Acteoside, Komponent Ta' Stachys Sieboldii MIQ, Jista' Jkun Aġent Antinefritiku Prometti: Effett Ta' Acteoside Fuq Nefrite Anti-GBM tat-Tip Crescentic fil-Firien

Għal aktar informazzjoni:ali.ma@wecistanche.com

Kazumi Hayashi, Tadashi Nagamatsu, Mikio Ito, Tomohisa Hattori u Yoshio Suzuki

Dipartiment tal-Farmakoloġija, Fakultà tal-Farmaċija, Università Meijo, 150 Yagotoyama, Tenpaku-Ku, Nagoya 468, Ġappun

ASTRATT

Effetti ta'acteoside(ACT) dwar l-anti-GBM tat-tip crescentinefritefil-firien ġew investigati. Meta l-firien ġew ittrattati biActeosidemill-1 jum wara injezzjoni iv ta’ serum kontra l-GBM,Acteosideinibixxi l-elevazzjoni tal-eskrezzjoni tal-proteini fl-awrina. ĠolActeoside-firien ittrattati, il-kontenut tal-kolesterol u l-krejatinina u l-produzzjoni ta' antikorpi kontra r-globulina tal-fenek fil-plażma kienu aktar baxxi minn dawk tal-firien ta' kontroll nefritiku. Osservazzjoni istoloġika wriet li dan l-aġent irażżan l-iperċellulità u l-inċidenza tal-formazzjoni tan-nofs tan-nofs, l-adeżjoni tal-ħajt kapillari mal-kapsula ta 'Bowman, u n-nekrożi fibrinojde fil-glomeruli. Barra minn hekk, id-depożiti tal-far-IgG u C3 fuq il-GBM kienu ferm inqas fil-Acteosidegrupp ittrattat milli fil-grupp ta 'kontroll nefritiku. Meta t-trattament inbeda mill-20 jum wara l-injezzjoni iv tas-serum anti-GBM, li biha l-marda kienet ġiet stabbilita,Acteosideirriżulta f'effett simili fuq il-nefritikufirien kif iddikjarat hawn fuq. Dawn ir-riżultati jissuġġerixxu li Acteoside jista 'jkun mediċina utli kontra glomerulonefrite progressiva malajr, li hija kkaratterizzata minn leżjonijiet glomerulari severi bi qasab imxerred.

Kliem ewlieni: Anti-GBM tat-tip Crescenticnefrite,Acteoside, Rat-IgG, Rat-C3

Ikklikkja biex Cistanche juża ma 'Acteoside

Chyorogi Stachys sieboldii MIQ (Labiatae) huwa preskritt għal ħafna mard, u dan it-tuberu jintuża bħala ikel minn Ċiniżi, Russi u Ġappuniżi. Investigazzjonijiet riċenti wrew li chyrogi għandu azzjoni kontra l-anoksja (1), azzjoni inibitorja fuq l-attività tal-hyaluronidase (2), u azzjoni immunosoppressiva (3).

Min-naħa l-oħra, issemma li r-rispons immuni jipparteċipa fl-iżvilupp tan-nefrite. Biex tpoġġiha b'mod aktar konkret, il-ħsara glomerulari hija medjata minn depożizzjoni ta 'kumpless immuni fil-glomeruli, segwita minn reazzjoni immuni-infjammatorja, inkluża l-attivazzjoni tal-kompliment u r-rilaxxi ta' medjaturi infjammatorji oħra. Fi studji reċenti, ingħatat ħafna attenzjoni għall-kontribut tar-rispons immuni medjat miċ-ċelluli fl-iżvilupp tal-glomerulonefrite (4, 5). Barra minn hekk, Neild et al. (6) irrapporta li s-soppressjoni tal-funzjoni taċ-ċelluli T minn cyclosporin A (CyA) imblukkat l-iżvilupp sussegwenti ta 'leżjonijiet glomerulari f'nefrite akuta tal-mard. Aħna rrapurtajna li mizoribine (7), azathioprine (7), CyA (8), methylprednisolone (9), u xi komponenti tal-pjanti (10) għandhom azzjoni immunosoppressiva wrew effett salutarju fuq nefrite anti-GBM. Għalkemm dawn l-aġenti immunosoppressivi jeżerċitaw azzjoni antinefritika, huwa diffiċli li jintużaw fi provi kliniċi minħabba l-effetti sekondarji tagħhom (11). Għalhekk, huwa mistenni li jiġi żviluppat aġent immunosoppressiv ġdid għat-trattament tan-nefrite fl-istadju kliniku.

L-iskop tal-istudju preżenti kien li jiċċara l-effett anti-nefritiku ta 'acteoside, komponent ta 'chyorogi, fuq nefrite anti-GBM tat-tip crescentic fil-firien.

MATERJALI U METODI

Annimali

Firien maskili tar-razza Sprague-Dawley, li jiżnu madwar. 160 g (Nihon SLC, Hamamatsu), intużaw għall-esperimenti kollha. Dawn l-annimali kienu miżmuma f'kamra bl-arja kondizzjonata f'23 ± 1 C matul il-perjodu sperimentali.

Drogi

L-istruttura kimika ta 'acteoside (ACT) (Tsumura Co., Ltd., Tokyo) hija murija fil-Fig. 1. Dan il-komponent ġie estratt mill-parti mill-ajru ta 'chyorogi (Stachys sieboldii MIQ). Il-purità tal-ACT ġiet ivverifikata permezz tal-HPLC (Kolonna: TSK gel ODS-80TM (4.0 id x 250 mm); Fażi mobbli: 20 fil-mija CH3CN/H2O, li fiha 10 AcOH; Rata tal-fluss: 0.7 ml/min; Temp.: temperatura tal-kamra; Detect: UV 254 nm) fi Tsumura Co., Ltd ACT impjegat f'dawn l-esperimenti kellu purità ta 'aktar minn 9970. ACT ġie maħlul f'ilma distillat. Intużaw ukoll Dipyridamole (Dip) (Boehringer Ingelheim, Ġermanja) u azathioprine (Aza) (Sigma, St. Louis, MO, USA); Dawn id-drogi ġew sospiżi f'1070 gomma arabika.

Induzzjoni ta 'nefrite anti-GBM tat-tip crescentic

Nefrite anti-GBM tat-tip Crescentic ġiet induċa billi ġew immunizzati l-firien li kienu rċevew doża nefritoġenika ta’ serum tal-fenek kontra l-firien GBM (anti-GBM) b’r-globulina tal-fenek (rG) skont modifika żgħira tal-metodu rrappurtat qabel ( 12). F'dan l-esperiment, il-firien kienu jiżnu madwar. Ġew amministrati 160 g 0.6 ml/annimal ta' serum anti-GBM fil-vina tad-denb.

L-effett tad-drogi tat-test ġie stmat billi ġew amministrati mill-ewwel jum wara l-injezzjoni tas-serum anti-GBM (fażi eterologa) jew l-20 jum wara l-injezzjoni tas-serum antiGBM (fażijiet awtologi). Fl-esperimenti, inġabru 24-siegħa kampjuni tal-awrina, u l-firien imbagħad ġew maqsuma f'5 jew 6 gruppi ta' 8 firien sabiex il-kontenut medju ta' proteini fl-awrina 24-hr f'kull grupp kien ta' livell simili.

Evalwazzjoni tal-effett antinefritiku tad-drogi tat-test

Fl-esperiment tat-trattament tad-droga mill-fażi eterologa, erba' gruppi ngħataw oralment 3, 10, jew 30 mg/kg/jum ta' ACT jew 100 mg/kg/jum ta' Dip, rispettivament, f'volum ta' 1 ml għal kull 100 g tal-piż tal-ġisem, kuljum mill-1 jum jew il-jum wara l-injezzjoni iv ta’ serum anti-GBM sal-40 jum. Fl-esperimenti tat-trattament tad-droga mill-fażi awtologa, tlieta jew erba 'gruppi ngħataw oralment 3, 10, jew 30 mg/kg jum ta' ACT (A) jew 30 mg/kg/jum ta 'ACT, 100 mg/kg/jum ta' Dip jew 50 mg/kg/jum ta’ Aza (B), rispettivament, f’volum ta’ 1ml għal kull 100 g ta’ piż tal-ġisem, kuljum mill-20 jum wara injezzjoni iv ta’ serum anti-GBM sal-40 (A) jew il-45. (B) jum. Il-grupp li kien fadal ingħata oralment il-vettura (ilma distillat) minflok drogi tat-test u serva bħala l-kontroll nefritiku. Barra minn hekk, intuża grupp mhux trattat (normali) għal tqabbil mal-gruppi nefritiċi.

Ġabra ta' awrina u demm

Il-kampjuni tal-awrina ta' {{0}}hr inkisbu billi kull annimal żamm f'gaġġa metabolika individwali għal 24 siegħa. Fil-bidu tal-ġbir ta 'l-awrina, kull annimal irċieva 8 ml ta' ilma distillat mill-ħalq mingħajr għalf. L-awrina mbagħad ġiet ċentrifugata fi 3,000 rpm għal 15-il minuta f'41C u s-supernatant intuża għad-determinazzjoni tal-proteina. Fl-aħħar jum ta 'l-esperiment, 2.0 ml ta' demm inġibdu mill-vina renali ta 'kull far anestetizzat b'siringa li tintrema u mqiegħda f'tubu li kien fih 0.125 ml ta' eparina. Id-demm ġie ċentrifugat f'5,000 rpm biex tinkiseb plażma għad-determinazzjoni ta' xi parametri.

Determinazzjonijiet tal-proteina urinarja u l-kontenut tal-kolesterol u l-krejatinina fil-plażma

L-eskrezzjoni tal-proteina fl-awrina ġiet iddeterminata bil-metodu ta 'Kingsbury et al. (13) u espress bħala mg/24hr awrina. Il-kontenut tal-kolesterol ġie ddeterminat b'kit ta' analiżi kummerċjali (Iddetermina TC-5; Kyouwa Medix Co., Ltd, Tokyo) (14) u espress bħala mg/dl plażma. Il-kontenut tal-krejatinina ġie ddeterminat bl-użu ta 'kit tad-determinazzjoni tal-krejatinina (CRE-EN; Kainos, Inc., Tokyo) u espress bħala mg/dl plażma/100 g piż tal-ġisem.

Kejl tat-titer tal-antikorpi tal-plażma kontra -G

It-titer tal-antikorpi tal-plażma kontra rG kien iddeterminat b'emagglutinazzjoni indiretta bl-użu ta 'ċelluli ħomor tad-demm tan-nagħaġ sensitizzati (15).

Kejl tal-livell ta' CH50 komplementari fil-plażma

Il-livell ta' CH50 tal-komplement tal-plażma ġie ddeterminat bil-metodu ta' Mayer (16).

Valutazzjoni tal-parametri istopatoloġiċi

Għall-istudju mikroskopiku tad-dawl, il-kliewi ġew iżolati minn firien anestetizzati bil-pentobarbital, imbagħad deidrati u ffissati billi tgħaddas it-tessuti pass pass f'diversi tradizzjonijiet ta 'tħassib ta' alkoħol etiliku minn baxx għal għoli. It-tessuti mbagħad ġew inkorporati fil-paraffin u qasmu fi 2 sa 3 flieli em-ħxuna. Fl-istudji tan-nefrite anti-GBM tat-tip crescentic, is-sezzjonijiet kienu mtebbgħin b'ematossilin u eosina u trikromju ta 'Masson. In-numru ta 'nuklei (iperċellulità), il-formazzjoni tan-nofs tan-nofs, l-adeżjoni tal-kapsula ta' Bowman mal-ħajt kapillari (adeżjoni), u n-nekrożi fibrinojde fil-glomeruli ġew osservati taħt mikroskopju tad-dawl. Għall-valutazzjoni ta' dawn il-parametri, intgħażlet cross-section ekwatorjali b'metodi ta' kampjunar każwali. Ġew osservati ħamsin glomeruli / cross-sections, u r-rata ta 'dehra ta' formazzjoni ta 'nofs il-nofs, adeżjoni u nekrożi fibrinojde kienet espressa bħala l-perċentwali tal-glomeruli (inċidenza) li kellhom dawn l-alterazzjonijiet morfoloġiċi kif deskritt qabel (17). L-evalwazzjoni saret minn persuna differenti li ma kinitx taf l-identità ta’ kull kampjun. Għall-valutazzjoni tal-iperċellulità, intgħażlet cross-section ekwatorjali b'metodu ta 'kampjunar każwali. In-numru ta' nuklei (inklużi nuklei ta' ċelluli glomerulari u lewkoċiti exudative) kien magħdud u espress bħala n-numru medju għal kull cross-section glomerulari f'10 glomeruli/sezzjoni.

Immunoistokimika

Fit-tessuti għat-tbajja' immunoenzimatiċi ta' far-IgG, is-sezzjonijiet tal-paraffin inqatgħu kif deskritt hawn fuq, u s-sezzjonijiet ġew ittrattati bi 0.1 fil-mija protease fi 0.05 M Tris- HCl buffer għal 7 min u mbagħad maħsul f'salina mkessħa 0.01 M phosphate-buffered saline (PBS), pH 7.4. Is-sezzjonijiet imbagħad ġew inkubati b'antikorp monoklonali tal-ġurdien IgG kontra l-firien (mAb) (Cappel, West Clester, PA, USA) f'dilwizzjoni ta '1:100 għal 90 min. Is-sezzjonijiet ġew maħsula mill-ġdid b'PBS, ittrattati b'0.3 fil-mija perossidu tal-idroġenu fil-metanol għal 20 min biex jimblokka perossidasi endoġenu, u inkubati b'IgG kontra l-ġurdien purifikat bl-affinità bijotinilata u perossidasi taż-żwiemel avidinat bi 3,3'-diaminobenzidine tetrahydrochloride (DAB) (Vecta stain ABC Kit; Vector institution, Burlingame, CA, USA). Il-passi kollha saru f'temperatura tal-kamra.

Tessuti għat-tbajja’ immunoenzimatiċi ta’ antiġen nukleari taċ-ċelluli proliferanti (PCNA), li huwa markatur għall-proliferazzjoni taċ-ċelluli, ġew iffissati f’10 fil-mija formalin f’PBS, u t-tessuti inkorporati fil-paraffin ġew imtebba’ bl-istess proċedura bħal dik għall-IgG tal-firien ħlief għal l-użu ta' mAb (19A2; Coulter Immunology, Hialeah, FL, USA) lill-PCNA.

Kwantifikazzjoni tal-far-IgG, C3, u PCNA fuq sezzjonijiet tat-tessut

L-erja totali tal-far-IgG immunoreattiva u C3 fil-glomerulus ġiet imkejla fi 30 glomeruli għal kull sezzjoni bl-użu ta’ analizzatur tal-immaġni (Toyobo Image analyzer V1; Toyobo Co., Ltd., Tokyo) u ppreżentat bħala mm2/glomerular cross-section (GCS). ). Iċ-ċelloli pożittivi għall-PCNA fil-glomerulus ġew magħduda bl-analizzatur tal-immaġni, u r-riżultati ġew espressi bħala n-numru ta 'ċelloli/GCS

Analiżi statistiċi

Id-dejta tirrappreżenta l-medja ± SD, u r-riżultati ġew evalwati statistikament minn ANOVA. Meta dawn ir-riżultati kienu parametriċi, dawn ġew evalwati statistikament bit-test ta 'Duncan. Meta r-riżultati ma kinux parametriċi, kienu evalwati statistikament bit-test Kruskal-Wallis. Il-persentaġġ inibitorju ġie kkalkulat kif ġej:

Perċentwal inibitorju ( fil-mija )=(Kontroll -Droga tat-test) x 100 / (Kontroll -Normali)

RIŻULTATI

Effett ta 'Acteoside fin-nefrite anti-GBM tat-tip crescentic

Eskrezzjoni tal-proteina fl-awrina (Figuri 2 u 3): Meta t-trattament b'ACT inbeda mill-għada tal-injezzjoni tas-serum anti-GBM (fażi eterologa), l-ewwel soppressjoni sinifikanti fuq il-proteina urinarja ġiet osservata fil-5 jum b'30 mg. /kg, po; fl-20 jum fi 3 u 10 mg/kg, po; u fl-40 jum b'Dip f'100 mg/kg, po

Meta ACT ingħata mill-20 jum wara l-injezzjoni tas-serum antiGBM (fażi awtologa), ACT b'10 u 30 mg/jum inibixxi l-elevazzjoni tal-eskrezzjoni tal-proteini fl-awrina sat-30 jum. Min-naħa l-oħra, Aza f'50 mg/kg kien aktar dgħajfa minn ACT bi 30 mg/kg, għalkemm mhux b'mod sinifikanti, u Dip ma kellu l-ebda effett.

Kolesterol fil-plażma u kontenut tal-krejatinina (Tabella 1): Il-kontenut tal-kolesterol u tal-krejatinina fil-plażma ġew determinati fl-40 jew il-45 jum. Il-kontenut tal-kolesterol fil-plażma fil-firien ta' kontroll nefritiku kien għoli b'mod sinifikanti. B'kuntrast, l-elevazzjoni tal-kontenut tal-kolesterol tnaqqset b'ACT (30 mg/kg) mill-fażi eterologa b'60 fil-mija tal-livell ta' kontroll u b'ACT (30 mg/kg) mill-fażi awtologa b'62'o tal-kontroll. livell. Il-kontenut tal-krejatinina fil-plażma fil-firien nefritiċi kienu elevati wkoll. Min-naħa l-oħra, fl-ACT (30 mg/kg) miż-żewġ firien ittrattati f'fażijiet, il-kontenut tal-krejatinina fil-plażma kien simili għal dak tal-firien normali.

Titer ta' antikorpi tal-plażma kontra rG: Il-firien nefritiċi kienu wrew produzzjoni ta' antikorpi mgħaġġla b'mod notevoli. Il-produzzjoni aċċellerata tal-antikorpi ġiet mrażżna għal 72 fil-mija tal-livell ta 'kontroll bit-trattament b'ACT (10 u 30 mg/kg) mill-fażi eterologa (Tabella 2), ACT (30 mg/kg) mill-fażi awtologa, u Aza għal 70 u 51 fil-mija tal-livell ta 'kontroll, rispettivament (data mhux murija), u ma kienx affettwat minn Dip.

Osservazzjoni istoloġika (Tabella 3, Figuri 4 u 5): Eżami mikroskopiku ħafif tal-glomeruli nefritiċi żvela leżjonijiet ikkaratterizzati minn formazzjoni tan-nofs tan-nofs severa, adeżjoni, nekrożi fibrinojde, u proliferazzjoni ta 'ċelluli mezanjali. L-osservazzjoni istoloġika wriet li l-ACT (kemm mill-fażi eterologa kif ukoll awtologa) inibixxi l-iperċellulità u l-inċidenza ta 'formazzjoni ta' qamar tan-nofs, adeżjoni u nekrożi fibrinojde fil-glomeruli mill-40 jew 45 jum. Il-leżjonijiet tal-firien nefritiċi trattati b'Dip u Aza kienu wkoll inqas minn dawk tal-firien ta' kontroll nefritiku. Madankollu, meta firien nefritiċi ġew ittrattati b'Dip mill-fażi awtologa, bidliet istoloġiċi ftit kienu affettwati minn Dip (dejta mhux murija).

Il-proliferazzjoni taċ-ċelluli glomerulari, jiġifieri ż-żieda fiċ-ċelluli pożittivi għall-PCNA fil-glomeruli, kienet osservata fifirien nefritiċi. B'kuntrast, fit-30 jum, tnaqqis ta '52 fil-mijazjoni fil-proliferazzjoni taċ-ċelluli kienet osservata, u dan kien assoċjat wbi tnaqqis sinifikanti fiċ-ċelluli glomerularilularità meta mqabbla mal-kontroll (Tabella 3).

Depożizzjoni ta 'reattiv immuni (Tabella 2 u Fig. 6): Kien possibbli li jiġu osservati depożiti ta' far-IgG u C3 fuq il-GBM fil-firien ta 'kontroll nefritiku; madankollu, ma nstabux fil-firien normali. ACT (30 mg/kg) mill-fażi eterologa naqqas id-depożizzjoni tal-far-IgG fuq il-GBM b'72 fil-mija tal-livell ta 'kontroll. Barra minn hekk, ACT (3, 10, u 30 mg/kg) mill-fażi eterologa naqqas id-depożizzjoni tal-far-C3 fuq il-GBM b'60 sa 69 fil-mija sal-40 jum. Anke meta l-ACT ingħata mill-fażi awtologa, l-inibizzjoni tad-depożizzjoni ta 'l-IgG u C3 tal-firien kienet simili għar-riżultati ta' hawn fuq. Id-dip ma affettwax id-depożizzjoni tal-far-IgG u C3. Aza, madankollu, naqqas id-depożizzjoni tal-far-IgG u C3 fuq il-GBM b'67 u 68 fil-mija, rispettivament (dejta mhux murija).

Effett ta 'ACT fuq l-attività komplementari u depożiti C3 fuq il-GBM f'nefrite anti-GBM tat-tip oriġinali (Fig. 7)

Nefrite anti-GBM tat-tip oriġinali ġiet indotta fil-firien permezz ta 'injezzjoni ta' 0.6 ml ta 'serum anti-GBM fil-vini tad-denb tagħhom, kif deskritt qabel (18). Firien nefritiċi ġew ittrattati minn qabel u wara ttrattati b'ACT bi 30 mg/kg, po u fattur tal-velenu tal-kobra (CVF) (Sigma) f'10 fig/far, ip, tliet darbiet, kull 8 sigħat. It-trattamenti ACT u CVF naqqsu l-eskrezzjoni tal-proteini fl-awrina b'perċentwal inibitorju ta' madwar. 35 grad u 71 fil-mija , rispettivament. Is-CH50 fil-firien ta' kontroll nefritiku kien ferm aktar baxx minn dak fil-firien normali b'24 siegħa wara l-induzzjoni tan-nefrite. ACT inibixxa d-depożizzjoni CH50 mnaqqsa u żiedet C3 fuq il-GBM fil-firien ta 'kontroll nefritiku. CVF abolixxa d-depożizzjoni CH50 u C3. Barra minn hekk, fl-esperiment in vitro, ACT inibixxi l-attivazzjoni tal-kompliment b'37 fil-mija. Meta ACT ġie amministrat lill-firien normali, ACT naqqas l-attivazzjoni tal-kompliment fl-esperiment ex vivo (dejta mhux murija).

DISKUSSJONI

Glomerulonefrite progressiva malajr u mard tal-kliewi fis-sindromu ta 'Goodpasture huma mard malinn li jiskadu f'insuffiċjenza renali sa xahrejn jew 3 xhur wara l-iżvilupp tal-marda (19). Karatteristiċi ta 'din in-nefrite kienu jinvolvu iperċellulità, infiltrazzjoni mmarkata ta' newtrofili u monoċiti, u formazzjoni ta 'nofs il-qassar fil-glomeruli. Terapija tal-cocktail b'aġenti immunosoppressivi, mediċini kontra l-plejtlits, u sterojdi ġew applikati prinċipalment għal din il-marda. Min-naħa l-oħra, għalkemm CyA huwa immunosoppressant li jaqbeż li jeżerċita effett ta 'benefiċċju fuq nefrite sperimentali (6, 8), ġie rrappurtat li CyA jikkawża disfunzjoni tal-kliewi u jikkawża alterazzjoni istoloġika irriversibbli fil-glomeruli (11). Methylprednisolone jippossjedi ħafna effetti sekondarji. Barra minn hekk, il-fenomenu tar-rebound u s-sindromu tal-irtirar wara trattament twil b'din il-mediċina huma tnejn mill-problemi. Għalhekk, għandu jiġi żviluppat aġent immunosoppressiv ġdid għat-trattament tan-nefrite li għandu inqas effetti sekondarji.

Nefrite anti-GBM tat-tip Crescentic huwa mudell sperimentali li juri alterazzjonijiet istoloġiċi u patoloġiċi simili għal dawk fil-glomerulonefrite li progressiva malajr u mard tal-kliewi tas-sindromu ta 'Goodpasture (20). L-iżvilupp u l-progressjoni ta 'din in-nefrite jikkonsistu f'2 fażijiet li huma medjati minn risponsi immuni. Ir-reazzjoni bikrija, l-hekk imsejħa fażi eterologa, hija dovuta għad-depożizzjoni ta 'antikorp anti-GBM, segwita minn akkumulazzjoni dipendenti mill-kompliment ta' granuloċiti polimorfonukleari (21, 22). Il-fażi tard (fażi awtologa) tiżviluppa bit-twaħħil ta 'antikorpi awtologi depożitati tul il-GBM u l-influss ta' monoċiti/makrofaġi għall-glomeruli wara din ir-reazzjoni (22, 23). Din in-nefrite hija kkaratterizzata minn proteina urinarja bifażika u iperċellulità li tinvolvi l-formazzjoni tan-nofs tan-nofs u n-nekrożi fibrinojde. Il-formazzjoni tan-nofs tan-nofs huwa maħsub li huwa medjat minn makrofaġi emigrati u ċelluli epiteljali proliferati (22, 24).

Preċedentement irrappurtajna li mizoribine u Aza, aġent immunosoppressiv (7), inibixxew l-elevazzjoni tal-antikorp tal-plażma kontra IgG tal-fenek u Pachyman, il-komponent ewlieni ta 'Poria cocos (18), naqqsu l-grad ta' depożizzjoni C3 fuq il-GBM, u t-tnejn kienu effettivi notevolment kontra n-nefrite anti-GBM.

It-trattamenti ACT irażżnu l-iżvilupp ta 'glomerulonefrite anti-GBM kif evalwat permezz ta' tnaqqis ta 'proteinurja u kolesterol fil-plażma, prevenzjoni ta' indeboliment tal-funzjoni renali, u prevenzjoni ta 'bidliet istoloġiċi progressivi inkluż l-iżvilupp ta' qasab glomerulari u iperċellulari. Fl-40 jum, ACT bi 30 mg/kg waħdu naqqas b'mod sinifikanti l-ammont ta 'depożizzjoni ta' far-IgG fuq il-GBM medjat mis-soppressjoni tal-produzzjoni tal-anti-korp f'dan il-mudell nefritiku. Min-naħa l-oħra, l-ammont ta 'depożiti C3 fuq il-GBM naqas b'ACT fi 3, 10, jew 30 mg/kg. Barra minn hekk, ACT inibixxi b'mod sinifikanti l-attivazzjoni tal-kompliment kemm f'esperimenti in vitro kif ukoll ex vivo. It-tnaqqis ta' CH50 fil-firien ta' kontroll nefritiku ġie inibit minn ACT. Id-dejta ta 'hawn fuq tissuġġerixxi li l-ACT jinibixxi l-ħsara renali billi jrażżan l-attivazzjoni tal-kompliment, minħabba li l-kumpless tal-attakk tal-membrana tal-kompliment (MAC) huwa involut fil-patoġenesi tal-ħsara glomerulari (25), u l-MAC sublitiku għandu medjaturi infjammatorji potenzjali li jistgħu jkunu assoċjati ma' ħsara glomerulari, Il-proliferazzjoni taċ-ċelluli mesanġjali u t-tixrid tal-matriċi extraċellulari, bħal speċi ta 'ossiġnu reattiv (26), protease (27), prostaglandini (28) u interleukin-1 bħal ċitokini (29), kif ukoll kollaġen (30).

Huwa maħsub li l-attivazzjoni tal-kompliment hija relatata mill-qrib mal-infiltrazzjoni tal-lewkoċiti. Fi studji reċenti, ġie rrappurtat li C5a ipprovoka l-adeżjoni ta 'monoċiti u newtrofili ma' ċelluli mesanġjali u ċelluli endoteljali, rispettivament (31, 32). Għalhekk, fi studju ulterjuri, se ninvestigaw l-effett ta 'ACT fuq l-akkumulazzjoni ta' lewkoċiti fil-glomeruli.

REFERENZI

1 Yamahara J, Kitani T, Kobayashi H u Kawahara Y: Studji dwar Stachys sieboldii MIQ. II Azzjoni kontra l-anossja u l-kostitwenti attivi. Yakugaku Zasshi 110, 932-935 (1990) (Abstrin English)

2 Takeda Y, Fujita T, Satoh T, u Kakegawa H: Fuq il-kostitwenti glikosidiċi ta 'Stachys sieboldii MIQ. u l-effetti tagħhom fuq l-attività tal-hyaluronidase. Yakugaku Zasshi 105, 955-959 (1985) (Abstr bl-Ingliż)

3 Sasaki H, Nishimura H u Morita T: Prinċipji immunosoppressivi ta' Rehmannia gluttons var. hueichingensis. Planta Med 55, 458-462 (1989)

4 Saito T u Atkins RC: Kontribuzzjoni ta 'lewkoċiti mononukleari għall-progressjoni ta' sklerożi glomerulari fokali sperimentali. Kidney Int 37, 1076-1083 (1990)

5 Tipping PG, Neale TJ, u Holdsworth SR: Parteċipazzjoni tal-limfoċiti T fi glomerulonefrite sperimentali indotta minn antikorpi. Kidney Int 27, 530-537 (1985)

6 Neild GH, Ivory K, u Williams DG: Cyclosporin A jinibixxi l-mard tas-serum tas-sactus fil-fniek. Clin Exp Immunol 52, 586-594 (1983)

7 Okamoto K, Ito M u Suzuki Y: Studji dwar l-effett antinefritiku fuq mizoribine (p-INN, Bredinin®), aġent immunosoppressiv ġdid, u azathioprine (2): Effett fuq nefrite anti-GBM tat-tip crescentic fil-firien. Jpn J Pharmacol 34, 33-41 (1984)

8 Nagamatsu T, Kojima N, Kondo N, Hattori T, Kojima R, Ito M, u Suzuki Y: Soppressjoni minn cyclosporin A ta 'nefrite anti-GBM fil-firien. Jpn J Pharmacol 58, 27-36 (1992)

9 Taniguchi H, Nagamatsu T, Kojima R, Ito M, u Suzuki Y: Azzjoni antinefritika mmarkata u inqas effetti avversi ta 'methylprednisolone sultanate b'amministrazzjoni intermittenti fil-firien. Jpn J Pharmacol 64, 79-88 (1994)

10 Hattori T, Furuta K, Hayashi K, Nagamatsu T, Ito N, u Suzuki Y: Studji dwar l-effetti antinefritiċi tal-komponenti tal-pjanti (6): Effetti antinefritiċi u mekkaniżmi ta’ phellogen drine (OB-5) fuq Crescent- tip anti-GBM nefrite fil-firien (2). Jpn J Pharmacol 60, 187-195 (1992)

11 Mason J: L-effetti ta 'Sandimmune fuq il-kliewi. Clin Res Bull 6, 47-51 (1989)

12 Ito M, Yamada H, Okamoto Y, u Suzuki Y: Nefrite tat-tip Crescentic indotta minn serum anti-glomerular basement membrane (GBM) fil-firien. Jpn J Pharmacol 33, 1145-1154 (1983)

13 Kingsbury FB, Clark CP, Williams G u Post AL: Id-determinazzjoni rapida tal-albumina fl-awrina. J Lab Clin Med 11, 981-989 (1926)

14 Zurkowski P: Metodu rapidu għad-determinazzjoni tal-kolesterol b'reaġent wieħed. Clin Chem 10, 451-453 (1964)

15 Mcleish KR, Clark CP, Williams G u Post AL: Soppressjoni tas-sinteżi tal-antikorpi minn prostaglandin E bħala mekkaniżmu għall-prevenzjoni tal-glomerulonefrite kumplessa immuni murina. Lab Invest 47, 147-152 (1982)

16 Mayer MM: Jikkumplimenta u jikkumplimenta l-iffissar. F'Experimental Immunochemistry, pp 133-240, Charles C. Thomas, Springfield (1961)

17 Hattori T, Ito M, Nagamatsu T, u Suzuki Y: Studji dwar l-effett anti-nefritiku ta' TJ-8014, mediċina erbali Ġappuniża ġdida (3): Effetti fuq in-nefrite anti-GBM tat-tip crescentic fil-firien. Jpn J Pharmacol 52, 131-140 (1990)

18 Hattori T, Hayashi K, Nagao T, Furuta K, Ito M, u Suzuki Y: Studji dwar l-effetti antinefritiċi tal-komponenti tal-pjanti (3): Effett ta 'pachyman, il-komponent ewlieni ta' Poria cocos Wolf fuq l-oriġini tat-tip nal anti-GBM nefrite fil-firien u l-mekkaniżmi tagħha. JpnJ Pharmacol 59, 89-96 (1992)

19 Shibata S, Miyakawa Y, Naruse T, Nagasawa T, u Takuma T: Glikoproteina li tinduċi antikorp nefrotossiku: L-iżolament u l-purifikazzjoni tiegħu mill-membrana tal-kantina glomerulari tal-firien. J Immunol 102, 593 601 (1969)

20 Falk RJ: Mard tal-kliewi assoċjat ma' ANCA. Kidney Int 38, 998-1010 (1990) 21 Mulligan MS, Johnson KJ, Todd RF III, Issekutz TB, Miyasaka M, Tamatani T, Smith CW, Anderson DC u Ward PA: Rekwiżiti għal molekuli ta 'adeżjoni tal-lewkoċiti fin-nefrite nefrotossika. J Clin Invest 91, 577-587 (1993)

22 Nahas AME: Fatturi tat-tkabbir u sklerożi glomerulari. Kidney Int 41, Supp 36, S15-S20 (1992)

23 Boyce NW, Holdsworth SR, Dijkstra CD, u Atkins RC: Kwantifikazzjoni ta 'fagoċiti mononukleari intraglomerulari fi glomerulonefrite sperimentali fil-far bl-użu ta' antikorpi monoklonali speċifiċi. Patoloġija 19, 290-293 (1987)

24 Becker GJ, Hancock WW, Stow JL, Glasgow EF, Atkins RC u Thomson NM: Involviment tal-makrofagi fi glomerulonefrite kumplessa immuni kronika sperimentali. Nephron 32, 227-233 (1982) 25 Perkinson DT, Baker PT, Couser WG, Johnson BJ u Adler S: Depożizzjoni kumplessa ta 'attakk tal-membrana f'korriment glomerulari sperimentali. Am J Pathol 120, 121-128 (1985)

26 Alder S, Baker PJ, Johnson RJ, Ochi RF, Pritzl P, u Couser WG: Kumpless ta 'attakk tal-membrana jistimula l-produzzjoni ta' metaboliti reattivi ta 'ossiġnu minn ċelluli mesanjali tal-firien kultivati. J Clin Invest 77, 762-767 (1986)

27 Johnson RJ, Couser WG, u Alpers CE: In-newtro philistine protease uman, esterase, u cathepsin G jistgħu jimmedjaw ħsara glomerulari in vivo. J Exp Med 168, 1169-1174 (1988)

28 Cybusky AV, Lieberthal W, Quigg RJ, Rennke HG, u Salant DJ: Rwol għal tromboxane f'korriment glomerulari medjat mill-kompliment. Am J Pathol 128, 45-51 (1987)

29 Lovett D, Hansch G, Resch K, u Gemsa D: Attivazzjoni ta 'ċelluli mesangjali glomerulari minn komponenti ta' komplement terminali. Stimulazzjoni ta 'prostanoid u rilaxx ta' fattur bħal interleukin-l. Immunobiology 168, 34-35 (1986)

30 Torbohm I, Schonermark M, Wingen AM, Berger B, Rother K u Hansch GM: C5b_8 u C5b{_9 jimmodulaw ir-rilaxx tal-kollaġen taċ-ċelloli epiteljali glomerulari umani. Kidney Int 37, 1098-1104 (1990)

31 Lo SK, Detmers PA, Levin SM, u Wrigh SD: Adeżjoni temporanja tan-newtrofili mal-endotelju. J Exp Med 169, 1779 -1793 (1989) 32 Brady HR, Denton MD, Jimenez W, Takata S, Palliser D u Brenner BM: Chemoattractants jipprovokaw l-adeżjoni tal-monoċiti maċ-ċelluli mezanjali umani u l-ħsara taċ-ċelluli mezanjali. Kidney Int 42, 480-487 (1992)