Markers tal-Kwalità Ta' Cistanches Herba Ibbażati fuq Relazzjoni Spettru-Effett Antiossidant Ⅱ
Mar 19, 2024
3 riżultati
3.1 Stabbiliment ta' mappa tal-marki tas-swaba'
Ipprepara 10 lottijiet ta’ soluzzjonijiet tat-test skont il-metodu taħt 2.1, uża l-kundizzjonijiet kromatografiċi taħt 2.2 għall-iskoperta, akkwista l-marki tas-swaba’ ta’ kull lott ta’ kampjuni (Figura 1), u agħżel il-quċċata Nru 11 (C11) bħala l-quċċata ta’ referenza tal- marki tas-swaba'. Importa d-data tal-fażi likwida. Fajl AIA tal-marki tas-swaba 'tal-prodott tat-test Cistanche deserticola fis-softwer "Sistema ta' Evalwazzjoni ta 'Xebh tal-Marki tas-Swaba' Kromatografiċi tal-Mediċina Ċiniża Tradizzjonali" (verżjoni 2012). Sbatax-il quċċata kromatografika komuni ġew kkalibrati fil-modalità komuni, u meta mqabbla ma 'l-ispettru standard ta' referenza mħallat (Figura 2), ġew identifikati total ta '10 quċċata komuni.
3.2 Riċerka dwar l-effett antiossidant ta 'Cistanche deserticola
3.2.1 Effett ta' Cistanche deserticola fuq il-vijabbiltà taċ-ċelloli HEK 293.
Meta mqabbel maċ-ċelloli fil-grupp normali, Cistanche deserticola ma pproduċietx ċitotossiċità f'konċentrazzjoni ta 'massa ta' 50 ~ 100 ug·mL-1, u r-rati ta 'sopravivenza taċ-ċelluli kienu akbar minn 90%. Hekk kif il-konċentrazzjoni ta' Cistanche deserticola żdiedet, il-vijabbiltà taċ-ċelluli naqset. Għalhekk, Cistanche deserticola b'konċentrazzjoni ta 'massa ta' 100 µg·mL–1 intgħażlet għal amministrazzjoni sussegwenti.
3.2.2 Effett ta 'Cistanche deserticola fuq ROS indott minn H2O2 fiċ-ċelloli HEK 293
Il-ROS IC50 ta 'Cistanche deserticola f'konċentrazzjonijiet differenti ġie kkalkulat bl-użu tas-softwer GraphPad Prism 8. Ir-riżultati huma murija fil-Figura 3 u fit-Tabella 2.
Għal aktar għarfien dwar cistanche, ejja nagħtu ħarsa lejn kif tiddistingwi l-kwalità ta ' cistanche. Il-kwalità ta 'Cistanche tiddependi fuq il-kontenut ta' l-ingredjenti attivi Echinacoside u Acteoside, il-kontenut ogħla jfisser funzjoni aktar b'saħħitha, illum nieħdu 30% Echinacoside u 12% Acteoside Cistanche Supplimenti bħala eżempju biex tagħtina spjegazzjoni, ġeneralment issejjaħ cistanche f'dan l-artikolu.
KEMM JIEĦU BIEX TAĦDEM ĊISTANCHE?
3.2.3 Effett ta' Cistanche deserticola fuq SOD indott minn H2O2-taċ-ċelloli HEK 293
Kif muri fil-Figura 4, meta mqabbel mal-grupp normali, l-attività SOD fiċ-ċelloli tal-grupp mudell tnaqqset b'mod sinifikanti, u l-attività SOD tal-grupp ta 'amministrazzjoni ta' Cistanche deserticola żdiedet fi gradi differenti (P<0.001), indicating that Cistanche deserticola can increase the intracellular SOD enzyme activity.
3.2.4 Effett ta' Cistanche deserticola fuq CAT indott minn H2O2-fiċ-ċelloli HEK 293
Kif muri fil-Figura 5, H2O2 jista 'jikkawża tnaqqis sinifikanti fl-attività intraċellulari tal-enzimi CAT (P<0.001), with the activity only reaching 30% of the normal group, indicating that H2O2 has seriously damaged the antioxidant system of cells. After Cistanche deserticola administration, intracellular CAT enzyme activity decreased significantly (P<0.001). The enzyme activity was significantly increased (P<0.001).
3.3 Cistanche deserticola Q-marker screening ibbażat fuq analiżi tal-korrelazzjoni tal-effiċjenza spettrali
3.3.1 PCA juża l-eigenvalue > 1 u r-rata tal-kontribuzzjoni tal-varjanza kumulattiva > 85% bħala l-istandard biex jiġu estratti 4 komponenti prinċipali. Il-plott ta 'scree (Figura 6) ta' l-ewwel tliet komponenti prinċipali għandu kurva aktar wieqfa, li jfisser li r-rata ta 'kontribuzzjoni tagħha hija ogħla. kbar. Ir-rata tal-kontribuzzjoni tal-varjanza kumulattiva tal-erba 'komponenti prinċipali hija 87.640%, li tindika li dawn l-erba' komponenti prinċipali jistgħu jirrappreżentaw 87.640% tal-informazzjoni tal-varjabbli oriġinali. Il-valuri eigen inizjali u r-rati tal-kontribuzzjoni tal-varjanza huma murija fit-Tabella 3. Il-matriċi tal-komponenti mdawra tinkiseb permezz tal-metodu tal-varjanza massima tan-normalizzazzjoni Kaiser, ara Tabella 4. Skont il-valur tat-tagħbija ta 'kull quċċata kromatografika fuq l-erba' komponenti prinċipali, l-informazzjoni riflessa minn kull wieħed. komponent prinċipali jista 'jiġi estratt. Jiġifieri, iktar ma jkun kbir il-valur tat-tagħbija, akbar tkun l-influwenza tal-quċċata kromatografika fuq il-komponent prinċipali. Fil-komponent prinċipali 1, il-qċaċet 1 sa 3, 5, 7, 11, u 13 sa 15 għandhom l-akbar tagħbijiet assoluti; fil-komponent prinċipali 2, il-qċaċet 6 u 16 għandhom l-akbar tagħbijiet assoluti; peak 17 jispjega l-informazzjoni tal-komponent prinċipali 3, Peak 8 għandu l-akbar impatt fuq il-komponent prinċipali 4, għalhekk it-13-il komponent kimiku tal-qċaċet 1 ~ 3, 5 ~ 8, 11, 13 ~ 17 intgħażlu bħala l-bażi materjali ewlenija ta 'Cistanche deserticola għal analiżi ta' effiċjenza spettrali sussegwenti.
3.3.2 PCC
ROS IC50 huwa indikatur negattiv tal-effikaċja tad-droga, għalhekk koeffiċjent ta 'korrelazzjoni negattiv ifisser li l-varjabbli dipendenti huwa korrelatat b'mod pożittiv mal-effikaċja tad-droga. Il-koeffiċjenti ta' korrelazzjoni tat-13-il quċċata kromatografika ta' Cistanche deserticola huma kollha negattivi, li jindikaw li kollha huma relatati b'mod pożittiv mat-tneħħija ta' ROS IC50, li fosthom il-qċaċet 14 u 3, 7, 11, 1, u 13 kienu korrelatati b'mod qawwi ħafna ma' ROSIC50 (P<0.01), and peaks 2, 5, and 15 were strongly correlated (P<0.05); the 13 chromatographic peaks were all positively correlated with SOD, among which peaks 13 and 3 , 15, 11, 2 were extremely strongly correlated with SOD (P<0.01), and peaks 1, 14, 7, 5, and 6 were strongly correlated (P<0.05); 11 peaks were positively correlated with CAT, and peak 5 was positively correlated with CAT. There was a strong correlation (P<0.05). The results are shown in Table 5.
Meta tgħaqqad ir-riżultati tal-PCC ta 'ROS IC50, SOD, u CAT, il-qċaċet 1 ~ 3, 5, 7, 11, u 13 ~ 15 ġew magħżula bħala l-grupp ta' ingredjent attiv għal Cistanche deserticola biex jeżerċita effetti antiossidanti.
3.3.3 PLS
In PLS, the ROS IC50 regression coefficients of 13 chromatographic peaks are all negative and positively correlated with the pharmacodynamic activity. Among them, the chromatographic peaks with VIP>1 are: 14, 3, 11, 1, 7, 13, 2, 5, 15 (Figure 7A); in the study of SOD enzyme activity, the coefficients of all peaks are positive, that is, all peaks are positively correlated with drug efficacy. Among them, the chromatographic peaks with VIP>1 are: 13, 3, 15, 11, 2, 1 , 14, 7 (Figure 7B); in the study of CAT enzyme activity, except for peaks 6 and 16, the other chromatographic peaks are positively correlated with drug efficacy, among which the chromatographic peaks with VIP>1 huma: 5, 13, 14, 11, 7 (Fig. 7C). Il-komposti rappreżentati mill-qċaċet 1 ~ 3, 5, 7, 11, u 13 ~ 15 ġew skrinjati bħala komponenti attivi antiossidanti potenzjali fil-mudell PLS.
3.4 Verifika tal-attività tal-markatur Q Cistanche deserticola
3.4.1 Effett ta' ingredjenti attivi fuq iċ-ċitotossiċità ta' HEK 293
Ibbażat fuq ir-riżultati tal-analiżi tal-korrelazzjoni tal-effett tal-ispettru, 6 ingredjenti inklużi l-aċidu ġenipiniku, 8-aċidu epistrychnoic, echinaceoside, verbascoside, anthocynoside A, u isorbascoside ġew magħżula għall-verifika tal-attività. Is-sitt ingredjenti attivi ta' Cistanche deserticola ma wrew l-ebda ċitotossiċità f'konċentrazzjonijiet li jvarjaw minn 0.781 sa 3.125 µmol·mL–1, u r-rati ta' sopravivenza taċ-ċelluli kienu kollha akbar minn 90%. Hekk kif il-konċentrazzjoni tiżdied, il-vijabbiltà taċ-ċelluli tiġi inibita. Għalhekk, il-konċentrazzjonijiet tad-dożaġġ sussegwenti ġew magħżula bħala 0.781, 1.563, u 3.125 µmol·mL–1.
3.4.2 Pari ta' ingredjenti attivi
L-effett antiossidant taċ-ċelloli HEK 293 indotti minn H2O 2- ġie vverifikat billi skopra l-effett ta 'scavenging ta' kull ingredjent attiv fuq ROS intraċellulari u l-abbiltà li tirregola l-attività tal-enzimi SOD u CAT biex tivverifika jekk għandhiex effett antiossidant. Fl-esperiment ta' tneħħija ta' ROS, id-differenzi bejn il-gruppi ta' aċidu ġenipiniku ta' doża medja u għolja u l-grupp mudell kienu statistikament sinifikanti (P<0.01, P<0.001, Figure 8A). Compared with the model group, there were statistically significant differences between the low, medium and high dose groups of inulin, anthoside A, verbascoside and isorbascoside (P<0.001, Figure 8B, Figure 8C), indicating that the six monomers All have a certain degree of ROS scavenging effect; in the SOD and CAT enzyme activity measurement test, the enzyme activities of the low, medium and high dose groups of active ingredients were all higher than the model group, indicating that all 6 monomers can increase SOD and CAT Enzyme activity.
