Effett Reno-protettiv tat-Trattamenti AM6545 u AM4113 fuq is-sindromu metaboliku
Mar 21, 2022
Kuntatt: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 Email:audrey.hu@wecistanche.com
PARTI Ⅰ:Interferenza ma' TGF 1-Infjammazzjoni Medjata u Fibrożi Sottostanti Effetti Reno-Protettivi tal-Antagonisti Newtrali tar-Riċettur CB1 AM6545 u AM4113 f'Mudell tal-Firien ta' Sindromu Metaboliku
Basma G.Eid, Thikryat Neamatallah, Abeer Hanafy, Hany M.El-Bassossy & et al.
1. Introduzzjoni
Metabolikusindromu(MetS), hija taħlita ta 'metabolikaanormalitajiet li komunement jimmanifestaw bħala reżistenza għall-insulina (IR), obeżità addominali, dislipidemija, u pressjoni tad-demm għolja [1]. Pazjenti b'MetS(Metabolikusindromu) huma f'riskju għoli li jiżviluppaw dijabete, mard kardjovaskulari aterosklerotiku (CVD), u indeboliment renali [2]. Dan il-mard kollu jirrappreżenta kundizzjonijiet tas-saħħa serji u spiss fatali li huma prevalenti fil-biċċa l-kbira tal-pajjiżi. Il-prevalenza ta' MetS(Metabolikusindromu) qed tiżdied globalment b'aktar minn biljun ruħ issa affettwati [3]. Din iż-żieda hija assoċjata ma 'inattività fiżika, konsum ta' ikel b'ħafna kaloriji u xorb supplimentat bi zokkor [4,5]. Ir-relazzjoni bejn MetS(Metabolikusindromu) u l-mard kroniku tal-kliewi (CKD) huwa kontroversjali. Madankollu, bosta studji rrappurtaw li dieta b'ħafna fruttożju tinduċi MetS (Metabolikusindromu) li sussegwentement jimxi 'l quddiem f'diversi manifestazzjonijiet ta' nefropatija bħal filtrazzjoni glomerulari mnaqqsa, albuminurja, urikosurja, proteinurja u bidliet fil-morfoloġija renali [6-8]. Mekkaniżmi possibbli ta' indeboliment renali jistgħu jinkludu r-rilaxx sistemiku ta' medjaturi taċ-ċitokini pro-infjammatorji, radikali ħielsa u stress ossidattiv f'MetS (Metabolikusindromu)[9,10]. Tabilħaqq, l-inċidenza ta’ CKD f’pazjenti b’MetS (Metabolikusindromu) hija 2.6-darbiet ogħla milli f'individwi mingħajr l-ebda MetS(Metabolikusindromu) komponenti [11].
benefiċċju ta 'estratt ta' cistanche: anti-batteriċi
Interventi terapewtiċi għal MetS(Metabolikusindromu) jinkludu modulazzjoni tas-sistema endokannabinojde (EC) attiva żżejjed permezz tal-inibizzjoni tas-sottotip tar-riċettur tal-kannabinojdi CB1 |12]. Intwera li l-inibizzjoni tar-riċettur CB1 tirregola l-aptit, it-teħid tal-ikel, u l-lipoġenesi fil-firien obeżi [13-15]. Is-CB1 huwa riċettur akkoppjat tal-proteini G ta' klassi A (GPCR) li jattiva prinċipalment proteini G i/o [16]. Ir-riċetturi CB1 li jinsabu kullimkien jinsabu ħafna fis-sistema nervuża ċentrali (CNS), li tista 'żżid l-inċidenza ta' disturbi newropsikjatriċi [17]. Ġie stabbilit li teżisti sistema sħiħa ta’ endocannabinoids fil-kliewi u għandha rwol sinifikanti fl-omeostażi renali kif ukoll fl-iżvilupp ta’ nefropatija dijabetika u kundizzjonijiet bħal CKD[18].Ir-riċetturi CB1 u CB2 kienu rrappurtati li huma preżenti f’ il-partijiet varji tan-nephron kif ukoll ċelluli renali oħra kemm fil-bnedmin kif ukoll fil-annimali gerriema [19]. Barra minn hekk, is-sistema endocannabinoid fil-kliewi għandha rwol predominanti fl-emodinamika renali [20].
Rimonabant (SR141716), pereżempju, huwa agonist invers tar-riċettur CB1 li ġie approvat klinikament f'April 2006 biex jikkurametabolikakumplikazzjonijiet u obeżità fl-Ewropa [21]. Madankollu, l-irtirar tad-droga rimonabant li tippenetra s-CNS kienet segwita mill-Aġenzija Ewropea tal-Mediċini peress li kienet assoċjata ma 'ansjetà, depressjoni u tendenza akbar li tikkawża suwiċidju [17].
Biex tevita l-effetti sekondarji newropsikjatriċi ta 'rimonabant, li kienu attribwibbli għall-effetti ċentrali assoċjati mal-profil agonist invers tiegħu, segwina żewġ strateġiji għall-iżvilupp ta' analogi effikaċi li m'għandhomx l-effetti sekondarji mhux mixtieqa tiegħu. L-ewwel wieħed minn dawn kien l-iskoperta ta 'antagonisti newtrali CB1. Dawn il-komposti, b'differenza mill-kontropartijiet agonisti inversi tagħhom li jaġixxu billi jippromwovu l-istat inattiv tar-riċettur, jipprevjenu l-endokannabinojdi li jseħħu b'mod endoġenu milli jinteraġixxu ma 'CB1. AM4113 jirrappreżenta antagonist newtrali CB1 ta 'suċċess li jaqsam l-effetti mixtieqa ta' rimonabant iżda m'għandux l-effetti sekondarji mhux mixtieqa tiegħu. It-tieni strateġija tagħna kienet li niżviluppaw antagonisti tar-riċetturi CB1 li ma jistgħux jaqsmu l-barriera tad-demm-moħħ.AM6545jirrappreżenta ligand b'suċċess li jaġixxi b'mod periferali, filwaqt li fl-istess ħin iżomm il-profil antagonist newtrali CB1. Iż-żewġ mediċini ġew irrappurtati li jżommu l-attività terapewtika f'mudelli ta' annimali differenti b'inqas effetti avversi minn rimonabant [22-26].
Fl-istudju attwali, immirajna li niddeterminaw jekk trattament bl-antagonisti tar-riċetturi CB1AM6545uAM4113ittejjeb il-funzjoni tal-kliewi f'mudell ta 'fructose għoli ta' melħmetabolikasindromuu biex tesplora l-mekkaniżmu sottostanti għall-funzjoni mtejba. Studju bħal dan jippermettilna nidentifikaw jekk xi wieħed mill-effetti ta 'dawn il-komposti għandux komponent relatat ma' inattivazzjoni CB1 prodotta ċentralment.
2. Riżultati
2.1.Effett tat-Trattamenti AM6545 u AM4113 fuq it-Ton Endokannabinojdi Renali
Twettaq kejl ta' anandamide (AEA) u 2-arachidonoyl glycerol (2-AG) fl-omoġenati tal-kliewi sabiex jiġi vvalutat it-ton endocannabinoid fil-kliewi. Kif muri fit-Tabella 1, meta l-firien ta 'kontroll (C) ġew ittrattati b'waħda minnhomAM6545(C u A65) jewAM4113(C flimkien ma' A41)ma kien hemm l-ebda effett sinifikanti fuq il-kontenut kemm ta' AEA kif ukoll ta' 2-A Gin il-kliewi. Annimali bimetabolikasindromu(MetS) urew livelli elevati ta' kemm AEA kif ukoll 2-AG meta mqabbla mal-kontrolli(C). Wara t-trattament tal-metabolikasindromufirien bi jewAM6545(M flimkien ma' A65) jewAM4113(M flimkien ma' A41), l-annimali xorta wrew livelli ferm ogħla kemm ta' AEA kif ukoll 2-AG fil-kliewi meta mqabbla mal-kontrolli.
Tabella 1. Kontenut tal-kliewi ta' anandamide u 2-arachidonoyl glycerol.
2.2.Effett tat-Trattamenti AM6545 u AM4113 fuq il-Funzjoni Renali fil-Firien MetS (sindrome metaboliku)
MetS(Metabolikusindromu) minħabba għalf b'ħafna fruttosju u melħ huwa assoċjat ma' deterjorament tal-funzjoni tal-kliewi kif indikat mir-rata miżjuda ta' eskrezzjoni tal-albumina (AER) u proteinurja meta mqabbla mal-kontrolli (p<0.05, figure="" 1a,="" b).="" both="">AM6545uAM4113inibit b'mod sinifikanti (p<0.05)the elevated="" proteinuria="" and="" albumin="" excretion="" rate="" to="" similar="" levels="" suggesting="" protection="" of="" renal="" function="" in="">Metabolikusindromu). EbdaAM6545lanqasAM4113AER jew proteinurja affettwati b'mod sinifikanti meta ngħataw f'annimali ta' kontroll (Figura 1A, B). It-tneħħija tal-krejatinina kienet ikkalkulata u kienet ferm aktar baxxa fil-metabolikasindromugrupp (M) meta mqabbel mal-kontrolli (Figura ]C). Jamministra jewAM6545(M flimkien ma 'A65) jew AM4113 (M flimkien ma' A41) għall-metabolikafirien ma kellhom l-ebda effett fuq it-tneħħija tal-krejatinina (Figura 1C).
Figura 1. L-antagonisti tar-riċettur CB1AM6545uAM4113ittejjeb il-parametri funzjonali tal-kliewi f'għalf b'ħafna melħ b'fruttożju għolimetabolikasindromufirien.
(A) turi r-rata ta' eskrezzjoni tal-albumina (AER), (B) turi l-proteinurja, u (C) turi t-tneħħija tal-krejatinina mkejla fil-kontroll
(Ċ) umetabolikasindromu(M)firien kif ukoll wara 4 ġimgħat ta 'injezzjoni intraperitoneali ta'AM6545fil-kontroll(C u A65)umetabolikafirien(M flimkien ma A65)jew AM4113 fil-kontroll(C u A41)jewmetabolikafirien (M flimkien ma 'A41) f'doża ta' 10mg/kg/jum.
Ir-riżultati jintwerew bħala box plots u l-medja hija murija bħala( plus )(n=8).*p<0.05 relative="" to="" the="" control="" group=""><0.05 relative="" to="" the="">metabolikasindromugrupp minn ANOVA one-way segwit mit-test post hoc ta 'Tukey.
2.3.Effett tat-Trattamenti AM6545 u AM4113 fuq il-Pressjoni tad-Demm
Il-kejl tal-pressjoni tad-demm bl-użu tal-metodu mhux invażiv tal-pulzieri tad-denb wera li MetS(Metabolikusindromu) annimali (M, M flimkien ma 'A65, M flimkien ma' A41) wrew pressjoni tad-demm sistolika u dijastolika sinifikament ogħla meta mqabbla ma 'annimali ta' kontroll. Trattament ta 'l-annimali ma' jewAM6545jewAM4113ma kkawża l-ebda tibdil sinifikanti fil-pressjoni tad-demm sistolika u dijastolika (Tabella 2).
Tabella 2. Effett ta 'AM6545 u AM4113 fuq pressjoni tad-demm sistolika u dijastolika (BP) ta' firien indotti minn sindromu metaboliku (MetS).
2.4.Impatt tat-Trattamenti AM6545 u AM4113 fuq l-Istopatoloġija Renali fil-Firien MetS (sindrome metaboliku)
Eżami ta’ sezzjonijiet imtebba’ H&E minn MetS(Metabolikusindromu) firien urew bidliet istopatoloġiċi mmarkati, speċjalment fil-kortiċi renali fejn bidliet anormali dehru prinċipalment fil-glomeruli u t-tubuli konvoluti prossimali u stroma renali relattiva għall-grupp ta 'kontroll. Il-kliewi tal-firien ta 'kontroll wera l-istruttura normali tal-kortiċi renali (Figura 2A, B), li kien fih l-aktar corpuscles renali li jikkonsistu f'kapillari glomerulari magħluqa mill-kapsula ta' Bowman. Barra minn hekk, kien hemm spazju kapsulari bejn it-tubuli konvoluti prossimali (PCT) u distali (DCT). Ċelloli kubojdali għoljin li għandhom ċitoplasma eosinophilic b'nuklei ċentrali fit-tond miksija t-tubuli konvoluti prossimali. Mikrovilli għoljin imlew il-lumen tat-tubuli, li wrew fruntiera luminali tal-pinzell. It-tubuli konvoluti distali kienu skarsi meta mqabbla mal-PCT. Fil-MetS(Metabolikusindromu) firien, il-kliewi wrew gradi varjabbli ta 'bidliet (Figura2C-E) fejn xi glomeruli kienu ipertrofiati b'kapillari glomerulari dilatati filwaqt li glomeruli oħra dehru atrofiċi. Barra minn hekk, il-biċċa l-kbira tal-PCTs kienu dilatati b'telf tal-bordijiet tal-pinzell; iċ-ċelluli tagħhom kellhom ċitoplasma vakuolata u nuklei piknotiċi skuri. Barra minn hekk, id-DCT wera xi bidliet deġenerattivi b'ħitan u ċitoplasma vacuolated. Barra minn hekk, dehru spazji interstizjali, emorraġija peritubulari u infiltrazzjoni ċellulari infjammatorja mononukleari f'żoni differenti tal-kortiċi renali. Interessanti, MetS(Metabolikusindromu) firien ittrattati bihomAM6545(Figura 3A, B) u AM4113 (Figura 3C, D) urew titjib notevoli fil-profil istoloġiku renali manifestat minn glomeruli u PCT kważi normali mingħajr sinjali ta 'deġenerazzjoni u/jew infiltrazzjoni ta' ċelluli infjammatorji.
Figura 2. Fotomikrografiji rappreżentattivi tal-istruttura istoloġika tal-kortiċi renali fil-kontroll umetabolikasindromufirien.
Grupp ta 'kontroll (A, B) juri glomeruli (G) u tubuli renali normali (PCT, DCT), filwaqt li fil-metabolikasindromugrupp (CE) xi glomeruli dehru atrofiati (G1) filwaqt li oħrajn dehru ipertrofiati (G2) b'kapillari dilatati ().
Il-biċċa l-kbira tal-PCT dehru deġenerati b'lumen imwessa', telf tal-bord tal-pinzell, u nuklei piknotiċi (ġewwa ċirku).
Innota l-preżenza ta 'spazji wiesgħa interstizjali (*), estravasazzjoni tad-demm (*), u infiltrazzjoni b'ċelloli infjammatorji (ICI). (H&E—A, C ×200—B, D, E × 400).
Figura 3. Fotomikrografiji rappreżentattivi tal-istruttura istoloġika tal-kortiċi renali fil-gruppi tal-far tal-metabolikasindromutrattat biAM6545(A, B) uAM4113(C, D) antagonisti tar-riċetturi CB1.
Innota r-restawr ta 'dehra kważi normali meta mqabbla mal-grupp ta' kontroll rigward il-glomeruli (G) u t-tubuli (PCT, DCT). (H&E—A, C×200—B, D ×400)
2.5. Effett tat-Trattamenti AM6545 u AM4113 fuq Livelli ta' Aċidu UIric fil-Firien MetS (sindrome metaboliku)
Minħabba l-importanza tal-aċidu uriku fl-infjammazzjoni tal-kliewi u l-progressjoni għal disturb kroniku tal-kliewi, Figura 4 turi li MetS(Metabolikusindromu) l-annimali kellhom żieda ta’ għaxar darbiet fil-kontenut ta’ aċidu uriku fl-awrina meta mqabbel mal-kontrolli (p<0.05). however,="" both="" cb1="" antagonists,="">AM6545uAM4113, b’mod sinifikanti (p<0.05) inhibited="" this="" increased="" uric="" acid="" content="" while="" restoring="" it="" to="" near="" normal="" values.="" meanwhile,="" neither="">AM6545lanqasAM4113affettwa b'mod sinifikanti l-kontenut tal-awrina tal-aċidu uriku f'annimali ta 'kontroll.
2.6. Effett ta'AM6545uAM4113Trattamenti fuq Livelli TGF 1 f'MetS(Metabolikusindromu) Firien
L-istudju investiga aktar ir-rwol ta 'TGF 1 bħala medjatur ewlieni ta' pro-infjammazzjoni u fibrożi. Kif muri fil-Figura 5, il-konċentrazzjoni tat-tessuti ta 'TGF 1 fil-kliewi iżolati minn MetS(Metabolikusindromu) firien kien notevoli (p<0.05) increased="" than="" in="" normal="" animals.="" however,="" the="" four="" weeks="" of="" treatment="" with="">AM6545uAM4113wassal għal riżultat sinifikanti (p<0.05)reduction of="" tgfβ1="" concentrations,="" restoring="" it="" to="" normal="" values.="" while="" neither="">AM6545lanqasAM4113affettwa b'mod sinifikanti l-konċentrazzjonijiet tat-tessuti TGF 1 fil-kliewi ta' kontroll. Dan ir-riżultat jissuġġerixxi li r-riċettur CB1 għandu rwol kritiku fil-medjazzjoni tal-infjammazzjoni u l-fibrożi tal-kliewi.
Il-koeffiċjent ta 'korrelazzjoni ġie kkalkulat biex jevalwa l-korrelazzjoni bejn ir-rata ta' eskrezzjoni tal-albumina u l-livell tal-kliewi ta 'TGF 1 (Tabella 3). Korrelazzjoni qawwija kienet preżenti bejn l-AER u TGF 1 fil-kontroll umetabolikasindromuannimali. Il-korrelazzjoni kienet preżenti wkoll fl-annimali ttrattati magħhomAM6545, imma mhux maAM4113.
Figura 4. L-antagonisti tar-riċetturi CB1AM6545uAM4113imblukkat l-elevazzjoni għaxar darbiet fil-kontenut ta 'aċidu uriku fl-awrina f'fruttożju għoli melħ għoli indottmetabolikasindromufirien.
Il-konċentrazzjoni ta 'aċidu uriku kienet imkejla fl-awrina tal-kontroll (C) umetabolikasindromu(M) firien kif ukoll kontroll umetabolikafirien trattati biAM6545(C u A65) u (M u A65) rispettivament jewAM4113(C u A41) u (M u A41) rispettivament f'doża ta' 10 mg/kg/jum. Ir-riżultati jintwerew bħala box plots u l-medja tidher bħala ( plus )(n=8).*p<0.05relative to="" the="" control="" group="" and=""><0.05 relative="" to="" the="">metabolikasindromugrupp minn ANOVA one-way segwit mit-test post hoc ta 'Tukey.
Figura 5. L-antagonisti tar-riċettur CB1AM6545uAM4113tnaqqas il-produzzjoni ta 'TGF 1 f'fruttożju indottmetabolikasindromufirien.
Il-konċentrazzjoni ta 'TGF 1 ġiet imkejla fil-kontroll (C) umetabolikasindromu(M) firien kif ukoll kontroll umetabolikafirien trattati biAM6545(C plus A65) u (M plus A65), rispettivament, jew AM4113(C plus A41) u (M plus A41), rispettivament, f'doża ta' 10mg/kg/jum. Ir-riżultati jintwerew bħala boxplots u l-medja hija murija bħala ( plus )(n=8).*p<0.05 relative="" to="" the="" control="" group=""><0.05 relative="" to="" the="">metabolikasindromugrupp minn ANOVA one-way segwit mit-test post hoc ta 'Tukey.
Tabella 3. L-effetti ta 'AM6545 u AM113 fuq il-korrelazzjoni bejn ir-rata ta' eskrezzjoni ta 'albumina (AER) u l-livell tal-kliewi tal-fattur tat-tkabbir trasformattiv-beta 1 (TGF1).
2.7.Effett ta'AM6545uAM4113Trattamenti fuq Fibrożi Renali f'MetS(Metabolikusindromu) Firien
Il-Figura 6 turi s-sezzjonijiet tal-kliewi minn gruppi differenti mtebbgħin minn Masson's Trichrome biex jiġu vvalutati l-fibri kollaġeniċi, li dehru bħala kulur blu. Il-kortiċi renali wriet żieda notevoli ta' fibri kollaġeniċi fil-kliewi meħuda minn MetS(Metabolikusindromu) firien (Figura 6B) meta mqabbla mal-firien ta 'kontroll (Figura 6A). Fl-interstizju u l-glomeruli, kien hemm eċċess ta 'depożizzjoni ta' fibra tal-kollaġen. B'kuntrast, kien hemm depożizzjoni mnaqqsa ta 'fibri collagenous fil-kortiċi renali maAM6545(Figura 6C) u AM4113 (Figura 6D) trattamenti. Kwantifikazzjoni tat-tbajja tat-Trikromu ta 'Masson uriet persentaġġ ogħla fil-metabolikasindromu(M) kif ukoll fil-metabolikagruppi ttrattati (M flimkien ma' A65, M flimkien ma' A41) meta mqabbla mal-kontrolli. Madankollu, it-trattament ta' MetS(Metabolikusindromu) annimali biAM6545uAM4113ikkawża tnaqqis sinifikanti tat-tbajja' ta' Masson relattiv għal dawk mhux ittrattatimetabolikagrupp.
Figura 6. Fotomikrografiji rappreżentattivi tal-kortiċi tal-kliewi ta 'gruppi differenti mtebbgħin b'Masson's Trichrome. Innota ż-żieda notevoli tal-fibri kollaġeniċi.
(A）fil-kliewi ta'metabolikasindromu(B) madwar il-glomeruli(G) u t-tubuli(PCT, DCT) meta mqabbla mal-kontroll(A). B'kuntrast,AM6545-trattatmetabolikasindromu
(C) u AM4113-trattatmetabolikasindromu(D) wera tnaqqis notevoli tal-fibri kollaġeniċi. (Masson's Trichrome, A, B, C & D × 200).
(E) turi l-kwantifikazzjoni tat-tbajja tat-Trikromu ta 'Masson espressa bħala perċentwali. Ir-riżultati huma murija bħala box plots u l-medja hija murija bħala ( plus )(n=8).*B'mod sinifikanti differenti minn "C" f'p<0.05,# significantly="" different="" from"m"="" at="" p=""><>
