' noduli mineralizzati meta mqabbla mal-kontroll, b'effett aktar evidenti f'TG (Figura 3B). Western blot wera espressjoni akbar ta 'markaturi osteoġeniċi taħt induzzjoni. Meta mqabbel mal-vojt, il-kontroll indika divrenzjar osteoġeniku b'suċċess. Wara t-trattament, TG żied b'mod aktar qawwi l-espressjoni tal-proteini BMP-2, p-Smad1/5, RUNX2, OSX, u ALP (Figura 3C; Tabella 5).

 

4. Diskussjoni

Insuffiċjenza tal-ovarji wara l-menopawża tnaqqas il-livelli tal-estroġenu u tfixkel il-metaboliżmu tal-għadam, ittejjeb id-differenzjazzjoni tal-osteoklasti filwaqt li tnaqqas id-differenzazzjoni tal-osteoblasti, u fl-aħħar mill-aħħar tikkawża telf tal-għadam [14-15]. Ibbażat fuq riċerka preċedenti [13], kien ipotizzat li l-kombinazzjoni tat-TFE ma 'suppliment nutrittiv tal-għadam tista' teżerċita effetti sinerġistiċi fit-titjib tal-PMOP. Għalhekk, dan l-istudju uża mudell ta 'far OVX u mudell ta' differenzjazzjoni tal-osteoblast biex jevalwa l-effikaċja u l-mekkaniżmu ta 'TG.

PINP (formazzjoni tal-għadam) u CTX-I (assorbiment mill-ġdid tal-għadam) ġew imtejba kemm minn T kif ukoll minn TG, b'TG juri effetti aktar sinifikanti. Hydroxyproline (Hyp), komponent ewlieni tal-kollaġen, jiżdied fis-serum u fl-awrina fl-OP [16-17]. F'dan l-istudju, OVX żied kemm fis-serum kif ukoll fl-awrina Hyp; it-trattament naqqas dawn il-livelli, b'TG inaqqashom b'mod aktar sinifikanti minn T. Żieda fl-assorbiment mill-ġdid tal-għadam f'OVX iżid ukoll it-telf tal-kalċju u l-fosfru, u jgħolli l-kalċju u l-fosfru fl-awrina, konsistenti ma 'DESAI S et al. [18]. It-trattament naqas U-Ca u UP, bi tnaqqis akbar fit-TG. Id-defiċjenza tal-estroġenu tbiddel l-istruttura trabekulari, tinibixxi l-osteoġenesi tal-BMSC, tippromwovi l-adipoġenesi u żżid l-attività tal-osteoklasti [19]. TG tejbet il-konnettività trabekulari, naqqas l-adipoċiti tal-mudullun, u naqqas in-numri ta 'osteoclast b'mod aktar effettiv minn T. Micro-CT ikkonferma li TG żied il-BMD u tejjeb il-mikroarkitettura trabekulari (BV/TV, Tb.Th, Tb.N) filwaqt li naqqas Tb.Sp u SMI.

Minħabba li l-OP hija marda metabolika, il-metabolomika ntużat biex tesplora netwerks metaboliċi regolati minn TG. Il-mogħdijiet regolati ta 'TG kienu jinvolvu l-aktar metaboliżmu ta' aċidu amminiku, nukleotidi u vitamini. Tryptophan huwa assoċjat ma 'BMD u livelli mnaqqsa jistgħu jimmarkaw OP [20]. F'dan l-istudju, tryptophan ġie regolat 'l isfel f'OVX u restawrat b'mod sinifikanti wara 8 ġimgħat ta' trattament ta 'TG, li jissuġġerixxi li TG jista' ttaffi t-telf tal-għadam billi jimmodula l-metaboliżmu tat-tryptophan. Il-krejatinina, marbuta mal-metaboliżmu ta 'arginine/creatine, ġiet assoċjata ma' OP [21-22]. Hawnhekk, il-krejatinina kienet l-ogħla f'OVX f'ġimgħa 8 u TG naqqasha b'mod sinifikanti, u jissuġġerixxi li r-regolamentazzjoni tal-metaboliżmu tal-arginine tista 'tikkontribwixxi għat-titjib tal-PMOP. Il-metaboliżmu tal-glutathione jipparteċipa fil-PMOP [23]. L-glutamate jista 'jiġi ġġenerat mill-metaboliżmu tal-glutathione (GSH). Il-GSH għandu funzjonijiet antiossidanti u jappoġġja r-rimodelazzjoni tal-għadam [24]. Fil-PMOP, l-istress ossidattiv jiżdied, il-kapaċità antiossidant tonqos, u l-attività tal-osteoklasti taqbeż l-attività tal-osteoblasti, u tfixkel il-formazzjoni tal-għadam [15]. F'dan l-istudju, L-glutamate kien ogħla f'OVX f'ġimgħa 8, u TG naqas L-glutamate, li jissuġġerixxi li TG jista 'jnaqqas il-konverżjoni ta' GSH għal L-glutamate u b'hekk jappoġġja l-livelli ta 'GSH u jikkontrobattu anormalitajiet metaboliċi relatati ma' defiċjenza ta 'estroġenu.

Disturbi fil-metaboliżmu tal-purini fl-OP jistgħu jwasslu għal akkumulazzjoni ta 'aċidu uriku [25-27]. Il-metabolomika wriet TG mnaqqsa livelli ta 'aċidu uriku fil-ġimgħat 3, 6, u 8 meta mqabbla ma' OVX, li tissuġġerixxi soppressjoni tas-sintesi tal-purini u akkumulazzjoni ta 'aċidu uriku. LIU DF et al. [28] irrapporta li l-interventi jistgħu jżidu l-adenosine biex itaffu d-disturbi fil-metaboliżmu tal-purini. F'dan l-istudju, TG żied b'mod sinifikanti l-adenosine wara 8 ġimgħat, li jissuġġerixxi kontribut għad-divrenzjar osteoġeniku u l-irkupru tal-għadam.

Vitamini (D, kumpless B, K) għandhom rwoli importanti fil-metaboliżmu tal-għadam [29-31]. Niacin u nikotinamide huma forom ta 'vitamina B3 [32]. Niacin tikkontribwixxi għas-sintesi tal-koenzima NAD/NADP, b'effetti anti-infjammatorji u antiossidanti [33]. Nicotinamide jista 'wkoll jippromwovi l-produzzjoni ta' NAD; NAD jappoġġja l-funzjoni mitokondrijali, inaqqas il-ħsara ROS, u jgħin biex iżżomm l-omeostasi tal-għadam. Fl-OP, NAD imnaqqas jista 'jfixkel id-divrenzjar u l-mineralizzazzjoni osteoġeniċi [34]. F'dan l-istudju, niacin u nikotinamide kienu ogħla f'OVX fil-ġimgħat 3, 6, u 8 (l-ogħla fil-ġimgħa 8). L-awturi deducew li s-sinteżi ta 'NAD tista' tkun indebolita fil-mard, li jwassal għal akkumulazzjoni ta 'niacin/nicotinamide u NAD baxx, filwaqt li TG naqqas il-livelli ta' niacin/nicotinamide, possibbilment jirrifletti l-konsum għas-sintesi NAD. Pyridoxamine (PM) hija parti mill-vitamina B6 [35]. Il-Vitamina B6 tappoġġja d-differenzazzjoni kondroġenika [36], u d-defiċjenza ta 'B6 tista' ddgħajjef il-crosslinking tal-kollaġen u s-saħħa tal-għadam [37]. Il-metaboliżmu tal-vitamina B6 ġie marbut mal-progressjoni tal-PMOP [38]. F'dan l-istudju, il-PM kien aktar baxx f'OVX f'ġimgħa 8, filwaqt li TG żied il-PM, li jissuġġerixxi rwol possibbli fl-appoġġ tal-kollaġen u s-saħħa tal-għadam.

Waqt it-tibdil tal-għadam, l-osteoblasts jimmedjaw il-formazzjoni tal-għadam. It-tbajja 'ALP u ARS tirrifletti l-osteoġenesi bikrija u l-mineralizzazzjoni tard, rispettivament, u tipikament tiżdied taħt induzzjoni osteoġenika [39-40]. Hawnhekk, TG saħħaħ l-attività ALP u noduli mineralizzati b'mod aktar effettiv minn TFE waħdu. BMPs huma membri tas-superfamilja TGF u għandhom rwoli ewlenin fid-divrenzjar osteoġeniku. BMP-2 jorbot ir-riċetturi, jattiva Smad1/5/8 (ma' Smad4), u jippromwovi fatturi ta' traskrizzjoni bħal RUNX2 u OSX downstream, fl-aħħar mill-aħħar jippromwovi sinteżi ta' proteini osteoġeniċi, depożizzjoni ta' matriċi extraċellulari, u mineralizzazzjoni [41]. Riċerka preċedenti rrapportat li TFE jippromwovi l-osteġenesi tal-BMSC permezz tal-mogħdija BMP-2/RUNX2/OSX [42]. Dan l-istudju ffoka fuq is-sinjalar BMP-2/Smad u sab li TG żdied b'mod sinifikanti l-espressjoni ta' BMP-2, p-Smad1/5, RUNX2, OSX, u ALP meta mqabbla ma 'TFE waħdu, li jappoġġja effett pro-osteoġeniku aktar b'saħħtu medjat permezz ta' BMP-2/Smad.

Fil-qosor, ir-riżultati in vivo u in vitro jindikaw li TG itejjeb b'mod effettiv l-anormalitajiet metaboliċi tal-għadam indotti minn OVX. Il-mekkaniżmi jistgħu jinvolvu r-regolazzjoni tal-metaboliżmu tal-aċidu amminiku, tan-nukleotidi u tal-vitamini u l-attivazzjoni tas-sinjalar BMP-2/Smad biex tiġi promossa l-osteġenesi. Dan l-istudju jipprovdi appoġġ teoretiku għal TG fil-prevenzjoni u t-trattament tal-PMOP.

 

5. Perspettiva ta 'l-Industrija: Xejriet ta' Ingredjenti Botaniċi għas-Saħħa ta' l-Għadam ta' wara l-menopawża - Minn Riċerka Orjentata lejn il-Mekkaniżmu għal Manifattura Standardizzata

Focus SEO: estratt tal-ħxejjex għall-osteoporożi wara l-menopawża, ingredjenti botaniċi għas-saħħa tal-għadam, osteoġenesi BMP-2/mogħdija Smad, Epimedium flavonoids (icariin) estratt, żvilupp tal-prodott botaniku iggwidat mill-metabolomika.

5.1 Għaliex il-kontenut "Estratt tal-Ħxejjex għall-Osteoporożi ta' wara l-Menopawża" immexxi minn mekkaniżmu huwa importanti fil-B2B

Għal ditti, importaturi, u formulaturi binisaħħa tan-nisausaħħa tal-għadamportafolli, is-suq dejjem aktar jippremja kunċetti botaniċi li jistgħu jiġu spjegati filoġika xjentifika ċara-per eżempju:

modulazzjoni metabolika b'ħafna mogħdijiet (mappoġġja l-metabolomika), u

mogħdijiet ta' sinjalazzjoni relatati mal-osteġenesi bħalBMP-2/Smad.

Studji bħal dak tradott hawn fuq huma ta’ valur għax jgħaqqdukompożizzjoni (TFE + CS/GLcN) → riżultati fenotipiċi (BMD, tnaqqis tal-osteoklasti, indiċi mikro-CT) → evidenza molekulari/bijokimika (BMP-2/Smad, PINP/CTX-I) → netwerks metaboliċi (mogħdijiet tal-vitamina B, aċidu amminiku u metaboliżmu tal-purini).

5.2 Is-sorsi tal-ingredjenti botaniċi: l-istandardizzazzjoni, it-traċċabilità u l-estrazzjoni skalabbli huma d-differenzjaturi reali

Fil-provvista B2B, "ħxejjex aromatiċi" mhix speċifikazzjoni waħda - hija katina tal-provvista. Għall-kumpaniji tal-prodott lest, il-mistoqsijiet ewlenin huma:

Jista 'jkun l-ingredjentstandardizzat(eż. komposti li jimmarkaw, marki tas-swaba')?

Hemmsistemi ta' kwalitàukontrolli tal-manifatturabiex tappoġġja provvista fit-tul?

Jista' l-fornitur jipprovdipakketti ta' dokumentazzjonigħal verifiki regolatorji u tal-klijenti?

5.3 Fejn tidħol Cistanche (tendenza + kapaċità ta’ manifattura, mhux pretensjoni sostituta)

Flimkien ma’ botaniċi stabbiliti għas-saħħa tal-għadam (eż.Epimediumflavonojdi),Cistanchekisbet attenzjoni fl-ispazju usa' tat-TCM u botaniku funzjonali minħabba l-istorja twila ta' użu tagħha f'formuli toniċi u l-preferenza dejjem tikber tal-industrija għalestratti ta' ħxejjex aromatiċiuattivi standardizzatili jistgħu jiġu integrati f'formati moderni ta 'supplimenti.

Għal xerrejja li qed jevalwaw l-imsieħba botaniċi, profil tal-fornitur orjentat lejn il-manifattura jsir importanti li jkopri:

sorsi integrati vertikalment,

kapaċità ta' estrazzjoni u pproċessar,

u trasparenza fl-isfond tal-kumpanija.

Dwar il-kapaċità tal-manifattura tagħna (sors ta' referenza):il-profil tal-kumpanija u l-isfond tal-fabbrika jistgħu jiġu riveduti fuq il-paġna uffiċjali "About Us" tas-sit tal-fornitur. ([xjcistanche.com])

Nota ta' konformità għall-blogs B2B:Jekk il-pożizzjonament tal-prodott tiegħek jimmira "l-osteoporożi ta' wara l-menopawża," kun żgur li l-lingwa tiegħek li tħares 'il barra tibqa'struttura/funzjonijewappoġġ nutrittiv–orjentat (skond is-suq tiegħek), u evita talbiet għal trattament ta’ mard sakemm ma jkunx appoġġjat u permess mir-regolamentazzjoni lokali.

Tgħallem aktar (paġni ta' referenza tal-fornitur):

Ħarsa ġenerali tal-kumpanija / sfond tal-fabbrika: ([xjcistanche.com])

Hub ta' kontenut botaniku relatat (riċetti TCM u rakkont tal-ingredjenti):(il-link ta' referenza pprovduta tiegħek tista' tiddaħħal ladarba tikkonferma li t-triq tal-URL finali hija korretta)

 

Referenzi

[1] LI J, CHEN X, LU LY, et al. Ir-relazzjoni bejn it-tessut xaħmi tal-mudullun tal-għadam u l-metaboliżmu tal-għadam fl-osteoporożi ta 'wara l-menopawża.Fattur tat-Tkabbir taċ-Ċitokine Rev, 2020, 52: 88.
[2] WANG LH, YU W, YIN XJ, et al. Prevalenza ta 'osteoporożi u ksur fiċ-Ċina: l-istudju tal-prevalenza ta' l-osteoporożi taċ-Ċina.JAMA Netw Miftuħ, 2021, 4(8): e2121106.
[3] WRIGHT NC, SAAG KG, DAWSON-HUGHES B, et al. L-impatt tal-kriterji dijanjostiċi l-ġodda tal-National Bone Health Alliance (NBHA) fuq il-prevalenza tal-osteoporożi fl-Istati Uniti.Osteoporos Int, 2017, 28(4): 1225.
[4] LIANG B, BURLEY G, LIN S, et al. Patoġenesi u trattament tal-osteoporożi: toroq eżistenti u emerġenti.Cell Mol Biol Lett, 2022, 27(1): 72.
[5] LEI SS, HUANG XW, LI LZ, et al. Esplorazzjoni tal-mekkaniżmu taEpimedii Folium–Rhizoma drynariaepar veġetali promossi difetti fl-għadam fejqan permezz ta 'farmakoloġija tan-netwerk u studji sperimentali.J Ethnopharmacol, 2024, 319(3): 117329.
[6] LIU W, XIANG SY, WU YC, et al. Icariin jippromwovi d-divrenzjar osteoġeniku tal-BMSCs permezz tal-mogħdija mTOR / autophagy biex ittejjeb l-osteoporożi assoċjata mad-dieta ketoġenika.J Orthop Surg Res, 2024, 19(1): 127.
[7] CHEN L, MA R, LUO P, et al. Effetti ta 'flavonoids totali ta' epimedium fuq it-tessut xaħmi tal-mudullun fil-firien ovariectomized.Endocrinol ta' quddiem (Lausanne), 2022, 13: 900816.
[8] LIU TS, YU H, WANG S, et al. Chondroitin sulfate itaffi l-osteoporożi kkawżata minn defiċjenza tal-kalċju billi jirregola l-metaboliżmu tal-lipidi.Nutr Metab (Londra), 2023, 20(1): 6.
[9] ZHENG HX, CHEN DJ, ZU YX, et al. Chondroitin sulfate jipprevjeni l-osteoporożi dijabetika indotta minn STZ permezz ta 'tnaqqis fil-glukożju fid-demm, stress anti-ossidattiv, anti-infjammazzjoni u regolazzjoni ta' espressjoni OPG/RANKL.Int J Mol Sci, 2020, 21(15): 5303.
[10] STELLAVATO A, RESTAINO OF, VASSALLO V, et al. Chondroitin sulfate fis-supplimenti tad-dieta tal-Istati Uniti meta mqabbla ma 'prodotti ta' grad farma: marki tas-swaba 'analitiċi u effett anti-infjammatorju potenzjali fuq kondroċiti u sinovioċiti osteoartrititiċi umani.Farmaċewtiċi, 2021, 13(5): 737.
[11] SODHI H, PANITCH A. Glycosaminoglycans fl-inġinerija tat-tessuti: reviżjoni.Bijomolekuli, 2020, 11(1): 29.
[12] QI SS, SHAO ML, SUN Z, et al. Chondroitin sulfate itaffi l-osteoporożi dijabetika u jsewwi l-mikrostruttura tal-għadam permezz ta 'anti-ossidazzjoni, anti-infjammazzjoni, u li jirregola l-metaboliżmu tal-għadam.Endocrinol ta' quddiem (Lausanne), 2021, 12: 759843.
[13] 张冬雪,曲帅,王明月,等．淫羊藿总黄酮联合骨营养剂抗骨质疏松作用探讨．中国骨质疏松杂志, 2023, 29(12): 1797.
[14] LI S, LIANG P, CHEN J, et al. Dendrobine jippromwovi l-formazzjoni tal-għadam permezz tal-passaġġ kanoniku ta 'sinjalazzjoni Wnt/-catenin u jipprevjeni l-osteoporożi wara l-menopawża.Front Pharmacol, 2025, 16: 1616070.
[15] ZHAO HY, YU F, WU W. Perspettivi ġodda dwar l-osteoporożi ta 'wara l-menopawża: mekkaniżmi u strateġiji terapewtiċi potenzjali ta' sirtuini u stress ossidattiv.Antiossidanti (Basel), 2025, 14(5): 605.
[16] RAI AD, SHERPA ML, SINGH A, et al. Assaġġ tal-phosphatase alkaline tal-għadam u tal-idrossiprolina tal-awrina f'nisa ta 'qabel u wara l-menopawża fl-istat ta' Sikkim u l-korrelazzjoni tiegħu mad-densità minerali tal-għadam.J Saħħa Midlife, 2021, 12(4): 304.
[17] 叶丽娟．恒古骨伤愈合剂治疗骨质疏松症的药效学研究．昆明:云南中医药大学,2024．
[18] DESAI S, BABARIA P, NAKARANI M, et al. Effett antiosteoporotic taHemidesmus indicusLinn. fuq firien ovariectomized.J Ethnopharmacol, 2017, 199: 1.
[19] LI J, LU LY, LIU L, et al. Ir-rwol uniku tat-tessut xaħmi tal-mudullun fit-telf tal-għadam ikkaġunat mill-ovarjiktomija fil-ġrieden.Endokrinali, 2024, 83(1): 77.
[20] LIU XY, ZHANG SS, LU XM, et al. Studju metabonomic dwar l-effett kontra l-osteoporożi taRhizoma Drynariaeu l-mekkaniżmu ta' azzjoni tiegħu bl-użu ta' UPLC–MS/MS.J Ethnopharmacol, 2012, 139(1): 311.
[21] EISENHAUER A, MÜLLER M, HEUSER A, et al. Proporzjonijiet tal-isotopi tal-kalċju fid-demm u fl-awrina: bijomarkatur ġdid għad-dijanjosi tal-osteoporożi.Bone Rep, 2019, 10: 100200.
[22] MEI ZD, DONG X, QIAN Y, et al. Assoċjazzjoni bejn il-metaboloma u d-densità minerali tal-għadam f'popolazzjoni Ċiniża.EBioMedicine, 2020, 62: 103111.
[23] MA YS, HOU ZJ, LI Y, et al. Il-kxif tal-mekkaniżmi farmakoloġiċi ta 'eleutheroside E kontra l-osteoporożi ta' wara l-menopawża permezz ta 'metabolomika bbażata fuq UPLC-Q/TOF-MS.Front Pharmacol, 2020, 11: 1316.
[24] XU HC, NOZAKI K, YU ZN, et al. Funzjonalizzazzjoni tal-wiċċ ta 'impjanti tat-titanju b'konjugat ta' glutathione b'rilaxx kontrollat ​​għal antiossidant u osteġenesi.J Mater Res Technol, 2025, 34: 2872.
[25] LI X, WANG YF, GAO MT, et al. Relazzjonijiet immexxija mill-metabolomika fost il-kliewi, il-mudullun u l-għadam tal-firien b'osteoporożi wara l-menopawża.Għadam, 2022, 156: 116306.
[26] YANG KD, WANG XC, ZHANG C, et al. Metformin itejjeb il-metaboliżmu tal-purini mmirati lejn HPRT1 u jsewwi l-fluss awtofaġiku medjat minn NR4A1 billi jimmodula s-shutling nukleoċitoplasmiku FoxO1 biex jikkura l-osteoporożi wara l-menopawża.Ċellula Mewt Dis, 2024, 15(11): 795.
[27] SAVIO LEB, LEITE-AGUIAR R, ALVES VS, et al. Sinjali purinerġiċi fil-modulazzjoni tal-bijoloġija redox.Redox Biol, 2021, 47: 102137.
[28] LIU DF, MA LY, ZHENG JH, et al. Isopsoralen itejjeb l-osteoporożi indotta mill-glukokortikojdi billi jirregola l-metaboliżmu tal-purini u jippromwovi d-divrenzjar tal-osteoblasti medjat mill-mogħdija cGMP/PKG.Curr Drug Metab, 2024, 25(4): 288.
[29] BELLONE F, CINQUEGRANI M, NICOTERA R, et al. Rwol tal-vitamina K fil-mard kroniku tal-kliewi: fokus fuq is-saħħa tal-għadam u kardjovaskulari.Int J Mol Sci, 2022, 23(9): 5282.
[30] MOSCHONIS G, HEUVEL EG VAN DEN, MAVROGIANNI C, et al. Effett tal-konsum tal-ġobon tat-tip gouda arrikkit bil-vitamina D fuq markaturi bijokimiċi tal-metaboliżmu tal-għadam f'nisa wara l-menopawża fil-Greċja.Nutrijenti, 2021, 13(9): 2985.
[31] DAI ZL, KOH W P. B-vitamini u saħħa tal-għadam-reviżjoni tal-evidenza attwali.Nutrijenti, 2015, 7(5): 3322.
[32] ZWICKENPFLUG W, HORNUNG F, HOLLAUS A, et al. Bijosintesi tal-vitamina B3 u NAD+^++: l-inkubazzjoni taċ-ċelloli HepG2 mal-myosmine alkaloid.J Sci Food Agric, 2024, 104(11): 6844.
[33] CHEN LJ, XING XK, ZHANG PF, et al. Regolazzjoni omeostatika ta 'NAD(H) u NADP(H) fiċ-ċelloli.Ġeni Dis, 2024, 11(5): 101146.
[34] YOON H, PARK SG, KIM HJ, et al. Nicotinamide itejjeb id-divrenzjar tal-osteoblasti permezz tal-attivazzjoni tas-sistema ta 'difiża antiossidanti mitokondrijali.Exp Mol Med, 2023, 55(7): 1531.
[35] DIAS P, SIATKA T, VOPRŠALOVÁ M, et al. Proprjetajiet bijoloġiċi ta 'vitamini tal-kumpless B, parti 2-vitamini B (6) u B (7) (bijotina, vitamina H).Nutr Res Rev, 2025, 38(2): 791.
[36] DEIANA M, MALERBA G, CARBONARE LD, et al. L-attività fiżika tipprevjeni d-degradazzjoni tal-qarquċa: studju tal-metabolomika jindika l-involviment tal-vitamina B6.Ċelloli, 2019, 8(11): 1374.
[37] WELAN R. Effett tal-vitamina B6 fuq ksur tal-osteoporożi.J Bone Metab, 2023, 30(2): 141.
[38] YANG F, DONG X, MA FX, et al. L-effetti ta 'intervent ta' tubson-2 decoction fuq firien ovariectomized kif determinat minn taħlita ta 'farmakoloġija tan-netwerk u metabolomika.Front Pharmacol, 2020, 11: 581991.
[39] CUI YB, YANG ZJ, YU GS, et al. Naringin jippromwovi d-differenzazzjoni tal-osteoblasti u jtejjeb l-osteoporożi fil-ġrieden ovariectomized.Sci Rep, 2025, 15(1): 12651.
[40] 陈泽彬,罗兰兰,石心怡,等．杜仲汤含药血清通过 L-VGCCs促进成骨细胞增殖和分化的机制研究．中国中药杂志, 2025, 50(12): 3335.
[41] YAN CP, WANG XK, JIANG K, et al. -ecdysterone saħħew ir-riġenerazzjoni tal-għadam permezz tal-mogħdija tas-sinjalar BMP-2/SMAD/RUNX2/Osterix.Front Cell Dev Biol, 2022, 10: 883228.
[42] 梁广胜,陈伟才,殷嫦嫦,等．淫羊藿总黄酮对大鼠骨髓间充质干细胞成细胞成细胞成细胞成细胞BMP-2/Runx2/OSX 通路的影响．中国中西医结合杂志, 2016, 36(5): 614.