Studju dwar l-effetti terapewtiċi u l-mekkaniżmi tal-monomeri tal-mediċina tradizzjonali Ċiniża fuq mudell tal-firien ta' ipogonadiżmu li jibda tard

 

Astratt

Għan
Biex tevalwa l-effetti terapewtiċi u l-mekkaniżmi ta’ tliet monomeri tal-mediċina tradizzjonali Ċiniża (TCM)-icariin, verbascoside, uginsenoside Rg1-onipogonadiżmu li jibda tard (LOH)f'mudell far, u biex jesploraw il-potenzjal tagħhom bħalainterventi naturali għat-tnaqqis tat-testosterone relatat mal-etàfl-irġiel ta’ mezza età.

Metodi
Mudell ta' ipogonadiżmu li jibda tard (LOH) ġie stabbilit f'irġiel ta' etàFirien Sprague-Dawleypermezz ta’ injezzjoni intraperitoneali ta’cyclophosphamide, jissimulaw defiċjenza ta 'androġenu. Tliet monomeri TCM-icariin, verbascoside, uginsenoside Rg1-kienu mogħtija mill-ħalq għal 60 jum.

Fi tmiem it-trattament, tkejlu l-piż tal-ġisem u l-piżijiet tal-organi riproduttivi (testikoli, epididimi, vesicles seminali, eċċ.).Bidliet istopatoloġiċifit-tessut testikolari ġew evalwati bl-użuTbajja ta' ematossilin-eosina (H&E).. Livelli tas-serum taFSH, LH, utestosteroneġew ittestjati permezzELISA. L-espressjoni tariċettur ta' androġenu (AR)proteina u mRNA ġie evalwat bl-użuWestern blotuPCR kwantitattiv f'ħin reali (qRT-PCR).

 

 

 

Riżultati

Ginsenoside Rg1wera l-aktar titjib sinifikanti filpiż tal-ġisemupiż tal-organi riproduttivi(P <0.01).

Icariinżiedet b'mod sinifikanti l-piż tal-testikoli, epididimu, uvesikli seminali(P <0.01).

Verbascosidepiż moderatament imtejjeb tal-vesikula seminali (P <0.05).

It-tliet monomeri TCM b'mod effettivdeġenerazzjoni testikolari maqlubafil-firien LOH, jirrestawraw l-istruttura tat-tubuli seminiferous u jżidu n-numru ta 'ċelluli spermatoġeniċiusperma matura.

Il-gruppi kollha tal-monomeri wrew il-kapaċità lilivelli aktar baxxi ta' FSH u LH fis-serumfilwaqt liżieda fit-testosterone fis-serum. Il-grupp icariinwera l-aktar titjib sinifikanti endokrinali (P <0.01).

Livelli ta' espressjoni ta'riċettur ta' androġenu (AR)kemm fil-proteina kif ukoll fl-mRNA kienu rregolati b'mod sinifikanti fil-gruppi kollha kkurati. L-effett ta 'icariinkienaktar evidenti minn propionate ta 'testosterone, li jindika aeffett regolatorju qawwi fuq is-sinjalar AR.

 

Konklużjoni

Dan l-istudju jissuġġerixxi liginsenoside Rg1huwa l-aktar effettiv fit-titjibpiż tal-ġisem u tal-organifil-firien LOH, filwaqt liicariinjuri l-aktar effett qawwi filisaħħaħ il-produzzjoni tat-testosteroneuit-titjib tal-espressjoni AR. It-tliet monomeri kollha-icariin, verbascoside, uginsenoside Rg1-dimostraweffetti protettivi kontra d-deġenerazzjoni testikolariujappoġġjaw il-funzjoni endokrinali riproduttiva maskili, li joffru alternattivi naturali promettenti għall-ġestjoni taipogonadiżmu relatat mal-età.

 

Kliem ewlieni

Ipogonadiżmu li jibda tard (LOH); Icariin; Verbascoside; Ginsenoside Rg1; Mediċina Tradizzjonali Ċiniża; Booster naturali tat-testosterone; Sindromu maskili tax-xjuħija; Espressjoni ta' riċettur ta' androġenu; Terapija erbali għas-saħħa tal-irġiel

Ikklikkja l-istampa biex titgħallem aktar dwar il-ħaxix TCM għas-saħħa sesswali

 

 

Sfond

Ipogonadiżmu li jibda tard (LOH)fl-irġiel ta 'età medja u anzjani hija assoċjata mill-qrib ma'tnaqqis relatat mal-età fil-livelli tal-androġeni, partikolarment testosterone. Studju epidemjoloġiku 2021 ibbażat fuq il-popolazzjoni li sar f'sitt provinċji rappreżentattivi fiċ-Ċina, li jinvolvi6,296 raġel ta’ bejn 40–79, żvelat ir-rati ta' prevalenza ta' LOH li ġejjin:

3.2%fl-irġiel fil-50 sena

11.2%fis-sittinijiet tagħhom

24.0%fis-snin 70 [1]

LOH huwa kkaratterizzat minntestosterone fis-serum imnaqqasflimkien ma' kostellazzjoni ta'sintomi ta 'defiċjenza ta' androġenubħal:

Libido baxxa

Disfunzjoni erettili

Dipressjoni u irritabilità

Tnaqqis konjittiv u telf tal-memorja

Dawn is-sintomi jistgħutfixkel b'mod sinifikanti l-benessri fiżiku u mentali, kif ukollkwalità tal-ħajja [2–3].

Bħalissa,terapija ta' sostituzzjoni tat-testosterone (TRT)hija t-trattament prinċipali għal-LOH u tista’ temporanjament ittaffi s-sintomi. Madankollu, tħassib dwarriskju kardjovaskulari, saħħa tal-prostata, usigurtà fit-tuljibqgħu [4]. Għalhekk, hemm interess dejjem jikber fl-esplorazzjonialternattivi naturali u aktar sikuri, speċjalment minnMediċina Tradizzjonali Ċiniża (TCM).

Dan l-istudju għandu l-għan li jevalwa l-effetti u mekkaniżmi terapewtiċita' tliet monomeri TCM-icariin, verbascoside, uginsenoside Rg1-użu amudell tal-far ta 'LOH.

 

1. Materjali u Metodi

1.1 Annimali Sperimentali

SittinFirien Sprague-Dawley (SD) irġiel ta’ 15-il xahar(700–800g) inkisbu f'Jannar 2022 miċ-Ċentru Sperimentali tal-Annimali taċ-Ċina Three Gorges University. Numri tal-liċenzja:

Ċertifikat tal-Annimali: Le. 42010200007997

Liċenzja tal-Produzzjoni: SCXK (E) 2022-0012

Il-firien kienu miżmuma f'ambjent ikkontrollat ​​(temperatura: 19-23 grad, umdità relattiva: 55%-65%), b'ċiklu naturali dawl-dlam u aċċess liberu għall-ikel u l-ilma. WaraĠimgħa 1 ta 'akklimatizzazzjoni, bdew l-esperimenti.

1.2 Reaġenti u Strumenti

Cyclophosphamide(Nanjing Jiancheng)

Icariin(Nanjing Guangrun Biotech)

Ginsenoside Rg1(Shanghai Macklin)

Verbascoside(Shanghai Zhenzhun Biotech)

Antikorp AR(Santa Cruz, l-Istati Uniti)

-antikorp ta' l-actin(Sigma, l-Istati Uniti)

Kits tat-tbajja' H&E(Shanghai Yiji Industrijali)

Kits ELISA għas-serum FSH, LH, testosterone(Shanghai Meilian)

Reaġenti qRT-PCR (SYBR Green I)(Shanghai Julu Biotech)

Strumenti: Thermo microplate reader, mikroskopju ottiku Olympus, sistema tal-immaġini LI-COR Odyssey, magna ABI qRT-PCR

 

1.3 Raggruppament tal-Annimali u Induzzjoni tal-Mudell LOH

Il-firien ġew assenjati b'mod każwali6 gruppi (n=10 kull grupp):

Grupp ta' kontroll:

Injezzjoni intraperitoneali (ip) ta' 0.9% salina għal 5 ijiem

Salina orali (1 mL/100g) għal 60 jum

Grupp mudell:

ip cyclophosphamide 20 mg/kg/jum għal 5 ijiem

Segwit minn salina orali għal 60 jum

Propionate tat-testosterone (kontroll pożittiv):

ip cyclophosphamide (l-istess bħal hawn fuq)

Injezzjoni taħt il-ġilda ta 'testosterone propionate 5 mg/kg/jum għal 7 ijiem

grupp Icariin:

ip cyclophosphamide (l-istess)

Icariin orali 200 mg/kg/jum għal 60 jum

Grupp Verbascoside:

ip cyclophosphamide (l-istess)

Verbascoside orali 200 mg/kg/jum għal 60 jum

Grupp Ginsenoside Rg1:

ip cyclophosphamide (l-istess)

Ginsenoside orali Rg1 200 mg/kg/jum għal 60 jum

It-trattamenti kollha ġew amministrati bejn8:00–11:30 AM. Saru valutazzjonijiet24 siegħa wara d-doża finali.

 

1.4 Piż tal-ġisem u Indiċi tal-Organi Riproduttivi

Wara l-użin, il-firien ġew ewtanizzati permezz ta 'dislokazzjoni ċervikali. Il-testikoli, epididimi, u vesicles seminalikienu mqassma u jintiżnu.

Wieħedtestis minn kull farkien iffissat fi4% paraformaldehydegħal 72 siegħa, deidratat b’alkoħol gradat, imdaħħal fil-paraffin, maqsum (5 μm), u mtebba’ b’Ematossilin-Eosina (H&E). Bidliet morfoloġiċi ġew osservati taħt mikroskopija tad-dawl.

 

1.5 Analiżi tal-Ormoni tas-Serum

Il-firien kienu anestetizzati bihom3% pentobarbital sodium, u d-demm inġabar permezztitqib tal-qalb. Serum kien separat minnċentrifugazzjoni fi 3000 rpm għal 10 min f'4 gradi. Kitts ELISA intużaw għall-kejlFSH, LH, u testosteronelivelli skond il-protokolli tal-manifattur.

 

1.6 Espressjoni tal-proteina AR (Western Blot)

It-tessut testikolari ġie lysed u l-konċentrazzjoni tal-proteina mkejla. Ammonti ugwali ta 'proteina ġew solvuti minn10% SDS-PAĠNA, trasferiti għal membrani PVDF, u inkubati b'antikorpi primarji kontraARu-aktina (1:1000)matul il-lejl. L-inkubazzjoni sekondarja tal-antikorpi kienet segwita minn skoperta kimiluminixxenti.ImmaġniJintuża għall-analiżi.

 

1.7 AR mRNA Espressjoni (qRT-PCR)

L-RNA totali ġie estratt mit-tessut testikolari. cDNA ġie sintetizzat permezz ta 'traskrizzjoni inversa. qRT-PCR sar bl-użu tal-metodu SYBR Green.

Primers AR:

Il-quddiem: 5′-CAGGACCA CGTTTTACCCA-3′

Reverse: 5′-TTCCCTTCCGCAGCTCTTTT-3′

-actin primers (kontroll intern):

Quddiem: 5′-CCACCATGTACCCAGGCATT-3′

Reverse: 5′-CGGACTCATCGTACTCCTGC-3′

Ċiklu termali: 95 grad għal 15-il minuta (pre-denaturazzjoni), segwit minn 40 ċiklu ta '95 grad għal 15 s u 60 grad għal 1 min. Id-dejta ġiet analizzata bl-użu tal-2^-ΔΔCtmetodu.

 

1.8 Analiżi Statistika

Id-dejta ġiet analizzata bl-użuSPSS 26.0.

Ir-riżultati huma ppreżentati bħalamedja ± devjazzjoni standard (x̄ ± s)

t-testintuża għal tqabbil ta' żewġ gruppi

ANOVA f'direzzjoni waħdaintuża għal paraguni ta' gruppi multipli

P < 0.05tqieset statistikament sinifikanti