Il-Potenzjal Dijanjostiku tal-Proteini Amyloidogenic Parti 2

4.1. Livelli ta' Proteini Amyloidogenic fin-Newrodegeneration

S'issa, l-aktar strateġiji ta' skoperta komuni jsondaw proteini amilojdoġeniċi speċifiċi, irrispettivament mill-konformazzjonijiet jew PTMs tagħhom, li jipprovdu informazzjoni dwar l-ammont totali ta 'proteina amilojdoġenika f'kundizzjonijiet ta' mard.

Ir-relazzjoni bejn il-mard u l-memorja hija suġġett ta 'tħassib kbir u hija ta' sinifikat kbir għas-saħħa tal-bniedem. Il-memorja tajba hija manifestazzjoni tal-għerf tal-bniedem, li tista 'tgħinna nipproċessaw l-informazzjoni aħjar u nieħdu deċiżjonijiet b'mod aktar preċiż. Fil-ħajja, ħafna nies ħafna drabi jinkwetaw li xi mard se jagħmel ħsara lill-memorja tagħhom, iżda fil-fatt, attitudni pożittiva lejn il-ħajja u drawwiet ta 'għajxien sani jistgħu jgħinuna nipproteġu l-memorja tagħna u nevitaw diversi mard.

L-ewwel, irqad tajjeb jista 'jgħin biex iżżomm il-memorja. Studji wrew li l-irqad huwa parti ewlenija mis-sistema tal-memorja tal-moħħ, inklużi l-kodifikazzjoni, il-preservazzjoni u l-proċess tal-memorja. In-nuqqas ta 'rqad jista' jkollu effetti negattivi fuq dawn il-proċessi, li jwassal għal telf ta 'memorja. Għalhekk, iż-żamma ta 'ħin ta' rqad biżżejjed kuljum tista 'tgħin biex tnaqqas it-tnaqqis tal-memorja.

It-tieni nett, dieta tajba hija wkoll essenzjali biex tinżamm il-memorja. Il-ġisem tal-bniedem jeħtieġ nutrijenti biex jitrama l-ġisem u l-moħħ, u ikel li jista 'jtejjeb il-memorja jinkludi ġewż, ħut, frott u ħxejjex. Il-ġewż huwa rikk fil-proteini u l-aċidi grassi, li jistgħu jippromwovu l-iżvilupp b'saħħtu tan-nervituri tal-moħħ. Il-ħut fih ħafna aċidi grassi omega-3, li huma ta' benefiċċju għas-saħħa tas-sistemi kardjovaskulari u nervużi. Barra minn hekk, il-frott u l-ħaxix huma sinjuri fl-antiossidanti, li jgħinu jipprevjenu indeboliment konjittiv u mard bħall-Alzheimer.

Fl-aħħarnett, attitudni pożittiva u eżerċizzju fiżiku jistgħu jgħinu wkoll biex iżżomm il-memorja. Emozzjonijiet pożittivi u ħsieb pożittiv jistgħu jtejbu l-kapaċità konjittiva tal-moħħ, jattivaw konnessjonijiet newrali u proliferazzjoni taċ-ċelluli fil-moħħ, u b'hekk jgħinu biex itejbu l-memorja. Barra minn hekk, eżerċizzju regolari jista 'jippromwovi ċ-ċirkolazzjoni tad-demm u l-kunsinna ta' ossiġnu, li huwa ta 'benefiċċju għas-saħħa tal-moħħ. Metodi ta 'fitness tradizzjonali bħall-yoga, it-Tai Chi, u l-mediċina Ċiniża jistgħu wkoll jgħinu biex itaffu t-tensjoni u jippromwovu s-saħħa fiżika u mentali.

Fil-qosor, għalkemm hemm ċerta relazzjoni bejn il-mard u l-memorja, attitudni pożittiva lejn il-ħajja u drawwiet ta 'għajxien sani jistgħu jgħinuna jipprevjenu u ttaffi l-ħsara lill-memorja kkawżata minn diversi mard. Għalhekk, għandna dejjem inżommu attitudni tajba, neżerċitaw b'mod attiv, nieklu dieta raġonevoli, u nżommu drawwiet ta 'għajxien b'saħħithom, biex nimxu lejn ħajja b'saħħitha u kuntenta. Wieħed jista 'jara li għandna bżonn intejbu l-memorja, u Cistanche jista' jtejjeb b'mod sinifikanti l-memorja minħabba li Cistanche għandu effetti antiossidanti, anti-infjammatorji u kontra t-tixjiħ, li jistgħu jgħinu jnaqqsu l-ossidazzjoni u r-reazzjonijiet infjammatorji fil-moħħ, u b'hekk jipproteġu s-saħħa tal- sistema nervuża. Barra minn hekk, Cistanche jista 'wkoll jippromwovi t-tkabbir u t-tiswija taċ-ċelloli tan-nervituri, u b'hekk itejjeb il-konnettività u l-funzjoni tan-netwerks newrali. Dawn l-effetti jistgħu jgħinu biex itejbu l-memorja, il-ħila tat-tagħlim, u l-veloċità tal-ħsieb, u jistgħu wkoll jipprevjenu l-okkorrenza ta 'disfunzjoni konjittiva u mard newrodeġenerattiv.

Ikklikkja taf modi biex ittejjeb il-funzjoni tal-moħħ

Dawn il-metodi huma partikolarment effettivi meta l-mekkaniżmu patoloġiku jiddependi fuq mutazzjonijiet ġenetiċi (eż. meta varjant ġenetiku ta’ proteina jiġi espress speċifikament f’pazjenti, Tabella 2), livelli ta’ espressjoni ta’ proteina (eż., meta l-espressjoni ta’ proteina tinbidel b’mod sinifikanti fil-pazjenti), jew lokalizzazzjoni ħażina (eż. meta proteina takkumula f’reġjuni speċifiċi tal-ġisem f’pazjenti).

Fil-każ ta 'AD, esperimenti inizjali ffukaw fuq il-kejl tal-konċentrazzjoni CSF ta' A totali. Madankollu, ma nstabet l-ebda differenzi sinifikanti bejn il-pazjenti u l-kontrolli [33].B'kuntrast, ġew osservati differenzi sinifikanti għat-tau totali.

Ir-riċerkaturi sabu żieda qawwija fit-tau totali fis-CSF ta’ pazjenti AD meta mqabbla ma’ kontrolli b’saħħithom [67]. Għalkemm hemm rabta ċara bejn il-konċentrazzjoni ta’ tau fis-CSF u l-AD, konċentrazzjonijiet ogħla ta’ tau huma osservati wkoll fi puplesija akuta, trawma fil-moħħ. , u forom oħra ta 'dimenzja [66,68], li jagħmlu d-dijanjosi speċifika għall-marda ta' sfida [44,66].

Fil-każ tal-PD, instab li -syn huwa preżenti f'konċentrazzjonijiet kemmxejn aktar baxxi fis-CSF ta 'pazjenti meta mqabbla ma' individwi b'saħħithom fi studji ta 'koorti żgħar [68-70]. Dan ġie osservat ukoll fil-plażma u fil-bżieq.

Fi studji akbar, CSF -syn għandu konċentrazzjoni ferm aktar baxxa minn kontrolli b'saħħithom [69]. Din il-konċentrazzjoni aktar baxxa ta 'fluwidi tal-ġisem inaċċessibbli -syn tista' tkun konsegwenza tal-aggregazzjoni intraċellulari tal-proteina [69]. Madankollu, l-użu ta '-syn waħdu mhuwiex biżżejjed bħala bijomarkatur wieħed għad-dijanjosi tal-PD [69]. Minħabba l-konċentrazzjoni baxxa tiegħu, TDP-43 huwa ta' sfida biex jitkejjel b'mod affidabbli fid-demm [71,72].

Madankollu, fis-CSF, intwera li l-konċentrazzjoni ta' TDP{{0}} hija ogħla f'pazjenti ALS (6.92 ± 3.71 ng/mL) milli f'suġġetti b'saħħithom (5.31 ± 0.94 ng/mL) u nies affettwati minn oħrajn. kundizzjonijiet, pereżempju, PD, sklerożi multipla, u Guillain-Barrésyndrome [73].

Studji reċenti ssuġġerew li TDP-43 preżenti fis-CSF jista' jkun abijomarkatur għad-dijanjosi ta' ALS, ALS/FTD iżda mhux għal FTD waħdu [74,75]. B'mod partikolari, għandu jiġi nnutat li l-proteini, inkluż TDP-43, jistgħu jinfirxu mid-demm fis-CSF.

Barra minn hekk, TDP-43 huwa wkoll abbundanti f'partijiet oħra tal-ġisem minbarra l-moħħ [54,76]. Għalhekk, TDP-43 fis-CSF jista' joriġina minn reġjuni oħra tal-ġisem u jista' ma jirrappreżentax b'mod adegwat il-patoloġija tal-moħħ fl-FTD. Bħalissa, l-isforzi tar-riċerka qed jiffokaw fuq il-monitoraġġ tat-TDP-43 li jinsab fl-eżosomi tas-CSF, li huma derivati ​​mill-moħħ u għalhekk jirrappreżentaw aħjar il-patoloġija tal-moħħ [77].

B'mod ġenerali, s'issa, minkejja evidenza konvinċenti tal-fatt li l-espressjoni tal-proteina u l-konċentrazzjonijiet huma mibdula fil-mard, l-istħarriġ tal-konċentrazzjoni totali tal-proteina waħdu ma wassalx għal approċċ dijanjostiku adottat b'mod wiesa '.

4.2. PTMs Assoċjati man-Newrodegeneration

Kif issemma qabel, il-PTMs jaffettwaw il-propensità ta 'aggregazzjoni tal-proteini amilojdoġeniċi u għandhom rwol kritiku fil-mekkaniżmu patoloġiku ta' mard newrodeġenerattiv [27,28].

Barra minn hekk, PTMs jinstabu wkoll f'kampjuni bijoloġiċi minn pazjenti [27-29]. PTMs aberranti jistgħu jseħħu ħafna qabel sintomi klinikament osservabbli. Din l-osservazzjoni tagħmel PTMs potenzjalment adattati biex jintużaw bħala bijomarkaturi għal dijanjosi bikrija (Tabella 1).

4.2.1. Frammentazzjoni u Clevage

Il-qsim tal-proteini huwa PTM assoċjat b'mod komuni mal-aggregazzjoni tal-amilojde u ġie investigat b'mod estensiv kemm in vitro kif ukoll in vivo. Fl-AD, pereżempju, bosta frammenti APP ġew marbuta mal-marda, A 42 u A 40 huma l-aktar investigati b'mod estensiv. Madankollu, forom oħra ta 'A għandhom ukoll potenzjal dijanjostiku, inklużi A 37, A 38, A 39, u A 43 [32].

Instab li l-konċentrazzjoni tas-CSF ta 'A 42 hija aktar baxxa f'pazjenti AD milli fil-kontrolli f'madwar 50% tal-każijiet [78].

Madankollu, bħalissa, il-proporzjon tal-konċentrazzjoni tas-CSF A 42/A 40 huwa kkunsidrat dijanjostikament aktar preċiż, peress li jqis il-varjazzjonijiet fiżjoloġiċi inter-individwali tal-espressjoni tal-proteini [78,103].

Minbarra A 40 u A 42, il-konċentrazzjoni ta 'A 43 hija aktar baxxa fis-CSF ta' pazjenti b'AD li jibda kmieni, iżda wkoll f'pazjenti b'indeboliment konjittiv ħafif u forom oħra ta 'dimenzja [79].

Għall-kuntrarju, A 38 huwa preżenti f'konċentrazzjonijiet ogħla f'pazjenti AD u jiddiskrimina speċifikament AD minn forom oħra ta 'dimenzja [66]. Għalhekk, il-proporzjon A 42/A 38 jista' jikkorrelata ma' tipi differenti ta' dimenzja u jintuża f'approċċi dijanjostiċi ta' skoperta kkombinati [103,104].

Minkejja li -syn u TDP-43 jistgħu wkoll jgħaddu minn frammentazzjoni, li għandha rwol fil-mekkaniżmi patoloġiċi tagħhom, ftit studji kienu skoprew iżoformi maqtugħin -synand TDP-43 fil-fluwidi tal-ġisem, u r-rwoli tagħhom bħala bijomarkaturi potenzjali baqa mhux magħruf [28,54,105,106].

4.2.2. Fosforilazzjoni

F'A, il-fosforilazzjoni ta 'Ser8 u Ser26 huwa maħsub li jżid l-abbundanza u l-istabbiltà ta' aggregati tossiċi. L-arrikkiment ta' dawn il-modifiki fl-ispeċi oligomeriċi A, meta mqabbel mal-monomeri, intwera bl-użu ta' antikorpi mono- jew poliklonali speċifiċi għall-fosfru [80,81].

Bħala konsegwenza ta 'iper-fosforilazzjoni, tau jiddissoċja mill-mikrotubulinetwork u l-aggregati. Għalhekk, il-fosforilazzjoni tau hija kkunsidrata bħala avveniment ewlieni fil-formazzjoni ta 'NFT [27].

F'dawn l-aħħar snin, ġew żviluppati diversi antikorpi biex jirrikonoxxu speċifikament p-tau u ġew żviluppati varjetà ta 'protokolli ELISA għal epitopi fosforilati differenti.

Riċentement, p-tau f'Thr217 (p-tau217) intwera li huwa bijomarkatur robust fil-plażma [86] u CSF [107] għall-AD peress li jiddistingwi AD minn mard newrodeġenerattiv ieħor inkluż tawopatiji oħra. Bl-istess mod, -syn huwa wkoll fosforilati f'ħafna residwi. Tajjeb li wieħed isemmi huwa l-varjant ta '-syn li jġorr il-fosforilazzjoni ta' Ser129 (p- -syn129).

Din il-modifika sseħħ minn kinases multipli u taffettwa l-aggregazzjoni u t-tossiċità ta '-syn kemm in vitro [95,96] kif ukoll in vivo [108]. Spettrometrija tal-massa (MS) u esperimenti bbażati fuq antikorpi sabu li LBs iżolati mill-imħuħ tal-pazjenti PD huma arrikkit f'p- -syn129.

Huma wrew ukoll li l-konċentrazzjoni ta' p- -syn129 fil-fluwidi tal-ġisem hija ogħla f'pazjenti b'PD u tikkorrelata mas-severità tal-marda [109,110]. Il-kwantifikazzjoni ta 'p- -syn129, flimkien ma' total -syn, fis-CSF ġiet ssuġġerita biex tgħin l-immudellar tal-PD u potenzjalment id-dijanjosi differenzjali tal-PD minn Parkinsonisms oħra [110,111].

Ġew żviluppati diversi antikorpi li huma speċifiċi għal TDP fosforilat-43 (eż. f'Ser409 uSer410).

Madankollu, TDP-43 jgħaddi minn diversi modifiki oħra, u l-istħarriġ biss tal-istat ta' fosforilazzjoni tal-proteina ma jiddeskrivix b'mod preċiż l-istat tal-marda. Approċċi ta' skoperta li bħalissa qed jiġu żviluppati jinvolvu l-użu kombinat ta' antikorpi differenti li jimmiraw modifiki u konformazzjonijiet differenti ta' TDP-43 [75,77].

4.2.3. Aċetilazzjoni

L-aċetilazzjoni hija PTM maġġuri oħra involuta fl-AD. Ġie rrappurtat li l-livelli ġenerali ta' aċetilazzjoni ta' A 42- u tau-aggregati huma ogħla b'mod sinifikanti f'ADhippocampus meta mqabbla ma' suġġetti b'saħħithom [112].

Barra minn hekk, bosta studji wrew li l-aċetilazzjoni ta 'Lys16 u Lys28 ta' A t-tnejn jibdlu l-aggregazzjoni tal-peptidein vitro [38]. B'mod partikolari, l-aċetilazzjoni ta 'Lys16 twassal għall-formazzjoni ta' aggregati amorfu minflok amyloids [38,39].

Tau jgħaddi minn aċetilazzjoni f'diversi residwi. B'mod partikolari, l-aċetilazzjoni f'Lys174, Lys274, u Lys280 rċevew l-aktar attenzjoni peress li dawn intwerew li jirregolaw ukoll il-funzjoni tal-proteina [87].

Fost dawn il-modifiki, Lys280 kien speċifikament foundacetylated fil-ġrieden transġeniċi u fit-tessuti tal-hippocampus tal-pazjenti [87].Fil-każ ta 'PD u dimenzja b'LBs (DLB), ġie rrappurtat li t-tessuti tal-moħħ (kortiċi temporali u kortiċi prefrontali dorsolaterali) minn pazjenti fihom solubbli andaggregated N-terminally acetylated -syn [113].

L-aċetilazzjoni N-terminal instabet li tbiddel b'mod sinifikanti l-istruttura tal-monomeriku -syn in vitro. Dan PTM jinduċi thehelical tiwi tal-N-terminal ta '-syn [97], li ġie ssuġġerit li jippromwovi l-assoċjazzjoni patoloġika tal-proteina mal-membrani [114].TDP-43 hija proteina oħra li tgħaddi minn aċetilazzjoni.

Dan il-PTM iħassar l-RNAbinding u jippromwovi l-aggregazzjoni tal-proteina. B'mod partikolari, TDP-43 atLys145 aċetilat jista' jiġi skopert f'leżjonijiet f'pazjenti ALS iżda mhux FTD, li jissuġġerixxi li l-aċetilazzjoni TDP-43 kienet marbuta mal-patoġenesi tal-ALS u tista' tintuża biex tiddiskrimina l-ALS mill-FTD, li hija ta' għajnuna bħala bijomarkatur jekk jinstab faċilment fil-fluwidi tal-ġisem [29].

4.2.4. Ossidazzjoni u Nitrazzjoni

L-istress ossidattiv ġie deskritt bħala fattur li jikkontribwixxi fil-mard newrodeġenerattiv [115]. F'AD, l-ossidazzjoni ta 'A f'Met35 ġiet skoperta post-mortem fl-okcipitalcortex f'pazjenti AD [116].

Madankollu, intweriet li din il-modifika tnaqqas ir-ritmu tal-aggregazzjoni tal-proteina in vitro [30,82] u se jkunu meħtieġa aktar investigazzjonijiet biex jiġi ċċarat ir-rwol eżatt fil-marda. Minflok ma jimmiraw għall-proteini amilojdoġeniċi ossidizzati, l-approċċi dijanjostiċi attwali jiffokaw prinċipalment fuq il-kejl tal-bijomarkaturi tal-istress ossidattiv (eż., prodotti ta 'ossidazzjoni u metaboliti speċifiċi) [115].

Madankollu, dawn il-bijomarkaturi mhumiex speċifiċi għan-newrodeġenerazzjoni, peress li l-istress ossidattiv huwa wkoll indott minn infjammazzjoni u fil-kuntest ta 'diversi patoloġiji, inkluż il-kanċer [115]. L-iżvilupp ta' antikorpi diretti kontra proteini amilojdoġeniċi ossidizzati, bħal tau u TDP-43, flimkien ma' approċċi sensittivi ħafna jista' jgħin fid-dijanjosi.

Instabet in-nitrazzjoni tar-residwi Tyr f'diversi proteini amilojdoġeniċi minn kampjuni tal-pazjenti (eż., Tyr10 f'A, Tyr29 f'tau, Tyr39 f'-syn) [28,30,37,89].

B'mod partikolari, instab li l-livelli nitrati -syn fiċ-ċelloli tad-demm periferali (monoċiti u eritroċiti) huma speċifikament ogħla f'pazjenti b'PD. Għalhekk, din il-modifika bħalissa hija meqjusa bħala bijomarkatur dijanjostiku potenzjali, għalkemm huma meħtieġa studji fuq skala akbar [99,117].

Molekuli ta 'stress nitrosattiv bħalissa huma vvalutati bħala bijomarkaturi potenzjali. Madankollu, ukoll f'dan il-każ, mhumiex speċifiċi għan-newrodeġenerazzjoni, u hija meħtieġa aktar investigazzjoni [118].

4.2.5. Glikosilazzjoni

Studji sabu A O-glycopeptides qosra (A 1-15 sa 20) f'kampjuni AD CSF u ssuġġerew li jistgħu jkunu bijomarkaturi utli, u l-profili u l-konċentrazzjonijiet tal-glycopeptide jeħtieġ li jiġu kkonfermati fi studji prospettivi ħafna akbar [119] (Tabella 1 ).

Tau intwera wkoll li jgħaddi minn N- u O-glycosylation. Interessanti, l-O-glycosylation għandha mekkaniżmu protettiv kontra l-iperfosforilazzjoni u l-formazzjoni ta 'PHF [91]. Livelli aktar baxxi ta 'O-glycosylated tau jinstabu fl-imħuħ AD meta mqabbla ma' kontrolli b'saħħithom [91].

B'kuntrast, N-glycosylation intwera li tiffaċilita l-iperfosforilazzjoni tau, u b'hekk tippromwovi l-akkumulazzjoni tagħha f'PHF. N-glycosylation instabet imħuħ AD inumani, iżda mhux fl-imħuħ ta 'kontroll, li tista' tkun modifika rilevanti għad-dijanjosi [83].

Fil-PD, glycosylated O-linked ma 'N-acetylglucosamine ta' -syn instab ukoll in vivo [100].

Approċċi dijanjostiċi bbażati fuq l-iskoperta ta 'proteini amilojdoġeniċi glycosylated għadhom fil-biċċa l-kbira mhux esplorati u tekniki ġodda qed jiġu żviluppati. Il-valutazzjoni tal-mudelli ta 'glycosylation f'pazjenti tinkludi N-glycome profiling bl-użu ta' glycoblotting u MS [120,121].

4.2.6. Ubikwitinazzjoni

Ubiquitin tikkettja proteini mitwija ħażin u timmirahom għad-degradazzjoni permezz tas-sistema theubiquitin-proteasome. Huwa maħsub li akkumulazzjoni anormali ta 'amilojdi tista' tirriżulta mill-alterazzjoni tal-mogħdija ubiquitin-proteasome [122].

Instab li l-ubiquitin huwa preżenti f'konċentrazzjonijiet ogħla fit-tessuti kortiċi tal-pazjenti AD meta mqabbla ma 'kontrolli b'saħħithom [122,123]. Għalkemm studji bikrija wrew li l-maġġoranza tal-ubiquitination isseħħ meta t-tau jiġi aggregat fit-tħabbil, l-ubiquitin instab ukoll f'tau solubbli, pereżempju, permezz tal-konjugazzjoni Lys63 [92,93].

Notevolment, Lys48 u, partikolarment, Lys63-polyubiquitination marbuta, kif ukoll modifiki monoubiquitin instabu li jikkontribwixxu għall-bijoġenesi tat-tħabbil.

Analiżi ulterjuri jistgħu jiffokaw fuq is-sejbien ta' Lys63 ubiquitinated tau biex jevalwaw il-valur dijanjostiku tiegħu [94]. -Syn jinstab, mono-, di- u tri-ubiquitinated, f'LBs mit-tessuti kortikali tal-imħuħ tal-pazjenti DLB awtopsijati [124].

Filwaqt li l-ubiquitination f'Lys6, Lys12, Lys21, Lys43, u Lys96 intwera li għandha effett inibitorju fuq il-formazzjoni tal-fibri, ubiquitinationat Lys10 u Lys23 għandha l-effett oppost u jista 'jkollha rwol patoloġiku.

Madankollu, il-preżenza tagħhom fil-fluwidi tal-ġisem u l-konnessjoni mal-patoloġija tal-PD għadhom mhux magħrufa [28].Ubikwitinated TDP-43 huwa komponent ewlieni tal-aggregati f'madwar 50% tal-FTDcases u 97% tal-każijiet ALS, u jidher li huwa downstream. tal-fosforilazzjoni. Madankollu, l-effetti ta' ubikwitinazzjoni fuq l-aggregazzjoni ta' TDP-43 għad iridu jiġu ċċarati aktar [29].

Bħalissa, approċċi dijanjostiċi potenzjali jiffokaw fuq il-kejl ta 'ubiquitin mhux konjugat ħieles aktar milli proteini ubikwitinati fis-CSF [125]. Ġie osservat li l-ammont ta 'ubiquitin fis-CSF jirrifletti n-numru ta' aggregati ta 'proteini fil-moħħ u jista' jservi bħala bijomarkatur [125,126].

4.3. Aggregati tal-Amyloid u Sondi Sensittivi għall-Amyloid

Bħalissa, l-isforzi ta 'riċerka li qed jiżdiedu qed jiffokaw fuq il-ġenerazzjoni ta' għodod bijomolekulari biex jiġu mmirati konformazzjonijiet aggregati speċifiċi (Figura 2). Ir-raġunament sottostanti din l-istrateġija tikkonsisti mill-fatt li l-proteini amilojdoġeniċi huma ġeneralment tossiċi ħażin meta jkunu monomeriċi, filwaqt li t-tossiċità tagħhom tiżdied b'mod sinifikanti meta jiġu aggregati [13].

Evidenza riċenti turi li l-oligomeri huma partikolarment tossiċi [13], għalhekk, biex tiġi mmonitorjata l-progressjoni u s-severità tal-mard newrodeġenerattiv, wieħed jista’ speċifikament jikkwantifika l-konċentrazzjoni tal-amyloids u/jew tal-oligomeri (Tabella 2, Figura 3).

F'dan il-kuntest, ġew żviluppati bosta sondi għall-amilojdi u aggregati li jixbħu l-amilojdi, inklużi sondi fluworexxenti ta 'molekula żgħira, antikorpi selettivi għall-konformazzjoni, u aptamers [127-130].

B'mod partikolari, studji ta 'molekula waħda li jużaw molekuli fluworexxenti sensittivi għall-amilojde kienu kapaċi jissondaw aggregati solubbli individwali preżenti fil-fluwidi tal-ġisem tal-pazjenti.

Għal doso, intużaw molekuli żgħar, bħal thioflavin T (ThT), li jżidu l-fluworexxenza tagħhom meta jorbtu mal-komponent cross- -sheet tal-amyloids. Bl-użu ta' dan l-approċċ, ir-riċerkaturi rnexxielhom jikkwantifikaw aggregati li jixbħu l-amilojdi solubbli f'kampjuni ta' AD u PDCSF [131,132].

Minbarra ThT, ġew żviluppati molekuli oħra bi proprjetajiet fluworexxenti simili, inklużi rotors molekulari [133,134], bħal thioflavin X [135].

Minbarra dawn is-sondi ta 'molekula żgħira, ġew żviluppati bijomolekuli speċifiċi għolja, bħal frammenti ta' antikorpi u aptamers li kapaċi jissondaw oligomeri ta 'proteini differentiamyloidogenic [127,136,137].

Riċentement, mikroskopija ta 'super-riżoluzzjoni b'aptamer speċifiku għall-amilojde u akkumulazzjoni ta' punt tad-DNA fit-topografija nanoskala kienet kapaċi tiskopri -syn u A aggregati f'kampjuni minn pazjenti PD mingħajr il-ħtieġa ta 'fluorophore konjugat [138].

Tradizzjonalment, l-antikorpi ġew iġġenerati bl-użu ta 'tekniki stabbiliti sew in vivo permezz ta' teknoloġiji ta 'immunizzazzjoni u ibridoma [139,140] jew in vitro bl-użu ta' teknoloġiji tal-wiri [141].

L-emerġenza ta 'metodi ġodda ta' skoperta ta 'antikorpi in silico ippermetta l-ġenerazzjoni ta' antikorpi b'mod effettiv fl-ispiża u fil-ħin [142]. AbDesign, algoritmu bbażat fuq l-istruttura li jutilizza disinn kombinatorju u bbażat fuq l-enerġija, kien ta’ suċċess fit-tfassil ta’ frammenti ta’ antikorpi li jimmiraw għall-insulina u l-proteina mikobatterjali aċil trasportatur [143].

Saru suċċessi simili bl-użu ta' proċeduri bbażati fuq l-istruttura bħal OptMAVen [144] u disinn ta' antikorpi Rosetta [145]. Aktar reċentement, il-Metodu Cascade [128] ġie żviluppat biex jiddisinja peptidi komplementari għal epitopet fil-mira li jista 'jitlaqqam mar-reġjun li jiddetermina l-komplimentarjetà ta' scaffold ta 'antikorpi.

Il-metodu Cascade kien impjegat qabel fit-tfassil ta 'antikorpi speċifiċi għall-konformazzjoni biex jimmiraw l-amilojdi A 42 u l-oligomeri [127,146].

4.4. PET Neuroimaging ta 'Amyloids fil-Moħħ

L-immaġini tal-PET tutilizza radjotraċċaturi biex teżamina l-preżenza ta 'amyloids fil-moħħ in vivo [147]. Ir-radjutracers huma kkaratterizzati minn lipofiliċità għolja, li tippermettilhom jgħaddu mill-barriera tad-demm-moħħ.

Il-kompost B ta 'Pittsburgh (11C-PiB) huwa fluworexxentanalog ta' ThT u l-ewwel intuża biex jintraċċa fibri tal-amilojde bl-użu tal-PET fl-2004. 11C-PiB bħalissa huwa fost ir-radjuligands l-aktar użati għall-immaġini tal-PET tal-patoloġija ċerebrali A [148] (Tabella 2) .

Amyloid-PET jista 'jiddistingwi d-dimenzja minn indeboliment konjittiv ħafif u tixjiħ normali. Madankollu, ma tistax tiddiskrimina kontra forom differenti ta’ dimenzja. Barra minn hekk, dawn it-tekniki huma għaljin, u r-radjutracers li jintużaw klinikament bħalissa jirriflettu biss il-livell ta' aggregati li ma jinħallux fil-moħħ.

B'kuntrast, radjuligands ġodda bbażati fuq antikorpi qed jiġu żviluppati biex jiskopru forom oligomeriċi u protofibrillari A solubbli u ġew ittestjati fi ġrieden transġeniċi [149,150].

For more information:1950477648nn@gmail.com