L-RNA M6 A Reader YTHDF2 Jikkontrolla l-Immunità Antitumorali U Antivirali taċ-Ċellola NK Parti 5

Iċ-ċelluli NK jużaw żewġ approċċi ewlenin biex jeqirdu ċelluli tat-tumur u ċelluli infettati bil-virus: (1) rilaxx ta 'molekuli ċitotossiċi, bħal asperforin u granzymes, li direttament jinduċu apoptosi taċ-ċelluli fil-mira jew piroptosi (Zhou et al., 2020) u (2) sekrezzjoni ta' bosta ċitokini (bħal IFN- , TNF- , u GM-CSF) u kimokini (MIP-1, MIP-1, IL-8, u RANTES) li jtejbu l-funzjoni ta 'immunità intrinsika u adattiva oħra. ċelluli (Fauriatet al., 2010; Reiter, 1993).

Iċ-ċelluli tat-tumur huma ċelluli anormali fil-ġisem tal-bniedem li jipproliferaw u jinfirxu mingħajr kontroll, u jikkawżaw ħsara kbira lil ġisimna. Biex jikkuraw it-tumuri, ħafna nies jagħżlu li jirċievu kimoterapija, radjuterapija, u trattamenti oħra. Dawn it-trattamenti jistgħu jeqirdu ċ-ċelloli tat-tumur sa ċertu punt, iżda wkoll jikkawżaw ċertu ħsara lil saħħitna, bħal li jaffettwaw il-memorja tagħna.

Il-kimoterapija bħalissa hija waħda mill-aktar metodi importanti biex jiġu trattati ċ-ċelloli tal-kanċer. Juża mediċini speċjali biex joqtol iċ-ċelloli tal-kanċer u jipprevjeni t-tkabbir u t-tixrid taċ-ċelloli tal-kanċer. Madankollu, dawn il-mediċini jistgħu wkoll jagħmlu ħsara lil xi ċelloli normali, speċjalment fil-moħħ, u għalhekk xi nies jistgħu jesperjenzaw tnaqqis sinifikanti fil-memorja tagħhom waqt li jirċievu kimoterapija.

Madankollu, m'għandniex nabbandunaw it-trattament għal din ir-raġuni. L-avvanz tax-xjenza u t-teknoloġija pprovdilna ħafna trattamenti ġodda, bħal terapija mmirata, immunoterapija, eċċ Dawn it-trattamenti jistgħu mhux biss inaqqsu l-ħsara kkawżata mill-kimoterapija lill-ġisem tagħna iżda wkoll joqtlu b'mod effettiv iċ-ċelloli tat-tumur.

Barra minn hekk, nistgħu wkoll nieħdu xi miżuri biex nipproteġu l-memorja tagħna. Pereżempju, nistgħu nsaħħu l-memorja billi neżerċitaw il-moħħ, bħal qari bir-reqqa, nitgħallmu lingwi barranin, nilagħbu logħob tal-moħħ, eċċ. Barra minn hekk, nieklu tajjeb u torqod tajjeb jistgħu wkoll jgħinu biex iżżomm memorja tajba.

Fil-qosor, hemm ċerta relazzjoni bejn iċ-ċelluli tat-tumur u l-memorja, iżda m'għandniex naqtgħu l-kura faċilment minħabba dan. Għandna nieħdu miżuri proattivi biex nipproteġu s-saħħa fiżika u l-memorja tagħna u nemmnu li l-avvanzi fit-teknoloġija jistgħu jġibulna trattamenti aħjar. Ejjew niġġieldu kontra ċ-ċelloli tat-tumur u nipproteġu s-saħħa u l-futur sabiħ tagħna! Wieħed jista 'jara li għandna bżonn intejbu l-memorja, u Cistanche deserticola jista' jtejjeb b'mod sinifikanti l-memorja, minħabba li Cistanche deserticola għandu effetti antiossidanti, anti-infjammatorji u kontra t-tixjiħ, li jistgħu jgħinu jnaqqsu l-ossidazzjoni u r-reazzjonijiet infjammatorji fil-moħħ, u b'hekk jipproteġu l- saħħa tas-sistema nervuża. Barra minn hekk, Cistanche deserticola tista 'wkoll tippromwovi t-tkabbir u t-tiswija taċ-ċelloli tan-nervituri, u b'hekk ittejjeb il-konnettività u l-funzjoni tan-netwerks newrali. Dawn l-effetti jistgħu jgħinu biex itejbu l-memorja, it-tagħlim u l-veloċità tal-ħsieb, u jistgħu wkoll jipprevjenu l-iżvilupp ta 'disfunzjoni konjittiva u mard newrodeġenerattiv.

Ikklikkja Know biex iżżid il-qawwa tal-memorja

F'dan l-istudju, osservajna mekkaniżmi mhux identiċi li bihom YTHDF2 jirregola l-immunità antitumorali u antivirali taċ-ċelluli NK. Fl-ambjent tat-tumur, YTHDF2 jippromwovi dawn is-sekrezzjoni ta 'perforin, granzyme B, u IFN- minn ċelluli NK għall-kontroll tal-metastasi tal-melanoma, filwaqt li, waqt l-infezzjoni MCMV, YTHDF2 jippromwovi attività antivirali medjata minn ċelluli NK kontra MCMV prinċipalment permezz tar-regolazzjoni tal-perforin.

Spjegazzjoni potenzjali waħda għal din id-diskrepanza hija li l-attivazzjoni taċ-ċelluli NK minn tumuri jew viruses hija regolata b'modi differenti.

MCMVattiva ċelluli NK billi tikkodifika proteina m157, ligand ta 'NK cellreceptor Ly49H (Smith et al., 2002), u jassoċja ma' żewġ adapters intraċellulari, DAP10 u DAP12 (French et al., 2006; Orr et al., 2009). Madankollu, fil-kuntest tat-tumur, l-attivazzjoni taċ-ċelluli NK hija rregolata sewwa mill-interazzjoni tagħha ma 'ligandi differenti tar-riċetturi NKcell espressi minn ċelluli tat-tumur kif ukoll minn ċitokini, bħal IL-15 u TGF- , fil-mikroambjent tat-tumur (Wu et al., 2020b).

Barra minn hekk, sibna li YTHDF2 jippromwovi l-maturazzjoni taċ-ċelluli NK billi jirregola l-Eomes. Madankollu, nstabu siti li ma jorbtux fl-mRNA ta 'Eomes, li jissuġġerixxu li YTHDF2 jirregola indirettament l-espressjoni ta' Eomes. Aktar studji huma ġġustifikati biex jinvestigaw il-mekkaniżmu li bih YTHDF2 jirregola l-espressjoni ta 'Eomes.

Barra minn hekk, kif l-YTHDF2 jirċievi u jimmedja sinjali li jistgħu jsawru malajr ir-rispons immuni taċ-ċelluli NK kontra ċ-ċelluli tal-virus jew tat-tumur b'mod differenti jeħtieġ ukoll aktar esplorazzjoni. It-trasferiment adottiv ta 'ċelluli NK alloġeniċi f'pazjenti lewkimiċi jista' jwassal għal remissjoni (Ruggeri et al., 2002).

Intwera li ċ-ċelloli NK maħdumin minn CAR jipprovdu benefiċċji sinifikanti f'limfoma CD19+ u lewkimja li rkadew jew refrattorji (Liu et al., 2020). Madankollu, l-espansjoni limitata u l-persistenza taċ-ċelluli NK in vivo, kif ukoll it-traffikar u l-infiltrazzjoni limitati taċ-ċelluli NK fis-siti tat-tumur, jibqgħu sfida ewlenija għat-terapija bbażata fuq NKcell (Yilmaz et al., 2020).

Peress li pazjenti bil-kanċer jew pazjenti infettati b'mod virali, bħal dawk b'COVID-19, normalment jgħaddu minn limfopenja temporanja (Grossman et al., 2015; Zhaoet al., 2020), espansjoni effiċjenti taċ-ċelluli NK waqt limfopenja hija kritika għall-kontroll tat-tkabbir tat-tumur u infezzjoni virali.

Is-sejbiet tagħna juru li YTHDF2 imexxi l-ħruġ taċ-ċelluli NK minn BMand jippromwovi l-proliferazzjoni omeostatika taċ-ċelluli NK waqt limfopenija in vivo fi ġrieden nieqsa minn ċelluli T, B u NK. L-istudju tagħna juri wkoll li YTHDF2 jirregola b'mod pożittiv il-funzjoni tal-effett taċ-ċelluli NK.

Għalhekk, l-inkorporazzjoni ta 'l-espressjoni YTHDF2 f'ċelluli NK jew CAR-NK jista' jkollha benefiċċji multidimensjonali għall-espansjoni taċ-ċelluli NK waqt il-manifattura in vitro, il-persistenza u t-titjib tal-funzjoni effetur in vivo. Barra minn hekk, ir-regolazzjoni 'l fuq ta' YTHDF2 li osservajna fl-issettjar tat-tumur u matul l-infezzjoni virali tista 'żżid il-kapaċità ta' NK jew CAR-NKcells li jinfiltraw fil-mikroambjent tal-marda.

IL-15 huwa regolatur ewlieni tal-iżvilupp taċ-ċelluli NK, l-omeostażi, is-sopravivenza, u l-funzjoni effettur (Becknell u Caligiuri, 2005; Mishra et al., 2014; Yu et al., 2013). Il-grupp tagħna preċedentement irrapporta mogħdija ġdida ta’ sinjalazzjoni IL-15–AKT–XBP1s li tikkontribwixxi għall-funzjonijiet effettur u s-sopravivenza taċ-ċelloli NK umani (Wang et al., 2019b). Madankollu, il-mekkaniżmu(i) eżatt(i) li bihom IL-15 jirregola s-sopravivenza taċ-ċelluli NK għadu ma ġiex mifhum bis-sħiħ.

Hawnhekk, sibna mekkaniżmu ġdid ġdid f'dak STAT5-YTHDF2 jifforma ċirku ta' feedback pożittiv 'l isfel miċ-ċelloli NK fil-ġewwa IL-15 li mbagħad jikkontrolla l-proliferazzjoni taċ-ċelluli NK, is-sopravivenza, u l-funzjonijiet effettur. Ir-rapport preċedenti tagħna wera li IL-15 ma jinduċix traskrizzjoni ta' XBP1s, u XBP1s ma jinteraġixxux ma' STAT5 fiċ-ċelloli NK (Wang et al., 2019b), li jissuġġerixxi li r-regolamentazzjoni ta' XBP1s minn IL-15 hija indipendenti minn STAT5. .

Għalhekk identifikaw żewġ medjaturi ġodda ta' IL-15 f'NKcells, XBP1s u YTHDF2, li għalihom XBP1s mhumiex regolati minn STAT5, filwaqt li YTHDF2 huwa dipendenti STAT5. Din il-kumplessità tas-sinjalar IL{7}} karatterizzat tista' taqbel mar-rwol kumpless u plejotropiku tal-IL-15, li huwa komponent ewlieni kemm tal-ambjent infjammatorju fil-mikroambjent tat-tumur kif ukoll tar-rispons għall-infezzjoni virali (Nguyen et al., 2002; Santana Carreroet al., 2019).

Il-kumplessità hija riflessa wkoll f'dak id-defiċjenza ta' Ythdf2 ma taffettwax is-sopravivenza u l-proliferazzjoni ta 'ċelluli NK ta' mistrieħ in vivo, filwaqt li YTHDF2 għandu rwol kritiku fir-regolazzjoni tal-proliferazzjoni u/jew is-sopravivenza ta 'ċelluli NK attivati ​​minn IL-15 jew permezz ta' infezzjoni MCMV .

L-istudju tagħna jappoġġja wkoll il-kunċett li l-modifiki YTHDF2 jew m6A b'mod ġenerali għandhom rwol aktar ċentrali fid-dinamika taċ-ċelluli NK fl-istat attivat u/jew fl-issettjar tal-mard.

F'dan l-istudju, applikajna strateġija multi-omics (RNA-seq, m6A-seq, u RIP-seq) biex nidentifikaw il-miri ta 'YTHDF2 f'NKcells.

F'konformità mas-sejba tagħna li ċelluli NK defiċjenti Ythdf2-urew dewmien sinifikanti fit-tkabbir taċ-ċelluli, sibna għadd kbir ta' ġeni relatati maċ-ċiklu taċ-ċelluli u d-diviżjoni taċ-ċelluli li naqsu b'mod sinifikanti fiċ-ċelloli Ythdf2ΔNK NK, li jissuġġerixxu li YTHDF2 jikkontrolla t-tkabbir taċ-ċelluli billi jirregola ċ-ċiklu taċ-ċelluli. . Ta 'min jinnota, il-modifiki m6A kienu involuti b'mod wiesa' fir-regolazzjoni taċ-ċiklu taċ-ċelluli.

METTL3 jippromwovi t-tkabbir taċ-ċelluli fil-lewkimja majelojde akuta billi jsaħħaħ it-traduzzjoni tal-ġeni fil-passaġġ taċ-ċiklu taċ-ċelluli (Barbieri et al., 2017; Vu et al., 2017). It-tħassir ta 'METTL14 testendi n-newroġenesi kortikali fi stadji ta' wara t-twelid billi tittawwal it-tranżizzjoni tal-fażi S-to-M taċ-ċelloli glial radjali (Yoonet al., 2017).

B'mod konsistenti mal-istudju tagħna, ġie rrappurtat li ċ-ċelloli inHeLa, YTHDF2 jimmira mogħdijiet involuti mhux biss fil-funzjoni molekulari iżda wkoll fil-proliferazzjoni u s-sopravivenza taċ-ċelluli (Wanget al., 2014).

Fei et al. (2020) reċentement irrappurtaw li YTHDF2 jippromwovi l-proliferazzjoni taċ-ċelluli possibilment billi jiffaċilita d-degradazzjoni tal-mRNA matul iċ-ċiklu taċ-ċelluli fiċ-ċelloli HeLa, li jissuġġerixxi mekkaniżmu(i) universali ta 'YTHDF2 jew il-modifiki m6A assoċjati tiegħu fiż-żamma tas-sopravivenza u l-funzjoni taċ-ċelluli. Minħabba li miljuni ta 'ċelluli huma meħtieġa għall-analiżi tal-istrateġija multi-omika, kellna niddependu fuq NKcells estiżi ex vivo u proliferattivi ħafna.

Dan jista 'jispjega l-osservazzjoni li l-miri skrinjati ta' YTHDF2 huma prinċipalment ġeni taċ-ċiklu taċ-ċelluli, filwaqt li miri potenzjali li jikkontrollaw is-sopravivenza taċ-ċelluli, il-funzjoni effettur, u l-maturazzjoni taċ-ċelluli NK ma ġewx murija. Indipendentement, aħna nemmnu li d-dejta tagħna tipprovdi l-ewwel evidenza li l-miri YTHDF2 jikkontribwixxu għal proċessi taċ-ċiklu taċ-ċelluli u tad-diviżjoni taċ-ċelluli fiċ-ċelloli immuni, partikolarment fiċ-ċelloli NK.

Bħala konklużjoni, skoprejna rwol mhux magħruf qabel tal-metilazzjoni ta 'YTHDF2 jew m6A bħala regolatur pożittiv ta' attività taċ-ċelluli NK u antivirali kif ukoll omeostażi u maturazzjoni taċ-ċelluli NK. Dawn is-sejbiet jipprovdu ħarsa lejn kif NKcells istħarriġ b'mod effettiv kontra metastasi tat-tumur u infezzjoni virali permezz ta 'm6A mRNA methylation.Materials and methodsMiceYthdf2fl/fl ġrieden kienu ġġenerati mil-laboratorju ta' J. Chen.

Fil-qosor, il-kostruzzjoni tad-donatur kienet iddisinjata biex tiġġenera mutazzjoni kondizzjonali ta' ġene fil-mira speċifika ma' elettroporazzjoni (rikombinazzjoni omologa) fiċ-ċelloli staminali embrijoniċi tal-ġrieden. Il-cassette ta' mira (En2SA-IRES-LacZ-pA-hBactP-Neo-pA) hija akkumpanjata minn enzima ta' rikombinazzjoni flippase (Flp) – siti ta' rikombinazzjoni ta' mira ta' rikonoxximent, li tippermetti t-tneħħija tal-cassette ta' mira ma' Flp recombinase.

Par ta 'loxP huwa wkoll introdott madwar ir-raba' eson ta 'Ythdf2, li jintuża għat-tħassir kondizzjonali tar-raba' eson ta 'Ythdf2 mill-Cre recombinase. Ġrieden bl-allel floxed (Ythdf2fl/fl) ġew iġġenerati billi qasmu l-ġrieden F1offspring mal-ġrieden ROSA26-FlpE (stock nru 003946; TheJackson Laboratory). Il-ġrieden Ythdf2fl/fl ġew imqassma għal C57BL/6 għal mill-inqas 10 ġenerazzjonijiet qabel ma ntużaw għal kwalunkwe esperiment.

Il-ġrieden Ncr1-iCre kienu rigal minn Eric Vivier (Centre d'Immunologie de Marseille-Luminy, Marsilja, Franza; NarniMancinelli et al., 2011). Il-ġrieden Rag2−/−Il2rg−/− ġew ipprovduti mill-faċilità tal-annimali f'City of Hope. Ġrieden NCI B6-Ly5.1/Cr (CD45.1ġrieden) inxtraw minn Charles River Laboratories. IL-15Tgmice ġew ġġenerati mill-grupp tagħna u backcrossed għall-isfond C57BL/6 (Fehniger et al., 2001). Ġrieden Stat5fl/fl kienu oriġinarjament minn John J. O'Shea (Istitut Nazzjonali tal-Artrite u l-Mard Muskoloskeletali u tal-Ġilda, Bethesda, MD; Cui et al., 2004).

Stat5fl/fl Ncr1-iCre mice were generated in the laboratory of J.C. Sun (Wiedemann et al., 2020). All mice were on a C57BL/6 background for >10 ġenerazzjonijiet. Għall-esperimenti ntużaw ġrieden maskili u femminili ta' 6–12-ġimgħat. Littermates Cre-negattivi ntużaw bħala WTcontrols. L-esperimenti kollha fuq l-annimali ġew approvati mill-kumitat istituzzjonali għall-kura u l-użu tal-annimali City ofHope.

For more information:1950477648nn@gmail.com