Markers tal-podoċiti urinarji f'Mard tal-Kliewi

għal aktar informazzjoni:ali.ma@wecistanche.com

Lingfeng Zeng, et al

Astratt

Il-podoċiti għandhom rwol importanti fiż-żamma tal-funzjoni tal-kliewi, u huma l-fokus primarju ta 'ħafnakliewimard. Il-korriment tal-podoċiti jirriżulta fit-twaqqigħ ta’ frammenti ċellulari derivati ​​minn podoċiti u miri molekulari speċifiċi għall-podoċiti fl-awrina, li jistgħu jservu bħala bijomarkaturi ta’kliewimard. Podoċiti intatti, jew vijabbli jew mejta, u microvesicles derivati ​​minn podoċiti jistgħu jiġu kkwantifikati fl-awrina b'diversi metodi ta 'ċentrifugazzjoni, viżwalizzazzjoni u kultura. Il-miri tal-proteini speċifiċi għall-podoċiti min-nukleu, iċ-ċitoplasma, id-dijaframma tal-qasma, il-membrana tal-kantina kapillari glomerulari, u ċ-ċitoskeletru, kif ukoll l-RNA messaġġier korrispondenti tagħhom (mRNA), fl-awrina, jistgħu jiġu kkwantifikati permezz ta’ western blotting, ELISA, jew polimerażi kwantitattiva reazzjoni katina. Għalkemm xi wħud minn dawn it-tekniki jistgħu jkunu għaljin jew intensivi fil-ħaddiema fil-preżent, jistgħu jsiru disponibbli b'mod wiesa 'fil-futur minħabba t-titjib fit-teknoloġija u l-awtomazzjoni. L-applikazzjoni ta'urinarjapodoċitemarkaturi għad-dijanjosi u l-monitoraġġ ta’ diversikliewimardġiet esplorata iżda d-dejta ppubblikata f’dan il-qasam mhijiex sistematika biżżejjed u m’għandhiex validazzjoni esterna. Aktar riċerka għandha tiffoka fuq l-istandardizzazzjoni, it-tqabbil u l-awtomizzazzjoni tal-metodi tal-laboratorju, kif ukoll id-definizzjoni tal-valur miżjud tagħhom għal testijiet kliniċi ta’ rutina.

Kliem ewlieni:Podocyte, Biomarker, mRNA, miRNA, Nephrin, Podocin, Podocalyxin, Synaptopodin,Kronikakliewimard

Zokk ta 'Cistanche jista' jikkura mard kroniku tal-kliewi

1. Introduzzjoni

1.1. Epidemjoloġija tal-mard kroniku tal-kliewi

Kronikakliewimard(CKD) hija marda li ma titteħidx importanti u li tiswa ħafna flus [1]. Bid-disponibbiltà ta 'terapija ta' sostituzzjoni renali, in-nefqa tal-kura tas-saħħa użata għat-trattament ta 'CKD (Ckronikukliewimarda)żdiedet sew wara s-sittinijiet [2,3]. Fl-2015, kien hemm aktar minn 2.5 miljun pazjent li kienu qed jirċievu terapija ta' sostituzzjoni tal-kliewi madwar id-dinja, u dan in-numru huwa mbassar li jirdoppja sal-2030 [4]. Mezzi effettivi għad-dijanjosi, it-trattament, u l-monitoraġġ takliewimardhuma ferm meħtieġa.

1.2. Podocyte bħala l-fokus tal-mard tal-kliewi

Il-funzjoni primarja tal-kliewi hija l-eskrezzjoni ta 'skart metaboliku u ilma eċċessiv tal-ġisem [5], li tinkiseb bi tliet proċessi: (1) filtrazzjoni tad-demm li jiċċirkola permezz tal-glomerulus biex jifforma ultrafiltrat fl-ispazju tal-Bowman; (2) assorbiment mill-ġdid selettiv ta 'sustanzi utli permezz tat-tubuli renali; u (3) sekrezzjoni selettiva ta' skart metaboliku ieħor minn kapillari peritubulari sal-fluwidu tubulari [6]

Għalkemm il-kliewi tikkonsisti f'diversi tipi ta' ċelluli li huma rranġati f'arkitettura 3-dimensjonali delikata, il-podocyte għandu rwol ewlieni fiż-żamma tal-funzjoni normali tal-kliewi u huwa l-fokus primarju ta' ħafnakliewimard. Il-podoċiti huma ċelloli differenzjati terminalment speċifiċi ħafna li, flimkien maċ-ċelloli endoteljali u l-membrana tal-kantina kapillari glomerulari (GCBM), jikkostitwixxu l-barriera tal-filtrazzjoni glomerulari [7]. Il-podoċiti għandhom korp taċ-ċelluli voluminuż li huwa separat mill-GCBM minn spazju sub-podoċiti [8]. Il-korp taċ-ċellula jagħti lok għal proċessi primarji twal li jestendu lejn il-GCBM u huma mwaħħla ma 'dan tal-aħħar permezz ta' firxa estensiva ta 'proċessi tas-sieq [8].

Il-podoċiti għandhom diversi funzjonijiet fiżjoloġiċi. Huma jżommu l-morfoloġija tal-linja vaskulari glomerulari, jirregolaw il-filtrazzjoni glomerulari, u jipparteċipaw fir-rispons immunoloġiku u infjammatorju lokali. Barra minn hekk, il-podoċiti huma parzjalment responsabbli għas-sintesi u l-fatturat tal-GCBM [9], kif ukoll il-produzzjoni ta 'fatturi parakrini bħall-fattur tat-tkabbir endoteljali vaskulari (VEGF), li huwa importanti fir-regolamentazzjoni tal-permeabilità u l-proliferazzjoni taċ-ċelloli endoteljali. [10]. Id-disfunzjoni tal-podoċiti għandha rwol ċentrali fil-patoġenesi u l-progressjoni ta 'ħafnakliewimard. Mutazzjonijiet ta 'diversi ġeni relatati mal-podocyte jirriżultaw fikliewimard, li tipikament jippreżentaw klinikament bħala sindromu nefrotiku reżistenti għall-isterojdi u istoloġikament bħala glomerulosclerosis fokali (FGS). Min-naħa l-oħra, disfunzjonijiet tal-podoċiti akkwistati, inkluż tnaqqis fin-numru jew densità tal-podoċiti u fużjoni tal-proċessi tas-sieq tal-podoċiti, iwasslu għal korriment sekondarju endoteljali u GCBM, telf ta 'ċarġ negattiv ta' GCBM, anormalità tal-proteina tal-membrana Hiatal, u finalment proteinurja permezz ta 'diversi mekkaniżmi. 11,12].

Konsegwenza karatteristika ta 'korriment ta' podoċiti hija l-interazzjoni mdgħajfa ma 'GCBM, li akkumulat fis-distakk ta' podoċiti minn GCBM. Peress li l-podoċiti għandhom kapaċità limitata għal riġenerazzjoni u kumpens funzjonali, il-podoċiti li jifdal mhumiex kapaċi jżommu l-funzjonijiet mekkaniċi u ta 'barriera ta' ħlas ta 'GCBM, li jkunu mħassra b'mod irriversibbli, u r-riżultat aħħari huwa proteinurja [13]. Skont is-severità tal-insult, il-ħsara lill-podoċiti tista 'twassal għal telf ta' proċessi tas-sieq, formazzjoni ta 'vakuole u psewdoċisti, dedifferenzjazzjoni, u apoptożi. L-istrutturi ġirien jiġu affettwati sussegwentement, inkluża l-proliferazzjoni ta 'ċelloli epiteljali parietali, tnaqqis ta' GCBM, telf ta 'tuff kapillari glomerulari, u finalment glomerulosclerosis [14].

1.3. Metodu ta 'reviżjoni tal-letteratura

Aħna wettaqna reviżjoni tal-letteratura b'termini ta 'tfittxija inklużi "podocyte", "podocyte-assoċjati molekuli", jew "bijomarkatur", flimkien ma' "kronikakliewimard", "korriment akut fil-kliewi", "glomerulonefrite", "nefropatija dijabetika", jew "dijabetikakliewimard", intużaw biex ifittxu letteratura rilevanti minn Medline, Embase u Cochrane Library. Referenzi ta' pubblikazzjonijiet rilevanti ġew eżaminati għal karti potenzjali addizzjonali. Studji eliġibbli inkludew studji fuq il-bniedem u fuq l-annimali ppubblikati qabel Lulju 2020. Pubblikazzjonijiet b'suġġetti irrilevanti, bħall-bijoloġija taċ-ċelluli podoċiti, il-fiżjoloġija tal-membrana, u l-manipulazzjoni molekulari tal-podoċiti, ġew esklużi.

1.4. Miri speċifiċi għall-podoċiti bħala bijomarkaturi

Il-korriment tal-podoċiti jwassal għat-twaqqigħ ta’ diversi molekuli derivati ​​mill-podoċiti fl-ispazju urinarju u jista’ jservi bħala bijomarkatur ta’kliewimard(Fig. 1). Il-korpi taċ-ċelluli podoċiti jistgħu jinqasmu fi tliet kompartimenti anatomikament u funzjonalment distinti: il-parti bażi, il-parti ta 'fuq, u l-parti tad-dijaframma li tiżżerżaq (SD) [15]. Proteini speċifiċi tal-membrana taċ-ċelluli huma preżenti f'kull parti, u l-interazzjoni tagħhom mas-sistema taċ-ċitoskeletru ċitoplasmika hija responsabbli għall-istabbiltà tal-istruttura u l-funzjoni tal-podoċiti [16]. Il-molekuli ewlenin derivati ​​mill-podoċiti li huma miri potenzjali għall-iżvilupp tal-bijomarkaturi huma miġbura fil-qosor fit-Tabella 1.

Fig. 1. Korriment tal-podoċiti u markaturi potenzjali derivati ​​minn podoċiti fl-awrina. Ħsara lill-podoċiti tirriżulta fi 3 proċessi patoloġiċi inter-relatati: bidla morfoloġika, apoptożi, u distakk. Il-podoċiti jistgħu jibqgħu vijabbli iżda jimmanifestaw bħala bidliet morfoloġiċi li għandhom konsegwenzi downstream funzjonali, bħal proteinurja u fibrożi tubulointerstizjali. L-apoptożi tal-podoċiti tista' tiżviluppa bħala riżultat ta' bidliet morfoloġiċi kumulati jew direttament minn insulti speċifiċi. Telf ta' podoċiti fil-glomeruli (jiġifieri podoċitopenja) iwassal għal bidliet arkitettoniċi fil-linja kapillari glomerulari u jirriżulta fi glomerulosclerosis. Il-podoċiti, jew dawk apoptotiċi jew vijabbli minħabba telf ta' 3 1 integrina, jistgħu jinqalgħu fl-ispazju urinarju, jiġu identifikati fl-awrina, u jservu bħala markaturi ta'kliewimard. Vesicles, mikropartiċelli, jew molekuli speċifiċi għall-podoċiti derivati ​​minn podoċiti feruti jew apoptotiċi jistgħu wkoll jiġu skoperti fl-awrina u jservu bħala bijomarkaturi. (GCBM, membrana kapillari tal-kantina glomerulari; AgII, angiotensin II; TGF- , trasformazzjoni tal-fattur tat-tkabbir-beta; ROS, speċi ta 'ossiġnu reattiv).

1.5. Miri nukleari u ċitoplasmiċi

Il-ġene tas-soppressor tat-tumur ta' Wilms-1 (WT1) huwa fattur ta' traskrizzjoni bħal finger taż-żingu fin-nukleu tal-podoċiti u huwa probabbilment l-iktar markatur speċifiku għall-podoċiti użat b'mod komuni għal studju istoloġiku [17]. Il-ġene WT1 jikkonsisti f'10 esoni, li minnhom l-esoni 7 sa 10 jikkodifikaw l-4 swaba taż-żingu tad-dominju li jgħaqqad id-DNA. WT1 huwa espress speċifikament f'podoċiti u probabbilment jirregola l-espressjoni ta 'nephrin [18]. Mutazzjonijiet eterozigoti fl-eżoni 8 u 9 tal-ġene WT1 iwasslu għas-sindromu Denys-Drash, li jippreżenta sindromu nefrotiku, pseudohermaphroditism maskili, u tumur Wilms [19].

Proteini nukleari u ċitoplasmiċi oħra tal-podoċiti huma studjati inqas tajjeb bħala bijomarkaturi. Il-kinase li fiha dominju aarF-4 (ADCK4) hija speċifikament preżenti fil-mitokondrija fi ħdan il-proċessi tas-saqajn tal-podoċiti tal-firien [20]. ADCK4 huwa responsabbli għall-istabbilizzazzjoni tal-kumpless CoQ u huwa meħtieġ għall-funzjoni normali tal-omeostażi tal-podocyte [20]. L-ablazzjoni ta' ADCK4 speċifika għall-podoċiti fil-ġrieden tirriżulta f'tħassir tal-proċess tas-sieq, diżorganizzazzjoni tal-qasma tal-filtrazzjoni, mitokondrija mkabbra u mhux funzjonali, u CoQ10 mnaqqsa [21], u t-trattament restawrat CoQ10, funzjoni mitokondrijali, morfoloġija mtejba tal-podoċiti, u tħassir tal-proċess tas-sieq [21] ,22].

1.6. Kumpless tal-proteini tad-dijaframma tal-qasma

Il-komponenti tal-proteini tad-dijaframma tal-qasma tal-podoċite ġew studjati b’mod estensiv bħala bijomarkaturi ta’kliewimard. Il-proteini ewlenin f'dan il-grupp jinkludu nephrin, podocin, CD2-proteina assoċjata (CD2AP), u podoplanin [23]. Nephrin hija proteina transmembrana b'dominji extraċellulari li jiffurmaw il-qalba tad-dijaframma tal-qasma. Jaġixxi kemm bħala barriera fiżika tal-għarbiel kif ukoll bħala scaffold tas-sinjalar [24]. Mutazzjonijiet tal-ġene nephrin kienu l-ewwel kawża rrappurtata tas-sindromu nefrotiku konġenitali fil-bnedmin [25]. Podocin u CD2AP huma responsabbli biex jgħaqqdu nephrin maċ-ċitoskeletru ta 'l-actin taħt il-membrana taċ-ċellula. Podocin hija proteina bħal hairpin tal-familja stomatin u hija esklussivament espressa f'podocytes [26]. Huwa kkodifikat mill-ġene NPHS2 li jikkonsisti fi tmien exons u jinsab fuq ir-reġjun tal-kromożoma 1q25-q31 [27]. Mutazzjonijiet tal-ġene NPHS2 jikkawżaw sindromu nefrotiku awtosomali reċessiv għal sterojdi reżistenti kemm f'pazjenti pedjatriċi kif ukoll f'pazjenti adulti [27,28]. CD2AP hija molekula ta 'armar li tinteraġixxi direttament ma' actin filamentuża u proteini oħra tal-membrana taċ-ċelluli u hija implikata fir-rimodelazzjoni dinamika ta 'l-actin u t-traffikar tal-membrana [29]. Podoplanin huwa glikoproteina transmembrana żgħira b'numru kbir ta 'ktajjen O-glycoside. Telf selettiv ta 'podoplanin fil-podoċiti jwassal għal proteinurja, segwit minn alterazzjonijiet fil-morfoloġija tal-podoċiti f'mudell tal-firien ta' proteinurja spontanja [30].

Cistance hija tajba għall-kliewi

1.7. Miri marbuta mal-GCBM

Il-komponenti ewlenin tal-proteini tar-reġjun bażali tal-podoċiti huma l-{0}} integrin u -dystroglycan ( -DG). Dawn il-proteini jankraw il-podocytes mal-GCBM u għandhom rwol importanti fiż-żamma tal-pożizzjoni korretta tal-podocyte kif ukoll l-integrità tal-membrana tal-filtrazzjoni [31,32]. L-3 1 integrina hija proteina transmembrana bid-dominju extraċellulari marbut mad-dominju G-like laminin G (LG) tal-laminin 521 fil-GCBM, filwaqt li r-reġjun ċitoplasmiku tiegħu huwa konness maċ-ċitoskeletru tal-podoċiti permezz tal--actinin{{ 9}}. Il-proteina glikosilata -DG hija konnessa maċ-ċitoskeletru permezz ta' utrofina, u mal-podocyte u l-GCBM permezz tal-interazzjoni tagħha mal-laminin 521.

1.8. Miri fil-membrana ta 'fuq

Podocalyxin hija l-proteina transmembrana ewlenija fuq in-naħa apikali tal-podocyte. Hija proteina ta 'aċidu sialiku ċċarġjata b'mod negattiv li tikkontribwixxi għall-barriera ta' ċarġ tal-filtrazzjoni glomerulari [33]. Podocalyxin għandu tliet funzjonijiet: (1) biex jipprevjeni proteini ċċarġjati b'mod negattiv milli jnixxu fl-awrina; (2) biex tinżamm is-separazzjoni ta 'podocytes maġenb; u (3) biex tipprevjeni l-adeżjoni bejn iċ-ċelloli epiteljali u l-linji kapillari [34]. Podocalyxin huwa konness maċ-ċitoskeletru ta 'l-actin minn ezrin u fattur regolatorju 2 ta' l-iskambjatur tas-sodju-proton (NHERF2).

1.9. Miri relatati mal-actin

Għadd ta' proteini speċifiċi għall-podoċiti huma marbuta maċ-ċitoskeletru ta' l-actin u jżommu l-istruttura 3-dimensjonali tal-podoċite. Il-miri l-aħjar studjati ta' dan il-grupp huma synaptopodin u -actinin-4. It-tnejn li huma jorbtu mal-iskeletru tal-actin billi jinteraġixxu mal-guanylate kinase assoċjat mal-membrana b'orjentazzjoni invertita-1 (MAGI-1) [35]. Synaptopodin hija proteina lineari b'ħafna proline kodifikata mill-ġene SYNPO [36] u hija espressa f'podoċiti li jiddifferenzjaw meta jiżviluppaw il-proċessi tas-sieq. Bħala riżultat, synaptopodin huwa meqjus bħala markatur ta 'podocytes maturi [37].

2. Metodi ta' studju

2.1. Markers tal-podoċiti intra-glomerulari

Għalkemm il-fokus ta 'din ir-reviżjoni huwa fuqurinarjapodoċitemarkaturi, huwa loġiku li tiġi diskussa fil-qosor l-iskoperta ta’ dawn il-markaturi fit-tessut tal-kliewi. It-tnaqqis tal-podoċiti jista 'jkun assolut (telf ta' podoċiti) jew relattiv (numru mnaqqas ta 'podoċiti għal kull volum ta' glomerulus) [38]. Il-metodu standard tad-deheb tal-kwantifikazzjoni tal-podoċiti fil-kliewi huwa metodoloġiji stereoloġiċi (mikroskopji tad-dawl jew elettroni, mikroskopji tal-iskannjar tal-laser konfokali, ultrasound, tomografija kompjuterizzata, jew immaġini ta 'reżonanza manjetika) [39]. Madankollu, kollha kemm huma jieħdu ħafna ħin u ħafna xogħol. Riċentement, Venkatareddy et al. evalwat il-metodu għall-istima tad-densità tal-podoċiti b'sezzjonijiet iffissati b'formalina waħda inkorporati fil-paraffin, li fihom in-nuklei tal-podoċiti ġew viżwalizzati permezz ta 'immunofluworexxenza indiretta b'antikorpi kontra WT1 jew enhancer bħal transduċin tal-qasma [40]. Studju sussegwenti wera li dan il-metodu pprovda enumerazzjoni preċiża tal-podoċiti f'mudell ta 'ġrieden transġeniku ta' tnaqqis selettiv tal-podoċiti, li jikkonferma li dan l-approċċ jipprovdi għodda kwantitattiva effiċjenti għall-analiżi tat-tnaqqis tal-podoċiti fil-glomeruli kollha [41]. Madankollu, dan il-metodu għadu jeħtieġ bijopsija tal-kliewi u għalhekk mhuwiex adattat għal monitoraġġ serjali.

2.2. Kwantifikazzjoni u kultura tal-podoċiti urinarji

Peress li l-podoċiti huma mwaħħla mal-pożizzjoni fiżjoloġika tagħhom biss mill-proċessi tas-sieq, huma vulnerabbli li jintilfu bħala ċelloli vijabbli fl-awrina [42]. Fil-fatt, podocytes intatti jistgħu jinstabu fl-awrina ta 'nies b'saħħithom u pazjentikliewimard[43], u t-telf tal-awrina huwa probabbilment mekkaniżmu ewlieni tat-tnaqqis tal-podoċiti matul il-progressjoni tas-CKD(Ckronikukliewimarda)[42]. Il-metodu tradizzjonali għall-identifikazzjoni ta 'podocytes fl-awrina jinvolvi tekniki ta' cytospin u studju ta 'immunofluworexxenza b'antikorpi speċifiċi anti-podocalyxin [44], li għalihom l-awtomazzjoni hija parzjalment fattibbli. Madankollu, it-teknika għandha sensittività u speċifiċità limitata minħabba debris ċellulari li jikkontaminaw fis-sediment urinarju.

Alternattivament, il-podoċiti jistgħu jiġu identifikati bl-iskoperta ta 'peptidi tryptic speċifiċi għal podoċiti b'kromatografija likwida flimkien ma' spettrometrija tal-massa tandem (LC-MS/MS). Għalkemm l-ispiża tat-tagħmir ta 'din it-teknika hija għolja, għandha l-vantaġġi li tkun indipendenti mill-operatur u riproduċibbli ħafna [45], u probabbilment se jkollha applikabilità dejjem tikber fil-prattika tal-laboratorju kliniku.

Studji preċedenti wrew li bit-teknika tal-immunofluworexxenza cytospin, nies b'saħħithom ineħħu inqas minn 0.5 podocytes/mg kreatinina, filwaqt li pazjenti b'mard glomerulari attiv jeħilsu sa 400 podocytes/mg kreatinina [43]. Il-maġġoranza taurinarjapodoċitihuma vijabbli meta ttestjati bl-esklużjoni tal-jodur tal-propidju u t-tbajja’ ta’ TUNEL [43]. Fit-teorija, il-kultura ta 'podoċiti vijabbli ex vivo għalhekk ittejjeb l-ispeċifiċità tal-identifikazzjoni tal-podoċiti billi tneħħi ċelluli mejta u mhux speċifiċi. Madankollu, il-podoċiti normalment ma jipproliferawx in vivo, u huma meħtieġa kundizzjonijiet sperimentali speċjali għall-kultura tagħhom ex vivo [46]. Rapporti preċedenti wrew li l-podoċiti setgħu l-ewwel jitkabbru taħt kundizzjonijiet permissivi għat-tkabbir, fejn il-podoċiti immortalizzati jirreplikaw [46]. Il-midja tal-kultura taċ-ċelluli għal dan il-għan ġeneralment tikkonsisti f'Roswell Park Memorial Institute (RPMI) 1640 jew il-mezz Eagle's modifikat ta' Dulbecco, b'10 fil-mija serum bovin fetali supplimentat b'20–100 U/ml ta' interferon-gamma tal-ġurdien (INF- ), u l- Dixxijiet tal-kultura huma ġeneralment miksija b'kollaġen tat-tip I biex jippromwovu l-proliferazzjoni tal-podoċiti [46]. Dan il-metodu għandu valur kbir fl-istudju translazzjonali u l-identifikazzjoni tal-mira terapewtika iżda huwa kkumplikat wisq għall-użu kliniku ta 'rutina.

Cistanche jista 'jtejjeb il-funzjoni tal-kliewi

2.3. Frammenti derivati ​​minn podoċiti urinarji

Vesicles extraċellulari (EVs) huma korpi membranużi sferiċi rilaxxati minn diversi tipi ta 'ċelluli [47]. Fis-sistema urinarja, EVs li fihom membrana apikali u fluwidu intraċellulari jitferrgħu mis-segmenti kollha tan-nephron, inklużi podoċiti, ċelluli epiteljali tubulari tal-kliewi, u ċelluli uroepiteljali fl-awrina. EVs urinarji fihom markaturi ta 'proteini ta' disfunzjoni u ħsara strutturali tal-kliewi. Studji reċenti jissuġġerixxu wkoll li l-EVs jistgħu jkunu rilevanti għall-komunikazzjoni interċellulari [48]. Barra minn hekk, studji preċedenti wrew ukoll li frammenti tal-membrani taċ-ċelluli apikali jitferrgħu minn podoċiti midruba fl-awrina [49], u jistgħu jiġu identifikati bħala strutturi granulari pożittivi għall-podocalyxin (PPGS) permezz ta 'mikroskopija elettronika [49]. F'mudelli ta 'ġrieden dijabetiċi, eżosomi urinarji minn podoċiti jistgħu jiġu iżolati permezz ta' ċentrifugazzjoni serjali, u mikropartiċelli jistgħu jiġu kkwantifikati permezz ta 'ċitometrija tal-fluss bl-użu ta' antikorp annexin V (li jiskopri l-mikropartiċelli kollha), segwit minn antikorp għal podocalyxin jew podoplanin (li jidentifikaw speċifikament mikropartiċelli derivati ​​minn podoċiti) [50,51]. L-analiżi addizzjonali tat-tixrid tad-dawl tista 'tintuża biex tiddetermina aktar id-daqs tal-mikropartiċelli [52]. B'dawn it-tekniki sofistikati, intwera li l-mikropartiċelli derivati ​​mill-podocyte jiżdiedu fil-ġrieden mal-espożizzjoni għal glucose għoli [51], kif ukoll fil-ġrieden dijabetiċi qabel il-bidu tal-albuminurja [52]. Fl-ewwel każ, l-anormalità ġiet imrażżna minn inibitur Rho-kinase, li jindika li r-riorganizzazzjoni taċ-ċitoskeletri hija l-iskatlu ewlieni tar-rilaxx tal-mikropartikuli [51]. Madankollu, l-applikazzjoni ta 'dawn it-tekniki għall-bniedemkliewimardma ġiex esplorat.

Minflok ma jitkejjel in-numru u d-daqs ta 'EVs u mikropartiċelli derivati ​​minn podoċiti fl-awrina, dan l-aħħar hemm interess dejjem jikber fil-kejl ta' molekuli speċifiċi għal podoċiti f'eżosomi urinarji. Pereżempju, fatturi ta 'transduction tas-sinjal derivati ​​minn podoċiti (PDSTFs) f'EVs urinarji ġew proposti bħala kandidat potenzjali għall-valutazzjoni ta' korrimenti podoċiti [52]. Madankollu, l-applikazzjonijiet kliniċi tagħhom għadhom taħt żvilupp.

2.4. Miri tal-proteini speċifiċi għall-podoċiti urinarji

Il-livelli urinarji ta’ diversi miri ta’ proteini speċifiċi għall-podoċiti jitkejlu faċilment u r-rwol tagħhom bħala bijomarkaturi ta’kliewimardġie studjat. Il-livell tal-podocalyxin urinarju jista’ jitkejjel permezz ta’ immunofluworexxenza indiretta, ELISA, jew ċitometrija tal-fluss [53], u ġie propost bħala markatur għalurinarjapodoċitegħadd. Madankollu, studju preċedenti wera li l-podocalyxin urinarju oriġina l-aktar mill-membrana apikali ta 'podoċiti feruti aktar milli dawk intatti mqatta' fl-awrina, u l-livell tiegħu jiżdied f'korriment bikri tal-kliewi [49]. Podocalyxin u nephrin, mira oħra ta' proteina speċifika għall-podoċiti importanti fl-awrina, mhumiex skoperti fl-awrina ta 'nies b'saħħithom permezz ta' Western blotting tradizzjonali [54] iżda huma skoperti minn ELISA konvenzjonali f'pazjenti bi pre-eclampsia [55]. Barra minn hekk, il-livell ta 'nephrin urinarju jikkorrelata mas-severità tal-proteinurja [56] u l-funzjoni tal-kliewi [57]. Il-livell ta' nephrin fil-plażma jista' wkoll jitkejjel [57], iżda r-rilevanza bijoloġika jew klinika tagħha ma ġietx determinata. Il-problema ewlenija ta 'l-użu tal-livelli urinarji ta' miri tal-proteini speċifiċi għall-podoċiti bħala bijomarkatur kliniku hija l-konċentrazzjoni baxxa (ġeneralment fil-medda ta 'ng/ml) u l-effett ta' konfużjoni tad-dilwizzjoni tal-konċentrazzjoni tal-awrina.

2.5. mRNAs speċifiċi għall-podoċiti urinarji

Kejl ta'urinarjapodoċite-livell ta 'mRNA speċifiku ġie propost bħala metodu alternattiv għad-determinazzjoni tal-għadd tal-podoċiti urinarji. L-ammont ta 'mRNA speċifiku għall-podocyte fl-awrina normalment mhuwiex biżżejjed għall-istudju tradizzjonali tat-tramuntana iżda jitkejjel faċilment permezz ta' reazzjoni tal-katina tal-polimerażi kwantitattiva f'ħin reali (RT-QPCR). Żewġ studji preċedenti wrew li l-livelli tal-mRNA tan-nephrin urinarju kellhom korrelazzjoni mill-qrib mal-għadd tal-podoċiti urinarji [56,58]. F'mudell tal-ġurdien ta 'mard tal-membrana tal-kantina anti-glomerulari b'bijopsija serjali tal-kliewi,urinarjapodoċite-livelli ta 'mRNA speċifiċi kkorrelati mar-rata ta' telf ta 'podoċiti glomerulari [52].

Studji reċenti, madankollu, bidlu l-enfasi fuq indiċijiet mRNA urinarji derivati ​​bħala markaturi surrogati għall-istress podoċiti jew korriment relattiv ta 'podoċiti. F'mudell tal-firien, il-marda glomerulari progressiva kienet assoċjata ma 'nephrin imnaqqas meta mqabbla mal-livelli tal-mRNA ta' podocin, u l-proporzjon tal-mRNA ta 'podocin-to-nephrin fl-awrina kkorrelata mas-severità tal-progressjoni istoloġika [59]. Fi studju sussegwenti, il-pressjoni arterjali medja ta’ nies b’saħħithom intweriet li tikkorrelata mal-proporzjon tal-mRNA tal-podoċin tal-awrina mal-proporzjon tal-krejatinina (markatur ta’ distakk tal-podoċiti), proporzjon tal-mRNA ta’ podoċin għal nephrin (markatur tal-istress tal-podoċiti), u podoċin tal-awrina. -to-aquaporin-2 mRNA ratio (markatur ta' korriment relattiv ta' podoċiti versus korriment tubulari) [60]. Il-ferita glomerulari hija speċifikament assoċjata ma' żieda fil-proporzjonijiet tal-mRNA ta' podocin u aquaporin-2 fl-awrina u nephrin-to-aquaporin-2 [61].

2.6. Markers tal-miRNA tal-awrina speċifiċi għall-podoċiti

Mikro-RNAs (miRNAs) huma RNAs qosra li ma jikkodifikawx li jirregolaw ħafna mogħdijiet bijoloġiċi billi jimmiraw mRNAs speċifiċi [62]. Simili għall-mRNA, il-miRNA urinarju huwa kkwantifikat faċilment minn RT-qPCR [63]. Mill-perspettiva tal-iżvilupp tal-bijomarkatur, il-miRNA għandu l-vantaġġ li jkun reżistenti għad-degradazzjoni, li jiffaċilita l-użu kliniku tiegħu kif ukoll l-istudju ta 'kampjuni tal-arkivji [63]. Ġew osservati għadd ta’ bidliet speċifiċi fil-miRNAkliewimard[9]. Per eżempju, telf speċifiku għall-podoċiti ta 'miRNAs funzjonali, inklużi miR-23b, miR-24, u miR-26a, instab li jirriżulta fi ħsara glomerulari u tubulari rapida [64]. Speċifikament, miR-27b jirregola s-sopravivenza tal-podoċiti billi jimmira r-riċettur tal-adenosine 2B [65]. Bl-istess mod, il-livelli ta' miR-21 fl-awrina, miR-124, u miR-192 kienu rrappurtati li jikkorrelataw mas-severità ta' disfunzjoni tal-kliewi (albuminurja u GFR stmat) uurinarjapodoċitemarkaturi (nephrin, synaptopodin, u podocalyxin) f'pazjenti dijabetiċi [66]. Studji reċenti identifikaw aktar mogħdijiet speċifiċi downstream għal diversi miRNAs li jistgħu jkunu rilevanti għall-patoġenesi jew il-progressjoni ta'kliewimard. Notevolment, miR-193a jrażżan l-espressjoni ta' WT- 1, li taffettwa d-differenzjazzjoni tal-podoċiti [67] u jista' jkollha rwol fil-patoġenesi tal-marda glomerulari [68]. Min-naħa l-oħra, miR-21 jinibixxi l-espressjoni ta' inibitur tat-tessuti ta' metalloproteinase 3 (TIMP3) [69,70], miR-26a jinibixxi l-fattur tat-tkabbir tat-trasformazzjoni beta-1 (TGF{{{ 11}}) espressjoni [71,72], miR-23b jimmira l-proteina SH3 li tgħaqqad id-dominju tal-proteina 2 ta' Ras GTPase (G3BP2) [73], miR-29c timmira l-omologu 1 ta' Sprouty (Spry1) ) [74]; li kollha huma involuti fil-progressjoni tan-nefropatija dijabetika.

Cistanche għat-titjib tal-funzjoni tal-kliewi

Madankollu, podocyte jikkontribwixxi għal proporzjon żgħir biss ta 'miRNA urinarju. Kwalunkwe alterazzjoni speċifika tal-miRNA osservata fil-podoċiti tista 'ma tkunx faċilment dixxernibbli fl-awrina, filwaqt li kwalunkwe alterazzjoni fil-livelli tal-miRNA tal-awrina tista' tirrifletti l-bidla patoloġika f'tipi oħra ta 'ċelluli renali [75,76]. Pereżempju, għalkemm il-livelli urinarji ta' miR-155, miR-663, u miR-1915 huma differenti b'mod sinifikanti bejn pazjenti b'FGS jew b'nefropatija tal-bidla minima (MCN) u kontrolli b'saħħithom [77], huwa ma ġiex muri li miR-155, miR-663, jew miR-1915 speċifikament joriġinaw minn podoċiti. Korrelazzjonijiet sinifikanti bejn ħafna livelli ta' miRNA u markaturi ta' ħsara tubulari, inklużi livelli urinarji ta' N-acetyl- -D-glucosaminidase (NAG) u molekula ta' ħsara fil-kliewi-1 (KIM-1) [66], ġew irrappurtati wkoll. Fi kliem ieħor, huwa diffiċli li tiġi kkonfermata l-ispeċifiċità tagħhom bħala markaturi tal-ħsara tal-podoċiti. L-eċċezzjoni notevoli għal din ir-regola hija miR-26a. Studju reċenti wera li l-livelli ta' miR-26a eżosomali fl-awrina kienu ogħla b'mod sinifikanti fin-nefrite tal-lupus milli f'kontroll b'saħħtu, miR-26a kien l-aktar miRNA espress b'mod abbundanti fil-glomerulus tal-ġurdien normali C57BL/6, u miR-26a kien responsabbli għar-regolazzjoni tad-divrenzjar tal-podoċiti u l-integrità ċitoskeletali [78]. Madankollu, ir-rwol ta' miR-26a urinarja bħala markatur speċifiku għall-podoċiti jeħtieġ li jiġi vvalidat.

2.7. Markers tal-podoċiti li jiċċirkolaw

Ħafna mill-markaturi tal-podoċiti imsemmija hawn fuq, notevolment miri tal-proteini speċifiċi għall-podoċiti u mRNAs, jistgħu jitkejlu fiċ-ċirkolazzjoni sistemika [56,79,80], u l-livelli fil-plażma tagħhom bħala bijomarkatur ta'kliewimardġew esplorati [55,81-84]. Madankollu, diskussjoni sħiħa dwar dan is-suġġett hija lil hinn mill-ambitu ta 'din ir-reviżjoni. Il-vantaġġi u l-iżvantaġġi ewlenin tal-metodoloġiji msemmija hawn fuq huma miġbura fil-qosor fit-Tabella 2.

3. Markers tal-podoċiti urinarji f'mard speċifiku tal-kliewi

3.1. Mard dijabetiku tal-kliewi

Dijabetiċikliewimard(DKD) hija l-aktar kawża komuni ta 'CKD(Ckronikukliewimarda)madwar id-dinja, u hemm minjiera ta’ letteratura dwar l-użu ta’ diversiurinarjapodoċitemarkaturi għad-dijanjosi u l-monitoraġġ tad-DKD. Per eżempju, Jim et al [14] irrappurtaw li l-livelli ta 'nephrin urinarju kienu skoperti fil-pazjenti DKD kollha bl-albuminurja, iżda 54 fil-mija biss f'dawk mingħajr albuminurja. Livelli ta 'nephrin urinarju korrelatati mal-livell ta' albuminurja, u inversament mal-funzjoni tal-kliewi [14]. Ma et al irrappurtaw li l-livell ta' -4 (Angptl4) li jixbaħ lill-awrina żdied f'DKD [85]. Il-livell ta' podocalyxin fl-awrina żdied f'pazjenti dijabetiċi qabel il-bidu tal-mikroalbuminurja u x'aktarx kien aktar sensittiv mill-mikroalbuminurja għall-iskoperta bikrija ta' DKD [86]. F'DKD stabbilit, il-livell ta' podocalyxin ta' l-awrina kkorrelata b'mod pożittiv mal-livell ta' HbA1c u l-proporzjon ta' albumina għal kreatinina [87,88]. Meħuda flimkien, ir-riżultati disponibbli jindikaw li l-livelli urinarji ta 'diversi miri speċifiċi għall-podocyte huma indikaturi bikrija ta' DKD, u l-livell ta 'podocalyxin urinarju huwa l-aktar markatur promettenti f'dan ir-rigward [54].

Ġew esplorati wkoll il-livelli tal-mira speċifika għall-podoċiti f'komponenti individwali tal-awrina.Urinarjupodoċiteil-livelli tal-mikropartiċelli, kif determinati miċ-ċitometrija tal-fluss, kienu ogħla fid-dijabete tat-tip 1 milli f'kontrolli b'saħħithom, u l-livell żdied aktar bil-morsa ipergliċemika [89]. Livelli eżosomali tal-awrina WT-1 korrelatati mas-severità ta' proteinurja, funzjoni tal-kliewi, ħsara glomerulari, u r-rata ta' tnaqqis fil-funzjoni renali f'pazjenti dijabetiċi [58,90]. Fi studju ieħor, il-livelli ta' glycogen synthase kinase (GSK)3 fiċ-ċelluli exfoliated fl-awrina kienu aktar preċiżi mill-albuminurja f'pazjenti dijabetiċi li jiddiskriminaw bi jew mingħajr indeboliment renali progressiv [91]. Madankollu, il-metodoloġija ta' dan l-assaġġ hija diffiċli u tista' ma tkunx applikabbli għall-prattika klinika ta' rutina.

Fir-rigward tal-markaturi tal-mRNA speċifiċi għall-podoċiti fl-awrina, studju preċedenti wera li l-livelli tal-mRNA fl-awrina ta’ nephrin, podocin, synaptopodin, WT-1, u -actin-4 kienu ogħla f’pazjenti b’DKD milli fil-kontrolli normali [92]. Kien hemm differenza sinifikanti fil-livelli tal-mRNA tal-awrina ta' nephrin, podocin, -actinin-4, u CD2-proteini assoċjati f'pazjenti dijabetiċi b'diversi severità ta' albuminurja [93]. Livelli ta' mRNA fl-awrina ta' nephrin, podocin, synaptopodin, WT-1, u -actin-4 kienu wkoll korrelati ma'urinarjapodoċitegħadd, livell ta 'nephrin urinarju, albuminurja, u s-severità ta' indeboliment renali [93]. Aktar reċentement, il-livelli tal-mRNA speċifiċi għall-podoċiti fl-awrina nstabu li jippreċedu l-bidu tal-mikroalbuminurja f'pazjenti b'dijabete tat-tip 2 [94], u l-proporzjon tal-mRNA tal-podoċin tal-awrina għall-kreatinina, markatur ta 'distakk tal-podoċiti, korrelata b'mod sinifikanti mar-rata sussegwenti ta'. tnaqqis fil-funzjoni tal-kliewi [94]. Barra minn hekk, il-livell tal-mRNA tas-synaptopodin fl-awrina kien aktar baxx wara 12-il ġimgħa ta’ terapija kombinata ta’ inibitur tal-enzima li jikkonvertu angiotensin (ACE) u imblokkatur tar-riċettur tal-angiotensin (ARB) meta mqabbel ma’ monoterapija ta’ inibitur ACE [95]. Meħuda flimkien, l-evidenza disponibbli tissuġġerixxi li l-kejl tal-livelli tal-mRNA speċifiċi għall-podoċiti fl-awrina jista 'jkun ta' valur għall-istratifikazzjoni tar-riskju u l-monitoraġġ tar-rispons terapewtiku fid-DKD.

3.2. Bidla minima fin-nefropatija u glomerulosklerożi fokali

MCN u FGS huma spiss meqjusa bħala mard podocyte, u r-rwol ta 'urinarjapodoċitemiri ġie ttestjat. Zhou et al. [96] irrappurtaw li l-livell tal-WT-1 eżosomali urinarju, kif imkejjel bit-teknika ta 'immunoblotting, kien ogħla b'mod sinifikanti f'pazjenti FGS milli f'dawk b'sindromu nefrotiku sensittiv għall-isterojdi (SSNS) jew voluntiera b'saħħithom. Il-livelli ta' WT-1 eżosomali fl-awrina naqsu b'mod sinifikanti wara trattament ta' kortikosterojdi u remissjoni ta' FGS jew SSNS [96]. Fi studju ieħor, il-livell ta 'nephrin urinarju, kif imkejjel b'assaġġ ELISA konvenzjonali, kien ogħla b'mod sinifikanti f'adulti b'FGS milli f'kawżi oħra ta' sindromu nefrotiku [97].

Livelli urinarji ta 'mRNA speċifiċi għall-podoċiti ġew studjati wkoll. Studju bikri wera li l-livelli tal-mRNA ta' nephrin u podocin fl-awrina ma kinux differenti b'mod sinifikanti bejn pazjenti b'MCN u voluntiera b'saħħithom, u l-livelli tagħhom kienu sinifikament aktar baxxi minn pazjenti DKD [98]. Studju sussegwenti wera li l-livelli ta 'l-awrina ta' nephrin u podocin mRNA kienu aktar baxxi f'pazjenti b'MCN milli f'FGS jew kontrolli b'saħħithom, u l-kobor tat-tnaqqis kien jikkorrelata mal-grad ta 'proteinurja [99]. F'dan l-istudju, il-livelli tal-mRNA tas-synaptopodin urinarju nstabu li jikkorrelataw mar-rata sussegwenti ta 'tnaqqis fil-funzjoni renali f'pazjenti FGS [99], li jissuġġerixxi li bidla kwalitattiva fil-podoċiti FGS tista' tiġi identifikata fl-awrina.

3.3. Nefropatija membranuża

Għalkemm il-bidla patoloġika prinċipali tan-nefropatija membranuża (MGN) hija d-depożizzjoni ta’ kumpless immuni fl-ispazju subepiteljali, li tirriżulta fl-alterazzjoni tal-barriera tal-filtrazzjoni glomerulari, studji dwarurinarjapodoċitemarkaturi fl-MGN huma skarsi. Il-livelli tal-mRNA tas-sediment urinarju ta 'nephrin, podocin, u synaptopodin kienu elevati b'mod sinifikanti fl-MGN, iżda l-livelli ddifferenzjaw MGN b'mod affidabbli minn kawżi oħra ta' sindromu nefrotiku [98]. Aktar reċentement, Lu et al [100] irrappurtaw li n-numru ta 'urinarjapodoċite-mikropartiċelli derivati ​​naqsu fl-istess ħin mat-titjib fil-parametri kliniċi wara terapija immunosoppressiva, li jissuġġerixxi rwol fil-monitoraġġ ta 'MGN.

3.4. Nefropatija IgA

Għalkemm in-nefropatija tal-immunoglobulina A (IgAN) hija primarjament marda mesanġjali, ir-rwol ta'urinarjapodoċitegħadd bħala bijomarkatur ġie esplorat. Notevolment, Shen et al [101] sabu li l-pazjenti IgAN kellhom żieda fit-telf tal-podoċiti urinarji, inqas podoċiti fil-glomeruli, u fużjoni aktar severa tal-proċess tas-saqajn fil-kampjuni tal-bijopsija tal-kliewi. F'dan l-istudju, podocyte urinarju ġie identifikat permezz ta 'studju indirett ta' immunofluworexxenza ta 'podocalyxin, u l-urinarjapodoċitegħadd korrelatat mal-krejatinina fis-serum u proteinurja [101]. Studju sussegwenti wera li n-numru ta 'podocytes urinarji f'pazjenti IgAN bi sklerożi segmentali kien ogħla minn dawk mingħajr sklerożi segmentali [102]. Fi tfal b'nefrite purpura onlajn IgAN jew Henoch-Sch¨, Hara et al [103] wrew li t-telf kumulattiv ta' podoċiti fl-awrina kien jikkorrelata mas-severità tal-ħsara tal-istoloġija u l-grad ta 'glomerulosclerosis fil-bijopsija tal-kliewi, u pazjenti b'persistenza.urinarjapodoċiteeskrezzjoni kellha progressjoni istoloġika mgħaġġla.

L-istudji dwar molekuli speċifiċi għall-podoċiti fl-awrina bħala bijomarkaturi ta 'IgAN huma frammentati u mhux kompluti. Il-livell ta 'podocalyxin urinarju kkorrelata b'mod sinifikanti mas-severità ta' leżjonijiet kapillari żejda akuti f'IgAN adulti [102]. Il-livell tal-mRNA tal-podocin urinarja ġie rrappurtat li jirrifletti s-severità tal-ħsara glomerulari attiva fil-bijopsija tal-kliewi u jipprovdi informazzjoni pronjostika komplementari għal-livell ta 'proteinurja [104]. Peress li l-IgAN hija l-glomerulonefrite primarja l-aktar komuni madwar id-dinja, huma ċertament meħtieġa aktar studji f'dan il-qasam.

Minbarra l-IgAN, ir-rwol ta 'urinarjapodoċitemarkaturi ġew esplorati fi glomerulopatiji mesanġjali oħra. Pereżempju,urinarjapodoċiteit-telf jiżdied b'mod notevoli kemm fil-forom ereditarji u akkwistati ta 'sklerożi mesanġjali diffusa [102]. Madankollu, dan il-qasam huwa inqas studjat tajjeb, probabbilment minħabba l-eteroġeneità fil-klassifikazzjoni patoloġika tiegħu.

3.5. Lupus nefrite

Urinarjupodoċiteit-twaqqigħ fin-nefrite tal-lupus ġie studjat. Rapport preċedenti wera li l-maġġuri taurinarjapodoċitif'pazjenti b'nefrite lupus attiva kienu vijabbli iżda dedifferenzjati, u l-proporzjon ta 'podocytes apoptotic fl-awrina kien sinifikament aktar baxx minn dak f'kontrolli b'saħħithom [105]. F'dan l-istudju, il-livelli urinarji ta' podocalyxin, synaptopodin, podocin, nephrin, u WT-1 (kif imkejla permezz ta' western blotting) żdiedu b'mod sinifikanti fil-lupus sistemiku, speċjalment f'lupus nefrite attiva, u l-livelli tagħhom kienu korrelatati b'mod sinifikanti mas-severità tal-proteinurja. u attività istoloġika [105]. Studju sussegwenti rrapporta aktar li l-livelli tal-mRNA tal-awrina ta 'nephrin, podocin, u synaptopodin kienu ogħla b'mod sinifikanti f'pazjenti b'nefrite lupus attiva milli f'lupus quiescent [106]. Speċifikament, il-livell ta 'mRNA ta' nephrin urinarju kkorrelata ma 'proteinurja u attività ta' mard sistemiku, iżda mhux il-klassi istoloġika ta 'lupus nefrite, filwaqt li l-livell ta' mRNA ta 'podocin urinarja kien tbassir indipendenti ta' tnaqqis sussegwenti tal-funzjoni renali [107].

3.6. Vaskulite assoċjata ma' antikorpi ċitoplasmiċi kontra n-newtrofili (ANCA).

Għalkemm il-podoċiti mhumiex il-mira primarja ta 'ħsara fil-kliewi fil-glomerulonefrite assoċjata ma' ANCA, id-densità ta 'podoċiti intra-glomerulari hija karatteristika mnaqqsa [108]. Zou et al [108] sabu li r-rata ta' distakk tal-podoċiti għall-awrina tbassar telf sussegwenti tal-funzjoni renali fil-glomerulonefrite assoċjata ma' ANCA, u Minakawa et al [109] irrappurtaw li podoċin urinarju għal proporzjon mRNA ta' nephrin, markatur surrogat ta' podoċite intra-glomerulari stress, korrelatat mal-perċentwali tal-formazzjoni tan-nofs tan-nofs [109]. Fl-aħħar studju, pazjenti b'livelli għoljin ta 'urinarjapodoċite-mRNA derivat kellu riżultat renali favorevoli, preżumibbilment minħabba riżerva aħjar tal-podoċiti glomerulari u l-potenzjal għar-riversibbiltà [109].

3.7. CKD oħra

L-utilità taurinarjapodoċitemarkaturi b'mod speċifikukliewimardhija miġbura fil-qosor fit-Tabella 3. Numru ta’ markaturi speċifiċi għall-podoċiti fl-awrina ġew esplorati wkoll bħala markaturi ġeneriċi ta’ CKD(Ckronikukliewimarda). Pereżempju,urinarjapodoċite-mikrovesicles extraċellulari derivati, kif ikkwantifikati permezz taċ-ċitometrija tal-fluss, żdiedu b'mod sinifikanti f'pazjenti bi pressjoni għolja b'funzjoni tal-kliewi indebolita milli f'dawk mingħajr indeboliment renali [110]. Il-livell ta’ sinaptopodin fl-awrina, kif iddeterminat minn Western blotting, ikkorrelata mal-funzjoni tal-kliewi kemm f’CKD dijabetika kif ukoll mhux dijabetika(Ckronikukliewimarda), irrispettivament mill-grad ta 'albuminurja, li jissuġġerixxi li l-awrina synaptopodin huwa markatur ġeneriku ta' ħsara podocyte [110]. Fost panel ta' miri tal-mRNA urinarju speċifiċi għall-podoċiti, il-livell tal-mRNA tal-fattur newrotrofiku derivat mill-moħħ tal-awrina (BDNF) kellu l-aħjar korrelazzjoni mal-molekula ta' ħsara fil-kliewi fl-awrina -1 (KIM-1), li hija markatur ġeneriku ta' ħsara fil-kliewi [111]. Għal miri ta' miRNA, il-livelli ta' miR-21 eżosomali fl-awrina żdiedu f'mudelli ta' annimali ta' korriment ta' podoċiti kif ukoll CKD(Ckronikukliewimarda)pazjenti [112], iżda l-oriġini ċellulari ta 'miR-21 ma ġietx determinata f'dan l-istudju.

Madankollu, huwa importanti li wieħed jinnota li mhux kollhakliewimardgħandek korriment podocyte. Żieda fiurinarjapodoċitetelf ġie rrappurtat f'diversi mard glomerulari iżda mhux f'poliċistiċi awtosomali dominantikliewimard(ADPKD) [113]. Aktar importanti minn hekk, l-assoċjazzjoni bejn podocyturia u proteinurja varjat b'mod notevoli bejn mard glomerulari differenti, li jissuġġerixxi liurinarjapodoċitemarkaturi għandhom jitqiesu aħjar bħala speċifiċi għall-mard [113].

4. Konklużjoni

Il-korriment tal-podoċiti għandu rwol importanti fil-patoġenesi u l-progressjoni ta 'ħafnakliewimard. Frammenti ċellulari derivati ​​minn podoċiti u miri molekulari speċifiċi għall-podoċiti fl-awrina għandhom potenzjal kbir li jiġu żviluppati bħala bijomarkaturi għad-dijanjosi u l-monitoraġġ ta’kliewimard. Il-proċess tal-iżvilupp tal-bijomarkatur jinkludi l-identifikazzjoni ta 'markaturi speċifiċi, id-determinazzjoni tal-metodoloġija tal-kejl, u deċiżjoni dwar il-kuntest kliniku għall-applikazzjoni (Fig. 2). Bl-avvanz fil-fehim tagħna tal-bijoloġija tal-podocyte u d-disponibbiltà ta 'teknoloġiji ġodda,urinarjapodoċiteil-markaturi huma mistennija li jkollhom ambitu ta' applikazzjoni li qed jespandi, kemm minħabba l-identifikazzjoni ta' miri ġodda kif ukoll l-iżvilupp ta' metodi ġodda għall-kwantifikazzjoni tagħhom. Bi tpattija, il-validazzjoni tal-markaturi tal-podoċiti urinarji tista’ titfa’ dawl fuq il-fehim tagħna tal-patofiżjoloġija ta’kliewimard. Hemm minjiera ta 'metodi għall-kwantifikazzjoni ta' podocyte u diversi markaturi speċifiċi għall-podocyte fl-awrina. Fl-għaxar snin li ġejjin, l-isforzi tar-riċerka għandhom ikunu ffukati fuq l-istandardizzazzjoni, it-tqabbil u l-awtomizzazzjoni tal-metodi tal-laboratorju, kif ukoll id-definizzjoni tal-valur miżjud tagħhom għal testijiet kliniċi ta’ rutina.

Fig. 2. Aspetti li għandhom jiġu kkunsidrati għall-iżvilupp ta’ bijomarkaturi relatati mal-podoċiti urinarji għalkliewimard. (GCBM, membrana kapillari tal-kantina glomerulari; CKD,kronikakliewimard; DKD, dijabetikukliewimard; FGS, glomerulosclerosis fokali).

Dikjarazzjoni ta' Interess Kompetituri

L-awturi jiddikjaraw li m'għandhom l-ebda interessi finanzjarji konkorrenti magħrufa jew relazzjonijiet personali li setgħu jidhru li jinfluwenzaw ix-xogħol irrappurtat f'dan id-dokument.

Rikonoxximent

Dan l-istudju kien appoġġjat mill-Fond ta’ Riċerka tal-PD Richard Yu Chinese University of Hong Kong (CUHK), u l-kontijiet ta’ riċerka CUHK 6905134 u 8601286. Il-finanzjaturi ma kellhom l-ebda rwol fid-disinn tal-istudju, il-ġbir tad-dejta, u l-analiżi, id-deċiżjoni li jippubblikaw, jew il-preparazzjoni tal-manuskritt. L-awturi ma jiddikjaraw l-ebda kunflitt ta' interess ieħor. Ir-riżultati ppreżentati f'dan id-dokument ma ġewx ippubblikati qabel kompletament jew parzjalment.

Ittejjeb il-mard tal-kliewi--Cistanche acteoside

Minn: 'Markers tal-podoċiti tal-awrina fikliewimard'minnLingfeng Zeng, et al

---Clinica Chimica Acta 523 (2021) 315–324