Razez Probijotiċi Vijabbli U Maqtula bis-Sħana Jtejbu l-Immunità Orali Billi Jgħollu l-Konċentrazzjoni IgA fil-Mukoża Orali

Astratt

L-immunità tal-mukuża orali-nażali għandha rwol kruċjali fil-protezzjoni tal-ġisem kontra l-invażjoni batterjali u virali. Prodotti probijotiċi sikuri ntużaw biex itejbu l-immunità tal-bniedem u s-saħħa orali. F'dan l-istudju, aħna vverifikajna l-effetti ta 'benefiċċju ta' pilloli probijotiċi vijabbli mħallta, li jikkonsistu minn Lactobacillus salivarius subsp. salicinius AP-32, Bifdobacterium animalis subsp. lactis CP-9, u Lactobacillus paracasei ET-66, u pilloli probijotiċi maqtula bis-sħana, li jikkonsistu minn L. salivarius subsp. salicinius AP-32 u L. paracasei ET-66, dwar l-immunità orali fost 45 parteċipant b'saħħithom. Il-parteċipanti ġew maqsuma b'mod każwali fi gruppi probijotiċi vijabbli, probijotiċi maqtula bis-sħana u plaċebo. L-amministrazzjoni tat-trattament damet għal 4 ġimgħat. Inġabru kampjuni tal-bżieq fil-Ġimgħa 0, 2, 4, u 6, u l-popolazzjonijiet ta' Lactobacillus, Bifidobacterium, u Streptococcus mutans u l-konċentrazzjoni ta' IgA ġew imkejla. Konċentrazzjonijiet ta' IgA u livelli ta' TGF-beta u IL-10 fiċ-ċelloli PBMC ġew ikkwantifikati bil-metodu ELISA. Ir-riżultati wrew li l-livelli tal-bżieq IgA żdiedu b'mod sinifikanti fuq l-amministrazzjoni kemm tal-vijabbli (119.30±12.63%, ***P<0.001) and heat-killed (116.78±12.28%, ***P<0.001) probiotics for 4 weeks. Among three probiotic strains, AP-32 would effectively increase the levels of TGF-beta and IL-10 in PBMCs. The oral pathogen Streptococcus mutans was significantly reduced on viable probiotic tablet administration (49.60±31.01%, ***P<0.001). The in vitro antibacterial test confirmed that viable probiotics effectively limited the survival rate of oral pathogens. Thus, this clinical pilot study demonstrated that oral probiotic tablets both in viable form or heat-killed form could exert beneficial effects on oral immunity via IL-10, TGB-beta mediated IgA secretion. The effective dosage of viable probiotic content in the oral tablet was 109 CFUs/g and the heat-killed oral tablet was 1× 1010 cells/g.

cistanche suppliment benefiċċji-żieda l-immunità

Introduzzjoni

Il-mukoża orali-nażali, il-portal għall-kuntatt ta 'antiġeni inalati, hija d-difiża ta' quddiem tas-sistema immuni umana [1, 2]. Normalment, viruses patoġeniċi jew batterji jinvadu l-uċuħ mukosali tal-kavità orali-nażali billi jiġġieldu kontra s-sistema immuni lokali u l-mikrobijota b'saħħitha [3]. Infjammazzjoni u sintomi, inklużi sogħla, uġigħ fil-griżmejn, imnieħer inixxi, u deni, jiżviluppaw minħabba r-reazzjonijiet immuni kontra viruses u batterji patoġeniċi invażivi [4]. Barra minn hekk, l-immunoglobulina A (IgA) hija l-fattur immuni ewlieni fil-bżieq u tirregola l-omeostasi tal-mikrobijota orali [5]. Diversi studji rrappurtaw l-abbiltà tal-IgA sekretorja li tipproteġi l-ġisem minn infezzjoni minn patoġeni virali, inkluż virus respiratorju sinċizjali [6], rotavirus [7], u virus tal-influwenza [7]. IgA segretorja tiffunzjona biex tipproteġi l-epitelja mukoża. Nicolas Millet et al. skopra li l-IgA mukuża jista 'jipprevjeni d-dysbiosis commensali ta' Candida albicans fil-kavità orali [8]. Tipprevjeni wkoll l-aggregazzjoni tal-patoġenu orali Streptococcus mutans, li jikkawża plakka dentali [9].

Barra minn hekk, ir-riċerkaturi skoprew li l-mikrobijota orali u l-metaboliti tagħha jistgħu jinfluwenzaw lokalment l-immunità fil-barriera orali [10]. Studji preċedenti wrew l-effettività tal-probijotiċi fl-elevazzjoni tal-konċentrazzjoni IgA fil-mukoża orali [11]. Ericson et al. wera li ċ-chewing gum li fih Lactobacillus reuteri ipparteċipa fir-rispons immuni adattiv ta 'suġġetti b'saħħithom billi żied il-livelli ta' IgA salivari [12]. Fil-bnedmin, iċ-ċitokini immuni TGF-beta u IL-10 huma korrelatati mal-produzzjoni ta' IgA [13].

Madankollu, jekk il-mikrobijota orali għollietx il-livelli sekretorji ta' IgA permezz taċ-ċitokini TGF-beta u IL-10 għadu mhux ċar. Barra minn hekk, il-patoġeni orali jinkludu S. mutans, P. gingivalis, u F. nucleatum subsp. polimorfiżmu u A. actinomycetemcomitans wrew korrelazzjoni għolja ma 'mard perjodontali u nifs ħażin [14]. Prodotti probijotiċi jistgħu jkunu terapija alternattiva potenzjali għal periodontitis billi jinibixxu l-patoġeni orali Fusobacterium nucleatum, iżda Porphyromonas gingivalis u Aggregatibacter actinomycetemcomitans ma wrew l-ebda tnaqqis sinifikanti [15]. Is-supplimentazzjoni probijotika tista 'wkoll tipprevjeni infezzjonijiet patoġeniċi [16]. Ġie rrappurtat li l-ispeċi ewlenin tal-mikrobijota llimitaw it-tkabbir ta 'pnewmonja Streptococcus patoġenika [17]. Għalhekk, iż-żamma ta 'ekosistema mikrobjali bilanċjata permezz tal-assorbiment ta' razez probijotiċi jista 'jkun mod alternattiv biex tirregola l-immunità orali u tittejjeb is-saħħa orali. Sejbiet preċedenti dwar l-inibizzjoni ta 'patoġeni orali minn razez probijotiċi wrew li Lactobacillus salivarius subsp. salicinius AP-32, Bifdobacterium animalis subsp. lactis CP-9, u Lactobacillus paracasei ET-66 jeżerċitaw effetti antibatteriċi eċċellenti in vitro; madankollu, mhux bil-mekkaniżmu taż-żieda fil-livelli ta 'H2O2 [18]. L-istrateġiji ewlenin għal razez probijotiċi biex jillimitaw it-tkabbir patoġeniku orali kienu l-ko-aggregazzjoni tal-patoġeni oralment, il-produzzjoni ta 'bijosurfactants, it-tibdil tal-ambjent orali, u l-ġenerazzjoni ta' sustanzi antimikrobiċi [19]. Barra minn hekk, studju in vitro wera li L. salicinius AP-32 medja ċitokini infjammatorji [interleukin (IL)-8, IL{-10] espressjoni fiċ-ċelloli epiteljali umani [20]. Għalhekk, f'dan l-istudju, aħna vverifikajna jekk pilloli probijotiċi vijabbli mħallta, li jikkonsistu minn L. salivarius subsp. salicinius AP-32, B. animalis subsp. lactis CP-9, u L. paracasei ET-66, u pilloli probijotiċi maqtula bis-sħana, li jikkonsistu minn L. salivarius subsp. Salicinius AP-32 u L. paracasei ET-66, tejbu l-funzjoni immuni permezz ta' TGF-beta, IL-10 jew għollew il-livell ta' konċentrazzjoni ta' IgA salivari. Ġiet ittestjata l-funzjoni anti-batterika tal-assorbiment tal-prodott probijotiku fil-kavità orali.

cistanche suppliment benefiċċji-kif tissaħħaħ is-sistema immuni

Ikklikkja hawn biex tara l-prodotti Cistanche Enhance Immunity

【Staqsi għal aktar】 Email:cindy.xue@wecistanche.com / Whats App: 0086 18599088692 / Wechat: 18599088692

Materjal u Metodi

Parteċipanti

B'kollox, 45 parteċipant b'saħħithom ta 'età ta' 20–40 sena ġew reklutati u maqsuma b'mod każwali fi tliet sottogruppi: il-pillola orali probijotika vijabbli, pillola orali probijotika maqtula bis-sħana, u gruppi tal-plaċebo. Kull grupp kien jikkonsisti minn 15-il parteċipant. Ġew esklużi parteċipanti b'drawwiet tal-ikel tat-tipjip u tal-ġewż betel. Pilloli orali ġew assenjati bl-addoċċ lill-parteċipanti. Il-parteċipanti kollha ħadu l-pilloli orali tliet darbiet kuljum (filgħodu, nofsinhar, u filgħaxija) għal 4 ġimgħat. Inġabru kampjuni tal-bżieq (2 mL) biex ikejlu l-konċentrazzjoni tal-IgA u l-popolazzjonijiet tal-mikroorganiżmi f'Ġimgħat 0, 2, 4, u 6. Inkiseb kunsens infurmat mill-parteċipanti kollha inklużi f'dan l-istudju. Il-protokoll ġie approvat mill-Bord ta 'Reviżjoni Istituzzjonali ta' Chung Shan Medical University, Tajwan (CS19052).

Pilloli Probijotiċi Vijabbli Orali

Il-pillola orali probijotika vijabbli (1 g) kienet fiha tliet razez probijotiċi vijabbli, L. salivarius subsp. salicinius AP-32, B. animalis subsp. lactis CP-9, u L. paracasei ET-66. Ħallna 0.01 g ta' 1011-il unità ta' formazzjoni ta' kolonji (CFUs) probijotiku wieħed fil-pillola orali. Kull razza probijotika waħda tkejjel madwar 0.33 * 109CFUs/g. Il-kontenut totali probijotiku fil-pillola orali kien 109 CFUs tal-kolonja/g. Id-dożaġġ attiv tal-pillola orali probijotika kien qed isegwi xogħlijiet ippubblikati preċedenti [18]. Ir-razez probijotiċi kollha nkisbu mil-laboratorju ta 'Biofag Biotech Co., Ltd. (Tainan, Tajwan). L. salivarius subsp. salicinius AP-32 ġie iżolat minn imsaren tal-bniedem b'saħħtu u ddepożitat fl-Istitut tar-Riċerka u l-Iżvilupp tal-Industrija tal-Ikel, Tajwan (ID: BCRC 910437) u fl-Università ta 'Wuhan, iċ-Ċina (ID: CCTCC-M2011127); B. animalis subsp. CP lattiku -9 ġie iżolat minn ħalib tas-sider uman b'saħħtu u ddepożitat fl-Istitut tar-Riċerka u l-Iżvilupp tal-Industrija tal-Ikel, Tajwan (ID: BCRC 910645) u fl-Università ta 'Wuhan (ID: CCTCC-M2014588); L. paracasei ET-66 ġie iżolat minn ħalib tas-sider uman b'saħħtu u ddepożitat fl-Istitut tar-Riċerka u l-Iżvilupp tal-Industrija tal-Ikel, Tajwan (ID: BCRC 910753) u fiċ-Ċentru tal-Ġbir tal-Kultura Mikrobijoloġika Ġenerali taċ-Ċina, Beijing, iċ-Ċina (ID: CGMCC{ {22}}). Lactobacillus. salivarius subsp. salicinius AP-32 u L. paracasei ET-66 ġew ikkultivati ​​fuq pjanċi agar de Man, Rogosa, u Sharpe (MRS) (110,660, Merck, Darmstadt, il-Ġermanja) u inkubati taħt kundizzjonijiet anerobiċi fakultattivi f'37 grad għal 48 siegħa. B. animalis subsp. Lactis CP-9 ġie kkultivat fuq agar MRS supplimentat b'0.05% cysteine ​​u inkubat b'mod anerobiku f'37 grad għal 48 siegħa. L-għadd tal-kolonji sar għall-kwantifikazzjoni ta 'CFU batterjali wara l-kultivazzjoni ta' razez probijotiċi [18].

sistema immunitarja li żżid il-pjanti cistanche

Pilloli Probijotiċi Orali maqtula bis-sħana

Il-pilloli orali probijotiċi maqtula bis-sħana (1 g) kienu jikkonsistu minn L. salivarius subsp. salicinius AP-32 u L. paracasei ET-66. Ir-razez vijabbli ġew ikkultivati ​​u inkubati, kif deskritt qabel. Imbagħad, AP-32 u ET{-66 ġew inattivati ​​billi inkubaw ir-razez vijabbli fil-midja MRS f'100 grad għal siegħa. Il-kontenut probijotiku fil-pillola orali kien 1 × 1010 ċelluli/g. Id-dożaġġ attiv ta 'pilloli orali probijotiċi maqtula bis-sħana kien qed isegwi ttestjar in vitro ippubblikat qabel [11]. Il-proċeduri sperimentali kollha saru fil-laboratorju ta 'Biofag Biotech Co., Ltd. (Tainan, Tajwan).

Kejl tal-Popolazzjonijiet Lactobacillus u Bifidobacterium f'Kampjuni tal-Bżieq

Inġabru kampjuni tal-bżieq (2 mL) minn kull parteċipant fil-Ġimgħat 0, 2, 4, u 6. Il-kampjuni tal-bżieq (100 µL) ġew dilwiti serjali u miżjuda mal-MRS pjanċi. Biex jitkejlu l-popolazzjonijiet ta 'Lactobacillus, Lactobacillus ġie kkultivat u inkubat fuq il-pjanċi tal-agar MRS taħt kundizzjonijiet anerobiċi fakultattivi f'37 grad għal 48 siegħa. Biex tkejjel il-popolazzjonijiet ta' Bifdobacterium, Bifdobacterium ġie kkultivat u inkubat b'mod anerobiku fuq MRS agar supplimentat b'0.05% cysteine ​​f'37 grad għal 48 siegħa. L-għadd tal-kolonji sar għall-kwantifikazzjoni ta 'CFU batterjali wara l-kultivazzjoni ta' razez probijotiċi. Ir-rati tal-popolazzjoni ta 'Lactobacillus u Bifidobacterium ġew normalizzati għan-numru tal-popolazzjoni probijotika f'Ġimgħa 0. Ir-rata tal-popolazzjoni ta' Lactobacillus u Bifidobacterium miġbura f'Ġimgħa 0 kienet ikkunsidrata 100%. Il-metodu sperimentali segwa xogħlijiet ippubblikati qabel [18].

Kejl tal-Konċentrazzjoni IgA fil-Mukoża Orali

Kampjuni tal-bżieq (2 mL) inġabru minn kull parteċipant fil-Ġimgħat 0, 2, 4, u 6 u miżmuma fi 20 grad. Il-Kit ELISA Uman Mhux miksi bl-IgA (Katalog # 88-50600-88; Invitrogen, Thermo Fisher Scientific, San Jose, CA, USA) intuża biex janalizza l-konċentrazzjoni IgA. L-ewwelnett, kisijna antikorpi IgA kontra l-bniedem fuq 96-platt tal-bir. IgA salivary preżenti fil-kampjun jew l-istandard ġie miżjud mal-microwell, u mbagħad antikorp IgA anti-bniedem konjugat bl-HRP ġie miżjud f'temperatura tal-kamra għal siegħa. Pipett TMB Substrat għal kull bir għal 30 min. Fl-aħħarnett, il-konċertazzjoni tal-IgA ġiet imkejla fuq spettrofotometru f'450 nm. Il-proċedura sperimentali kollha twettqet fi tliet kopji, skont l-istruzzjonijiet tal-manifattur. Ir-rata ta' konċentrazzjoni ta' IgA miġbura f'Ġimgħa 0 kienet ikkunsidrata bħala 100%. Il-metodu sperimentali segwa xogħlijiet ippubblikati qabel [18].

cistanche tubulosa-titjib tas-sistema immuni

Kejl tal-Konċentrazzjoni TGF-Beta u IL-10 fil-PBMC

L-ittestjar tal-elevazzjoni indotta minn probijotiċi tal-livelli ta' TGF-beta u IL-10 wara l-istudju preċedenti [20]. Iċ-ċelloli mononukleari tad-demm periferali (PBMCs) inkisbu minn kampjuni tad-demm ta 'donaturi b'saħħithom (Tainan Blood Center, Taiwan Blood Services Foundation). Iċ-ċentrifugazzjoni tad-demm sħiħ permezz ta 'gradjent Ficoll-Hypaque (Pharmacia, l-Isvezja), u l-frazzjoni tad-densità ħafifa mill-interface ta' 42.5%-50% ġiet eluduta. Iż-żrigħ ta' 4 * 105 ċelluli PBMC estratti f'100 µl RPMI-1640 b'1% FBS (Sigma Chemical Co., St. Louis, MO, USA) għal kull bir ta' pjanċi ta' 96 bir. Imbagħad żid 5 * 105 cfu/20 µl trattament probijotiku għal kull PBMCs miżrugħa sew (ċelluli: razez probijotiċi=1:10). Il-kontrolli pożittivi kienu jżidu 10 µg/ml Phytohaemagglutinin (PHA) (Sigma-Aldrich, Munich, il-Ġermanja) mal-bjar miżrugħa tal-PBMCs għall-produzzjoni ta' TGF- , IL-10 rispettivament [21]. Ko-kultivazzjoni ta 'probijotiċi ma' PBMCs għal 48 siegħa. Kejl tas-supernatant li fih ċitokini IL-10 u TGF- permezz ta' analiżi ta' analiżi immunosorbenti marbuta ma' enżimi (ELISA) (Thermo Scientific, Carlsbad, CA, USA). L-esperimenti kollha ġew imkejla u segwew il-protokoll kummerċjali mill-inqas fi tliet kopji.

Evalwazzjoni tal-Funzjoni Antibatterika fil-Kavità Orali

Streptococcus mutans huwa theddida komuni għas-saħħa orali, li tikkawża t-snien tas-snien billi tifforma pesta jew bijofilm [22]. Inġabru kampjuni ta’ Streptococcus mutans mit-tampuni, li bihom inġabru s-S. mutans fuq il-parti supraġinġivali, il-ġinġi, u l-mukuża orali, f’Ġimgħat 0, 2, 4, u 6. S. mutans inżamm fi tryptic brodu tas-sojja (TSB, 5 mL) supplimentat b'50% gliċerol. Il-medium S. mutans ġie dilwit serjament u miżjud mal-pjanċa Mitis Salivarius-Bacitracin Agar (MSBA, 0.2 U/mL), li ġiet inkubata f'37 grad għal 2 d. Fl-aħħarnett, in-numru ta 'kolonji S. mutans f'kull kampjun ta' parteċipant kien magħdud biex jiġu kkalkulati r-rati ta 'sopravivenza patoġenika; ir-rata ta' sopravivenza ta' S. mutans miġbura f'Ġimgħa 0 kienet ikkunsidrata 100%. Il-metodu sperimentali segwa xogħlijiet ippubblikati qabel [18].

Attività Antibatterika in Vitro tal-Pilloli Orali

Oral tablets (1 g) that contained viable (AP-32, CP-9, and ET-66; > 109 CFUs) and heat-killed (AP-32 and ET-66,>1010 CFUs) razez probijotiċi ġew maħlula f'TSB u medju ta 'infużjoni tal-qalb tal-moħħ, rispettivament, biex tinkiseb konċentrazzjoni finali ta' 0.1 g/mL. Il-mezz biss intuża għall-grupp vojt, filwaqt li pilloli (1 g) mingħajr ebda komponenti probijotiċi ġew maħlula fil-midja rispettiva għall-grupp tal-plaċebo. Imbagħad, patoġeni orali (106 CFUs) ġew introdotti fis-soluzzjonijiet tal-pilloli u ko-inkubati f'37 grad għal 2 (S. mutans) jew 3 (Porphyromonas gingivalis, Fusobacterium nucleatum subsp. polymorphum, u Aggregatibacter actinomy cetemcomitans) d. Il-patoġeni nkisbu mill-BCRC. Ir-rata ta' inibizzjoni tal-patoġenu orali (%) ġiet ikkalkulata kif ġej: (kontroll CFUblank–grupp CFUesperimentali)/kontroll CFUblank. Il-metodu sperimentali segwa ttestjar ippubblikat qabel [11].

Analiżi Statistika

Is-softwer GraphPad Prism intuża għall-analiżi statistika tar-riżultati tat-test-t b'żewġ denbu. Id-dejta ġiet ippreżentata bħala d-devjazzjoni standard medja (SD) jew il-medja tar-riżultati ta 'żewġ jew tliet esperimenti indipendenti. Differenzi statistiċi tqiesu sinifikanti fil-valur P<0.05.

Riżultati

Pilloli Probijotiċi Żiedu l-Popolazzjoni ta 'Bifidobacterium fil-Kavità Orali

Il-popolazzjoni ta' Bifidobacterium kienet elevata b'mod stabbli fil-kavità orali wara l-għoti tal-pilloli probijotiċi. Il-popolazzjonijiet ta' batterji wara t-trattamenti ġew normalizzati minn popolazzjonijiet ta' batterji qabel it-trattamenti (Rata ta' popolazzjoni %=CFU ta' wara t-trattament/CFU ta' qabel it-trattament). Fil-grupp probijotiku vijabbli, ir-rata tal-popolazzjoni żdiedet b'mod sinifikanti għal 244.14±164.96% f'Ġimgħa 2 (**P<0.01, Fig. 1a) and 438.41±308.58 at Week 4 (***P<0.001), compared to Week 0. The Bifidobacterium population rate remained high at Week 6 (no administration of viable probiotic tablets for 2 weeks after Week 4, 550.16±448.19%, ***P<0.001), compared to Week 0. The Bifidobacterium population number was significantly different between the viable probiotic and placebo groups at Week 6 (**P<0.01). In the heat-killed probiotic group, the Bifidobacterium population was increased at Weeks 2 (149.92±60.47%, **P<0.01) and 4 (199.87±148.64%, *P<0.05), but was decreased at Week 6 after administration of the heat-killed probiotic tablets was stopped for 2 weeks (182.98±163.73%, Fig. 1a).

Pilloli Probijotiċi Żiedu l-Popolazzjoni ta 'Lactobacillus fil-Kavità Orali

Il-bidla fil-popolazzjoni orali ta' Lactobacillus minħabba l-amministrazzjoni tal-pilloli probijotiċi wriet mudell simili għal dak segwit mill-bidla fil-popolazzjoni orali ta' Bifidobacterium. Il-popolazzjonijiet batterjali wara t-trattamenti ġew normalizzati minn popolazzjonijiet batteriċi qabel it-trattamenti. Fil-grupp probijotiku vijabbli, ir-rata tal-popolazzjoni ta 'Lactobacillus żdiedet b'mod sinifikanti għal 447.74±337.89% f'Ġimgħa 2 (**P<0.01, Fig. 1b) and 982.27±726.66% at Week 4 (***P<0.001), compared to Week 0. The Lactobacillus population rate was higher at Week 6 (no administration of viable probiotic tablets for 2 weeks after Week 4, 727.57±539.76%, ***P<0.001) than at Week 0. The Lactobacillus population number was significantly different between the viable probiotic and placebo groups at Week 6 (***P<0.001). In the heat-killed probiotic group, the Lactobacillus population was increased at Weeks 2 (256.66±183.78%, **P<0.01) and 4 (312.85 ± 279.71%, *P < 0.05). Additionally, the Lactobacillus number remained but showed no significant difference at Week 6 after the administration of heat-killed probiotics was stopped for 2 weeks (208.00±199.50%, Fig. 1b).

Fig. 1 a Kejl ta' popolazzjonijiet ta' Bifidobacterium fuq l-uċuħ tal-mukuża orali. V pilloli probijotiċi vijabbli; H pilloli probijotiċi inattivati ​​maqtula bis-sħana; Pilloli plaċebo C (kontroll); u batterji tal-aċidu lattiku LAB. Ġew imwettqa ġbir u analiżi tal-kampjuni tal-bżieq f'Ġimgħat 0, 2, 4, u 6. Id-dejta ġiet ippreżentata bħala d-devjazzjoni standard medja (SD). Intuża t-test b'żewġ denbu biex janalizza d-differenzi statistiċi. Is-sinifikati statistiċi kienu mmarkati b'*P<0.05, **P<0.01, ***P<0.001. b Measurement of Lactobacillus populations on the oral mucosal surfaces. V viable probiotic tablets; H heat-killed inactivated probiotic tablets; C placebo tablets (control); and LAB lactic acid bacteria. Collection and analysis of salivary samples at Weeks 0, 2, 4, and 6 were performed. Data were presented as the mean standard deviation (SD). A two-tailed t-test was used to analyze statistical differences. Statistical significances were marked with *P<0.05, **P<0.01, ***P<0.001

Pilloli probijotiċi li fihom AP-32, ET-66, u CP-9 elevati b'mod sinifikanti l-Konċentrazzjoni ta' IgA fil-Mukoża Orali

Peress li l-konsum tal-pillola probijotika (vijabbli jew maqtula bis-sħana) ġie ppruvat li jgħolli l-livelli ta 'Bifidobacterium u Lactobacillus fil-kavità orali, aħna analizzajna aktar il-bidliet fil-konċentrazzjoni tal-IgA salivari, li seħħew minħabba l-assorbiment ta' prodotti probijotiċi. Il-livelli ta' IgA wara t-trattamenti ġew normalizzati bil-livelli ta' IgA qabel it-trattamenti. Fil-grupp probijotiku vijabbli, il-konċentrazzjoni tal-IgA salivari żdiedet ftit għal 103.24 ± 8.10% f'Ġimgħa 2 (Fig. 2) u 104.81 ± 13.26 f'Ġimgħa 4, iżda mingħajr differenzi statistikament sinifikanti. Madankollu, il-konċentrazzjoni tal-bżieq IgA fil-grupp probijotiku vijabbli, meta mqabbla mal-grupp tal-plaċebo, żdiedet b'mod sinifikanti għal 119.30 ± 12.63% f'Ġimgħa 6 (l-ebda amministrazzjoni ta 'pilloli probijotiċi vijabbli għal ġimgħatejn wara Ġimgħa 4), meta mqabbla ma' Ġimgħa 0 ( ***P<0.001). Furthermore, in the heat-killed probiotic group, the salivary IgA concentration was slightly increased at Weeks 2 (102.51± 7.20%) and 4 (104.35 ± 10.27%). The saliva IgA concentration was increased at Week 6 (116.78 ± 12.28%, ***P < 0.001, Fig. 2), compared to Week 0.

Razez Vijabbli Żiedu fil-Livelli ta' IL-10 u TGF-Beta fil-PBMCs

Il-kontroll pożittiv ta' 10 µg/ml Phytohaemagglutinin (PHA) għola b'suċċess il-livelli ta' IL-10 (58.2 ± 7.9 pg/ml, ***P < 0.001, Fig. 3a) u TGF- (53.4±8 pg/ml, ***P<0.001, Fig. 3b) in PBMCs by comparing to the negative control (PBMCs treated with medium only). Viable strains of CP-9, AP-32 and ET-66 signifcantly increased the levels of IL-10 in PBMCs to 84.2±9 pg/ml (***P<0.001, ##P<0.01), 303.1±170.9 pg/ml (*P<0.05, ##P<0.01) and 98.2±17.5 pg/ml (***P<0.01, ##P<0.01), respectively. Symbol *indicated a significant difference by comparing to the medium-treated control; symbol #indicated a significant difference by comparing to the PHA control (Fig. 3a). Besides, viable strains of CP-9, AP-32, and ET-66 significantly increased the levels of TGF-beta in PBMCs to 23.2 ± 4.7 pg/ml (***P < 0.001), 130.9 ± 16 pg/ ml (***P < 0.001, ###P < 0.001) and 31.4 ± 5.5 pg/ml (***P<0.01), respectively (Fig. 3b).

Fig. 2 Konċentrazzjoni ta' immunoglobulina A (IgA) fil-kampjuni tal-bżieq. V pilloli probijotiċi vijabbli; H pilloli probijotiċi inattivati ​​maqtula bis-sħana; Pilloli plaċebo C (kontroll); u batterji tal-aċidu lattiku LAB. Ġew imwettqa ġbir u analiżi tal-kampjuni tal-bżieq f'Ġimgħat 0, 2, 4, u 6. Id-dejta ġiet ippreżentata bħala d-devjazzjoni standard medja (SD). Intuża t-test b'żewġ denbu biex janalizza d-differenzi statistiċi. Statistika

Pilloli probijotiċi li fihom AP-32, ET-66, u CP-9 Ipprojbixxa l-Popolazzjoni ta' S. mutans fil-bżieq

Popolazzjonijiet elevati ta' Bifidobacterium u Lactobacillus u żieda fil-konċentrazzjoni tal-bżieq IgA jistgħu jikkontribwixxu għall-ġlieda kontra mikro-organiżmi patoġeniċi orali. Fl-esperiment sussegwenti, aħna ttestjajna l-alterazzjoni fil-popolazzjoni tal-patoġenu orali S. mutans minħabba intervent probijotiku. Il-popolazzjonijiet batterjali wara t-trattamenti ġew normalizzati minn popolazzjonijiet batteriċi qabel it-trattamenti. Fil-grupp probijotiku vijabbli, il-popolazzjoni ta' S. mutans tnaqqset b'mod sinifikanti f'Ġimgħat 2 (53.55±31.60%, ***P<0.001), 4 (49.60±31.01%, ***P<0.001), and 6 (55.19±42.72%, **P<0.01, Fig. 4). At week 6, S. mutans was significantly inhibited in the viable probiotic group (55.19±42.72%, ***P<0.001), compared to in the placebo group. Furthermore, in the heat-killed probiotic group, the S. mutans population was slightly decreased at Week 2 (85.81±49.87%) and significantly reduced at Week 4 (58.35 ± 33.17%, ***P<0.001). The S. mutans population level in the heat-killed probiotic group (202.81±167.99%) reverted to that in the placebo group (225.05±127.01%) at Week 6 (no administration of heat-killed probiotic tablets for 2 weeks from Week 4) (Fig. 4).

Fig. 3 Razez vijabbli żiedu l-livelli ta' IL-10, u TGF-beta, fil-PBMCs. Il-livell ta' IL-10 u b TGF-beta fil-PBMCs ġew ittestjati billi ġew trattati razez probijotiċi. Iż-żieda ta' 5 * 105 cfu/20 µl razez vijabbli ta' CP-9, AP-32, u ET-66 ma' PMBCs 10 µg/ml. Phytohaemagglutinin (PHA) intuża bħala kontroll pożittiv. Il-kontroll negattiv kien PBMCs ittrattati b'medja RMPI-1640 biss. Twettqu testijiet triplikati. Id-dejta ġiet ippreżentata bħala d-devjazzjoni standard medja (SD). Intuża t-test b'żewġ denbu biex janalizza d-differenzi statistiċi. Is-sinifikati statistiċi ġew immarkati b'P<0.05, P<0.01, P<0.001. The symbol *indicated a significant difference by comparing to the medium-treated control; symbol #indicated significant difference by comparing to the PHA control

Fig. 4 Kejl ta' popolazzjonijiet patoġeniċi ta' Streptococcus mutans fuq l-uċuħ mukożi orali. V pilloli probijotiċi vijabbli; H pilloli probijotiċi inattivati ​​maqtula bis-sħana; Pilloli plaċebo C (kontroll); u batterji tal-aċidu lattiku LAB. Ġew imwettqa ġbir u analiżi tal-kampjuni tal-bżieq f'Ġimgħat 0, 2, 4, u 6. Id-dejta ġiet ippreżentata bħala d-devjazzjoni standard medja (SD). Intuża t-test b'żewġ denbu biex janalizza d-differenzi statistiċi. Is-sinifikati statistiċi ġew immarkati b'*P<0.05, **P<0.01, ***P<0.001

Konferma tal-Abbiltà tal-Pilloli Probijotiċi li jinibixxu t-Tkabbir tal-Patoġenu Orali permezz ta' Test In Vitro

L-istudju in vitro wera li pilloli probijotiċi vijabbli inibixxu b'mod sinifikanti r-rata ta 'sopravivenza ta' patoġeni orali (Fig. 5a). Il-popolazzjonijiet batterjali wara t-trattamenti ġew normalizzati minn popolazzjonijiet batteriċi qabel it-trattamenti. Ir-rata ta' sopravivenza ta' S. mutans, P. gingivalis, F. nucleatum, u A. actinomy cetemcomitans fil-grupp probijotiku vijabbli, meta mqabbla ma' fil-grupp tal-plaċebo, naqset għal 4.23% (***P < 0 .001, plaċebo=91%), 8.64% (***P < 0.001, plaċebo=89%), 5.77% (**P<0.01, placebo=98%), and 6.23% (**P<0.01, placebo=87%), respectively. However, the heat-killed probiotic tablet exerted weaker antibacterial effects than the viable probiotic tablet (Fig. 5b). The survival rate of S. mutans, P. gingivalis, F. nucleatum, and A. antinomy cetemcomitans in the heat-killed probiotic group, compared to in the placebo group, was slightly decreased without statistical significance (82%, placebo=91%), significantly reduced to 53% (*P<0.05, placebo=89%), not inhibited (96.88%, placebo=98%), and significantly reduced to 80% (**P<0.01, placebo=87%), respectively.

Diskussjoni

Meta mqabbel mal-grupp tal-plaċebo, il-popolazzjonijiet orali ta 'Lactobacillus u Bifidobacterium jiżdiedu b'mod sinifikanti billi jitimgħu pilloli probijotiċi vijabbli jew pilloli probijotiċi maqtula bis-sħana għal 4 ġimgħat. Barra minn hekk, in-numri ta 'Lactobacillus u Bifidobacterium baqgħu f'livelli għoljin b'mod sinifikanti għal ġimgħatejn wara s-sospensjoni tal-konsum ta' konsum vijabbli ta 'probijotiċi (Fig. 1a u b). Bl-istess mod, Camila Casuccio Almeida et al. wera li amministrazzjoni ta' erba' ġimgħat ta' kura probijotika tista' tippersisti ttejjeb is-sintomi f'pazjenti intolleranti għal-lattożju għal mill-inqas 3 xhur wara li twaqqaf il-konsum probijotiku [23]. Madankollu, l-effett persistenti tal-probijotiċi fit-trattament fit-tul għandu jiġi evalwat fil-futur. Barra minn hekk, il-konċentrazzjoni ta 'IgA salivari żdiedet b'mod sinifikanti fuq l-amministrazzjoni ta' pilloli probijotiċi vijabbli u maqtula bis-sħana. Kemm il-gruppi probijotiċi maqtula bis-sħana kif ukoll dawk vijabbli żiedu l-IgA salivarju billi amministraw pilloli orali għal 4 ġimgħat, iżda mingħajr ma wrew differenza statistika għall-plaċebo. Il-konċentrazzjoni ta 'IgA fi gruppi probijotiċi maqtula bis-sħana u vijabbli wriet żieda sinifikanti f'Ġimgħa 6. Madankollu, il-mekkaniżmu ta 'elevazzjoni ta' IgA wara li titwaqqaf l-amministrazzjoni probijotika għal ġimgħatejn għandu jiġi investigat aktar (Fig. 2) Braathen et al. irrapporta riżultati simili dwar ir-rwol ta 'modulazzjoni immuni ta' razez probijotiċi fil-kavità orali [24]. Barra minn hekk, razez probijotiċi ġew irrappurtati li jżidu l-konċentrazzjoni tal-IgA tal-ippurgar b'mod sinifikanti fil-majjali nisa u l-ħnieżer [25]. Madankollu, studji dwar is-sintomi li jtaffu l-IgA f'infezzjonijiet tal-passaġġi tan-nifs ta' fuq għadhom insuffiċjenti. Il-mekkaniżmu molekulari dettaljat ta' inibizzjoni u prevenzjoni ta' infezzjonijiet fil-passaġġ tan-nifs ta' fuq minn razez probijotiċi CP-9, AP-32, u ET-66 jista' jiġi investigat fi studji futuri. Fl-istudju preżenti, razez vijabbli CP-9, AP-32, u ET-66 jgħollu l-livell ta' IL-10, u TFG-beta fiċ-ċelloli PBMC. AP-32 wera kapaċità effettiva biex tiżdied IL-10, u TFG-beta fil-PBMCs billi tqabbelhom mal-kontroll pożittiv PHA (Fig. 3a u b). Preżuniet li razez vijabbli CP-9, AP-32, u ET-66 jistgħu jinduċu IL-10 u TFG-beta li jxerrdu ċ-ċelluli B biex iżidu l-livelli ta' IgA tal-bżieq. Madankollu, il-korrelazzjoni bejn IL-10 tal-bżieq, TFG-beta, u IgA tal-bżieq għandha tiġi ttestjata aktar [26]. Barra minn hekk, jekk probijotiċi maqtula bis-sħana għollewx IgA permezz tal-induzzjoni ta' IL-10 u TFG-beta għadu mhux ċar. Test in vitro indika li AP-32 maqtul bis-sħana ippromwova t-tnixxija ta' interferon u IL-12p70 u naqqas il-livelli ta' IL-13 [27]. Għalhekk, f'dan l-istudju kliniku, l-abbiltà tar-razez CP-9, AP-32, u ET-66 probijotiċi u AP-32 u ET-66 maqtula bis-sħana razez biex jinibixxu batterji patoġeniċi fil-kavità orali ġiet validata aktar (Fig. 4). Pastilji probijotiċi vijabbli ppreżentaw kapaċità anti-patoġenika aħjar minn pastelli maqtula bis-sħana permezz ta 'aċidi organiċi li jxerrdu, peptidi antimikrobiċi [28], exopolysaccharides (EPSs) [29] batterjoċini [30] (Fig. 5a u b). Il-komponenti antimikrobiċi funzjonali prodotti minn razez probijotiċi vijabbli għandhom jiġu skoperti permezz ta 'kromatografija likwida ta' prestazzjoni għolja (HPLC) u kromatografija likwida (LC)–spettrometrija tal-massa fil-futur [31]. Huwa rrappurtat li l-probijotiċi maqtula bis-sħana kellhom vantaġġi ewlenin ta 'probijotiċi vijabbli iżda mingħajr ċertu tħassib dwar is-sigurtà ta' razez probijotiċi vijabbli [32]. Madankollu, il-komponenti antimikrobiċi ta 'probijotiċi maqtula bis-sħana għandhom jiġu vverifikati aktar.

Fig. 5 Konferma tal-kapaċità tal-pilloli probijotiċi li jinibixxu t-tkabbir tal-patoġenu orali permezz ta' test in vitro. Il-kapaċità ta 'pilloli probijotiċi vijabbli u maqtula bis-sħana li jinibixxu r-rata ta' sopravivenza ta 'patoġeni orali, inklużi Streptococcus mutans, Porphyromonas gingivalis, Fusobacterium nucleatum, u Aggregatibacter actinomycetemcomitans, ġiet validata. Grupp vojt, medju biss; grupp plaċebo, pilloli (1 g) mingħajr ebda komponenti probijotiċi. Twettqu testijiet triplikati. Id-dejta ġiet ippreżentata bħala d-devjazzjoni standard medja (SD). Intuża t-test b'żewġ denbu biex janalizza d-differenzi statistiċi. Is-sinifikati statistiċi ġew immarkati b'*P<0.05, **P<0.01, ***P<0.001

Konklużjoni

Pilloli probijotiċi vijabbli mħallta, li jikkonsistu minn L. salivarius subsp. salicinius AP-32, B. animalis subsp. lactic CP-9, u L. paracasei ET-66, u probijotiċi maqtula bis-sħana, inklużi L. salivarius subsp. salicinius AP-32 u L. paracasei ET-66, eżerċitaw il-funzjonijiet ta 'benefiċċju tagħhom billi elevaw il-popolazzjonijiet orali ta' Lactobacillus u Bifdobacterium, naqqsu S. mutans fil-kavità orali, u żiedu l-konċentrazzjoni tal-bżieq IgA f'parteċipanti b'saħħithom. Ir-riżultati tat-test in vitro vvalidaw li probijotiċi vijabbli effettivament jinibixxu patoġeni orali, inklużi S. mutans, P. gingivalis, u F. nucleatum subsp. polimorfiżmu, u A. actinomycetemcomitans. L-immunità tal-mukuża orali-nażali hija d-difiża ta 'quddiem kontra mikro-organiżmi li jinvaduh, u din saret kwistjoni kruċjali. Għalhekk, dan l-istudju se joffri strateġija alternattiva (supplimentazzjoni probijotika) biex tinżamm l-immunità orali u s-saħħa orali.

cistanche suppliment benefiċċji-kif tissaħħaħ is-sistema immuni

Referenzi

1. Takaki H, Ichimiya S, Matsumoto M, Seya T (2018) Rispons immuni tal-mukuża f'tessut limfoid assoċjat mal-imnieħer mal-amministrazzjoni intranżali minn adjuvants. J Innate Immun 10(5–6):515–521

2. Wu RQ, Zhang DF, Tu E, Chen QM, Chen WJ (2014) Is-sistema immuni tal-mukuża fil-kavità orali—orkestra tad-diversità taċ-ċelluli T. Int J Oral Sci 6(3):125–132

3. Man WH, de Steenhuijsen Piters WAA, Bogaert D (2017) Il-mikrobijota tal-passaġġ respiratorju: gatekeeper għas-saħħa respiratorja. Nat Rev Microbiol 15(5):259–270

4. Wald ER, Guerra N, Byers C (1991) Infezzjonijiet tal-apparat respiratorju ta 'fuq fi tfal żgħar: tul ta' u frekwenza ta 'kumplikazzjonijiet. Pedjatrija 87(2):129–133

5. Marcotte H, Lavoie MC (1998) Ekoloġija mikrobjali orali u r-rwol tal-immunoglobulina tal-bżieq A. Microbiol Mol Biol Rev 62 (1): 71-109

6. Weltzin R, Traina-Dorge V, Soike K, Zhang JY, Mack P, Soman G et al. J Infect Dis 174(2):256–261

7. Ruggeri FM, Johansen K, Basile G, Kraehenbuhl JP, Svensson L (1998) Antirotavirus immunoglobulin A jinnewtralizza l-virus in vitro wara transċitosi permezz ta 'ċelluli epiteljali u jipproteġi ġrieden trabi mid-dijarea. J virol 72(4):2708–2714

8. Millieġ N, Solis NV, Swidergall M (2020) Mukuża IgA tipprevjeni d-dysbiosis commensal Candida albicans fil-kavità orali. Front Immunol 11:2448

9. Katz J, Harmon CC, Buckner GP, Richardson GJ, Russell MW, Michalek SM (1993) Risposti protettivi tal-immunoglobulina tal-bżieq A kontra l-infezzjoni ta’ Streptococcus mutans wara immunizzazzjoni intranżali b’antiġen S. mutans I/II flimkien mas-subunità B tat-tossina tal-kolera . Infect Immun 61(5):1964–1971

10. Moutsopoulos NM, Konkel JE (2018) Immunità speċifika għat-tessuti fil-barriera tal-mukuża orali. Xejriet Immunol 39(4):276–287

11. Lin CW, Chen YT, Ho HH, Hsieh PS, Kuo YW, Lin JH, Liu CR, Huang YF, Chen CW, Hsu CH, Lin WY, Yang SF (2021) Lozengines bi razez probijotiċi jtejbu r-rispons immuni orali u s-saħħa . Oral Dis. https://doi.org/10.1111/odi.13854

12. Ericson D, Hamberg K, Bratthall G, Sinkiewicz-Enggren G, Ljunggren L (2013) Rispons salivary IgA għal batterji probijotiċi u streptokokki mutans wara l-użu ta 'chewing gum li fih Lactobacillus reuteri. Pathog Dis 68(3):82–87

13. Defrance T, Vanbervliet B, Briere F, Durand I, Rousset F, Banchereau J (1992) Interleukin 10 u transforming growth factor beta jikkooperaw biex jinduċu ċelluli B umani naive attivati ​​anti-CD40- biex inixxu immunoglobulina A. J Exp Med 175(3):671–682

14. Papone V, Verolo C, Zafaroni L, Batlle A, Capo C, Bueno L et al (2015) Sejbien u prevalenza ta 'patoġeni perjodontali f'popolazzjoni Urugwajana b'perijodontite kronika bl-użu ta' metodoloġija konvenzjonali u metaġenomika. Odontoestomatologia 17(25):23–32

15. Butera A, Gallo S, Maiorani C, Molino D, Chiesa A, Preda C, Scribante A (2021) Alternattiva probijotika għal chlorhexidine fit-terapija perjodontali: evalwazzjoni ta 'parametri kliniċi u mikrobijoloġiċi. Mikro-organiżmi 9(1):69

16. Wang Y, Li X, Ge T, Xiao Y, Liao Y, Cui Y et al (2016) Probijotiċi għall-prevenzjoni u t-trattament ta 'infezzjonijiet tal-apparat respiratorju fit-tfal: reviżjoni sistematika u meta-analiżi ta' provi kkontrollati randomised. Mediċina 95(31):e4509. https://doi.org/10.1097/ MD.0000000000004509

17. Laufer AS, Metlay JP, Gent JF, Fennie KP, Kong Y, Pettigrew MM (2011) Komunitajiet mikrobiċi tal-apparat respiratorju ta 'fuq u otite media fit-tfal. mBio 2(1):e00245-10. https://doi.org/10. 1128/mBio.00245-10

18. Chen YT, Hsieh PS, Ho HH, Hsieh SH, Kuo YW, Yang SF, Lin CW (2020) Attività antibatterika ta 'razez probijotiċi vijabbli u maqtula bis-sħana kontra patoġeni orali. Lett Appl Microbiol 70(4):310–317

19. Bonifait L, Chandad F, Grenier D (2009) Probijotiċi għas-saħħa orali: ħrafa jew realtà? J Can Dent Assoc 75(8):585–90

20. Hsieh PS, An Y, Tsai YC, Chen YC, Chuang CJ, Zeng CT, King AE (2013) Potenzjal ta 'razez probijotiċi biex jimmodulaw ir-risponsi infjammatorji ta' ċelluli epiteljali u immuni in vitro. Microbiol Ġdid 36(2):167–179

21. Elrefaei M, Burke CM, Baker CA, Jones NG, Bousheri S, Bangsberg DR, Cao H (2009) Il-produzzjoni TGF- u IL-10 minn ċelluli T CD8+ speċifiċi għall-HIV hija regolata minn CTLA{ {5}} sinjalazzjoni fuq CD4+ ċelluli T. PloS ONE 4(12):e8194

22. Ranganathan V, Akhila CH (2019) Streptococcus mutans: Sar awtur ewlieni għal manifestazzjonijiet orali? J Microbiol Exp 7(4):207–213

23. Almeida CC, Lorena SLS, Pavan CR, Akasaka HMI, Mesquita MA (2012) Effetti benefiċi ta 'konsum fit-tul ta' taħlita probijotika ta 'Lactobacillus casei Shirota u Bifidobacterium breve Yakult jistgħu jippersistu wara sospensjoni ta' terapija f'pazjenti intolleranti għal-lattożju. Nutr Clin Pract 27(2):247–251

24. Braathen G, Ingildsen V, Twetman S, Ericson D, Jørgensen MR (2017) Il-preżenza ta 'Lactobacillus reuteri fil-bżieq tikkoinċidi ma' IgA bżieq ogħla f'adulti żgħażagħ wara teħid ta 'pastilji probijotiċi. Benef Microbes 8(1):17–22

25. Scharek L, Guth J, Filter M, Schmidt MFG (2007) Impatt tal-batterji probijotiċi Enterococcus faecium NCIMB 10415 (SF68) u Bacillus cereus var. lilek NCIMB 40112 dwar l-iżvilupp ta' IgG fis-serum u IgA fekali tal-majjali nisa u l-qżieqeż tagħhom. Arch Anim Nutr 61(4):223–234

26. Ebrahimpour-Koujan S, Milajerdi A, Larijani B, Esmaillzadeh A (2020) Effetti ta 'probijotiċi fuq ċitokini tal-bżieq u immunoglobulini: reviżjoni sistematika u meta-analiżi fuq provi kliniċi. Sci Rep 10(1):1–11

27. Ou CC, Lin SL, Tsai JJ, Lin MY (2011) Il-batterji tal-aċidu lattiku maqtula bis-sħana jtejbu l-potenzjal immunomodulatorju billi jxekklu r-rispons immuni lejn il-polarizzazzjoni Th1. J Food Sci 76(5):M260–M267. https://doi.org/10.1111/j.1750-3841.2011. 02161.x

28. Nair MS, Amalaradjou MA, Venkitanarayanan K (2017) Proprjetajiet antivirulenza ta 'probijotiċi fil-ġlieda kontra l-patoġenesi mikrobjali. Adv Appl Microbiol 98:1–29

29. Wu MH, Pan TM, Wu YJ, Chang SJ, Chang MS, Hu CY (2010) Attivitajiet ta 'exopolysaccharide minn bifidobacterium probijotiku: Effetti immunomodulatorji (fuq J774A. 1 makrofaġi) u proprjetajiet antimikrobiċi. Int J Food Microbiol 144(1):104–110

30. Barefoot SF, Klaenhammer TR (1983) Sejbien u attività ta' lactacin B, batterjoċina prodotta minn Lactobacillus acidophilus. Appl Environ Microbiol 45(6):1808–1815

31. Kim PI, Sohng JK, Sung C, Joo HS, Kim EM, Yamaguchi T, Kim BG (2010) Karatterizzazzjoni u identifikazzjoni tal-istruttura ta 'peptide antimikrobiku, hominin, prodott minn Staphylococcus hominis MBBL 2–9. Biochem Biophys Res Commun 399(2):133–138

32. Piqué N, Berlanga M, Miñana-Galbis D (2019) Benefiċċji tas-saħħa ta 'probijotiċi maqtula bis-sħana (Tyndallized): ħarsa ġenerali. Int J Mol Sci 20(10):2534