Studju fuq id-diġestjoni in vitro u l-attività antiossidanti tat-trab tal-Lycium Ruthenicum u Cistanche Deserticola

Astratt:

 

Għan: L-effett tat-trab tal-Lycium ruthenicum uħwawar cistanche li jgħixu fid-deżerttrab imnixxef bil-friża fuq ilkomponenti kimiċi funzjonaliuattività antiossidantitaħtdiġestjoni gastrointestinali simulatain vitro ġew studjati. 【Metodu】:Iddeterminajna l-kontenut ta 'polifenoli, polysaccharides, anthocyanins, u phenylethanoid glycosides f'dawn it-trabijiet wara diġestjoni gastrointestinali simulata, u kejlu l-effetti ta' tkessiħ tagħhom fuq radikali ħielsa DPPH u ABTS in vitro. 【Riżultat】: Il-grupp simulat ta 'diġestjoni gastrika kellu kontenut ogħla ta' sustanzi attivi meta mqabbel mal-grupp ta 'diġestjoni intestinali simulat. Ir-rati ta' tneħħija ta' polifenoli, anthocyanins, u phenylethanoid glycosides b'DPPH u ABTS kienu lineari ħafna (p<0.05). 【Conclusion】:Gastric digestion improved the solubility of polyphenols, polysaccharides, anthocyanins, and phenylethanoid glycosides in Black fruit wolfberry powder and desertliving cistanche herb powder, thereby enhancing their scavenging rate of DPPH and ABTS free radicals. Intestinal digestion increased the solubility of polyphenols and phenylethanoid glycosides, decreased the content of polysaccharides and anthocyanins, and promoted the scavenging rate of ABTS free radicals. However, DPPH free radicals showed no promoting effect. These findings provide a novel direction for the development of new functional foods using Black fruit wolfberry and desertliving cistanche herb.

Kliem ewlieni:Lycium ruthenicum;Cistanche deserticola Ma; Diġestjoni gastrointestinali; Antiossidazzjoni

 

ESTRAT TA' CISTANCHE TA' KWALITÀ GĦALL-BEJGĦ

Ikkuntattjana għal aktar dettalji

 

 

Kontra x-Xjuħija u Preservazzjoni tas-Saħħa: Studju dwar il-Proprjetajiet Antiossidanti ta' Lycium ruthenicum u Cistanche deserticola

L-anti-aging u l-preservazzjoni tas-saħħa saru punti fokali ta’ attenzjoni f’diversi setturi tas-soċjetà. Fil-preżent, huwa maħsub ħafna li l-mekkaniżmu tat-tixjiħ ċellulari huwa relatat mill-qrib mal-ħsara radikali ħielsa. Ir-radikali ħielsa fil-ġisem tal-bniedem huma l-kawża ewlenija tat-tixjiħ u l-bidliet patoloġiċi; akkumulazzjoni eċċessiva tista' tipperikola serjament is-saħħa tal-bniedem. Għalhekk, il-prevenzjoni tat-tixjiħ primarjament tibda bl-eliminazzjoni ta 'radikali ħielsa żejda fil-ġisem. F'termini tal-kompożizzjoni ta 'prodotti tas-saħħa kontra t-tixjiħ, minbarra xi supplimenti ta' vitamini u minerali, il-biċċa l-kbira huma primarjament ifformulati bl-użu ta 'materjali mediċinali tradizzjonali Ċiniżi [1].

Lycium ruthenicum, arbuxxell li jappartjeni għall-ġeneruLiċjufil-familja Solanaceae, hija magħrufa għall-frott tagħha, li bħalissa huma kkunsidrati bħala wieħed mill-aqwa sorsi naturali ta 'anthocyanins. Għalhekk huwa mfaħħar bħala "King of Anthocyanins" u huwa sors naturali antiossidant importanti [2,3]. Barra minn hekk, hija rikka f'polisakkaridi, flavonoids, aċidi fenoliċi, u diversi oligoelementi [4-6].

Cistanche deserticola, pjanta tal-ġeneruCistanchefil-familja Orobanchaceae, huwa toniku użat komunement fil-mediċina tradizzjonali Ċiniża biex jimtela l-essenza tal-kliewi [7]. Fiha varjetà wiesgħa ta 'komposti bijoattivi, bħal phenylethanoid glycosides, echinacoside, acteoside, u polysaccharides [1].

Il-kombinazzjoni ta 'Lycium ruthenicumuCistanche deserticolahuwa maħsub li jarmonizza l-yin u yang fil-kliewi, jrażżan ir-radikali ħielsa fid-demm, isaħħaħ ir-reżistenza, ittardja t-tixjiħ, jipprevjeni l-arterjosklerożi, u jsaħħaħ l-immunità [8]. It-tnejn huma prodotti lokali b'għan doppju (mediċinali u li jittieklu) mill-Kuritur Hexi fil-Provinċja ta' Gansu, iċ-Ċina.

Bħalissa, saret riċerka estensiva domestika u internazzjonali bbażata fuq il-funzjonijiet farmakoloġiċi u l-estrazzjoni tal-komposti attivi tal-Lycium ruthenicumuCistanche deserticola. Studji minn Gao Yan [9], Guo Qiaoli [10], u Ailadan·Maimaiti Aili [11] sabu li polysaccharides fiCistanche deserticolajuru attività antiossidanti għolja, u l-glikożidi tal-feniletanojdi tiegħu jippossjedu ċertu grad ta 'kapaċità antiossidanti, qawwa qawwija ta' tnaqqis, u kapaċità effettiva li torbot il-mira. Riċerka minn Yang Dailin [12] u Lou Shuting [13] turi li l-komposti polifenoliċi fiLycium ruthenicumhuma kumplessi u abbundanti, li juru proprjetajiet antiossidanti qawwija, b'fenoliċi totali u anthocyanins korrelatati ħafna ma 'attività antiossidanti.

Anthocyanins u polyphenols fiLycium ruthenicum, kif ukoll polysaccharides u phenylethanoid glycosides inCistanche deserticola, kollha ġew ikkonfermati li għandhom effetti kontra t-tixjiħ [14,15]. Madankollu, ma kien hemm l-ebda rapporti dwar l-użu kombinat ta 'dawn iż-żewġ ingredjenti fiin vitrodiġestjoni gastrointestinali simulata u esperimenti ta 'attività antiossidanti.

Għalhekk, dan l-istudju jipproponi li jużaLycium ruthenicumtrab u mnixxef bil-friżaCistanche deserticolatrab bħala l-materja prima ewlenija għall-esperimenti diġestivi. B'referenza għall-Farmakopea Ċiniżau bbażati fuq id-domanda tal-ġisem tal-bniedem għall-komponenti attivi ewlenin ta 'Lycium ruthenicumuCistanche deserticola, se jiġu adottati tliet proporzjonijiet differenti (1:2, 1:1, u 2:1). Simulatin vitroSe jsiru esperimenti ta 'diġestjoni u assorbiment biex jitkejlu l-bidliet fl-anthocyanins, phenylethanoid glycosides, polyphenols, u polysaccharides matul id-diġestjoni, kif ukoll l-attività antiossidanti tagħhom. L-istudju għandu l-għan li jevalwa l-benefiċċji potenzjali għas-saħħa u jipprovdi għarfien ġdid għall-iżvilupp ta’ prodotti tas-saħħa funzjonali li jgħaqqduLycium ruthenicumuCistanche deserticola.

1 Materjali u Metodi

1.1 Materjali u Reaġenti

Materjali:
Lycium ruthenicumfrott inġabar fl-2022 minn foresti artifiċjali f'Huahai Town, Yumen City.Cistanche deserticolainħasad f'Mejju 2022 minn imlaqqma artifiċjalmentHaloxylonforesti fl-art ramlija tal-Kontea ta’ Gaotai.

Reaġenti:
Pepsin (3000 U/g), trypsin (250 U/mg), aċidu galliku, reaġent Folin–Ciocalteu, DPPH, u ABTS inxtraw minn Shanghai Macklin Biochemical Technology Co., Ltd.

 

1.2 Strumenti u Tagħmir

DK-98-II banju tal-ilma termostatiku diġitali (Tianjin Test Instrument Co., Ltd.)

Bilanċ analitiku elettroniku QUINTIX-224 (Sartorius Scientific Instruments Co., Ltd.)

GL-12B ċentrifuga refriġerata b'veloċità għolja fuq il-bank (Hunan Hesi Instrument and Equipment Co., Ltd.)

DR6000 spettrofotometru UV-viżibbli (Hach Company)

SPH-110X12 110X24 xejker termostatiku tal-banju tal-ilma (Shanghai Shiping Laboratory Equipment Co., Ltd.)

 

1.3 Metodi

1.3.1 Preparazzjoni tal-Kampjun

Lycium ruthenicumfrott kienu mnixxfa bl-arja b'mod naturali, u frott miksur u zkuk tneħħew. Il-kampjuni ġew mitħunin bl-użu ta 'grinder u għaddew minn għarbiel ta' 50 malja għal użu aktar tard. FriskCistanche deserticolaġie maħsul, imqatta ', u immedjatament mxarrba f'soluzzjoni li tipproteġi l-kulur, imbagħad imnixxef bil-friża, mitħun, u għadda minn għarbiel ta' 50 malja għall-ħażna.
Biex tipprepara trabijiet imħallta:Lycium ruthenicumtrab uCistanche deserticolatrab kienu mħallta fi proporzjonijiet tal-grupp - Grupp A: 1:2, Grupp B: 1:1, Grupp C: 2:1. Il-piż totali tal-kampjun kien 0.75 g. Il-kampjun imħallat tħallat ma 'ilma dejonizzat fi proporzjon solidu għal likwidu ta' 1:40 u mħawwad f'37 grad għal diġestjoni gastrointestinali simulata. Wara t-tkessiħ, it-taħlita ġiet ċentrifugata għal 15-il minuta f'6000 rpm, u s-supernatant inġabar għal aktar analiżi.

1.3.2 Diġestjoni Simulata in Vitro

Il-metodu ta' diġestjoni in vitro ġie ottimizzat abbażi ta' referenza [16] u kien jikkonsisti f'żewġ stadji:

Stadju 1: Diġestjoni gastrika (GD), 2 sigħat
Kampjun ta' 0.75 g (Lycium ruthenicum, Cistanche deserticola, jew trab imħallat) tqiegħed f'tubu ċentrifugu ta '50 mL b'ammont xieraq ta' ilma dejonizzat u mħallat. Il-pH ġie aġġustat għal 2.0 bl-użu ta '1 mol/L HCl. Imbagħad, ġew miżjuda 4 mL ta 'meraq tal-istonku simulat (3 g pepsin maħlul f'50 mL 0.01 mol/L HCl). It-taħlita ġiet inkubata f'banju ta 'l-ilma li tħawwad f'37 grad u 100 rpm għad-diġestjoni. L-attività ta 'l-enzimi mbagħad ġiet inattivata f'banju ta' l-ilma jagħli għal 10 minuti. It-taħlita ġiet ċentrifugata f'4 gradi għal 15-il minuta (6000 rpm), u s-supernatant inġabar għall-ittestjar.

Stadju 2: Diġestjoni intestinali (ID), sagħtejn
Il-pH tat-taħlita tad-diġestjoni ta 'wara l-istonku ġie aġġustat għal 7.0 bl-użu ta' 1.0 mol/L NaHCO₃. Imbagħad ġiet miżjuda soluzzjoni ta 'tripsin (0.3 g trypsin maħlul f'50 mL 0.01 mol/L Na₂CO₃) u mħallta sewwa. Id-diġestjoni saret billi tħawwad b'100 rpm f'banju ta' l-ilma ta' 37 grad. Wara d-diġestjoni, l-attività ta 'l-enzima ġiet inattivata f'banju ta' l-ilma jagħli għal 10 minuti. It-taħlita ġiet ċentrifugata f'4 gradi għal 15-il minuta (6000 rpm), u s-supernatant inġabar għall-analiżi.

 

1.3.3 Determinazzjoni ta' Komponenti Funzjonali

Kontenut totali ta 'polifenolġie determinat bl-użu tal-metodu Folin–Ciocalteu [17].

Kontenut ta' polisakkaridtkejjel bl-użu tal-metodu phenol-sulfuric acid [18].

Kontenut ta' anthocyaninġie determinat bl-użu tal-metodu differenzjali tal-pH [13].

Kontenut ta 'phenylethanoid glycosidekien imkejjel bl-UV-viżibbli spettrofotometrija [19].

 

1.3.4 Determinazzjoni tal-Attività Antiossidanti

1.3.4.1 Attività ta' Tkessiħ Radikali tad-DPPH
L-assaġġ DPPH sar skond il-metodu deskritt fir-referenza [20]. Ir-rata ta' tneħħija radikali DPPH ġiet ikkalkulata bl-użu tal-formula (1):

Rata ta' tneħħija radikali tad-DPPH (%)= (1−A1−A2A0)×100\\left(1 - \\frac{A_1 - A_2}{A_0} \\right) \\times 100(1−A0​A1​−A2​​)×100
(Formula 1)

Fejn:

A1A_1A1​=assorbenza tal-kampjun + soluzzjoni DPPH

A2A_2A2​=assorbiment tal-kampjun + ilma dejonizzat

A0A_0A0​=assorbiment tas-soluzzjoni DPPH + ilma dejonizzat

1.3.4.2 Attività ta' Tkessiħ Radikali tal-ABTS
L-assaġġ ABTS sar skond il-metodu deskritt fir-referenza [21]. Ir-rata ta' tneħħija radikali ABTS ġiet ikkalkulata bl-użu tal-formula (2):

Rata ta' tneħħija radikali tal-ABTS (%)= (1−A1−A2A0)×100\\left(1 - \\frac{A_1 - A_2}{A_0} \\right) \\times 100(1−A0​A1​−A2​​)×100
(Formula 2)

Fejn:

A1A_1A1​=assorbenza tal-kampjun + soluzzjoni ABTS

A2A_2A2​=assorbiment tal-kampjun + ilma dejonizzat

A0A_0A0​=assorbiment tas-soluzzjoni ABTS + ilma dejonizzat

 

1.4 Ipproċessar tad-Dejta

L-esperimenti kollha saru fi tliet kopji. Id-dejta ġiet analizzata bl-użuSPSS 22.0softwer, u graffs ġew maħluqa bl-użuMicrosoft Oriġini 2018.

 

2 Riżultati u Analiżi

2.1 Effetti ta' Diġestjoni Gastrointestinali Simulata fuq il-Komponenti Attivi u l-Attività Antiossidanti ta'Lycium ruthenicumTrab

2.1.1 Effetti tad-Diġestjoni Gastrointestinali fuq Komponenti Attivi fiLycium ruthenicumTrab

Kif muri fiFigura 1-a, il-kontenut tal-polifenol fil-grupp ta 'diġestjoni gastrointestinali simulata ta'Lycium ruthenicumżdied b'mod sinifikanti fl-ewwel 1.5 sigħat (p< 0.05), segwit minn tnaqqis. B'mod ġenerali, il-livelli tal-polifenoli wrew żieda matul l-istadji tad-diġestjoni gastrointestinali.

SkondFigura 1-b, fil-grupp simulat ta 'diġestjoni gastrika, il-kontenut ta' polysaccharide ta 'Lycium ruthenicumżdied b'mod sinifikanti fi żmien sagħtejn (p< 0.05), filwaqt li fil-grupp ta 'diġestjoni intestinali simulata, il-kontenut ta' polysaccharide wera xejra 'l isfel sinifikanti (p< 0.05).

Kif muri fiFigura 1-c, il-kontenut ta 'antoċjanin fil-grupp simulat ta' diġestjoni gastrika żdied b'mod sinifikanti fi żmien 1.5 sigħat (p< 0.05). B'kuntrast, il-kontenut ta 'anthocyanin fil-grupp ta' diġestjoni intestinali simulata naqas ftit fl-ewwel 1.5 sigħat, iżda wara siegħa, id-differenza ma kinitx statistikament sinifikanti (p> 0.05). L-ambjent alkalin huwa identifikat bħala l-kawża primarja tad-degradazzjoni tal-antoċjanin [22].

 

2.1.2 Korrelazzjoni Bejn Komponenti Attivi u Attività Antiossidanti ta'Lycium ruthenicumTrab Wara Diġestjoni In Vitro Simulata

Kif muri fiFigura 2-a, ir-rata ta 'scavenging radikali DPPH fil-grupp simulat ta' diġestjoni gastrika ta 'Lycium ruthenicumġeneralment żdiedet matul il-perjodu ta’ sagħtejn, għalkemm kien hemm tnaqqis f’0.5 sigħat segwit minn żieda. Meta mqabbel mal-grupp tad-diġestjoni intestinali, it-tnaqqis fil-grupp gastriku kien aktar evidenti u statistikament sinifikanti (p< 0.05).

SkondFigura 2-b, ir-rata ta ' scavenging radikali ABTS fil-grupp simulat diġestjoni gastrika taLycium ruthenicumwera żieda sinifikanti fi żmien sagħtejn, filwaqt li fil-grupp intestinali simulat, ir-rata tat-tħaffir tal-ABTS naqset b'mod sinifikanti (p< 0.05).

Tabella 1juri li fil-grupp simulat ta 'diġestjoni gastrika, polifenoli fiLycium ruthenicumkellu korrelazzjoni qawwija ma 'attività ta' tneħħija tad-DPPH (p<0.05), filwaqt li anthocyanins ma wrewx korrelazzjoni sinifikanti ma 'attività DPPH taħt kundizzjonijiet gastriċi. Meta mqabbel mad-DPPH, ABTS wera korrelazzjoni lineari aktar b'saħħitha kemm mal-polifenoli kif ukoll mal-anthocyanins (p< 0.01), x'aktarx minħabba l-kontenut għoli ta 'anthocyanin fiLycium ruthenicum, li huwa kompost antiossidant ewlieni.

Il-polisakkaridi wrew korrelazzjoni pożittiva qawwija ħafna mad-DPPH (p< 0.01), iżda korrelazzjoni negattiva qawwija ma 'ABTS (p< 0.01). Fil-grupp ta 'diġestjoni intestinali simulata, kemm polysaccharides u anthocyanins kienu korrelatati ħafna mal-attivitajiet ta' scavenging DPPH u ABTS (p< 0.05). Notevolment, il-korrelazzjoni lineari bejn il-polisakkaridi u l-kapaċità antiossidanti kienet aktar b'saħħitha minn dik ta 'anthocyanins.

B'kuntrast, il-polifenoli wrew korrelazzjoni negattiva qawwija kemm ma 'DPPH kif ukoll ma' ABTS (p< 0.01), li jissuġġerixxi li hekk kif iż-żmien tad-diġestjoni jiżdied, il-komposti fenoliċi jistgħu ma jiġux utilizzati bis-sħiħ u jistgħu jgħaddu minn degradazzjoni, li jwassal għal telf fil-potenzjal antiossidant [14].

 

Tabella 1

Korrelazzjoni bejn il-kontenuti ta 'polifenoli, polisakkaridi, u anthocyanins fiLycium ruthenicumu attivitajiet antiossidanti differenti

Indiċi / 指标	Grupp simulat tal-meraq tal-istonku		Grupp ta 'fluwidu intestinali simulat
	DPPH	ABTS	DPPH	ABTS
Polifenol / 多酚	0.585*	0.910**	-0.706**	-0.688**
Polysaccharide / 多糖	0.841**	-0.980**	0.744**	0.770*
Anthocyanin / 花色苷	0.463	0.835**	0.553*	0.610*

Nota:
** jindika korrelazzjoni sinifikanti (P< 0.05)
*** jindika korrelazzjoni estremament sinifikanti (P< 0.01)