Studju Dwar L-Attivitajiet Antiossidanti tal-Glikosidi tal-Feniltanojdi minn Cistanche deserticola

Kuntatt: Audrey Hu Whatsapp / hp: 0086 13880143964 Email:audrey.hu@wecistanche.com

LI Li et al ( Laboratorju Ċentrali tal-Università Normali ta 'Changchun, Changchun, Jilin 130032)

Astratti[ Għan ] Ir-riċerka kellha l-għan li tistudja b'mod sistematiku l-attivitajiet antiossidanti tal-glikosidi tal-fenilinatanojdi minnCistanchedeżerticola. [Metodu ] Żewġ sistemi mudell, l-assaġġ radikali ħieles ta '2,2-diphenyl-l -picrylhydrazyl (DPPH ) u l-analiżi tal-kemiluminexxenza tar-ritratti (PCL), intużaw biex titkejjel l-attività antiossidanti tal-estratt C. deserticola, l-acteoside, l-isoacteoside, u l-echinacoside. [ Riżultat] Ir-riżultati wrew li l-kontenut fenoliku totali (TPCs) fl-echinacoside, l-acteoside, l-isomekkaside, u 80% tal-estratt tal-etanol ta' C. deserticola kienu 753.95, 659.94, 356.14, u 14.73 mg aċidu galliku /g kampjun. L-estratt C. deserticola wera attività qawwija ta 'antiox记ant fl-esperiment PCL, segwit minn echinacoside, acteoside, u isoacteoside. Madankollu, l-echinacoside wera attività antiossidanti qawwija fl-esperiment DPPH, segwit minn acteoside, isoacteoside, u l-estratt C. deserticola.

[ Konklużjoni ]Din ir-riċerka tista' tipprovdi referenzi għall-istudju farmakoloġija u ta' attività bijoloġika tal-glikosidi tal-fenilinidi minn C. deserticola.

Kliem ewlieni Cistanche deserticola ; Acteoside ; Isoacteoside ; Echinacoside ; Attività antiossidanti ; DPPH; PCL

Cistanche(Cistanche deserticolaY.C. Ma.) hija pjanta tal-Cistancheġeneru (Oro-banehaeeeae) tal-Cistancheġeneru (Cistanche). Iz-zokk imnixxef imlaħħam ta 'Cistanche bil-weraq bil-qoxra. Numru kbir ta 'studji sabu li l-ingredjenti attivi ewlenin tal-pjanti Cistanche huma komposti tal-glikosid tal-alkoħol phenethyl. . Il-kompost tal-glikosid tal-fenililon jappartjeni għal tip ta 'kompost tal-polyphenol, li huwa distribwit b'mod wiesa' f'ħafna tipi ta 'pjanti. Studji tat-test farmakoloġiku wrew li dawn il-komposti għandhom firxa wiesgħa ta 'attivitajiet farmakoloġiċi u bijoloġiċi, bħal attivitajiet anti-epatotossini, anti-infjammatorji, analġesiċi u antiossidanti. Fosthom, l-iktar ħaġa impressjonanti hija li l-kompost tal-glikosid tal-phenoxyethanol għandu attività antiossidanti tajba ħafna. L-awtur wettaq prinċipalment analiżi sistematika ta' l-attività antiossidanti tal-komposti tal-glikosid ta' l-alkoħol f'Cistanche, bl-użu ta' żewġ metodi ta' evalwazzjoni in vitro antiossidanti, jiġifieri Fotoehemilumineseence (PCL) u 2,2-diphenyl-1-pieryl-hydroxyl (DPPH") Intużaw żewġ sistemi differenti biex titkejjel l-attività antiossidanti tal-estratt tal-etanol ta' 80 % ta'Cistanche,ergosteroside,iżoergosideUechinacoside.

1 Materjal u metodi

1.1 Kampjuni u reaġenti

Cistanche (Cistanche deserticola)materjali mediċinali nxtraw mill-Ispiżerija ta 'Beijing Tongrentang.Ergosteroside, isoergoside,echinacoside, Folin. Reaġent Ciocalteu, aċidu galliku, 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH.), eċċ. Kumpanija (St. Louis, Mo). Is-solvent użat għall-analiżi tal-PCL ġie pprovdut minn Analytik Jena AG (Berlin, il-Ġermanja). Reaġenti oħra huma kollha reaġenti analitiċi (prodotti mill-Impjant Kimiku ta' Beijing). L-ilma huwa ilma ultrapure (18.2 nPa).

1.2 Estrazzjoni tal-kampjun

Iżen b'mod preċiż 2.0005g ta 'Cistanchetrab tal-kampjun, uża 50rnl ta '80% etanol għall-estrazzjoni ultrasonika f'temperatura ambjentali għal 0.5h, estratt darbtejn, iffiltra s-soluzzjoni tal-kampjun, evaporazzjoni rotanti sa nixfa (<40oc), use="" 100ml="" of="" distilled="" water="" dissolve,="" degrease="" twice="" with="" 100ml="" n-hexane,="" discard="" the="" n-hexane="" solution,="" extract="" the="" water="" part="" with="" 100="" ml="" of="" water-saturated="" n-butanol="" 3="" times,="" combine="" the="" n-butanol="" extracts,="" rotary="" evaporate="" to=""><40oc), and="" use="" 4ml="" for="" the="" residue="" the="" volume="" of="" absolute="" ethanol="" is="" fixed="" to="" obtain="" a="" sample="" of="">Cistanche deserticola.

1.3 Determinazzjoni tal-kontenut totali ta' polifenol tal-kampjun

Il-kontenut totali tal-fenol tal-kampjun huwa ddeterminat bl-użu tal-metodu F0-lin-Ciocaheu, u r-riżultat huwa espress bħala milligrammi ta' aċidu galliku għal kull gramma ta' estratt. Ħu soluzzjoni kampjun b'ċerta konċentrazzjoni ta '0.2rnI (biex tagħmel l-assorbanza taqa' fuq il-kurva standard), żid 1ml ta 'reaġent Folin-Ciocaheu b'konċentrazzjoni ta' 0.5mol / L, u mbagħad żid 0.8ml ta 'soluzzjoni ta' karbonat tas-sodju b'konċentrazzjoni ta '7.5% biex tħallat sew, Imqiegħed f'temperatura tal-kamra għal 0.5h, u mbagħad kejjel l-assorbenza f'765nm (spettrofotometru viżibbli ultravjola: DU800, Beckman Couher, Inc. l-Istati Uniti). Uża s-soluzzjoni tal-aċidu galliku (il-firxa tal-konċentrazzjoni tal-massa hija 0.02 ~ 0.20me,/ m1) biex tagħmel il-kurva standard, u t-testijiet kollha huma ripetuti darbtejn.

1. 4 Analiżi antiossidanti in vitro

1.4.1 Determinazzjoni tal-metodu tal-PCL.

It-test uża Photochem@ (Berlin, Ger-ħafna) antiossidant ultra-veloċi u analizzatur awtomatiku radikali ħieles. Il-prinċipju huwa li tiġġenera radikali ħielsa b'metodu fotokimiku u tuża l-metodu ta 'kemiluminexxenza biex tiskopri radikali ħielsa. Fl-esperiment, fotosensitizzatur b'effett ta 'eċċitazzjoni fotokimika ntuża biex eċita l-molekuli ta' reazzjoni, sabiex taħt l-azzjoni tal-lampa ultravjola, ir-reazzjoni ta 'ossidazzjoni seħħet 1000 darba aktar mgħaġġla mill-kundizzjonijiet normali, u r-radikali ħielsa ġew iġġenerati malajr. Agħżel il-metodu PCL-ACW-Kit Kejjel l-attività antiossidanti tal-komponenti li jinħallu fl-ilma tas-sottokampjuni psyllium. Ippipetta buffer ta 'reazzjoni ta' 1.0ml (inkluża l-konċentrazzjoni ta '0.1moL / L SodiumCarbonate, valur tal-pH ta' 10.5 u konċentrazzjoni ta '0.1mmol / LNA, EDTA wieħed, 1.5ml ACW- dilwent (ilma), konċentrazzjoni 1mmol / LLumino1) jaġixxi bħala fotosensitizer biex eċitat il-molekuli ta' reazzjoni, sabiex ir-radikali ħielsa jiġu ġġenerati malajr, u fl-istess ħin bħal sustanza fotokimika. Kemm il-kampjun kif ukoll l-istandard huma 10 "l. Billi jitkejlu konċentrazzjonijiet differenti (0.5, 1.0, 2.0 u 3.0 nmol/L) ta' L. L-ekwazzjoni standard tal-kurva għall-aċidu askorbiku hija Y = 24.640Ox + 2.9311, R² = 0.9969. Huwa meħtieġ li l-kampjun jew is-soluzzjoni standard jiġu dilwiti fit-test sabiex l-intervall tal-ħin tad-dewmien jaqa' fil-medda lineari tal-kurva standard. Photochem jiġġenera l-kurva standard u jittestja l-attività antiossidanti tal-kampjun awtomatikament, u l-attività antiossidanti tal-kampjun hija ekwivalenti għal L. Ikkalkulat bin-numru ta ' nanomoli ta 'aċidu askorbiku.

1.4.2 Determinazzjoni tal-metodu DPPH.

Diphenylpicrylhydrazino radikali [DPPH ·] huwa radikali stabbli ċċentrat fuq in-nitroġenu b'assorbiment massimu f'wavelength ta '515nm. [DPPH ·] is-soluzzjoni tal-metanol hija vjola, u l-konċentrazzjoni tagħha għandha relazzjoni lineari ma 'assorbenza." Wara li jżidu l-antiossidanti mas-soluzzjoni tal-metanol [DPPH ·], l-antiossidanti jistgħu jingħaqdu ma' [DPPH ·] radikali ħielsa jew jissostitwixxuhom biex jagħmlu [DPPH ·] ] In-numru ta 'radikali ħielsa jonqos, u l-kulur tas-soluzzjoni jsir eħfef, li jidher mit-tnaqqis kontinwu fl-assorbenza fil-wavelength ta' 515 nm sakemm jilħaq l-istabbiltà." Fit-test, l-etanol intuża minflok il-metanol. Iżen b'mod preċiż [DPPH ·] u kkonfigurat il-konċentrazzjoni għal 0. [DPPH ·] Is-soluzzjoni tal-etanol ta' 0.040 76mg/ml, tinkiseb il-kurva standard ta' [DPPH ·]: Y: 18.032x-0.0016, R = 0.9993. Il-metodu għall-kejl tar-rata residwa ta' radikali ħielsa jirreferi għal-letteratura [16]. Bl-użu ta' l-etanol bħala s-solvent, ipprepara konċentrazzjonijiet differenti ta' kampjun u soluzzjoni standard, ħu kampjun ta' 0.1ml jew soluzzjoni standard rispettivament, u żid soluzzjoni standard ta' 3.9ml [DPPH·] b'konċentrazzjoni ta' massa ta' 2.5mg/L (attwalment użata issa) ), ibdel is-soluzzjoni tal-kampjun bl-etanol bħala vojt. Ħawwad is-soluzzjoni mħallta, uża cuvette biex tkejjel l-assorbenza tagħha f'ħinijiet differenti f'wavelength ta' 515nm, u ikkonvertiha għall-konċentrazzjoni tal-massa ta' [DPPH·] skont il-kurva standard biex tikkalkula r-rata residwa ta' [DPPH·]. Skont ir-rata residwa ta' [DPPH ·] u l-ammont korrispondenti ta' kampjun miżjud, tista' tinġibed kurva għat-tneħħija ta' [DPPH-] radikali ħielsa mill-kampjun. Skont il-kurva tar-relazzjoni bejn il-konċentrazzjoni tal-massa ta' [DPPH ·] u l-assorbenza, l-assorbenza mkejla wara ż-żieda tal-kennies radikali ħieles tista' tiġi kkonvertita fil-konċentrazzjoni tal-massa ta' [DPPH ·] biex jiġi kkalkulat id-[DPPH ·] wara ż-żieda tal-kennies radikali ħieles. Il-formula tal-kalkolu għar-rata residwa hija kif ġej: [DPPH ·] REM=[DPPH·] /[DPPH·] r=0×100% fejn [DPPH·] hija l-konċentrazzjoni tal-massa ta' DPPH· f'ċertu mument fil-proċess ta' scavenging radikali ħieles, [DPPH·]:. Hija l-konċentrazzjoni oriġinali tal-massa ta' DPPH·. Skont in-numru ta' antiossidanti miżjuda u r-rata residwa ta' [DPPH ·], issir il-kurva tar-relazzjoni bejn it-tnejn, u l-ekwazzjoni ta' rigressjoni tista' tinkiseb permezz ta' analiżi ta' rigressjoni lineari. Skont l-ekwazzjoni ta' rigressjoni, tista' tiġi kkalkulata d-doża antiossidanti meta r-rata residwa ta' [DPPH ·] tkun tista' tiġi kkalkulata. Nofs inibizzjoni. Skont il-kurva ta' scavenging radikali ħieles [DPPH·] ta' konċentrazzjonijiet differenti ta' kampjuni jew standards, ikkalkula l-ammont KE tal-kampjun meta l-konċentrazzjoni oriġinali tal-massa ta' [DPPH·] titnaqqas għal 50 % (stat stabbli). Iktar ma tkun żgħira l-KE, il-kapaċità ta 'scavenging radikali b'xejn Aktar b'saħħitha". Ittestja 3 darbiet b'mod parallel.

cistanche

2 Riżultati u analiżi

2.1 Determinazzjoni tal-kontenut totali tal-polifenol tal-kampjun Fid-determinazzjoni tal-kontenut totali tal-polifenol, il-kontenut totali ta' polifenol ta'echinacosidehuwa l-ogħla, li huwa 753.95 mg aċidu galliku /g. Segwit minn glikosidi ergosterojdi, glikosidi isoergosterojdi, u estratti mhux raffinati ta'Cistanche, li kienu 468.3, 356.14, u 14.73 mg aċidu galliku /g, rispettivament.

2.2 Determinazzjoni tal-kampjun ta ' l-attività antiossidanti

2.2.1 Riżultati tad-determinazzjoni tal-metodu PCL- ACW. Fit-test antiossidanti PCL-ACW, il-kapaċità antiossidanti ta '1txgCistancheil-materjal mediċinali huwa ekwivalenti għall-kapaċità antiossidanti ta' aċidu L-askorbiku ta' 15.68nmol; 1 gechinacosidehuwa ekwivalenti għall-kapaċità antiossidanti ta '14.03nmol aċidu askorbiku Attività: 1txgergosterosidehuwa ekwivalenti għal 11.44nmolL kapaċità antiossidanti ta' aċidu askorbiku; 1Ixg isomergosteroside huwa ekwivalenti għall-attività antiossidanti ta' 8.24nmol aċidu askorbiku.

2.2.2 Riżultati tal-kejl tal-metodu DPPH. Jista 'jidher mit-Tabella 1 li jiġi kklerjat. L-ordni tal-abbiltà ta 'radikali ħielsa hijaergosteroside,echinacoside, isoergoside u l-estratt mhux raffinat ta'Cistanche, fosthom in-naħa tal-ergo uechinacosidebażikament ikollhom l-istess kapaċità antiossidanti fit-test DPPH. Jista 'jidher minn dan. Minħabba li sistemi ta ' testijiet antiossidanti in vitro differenti jintużaw biex ikejlu l- kampjuni, il- mekkaniżmu ta ' effetti antiossidanti huwa differenti, u r- riżultati jistgħu jkunu inkonsistenti. Dan ġie vverifikat ukoll fit-test. Għalhekk, huwa meħtieġ li jintgħażlu sistemi oħra ta 'analiżi antiossidanti għal aktar verifika.

echinacosie

Referenzi

[1] Yang Cuiping, Su Weiwei. Il-progress tar-riċerka tas-soppa tal-laħam[J]· Materjali Mediċinali Ċiniżi, 2001, 24(12): 907-909.

[2] Lei Li, Song Zhihong, Tu Pengfei Research progress dwar il-kostitwenti kimiċi tal-pjanti Cistanche[J]. Mediċina Veġetali Ċiniża, 2003,34 (5): 473 -476.

[3] HIROMI KOBAYASHI,HIROKO KARASAWA JOSHIO MIYASE. Studji dwar il-Kostitwenti Cistanchis Herba. HI. Iżolament u strutturi ta' glikosidi phenylpropanoid ġodda, Cistanosides A u B[ J]. Chem. Pharm Bull, 19 ^,32(10):3009 -3014.

[4] LI LI, RONG TSAO, RAYMOND YANG, et al. Iżolament u purifikazzjoni tal-glikosidi tal-fenilinentanojdi minnCistanche deserticolabi kromatografija ta' kontro-kurrent b'veloċità għolja[ J ]. Kimika tal-Ikel,2008,1(^:702-710.

[5] LI LI, RONG TSAO, LIU ZQ, et al. Iżolament u purifikazzjoni ta' actec^ide u isoacteoside minn Plantago psyllium L. by hi南-speed counter-current chromatography [J ]. Ġurnal tal-Kromatografija A,2005,1063: 161-169.

[6] RAVN H, NISHIBE S, SASAHARA M, et al. Komposti fenoliċi minn Plantago Asiatica[ J]. Phytochemistry, 1990, 29: 3627-3631.

[7] TOYAMA Y, MATSUMOTO M, NISHIOKA I. Glikosidi fenoliċi minn għeruq Morda ta ' Rehmannia gluiinosa var. purpurea [J]. Phytochemistry, 1987, 26: 983-986.

[8] Wang Xiaowen, Jiang Xiaoyan, Wu Ji J Ya, et al. Cistanche cistanche glycosides totali in Vitro scavenging radikali ħielsa u effetti protettivi fuq ħsara fid-DNA indotta minn OH [J]. Ġurnal Farmaċewtiku Ċiniż, 2001, 36(1): 29-31.

[9] XIONG Q, HASE K, TEZUKA Y, et al. Attività epatoprotettiva tal-fenitanojdi minnCistanche deserticola[J ]. Planta Med, 1998,64:120.

[10] SCHAPOVAL E E S, WINTER DE VARGAS M R, CHAVES C G, et al. Attivitajiet anti-infjammatorji u antinoċettivi ta' estratti u komposti iżolati minn Stachytarpheta cayeunensis [J]. J Ethnopharmacol, 1998, 60: 53.

[11] LI J, WANG PF, ZHENG R L, et al. Protezzjoni tal-glikosidi tal-fenilpropanojdi mill-Pedakulari kontra l-emoliżi ossidattiva in vitro [J]. Planta Med, 1993,59:315—317.

[12] HE Z D, LAU KM, Xu H X, et al. Attività antiossidanti tal-glikosidi tal-fenilatanojdi mill-kanċer tal-Brandisia [J]. L-Etnopharmakoloġija, 2000, 71: 483-486.

[13] XIONG Q, KADOTA S, TANI T, et al. Effetti antiossidanti tal-fenitanojde minnCistanche deserticola[J]. Biol Pharm Bull, 1996,19: 1580-1585.

[14] TSAO R, YANG R, XIE S, et al. Liema komposti polifenoliċi jikkontribwixxu għall-attivitajiet antiossidanti totali tat-tuffieħ? [J]. J Agric Food Chem, 2005,53:4989-4995.

[15] POPOV I N, LEWIN G. Hiotochemiluminescent detection ta' attività antiradonika: Ittestjar U. ta' antiossidanti mhux adolexxenti li jinħallu fl-ilma [J]. Free Rad Biol Med, 1994, 17: 267-271.

[16] BRAND-WILLIAMS W, CUVEHER M E, BERGET C. Użu ta' metodu radikali ħieles biex tiġi evalwata l-attività antiossidanti [J]. Lebensm Wiss Technol, 1995,28: 25-30.

[17] Li Chunyang, Xu Shiying, Wang Zhang. Il-metodu DPPH biex tiġi ddeterminata l-kapaċità tal-proanthocyanidins taż-żerriegħa tal-għeneb li jkaxkru radikali ħielsa [J]. Ġurnal tal-Ikel u l-Bijoteknoloġija, 2006, 25(2)" 02-106.

SCHLESIER K, HARWICH M, BOHM V, et al. Valutazzjoni tal-attività antiossidanti bl-użu ta' metodi in vitro differenti [J ]. Riċerka Radikali Ħielsa,2002,36(2):177-187.