Studju dwar l-influwenza tal-immunità fil-ġrieden

Biex titgħallem aktar informazzjoni jekk jogħġbok ikkuntattjadavid.wan@wecistanche.com

Tnejn minn tletin raġelDBA/2NCrl(D2N) ġrieden użati bħala razza ta 'kontroll fl-analiżi tad-dejta fl-isfond ta'DBA/2N-MDXġrieden, ippreżentati b'sejbiet anormali issuġġeriti ta' infezzjoni. Każ 1: Ġurdien D2N maskili ta' 4-ġimgħat wera leżjoni ta' plakka bajda fil-kliewi tax-xellug (l-ebda sintomi kliniċi), u sar eżami patoloġiku tal-kliewi. Infiltrazzjoni taċ-ċelluli infjammatorji, prinċipalment newtrofili, kienet osservata fit-tubuli u l-interstizju tal-kliewi tax-xellug, u Staphylococcus aureus (S.aureus) ġie skopert mis-segment tal-kliewi tax-xellug. Għalhekk, din il-leżjoni fuq il-kliewi tax-xellug ġiet iddijanjostikata bħala suppurattivatubulointerstizjalinefrite kkawżata minn infezzjoni ta 'S. aureus. Każ 2: Torticollis tax-xellug b'telf ta' piż instab f'ġurdien D2N maskili ta' 9-ġimgħat. Evalwazzjoni istoloġika wriet infjammazzjoni eżudattiva madwar l-orifiċju farinġali tat-tubi ta 'Eustachian, u infjammazzjoni purulenta kemm tal-widnejn tan-nofs kif ukoll tal-widna ta' ġewwa tax-xellug b'formazzjoni ta 'axxess u gruppi bħala mikrokolonji gram-pożittivi. S. aureus ġie identifikat minn kulturi tampuni taż-żewġ kanali tal-widna esterni. Bħala riżultat, dan il-każ ta 'torticollis kien ikkawżat minn S. aureus-suppurative otitis media u l-internet. S. aureus huwa magħruf sew bħala patoġenu opportunistiku bil-potenzjal li spiss jikkawża mard suppurattiv lill-annimali tal-laboratorju immunokompetenti. Madankollu, sa fejn nafu tagħna, dan il-każ ta 'infezzjoni ta' S. aureus ippreżentat b'torticollis f'ġurdien D2N mhuwiex irrappurtat.

Ikklikkja hawn biex titgħallem aktar dwar Cistanche

Iżolati ta' Staphylococcus aureus (MRSA) reżistenti għall-metiċillina ħarġu f'ġurdien tal-laboratorju fiċ-Ċentru għax-Xjenza tal-Annimali tal-Laboratorju tal-Kulleġġ Mediku tad-Difiża Nazzjonali fl-2018 uMRSAiżolati ġew irkuprati mill-ġrieden ukoll fil-kmamar tal-ġrieden l-oħra minn hemm 'il quddiem. Fuq dawn l-iżolati MRSA, ittajpjar molekulari bħal Multi-locus sequence typing (MLST), Staphylococcus aureus Protein A(spa)typing, typing SCCmec, u typing coagulase saru għad-determinazzjoni tal-ġenotipi tagħhom. L-iżolati kollha wrew ġenotipi identiċi (ST1, spa t1784, SCCmec tip IV, u coagulase tip VII), li jissuġġerixxu li l-iżolati kienu kloni identiċi. Qabel ma tfaċċat l-MRSA fl-2018, l-ebda iżolat b’ġenotipi bħal dawn ma kien ġie iżolat f’din il-faċilità, kien preżunt li l-klonu tal-MRSA ddaħħal fil-faċilità permezz ta’ annimali umani jew tal-laboratorju. STl1 hija l-ewwel MRSA akkwistata mill-komunità rkuprata mit-tfal fl-Istati Uniti, madankollu, ST1 huwa rkuprat minn bnedmin u annimali madwar id-dinja bħalissa. Fil-Ġappun, ir-razez ST1 u SCCmec tat-tip IV ġew iżolati mill-bnedmin u mill-qtates, li jissuġġerixxu li ST1 jiġi trażmess bejn il-bnedmin u l-annimali. Razza MRSA b'dawn il-ġenotipi iżda wkoll bi spa tl784 ġiet irkuprata mill-bnedmin. Bħalissa, id-distinzjoni bejn MRSA akkwistata mill-isptar, MRSA akkwistata mill-komunità, u MRSA relatata mal-bhejjem hija aktar ambigwa. Dawn ir-riżultati jissuġġerixxu li l-ġrieden jistgħu jaġixxu bħala ġibjuni tal-MRSA.

Fl-immunoterapija riċenti tal-kanċer, l-attività ta' molekuli bħal PD-1 hija inibita biex tiżdied l-attività taċ-ċelloli immuni kontra l-kanċer. Minkejja l-effett terapewtiku għoli, hemm każijiet li fihom tiżviluppa mard awtoimmuni fl-immunoterapija tal-kanċer. Hawnhekk, waqqafna sistema li tista' tiddegrada l-PD-1 b'mod speċifiku għall-ħin f'ċelloli kkultivati ​​u ġrieden bl-użu tal-Sistema degron SMASh. Il-proteina tal-fużjoni PD-1-SMASh fiċ-ċelloli Jurkat u CD3 flimkien mal-isplenoċiti tnaqqset b'ġurnata wara l-għoti ta' Asunaprevir(ASV) jew Grazoprevir(GRV) li huma inibituri tal-protease NS3/4A. It-tkabbir taċ-ċelluli tal-adenokarċinoma MC{-38 imlaqqma f'ġrieden PD-1-cherry-SMASh knockin(KI) b'ASV ġie mrażżan meta mqabbel ma' ġrieden KI tat-tip selvaġġ (WT) u mhux ittrattati. Barra minn hekk, il-ġrieden WT trapjantati b'ċelluli tal-mudullun KI wara li ġew irradjati b'radjazzjoni letali jistgħu jirrifjutaw ċelluli MC-38 b'GRV. Il-ġrieden KI dehru b'saħħithom u ma wrew l-ebda sinjali ta 'mard awtoimmuni. Nissuġġerixxu li l-użu tas-sistema degron f'organiżmi ħajjin huwa mistenni li javvanza mhux biss diversi studji bijoloġiċi iżda t-trattament tal-mard.

Il-proġesteron (P4) jinħeles mill-plaċenta biex iżomm it-tqala u jiffunzjona bħala regolatur immuni. Glucocorticoid huwa ieħorimmuni-regolatorjusterojdi biex jirregola l-infjammazzjoni. F'dan l-istudju, ċelluli mononukleari tad-demm periferali tal-bniedem (PBMCs) ġew trapjantati fi ġrieden NOG biex jinduċu mard tal-graft-versus-host-disease (GVHD) u użati għat-tqabbil bejn l-effetti P4 u cortisol (COR). Il-PBMCs ġew stimulati fil-preżenza ta 'diversi konċentrazzjonijiet ta' P4 jew COR u ċ-ċelloli ġew analizzati permezz ta 'ċitometrija tal-fluss (FCM). Alikwoti ta'PBMCsġew trapjantati fi ġrieden NOG, u P4 jew COR ġie injettat fil-ġrieden darbtejn fil-ġimgħa. Wara 28 jum, saru analiżi FCM u immunoistokimiċi. Bħala riżultat, konċentrazzjoni għolja ta 'P4 inibita l-attivazzjoni taċ-ċelluli T in vitro, filwaqt li l-inibizzjoni ma komplietx wara t-tneħħija. Is-soppressjoni tal-attivazzjoni taċ-ċelluli T kienet inqas fit-trattament COR meta mqabbel ma 'P4, u l-eżawriment taċ-ċelluli T kien aktar prominenti. Ġrieden injettati P4-ġarrew aktar splenoċiti, speċjalment ċelluli T CD8, meta mqabbla mal-ġrieden ta' kontroll. Madankollu, l-espressjoni aktar baxxa ta 'CD25, inqas infiltrazzjoni ta' ċelluli T umani fil-pulmun u l-fwied, u inqasGVHDsintomi kienu osservati. Min-naħa l-oħra, in-numru ta 'splenocytes, speċjalment ċelluli T, fil-ġrieden injettati COR kien aktar baxx b'mod sinifikanti, u ċelluli attivati/eżawriti kienu abbundanti. Dawn ir-riżultati jissuġġerixxu li P4 jippreferi li jżomm ċelluli T meta mqabbel ma 'COR in vitro.

Helicobacter hepaticus u Helicobacter bills huma magħrufa bħala patoġeni li jikkawżaw epatite u kolite fil-ġrieden. L-eżistenza ta' bosta każijiet pożittivi għadha kkonfermata kull sena f'faċilitajiet ta' annimali sperimentali fil-Ġappun. L-aħjar huwa li tuża kontenut taċ-ċekali jew ħmieġ frisk bħala kampjun għall-ittestjar tal-PCR ta 'H. hepaticus, u H. bilis.

Riċentement, ir-reaġenti tat-trasport u l-ħażna tad-DNA u RNA ġew manifatturati minn diversi manifatturi. Huwa mistenni li dawn ir-reaġenti se jkunu l-problemi fit-trasport ta 'kampjuni użati għat-testijiet PCR se jiġu kklerjati. Għalhekk, f'dan l-istudju, l-utilità tar-reaġent tal-ħażna tal-aċidu nuklejku ġiet eżaminata billi twettaq test PCR ta 'Helicobacter bl-użu tal-kontenut taċ-ċecum ippreservat bl-użu tar-reaġent tal-preservazzjoni tal-aċidu nuklejku. Bħala riżultat, kampjuni maħżuna għal 7 ijiem bl-użu tas-soluzzjoni ta 'preservazzjoni jistgħu jiġu skoperti Helicobacter fl-istess livell bħall-kampjun frisk. Minn dan ta 'hawn fuq, ġie ssuġġerit li fit-test PCR ta' Helicobacter, Anki jekk it-trasport jieħu jiem, huwa possibbli li jitwettaq it-test bi preċiżjoni għolja billi jittrasporta l-kampjun mgħaddas fir-reaġent tal-ħażna tal-aċidu nuklejku permezz ta 'titjira refriġerata.

Preċedentement żviluppajna razez mutanti ta 'E.coli b'aderenza mtejba b'mod sinifikanti għal uċuħ solidi in vitro billi mmodifikaw il-ġeni li jirrispondu għall-ġuħ tan-nutrijenti. Biex tevalwa l-interazzjoni bejn dawn ir-razez (AEEs) ta 'E. coli mtejba bl-adeżjoni u l-ambjent intestinali in vivo, ivvalutajna l-kapaċità ta' kolonizzazzjoni tagħhom għall-passaġġ intestinali billi nlaqqmu ġrieden.

Qabel l-esperiment ta 'evalwazzjoni, aħna ttrasformajna AEEs bi plasmid li jesprimi luciferase għal viżwalizzazzjoni in vivo. kif kienu mlaqqma mill-ħalq fi ġrieden sajmin u ħmieġ miġbura kull ftit jiem. In-numru ta' ħajjinAEEsġie stmat billi tkejjel is-CFU mill-ħmieġ miġbur.

Bħala riżultat, meta mqabbla mar-razza ta 'kontroll, AEEs kienu aktar abbundanti fil-ħmieġ għal aktar minn ġimgħa, li jindika kolonizzazzjoni msaħħa fil-passaġġ intestinali. Billi osservat il-lokalizzazzjoni tal-luminexxenza tal-luċiferażi permezz ta 'immaġini mhux invażivi bl-użu ta' IVIS, instab ukoll li l-AEEs kellhom it-tendenza li jikkolonizzaw fiċ-ċecum u l-kolon.

[Objettiv] Bħalissa, [Pasteurella]pnewmotropikaġie kklassifikat mill-ġdid bħala ġeneru ġdid Rodentibacter. Minn dawn, R.pneumotropicus u R. Healy huma l-miri ewlenin għall-monitoraġġ mikrobijoloġiku fl-annimali gerriema. Iżolajna numru ta’ Rodentibacter sp. li ma setgħux jiġu identifikati bħala speċi minn annimali gerriema. F'dan l-istudju, nesploraw il-karatteristiċi ta 'Rodentibacter sp. iżolat, li jiffoka fuq virulenza batterjali. [Metodi] Rodentibacter sp. li kien iżolat mit-trakea tal-firien intużaw għall-istudju. Abbozz ta 'sekwenzjar tal-ġenoma sar fuq is-sekwenzjar tal-ġenerazzjoni li jmiss, u mbagħad, il-ġeni assoċjati mal-virulenza ġew imbassra. F'esperimenti fuq l-annimali, il-ġrieden Rag2 intużaw għal Rodentibacter sp. infezzjoni.|Riżultati| Permezz tal-abbozz tas-sekwenzjar tal-ġenoma, ġene uniku li jikkodifika t-tossini RTX kien ġie identifikat f'Rodentibacter sp. Is-sekwenza tal-proteini tat-tossina RTX kienet aktar omologa għal dawk prodotti minn Enterobacteriaceae milli minn Pasteurellaceae. F'esperiment fuq l-annimali, kważi l-ġrieden Rag 2 infettati kollha ġew ikkonfermati pnewmonja jew settiċemija fatali. Għalkemm l-iżolat ma setax jiġi identifikat bħala R. pneumotropicus u R. heylii, din l-ispeċi relatata mill-qrib tista 'tkun letali għal annimali immunokompromessi fil-preżenza ta' fatturi ta 'virulenza bħal tossina RTX.

Fil-Programm ta' Żvilupp tat-Teknoloġija Bażika tal-NBRP (2018-2019), aħna sekwenzajna l-ġenomi ta' batterji patoġeniċi opportunistiċi murini, u wettaqnaRNAseqta' protozoa fil-ġrieden, sabiex jiġu żviluppati analiżi PCR għal dawn l-organiżmi. Aħna użajna dawn ir-riżultati biex nanalizzaw Rodentibacter spp. u protozoa fil-firien b'kollaborazzjoni mal-Università ta' Kyoto (NBRP Rat). Hawnhekk, nirrapportaw ir-riżultati tat-test f'kampjuni tal-firien. [Metodi] Is-sekwenzi tal-ġeni 16S rRNA ta 'madwar 1.5 kbp inqraw permezz tal-PCR għal sitt iżolati tal-firien ta' Rodentibacter spp., U l-abbozz tas-sekwenza tal-ġenoma ta 'iżolat wieħed (#25) ġiet determinata bl-użu ta' Illumina HiSeq 2500. PCR tal-kontenut taċ-ċekali tal-firien kien imwettaq abbażi tar-riżultati RNAseq ta' protozoa tal-ġrieden. [Riżultati] Is-sekwenzi tal-ġeni 16S rRNA tal-iżolati kollha kienu identiċi, u ġew identifikati bħala Rodentibacter Ratti mill-analiżi OTU. Is-sekwenza mill-ġdid tal-iżolat #25 żvela wkoll li din ir-razza kienet R. Ratti.PCR għal protozoa murini tat riżultati pożittivi għall-amoeba tal-firien. Ma nkisbu l-ebda riżultati pożittivi għal TrichomonasPCRfuq kampjuni tal-firien. [Diskussjoni] L-iżolati tal-firien ta' Rodentibacter spp. eżaminati f’dan ir-rapport kienu kollha R. Ratti. Huwa importanti li tkun konxju tal-preżenza ta 'R. Ratti meta twettaq testijiet ta' Rodentibacter fil-firien. Xi kampjuni tal-ħmieġ tal-firien urew pożittivi għall-PCR tal-amoeba tal-ġrieden. Dan huwa l-ewwel pass fl-iżvilupp tal-PCR għall-iskoperta ta 'protozoa fil-firien.

L-organiżmi ta' Rodentibacter 'Pasteurella pneumotropica' huma batterji patoġeniċi opportunistiċi li jikkawżaw mard respiratorju fil-ġrieden u l-firien. Qabel kienu kklassifikati fil-ġeneru Pasteurella, u diversi razez ġew proposti b'mod tentattiv bħala bijotipi. Fl-2017, ġew riorganizzati kollettivament fil-ġeneru Rodentibacter. Razez MaM u MaR ġew iżolati mill-ġrieden u l-firien, rispettivament, madwar is-snin tmenin. F'dan l-istudju, iddeterminajna s-sekwenzi tal-ġenoma taż-żewġ razez u qabbilhom ma 'dawk tal-ġeneru Rodentibacter, materjali u Metodi. Ir-razez MaM u MaR inkisbu mill-Istitut Nazzjonali tal-Mard Infettiv (NIAID)

(Manabu Saito --> Yasushi Ami -->Fumio Ike). Iż-żewġ razez tkabbru b'kultura likwida biex tiġi estratta DNA ġenomika, u s-sekwenzi ġenomiċi ġew determinati bl-użu ta' Illumina Hiseq 2500 u PacBio Sequel.[Riżultati]Ibbażat fuq is-sekwenza tal-ġeni 16S rRNA, ir-razza MaM ġiet identifikata bħala R.pneumotropicus u r-razza MaR bħala R. Ratti. Barra minn hekk, ġiet iddeterminata s-sekwenza sħiħa tal-ġenoma (2,213,961 bp) tar-razza MaR (in-numru ta 'operoni rRNA kien 6 u n-numru ta' ġeni kien stmat li huwa 2,063). [Diskussjoni Ir-razez MaM u MaR intużaw bħala standards għall-identifikazzjoni ta' "Pasteurella pneumotropica" fil-Ġappun. Minn din l-analiżi, iddeterminajna l-ispeċi taż-żewġ razez kif ġej: ir-razza MaM hija R.pneumotropicus u r-razza MaR hija R.ratti. B'mod notevoli, dawn ir-riżultati juru li R. Ratti jista 'jiġi iżolat mill-firien fil-Ġappun.

Clostridium pili għalija (CP) huwa suxxettibbli għal infettiv f'diversi annimali tal-laboratorju inklużi firien u ġrieden u juri infezzjoni mingħajr sintomi ħlief f'annimali immunokompromessi. Huwa meqjus bħala dijanjosi differenzjali maġġuri biex jinżammu l-faċilitajiet tal-annimali u huwa magħruf sew li jaffettwa d-dejta sperimentali minn studji fuq l-annimali. Serodijanjosi (ELISA, IFA) u PCR huma komunement użati għad-dijanjosi ta 'CP minħabba li l-iżolament fil-medju nutrijent artifiċjali huwa diffiċli għal CP. Madankollu, l-eżistenza tal-antikorp mhux speċifiku li jindika r-reattività inkroċjata ma 'CP bl-użu tas-serodijanjosi hija rrappurtata u hija rikonoxxuta ta' spiss f'każ simili fil-faċilitajiet tagħna. Barra minn hekk, il-metodu PCR għandu limiti bħala metodu dijanjostiku affidabbli b'monitoraġġ perjodiku, minħabba li CP ma jinstabx fil-ħmieġ wara t-titer tal-antikorpi li qed jiżdied. Riċentement, eżaminajna approċċ differenti, billi ppreservajna l-ħmieġ mill-annimali kull xahar. Aħna adottajna t-test tal-PCR għal CP mhux affettwat mill-influwenza tal-antikorpi bħala dijanjostiċi aktar affidabbli bl-użu tal-ħmieġ ippreservat kontinwament. F'dan ir-rapport, nuru eżempju reċenti. (antikorp mhux speċifiku) biex iwassal għal spezzjoni tal-fluss li qed jiżviluppa fil-kumpanija tagħna.