X'jistimula t-Tkabbir Ġdid tal-Għadam? Cistanche (CPhGs) Jattiva l-Pathway SIRT2–C/EBP –AREG Biex Jibni Għadam Aktar B'Saħħithom

Riżultati

 

2.1 CPhGs itaffu l-osteoporożi kkaġunata mill-ovarjiktomija fil-ġrieden

is-sejbiet tal-mikro-CT (Figura 1A) urew li, meta mqabbel mal-grupp Sham, il-grupp OVX wera qerda severa ta 'mikroarkitettura tal-għadam trabekulari fil-wirk distali, ikkaratterizzat minn trabekulae skarsa u maqsuma. Fil-grupp OVX + CPhGs, in-numru trabekulari u l-konnettività ġew restawrati b'mod sinifikanti, u jersqu lejn il-livell ta 'Sham. Dawn ir-riżultati jindikaw li CPhGs jistgħu jtaffu t-telf tal-għadam ikkawżat mill-ovarektomija. It-tbajja 'HE' (Figura 1B) ikkonfermat aktar li n-numru trabekulari kien imnaqqas fil-grupp OVX kontra l-grupp Sham, bi trabekulae residwu jsiru irqaq u maqsuma; b'kuntrast, il-grupp OVX + CPhGs wera numru trabekulari miżjud meta mqabbel ma 'OVX u integrità strutturali mtejba b'mod notevoli. It-tikkettar doppju ta 'Calcein (Figura 1C) wera faxex fluworexxenti mċajpra u spazjati dejjaq fil-grupp OVX, li jissuġġerixxi formazzjoni inibita tal-għadam; fil-grupp OVX + CPhGs, meded fluworexxenti kienu ċari bi spazjar miżjud b'mod sinifikanti, li jindika li CPhGs jippromwovu rata ta 'mineralizzazzjoni tal-matriċi tal-għadam u jtejbu b'mod notevoli kapaċità ġdida ta' formazzjoni tal-għadam.

 

 

Immaġni rappreżentattiva tat-tomografija mikro-kompjuterizzata tal-għadam trabekulari fil-metafiżi femorali tal-ġrieden; Tbajja b'ematossilina u eosina tas-sezzjonijiet femorali tal-ġrieden; Immaġini ta 'tikkettjar doppju ta' C calcein ta 'ġrieden fil-gruppi OVX u OVX + CPhGs.

Fig.1 CPhGs itaffu l-osteoporożi kkaġunata mill-ovarjiktomija fil-ġrieden

 

Cistanche Benefiċċji Oħra

 

 

 

 

Cistanche Listing Għall-Bejgħ

 

 

2.2 Effetti tas-CPhGs fuq id-divrenzjar osteoġeniku taċ-ċelloli MC3T3-E1

In vitro, il-grupp CPhGs wera livelli ta 'espressjoni ta' proteina u mRNA b'mod sinifikanti ogħla ta 'OCN, OPN, u RUNX2 mill-grupp NC (P <0.05). L-attività tal-fosfatażi alkalina (ALP) f'jum 10 kienet ukoll ogħla b'mod sinifikanti fil-grupp CPhGs milli f'NC (P <0.05). Dawn ir-riżultati jindikaw li CPhGs jippromwovu b'mod sinifikanti d-differenzazzjoni tal-osteoblast. Ara t-Tabella 1.

 

2.3 Effetti tas-CPhGs fuq l-assi SIRT2–C/EBP –AREG

L-esperimenti taċ-ċelluli (Tabella 2) urew li, meta mqabbel mal-grupp NC, il-grupp CPhGs kien żdied b'mod sinifikanti l-espressjoni ta 'proteina u mRNA ta' C/EBP u mRNA AREG elevat (P <0.05), li jindika attivazzjoni ta 'ġeni fil-mira C/EBP downstream. Relattiv għal NC, SIRT2 mRNA kien irregolat b'mod sinifikanti fil-grupp CPhGs (P <0.05), b'żieda konkomitanti fil-livell tal-proteina (P <0.05). B'kuntrast, il-livelli ta 'mRNA ta' SIRT1, SIRT3, SIRT4, u SIRT5 ma wrew l-ebda tibdil sinifikanti (P> 0.05), li jikkonferma l-ispeċifiċità tal-mogħdija għal SIRT2.

Tabella 1. CPhGs Isaħħu l-Markers tad-Differenzjazzjoni Osteoġenika fiċ-Ċelloli MC3T3-E1

Oġġett	NC Grupp	CPhGs Grupp
Proteina OCN	0.48 ± 0.14	1.24 ± 0.18¹
OCNmRNA	1.00 ± 0.11	1.61 ± 0.23¹
Proteina OPN	0.51 ± 0.15	1.05 ± 0.44¹
OPNmRNA	1.03 ± 0.12	2.11 ± 0.24¹
proteina RUNX2	0.77 ± 0.21	1.08 ± 0.25¹
RUNX2mRNA	1.02 ± 0.14	1.58 ± 0.17¹
Attività tal-ALP fl-10 jum	0.21 ± 0.02	0.44 ± 0.05¹

¹ P< 0.05 vs grupp NC.

 

Tabella 2. Effetti ta 'CPhGs fuq l-Espressjoni ta' SIRT2, C/EBP, u AREG

Oġġett	NC Grupp	CPhGs Grupp
Proteina C/EBP	0.51 ± 0.06	1.21 ± 0.11¹
C/EBPmRNA	1.00 ± 0.10	1.15 ± 0.14¹
AREGmRNA	1.01 ± 0.15	2.05 ± 0.24¹
SIRT1mRNA	1.03 ± 0.12	1.01 ± 0.11
Proteina SIRT2	0.26 ± 0.08	0.37 ± 0.07¹
SIRT2mRNA	0.87 ± 0.08	1.88 ± 0.21¹
SIRT3mRNA	1.01 ± 0.14	1.28 ± 0.17
SIRT4mRNA	1.21 ± 0.12	1.04 ± 0.05
SIRT5mRNA	1.06 ± 0.05	1.08 ± 0.03

¹ P< 0.05 vs grupp NC.

 

2.4 Effetti u mekkaniżmu tas-CPhGs fuq SIRT2 u C/EBP

L-immunofluworexxenza (Figura 2A) żvelat espressjoni mtejba b'mod notevoli u ko-lokalizzazzjoni nukleari ta 'SIRT2 u C/EBP fil-grupp CPhGs kontra NC. Filwaqt li s-sinjali SIRT2 u C/EBP kienu dgħajfa f'NC, l-intensitajiet tal-fluworexxenza tagħhom żdiedu b'mod sinifikanti minn CPhGs, b'sinjali ċari ta 'ko-lokalizzazzjoni nukleari, li jissuġġerixxu interazzjoni msaħħa. Il-ko-immunopreċipitazzjoni kkonfermat aktar li, f'kumplessi pull-down C/EBP, il-proteina SIRT2 żdiedet b'mod sinifikanti fil-grupp CPhGs kontra NC (Figura 2B). Fl-immunoprecipitates C/EBP, is-sinjal acetyl-lysine (Acetyl) naqas fil-grupp CPhGs, filwaqt li l-proteina C/EBP totali ma nbidlitx (Figura 2C), li jindika li CPhGs isaħħu b'mod sinifikanti l-interazzjoni SIRT2-C/EBP u jrażżnu ċ-ċelluli C/EBP endoġeni acetylation-EMC3-1.

2.5 Effetti ta' SIRT2 fuq proteina C/EBP u espressjoni ta' mRNA

Meta mqabbel mal-grupp ta 'Kontroll, SIRT2 knockdown (SIRT2 KD) naqqas b'mod sinifikanti l-livelli ta' proteina C/EBP u mRNA fiċ-ċelloli MC3T3-E1. Relattivament għall-Kontroll + CPhGs, il-grupp SIRT2 KD + CPhGs wera wkoll tnaqqis fil-proteina C/EBP u mRNA, u CPhGs ma setgħux ireġġgħu lura t-tnaqqis ikkawżat minn SIRT2 knockdown (Figuri 3A, 3B). Dawn is-sejbiet jindikaw li t-telf ta 'SIRT2 inaqqas b'mod notevoli l-akkumulazzjoni tal-proteini C/EBP u l-espressjoni tal-mRNA C/EBP.

A, analiżi ta 'immunofluworexxenza ta' SIRT2 (aħmar) u C/EBP (aħdar) f'ċelluli MC3T3-E1 ittrattati b'CPhGs (×200); B, analiżi ta 'ko-immunopreċipitazzjoni (ko-IP) ta' interazzjoni SIRT2-C/EBP; C, livell ta 'aċetilazzjoni ta' C/EBP misjuba minn pan-acetylly purifikazzjoni IP.

Fig.2 Effett tas-CPhGs fuq SIRT2 u C/EBP u l-mekkaniżmu tiegħu

 

2.6 Effetti tad-deacetylation C/EBP fuq id-differenzazzjoni osteoġenika

Mutanti tas-sit tal-aċetilazzjoni C/EBP (K102R u K211R) inbnew biex jimitaw deacetylation sostnut. Aħna vvalutajna l-attività tal-ALP fl-istadju ta 'divrenzjar bikri (jum 7) u mineralizzazzjoni fl-istadju terminali (jum 14). Meta mqabbel ma 'WT, kemm il-mutanti K102R kif ukoll K211R wrew żona ALP-pożittiva miżjuda, u t-tbajja' ta' Alizarin Red S (ARS) wriet mineralizzazzjoni mtejba tal-matriċi extraċellulari. Madankollu, il-grupp EX wera żidiet akbar fl-ALP u l-ARS minn kwalunkwe mutant wieħed, li jissuġġerixxi li CPhGs jimmodulaw b'mod kooperattiv iż-żewġ siti K102 u K211 biex jippromwovu b'mod komprensiv il-formazzjoni tal-għadam (Figura 3C). Dawn ir-riżultati jindikaw li l-effett pro-osteoġeniku ta 'CPhGs huwa assoċjat ma' differenzjazzjoni bikrija medjata mid-deacetylation C/EBP u mineralizzazzjoni terminali, li jipprovdu evidenza funzjonali li CPhGs jinfluwenzaw id-divrenzjar osteoġeniku permezz tal-assi SIRT2/CEBP /AREG.

Diskussjoni

 

L-osteoporożi saret kwistjoni globali tas-saħħa pubblika li taffettwa serjament il-kwalità tal-ħajja tal-pazjenti. Mediċini tradizzjonali Ċiniżi bħal Cistanche (Rou Cong Rong), Ligustrum lucidum u Morinda officinalis għandhom rwoli importanti fil-ġestjoni tal-osteoporożi u qed jiġbdu attenzjoni dejjem tikber minħabba inqas effetti avversi u effikaċja stabbli [8-9]. Cistanche u l-kostitwenti tiegħu jistgħu jimmodulaw il-formazzjoni u l-assorbiment mill-ġdid tal-għadam u għandhom potenzjal qawwi għall-prevenzjoni u t-trattament tal-osteoporożi. Studju wieħed [10] sab li l-estratt ta 'Cistanche jippromwovi d-divrenzjar taċ-ċelluli staminali mesenkimali lejn l-osteoblasts, u jżid b'mod effettiv il-massa tal-għadam filwaqt li jnaqqas ir-riassorbiment tal-għadam. Studju ieħor [11] wera li Cistanche polysaccharides jinibixxu l-osteoklastoġenesi u l-assorbiment mill-ġdid ta 'hydroxyapatite, parzjalment billi jrażżnu l-ġeni markaturi tal-osteoclast (eż., Ctsk, MMP9, u ACP5).

Dan l-istudju investiga b'mod sistematiku l-effetti u l-mekkaniżmi molekulari tas-CPhGs fit-terapija tal-osteoporożi. Permezz ta 'esperimenti in vivo u in vitro, sibna li CPhGs jippromwovu b'mod sinifikanti d-divrenzjar osteoġeniku billi jimmodulaw l-assi SIRT2–C/EBP –AREG, li jipprovdu bażi teoretika ġdida għar-regolazzjoni tal-metaboliżmu tal-għadam bi prodotti naturali.

Aħna wrejna li CPhGs itejbu l-fenotip tat-telf tal-għadam fil-ġrieden ovariectomized billi jattivaw l-assi SIRT2–C/EBP –AREG, iżidu b'mod sinifikanti n-numru trabekulari u jippromwovu l-formazzjoni tal-għadam. Ir-riżultati tagħna juru li CPhGs jirregolaw sew il-markaturi osteoġeniċi (OCN, OPN, RUNX2) u l-attività ALP. Bħala regolatur ewlieni tad-divrenzjar osteoġeniku [12], ir-regolazzjoni 'l fuq ta' RUNX2 tista 'tmexxi direttament il-mineralizzazzjoni tal-matriċi tal-għadam, u l-attività ALP msaħħa tappoġġja aktar il-maturazzjoni tal-funzjoni tal-osteoblast. Aħna niżvelaw għall-ewwel darba li CPhGs jirregolaw l-espressjoni SIRT2, isaħħu l-interazzjoni tiegħu ma 'C/EBP, u jinduċu deacetylation C/EBP. C/EBP deacetylated x'aktarx jgħaddi minn bidliet konformazzjonali li jtejbu l-attività tat-traskrizzjoni u jirregolaw b'mod sinifikanti l-AREG mRNA; bħala ligand EGFR, AREG jista 'jattiva l-mogħdija PI3K-AKT biex jippromwovi l-osteoġenesi konsistenti ma' ZHANG et al. [13], li rrapporta li l-estratt ta 'Cistanche jrażżan id-divrenzjar tal-osteoklasti permezz ta' PI3K/AKT. Bl-użu ta 'mutanti tas-sit ta' aċetilazzjoni C/EBP (K102R u K211R), ikkonfermajna direttament li d-deacetylation C/EBP tippromwovi l-kalċifikazzjoni tal-matriċi extraċellulari, filwaqt li knockdown SIRT2 stabbilixxa l-ħtieġa ta 'din il-mogħdija fl-azzjoni CPhG, li jindika li d-deacetylation C/EBP medjata minn SIRT2 hija ċentrali għall-effetti pro-oste CPhG. Dawn is-sejbiet iwessgħu d-diversità rikonoxxuta tal-funzjonijiet tal-familja Sirtuin fl-omeostasi tal-għadam u jissuġġerixxu strateġiji ġodda għat-trattament tal-osteoporożi billi jimmiraw modifiki wara t-traduzzjoni.

L-osteoblasti għandhom rwoli ewlenin fil-proċess kumpless ta' remodeling tal-għadam. L-iżbilanċ bejn il-formazzjoni tal-għadam u r-riassorbiment - fil-biċċa l-kbira regolat mill-osteoblasts - huwa mutur ewlieni tal-osteoporożi. Għalhekk, it-titjib tal-formazzjoni tal-għadam hija strateġija terapewtika fundamentali. Remodeling effettiv jiddependi fuq interazzjonijiet koordinati bejn osteoblasts u osteoclasts. L-AREG, membru tal-familja EGF, huwa kritiku fir-regolazzjoni tat-tkabbir taċ-ċelluli, l-apoptożi, u l-migrazzjoni f'diversi tipi ta 'ċelluli [14]. SIRT2 huwa deacetylase dipendenti minn NAD+-espress prinċipalment fiċ-ċitoplasma iżda jinstab ukoll fil-mitokondrija u fin-nukleu, li jagħmilha membru uniku tal-familja Sirtuin [15]. Bħala fattur ta 'traskrizzjoni, C/EBP jgħaddi minn deacetylation taħt ir-regolament SIRT2, u jżid l-attività ta' traskrizzjoni ta 'diversi ġeni. Matul id-divrenzjar tal-osteoblast, C/EBP jorbot ġeni multipli biex jimmodula t-traskrizzjoni. Ir-riżultati tagħna juru li CPhGs itejbu l-espressjoni tal-proteina C/EBP u l-interazzjoni tagħha ma 'SIRT2, jrażżnu b'mod notevoli l-aċetilazzjoni C/EBP, u min-naħa tagħhom jirregolaw AREG mRNA, u b'hekk jippromwovu d-divrenzjar osteoġeniku. Għalkemm l-espressjoni C/EBP tikkorrelata b'mod pożittiv mat-traskrizzjoni ta' AREG, jekk C/EBP iservix direttament bħala fattur ta' traskrizzjoni ta' AREG jiġġustifika validazzjoni ulterjuri.

Fil-qosor, CPhGs jippromwovu d-deacetylation C/EBP permezz ta 'SIRT2, u b'hekk iżidu l-espressjoni ta' AREG, itejbu d-divrenzjar tal-osteoblasti u jtejbu l-osteoporożi. Is-CPhGs għandhom potenzjal bħala aġenti terapewtiċi għall-osteoporożi.

 

Provens ta 'Cistanche ta' fiduċja għas-saħħa tal-għadam osteoporotiku

Jekk inti marka nutraċewtika, manifattur ta 'ikel funzjonali, jew xerrej ta' R&D li jfittxu glycosides (CPhGs) ta 'Cistanche phenylethanoid affidabbli u ta' kwalità għolja jew estratti standardizzati ta 'Cistanche għas-saħħa tal-għadam, huwa essenzjali li tissieħeb ma' fornitur li jikkontrolla l-katina industrijali sħiħa tal-ħxejjex u jikkonforma ma 'sistemi ta' kwalità internazzjonali. Chengdu Wecistanche Bio-Tech Co., Ltd (WECISTANCHE) hija l-kumpanija tal-bejgħ ta 'Hotan Dicheng (Hetian Dicheng) u l-kwartieri ġenerali tagħna jinsab f'Hotan, ir-reġjun ta' oriġini ta 'Cistanche premier ta' Xinjiang-Ċina. WECISTANCHE huwa manifattur ewlieni taċ-Ċina Cistanche bi:

Hotan Dicheng (Hetian Dicheng)

L-akbar kapaċità ta 'proċessar ta' Cistanche fid-dinja marbuta ma 'bażi ​​ta' 200,000 acre, inklużi 85,000+ acres ta 'kultivazzjoni u fabbrika GMP ta' 20,000 tunnellata għal Cistanche frisk u botaniċi oħra.

Workshop ta 'produzzjoni GMP ta' 100,000 klassi; purifikazzjoni u konċentrazzjoni avvanzati ta 'ultrafiltrazzjoni/nanofiltrazzjoni; u laboratorju ta 'mikrobioloġija ta' 10,000 klassi.

 

Hotan Dicheng (Hetian Dicheng)
 

Ċertifikazzjonijiet:Ċina SC, HACCP, ċertifikazzjonijiet organiċi (IOIA/Assoċjazzjoni Internazzjonali għat-Titjib tal-Uċuħ Organiċi) u NOP (Programm Organiku tal-Istati Uniti).

14 privattivi ta 'invenzjoni relatati ma' Cistanche, inkluża t-teknoloġija tal-estrazzjoni tas-separazzjoni tal-membrana.

Kollaborazzjonijiet akkademiċi mal-aqwa istituzzjonijiet (eż., Peking University, Shanghai Jiao Tong University, Xinjiang Medical University, Kyoto Pharmaceutical University).

 

L-ambitu tan-negozju jkopri estratti ta 'Cistanche, supplimenti tas-saħħa, materja prima, u applikazzjonijiet madwar decoctions TCM, ikel funzjonali, prodotti għall-kura tas-saħħa, supplimenti tad-dieta, farmaċewtiċi u kura tal-ġilda. Matul il-COVID-19, WECISTANCHE tat prodotti Cistanche b'valur ta' aktar minn biljun RMB, li jirrifletti responsabbiltà soċjali qawwija.

 

Għal xerrejja li qed ifittxu bl-ingrossa jew jakkwistaw estratt ta 'Cistanche għal mekkaniżmi ta' mira ta' formuli ffukati fuq l-osteoporożi bħall-modulazzjoni SIRT2–C/EBP –AREG, id-divrenzjar tal-osteoblast (RUNX2/ALP/OCN/OPN), u appoġġ kumplimentari kontra r-risorbiment-WECISTANCHE joffri standards ta 'provvista skalabbli u konformi allinjati mal-US/EU. Tgħallem aktar: Dwarna - WECISTANCHE (https://www.xjcistanche.com/about-us).

Email:wallence.suen@wecistanche.com
Indirizz:Nru.1, Floor 26, Unit 1, Bini 6, No.133 Sheng'an Street, High-tech District, Chengdu, Sichuan, iċ-Ċina (Pilot Free Trade Zone).

 

Referenzi

[10] Li Y, Pei T, Zhu H, et al. Il-melatonin itaffi l-frekwenza tal-polz tal-ormon luteinizzanti mtejba indotta minn tfixkil tar-ritmu ċirkadjan u disfunzjoni tal-ovarji.J Pineal Res.2025;77(1):e70026. doi:10.1111/jpi.70026

[11] Liu J, Yang Y, He Y, et al. Id-decoction Erxian itaffi l-insuffiċjenza prematura tal-ovarji kkaġunata minn cisplatin fil-firien billi tnaqqas il-livelli ta 'ossidazzjoni fiċ-ċelloli tal-granulosa tal-ovarji.J Ethnopharmacol.2023;304:116046. doi:10.1016/j.jep.2022.116046

[12] Yang ZN, Du X, Wang A, et al. Melatonin ittejjeb l-omeostasi mitokondrijali indotta minn Pb u l-ħsara fl-ovarji permezz tar-regolazzjoni tal-mogħdija tas-sinjalar p38.Ecotoxicol Environ Saf.2025;292:117937. doi:10.1016/j.ecoenv.2025.117937

[13] Okoye CN, Koren SA, Wojtovich AP. Kumpless mitokondrijali I produzzjoni ROS u sinjalazzjoni redox fl-ipoksja.Redox Biol.2023;67:102926. doi:10.1016/j.redox.2023.102926

[14] Keskin-Aktan A, Akbulut KG, Yazici-Mutlu Ç, et al. L-effetti ta 'melatonin u curcumin fuq l-espressjoni ta' SIRT2, Bcl-2 u Bax fl-ippokampus ta 'firien adulti.Moħħ Res Bull.2018;137:306-310. doi:10.1016/j.brainresbull.2018.01.006

[15] Zhu T, Yan L, Deng S, et al. Il-mitokondrija tal-ovoċiti tal-ħnieżer jissintetizzaw il-melatonin, li jtejjeb il-maturazzjoni in vitro u l-iżvilupp embrijoniku tagħhom.Antiossidanti.2024;13(7):814. doi:10.3390/antiox13070814