Il-Bażi Xjentifika għall-Applikazzjoni Ġdida ta' Cistanche
Mar 09, 2022
Kuntatt: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 Email:audrey.hu@wecistanche.com
Sun Weidong1, Chen fei2, Sun yun2
(1. Isptar Yangzhou tal-Mediċina Tradizzjonali Ċiniża, Yangzhou 225009, Jiangsu; 2. Skola tal-Mediċina, Yangzhou University, Yangzhou 225001, Jiangsu)
ASTRATT: Ġie stabbilit il-mudell tal-firien beg nin prostatic hyperplasia (BPH), u tliet gruppi ta’ dożi ta’ acteoside ġew amministrati mill-ħalq għal 4 ġimgħat, biex jiġi studjat l-effett ta’ acteoside distillat minnCistanche tubulosafuq apoptosi u ultra microstructure glandola tal-prostata fil-firien b'BPH. Il-bidla ultrastrutturali tal-glandola tal-prostata ġiet osservata permezz ta 'mikroskopija elettronika ta' trasmissjoni. Ir-riżultati wrew li l-Apoptosi tal-prostata normali tal-firien ma kinitx ovvja, kien hemm baxx
rata ta 'apoptożi tal-prostata fil-grupp mudell, fid-doża għolja acteoside minnCistanche tubulosatrattament, l-apoptożi tal-prostata tal-firien kienet ogħla b'mod sinifikanti minn dik tal-mudell.
KELMI EWLENIN:Cistanche, Cistanche tubulosa, acteoside; far; tibda iperplażja tal-prostata; apoptożi; ultrastrutturali
Fil-proċess ta 'iperplażja beninna tal-prostata (BPH), l-apoptosi taċ-ċelluli hija waħda mill-mekkaniżmi li bħalissa qed jiġbdu l-attenzjoni. Il-kodifikazzjoni tal-ġeni tiddeterminaha u tippermetti liċ-ċelloli jikkontrollaw il-mewt taċ-ċelluli programmata billi jirrispondu għal sinjali speċifiċi.
Wara li l-prostata tiżviluppa sa daqs adult, ir-rata ta 'proliferazzjoni taċ-ċelloli tal-prostata tinżamm f'1 fil-mija sa 2 fil-mija permezz tal-bilanċ tar-rata medja ta' apoptożi. Ladarba l-bilanċ jitkisser, huwa meqjus bħala l-kawża ta 'BPH. Taħt kundizzjonijiet normali, il-livelli ta 'estroġenu u androġenu u ċ-ċirkolazzjoni normali fil-prostata huma tip ta' stat ta 'awto-bilanċ li jeżisti fil-proċess ta' proliferazzjoni u apoptożi. Meta l-bilanċ bejn il-proliferazzjoni u l-apoptożi ma jkunx bilanċjat, dan iwassal għal aktar tkabbir u espansjoni tal-glandola, li prinċipalment tikkawża l-espansjoni tal-kompartiment taċ-ċelluli epiteljali [1].
F'dan l-esperiment, waqqafna mudell ta 'iperplażja tal-prostata tal-firien biex josservaw u janalizzaw l-effett ta' acteoside (glycoside bħal koazzjoni), wieħed mill-komponenti kimiċi ta 'Cistanchefuq l-apoptożi u l-bidliet ultrastrutturali taċ-ċelloli tal-prostata tal-firien, sabiex jiġi evalwat l-effett ta 'acteoside L-effett li jinibixxi l-iperplażja tal-prostata jipprovdi bażi xjentifika għall-iżvilupp u l-użu ta 'użi ġodda tal-mediċina Ċiniża Cistanche.
Cistancheestratt
1 Materjal u Metodi
1. 1 Annimali Sperimentali
Ħamsin firien SD maskili ta 'età ta' 6-7 ġimgħat, grad nadif, li jiżnu 80-100 g, huma pprovduti miċ-Ċentru għall-Mediċina Komparattiva tal-Università ta 'Yangzhou.
1. 2 Reaġenti u Mediċini
L-injezzjoni ta 'propionate ta' testosterone hija minn Shanghai General Pharmaceutical Co., Ltd., l-ispeċifikazzjoni hija 25 mg · mL -1, u n-numru tal-lott huwa 060708. Is-soluzzjoni taż-żebgħa PI hija minn Yangzhou University Testing Center. Il-kontenut ta 'Aktiside huwa 945 g·kg-1, imħejji mid-Dipartiment tal-Analiżi tal-Mediċina Ċiniża, l-Università Farmaċewtika taċ-Ċina.
1. 3 Tagħmir Sperimentali
Philips Tecnai 12 mikroskopju elettroniku ta 'trasmissjoni huwa minn Philips fl-Olanda; FACSAria flow cytometer huwa minn BD fl-Istati Uniti.
1. 4 Raggruppamenti u Modelli
Wara l-kastrazzjoni skont il-metodu tal-letteratura [3], il-firien ġew injettati b'5 mg·(kg·d)-1ta 'propionate ta' testosterone fuq wara tal-firien għal 4 ġimgħat biex jiġi stabbilit mudell ta 'iperplażja tal-prostata. Il-firien mudell kienu maqsuma b'mod każwali fi gruppi ta 'mudell: grupp ta' doża għolja mudell flimkien ma 'acteoside, grupp ta' doża medja mudell flimkien ma 'acteoside, grupp ta' doża baxxa ta 'mudell flimkien ma' acteoside, għaxar firien f'kull grupp; għaxar firien normali oħra kienu bħala grupp ta 'kontroll.
1. 5 Metodu ta 'Amministrazzjoni
Ġimgħa wara l-immudellar, il-gruppi ta' acteoside b'doża għolja, medja u baxxa ngħataw 60, 30, 15 mg·(kg·d)-1 bil-gavage, rispettivament. Il-grupp mudell u l-grupp ta 'kontroll tpoġġew volum ugwali ta' salina normali darba kuljum għal erba 'ġimgħat, miżun darba fil-ġimgħa, u aġġustaw id-dożaġġ skond il-piż tal-ġisem.
1. 6 Ġbir u Ipproċessar tal-kampjuni
1) Materjal u preparazzjoni tal-kampjun: 24 siegħa wara l-aħħar amministrazzjoni, iżen il-firien tas-sawm u sagrifika l-firien permezz ta 'dislokazzjoni ċervikali. Iftaħ immedjatament l-addome t'isfel, qaxxar it-tessuti madwar il-prostata, illibera l-prostata, u ħu parti mill-prostata għall-użu f'banju tas-silġ. Omoġenizzatur tat-tessuti omoġenizzat, sospensjoni ta' ċellula waħda tal-prostata ppreparata, u mtebba' b'metodu ta' pass wieħed tal-jodur tal-propidju [4]; parti oħra tat-tessut tal-prostata ġiet iffissata f'25 g·L-1 glutaraldehyde biex tipprepara sezzjonijiet ultra-rqaq.
2) Ipprepara sospensjoni ta 'ċellula waħda: Taħt kundizzjonijiet asettiċi, neħħi kompletament il-prostata tal-far u ċċaqlaqha ġo dixx petri, aħsel id-demm u l-emboli tad-demm fuq il-wiċċ tat-tessut tal-prostata b'PBS, u neħħi x-xaħam tal-madwar, fibri żejda, u membrani taċ-ċelluli. Mill-istess prostata tal-far, tessut tal-prostata frisk bid-daqs ta 'madwar 0.5 ċm3ittieħdet u maqtugħ f'biċċiet biex tipprepara sospensjoni taċ-ċelluli tal-prostata [5]. Poġġi l-blokka tat-tessut tal-prostata f'dixx petri, u żid ammont żgħir ta 'PBS; uża imqassijiet oftalmoloġiċi biex taqta' t-tessut f'banju tas-silġ, itħan l-omoġenizzatur għal sospensjoni, żid 10 mL PBS, ipperpetta l-omoġenat tat-tessuti, u uża malji tan-najlon ta 'daqs tal-pori ta' 0.074 mm ġie ffiltrat fit-tubu tat-test, ċentrifugat. fi 1 500 r min-1għal 3 min, u l-preċipitat inħasel tliet darbiet bil-PBS, kull darba f'500 r min-1ċentrifugazzjoni b'veloċità baxxa għal żmien qasir biex tneħħi d-debris taċ-ċelluli, għal 0.037 mm filtru tal-malji tan-najlon tad-daqs tal-pori biex tneħħi ċaċelli taċ-ċelluli. Għadd iċ-ċelluli u aġġusta l-konċentrazzjoni taċ-ċelluli għal 2 × 109 ċelluli · L-1. Tebgħa b'1 mL soluzzjoni tat-tebgħa PI, ipproteġi mid-dawl f'4 gradi għal 10 min.
3) Preparazzjoni ta 'sezzjoni ultrathin: Għall-preparazzjoni ta' sezzjoni ta 'tessut ultrathin, ara l-letteratura [6].
2 Riżultati u analiżi
Fig. 1 Apoptosi tal-mudell tal-far BPH u azzjoni indotta ta 'acteoside
a. Grupp normali; b. Grupp mudell; c. Grupp ta' doża għolja ta' Acteoside; d. Grupp ta' doża baxxa ta' Acteoside
2. 1 L-effett ta 'acteoside fuq l-apoptosi tal-prostata tal-firien
Il-Figura 1 turi l-quċċata tal-apoptożi misjuba permezz taċ-ċitometrija tal-fluss, li turi li l-acteoside għandu effett pro-apoptotiku. L-analiżi statistika tar-riżultati tal-apoptożi taċ-ċelluli wriet li r-rata tal-apoptożi taċ-ċelluli tal-firien żdiedet b'mod sinifikanti (24.7±1.85) fil-mija u (16.1±1.04) fil-mija wara trattament b'dożi għoljin, medji u baxxi tal- acteoside. , (14.5±0.68) fil-mija , u l-grupp normali (1.1±{{20}}.06) fil-mija , grupp mudell (9.5±0.5) fil-mija , grupp pożittiv (9.83±) 0.76) Id-differenza fil-paragun fil-mija hija sinifikanti (P<0.01), indicating="" that="" aktidine="" can="" induce="" cell="" apoptosis,="" the="" effect="" is="" stronger="" than="" that="" of="" the="" positive="" control="" drug="" qianliekang="" (figure="">
Fig. 2 Ir-radju tal-apoptożi fil-mudell tal-far BPH u l-effett tal-acteoside
2.2 L-effett ta 'acteoside fuq l-ultrastruttura taċ-ċelloli tal-iperplażja tal-prostata.
Osservazzjonijiet tal-mikroskopija elettronika juru li l-prostata normali tal-far għandha nuklei kompluti, ovvjament nukleoli, u distribuzzjoni uniformi tal-kromatina nukleari; ir-retikulu endoplasmiku mhux maħdum għandu l-istess daqs, huwa rranġat pulit, u m'għandux vakuolazzjoni. M'hemm l-ebda mikrovilli li jixbħu s-swaba 'fuq il-wiċċ ta' l-epitelju, l-ebda nefħa tal-mitokondrija, u ftit tnixxijiet fil-kavità. In-nuklei taċ-ċelluli tal-prostata fil-grupp mudell kienu deformati u ċekken, u ċ-ċitoplasma kienet abbundanti. Ir-retikulu endoplasmiku mhux maħdum kien estiż f'forma ta 'ċisti, u ċ-ċisti kienet mimlija b'partiċelli ta' proteina ta 'densità għolja. Il-mitokondrija kienu kemmxejn minfuħin (kien hemm ukoll vacuoles), Hemm tnixxijiet ta 'densità medja fil-kavità, u nstabu granuli densi ta' sekrezzjoni tonda f'xi ċelloli. Fil-firien ittrattati b'acteoside, in-nukleu kien intatt meta mqabbel mal-grupp mudell. In-nukleu kien ikkonċentrat, id-densità nukleari żdiedet, l-eterokromatina akkumulata, iċ-ċitoplasma kellha vacuoles, u l-vakuoli tar-retikulu endoplasmika mhux maħduma tnaqqsu. Il-grupp ta 'acteoside b'doża baxxa kellu nuklei kemmxejn imkemmxa Tinxtorob, ċitoplasma irregolari, aktar sinjuri, u retikulu endoplasmiku mhux maħdum imnaqqas (Figura 3).
Il-benefiċċju ta' cistanche: kontra l-Apoptożi
3 Diskussjoni
L-apoptożi hija proċess ta 'mewt taċ-ċelluli programmata f'organiżmi multiċellulari li jirregola l-iżvilupp tal-ġisem u jżomm l-istabbiltà tal-ambjent intern, u l-kodiċi ġenetiċi jiddeterminawha.
Iċ-ċelloli apoptotiċi għandhom il-karatteristiċi morfoloġiċi u bijoloġiċi uniċi tagħhom: tnaqqis fil-kromatina nukleari, degradazzjoni u frammentazzjoni estensiva tad-DNA, tnaqqis fuq skala sħiħa taċ-ċelluli, tnaqqis tal-membrani taċ-ċelluli u sporġenzi ta 'barra li jkopru organelli (bħal mitokondrija u ribożomi), u l-formazzjoni ta' karatteristiċi nukleari. frammenti Korpi apoptotiċi, ċelluli apoptotiċi mhux biss iżommu struttura u funzjoni tal-membrana taċ-ċelluli kompluti iżda għandhom ukoll struttura kompleta ta 'organelli, li hija differenti minn nekrożi taċ-ċelluli.
Il-mekkaniżmu molekulari tal-apoptosi taċ-ċelluli ma ġiex spjegat bis-sħiħ s'issa. Studji [7] wrew li hemm ħafna ġeni involuti fir-regolazzjoni tal-ġeni tal-apoptosi taċ-ċelluli.
L-apoptosi huwa l-proċess ta 'BPH bħalissa qed jiġbed aktar attenzjoni. Huwa determinat mill-kodifikazzjoni tal-ġeni u jippermetti liċ-ċelloli jikkontrollaw il-mewt taċ-ċelluli billi jirrispondu għal sinjali speċifiċi [1]. Wara li l-prostata tiżviluppa għal daqs adult, ir-rata ta 'proliferazzjoni taċ-ċelloli tal-prostata tinżamm f'1 fil-mija sa 2 fil-mija permezz tal-bilanċ tar-rata tal-apoptożi. Il-qerda ta' dan il-bilanċ dejjem kienet ikkunsidrata bħala l-kawża tal-BPH [8]. Taħt kundizzjonijiet normali, il-livell ta 'estroġenu u androġenu u ċirkolazzjoni regolari fil-prostata huma tip ta' stat ta 'bilanċ personali li jeżisti fil-proċess ta' proliferazzjoni u apoptożi. Meta l-proliferazzjoni u l-apoptożi ma jkunux bilanċjati, dan jikkawża li l-glandoli jikbru u jespandu aktar, prinċipalment minħabba l-espansjoni tal-kompartiment taċ-ċelluli epiteljali [9]. L-interruzzjoni ta 'dan il-bilanċ tista' tkun dovuta għal bidliet fil-livelli jew funzjonijiet ta 'androġeni; jista' jkun ukoll minħabba kwalunkwe rispons prodott minn stimulazzjoni AR tad-DHT jew bidliet fil-livelli tal-fattur tat-tkabbir medjat mid-DHT [2]. F'dan l-istudju, FCM skopra l-apoptożi taċ-ċelluli u sabet li r-rata ta 'apoptożi taċ-ċelloli tal-prostata fil-firien li ngħataw dożi għoljin ta' acteoside żdiedet b'mod sinifikanti. Ir-riżultati tal-mikroskopija elettronika wrew li n-nuklei taċ-ċelloli tal-prostata fil-grupp tal-mudell kienu deformati, ir-retikulu endoplasmiku mhux maħdum kien estiż ħafna f'forma ta 'ċisti, u ċ-ċisti kienet mimlija b'partiċelli ta' proteina ta 'densità għolja, u nstabet vakuolazzjoni. Il-mitokondrija kienu minfuħin ħafif, u studji relatati[ 10-11 ] Ir-rapport huwa konsistenti.
Wara l-intervent ta 'acteoside, il-grad ta' iperplażja tal-prostata fil-firien kien aktar baxx. Il-grupp ta 'doża għolja wera wkoll sinjali bikrija ta' apoptożi: in-nukleu taċ-ċelluli tal-prostata baqa 'intatt, u vacuoles reticulum endoplasmic kienu sinifikament aktar baxxi. Kondensazzjoni ta 'nuklei, żieda fid-densità nukleari, akkumulazzjoni ta' eterokromatina, simili għall-karatterizzazzjoni taċ-ċelloli tat-tessut tal-prostata fil-firien wara kastrazzjoni [12-13]. Juri li acteoside mill-cistanchejista 'jikkaġuna apoptożi taċ-ċelluli fil-firien b'iperplażja tal-prostata, jirregola u jirrestawra l-bilanċ tal-apoptożi u l-proliferazzjoni taċ-ċelluli tal-prostata, u għandu rwol fl-inibizzjoni tal-proliferazzjoni taċ-ċelluli tal-prostata. Ir-riżultati ta 'dan l-istudju u studji preċedenti [14] jindikaw li l-effett inibitorju ta' acteoside, komponent kimiku ta 'Cistanche tubulosa, fuq l-iperplażja tal-prostata tista 'tkun relatata mal-promozzjoni tagħha tal-apoptożi taċ-ċelluli, it-tnaqqis tal-AR u l-espressjoni żejda ta' TGF-UR1. Il-mekkaniżmu dettaljat ta' azzjoni għad irid jiġi studjat aktar.
Benefiċċju Cistanche: ittejjeb l-immunità
Referenzi:
[1] Giacomo N, Antonio G, Ra fa el BB, et al. Infjammazzjoni, apoptożi, u BPH, x'inhi l-Evidenza [J]. Supplimenti Ewropej tal-Uroloġija, 2006(5): 401-408.
[2] Car son IC, Rittmaster R. Ir-rwol tad-dihydrotestosterone fl-iperplażja beninna tal-prostata [J]. Uroloġija, 2003, 61: 2-7.
[3] Xu Shuyun, Bian Julian, Chen Yuxiu. Metodoloġija ta' esperiment farmakoloġiku[M]. It-3 edizzjoni. Beijing: People's Medical Publishing House, 2002: 1552-1553.
[4] Zhai Qiwei, Ji Hongbin, Yan Mingda, et al. L-użu ta' sistema ta' espressjoni inducibbli tet-off biex tistudja l-funzjoni ta' Akt[J]. Bullettin tax-Xjenza Ċiniż, 2000, 45( 16): 1738-1741.
[5] Xia Anzhou, Xing Shuhua, Zhu Xuewen, et al. Studju komparattiv dwar il-metodi ta' preparazzjoni għas-sospensjoni ta' ċellula waħda tat-tessut renali [J]. Ġurnal tal-Kulleġġ Mediku Xuzhou, 2004, 24( 1):50-53.
[6] Sun Yun, Wang Dejun, Liu Xiaomei, et al. Il-bidliet tal-ultrastruttura tal-pulmun fil-ġrieden li qed jixjieħu sperimentali u l-effett ta 'Cistanche deserticola polysaccharide [J]. Bullettin Farmakoloġiku Ċiniż, 2002, 18(1): 84-87.
[7] Liu Qingming, Lu Mingzhi. Progress tar-riċerka fil-patoġenesi tal-proliferazzjoni taċ-ċelluli tal-iperplażja beninna tal-prostata u l-apoptożi [J]. Jiangxi Medical Laboratory Science, 2005, 23 ( 2): 141-143.
[8] Sharia t SF, Ashfaq R, Roehrborn CG, et al. Espressjoni ta' survivin u bijomarkaturi apoptotiċi fi iperplażma beninna tal-prostata [J]. J Urol, 2005, 174: 2046-2050.
[9] Unter G, Madersbacher S, Berg er P. Iperplażja beninna tal-prostata: mudellar mill-ġdid tat-tessuti relatat mal-età [J]. Exp Gerontol, 2005, 40: 121-128.
[10] Zheng Heng, Shao Chunli, Qian Jiaqing. L-effett inibitorju ta 'hydrochloride fuq l-iperplażja tal-prostata fil-firien [J]. Ġurnal tal-Università Medika Tongji, 1999, 28(3):227-229.
[11] Zhong Wei, Qiu Shudong, Jiang Sailing. Il-bidliet morfoloġiċi ta 'iperplażja beninna tal-prostata u d-differenza ta' espressjoni ARmRN A [J]. Ġurnal ta 'l-Università Medika ta' Xi'an, 1999,20( 2): 145-149.
[12] Niu Yuanjie, Dong Kequan, Bai Jingwen, et al. Bidliet patoloġiċi dinamiċi tal-prostata tal-klieb wara kastrazzjoni[J]. Ġurnal Ċiniż tal-Uroloġija, 1998, 19( 7): 429-433.
[13] Ye Zhangqun, Lan Ruzhu, Zhou Yusheng, et al. Bidliet dinamiċi fil-mikrostruttura tal-prostata ventrali tal-far wara l-kastrazzjoni[ J]. Ġurnal Ċiniż tal-Uroloġija, 2001,22( 8): 468-472.
[14] Sun Weidong, Chen fei, Sun yun. L-effett inibitorju ta 'Aktiside fuq mudell sperimentali ta' iperplażja beninna tal-prostata [J]. Ġurnal ta 'Yangzhou University: Agrikoltura u Xjenzi tal-Ħajja
Edizzjoni, 2008, 29(3): 55-58.