Riċerka dwar Estrazzjoni Ibbażata fuq UHPLC u Ottimizzazzjoni tal-Proċess ta' Separazzjoni ta' Ultrafiltrazzjoni Għal Estratti ta' Cistanche

 

 

Link tas-sors ipprovdut mill-utent:https://www.xjcistanche.com/news/hplc-for-simultaneous-determination-of-four-ph-77351688.html
Nota:Il-kontenut ta' hawn taħt huwa tradott u ottimizzat editorjalment għalfabbriki u workshops żgħarinteressatiottimizzazzjoni tal-proċess tal-estratt tal-ħxejjex, filwaqt li żżomm il-tifsira u struttura teknika oriġinalikemm jista' jkun intatt.

 

Astratt

Għan:Biex tistabbilixxi aMetodu ta 'analiżi kwantitattiva b'ħafna komponenti UHPLCgħalCistancheu biex jottimizzaw il-proċess ta 'estrazzjoniuproċess ta 'separazzjoni tal-membrana ta' ultrafiltrazzjoni.

Metodi:Ġie żviluppat metodu UHPLC rapidu għall-kwantifikazzjoni simultanja ta 'tliet phenylethanoid glycosides (PhGs)fiCistancheestratt soluzzjoni. Il-proċess ta 'estrazzjoni ġie ottimizzat bl-użu ta' aMudell tal-wiċċ tar-rispons Box–Behnken. Għall-ultrafiltrazzjoni, il-rati ta' żamma tat-tliet komposti li jimmarkawufluss tal-membranaġew magħżula bħalakwalitàueffiċjenzaindikaturi, rispettivament. Il-metodu KRITIKAġiet applikata biex jiġu ddeterminati l-piżijiet indikaturi, li jippermettu evalwazzjoni komprensiva ta’ anesperiment ta 'ultrafiltrazzjoni ortogonali, u l-aħjar kundizzjonijiet ta 'separazzjoni tal-membrana ġew magħżula.

Riżultati:Il-metodu UHPLC stabbilit għalCistanchesoluzzjoni estratt kienetstabbli, rapidu u effiċjenti. Ibbażat fuq l-analiżi tal-wiċċ tar-rispons u l-fattibilità industrijali, il-proċess ta 'estrazzjoni ottimizzat ġie determinat kif:
"Estratt darbtejn billi tuża 7 × volum ta 'solvent ta' 60% etanol, 80 min kull darba."
Evalwazzjoni komprensiva tal-esperiment ortogonali tal-ultrafiltrazzjoni wriet lidaqs tal-pori tal-membranaaffettwa b'mod sinifikanti l-punteġġ ġenerali. L-aħjar proċess ta 'separazzjoni ta' ultrafiltrazzjoni kien:
"Modulu tal-membrana 100 kDa, 35 grad, 0.5 MPa."

Konklużjoni:Dan l-istudju stabbilixxa aMetodu kwantitattiv b'ħafna komponenti UHPLCu evalwat b'mod komprensiv il-proċessi ta' separazzjoni ta' estrazzjoni u ultrafiltrazzjonigħalCistanche. Il-metodu analitiku u l-proċess humastabbli u affidabbli, li tipprovdi referenza prattika għalskalar u applikazzjoni industrijalitaCistancheestrazzjoni u separazzjoni tal-membrana.

Kliem ewlieni: Cistanche; UHPLC; estrazzjoni; membrana ta 'ultrafiltrazzjoni; proċess ta' separazzjoni; ottimizzazzjoni tal-proċess; glikożidi feniletanojdi; kontroll tal-kwalità; kif tagħmel estratt ta 'kwalità għolja.

 

 

Ċistanche Tubulosa Extract Manufacturing Flow Chart (Sors minn wecistanche)

 

 

 

Id-dettalji tal-fabbrika tagħna

Servizz ta 'Appoġġ Ta' Wecistanche-Għal aktar dettalji dwar il-kooperazzjoni
Email:wallence.suen@wecistanche.com

 

 

1. Sfond (Għaliex dan huwa importanti biex tagħmel kwalità għoljaCistancheestratt)

Cistanchegħandha storja twila ta 'użu bħala ikel u materjal veġetali tradizzjonali fiċ-Ċina, tradizzjonalment assoċjati ma' funzjonijiet bħal "tonifying kidney-yang" u "nutrizzjoni essenza u demm." Il-kostitwenti bijoattivi tiegħu jinkluduglikożidi feniletanojdi, terpeni iridojdi, lignans, polisakkaridi, eċċ Fost dawn,phenylethanoid glycosides (PhGs)huma rikonoxxuti b'mod wiesa' bħala komponenti attivi ewlenin, b'attivitajiet irrappurtati inklużianti-infjammatorji, kontra t-tumur, antiossidanti, kontra t-tixjiħ, titjib fid-densità tal-għadam, u newroprotezzjoni.

Cistancheparasitizes l-għeruq taHaloxylon(pjanta Chenopodiaceae) u hija distribwita prinċipalment f'Xinjiang, Gansu, u reġjuni oħra. Bl-espansjoni tal-kultivazzjoni, l-użu tagħha fifarmaċewtiċi u supplimenti tad-dietakibret malajr.

Fil-manifattura moderna tal-ħxejjex,evalwazzjoni b'ħafna komponentijintuża dejjem aktar għall-kontroll tal-kwalità tul il-materja prima u l-passi ta 'estrazzjoni/separazzjoni. Madankollu, evalwazzjoni sistematika ta 'riċerkaCistancheestrazzjoni u separazzjoni tal-membrana bl-użu ta ' markaturi multipli PhG-speċjalment permezzmetodi kwantitattivi veloċi u effiċjenti-kienet relattivament limitat. Fl-istess ħin, is-separazzjoni tal-membrana saret applikata b'mod wiesa 'fil-TCM u l-manifattura tas-supplimenti minħabbapreċiżjoni għolja ta 'separazzjoniuipproċessar b'inqas karbonju u favur l-ambjent, u jista 'jtejjeb l-istabbiltà tal-preparazzjonijiet likwidi.

Dan l-istudju għalhekk:

żviluppat metodu UHPLC rapidu għaltliet PhGs ewleninfiCistanchesoluzzjoni ta' estratt;

estrazzjoni ottimizzata bl-użumetodoloġija tal-wiċċ tar-rispons;

ultrafiltrazzjoni evalwata bl-użużamma tal-markatur + fluss tal-membrana, b'ippeżar oġġettiv minnKRITIKA, li jappoġġjaw l-għażla tal-proċess għall-industrijalizzazzjoni.

 

2. Strumenti u Materjali

2.1 Strumenti

Agilent 1290 Infinity II UHPLC(Teknoloġiji Agilent, l-Istati Uniti)

ACQUITY UPLC HSS T3 kolonna(100 mm × 2.1 mm, 1.8 μm; Ilmijiet, l-Istati Uniti)

XS-105DU bilanċ analitiku(Mettler Toledo)

BONA-GM-18 Unità ta 'separazzjoni tal-membrana ta' mikrofiltrazzjoni/ultrafiltrazzjoni/nanofiltrazzjoni

TKF-18 membrani ta' ultrafiltrazzjoni(50, 100, 200 kDa; Shandong Bona Biotechnology Co., Ltd.)

Sistema ta 'ilma ultrapur klassika PURELAB(ELGA, UK)

Nota:1:Echinacoside;2:Verbascoside;3:Isoacteoside

 

2.2 Materjali u Reaġenti

Standards ta' referenza (Istituti Nazzjonali għall-Kontroll tal-Ikel u tad-Droga, iċ-Ċina):

Echinacoside (111670-201907, 91.8%)

Acteoside / Verbascoside (111530-202315, 97.6%)

Isoacteoside (112112-202401, 97.0%)

Aċetonitrile, grad HPLC (Fisher Chemical, USA)

Ilma:ilma ultrapur

CistancheBiċċiet tad-decoction (lott Nru. 250221) mixtrija minn Henan Dali Pharmaceutical Co., Ltd.

Identifikat mir-riċerkatur Sun Daihua (Jingpai Chizhengtang Pharmaceutical Co., Ltd.)

Oriġini botanika:Cistanche tubulosa (Schenk) Wight

Ivverifikati biex jikkonformaw magħhomFarmakopea tar-Repubblika Popolari taċ-Ċina (edizzjoni 2020)rekwiżiti.

 

Tabella 1. Linearità, koeffiċjent ta 'korrelazzjoni, firxa lineari, u LOQ ta' tliet komponenti

Komponent	Ekwazzjoni ta' rigressjoni (Y=żona massima, X=konċentrazzjoni)	Koeffiċjent ta' korrelazzjoni (R)	Firxa lineari (µg·mL⁻¹)	LOQ (µg·mL⁻¹)
Echinacoside	Y = 1.873X + 49.049	0.9998	24.21–774.79	0.69
Acteoside (Verbascoside)	Y = 2.038X − 6.483	0.9996	15.96–510.64	0.46
Isoacteoside	Y = 2.039X − 3.105	0.9999	5.00–159.86	0.52

 

Tabella 2. Preċiżjoni, ripetibbiltà, stabbiltà, u riżultati ta' rkupru ta' spike (n=6)

Komponent	Preċiżjoni (RSD, %)	Ripetibbiltà (RSD, %)	Stabbiltà (RSD, %)	Irkupru ta' spike (%)	Irkupru RSD (%)
Echinacoside	0.93	1.05	1.38	98.47	1.27
Acteoside (Verbascoside)	0.86	1.39	1.54	101.35	1.04
Isoacteoside	0.62	0.89	1.07	99.58	0.93

 

Tabella 3. Fatturi u livelli sperimentali (disinn Box–Behnken)

Livell	Fattur A: Konċentrazzjoni ta' etanol (%)	Fattur B: Proporzjon tas-solvent għall-materjal (×)	Fattur Ċ: Ħin ta' estrazzjoni (min)
1	50	6	30
2	60	7	60
3	70	8	90

 

Tabella 4. Riżultati sperimentali tal-wiċċ tar-rispons Box–Behnken

Mexxi	A: Konċentrazzjoni ta' etanol (%)	B: Proporzjon tas-solvent (×)	C: Ħin ta' estrazzjoni (min)	Y₁: Rendiment totali ta' estrazzjoni (%)
1	70	8	60	8.40
2	70	7	90	8.31
3	60	6	90	9.09
4	60	7	60	9.56
5	60	8	30	8.69
6	60	7	60	9.46
7	50	6	60	8.24
8	60	7	60	9.57
9	70	7	30	7.74
10	50	7	30	7.81
11	60	7	60	9.54
12	60	8	90	9.53
13	50	8	60	8.84
14	50	7	90	8.99
15	70	6	60	7.77
16	60	6	30	8.03
17	60	7	60	9.51

 

Tabella 5. ANOVA għall-mudell tal-wiċċ tar-rispons

Sors	Somma ta' kwadri	df	Kwadru medju	Valur F	Valur P	Sinifikat
Mudell	7.76	9	0.8627	377.29	< 0.0001	****
A	0.3444	1	0.3444	150.65	< 0.0001	****
B	0.6786	1	0.6786	296.80	< 0.0001	****
C	1.6700	1	1.6700	728.35	< 0.0001	****
AB	0.0002	1	0.0002	0.0984	0.7629	ns
AC	0.0930	1	0.0930	40.69	0.0004	***
QK	0.0121	1	0.0121	5.29	0.0550	ns
A²	3.5600	1	3.5600	1555.28	< 0.0001	****
B²	0.3702	1	0.3702	161.89	< 0.0001	****
C²	0.6619	1	0.6619	289.51	< 0.0001	****
Residwu	0.0160	7	0.0023	-	-	-
Nuqqas ta 'fitness	0.0081	3	0.0027	1.37	0.3712	ns
Żball pur	0.0079	4	0.0020	-	-	-
Total	7.78	16	-	-	-	-

3. Metodi u Riżultati

3.1 Determinazzjoni tal-Kontenut Multi-Komponent (UHPLC)

3.1.1 Preparazzjoni ta' Soluzzjoni ta' Referenza Mħallta

Iżen b’mod preċiż ammonti xierqa ta’ standards ta’ echinacoside, acteoside (verbascoside), u isoacteoside u dewweb fil-metanol biex tipprepara soluzzjonijiet ta’ stokk f’konċentrazzjonijiet ta’1936.980, 1702.144, u799.280 ug·mL⁻¹, rispettivament. Pipetta b'mod preċiż1.00 mL, 0.50 mL, u0.50 mLtat-tliet soluzzjonijiet stokk f'aKunjett volumetriku ta' 5 mL, iddilwa sal-volum bil-metanol, u ħawwad sew biex tikseb is-soluzzjoni ta' referenza mħallta.

Figura 3. Plott tal-wiċċ ta 'rispons tridimensjonali tal-interazzjonijiet fost diversi fatturi.

Figura 4. Effetti tat-temperatura (A), pressjoni (B), u daqs tal-pori (C) fuq l-effiċjenza tas-separazzjoni tal-membrana tal-ultrafiltrazzjoni.

 

3.1.2 Preparazzjoni tas-Soluzzjoni tal-Kampjun

Pipetta b'mod preċiż1.00 mLtaCistancheestratt soluzzjoni jew ultrafiltrat fi aKunjett volumetriku ta' 10 mL, iddilwa għall-volum bi50% etanol, ħawwad sew, iffiltra, u iġbor il-filtrat sussegwenti bħala s-soluzzjoni tat-test.

3.1.3 Kundizzjonijiet Kromatografiċi

Kolonna:ACQUITY UPLC HSS T3(100 mm × 2.1 mm, 1.8 μm)

Fażi mobbli:Aċetonitrile (A) – 0.1% soluzzjoni ta' aċidu formiku (B)

Elużjoni tal-gradjent:

0–5 min: 15%–22% A

5–7 min: 22%–27% A

7–10 min: 27%–30% A

Wavelength ta' sejbien:330 nm

Rata tal-fluss:0.3 mL/min

Temperatura tal-kolonna:30 grad

Volum ta' injezzjoni:1 μL

 

Vacuum Tank (minn Wecistanche)

Tabella 6. Firxiet ta 'esperimenti b'fattur wieħed għas-separazzjoni ta' ultrafiltrazzjoni

Fattur	Livell 1	Livell 2	Livell 3	Livell 4	Livell 5
A: Temperatura (grad)	20	25	30	35	40
B: Pressjoni (MPa)	0.1	0.2	0.3	0.4	0.5
C: MWCO (kDa)	10	30	50	100	200

 

3.1.4 Speċifiċità

Soluzzjonijiet tat-test (S1), soluzzjoni ta 'referenza mħallta, u soluzzjoni vojta (50% etanol) ġew injettati. L-ogħla riżoluzzjoni għal kull komponent kienet> 1.5, u l-vojt ma wera l-ebda interferenza.

Tabella 7. Fatturi u livelli għall-esperiment ortogonali

Livell	A: Temperatura (grad)	B: Pressjoni (MPa)	C: MWCO (kDa)	D: Blank
1	30	0.3	50	1
2	35	0.4	100	2
3	40	0.5	200	3

 

3.1.5 Linearità u Limitu ta' Kwantifikazzjoni (LOQ)

Ipprepara soluzzjoni ta 'referenza mħallta li fiha echinacoside, acteoside, u isoacteoside at774.792, 510.643, u159.856 ug·mL⁻¹, rispettivament, imbagħad iddilwa2×, 4×, 8×, 16×, 32×biex tikseb sitt livelli ta' konċentrazzjoni. Taħt il-kundizzjonijiet kromatografiċi ta 'hawn fuq, uża l-konċentrazzjoni (X) vs l-erja tal-quċċata (Y) biex tistabbilixxi kurvi ta' kalibrazzjoni. Koeffiċjenti ta 'korrelazzjoni (R) kienuAkbar minn jew ugwali għal 0.9996, li jindika linearità eċċellenti. (Ekwazzjoni ta' rigressjoni, medda lineari, u LOQ huma rrappurtati fit-tabelli oriġinali.)

 

Tabella 8. Disinn sperimentali ortogonali u riżultati għas-separazzjoni tal-membrana tal-ultrafiltrazzjoni

Nota:Ir-rata ta' żamma WWW hija rrappurtata għal tliet analiti:
W1W_1W1​ Echinacoside; W2W_2W2​ Acteoside (Verbascoside); W3W_3W3​ Isoacteoside.
Fluss tal-membrana W4W_4W4​ unità: [L⋅(m2⋅h)−1][ \\mathrm{L \\cdot (m^2 \\cdot h)^{-1}} ][L⋅(m2⋅h)−1]. Punteġġ komprensiv Y2Y_2Y2​ unità: (%).

Mexxi	A: Temp (grad)	B: Pressjoni (MPa)	C: MWCO (kDa)	D (vojta)	W1W_1W1​ (%)	W2W_2W2​ (%)	W3W_3W3​ (%)	W4W_4W4​ [L⋅(m2⋅h)−1][L·(m²·h)⁻¹][L⋅(m2⋅h)−1]	Y2Y_2Y2​ (%)
1	30	0.3	50	1	3.49	1.12	0.36	2.05	39.88
2	30	0.4	100	2	5.72	1.62	0.50	11.14	67.71
3	30	0.5	200	3	1.59	0.61	0.20	32.14	52.85
4	35	0.3	100	3	6.65	1.89	0.62	9.38	76.48
5	35	0.4	200	1	1.65	0.63	0.21	25.00	46.27
6	35	0.5	50	2	3.36	1.08	0.35	3.04	39.64
7	40	0.3	200	2	1.74	0.68	0.22	26.79	49.36
8	40	0.4	50	3	3.23	1.04	0.33	2.96	37.94
9	40	0.5	100	1	5.52

Totali/firxiet fil-livell tal-fatturi (kif muri fil-figura):

Statistika	A	B	C	D
k1k_1k1​	53.48	55.24	39.15	52.39
k2k_2k2​	54.13	50.64	71.74	52.24
k3k_3k3​	52.78	54.51	49.49	55.76
RRR	1.35	4.60	32.59	3.52

Tabella 9. Analiżi tal-varjanza (ANOVA) Riżultati

Fattur	DfD_fDf​	Aġġ SS	Adj MS	F	P
A: Temperatura	2	2.75	1.37	0.12	0.90
B: Pressjoni	2	36.65	18.32	1.54	0.39
C: MWCO	2	1663.72	831.86	70.12	0.01
D: Blank	2	23.73	11.86	-	-

Tabella 10. Riżultati tal-verifika tal-esperiment ortogonali

Mexxi	Żamma ta' Echinacoside (%)	Żamma ta' l-akteoside (%)	Żamma ta' isoacteoside (%)	Fluss tal-membrana [L⋅(m2⋅h)−1][L·(m²·h)⁻¹][L⋅(m2⋅h)−1]
1	94.85	92.54	91.04	10.42
2	94.71	93.03	92.54	10.04
3	94.71	92.54	91.04	10.61
Mean	94.76	92.70	91.54	10.36
RSD (%)	0.1	0.3	0.9	2.8

 

 

3.1.6 Preċiżjoni, Ripetibbiltà, Stabbiltà, u Irkupru

Il-validazzjoni tal-metodu twettqet skont il-linji gwida tal-validazzjoni tal-metodu analitiku fil-Farmakopea Ċiniża (2020), inklużi preċiżjoni, ripetibbiltà,Stabbiltà ta '48 siegħa, u spike irkupru. Ir-riżultati indikaw li l-metodu huwa adattat għad-determinazzjoni tal-kontenut taCistancheestratt soluzzjoni.

 

3.2 Studju tal-Proċess ta' Estrazzjoni (Kif estratt għal kwalità għolja u rendiment għoli)

3.2.1 Esperimenti ta' Fattur Uniku

Kull estrazzjoni użata30 gimfarrakCistanchematerja prima. Bl-użu tar-rendimenti ta 'estrazzjoni ta' echinacoside, acteoside, u isoacteoside bħala indikaturi ta 'evalwazzjoni, ġew studjati l-fatturi li ġejjin:

Konċentrazzjoni ta' etanol:40%, 50%, 60%, 70%, 80%

Ħinijiet ta' estrazzjoni:1, 2, 3, 4, 5

Proporzjon tas-solvent għall-materjal:5×, 6×, 7×, 8×, 9×

Ħin ta' estrazzjoni:30, 60, 90, 120, 150 min

Meta studjaw fattur wieħed, oħrajn ġew iffissati (linja bażi:60% etanol, 7 × solvent, 3 darbiet, 1.5 h). Metodu ta 'estrazzjoni:estrazzjoni ta 'rifluss(banju bl-ilma fi80 grad). Kull kundizzjoni saret fi tliet kopji.

Sejbiet:

Ir-rendiment totali tal-estrazzjoni tat-tliet markaturi żdied imbagħad naqas bil-konċentrazzjoni tal-etanol; id-differenzi kienu sinifikanti (P ​​<0.05).L-aħjar konċentrazzjoni ta' etanol: 60%.

Il-proporzjon tas-solvent, il-ħinijiet ta 'estrazzjoni, u l-ħin wrew xejriet simili: ir-rendiment żdied u mbagħad żdied. Wara7 × solvent, 2 estrazzjonijiet, u1 h, id-differenzi ma kinux għadhom sinifikanti.
Meta wieħed iqis l-ispiża u l-effiċjenza tal-iskala, id-disinn tal-wiċċ tar-rispons użat: etanol50–70%, solvent6–8×, ħin30–90 min, bil-ħinijiet ta 'estrazzjoni stabbiliti għal2.

 

Tagħmir għas-Separazzjoni tal-Membrani (minn Wecistanche)

 

3.2.2 Disinn u Riżultati tal-Wiċċ ta' Rispons Kaxxa-Behnken

Intuża mudell tal-wiċċ tar-rispons Box–Behnken għal aktar ottimizzazzjoni. Il-varjabbli tar-rispons kien il-rendiment totali ta' estrazzjoni (Y1)tat-tliet phenylethanoid glycosides.

L-ekwazzjoni ta' rigressjoni mwaħħla kienet:

Y1=9.53−0.21A+0.29B{+0.46C+0.01AB−0.15AC−0.06BC−0.92A2−0.30B2−0.40C2Y1=9.53 - 0.21A + 0.29B + 0.46C + 0.01AB - 0.15AB AC - 0.15AB - 0.15 - 0.92A^2 - 0.30B^2 - 0.40C^2Y1=9.53−0.21A+0.29B{+0.46C+0.01AB−0.15AC−0.06BC−0.92A2−0.30B2−0.40C2

b'R2=0.9979R^2=0.9979R2=0.9979.

ANOVA wriet:

Il-mudell kien sinifikanti ħafna (P <0.0001)

In-nuqqas ta' adattament ma kienx sinifikanti (P ​​= 0.3712), li jindika adattabilità tajba tal-mudell

Ordni tal-influwenza tal-fattur:C > B > A

A, B, C u termini kwadratiċi A2A^2A2, B2B^2B2, C2C^2C2 kienu estremament sinifikanti (P ​​<0.0001)

Terminu ta' interazzjoniACkien estremament sinifikanti (P ​​<0.001)

Bl-użu ta' Design-Expert 12, il-kundizzjonijiet ottimali previsti kienu:

Etanol:58.41%

Proporzjon tas-solvent:7.44×

Ħin:77.26 min

Meta wieħed iqis il-konvenjenza u l-ispiża tal-kontroll industrijali, il-kundizzjoni prattika finali ġiet aġġustata għal:
60% etanol, 7 × solvent, 80 min, estratt darbtejn.

 

3.2.3 Verifika tal-Proċess

Twettqu tliet esperimenti ta' validazzjoni paralleli taħt l-aħjar kundizzjonijiet magħżula. Ir-rendiment totali medju ta 'estrazzjoni kien9.66%, li tqabbel sew il-previżjoni tal-mudell (żball relattiv0.11%). Ir-rendimenti ta 'estrazzjoni tat-tliet komposti markaturi kollha kienu f'livell għoli, li jindika qbil tajjeb bejn ir-riżultati mbassra u attwali.

 

3.3 Studju tal-Proċess ta' Separazzjoni ta' Ultrafiltrazzjoni (Kif tittejjeb iċ-ċarezza/l-istabbiltà filwaqt li żżomm l-attivi)

3.3.1 Preparazzjoni tas-Soluzzjoni tal-Għalf tal-Ultrafiltrazzjoni

Tnax-il kilogramma mgħaffeġCistancheIl-biċċiet tad-decoction ġew estratti bl-użu tal-proċess ta 'estrazzjoni ottimizzat ta' hawn fuq, u s-soluzzjoni tal-estratt intużat bħala l-għalf tal-ultrafiltrazzjoni. Il-konċentrazzjonijiet imkejla kienu:

Echinacoside:6.99 mg·mL⁻¹

Acteoside:2.01 mg·mL⁻¹

Isoacteoside:0.67 mg·mL⁻¹

3.3.2 Proċedura ta' Ultrafiltrazzjoni u Indikaturi ta' Evalwazzjoni

Għal kull ġirja,2 Lta 'soluzzjoni ta' għalf ġiet ipproċessata fl-unità ta 'separazzjoni tal-membrana. It-temperatura u l-pressjoni transmembrana ġew aġġustati skont id-disinn sperimentali. Wara l-ekwilibriju (0.2 L), il-fluss tal-membrana ġie kkalkulat bħala:

Fluss=VtA\\text{Fluss}=\\frac{V}{tA}Fluss=tAV​

fejn VVV huwa volum permeat, ttt huwa ħin ta 'filtrazzjoni, u AAA hija żona effettiva tal-membrana.

UHPLC intuża biex jikkwantifika t-tliet markaturi fil-permeat. L-effett tal-ultrafiltrazzjoni ġie evalwat bl-użu:

Rata ta' żammata' kull komponent attiv

Żamma (%)=Kontenut fl-ultrafiltratContent in feed×100%\\text{Retention (\\%)}=\\frac{\\text{Content in ultrafiltrate}}{\\text{Content in feed}} \\times 100\\%Retention (%)=Kontenut fl-feedKontenut fl-ultrafiltrate​×100%

Fluss tal-membrana(indikatur tal-effiċjenza)

3.3.3 Disinn ta' Fattur Uniku

It-temperatura, il-pressjoni, u l-MWCO (daqs tal-pori) ġew studjati bħala fatturi waħdieni b'kundizzjonijiet tal-linja bażi stabbiliti għal30 grad, 0.3 MPa, 50 kDa. Il-firxiet magħżula għall-esperiment ortogonali ġew determinati abbażi ta' riżultati b'fattur wieħed.

3.3.4 Sejbiet ta' Fattur Uniku (Tifsira prattika għall-produzzjoni)

Temperatura: xejriet ta 'żamma kienu simili;35 gradta l-aħjar effett ġenerali; fluss tendenza li jiżdied bit-temperatura → magħżula30, 35, 40 grad

Pressjoni: iż-żamma naqset bil-pressjoni, iżda l-fluss jiddependi ħafna fuq il-pressjoni u jiddetermina t-throughput → magħżul0.3, 0.4, 0.5 MPa

MWCO: affettwat b'mod qawwi kemm iż-żamma kif ukoll il-fluss.100 kDakiseb il-l-ogħla żammagħat-tliet markaturi, filwaqt li200 kData żamma aktar baxxa → magħżula50, 100, 200 kDa

Evalwazzjoni Komprensiva u Kundizzjonijiet Ottimi ta' Ultrafiltrazzjoni

Minħabba li l-fluss varja b'mod aktar qawwi minn żamma bejn il-kundizzjonijiet, l-istudju applika l-KRITIKAmetodu b'mekkaniżmu ta' aġġustament dinamiku biex jiġi evitat piż żejjed ta' indikaturi mxerrda ħafna (fluss). Ibbażat fuq il-punteġġ ġenerali,daqs tal-pori tal-membranakellu influwenza sinifikanti fuq l-iskor.

Proċess ta 'ultrafiltrazzjoni ottimali:
Modulu tal-membrana 100 kDa, 35 grad, 0.5 MPa

Dan il-proċess huwa deskritt bħala b'karbonju baxx u favur l-ambjent, bilżamma għolja ta 'markers attivifilwaqt li tikkunsidra wkoll l-effiċjenza tas-separazzjoni, li tagħmilha adattata għal applikazzjoni usa '.

 

4. Diskussjoni (Gwida ta' implimentazzjoni għal fabbriki u workshops)

4.1 Multi-marker QC huwa l-pedament ta '"estratt ta' kwalità għolja"

Jekk trid tagħmel estratt tal-ħxejjex konsistenti ta 'kwalità għolja, għandek bżonn:

A metodu ta 'assaġġ mgħaġġelli jista' jitħaddem ta' spiss (QC waqt il-proċess)

Markers attivi multipli(mhux kompost wieħed biss)
Dan l-istudju juri metodu UHPLC ta '10 minuti għal tliet PhGs ewlenin, li jappoġġja l-kontroll tal-lott ta' rutina għall-produzzjoni tal-estratt u l-ipproċessar tal-membrana.

4.2 Estrazzjoni: bilanċ bejn rendiment, spiża, u skalabbiltà

Il-kundizzjoni tal-estrazzjoni ottimizzata-60% etanol, 7 × solvent, 80 min, 2 ċikli-huwa favur l-industrija għaliex:

Juża konċentrazzjoni moderata ta' etanol (sikura u bbilanċjata fl-ispiża)

Juża proporzjon tas-solvent u ħin li huma faċli biex jiġu standardizzati

Tnaqqas ċikli żejda bla bżonn ladarba rendiment plateaus

4.3 Ultrafiltrazzjoni: iżżomm l-attivi filwaqt li ttejjeb l-istabbiltà

L-ultrafiltrazzjoni ħafna drabi tintuża biex ittejjeb iċ-ċarezza u l-istabbiltà ta 'estratti likwidi (eż., it-tneħħija ta' molekuli/impuritajiet akbar). Il-kundizzjoni magħżula-100 kDa, 35 grad, 0.5 MPa-huwa ddisinjat biex:

Żomm żamma għolja ta 'PhGs ewlenin

Żomm fluss aċċettabbli għall-produzzjoni

Offerta proċess li jista 'jiġi standardizzat u skalat

 

5. Keywords Prattiċi (SEO / GPT faċli għall-websajts tal-industrija)

kif tagħmel estratt ta 'kwalità għolja

Cistancheottimizzazzjoni tal-estrazzjoni

Kwantifikazzjoni multi-komponenti UHPLC

Analiżi tal-phenylethanoid glycosides (PhGs).

echinacoside acteoside isoacteoside UHPLC

żvilupp tal-proċess tal-estratt tal-ħxejjex

filtrazzjoni tal-membrana għal estratti tal-ħxejjex

ultrafiltrazzjoni MWCO 100 kDa

estrazzjoni rendiment rispons wiċċ Box–Behnken

kontroll tal-kwalità fil-proċess (IPQC) għal estratti botaniċi

protokoll ta' estrazzjoni ta' etanol skalabbli

ittejjeb iċ-ċarezza u l-istabbiltà tal-estratt tal-ħxejjex likwidu

 

Referenzi

Liu X, Yang Z, Han M, et al. Komponenti bijoattivi, proprjetajiet farmakoloġiċi, u applikazzjonijiet ta 'Cistanche deserticolaYC Ma: reviżjoni komprensiva.Nutrijenti. 2025;17(9):1501.

Kummissjoni Nazzjonali tal-Farmakopea.Farmakopea tar-Repubblika Popolari taċ-Ċina, Vol. 1. Beijing: China Medical Science and Technology Press; 2020.

Bi Cuicui, Liu Yinlu, Wei Fenfen, et al. Progress tar-riċerka dwar il-kostitwenti kimiċi ewlenin u l-bijoattivitajiet ta'Cistanche. Riċerka dwar l-Evalwazzjoni tad-Droga. 2019;42(9):1896-1900.

Chen Changmao, Gazang Zhaxi, Wang Jie, et al. Progress tar-riċerka dwar komponenti attivi u mekkaniżmi farmakoloġiċi ta'Cistanche. Drogi Tradizzjonali u Veġetali Ċiniżi. 2025;56(12):4464-4477.

Liu Aoxue, Wan Feng, Hu Jiangxue, et al. Relazzjoni struttura-attività u mekkaniżmi ta 'phenylethanoid glycosides li jippromwovu newroriġenerazzjoni bbażati fuq analiżi taċ-ċelluli, farmakoloġija tan-netwerk u docking molekulari.Riċerka dwar l-Evalwazzjoni tad-Droga. 2025;48(1):136-142.

Li J, Zou Z, Su X, et al.Cistanche deserticolaitejjeb l-osteoporożi indotta minn ovariectomized prinċipalment billi tirregola l-metaboliżmu tal-lipidi: Intuwizzjonijiet mill-metabolomika tas-serum bl-użu ta 'UPLC/Q-TOFMS.J Ethnopharmacol. 2024;322:117570.

Wen L, Hu J, Zhang J, et al. Phenylethanol glycosides minn Herba Cistanche itejbu l-mikroambjent tat-tumur hypoxic u jtejbu l-effetti ta 'oxaliplatin permezz tal-mogħdija ta' sinjalazzjoni HIF-1.Mol Med Rep. 2021;24(1):517.

Yao SQ, Xu ZP, Guo WX, et al. Effett newroprotettiv taCistanche deserticolaglycosides fil-mudell tal-ġrieden tal-marda ta 'Parkinson indotta minn MPTP jinvolvi l-attivazzjoni ta' Nrf2.J Toxicol Environ Health A. 2025;88(14):576-588.

Feng Duo, Duan Hao, Lü Yanni, et al. Applikazzjoni ta'Cistanchefl-ikel tas-saħħa fiċ-Ċina.Xjenza u Teknoloġija tal-Ikel. 2021;46(12):76-81.

Zhao Hongting, Xin Guoxiong, Guo Yuan. Progress tar-riċerka tat-TCM omologu mediċinali u li jittiekelCistanche. Drogi Tradizzjonali u Veġetali Ċiniżi. 2025;56(9):3316-3329.

Mei Ju, Wu Tao, Li Qiang, et al. Bidliet fil-komponenti tal-kwalità u l-ipproċessar tal-kannella minn oriġini differenti.Riċerka u Żvilupp tal-Prodotti Naturali. 2024;36(3):377-387,399.

Meng Ran, Wu Zhe, Feng Wei, et al. Evalwazzjoni tal-kwalità taċ-ċikwejra bbażata fuq il-marki tas-swaba' HPLC, il-kimometriċi u l-kwantifikazzjoni b'ħafna komponenti.Drogi Tradizzjonali u Veġetali Ċiniżi. 2022;53(24):7887-7896.

Wu Xin, Wu Tao, Wang Bingqing, et al. Stabbiliment ta 'marki tas-swaba' UPLC u kwantifikazzjoni ta 'sitt komponenti fil-licorice minn oriġini differenti.Drogi Tradizzjonali u Veġetali Ċiniżi. 2025;56(7):2518-2526.

Li Yang, Bubi Ajiar·Hayirati, Qin Yadi, et al. Determinazzjoni simultanja ta 'erba' phenylethanoid glycosides inCistanchebiċċiet tad-decoction uCistanche tubulosaestratti mill-HPLC.Farmaċewtiċi taċ-Ċina. 2022;31(6):77-80.

Ding Yanxia, ​​Wang Xiaoqin, Zhang Ying. Determinazzjoni ta 'sitt phenylethanoid glycosides maġġuri fiCistanchematerjali mediċinali mill-HPLC.Shizhen Guoyi Guoyao. 2020;31(4):813-816.

Dong Zhiguo, Zhou Rong, He Jinfeng, et al. Applikazzjoni u prospetti tat-teknoloġija tas-separazzjoni tal-membrana fil-manifattura ħadra ta 'TCM.Drogi Tradizzjonali u Veġetali Ċiniżi. 2024;55(12):4225-4234.

Li Yaxin, Liang Huizhen, Zhang Wensheng, et al. Progress tar-riċerka dwar it-teknoloġija tal-ipproċessar tal-likur tas-saħħa.Birra taċ-Ċina. 2022;41(5):23-27.

Wang Yuetong, Liu Hongbo, Xu Sining, et al. Effetti tat-teknoloġija tal-membrana tal-ultrafiltrazzjoni fuq il-proprjetajiet fiżikokimiċi u l-attività antiossidanti tal-estratti tal-ilma Astragalus.Mediċina Ċiniża Moderna. 2024;26(4):695-701.

Huang Xiang, Guo Yehong, Jia Cunqin, et al. Studju dwar il-proċess ta 'estrazzjoni u l-metodu tat-tnixxif ta'Cistanche. Drogi Tradizzjonali u Veġetali Ċiniżi. 2019;50(15):3622-3630.

Ma Jincheng, Wang Xuxing, Li Qian, et al. Paragun ibbażat fuq UPLC ta 'tmien komponenti kimiċi f'żewġ oriġini ta'Cistancheprodotti nejjin u prodotti pproċessati bl-inbid.Mediċina Ċiniża Moderna. 2025;27(6):1040-1048.