Effetti Kontra x-Xjuħija Ta' l-Estratt tal-Kultura tal-Kalla ta' Leontopodium Alpinum (Edelweiss) Permezz tal-Profiling tat-Trancriptome Parti 3

Jekk jogħġbok ikklikkjaoscar.xiao@wecistanche.comgħal aktar informazzjoni

3.4. Evalwazzjoni in vitro ta 'l-Estratt ta' LACCE Assoċjat ma 'l-Effett ta' Moisturizing

Aħna eżaminajna l-effett moisturizing ta 'LACCE fuq ċelluli HaCaT billi tuża l-espressjoni ta' Aquaporin 3 (AQP3), li tikkodifika l-ilma u l-proteina li tittrasporta l-gliċerol espressa fiċ-ċelloli tal-ġilda, permezz ta 'RT-PCR f'ħin reali (Figura 3C). Meta mqabbel mal-kontroll negattiv, il-ġene AQP3 kien irregolat b'mod sinifikanti biż-żieda tal-LACCEextract.cistanche tubulosa benefiċċji u effetti sekondarjiInteressanti, hekk kif il-konċentrazzjoni tal-LACCEextract żdiedet, l-espressjoni ta 'AQP3 żdiedet gradwalment minn 3.19 (0.1 fil-mija LACCE) għal 4.5 (1 fil-mija LACCE).

Jekk jogħġbok ikklikkja hawn biex tkun taf aktar

3.5.Valutazzjoni In Vitro tal-Estratt LACCE bħala Aġent Kontra t-Tikmix

Aħna ttestjajna l-effett ta 'kontra t-tikmix ta' LACCE bl-użu ta 'ġene markatur li jikkodifika matrix metalloproteinase-2(MMP-2), li jippromwovi t-tkabbir taċ-ċelluli, permezz ta' RT-PCR f'ħin reali (Figura 3D). L-irradjazzjoni UVB żiedet b'mod sinifikanti l-espressjoni ta' MMP-2meta mqabbla mal-kontroll negattiv mingħajr ebda irradjazzjoni UVB (bidla darbiet 0.67 b'valur inqas minn0.05). L-espressjoni ta' MMP-2 kienet irregolata biż-żieda ta' LACCE kontra l-irradjazzjoni UVB. B'mod ġenerali, l-espressjoni ta' MMP-2 naqset gradwalment hekk kif żdiedet il-konċentrazzjoni ta' LACCE. L-espressjoni ta 'MMP-2 f'kundizzjonijiet normali mingħajr ebda irradjazzjoni UVB kienet komparabbli ma' dik f'0.5 fil-mija LACCE b'irradjazzjoni UVB.

3.6.Valutazzjoni Klinika ta' LACCE dwar l-Irfigħ tal-wiċċ u t-Titjib tat-tikmix periorbitali, l-elastiċità tal-ġilda, id-densità tal-ġilda u l-ħxuna tal-ġilda

Biex neżaminaw l-effett ta 'LACCE in vivo, wettaqna evalwazzjoni klinika ta' LACCE assoċjata ma 'l-irfigħ tal-wiċċ u t-titjib tat-tikmix periorbitali, l-elastiċità tal-ġilda, id-densità dermali u l-ħxuna tal-ġilda. Għal dan, 21 voluntiera mara, li komplew jinqasmu fi 12 fl-40 sena u disgħa fil-50 sena, ipparteċipaw fl-evalwazzjoni klinika fuq erba’ ġimgħat.

Cistanche jista 'anti-aging

L-ewwel, eżaminajna l-effett tat-tikmix periorbitali LACCEon bl-użu tas-sistema ta 'riżoluzzjoni għolja PRIMOS. Żewġ parametri ta 'ħruxija differenti, medja ta' ħruxija (Ra) (Figura 4A) u ħruxija kwadrata ta 'l-għeruq (Rq) (Figura 4B), ġew analizzati. Erba' ġimgħat wara t-trattament b'LACCE u l-plaċebo, il-valuri Ra u Rq naqsu fiż-żewġ kampjuni.estratt ta' cistanche tubulosa,Madankollu, ir-rata ta' tnaqqis għall-valuri Ra u Rq kienet ħafna ogħla fil-kampjun trattat b'LACCE milli fil-kampjun trattat bil-plaċebo (Tabella 2). Pereżempju, ir-rata tat-tnaqqis għall-valur Ra ​​kienet 3.654 fil-mija u 6.118 fil-mija f'ġimagħtejn u erba' ġimgħat, rispettivament, b'sinifikat statistiku (p<0.05). similarly,="" the="" decrease="" rate="" for="" the="" rq="" value="" was="" 3.583%and="" 6.189%="" at="" two="" and="" four="" weeks,="" respectively,="" with="" statistical="" significance=""><0.05). moreover,="" the="" ratio="" of="" volunteers="" who="" displayed="" a="" reduction="" in="" the="" roughness="" parameters="" for="" the="" lacce-treated="" sample="" was="" much="" higher="" than="" that="" for="" the="" placebo-treated="" sample.="" for="" example,="" at="" four="" weeks,="" the="" ratios="" of="" volunteers="" showing="" a="" decrease="" in="" ra="" and="" rq="" values="" were="" 90.476%="" in="" the="" lacce-treated="" sample="" and="" 57.142%="" in="" the="" placebo-treated="">

Figura 4. Testijiet kliniċi in vivo ta 'LACCE għall-irfigħ tal-wiċċ u t-titjib tat-tikmix periorbitali, l-elastiċità tal-ġilda, id-densità tal-ġilda, u l-ħxuna tal-ġilda. Il-valuri Ra (A) u Rq (B) ġew imkejla mis-sistema ta 'riżoluzzjoni għolja PRIMOs fi tliet punti ta' ħin differenti biex josservaw l-effett tat-tikmix periorbitali ta 'LACCE (1 fil-mija). Il-valuri ta 'elastiċità grossa (R2)(C), elastiċità netta (R5)(D), u elastiċità bijoloġika (R7)(E) ġew imkejla biex tiġi osservata l-elastiċità tal-ġilda b'LACCE. Kejl tad-densità tal-ġilda (F) u l-ħxuna tal-ġilda (G). Kejl R fil-kantuniera tal-ħalq (H).Qabel/wara:probabbiltà p (miżuri ripetuti ANOVA, sinifikanti:*p<><><0.001).lacce lacebo="" b:="" probability="" p(repeated="" measures="" anova,="" significant∶="" 十="" p=""><>

Aħna eżaminajna l-effett ta 'LACCE fuq l-elastiċità tal-ġilda tal-ħaddejn bl-użu ta' Cutometer. Tliet parametri differenti, elastiċità grossa (R2), elastiċità netta (R5), u elastiċità bijoloġika (R2) (R7), ġew imkejla (Figura 4C-E). Il-valuri R2, R5, u R7 kemm għall-kundizzjonijiet ikkurati b'LACCE kif ukoll bil-plaċebo żdiedu matul l-erba' ġimgħat.reviżjonijiet cistanche tubulosa,Pereżempju, il-valur R2 għall-kampjun trattat b'LACCE żdied minn 0.728 għal 0.752, filwaqt li l-valur R2 għall-kampjun trattat bil-plaċebo żdied minn 0.74{ {10}} sa 0.752 (Figura 4C). Barra minn hekk, ir-rata ta 'żieda fil-kampjun trattat b'LACCE kienet ħafna ogħla minn dik fil-kampjun trattat bil-plaċebo (Tabella 3). Per eżempju, ir-rati ta 'żieda fil-kampjun trattat LACCE kienu 3.296 (R2), 5.816 (R5), u 6.756 (R7), filwaqt li r-rati ta' żieda fil-kampjun trattat bil-plaċebo kienu 1.621 (R2), 2.895 (R5), u 3.378(R7)f'erba' ġimgħat. Madankollu, ma kien hemm l-ebda differenza fil-proporzjon ta 'voluntiera li juru żieda fl-elastiċità tal-ġilda bejn iż-żewġ kampjuni.

Aħna eżaminajna l-effett ta 'LACCE fuq id-densità tal-ġilda u l-ħxuna tal-ġilda bl-użu ta' Dermascan-C. Iż-żewġ kampjuni wrew żieda fid-densità tal-ġilda u l-ħxuna tal-ġilda erba’ ġimgħat wara t-trattament (Figura 4F, G). 26.936 sa 28.168 (Figura 4F). Ir-rata ta 'żieda għad-densità tal-ġilda kienet ħafna ogħla fil-kampjun LACCE (5.466 fil-mija) milli fil-kampjun ittrattat bil-plaċebo (3.118 fil-mija) erba' ġimgħat wara t-trattament (Tabella 4). Għal darb'oħra, ir-rata ta 'żieda għall-ħxuna tal-ġilda kienet ħafna ogħla fil-kampjun LACCE (10.192 fil-mija) milli fil-kampjun ittrattat bil-plaċebo (4.829 fil-mija) erba' ġimgħat wara t-trattament. Interessanti, ħafna voluntiera wrew żieda qawwija fid-densità tal-ġilda (90.476 fil-mija) u l-ħxuna tal-ġilda (100 fil-mija) wara erba 'ġimgħat ta' trattament LACCE.

Aħna eżaminajna l-effett ta 'LACCE fuq l-irfigħ tal-wiċċ fil-kantuniera tal-ħalq bl-użu tal-analiżi Moireé. Kemm il-kampjuni ttrattati b'LACCE kif ukoll bil-plaċebo wrew tnaqqis fl-irfigħ tal-wiċċ (Figura 4H); madankollu, ir-rata tat-tnaqqis ta 'l-irfigħ tal-wiċċ kienet ħafna ogħla fil-kampjun LACCE (2.541 fil-mija ) minn dik fil-kampjun tal-plaċebo (0.437 fil-mija ) f'erba' ġimgħat ta 'trattament. Il-proporzjon ta 'voluntiera li wrew tnaqqis fl-irfigħ tal-wiċċ kien ogħla b'LACCE (85.714 fil-mija) milli bil-plaċebo (57.142 fil-mija).

3.7.Analiżi tat-Transkriptome taċ-Ċelloli HaCaT bi Rispons għal LACCE minn RNA-Seq

Għalkemm l-estratt LACCE wera diversi effetti pożittivi bħala aġent kożmetiku, jista 'jkun notevoli li tiġi eżaminata l-bidla fit-traskriptome uman b'reazzjoni għal LACCE. Għal dan, użajna 1 fil-mija estratt ta 'LACCE minflok konċentrazzjoni aktar baxxa għaliex asssumijna li l-effett possibbli ta' konċentrazzjoni baxxa ta 'LACCE fuq ċelloli tal-keratinoċiti jista' jkun żgħir. Iċ-ċelloli HaCaT ġew ittrattati b'1 fil-mija LACCE (trattament), filwaqt li ċ-ċelloli HaCaT ta 'kontroll ġew ittrattati b'ilma sterili. Tliet repliki bijoloġiċi ġew applikati għal RNA-Seg. In-numru ta' qari tas-sekwenza varja minn 32.776,672 sa 42,640,000(Tabella 5). Aktar minn 90 fil-mija tal-qari fis-sitt kampjuni kollha ġew immappjati fuq it-traskrizzjonijiet ta 'referenza tal-bniedem li fihom 159,998 traskrizzjonijiet (Figura 5A). Għall-analiżi tal-espressjoni tal-ġeni, aħna kkalkulajna frammenti għal kull kilobase ta 'traskrizzjoni għal kull miljun (FPKM) valuri. Kif muri fil-Figura 5B, il-valuri FPKM mit-tliet kampjuni ttrattati kienu ogħla minn dawk mit-tliet kampjuni ta 'kontroll. Wara li tneħħew traskrizzjonijiet żejda, 11,290 traskrizzjonijiet biss ta '68,158 traskrizzjonijiet ġew espressi f'ċelloli tal-keratinoċiti umani (Tabella S1).

Figura 5. Riżultati tal-mapping, distribuzzjoni ta 'frammenti għal kull kilobase ta' valuri ta 'traskrizzjoni għal kull miljun (FPKM), u viżwalizzazzjoni ta' ġeni espressi b'mod differenzjali. (A)Porzjon ta' qari mappjat (oranġjo) u mhux mappat (griż) fuq it-traskriptoma ta' referenza uman. (B) Boxplot li juri d-distribuzzjoni tal-valuri FPKM f'kull librerija. (C) Plot tal-vulkan li juri d-distribuzzjoni ta' log1o(adj) u log2 (FC) għall-ġeni espressi kollha. Pad u FC jindikaw il-valur p aġġustat u l-bidla tat-tinja, rispettivament. Għaxar DEG identifikati huma indikati b'tikek blu (ġeni regolati 'l isfel, Down), ħomor (ġeni regolati 'l fuq, Up), u griżi (ġeni mhux espressi b'mod sinifikanti, NS).

Għalkemm użajna konċentrazzjoni ogħla ta' LACCE(1 fil-mija )li kienet 10 darbiet ogħla mill-LACCE normali (0.1 fil-mija ) użata għall-kożmetiċi, it-traskriptome taċ-ċelloli tal-keratinoċiti umani ma nbidilx b'mod sinifikanti b'reazzjoni għat-trattament LACCE, kif muri fil-plott tal-vulkan (Tabella S1 u Figura 5C).cistanche UKIbbażat fuq il-valur p aġġustat ta 'inqas minn 0.001 u log2 (bidla darbiet) ta' aktar minn 1, identifikajna total ta '10 ġeni espressi b'mod differenzjali (DEGs) fuq LACCE (Tabella 6). Mill-10 DEGs,

l-erba' ġeni regolati 'l isfel kienu ġeni li jikkodifikaw inibitur ta' 3 li jgħaqqad id-DNA, dominju ripetut ta 'ankyrin 1, dominju BTB relatat ma' Rho 3 li fih 3, u 18S ribosomal N5. Is-sitt ġeni regolati kienu ġeni li jikkodifikaw carbonic anhydrase 2, proteina li tgħaqqad il-fattur tat-tkabbir bħal insulina 3, keratin 15, proteina interazzjoni BCL2-3, proteina li tgħaqqad il-fattur tat-tkabbir tal-fibroblast 1, u transCript4 li jinduċibbli ħsara fid-DNA.

3.8. Rwoli Funzjonali ta 'Ġeni Up-Regulated Bi Risposta għal LACCE

L-impatt ta 'LACCE fuq it-transcriptome tal-keratinoċiti kien aktar ħafif minn trattamenti oħra ta' stress. Biex tikseb ħarsa ġenerali funzjonali ta 'ġeni regolati 'l fuq u 'l isfel, wettaqna analiżi ta' arrikkiment GO. Madankollu, ma ksibna l-ebda riżultat sinifikanti għal termini GO arrikkit minħabba ġeni żgħir espressi b'mod differenzjali. Għalhekk, żidna n-numru ta' ġeni espressi b'mod differenzjali billi applikajna valur p aġġustat ta' inqas minn 0.05 u log2 (bidla darbiet) ta' aktar minn 0.5. Bħala riżultat, identifikajna 22 ġeni regolati 'l fuq u 13-il ġeni regolati 'l isfel (Tabella S1). L-analiżi tal-arrikkiment GO identifikat 36 terminu GO arrikkit magħmul minn 21 terminu GO (proċess bijoloġiku), żewġ termini GO (funzjoni molekulari), u 13-il terminu GO (komponent ċellulari) f'ġeni regolati 'l fuq (Tabella S2). B'kuntrast, 12-il terminu GO arrikkit biss għall-proċess bijoloġiku ġew identifikati fi 13-il ġeni regolati 'l isfel (Tabella S2).

Skont il-proċess bijoloġiku, il-ġeni involuti fil-keratinizzazzjoni, il-kornifikazzjoni, il-mewt taċ-ċelluli programmata, l-organizzazzjoni tal-junction taċ-ċelluli, ir-regolamentazzjoni pożittiva tal-proċess tal-iżvilupp, u l-istabbiliment ta 'barriera tal-ġilda kienu regolati ħafna (Figura 6A).cistanche wirkungGħall-funzjoni molekulari, il-kostitwent strutturali taċ-ċitoskeletru u l-attività tal-molekula strutturali kienu espressi ħafna (Tabella S2). Fil-każ tal-komponent ċellulari, ġeni fil-filament intermedju, exosome extraċellulari, u filament keratin kienu espressi ħafna (Figura 6B). Ta '12-il terminu GO għal 13-il ġeni regolati 'l isfel, ġeni relatati mar-rispons għall-jone taż-żingu, ir-regolamentazzjoni tal-ossifikazzjoni, u r-regolamentazzjoni negattiva tal-proċess bijoloġiku ta' spiss kienu rregolati 'l isfel.

Figura 6. L-istruttura ġerarkika tat-termini GO arrikkit identifikati għal ġeni umani regolati 'l fuq b'reazzjoni għal LACCE. Graffs aċikliċi diretti (DAGs) Ħares l-istruttura ġerarkika ta 'termini GO arrikkit identifikati għal ġeni up-regolati fuq trattament LACCE skond il-proċess bijoloġiku (A) u l-komponent ċellulari (B). Kull terminu GO huwa indikat b'kulur tal-kaxxa differenti abbażi tal-valur p. Informazzjoni dettaljata għat-termini GO identifikati tinsab fit-Tabella S2.

4. Diskussjoni

Il-kożmetiċi huma definiti klassikament bħala kwalunkwe prodott ippreparat li jista 'jiġi applikat għall-ġisem tal-bniedem, inklużi l-wiċċ, il-ġilda, ix-xagħar, il-ħalq, u l-għajnejn, biex jibdlu jew isaħħu d-dehra tal-ġisem tal-bniedem [21]. Barra minn hekk, il-kożmetiċi jintużaw għat-tindif, biex jipprovdu fwieħa, u biex jagħtu protezzjoni. Il-biċċa l-kbira tal-kożmetiċi huma komposti minn komposti kimiċi li jistgħu jiġu derivati ​​minn sorsi naturali jew sintetiċi [22].

F'dan l-istudju, aħna eżaminajna l-effetti possibbli ta 'LACCE bħala kompost naturali għall-kożmetiċi permezz ta' analiżi diversi in vitro u in vivo. Diversi riżultati ta 'assaġġ in vitro wrew l-attività antiossidant qawwija ta' LACCE b'reazzjoni għat-trattament UVB. Interessanti, l-effett ta 'LACCEasan antiossidant kien korrelatat mal-konċentrazzjoni ta' LACCE. L-attività antiossidant ta' LACCE (1 fil-mija) kienet komparabbli ma' dik ta' NAC jew ferm ogħla mill-vitamina Ċ. LACCE fih ammont ogħla ta' aċidu chlorogenic, 3,5-Dicaffeoylquinic acid, leontopodic acid B, u leontopodic acid A minn kulturi normali edelweiss callus, kif muri fi studju preċedenti [4]. B'mod partikolari, studju preċedenti li identifika żewġ aċidi leontopodic minn edelweiss wera r-rwol funzjonali ta 'LACCE bħala aġent antiossidant [23].

L-espressjoni ta 'żewġ ġeni infjammatorji ġiet mrażżna bit-trattament LACCE, li jissuġġerixxi r-rwol possibbli ta' LACCE f'attività anti-infjammatorja, kif muri qabel [7,24]. Interessanti, ma kien hemm l-ebda differenza sinifikanti fl-effett anti-infjammatorju fost konċentrazzjonijiet differenti ta 'LACCE, li jindika li 1 fil-mija LACCE jista' jkun biżżejjed għall-applikazzjoni bħala aġent anti-infjammatorju fil-kożmetiċi. B'kuntrast, l-espressjonijiet ta 'AQP3 u MMP2 meħtieġa għall- moisturizing u t-tikmix, rispettivament, nbidlu b'mod drammatiku wara t-trattament b'konċentrazzjonijiet differenti ta' LACCE.

Test kliniku huwa l-aktar pass importanti għall-użu tal-estratt tal-pjanti bħala sors kożmetiku. F'dan l-istudju, eżaminajna l-effetti in vivo ta 'LACCE ma' 21 voluntier. L-applikazzjoni ta 'LACCE fuq il-wiċċ u t-tessuti tal-ġilda wriet żidiet sinifikanti f'erba' fatturi differenti (titjib fit-tikmix periorbitali, elastiċità tal-ġilda, densità dermali, u ħxuna tal-ġilda) meta mqabbla mal-plaċebo. B'mod partikolari, l-użu kostanti ta 'LACCE tejjeb il-wiċċ u t-tessuti tal-ġilda b'mod sinifikanti. Għalkemm l-estratti tal-edelweiss huma magħrufa bħala sors għall-kożmetiċi, dan huwa l-ewwel rapport li juri l-applikazzjoni b'suċċess ta 'LACCE bħala materjal kożmetiku.

Biex tevalwa l-estratti tal-pjanti bħala sors kożmetiku jew mediċinali in vitro, l-eżami tal-espressjoni tal-ġeni markaturi huwa approċċ sperimentali popolari. Madankollu, l-applikazzjoni ta 'ġeni magħżula biss għall-analiżi tal-espressjoni tal-ġeni għandha bosta limitazzjonijiet. L-iżvilupp rapidu reċenti tas-sekwenzjar tal-ġenerazzjoni li jmiss jiffaċilita l-analiżi tal-espressjoni tal-ġeni mal-ġenoma kollu. F'dan l-istudju, użajna RNA-Seq biex neżaminaw bidliet fit-traskriptome kollha fiċ-ċelloli tal-keratinoċiti umani b'rispons għal LACCE. Ir-riżultati tagħna wrew li mill-inqas 16.56 fil-mija tal-ġeni umani kienu espressi f'ċelloli tal-keratinoċiti, li jindikaw l-espressjoni speċifika tat-tessut tal-ġeni umani. L-LACCE indotta l-espressjoni ta 'diversi ġeni; madankollu, il-bidla globali fit-traskriptome uman minn LACCE kienet ħafifa meta mqabbla ma 'kundizzjonijiet oħra ta' stress. Dan ir-riżultat jiżgura s-sigurtà ta 'LACCE għall-applikazzjoni fit-tessuti umani.

analiżi ta 'arrikkiment żvelat li ġeni up-regolati li jikkodifikaw Keratin 5 (KRT5), KRT19, KRT6A, KRT15, ​​KRT14, KRT17, u junction plakoglobin (JUP) kienu involuti fil-keratinizzazzjoni u l-kornifikazzjoni. Il-keratinoċiti epidermali għandhom rwol importanti bħala ostaklu kontra diversi fatturi ambjentali [25]. Speċifikament, ċelluli epidermali differenzjati terminali jiżviluppaw f'keratinoċiti mejta permezz ta 'mewt taċ-ċelluli programmata msemmija bħala cornification, li jiffurmaw barriera epidermali qawwija [26]. Wara l-mewt taċ-ċelluli, is-saff tal-ġilda cornified jipprovdi ħafna vantaġġi għall-wiċċ u t-tessuti, inkluż żieda fl-elastiċità, stabbiltà, moisturizing, u reżistenza mekkanika [25]. Mill-ġeni KRT identifikati, il-ġene li jikkodifika Keratin15(KRT15), membru tal-familja tal-ġeni tal-keratin, huwa magħruf bħala markatur taċ-ċelluli staminali tal-follikulu tax-xagħar li huwa espress ħafna fit-tessuti tal-ġilda[27,28]. Studju reċenti ssuġġerixxa li KRT15 jiffunzjona fir-riġenerazzjoni epiteljali kontra r-radjazzjoni u t-tiswija tal-feriti [29,30].

Minbarra diversi ġeni li jikkodifikaw proteini KRT, ġeni li jikkodifikaw DDIT4, BNIP3, u IGFBP3 jiffunzjonaw fil-mewt taċ-ċelluli programmata. Pereżempju, it-traskrizzjoni4(DDIT4) li tista 'tinduċi l-ħsara tad-DNA hija espressa ħafna minn tensjonijiet differenti u tinibixxi l-mira tal-mammiferi tal-passaġġ tal-kumpless rapamycin 1(mTORC1) assoċjat mat-trattament tal-kanċer [31]. Studji preċedenti identifikaw il-ġene DDIT4, li kien espress ħafna minn dexamethasone, li huwa aġent kimoterapewtiku li jinduċi awtofaġija fil-limfoċiti, li jissuġġerixxi r-rwol possibbli tiegħu fir-regolazzjoni tat-tkabbir taċ-ċelluli, il-proliferazzjoni u s-sopravivenza [32,33]. LACCE wera effetti simili għal dexamethasone bħala aġent anti-infjammatorju. Bcl-2/adenovirus E1B 19-kDa-interacting protein (BNIP3) hija membru ta' familja ta' proteini pro-apoptosi li tirregola l-proliferazzjoni ċellulari[34] . Barra minn hekk, BNIP3 huwa involut fil-protezzjoni tal-keratinoċiti mill-apoptosi indotta mill-UVB billi jirregola l-espressjoni tal-ġeni tiegħu [35]. Diversi studji wrew li l-espressjoni tal-proteina 3 (IGFBP-3) li tgħaqqad il-fattur tat-tkabbir simili għall-insulina hija relatata mas-senescence ċellulari [36,37]. Iż-żieda ta' IGFBP-3 tinduċi jew tinibixxi l-apoptożi skont it-tipi ta' ċelluli [37]. Pereżempju, IGFBP-3 kien regolat 'il fuq fiċ-ċelloli ċervikali immortalizzati mill-papillomavirus uman, li rriżulta fit-titjib tal-mitoġenesi indotta minn IGF-1-[37]. Studju reċenti wera r-regolazzjoni 'l isfel ta' IGFBP-3 f'ċelloli qodma senescent u H, O{2-ikkaġunati meta mqabbla ma' ċelloli żgħar, li jissuġġerixxi r-rwol possibbli tiegħu bħala markatur tat-tixjiħ [36].

BNIP3, IGFBP3, stratifin (SFN), CA2, FGFBP1, KRT17, u JUP huma involuti fir-regolamentazzjoni pożittiva tal-proċess ta 'żvilupp. Minnhom, carbonic anhydrases huma enzimi kullimkien preżenti fi prokarjoti u ewkarjoti, inklużi annimali u pjanti [38]. Fil-bnedmin, carbonic anhydrase jikkatalizza l-formazzjoni ta 'aċidu karboniku mill-ilma u d-dijossidu tal-karbonju (CO,), li huma meħtieġa għall-fiżjoloġija tal-moħħ, tal-kliewi u tal-għadam [39]. Studju preċedenti wera li CA4 u CA9 kienu regolati 'l fuq f'ġurdien matul il-perjodu hypoxic tal-ferita minn RNA-Seq [40]. Barra minn hekk, iż-żieda ta 'enzima CA9 rikombinanti promossi l-epitelizzazzjoni mill-ġdid tal-feriti [40]. Barra minn hekk, studju tal-proteome wera wkoll l-involviment tal-proteina CA2 fit-tixjiħ u n-newrodeġenerazzjoni f'ġurdien [41]. Hawnhekk, aħna wrejna li LACCE ippromwoviet ir-riġenerazzjoni taċ-ċelloli tal-keratinoċiti umani billi tirregola l-espressjoni CA2. Il-proteina li tgħaqqad il-fattur tat-tkabbir tal-fibroblast 1(FGFBP1) hija chaperone estraċellulari li torbot ma' FGFs u timmodula s-sinjalar tal-FGF J42]. Diversi studji wrew li FGFBP1 huwa espress ħafna waqt anġjoġenesi u għandu rwol importanti fil-karċinoġenesi tal-ġilda, infjammazzjoni, u fejqan tal-feriti [42-44]. Barra minn hekk, il-lokalizzazzjoni ċellulari ta 'ġeni regolati 'l fuq fil-vesiku, exosome extraċellulari, filament intermedju, u filament keratin tissuġġerixxi li dawn il-proteini huma komponent primarju taċ-ċitoskeletru.

F'ġeni regolati 'l isfel, il-biċċa l-kbira tal-ġeni huma magħrufa li huma indotti minn stress differenti. Pereżempju, żewġ ġeni li jikkodifikaw metallothionein 2a (MT2A) u metallothionein le (MT1E) huma indotti taħt kundizzjonijiet ta 'stress tal-metall, inklużi jone taż-żingu, jone tar-ram, u jone tal-kadmju, u stress ossidattiv, bħal UVB [45,46]. Barra minn hekk, inibitur ta 'DNA-binding 3 (ID3), membru ta' proteini helix-loop-helix, huwa ġene immedjat-bikri b'reazzjoni għal sinjali mitoġeniċi u stress ossidattiv [47]. Id-dominju tar-repetizzjoni tal-Ankyrin 1 (ANKRD1), magħruf ukoll bħala proteina tar-repetizzjoni tal-ankyrin kardijaku (CARP), huwa kofattur traskrizzjoni li huwa regolat 'il fuq waqt il-fejqan tal-feriti u jinduċi anġjoġenesi [48]. Kemm ID3 kif ukoll ANKRD1 huma involuti fir-regolament negattiv tal-proċess bijoloġiku. ID3 jaġixxi bħala regolatur tat-traskrizzjoni li jinibixxi d-differenzjazzjoni taċ-ċelluli staminali u jippromwovi l-progressjoni taċ-ċiklu taċ-ċelluli [47]. Barra minn hekk, studju reċenti wera li t-telf tal-funzjoni ANKRD1 fil-ġrieden irriżulta f'dewmien fil-fejqan tal-feriti, li jissuġġerixxi r-rwol tiegħu fil-feriti u l-ħsara fit-tessuti [49 ]. Barra minn hekk, 3 li fih id-dominju BTB relatat ma 'Rho (RHOBTB3) jiffunzjona biex jippromwovi d-degradazzjoni proteasomali ta' fatturi li jinduċu l-ipoksja (HIFs), li huma r-regolaturi ewlenin ta 'risponsi adattivi għal ossiġnu baxx [50]. Barra minn hekk, il-proteina transmembrana 1 (IFITM1) indotta mill-interferon tinibixxi d-dħul ta 'ħafna vajrusis fiċ-ċellula ospitanti [51]. Bl-istess mod, il-ġene li tikkodifika l-proteina 6(IFI6) li tista' tinduċi għall-interferon alfa hija indotta minn interferon u tirregola l-apoptożi u l-immunità innata antivirali [52,53]. Ir-regolazzjoni 'l isfel ta' ġeni li jirrispondu għall-istress permezz tat-trattament LACCE tissuġġerixxi li LACCE ma jikkawżax stress fiċ-ċelloli tal-keratinoċiti umani.

5. Konklużjonijiet

Hawnhekk, aħna evalwajna LACCE bħala materjal kożmetiku naturali permezz ta 'diversi assaġġi in vitro u in vivo, li jissuġġerixxu l-effetti qawwija tiegħu fuq it-titjib tat-tessuti tal-wiċċ u tal-ġilda. B'mod partikolari, l-analiżi tat-traskriptome bbażata fuq RNA-Seg żvelat il-mekkaniżmu molekulari fiċ-ċelloli tal-keratinoċiti umani b'rispons għal LACCE. LACCE irregola l-ġene involut fil-keratinizzazzjoni u l-kornifikazzjoni, u jipprovdi barriera tal-ġilda, li hija promossa minn ġeni meħtieġa għall-mewt taċ-ċelluli programmata. Ħafna regolaturi pożittivi tal-proċess ta 'żvilupp kienu regolati 'l fuq, filwaqt li diversi ġeni kkaġunati mill-istress ġew irregolati 'l isfel bit-trattament LACCE. Meħuda flimkien, l-istudju tagħna wera li LACCE huwa aġent għall-kożmetiċi jew kożmeċewtiċi kontra t-tixjiħ.

Dan l-artikolu huwa estratt minn Genes 2020, 11, 230; doi:10.3390/genes11020230 www.mdpi.com/journal/genes